一种治疗肾结石的药物组合物及其用途
阅读说明：本技术 一种治疗肾结石的药物组合物及其用途 (Pharmaceutical composition for treating kidney stone and application thereof ) 是由 马明 徐芳 张景欣 于 2020-07-20 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种治疗肾结石的药物组合物及其用途。特别地,本发明提供的治疗肾结石的药物组合物是以5-甲基-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲酰基]-环己基}羰基)氨基]-1H-吡唑-3-甲酰胺为有效成分制成的固体分散体。本发明还涉及所述化合物在制备用于治疗肾结石的药物中的用途。(The invention discloses a pharmaceutical composition for treating kidney stone and application thereof. Particularly, the pharmaceutical composition for treating kidney stones provided by the invention is a solid dispersion prepared by using 5-methyl-4- [ ({ (1R,2R) -2- [4- (3-methyl-1H-pyrazol-5-yl) benzoyl ] -cyclohexyl } carbonyl) amino ] -1H-pyrazole-3-formamide as an active ingredient. The invention also relates to the use of said compounds for producing medicaments for treating kidney stones.)
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其是涉及一种治疗肾结石的药物组合物及其用途。
背景技术
肾结石(renal calculi)是一种肾脏中晶体物质的异常聚积所致的疾病，为***的常见病、多发病，好发生于青壮年，其中近80％的肾结石为草酸钙结石，15％为磷酸钙结石，其余为尿酸结石、胱氨酸结石及感染性结石等。肾结石的形成过程可归结于某些因素导致尿液中的晶体物质的浓度升高或者溶解度降低，呈过饱和状态，从而析出晶体并在局部生长、聚积，最终形成结石。约40％～75％的肾结石患者有不同程度的腰痛，主要表现为腰部酸胀不适，或在身体活动增加时有隐痛或钝痛。如不及时治疗，容易进一步引发尿路梗阻、肾组织损伤、***，甚至导致肾功能衰竭等不良后果。
肾结石的形成机制尚未完全清楚，生化指标异常、肾小管上皮细胞损伤、纳米细菌生物矿化、细胞信号转导异常、代谢疾病等都被认为是结石形成的可能因素。另外，营养缺乏(维生素B6缺乏、缺镁饮食)、长期卧床、尿路的梗阻、感染、异物和药物的使用也是结石形成的常见病因。
由于肾结石的病因尚不明确，并且3-5年后复发率较高，故肾结石的治疗成为了医学界较为棘手的问题。目前，临床医学上对于肾结石，主要是采用开放手术取石、经皮肾镜取石、腹腔镜取石、输尿管镜碎石、超声波碎石等手段进行治疗。然而，这些治疗手段对身体的损伤大、术中容易并发出血、且复发率高。因此，本领域中对于寻找非介入性的溶石疗法有迫切需要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，寻找一种可以以非介入性的方式给药治疗肾结石的药物。
经过潜心研究，本申请的发明人发现5-甲基-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲酰基]-环己基}羰基)氨基]-1H-吡唑-3-甲酰胺，特别是其固体分散体制剂对肾结石模型大鼠具有较好的治疗作用，从而完成了本发明。
据此，本发明提供一种治疗肾结石的药物组合物及其用途。特别地，本发明提供的治疗肾结石的药物组合物是以5-甲基-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲酰基]-环己基}羰基)氨基]-1H-吡唑-3-甲酰胺(以下简称为“式I的化合物”)为有效成分制成的固体分散体。
据此，在一个实施方案中，本发明提供一种治疗肾结石的药物组合物，其特征在于所述药物组合物呈固体分散体的形式，所述固体分散体以式I的化合物、聚氧乙烯40氢化蓖麻油、PEG6000、泊洛沙姆188、微晶纤维素、共聚维酮为原料制成，其中式I的化合物、聚氧乙烯40氢化蓖麻油、PEG6000、泊洛沙姆188、微晶纤维素和共聚维酮之间的质量比为0.5-2:0.2-0.8:1-4:0.2-0.8:1-4:0.3-1.2。
例如，在一个实施方案中，式I的化合物、聚氧乙烯40氢化蓖麻油、PEG6000、泊洛沙姆188、微晶纤维素和共聚维酮之间的质量比为0.5-2:0.4:2:0.4:2:0.6。
在一个实施方案中，本发明还提供所述治疗肾结石的药物组合物的制备方法，其包括以下步骤：
(1)将式I的化合物和PEG6000溶解在适量的溶剂中，然后依次加入聚氧乙烯40氢化蓖麻油和泊洛沙姆188，溶解并混合均匀，得到溶液；
(2)将微晶纤维素和共聚维酮加入流化床中，然后将步骤(1)中得到的溶液以顶喷方式喷入流化床中造粒，干燥，过筛，即得所述药物组合物。
在一个优选的实施方案中，所述溶剂选自乙醇、丙酮、二氯甲烷、四氢呋喃及其混合物，优选体积比为3:1的乙醇-二氯甲烷。
所谓“适量”是指足以溶解包括式I的化合物、聚氧乙烯40氢化蓖麻油、PEG6000、泊洛沙姆188、微晶纤维素和共聚维酮在内的所有原料的量。该量是本领域技术人员根据常规药学实践容易确定的。
本发明的另一方面提供一种用于治疗肾结石的药物制剂，所述药物制剂由上述药物组合物(固体分散体)与药学上可接受的载体组成。优选地，所述药物制剂呈固体，并且所述药学上可接受的载体选自常规的药用填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂中的一种或多种的混合物。
本发明的治疗肾结石的药物组合物中的活性成分5-甲基-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)苯甲酰基]-环己基}羰基)氨基]-1H-吡唑-3-甲酰胺的结构式如下：
该化合物公开于国际专利公开号WO2016/177703A1(参见实施例22)中。该专利文献一般地涉及抑制5-脂氧合酶激活蛋白以及因此抑制白三烯产生的新型吡唑衍生物。据信所述化合物可以用于治疗和/或预防心血管疾病，如动脉硬化、冠心病、心力衰竭、冠状动脉疾病和腹主动脉瘤等疾病。但是，该专利文献未提及所述化合物具有治疗肾结石的用途，而这构成了本发明的预料不到的发现。
本发明的再一个方面涉及式I的化合物的新的制药用途，即式I的化合物在制备用于治疗肾结石的药物中的用途。优选地，所述肾结石是主要成分为草酸钙的肾结石。
下面将结合
具体实施方式
对本发明的优选实施方案及其效果进行描述。但是，应理解这些优选实施方案的描述只是用于进一步详述本发明的优点和效果，而绝非对本发明的权利要求构成任何限制。
具体实施方式
实施例1
药物组合物1
本实施例所述的药物组合物的配方如下表中所示：
组分
用量
式I的化合物
5g
聚氧乙烯40氢化蓖麻油
4g
PEG6000
20g
泊洛沙姆188
4g
微晶纤维素
20g
共聚维酮
6g
其制备方法为：
(1)将式I的化合物和PEG6000溶解在适量的体积比为3:1的乙醇-二氯甲烷中，然后依次加入聚氧乙烯40氢化蓖麻油和泊洛沙姆188，溶解并混合均匀，得到溶液；
(2)将微晶纤维素和共聚维酮加入流化床中，然后将步骤(1)中得到的溶液以顶喷方式喷入流化床中造粒，干燥，过80目筛，即得所述药物组合物。
实施例2
药物组合物2
本实施例所述的药物组合物的配方如下表中所示：
组分
用量
式I的化合物
10g
聚氧乙烯40氢化蓖麻油
4g
PEG6000
20g
泊洛沙姆188
4g
微晶纤维素
20g
共聚维酮
6g
其制备方法为：
(1)将式I的化合物和PEG6000溶解在适量的体积比为3:1的乙醇-二氯甲烷中，然后依次加入聚氧乙烯40氢化蓖麻油和泊洛沙姆188，溶解并混合均匀，得到溶液；
(2)将微晶纤维素和共聚维酮加入流化床中，然后将步骤(1)中得到的溶液以顶喷方式喷入流化床中造粒，干燥，过80目筛，即得所述药物组合物。
实施例3
药物组合物3
本实施例所述的药物组合的配方如下表中所示：
组分
用量
式I的化合物
20g
聚氧乙烯40氢化蓖麻油
4g
PEG6000
20g
泊洛沙姆188
4g
微晶纤维素
20g
共聚维酮
6g
其制备方法为：
(1)将式I的化合物和PEG6000溶解在适量的体积比为3:1的乙醇-二氯甲烷中，然后依次加入聚氧乙烯40氢化蓖麻油和泊洛沙姆188，溶解并混合均匀，得到溶液；
(2)将微晶纤维素和共聚维酮加入流化床中，然后将步骤(1)中得到的溶液以顶喷方式喷入流化床中造粒，干燥，过80目筛，即得所述药物组合物。
实施例4本发明的药物组合物对肾结石大鼠的治疗作用
本实验采用雄性SD大鼠为模型动物来验证本发明的药物组合物对肾结石大鼠的治疗作用。
1、实验动物
本实验采用体重为200-300g的8周龄的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠作为模型动物(购自于北京维通利华实验动物技术有限公司)。将大鼠饲养在室温20-23℃、空气湿度为40％-60％、每12小时切换光照/黑暗的洁净的动物房中适应环境一周。动物可自由进食和饮水。
2、实验方法
2.1肾结石模型大鼠的建立、分组和给药
随机选取45只大鼠，每日分别灌胃给予2mL造石液(含1％乙二醇和1％氯化铵的自来水)，持续14天。另外，选取10只大鼠作为正常组，每日分别灌胃给予等量生理盐水，持续14天。通过多普勒超声诊断系统观察大鼠结石形成情况，选取建模成功的40只大鼠，随机分为模型组、阳性对照组、化合物组和药物组合物组，每组10只。
将所述大鼠正常饲养在SPF级实验动物房中，供应正常的食物和饮用水。其中，阳性对照组大鼠每日以1g/kg体重的剂量灌胃给予市售排石颗粒(购自南京同仁堂药业有限责任公司，规格为20g/袋)，化合物组大鼠每日以100mg/kg体重的剂量灌胃给予式I的化合物，药物组合物组大鼠每日以相当于100mg式I的化合物/kg体重的剂量灌胃给予根据实施例2制备的药物组合物。正常组和模型组大鼠均每日灌胃给予适量生理盐水。给药持续28天后结束实验。
2.2尿液中草酸(Ox)和钙离子(Ca2+)的水平的检测
给药结束前1天，用代谢笼收集大鼠24h的尿液，分别用离子色谱法和全自动生化分析仪测定尿液中草酸(Ox)和钙离子(Ca2+)的水平。
2.3血清中尿素氮(BUN)和肌酸酐(Cr)的水平的检测
给药结束后，断头处死各组大鼠，经腹主动脉采集各组大鼠的血液样本，以3000r/min离心10min，将上清液冻存于-20℃冰箱，并用比色法检测血清中尿素氮(BUN)和肌酸酐(Cr)的水平。
2.4肾组织病理学形态观察
断头处死各组大鼠后，切取右侧肾组织，用10％甲醛固定，经石蜡包埋，常规制作切片，并进行苏木精-伊红(HE)和Pizzolato氏染色。最后，以中性树胶封片，在偏光显微镜下观察大鼠肾组织中钙化斑、游离结石的病理改变，并根据文献“米军等.金钱草联合碳酸锂预防草酸钙肾结石机制[J].暨南大学学报(自然科学与医学版)，2014，35(2):171-176”中记载的相关标准，进行肾病理损伤评分，总分在0-4分，分数越高，表明肾组织病理损伤越严重。
3、实验结果：
3.1尿液及血清的生化指标检测结果
具体结果如表1所示。
表1各组大鼠的尿液及血清的生化指标检测结果
组别
Ox(μmol·L<sup>-1</sup>)
Ca<sup>2+</sup>(mmol·L<sup>-1</sup>)
BUN(mmol·L<sup>-1</sup>)
Cr(μmol·L<sup>-1</sup>)
正常组
103.86±16.52
0.16±0.08
5.26±1.29
41.38±6.79
模型组
167.95±27.86
0.54±0.12
17.39±2.61
120.96±16.45
阳性对照组
132.25±18.89
0.33±0.11
11.57±1.58*
81.36±11.65*
化合物组
129.32±26.33
0.29±0.08*
9.89±1.36*
72.97±13.02*
药物组合物组
108.25±17.46*
0.22±0.07*
7.85±1.26*
67.02±9.12*
注：以上数据表示为*表示与模型组比较，p<0.05。
以上结果显示，与正常组比较，模型组大鼠的尿液中的草酸、钙离子以及血清中的尿素氮和肌酸酐含量均明显升高。经过给予市售排石颗粒、式I的化合物、实施例2制备的药物组合物治疗28天后，各给药组大鼠的尿液及血清的相应生化指标均较明显模型组降低。
3.2肾组织病理学形态观察结果
经苏木精-伊红(HE)和Pizzolato氏染色后观察，正常组大鼠未见肾小管扩张及草酸钙结晶沉积；模型组大鼠可见肾小管扩张及弥漫分布的黑褐色草酸钙结晶沉积，而各实验组大鼠的肾小管管腔扩张程度明显降低，且管腔内仅有少量分布的草酸钙结晶。
另外，正常组、模型组、阳性对照组、化合物组和药物组合物组的肾组织病理学评分分别为0.78±0.32、3.28±0.47、1.89±0.39、1.65±0.27和1.39±0.22分，表明模型组大鼠肾组织的病理学评分显著高于正常组(P＜0.05)，而各实验组大鼠肾组织的病理学评分显著低于模型组(P＜0.05)。
以上结果说明，式I的化合物能够有效地改善与肾结石相关的生化指标和病理学表现。另外，发明人还发现，根据本发明实施例2制备的固体分散体的药理学活性优于同等剂量的式I的化合物，这可能是由于所述固体分散体增加了式I的化合物的溶出并由此提高了其生物利用度所致。
以上所述仅是本发明的优选实施方式。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和原理的前提下，还可以做出若干改进、修饰和等同替换等，这些改进、修饰和等同替换后的技术方案也应视为落在本发明的保护范围之内。