萝卜硫素在提高哺乳动物繁殖性能中的应用
阅读说明：本技术 萝卜硫素在提高哺乳动物繁殖性能中的应用 (Application of sulforaphane in improving reproductive performance of mammals ) 是由 刘红林 陶景丽 许波 张轩 周佳奇 张良良 李伟建 李荣阳 于 2020-07-20 设计创作，主要内容包括：萝卜硫素在提高哺乳动物繁殖性能中的应用,本发明利用萝卜硫素能够促进体外颗粒细胞的增殖和活力、抑制颗粒细胞的凋亡。萝卜硫素体外促进雌二醇的生成以及颗粒细胞StAR、CYP19A1等类固醇合成酶基因的表达。萝卜硫素促进体外颗粒细胞FSH受体的表达。萝卜硫素促进小鼠卵巢发育,增加卵巢重量。萝卜硫素促进体内颗粒细胞的增殖。萝卜硫素促进小鼠卵巢卵泡发育,增加卵泡数,增加排卵数。断奶母猪日粮添加萝卜硫素显著提高了母猪产仔数。本发明应用萝卜硫素提高哺乳动物繁殖性能的技术,提供了萝卜硫素的新用途,极大的提高了其应用价值,扩大了萝卜硫素的应用范围,拓展出应用萝卜硫素的新领域,具有广阔的应用前景和商业价值。(The invention relates to an application of sulforaphane in improving the reproductive performance of mammals, which can promote the proliferation and the activity of in vitro granular cells and inhibit the apoptosis of the granular cells by utilizing the sulforaphane. Sulforaphane promotes the production of estradiol and the expression of steroid synthase genes such as granulosa cells StAR and CYP19A1 in vitro. Sulforaphane promotes the expression of the FSH receptor of granulosa cells in vitro. Sulforaphane promotes development of mouse ovary and increases weight of ovary. Sulforaphane promotes the proliferation of granulosa cells in vivo. The sulforaphane promotes the development of ovarian follicles of mice, increases the number of the follicles and increases the number of ovulations. The daily ration of the weaned sow added with the sulforaphen obviously improves the litter size of the sow. The invention provides a new application of the sulforaphane, greatly improves the application value of the sulforaphane, enlarges the application range of the sulforaphane, expands the new field of the sulforaphane, and has wide application prospect and commercial value.)
技术领域
本发明属于生殖生物技术领域，更具体涉及萝卜硫素在提高哺乳动物繁殖性能中的应用。
背景技术
生殖是人类世代延续的根本，不幸的是当今社会人类生殖障碍高频发生，据统计约有10％的夫妻受到生殖障碍困绕；另一方面家畜的繁殖性能是重要的经济性状，提高肉牛、羊等家畜的双羔率以及增加母猪产仔数(缩短与发达国家的差距)对于畜牧业的提质增效意义重大。因此，研发安全高效提高哺乳动物繁殖性能的新技术既有重大的现实需求，又具有巨大的应用价值与商业前景。
卵巢是雌性动物最重要的生殖器官，其功能主要是产生卵子及类固醇激素。卵巢卵泡生长发育是母畜发情、***的生理基础。颗粒细胞是卵泡中除***外卵泡的主要组成成分，生成类固醇激素(如***、孕酮)与分泌干细胞因子(SCF)等调控***的生长发育是颗粒细胞的重要功能(Yada H et al.,1999)。在卵泡发育过程中，颗粒细胞不断增殖分化，表现为形态改变以及细胞数量和层数的增加；与此同时，颗粒细胞的类固醇激素合成能力不断增加。卵泡发育主要受促卵泡素(FSH)调控，FSH通过颗粒细胞膜受体促进细胞的增殖及产生类固醇激素(Yu FQ et al.,2005)。FSH被认为是卵泡生长发育最为重要的调控因子。外源给予FSH能够有效促进***已为人们所认识，利用该原理已建立了包括猪在内的多种家畜的超数***技术，然而该技术存在成本高、影响激素平衡与胚胎附植等缺陷。申请人发现，植源性小分子化合物-萝卜硫素(SFN)能够显著促进猪、小鼠卵泡颗粒细胞的增殖，意外的是，SFN对猪卵泡颗粒细胞增殖的促进效果优于FSH，并且显著促进了StAR、CYP19A1等类固醇合成酶基因的表达(与FSH类似)，这为利用SFN提高母畜繁殖性能提供了可能。
萝卜硫素(1-异硫氰酸-4-甲磺酰基丁烷，sulforaphane，SFN)又称莱菔子素，是一种异硫氰酸酯，由硫代葡萄糖苷经植物体内黑芥子酶水解所产生，广泛存在于十字花科植物中，如西兰花、芥蓝、花椰菜等。萝卜硫素是一种含硫化合物，分子式为C6H11S2NO，相对分子质量为177.29，常温条件下呈黄色或无色液体，不溶于水，极易溶于有机溶剂，易被吸收。大量的研究报道证实萝卜硫素具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎症以及调控表观遗传修饰等功能(Li H et al.,2018；Byrne MM et al.,2014)。有研究表明，摄取富含萝卜硫素的十字花科蔬菜有益于健康，包括可以预防许多疾病，如心血管疾病，神经退行性疾病和糖尿病等。在肿瘤预防方面，萝卜硫素可以降低许多类型肿瘤的风险，例如结肠直肠癌，肾癌和乳腺癌等。调控细胞的增殖与分化是SFN发挥作用的重要方式，SFN的浓度以及细胞类型等影响SFN对细胞增殖分化的调控效果，如Han等人(Han Z et al.,2017)发现低浓度萝卜硫素可以促进神经干细胞的增殖，并显著促进了神经元的分化，从而产生预防神经退行性疾病的作用；与此相反，萝卜硫素又具有抑制不同类型癌细胞增殖，诱导癌细胞的细胞周期阻滞，促进癌细胞凋亡等作用(Bryant CS et al.,2010；Chaudhuri D et al.,2007；Ashok BT et al.,2005)。
目前萝卜硫素相关的发明多集中在其提取制备技术上，例如一种从西兰花中提取萝卜硫素的制备方法(CN105949098A)，一种萝卜硫素提取工艺(CN108048498A)，萝卜硫素的提取方法(CN108912024A)，一种萝卜硫素微胶囊的制备方法(CN107569470A)，萝卜硫素包合物制备方法(CN108992675A)，一种萝卜硫素保健片的制备方法(CN106214721A)等。在萝卜硫素的应用方面，多集中在其对成体健康保护作用的专利，尚无促进哺乳动物繁殖性能的专利，例如萝卜硫素在抑制端粒酶活性及制备抗癌药物中的用途(CN109771409A)，萝卜硫素在制备用于预防糖尿病性病变的食品、保健品或药品中的应用(CN108743576A)，萝卜硫素制备保护孕期饮酒妇女的胎儿血管发育药物应用(CN108771669B)等。
发明内容
解决的技术问题：本发明为了提升哺乳动物繁殖能力，提供一种萝卜硫素在提高哺乳动物繁殖性能中的应用。采用萝卜硫素显著促进猪、小鼠卵泡颗粒细胞增殖与类固醇激素合成，更重要的是，一定浓度的萝卜硫素能够促进小鼠卵巢增重、卵泡发育与***以及母猪的产仔数。
技术方案：萝卜硫素及其衍生物在制备提高哺乳动物繁殖性能产品中的应用。
萝卜硫素及其衍生物在制备促进卵泡颗粒细胞增殖成熟产品中的应用。
萝卜硫素及其衍生物在制备促进卵巢卵泡发育产品中的应用。
萝卜硫素及其衍生物在制备促进发情***产品中的应用。
上述萝卜硫素的有效浓度：体外不高于10μM，体内为不高于5mg/kg。
上述萝卜硫素的有效浓度：体外1～10μM，体内0.1～5mg/kg。
本发明所述的萝卜硫素(SFN)分子式为C6H11S2NO，相对分子质量为177.29。
有益效果：萝卜硫素促进体外颗粒细胞的增殖和活力、抑制颗粒细胞的凋亡。萝卜硫素体外促进***的生成以及颗粒细胞StAR、CYP19A1等类固醇合成酶基因的表达。萝卜硫素促进体外颗粒细胞FSH受体的表达。萝卜硫素促进小鼠卵巢发育，增加卵巢重量。萝卜硫素促进体内颗粒细胞的增殖。萝卜硫素促进小鼠卵巢卵泡发育，增加卵泡数，增加***数。断奶母猪日粮添加萝卜硫素显著提高了母猪产仔数。本发明应用萝卜硫素提高哺乳动物繁殖性能的技术，提供了萝卜硫素的新用途，极大的提高了其应用价值，扩大了萝卜硫素的应用范围，拓展出应用萝卜硫素的新领域，具有广阔的应用前景和商业价值。
附图说明
图1为本发明实施例1萝卜硫素促进体外颗粒细胞的增殖和活力、抑制颗粒细胞的凋亡图。图中A：猪和小鼠体外培养颗粒细胞添加萝卜硫素处理24h后用CCK-8检测细胞活力水平。B：猪和小鼠体外培养颗粒细胞添加萝卜硫素处理12h后，掺入EdU孵育2h后，在激光共聚焦显微镜下观察拍照，检测颗粒细胞EdU染色标记的水平，并量化分析阳性细胞比例。C：猪和小鼠体外培养颗粒细胞添加萝卜硫素处理12h后，western blot检测颗粒细胞PCNA蛋白表达水平及灰度分析。D：小鼠体外培养颗粒细胞添加萝卜硫素，12h后western blot检测颗粒细胞Cleaved-caspase 3蛋白表达水平及灰度分析。上述相应试验结果用平均值±标准误表示，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001,****p<0.0001,ns,not significant,P>0.05。
图2为本发明实施例2萝卜硫素体外促进***的生成以及颗粒细胞StAR、CYP19A1等类固醇合成酶基因的表达图。图中A：ELISA检测对照组和萝卜硫素组小鼠颗粒细胞培养上清中***水平变化。*p<0.05。B：小鼠颗粒细胞经萝卜硫素处理12h后，荧光定量PCR检测类固醇激素合成酶基因的mRNA水平变化，以β-actin为内参，计算相关基因表达量。C：小鼠颗粒细胞经萝卜硫素处理12h后，Western blot检测类固醇激素合成酶基因蛋白水平变化并进行灰度分析。上述相应试验结果用平均值±标准误表示，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001,****p<0.0001,ns,not significant,P>0.05。
图3为本发明实施例3萝卜硫素促进体外颗粒细胞FSH受体的表达图。小鼠颗粒细胞经萝卜硫素处理12h后，Western blot检测FSH受体FSHR蛋白水平变化并进行灰度分析。结果用标准差±标准误表示。**p<0.01。
图4为本发明实施例4萝卜硫素促进小鼠卵巢发育，增加卵巢重量图。图中A：不同浓度萝卜硫素对小鼠腹腔注射(n＝7)后促进卵巢发育，使卵巢形态增大。B：不同浓度萝卜硫素对小鼠腹腔注射(n＝7)后对卵巢重量变化的影响及统计量化。C：根据A、B结果使用S6浓度萝卜硫素对小鼠(5周龄)进行腹腔注射后，对照组、萝卜硫素和促卵泡素组的小鼠卵巢分别称重并统计量化(n＝18)。
图5为本发明实施例5萝卜硫素促进体内颗粒细胞的增殖图。图中A：小鼠腹腔注射萝卜硫素后，显微共聚焦分别检测对照组、萝卜硫素组和促卵泡素组卵巢颗粒细胞Edu染色标记的水平以及标记细胞比例的量化统计。B：小鼠腹腔注射萝卜硫素后，Western blot检测对照组和萝卜硫素组增殖标记蛋白PCNA水平的变化，并进行灰度分析。上述相应试验结果用平均值±标准误表示。***p<0.001,****p<0.0001,ns,not significant,P>0.05。
图6为本发明实施例6萝卜硫素促进体内***的生成以及颗粒细胞StAR、CYP19A1等类固醇合成酶基因的表达图。图中A：放射性免疫法检测对照组和萝卜硫素组小鼠血清中***和孕激素水平。B：对照组和萝卜硫素组小鼠卵巢类固醇激素合成酶蛋白的表达水平及量化分析。上述相应试验结果用平均值±标准误表示，*p<0.05,**p<0.01,****p<0.0001,ns,not significant,P>0.05。
图7为本发明实施例7萝卜硫素促进体内颗粒细胞FSH受体的表达图。小鼠经萝卜硫素腹腔注射后，Western blot检测卵巢FSH受体FSHR蛋白水平变化并进行灰度分析。结果用标准差±标准误表示。****p<0.0001。
图8为本发明实施例8萝卜硫素促进小鼠卵巢卵泡发育，增加卵泡数图。图中A：小鼠卵巢石蜡经H&E染色后检测对照组和萝卜硫素组卵巢形态。B：H&E后统计小鼠卵巢窦前卵泡(PA)和窦卵泡(A)数(n＝7)。结果用标准差±标准误表示。***p<0.001。
图9为本发明实施例9萝卜硫素促进小鼠卵巢卵泡发育，增加***数图。图中A：对照组和萝卜硫素组小鼠***数统计(n＝10)。结果用平均值±标准误表示。***p<0.001。B：对照组和萝卜硫素组***小鼠比例统计(n＝17)。
图10为本发明萝卜硫素在提高哺乳动物繁殖性能中的整体效果示意图。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例均按照常规实验条件，或按照制造厂商说明书建议的条件。下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述。
萝卜硫素显著促进猪、小鼠卵泡颗粒细胞增殖与类固醇激素合成以及萝卜硫素促进小鼠卵巢增重、卵泡发育与***是申请者团队的重要发现。萝卜硫素体内给药48小时后小鼠卵巢重与有腔卵泡数显著增加，特别是萝卜硫素可以取代小鼠超数***程序中的FSH用于诱导小鼠***。与此同时申请人还发现，断奶母猪连续3天饲喂添加萝卜硫素的日粮产仔数显著升高。基于上述发现，申请人发明了应用萝卜硫素提高哺乳动物繁殖性能的技术。应用萝卜硫素提高哺乳动物繁殖性能的技术，提供了萝卜硫素的新用途，极大的提高了其应用价值，扩大了萝卜硫素的应用范围，拓展出应用萝卜硫素的新领域，具有广阔的应用前景和商业价值。
以下实施例中所用的萝卜硫素，体外实验购自Sigma(S4441)，体内实验购自aladdin(S111997)。
实施例1萝卜硫素促进体外颗粒细胞的增殖和活力、抑制颗粒细胞的凋亡
卵巢中卵泡的生长发育是雌性哺乳动物发情***的生理基础，而颗粒细胞在卵泡的生长发育过程中发挥着非常关键的作用。利用猪和小鼠颗粒细胞体外培养模型，分别添加不同浓度的萝卜硫素(0μM、1μM、5μM、10μM和0μM、1μM、5μM、10μM、50μM)处理24h后检测颗粒细胞活力的变化。在小鼠上，CCK-8检测结果发现低浓度的萝卜硫素(1μM)能显著提升颗粒细胞的活力水平，而高浓度的萝卜硫素(5μM、10μM、50μM)反而能够抑制颗粒细胞的活力；在猪上，低浓度的萝卜硫素(1μM、5μM)也能显著提升颗粒细胞的活力水平(图1.A)。因此，我们选用低浓度萝卜硫素5μM和1μM分别作为猪和小鼠的最适处理浓度进行以下的实验。Western blot检测细胞增殖标志蛋白PCNA表达水平，发现SFN处理组颗粒细胞PCNA表达水平显著升高(图1.C)；利用EdU增殖检测试剂盒检测颗粒细胞的增殖水平，发现SFN处理组颗粒细胞增殖水平显著上升(图1.B)，结果表明SFN能够显著促进颗粒细胞的增殖活性。绝大多数卵泡会在发育过程中发生闭锁，最终退化消失。有研究发现颗粒细胞凋亡是引起卵泡闭锁的主要原因。因此降低颗粒细胞的凋亡水平对卵泡的发育有着重要的意义。我们同样检测了SFN处理的颗粒细胞的凋亡水平，发现细胞凋亡标志蛋白cleaved-caspase 3水平显著下调，表明萝卜硫素能够抑制颗粒细胞的凋亡(图1.D)(*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001,****p<0.0001,ns,not significant,P>0.05)。
实施例2萝卜硫素体外促进***的生成以及颗粒细胞StAR、CYP19A1等类固醇合成酶基因的表达
类固醇激素对颗粒细胞的增殖分化特性发挥着至关重要的作用，有报道称***对颗粒细胞的增殖有明显的促进作用(Saswati Das et al.,1996)。因此我们检测了低浓度萝卜硫素(1μM)处理后的颗粒细胞***水平和类固醇激素合成酶的变化。我们将SFN处理12h后的颗粒细胞培养上清液收集起来，通过ELISA检测***水平，细胞结果发现SFN组***水平显著上升(图2.A)。通过QRT-PCR和Western blot技术对类固醇激素合成酶的转录和蛋白水平进行检测，结果发现StAR在mRNA和蛋白水平均极显著上调，CYP11A1和HSD3B基因转录水平升高，芳香化酶编码基因CYP17A1和CYP19A1蛋白表达量显著升高(图2.B/C)(*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001,****p<0.0001,ns,not significant,P>0.05)。结果说明低浓度萝卜硫素能够促进StAR、CYP19A1等类固醇激素合成酶的变化，进而促进***的产生。
实施例3萝卜硫素促进体外颗粒细胞FSH受体的表达
卵泡的生长发育和颗粒细胞的增殖分化同时受到垂体分泌的***和卵巢自身分泌的性类固醇激素的控制，垂体分泌的促卵泡素(FSH)对颗粒细胞的增殖有显著的促进作用，并且能够促进颗粒细胞产生FSHR，增强对FSH的反应能力，从而不断促进卵泡的发育。为了检测SFN能否促进FSH受体的表达，提高颗粒细胞对FSH的反应能力，进而促进颗粒细胞增殖，我们同样用低浓度萝卜硫素(1μM)处理颗粒细胞12h后，应用Western blot技术检测了颗粒细胞FSH激素受体FSHR的表达，结果发现SFN处理组的FSHR显著上调(图3)(**p<0.01)。结果说明SFN可能通过上调FSHR的表达水平提高颗粒细胞对FSH的反应能力，促进颗粒细胞的增殖。
实施例4萝卜硫素促进小鼠卵巢发育，增加卵巢重量
体外发现SFN可以显著促进颗粒细胞增殖分化特性，为了研究SFN在体内的应用效果，我们将5周龄小鼠按照SFN浓度分为control(0)、S1(0.05mg/kg)、S2(0.1mg/kg)、S3(0.25mg/kg)、S4(0.5mg/kg)、S5(1mg/kg)、S6(1.25mg/kg)7组，每组7只小鼠。每天早8点和晚8点进行腹腔注射SFN，注射两天，最后一次注射12h后将小鼠断颈处死，收集血清和卵巢组织，对一侧卵巢拍照并称重，4％多聚甲醛固定后做石蜡切片，另一侧卵巢用于蛋白的提取。结果发现S4-S6组卵巢长直径大小明显高于control组(图4.A)，卵巢重量显著高于control组(图4.B)，S6作用浓度最为明显，因此后续体内实验选用S6组的浓度。一般认为，FSH是卵泡颗粒细胞增殖最为有效的促进因子。为了比较SFN与FSH对卵巢发育的影响效果，我们将5周龄小鼠分为对照组、SFN组和FSH组，FSH的注射为目前常用的剂量和方法(10IU-5IU-2IU-1IU)，每组9只小鼠，每天早8点和晚8点进行腹腔注射，注射两天，最后一次注射12h后将小鼠断颈处死，收集卵巢组织。结果发现SFN与FSH均显著增加卵巢重量(图4.C(****p<0.0001)，而SFN组与FSH组卵巢重量没有显著差异(NS,not significant,P>0.05)。实验证明，SFN能够显著增加卵巢重量，并且与FSH有类似的效果。
实施例5萝卜硫素促进体内颗粒细胞的增殖
为了进一步研究SFN显著促进卵巢重量增加的机理，我们利用体内注射EdU检测小鼠卵泡颗粒细胞的增殖水平，来探究SFN是否通过影响颗粒细胞增殖来增加卵巢重量。我们利用5周龄小鼠分为对照组、SFN组和FSH组，每组5只。每天早8点和晚8点分别腹腔注射SFN和FSH，注射两天，最后一次注射时与EdU(5μg/g)共同注射，12h后将小鼠断颈处死，多聚甲醛固定后做石蜡切片，利用免疫荧光技术检测EdU的变化水平。结果发现SFN组和FSH组有腔卵泡颗粒细胞中的EdU的阳性比例显著高于对照组(****p<0.0001)，而SFN组和FSH组之间没有显著差异(图5.A)(NS,not significant,P>0.05)。为了进一步证明SFN对小鼠卵泡颗粒细胞的增殖作用，我们利用Western blot技术检测细胞增殖标志蛋白PCNA的变化水平，结果发现SFN组的PCNA水平显著高于对照组(图5.B)(***P<0.001)。实验结果证明，萝卜硫素在体内能够促进颗粒细胞的增殖进而增加卵巢重量。
实施例6萝卜硫素促进体内***的生成以及颗粒细胞StAR、CYP19A1等类固醇合成酶基因的表达
为了进一步研究体内注射SFN对颗粒细胞分化特性的影响，我们利用放射性免疫技术检测了对照组和SFN组血清中***和孕激素的水平，结果发现SFN组小鼠***和孕激素水平均显著上升(图6.A)。同时，利用Western blot技术检测了卵巢组织蛋白类固醇激素的表达水平，结果发现类固醇激素合成酶中StAR、CYP17A1和CYP19A1均显著上升(图6.B)(*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001,****p<0.0001,ns,not significant,P>0.05)。实验结果证明，萝卜硫素在体内同样促进***、孕激素和类固醇激素合成酶的表达。
实施例7萝卜硫素促进体内颗粒细胞FSH受体的表达
我们体外已经证明萝卜硫素能够上调FSHR的表达。为了进一步在体内证实SFN对FSHR表达的影响，我们检测了SFN组小鼠卵巢组织FSHR蛋白的表达水平，结果发现SFN组相较于对照组，能够显著促进FSHR的表达(图7)(***P<0.001)。实验证明，SFN在体内同样能促进FSHR的表达，增强小鼠卵巢对***的反应能力，从而促进小鼠卵巢的发育。
实施例8萝卜硫素促进小鼠卵巢卵泡发育，增加卵泡数
为了进一步研究萝卜硫素对小鼠卵巢发育的影响，我们利用HE染色，观察小鼠卵巢的形态变化以及统计分析各级卵泡的数量。通过对对照组和SFN组进行石蜡包埋，每组7个卵巢，随后将包埋好的卵巢组织切片，切到接近最大横截面的时候，每隔10刀取一片，每个卵巢取10片用于HE染色，用于观察卵巢形态并统计各级卵泡数。结果发现SFN组卵巢组织明显增大，窦前卵泡(PA)和窦状卵泡(A)数量都显著增加(图8.A)(***P<0.001)。实验结果证明，腹腔注射萝卜硫素能够显著增加卵泡数。
实施例9萝卜硫素促进小鼠卵巢卵泡发育，增加***数
我们已经证明了萝卜硫素能够促进小鼠卵巢的发育，为了进一步研究萝卜硫素对小鼠***的影响，我们将5周龄小鼠分为对照组和SFN组，每组17只。每天早8点和晚8点分别腹腔注射生理盐水和SFN，注射两天，12h后脱颈处死小鼠，采集输卵管，其中10只用于检测小鼠输卵管中的***数量并统计，另外7只只统计是否***。结果发现，SFN组***数显著高于对照组(图9.A)(***P<0.001)；更有意思的是，SFN组所有小鼠均***，***率达到100％(17/17)，对照组只有47.06％(8/17)的***率(图9.A)；实验结果证，明萝卜硫素能够促进小鼠卵泡***，并增加***数。
实施例10断奶母猪日粮添加萝卜硫素显著提高了母猪产仔性能
含萝卜硫素的西兰花提取物(批号200319)购至西安青芷生物技术有限公司，在断奶母猪饲料中添加该种西兰花提取物，添加剂量使每头母猪每天萝卜硫素的摄取达到100mg。长大经产母猪断奶当日开始饲喂，连续饲喂3天，3天后按常规进行发情鉴定与配种处理，母猪分娩后统计产仔数等性状。研究发现(表1)，长大经产母猪(34窝)饲喂含萝卜硫素的饲料后窝总产仔数平均为15.3头，显著高于对照组(33窝)12.6头的水平；试验组产活仔数达到14.7头，而对照组为11.8头，二者差异同样显著(不同字母之间表示差异显著)。
表1断奶母猪日粮添加萝卜硫素对其产仔性能的影响
注：a、b不同字母之间表示差异显著。