阅读说明：本技术 两种磺酰基吡咯烷P-CABs的合成方法及用途 (Synthesis method and application of two sulfonyl pyrrolidine P-CABs ) 是由 桑锋 李媛媛 孙炳夏 张静 付林 于 2020-06-17 设计创作，主要内容包括：本发明公布了两种磺酰基吡咯烷P-CABs的合成方法及用途,其结构通式(I)如下。具有优异的胃酸分泌抑制作用。本发明制备路线工艺步骤较少,原料易得,适合工业化生产。<Image he="223" wi="254" file="100004_DEST_PATH_IMAGE001.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(The invention discloses a synthesis method and application of two sulfonyl pyrrolidine P-CABs, and the structural general formula (I) is as follows. Has excellent gastric acid secretion inhibiting effect. The preparation route of the invention has fewer process steps and easily obtained raw materials, and is suitable for industrial production.)

两种磺酰基吡咯烷P-CABs的合成方法及用途

技术领域

本发明涉及化合物合成领域，具体涉及具有胃酸分泌抑制活性的两种磺酰基吡咯烷P-CABs。

背景技术

钾竞争性酸阻滞剂(Potassium-Competitive Acid Blockers，P-CABs)是一类新型酸阻滞剂，其可以通过竞争性地结合H⁺而抑制H⁺/K⁺-ATP酶的活性。P-CABs具有亲脂性、弱碱性、解离常数高和在低pH值时稳定的特点。以泮托拉唑代表的质子泵抑制剂抑制胃酸的分泌以治疗消化性溃疡、卓艾综合征以及上消化道出血等，已经广泛地用于临床。P-CABs具备以下潜在优势：起效迅速，在1小时内就能达到最大效果；血药浓度与口服给药剂量线性相关，提示该类药物可以比较容易地达到最佳抑酸状态。

尽管目前已公开了一系列的钾竞争性酸阻滞剂(P-CABs)抑制剂，但针对不同的适应症仍需开发新型高效的化合物及简易可行的制备方法，经过不断优化，本发明设计具有通式(I)所示结构化合物的合成方法，并发现其具有优异的胃酸分泌抑制作用。

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发明内容

本发明的目的是提供具有通式(I)所示结构化合物的合成方法及用途。

其中：

R选自甲胺及乙醇胺。

本发明的再一目的是提供两种磺酰基吡咯烷P-CABs拟在pH 6.5的条件下评估H⁺-K⁺-ATPase抑制活性（体外，IC₅₀值）的应用。

本发明所述的两种磺酰基吡咯烷P-CABs的通式（I）如下：

上述磺酰基吡咯烷P-CABs的通式，其合成路线如下：

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实施例1：

上述磺酰基吡咯烷P-CAB的合成路线如下：

上述磺酰基吡咯烷P-CAB的制备方法，包括以下几个步骤：

（1）将4-羟基苯磺酸钠、溴乙酸甲酯和碳酸钾在甲醇中回流至反应结束，经旋干、乙酸乙酯除杂产物2；

（2）将步骤（1）中得到的产物2、二氯亚砜和DMF进行反应，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到产物3；

（3）将步骤（2）中得到的产物3、原料4、三乙胺和DMAP反应过夜，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到产物5；

（4）将步骤（3）得到的产物5、甲胺甲醇溶液加入到甲醇溶液中，反应一段时间后加入硼氢化钠至原料反应完全，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到终产物6。

其中：

步骤（1）中，4-羟基苯磺酸钠、溴乙酸甲酯和碳酸钠用量比例为1 mmol : 3.1 mmol :2.3 mmol 。

步骤（1）中，油浴控制温度75 ^oC，反应时间6~8h。

步骤（2）中，步骤（1）中所得产物2与二氯亚砜、DMF比例为1 mmol : 4.2 mmol :0.09 mmol。

步骤（2）中，油浴控制60℃搅拌4h，然后冷却至室温下反应过夜。

步骤（3）中，步骤（2）中产物3、原料4、三乙胺和DMAP的用量比例为1 mmol : 2mmol : 2.2 mmol :0.2mol。

步骤（3）中，油浴控制温度50℃，反应过夜。

步骤（4）中，步骤（3）中产物5与甲胺甲醇溶液的用量比例为1 mmol : 5 mmol。

步骤（4）中，反应25-30min后，加入硼氢化钠，反应时间为1h-1h30min。

上述磺酰基吡咯烷P-CAB用于制备抑制胃酸分泌的药物。

本发明的有益效果如下：

本发明制备路线工艺步骤较少，原料易得，适合工业化生产。得到的磺酰基吡咯烷P-CABs，具有优异的胃酸分泌抑制作用。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明实施例提供了两种磺酰基吡咯烷P-CABs的合成方法，其合成步骤如下：

（1）将4-羟基苯磺酸钠（5g）与溴乙酸甲酯（8.76mL）_、置于圆底烧瓶中，加入150 mL甲醇作为反应溶剂，油浴70℃下回流加热，反应过夜至原料反应完全。直接减压浓缩并用乙酸乙酯清洗固体，得到产物2；

（2）将步骤（1）中得到的产物2（1.25g）与二氯亚砜（1.36mL）置于圆底烧瓶中，加入DMF（31μL）作为助溶剂，油浴120℃加热反应4h，然后冷却至室温搅拌过夜至反应完全，用水和乙酸乙酯萃取，保留有机层，无水硫酸钠干燥、减压浓缩，柱层析得到产物3；

（3）将步骤（2）中得到的产物3（536mg）与原料4（1.5g）置于圆底烧瓶中，加入三乙胺（876μL）和DMAP（70mg），加入乙腈（11.8mL）作为反应溶剂，油浴50℃状态下搅拌9h后用水和乙酸乙酯萃取，保留有机层，无水硫酸钠干燥、减压浓缩，柱层析得到产物5；

（4）将步骤（3）中得到的产物5（217mg）与甲胺甲醇溶液（0.4 mL）置于圆底烧瓶中，加入甲醇（2 mL）作为反应溶剂，反应25-35min后加入硼氢化钠（26.4mg）至原料反应完全，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到终产物6。

终产物6测试结果如下：

白色固体，收率19%（4步反应总收率），¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.36 (dd, J =9.5, 7.2 Hz, 4H), 7.18 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.00(t, J = 8.9 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.22 (s, 1H),4.49 (s, 2H), 3.62 (s, 2H), 2.90 (d, J = 4.9 Hz, 3H), 2.45 (s, 3H)。

实施例2：

上述磺酰基吡咯烷P-CAB的合成路线如下：

上述磺酰基吡咯烷P-CAB的制备方法，包括以下几个步骤：

（1）将4-羟基苯磺酸钠、溴乙酸甲酯和碳酸钾在甲醇中回流至反应结束，经旋干、乙酸乙酯除杂产物2；

（2）将步骤（1）中得到的产物2、二氯亚砜和DMF进行反应，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到产物3；

（3）将步骤（2）中得到的产物3、原料4、三乙胺和DMAP反应过夜，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到产物5；

（4）将步骤（3）得到的产物5、乙醇胺溶液加入到乙醇溶液中至原料反应完全，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到终产物7。

（5）将步骤（4）得到的产物7、甲胺甲醇溶液加入到甲醇溶液中，反应一段时间后加入硼氢化钠至原料反应完全，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到终产物8。

其中：

步骤（1）中，4-羟基苯磺酸钠、溴乙酸甲酯和碳酸钾用量比例为1 mmol : 3.1 mmol :2.3 mmol 。

步骤（1）中，油浴控制温度75 ^oC，反应时间6~8h。

步骤（2）中，步骤（1）中所得产物2与二氯亚砜、DMF比例为1 mmol : 4.2 mmol :0.09 mmol。

步骤（2）中，油浴控制60℃搅拌4h，然后冷却至室温下反应过夜。

步骤（3）中，步骤（2）中产物3、原料4、三乙胺和DMAP的用量比例为1 mmol : 2mmol : 2.2 mmol :0.2mol。

步骤（3）中，油浴控制温度50℃，反应过夜。

步骤（4）中，步骤（3）中产物5与乙醇胺的用量比例为：1mol：10mol

步骤（4）中，反应温度为25℃

步骤（5）中，步骤（4）中产物7与甲胺甲醇溶液的用量比例为1 mmol : 5 mmol。

步骤（5）中，反应25-30min后，加入硼氢化钠，反应时间为1h-1h30min。

上述磺酰基吡咯烷P-CABs用于制备抑制胃酸分泌的药物。

本发明的有益效果如下：

本发明制备路线工艺步骤较少，原料易得，适合工业化生产。得到的磺酰基吡咯烷P-CABs，具有优异的胃酸分泌抑制作用。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明实施例提供了两种磺酰基吡咯烷P-CABs的合成方法，其合成步骤如下：

（1）将4-羟基苯磺酸钠（5g）与溴乙酸甲酯（8.76mL）_、置于圆底烧瓶中，加入150 mL甲醇作为反应溶剂，油浴70℃下回流加热，反应过夜至原料反应完全。直接减压浓缩并用乙酸乙酯清洗固体，得到产物2；

（2）将步骤（1）中得到的产物2（1.25g）与二氯亚砜（1.36mL）置于圆底烧瓶中，加入DMF（31μL）作为助溶剂，油浴120℃加热反应4h，然后冷却至室温搅拌过夜至反应完全，用水和乙酸乙酯萃取，保留有机层，无水硫酸钠干燥、减压浓缩，柱层析得到产物3；

（3）将步骤（2）中得到的产物3（536mg）与原料4（1.5g）置于圆底烧瓶中，加入三乙胺（876μL）和DMAP（70mg），加入乙腈（11.8mL）作为反应溶剂，油浴50℃状态下搅拌9h后用水和乙酸乙酯萃取，保留有机层，无水硫酸钠干燥、减压浓缩，柱层析得到产物5；

（4）将步骤（4）中得到的产物5（100mg）与乙醇胺（146mg）置于圆底烧瓶中，加入异丙醇（13 mL）作为反应溶剂，油浴控制50℃反应24h至原料反应完全，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到终产物7。

（5）将步骤（3）中得到的产物7（109mg）与甲胺甲醇溶液（0.2 mL）置于圆底烧瓶中，加入甲醇（1 mL）作为反应溶剂，反应25-35min后加入硼氢化钠（13.28mg）至原料反应完全，经萃取、干燥、减压浓缩、柱层析得到终产物8。

终产物7产品测试结果如下：

白色固体，收率21%（5步反应总收率），¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.39 (d, J =8.7 Hz, 4H), 7.19 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.03 (dd, J= 19.7, 10.8 Hz, 2H), 6.86 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.24 (s, 1H), 5.32 (s, 1H),4.53 (s, 2H), 3.74 – 3.67 (m, 2H), 3.65 (s, 2H), 3.49 (q, J = 5.0 Hz, 3H),2.46 (s, 3H)。

对两种磺酰基吡咯烷P-CABs进行H⁺/K⁺-ATPase生物学评价

下面的体外筛选试验是用来测定本发明化合物对于H⁺/K⁺-ATPase酶活性的抑制作用。

实验材料及仪器：

1、猪胃粘膜微粒体(富含H⁺/K⁺-ATPase)

2、ATP

3、孔雀石绿

4、钼酸铵

5、Tween 20

实验步骤简述如下：

一、试剂准备

1、化合物用100％DMSO配制成合适的浓度：10000，1000，100，10，1，0.1nM；

2、缓冲液1：50mmol/L HEPEs-Tris，5mmol/L MgCl₃，pH6.5；

3、缓冲液2：50mmol/L HEPEs-Tris，5mmol/LMgCl₃，pH6.5，10mmol/L KCl，pH＝6.5；

4、ATP：用缓冲液1稀释ATP至2mmol/L；

5、孔雀石绿溶液：0.12％孔雀石绿溶于2.5mol H₂SO₄，7.5％钼酸铵和11％的Tween 20使用时按100∶25∶2比例混合；

二、实验过程：

向79μL缓冲液2中加入10μL的胃粘膜微粒体(H⁺/K⁺-ATPase)，再加入1μL不同浓度的化合物溶液，然后加入10μL 2mM的ATP启动反应。在37℃反应30分钟。加入30μL孔雀石绿溶液终止反应，室温平衡20分钟，在酶标仪上620nm处读OD值，计算化合物在不同浓度对H⁺/K⁺-ATPase的抑制率。同时，以不加KCl的反应作为背景，在计算酶活性时减去。化合物的IC₅₀ 值可通过不同浓度下的抑制率计算得出。

三、实验结果：化合物的IC₅₀ 值

化合物编号	IC<sub>50</sub>（H <sup>+ </sup>/K<sup> +</sup> -ATPase）/（nM）
		实施例1	30
实施例2	55