阅读说明：本技术 柠檬烯在制备抗过敏性皮炎药物中的应用 (Application of limonene in preparation of anti-allergic dermatitis medicine ) 是由 孙东杰 于 2020-04-15 设计创作，主要内容包括：本发明公开柠檬烯在制备抗过敏性皮炎药物中的应用,属于生物医药技术领域。本发明所述柠檬烯可以抑制DNCB丙酮溶液诱导的接触性皮炎,同时具有抑制被动皮肤过敏反应及肥大细胞脱颗粒的效应；因此,所述柠檬烯可以用于治疗多种原因引起的过敏性皮炎,且具有较好的治疗效果。(The invention discloses an application of limonene in preparing an anti-allergic dermatitis medicine, and belongs to the technical field of biological medicines. The limonene can inhibit contact dermatitis induced by DNCB acetone solution, and has the effects of inhibiting passive skin anaphylaxis and mast cell degranulation; therefore, the limonene can be used for treating allergic dermatitis caused by various reasons and has a good treatment effect.)

柠檬烯在制备抗过敏性皮炎药物中的应用

技术领域

本发明涉及柠檬烯在制备抗过敏性皮炎药物中的应用，属于生物医药技术领域。

背景技术

柠檬烯别名苎烯，单萜类化合物，无色油状液体，有类似柠檬的香味。具有良好的镇咳、祛痰、抑菌作用。常用其右旋体，可用作配制人造橙花、甜花、柠檬、香柠檬油的原料。也可作为一种新鲜的头香香料用于化妆、皂用及日用化学品香精，在古龙型、花香中的茉莉型、薰衣草型以及松木、醛香、木香、果香或清香型中均适宜。食用香精中作为修饰剂用于白柠檬、果香及辛香等配方。

过敏性皮炎是一大类疾病，共同特点是瘙痒和皮疹，主要包括以荨麻疹为代表的Ⅰ型变态反应和以湿疹、接触性皮炎为代表的Ⅳ型变态反应。荨麻疹又称为风疹，走行不定，消退不留痕迹、反复发作，慢性荨麻疹反复发作，剧烈瘙痒，给患者带来巨大痛苦。湿疹又称为湿疮，病因不明，接触致敏原及内在体质因素均与发病有关，以病情反复发作、皮损对称、泛发、瘙痒明显、严重时渗出流水为主要特征，人群发病率较高，难以根治。接触性皮炎亦称毒物性皮炎，为皮肤或黏膜接触某些外界刺激物质或变应原发生的炎症反应；中医的漆疮、膏药风属于本病的范畴。症状为：自觉灼痒，重者有痛感。皮损一般仅局限于接触部位，境界清楚，形态与接触物大体一致。但亦可因搔抓等原因导致泛发全身。由于搔抓或处理不当、感染或刺激物未能及时除去，致使病程迁延变为慢性皮炎。

目前过敏性皮炎治疗以抗敏止痒为主，口服抗过敏药物包括抗组胺药等，外用药物使用基本原则：采用恰当的剂型和药物，以消炎、收敛、缓和为原则，避免使用刺激性或易致敏药物。

在过敏性皮炎的治疗中，外用抗过敏药物是主要的治疗手段之一，包括：糖皮质激素类，虽可以一定程度抗敏止痒，但长期外用存在局部皮肤萎缩、感染、色素异常等不良反应，而且患者普遍闻“激素”色变，这些限制了它的使用；此外还有其他非糖皮质激素药物，如钙调磷酸酶抑制剂及各种中药单体或者复方成分，虽有一定效果，或多或少存在疗效偏弱、价格偏高及局部刺激作用等缺陷。总体而言，抗过敏性皮炎外用药物对于相当部分过敏性皮炎患者疗效不佳。因此，寻找及开发有良好抗敏效果、经济实惠且安全的抗过敏性皮炎外用药物非常有必要。

发明内容

本发明的目的在于提供柠檬烯在制备抗过敏性皮炎药物中的应用。

本发明所述将柠檬烯可以与其他人体可接受的辅料制备为溶液、敷料霜或乳剂。

在实际应用中一般采用常规方法制备为溶液、霜、敷料或者乳剂来使用，分别通过喷涂、湿敷及涂抹于患处，一手掌均匀涂0.5克药物，一天两次。

本发明所述柠檬烯为市售柠檬烯或者采用现有方法制备得到的柠檬烯。

本发明所述过敏性皮炎是指皮肤或黏膜接触某些外界刺激物质或变应原发生的炎症反应，共同特点是瘙痒和皮疹，包括由致敏原引起的Ⅰ、Ⅳ型皮肤变态反应及不明原因所致的以瘙痒、皮疹为特征的一类疾病。

本发明的有益效果：本发明所述柠檬烯用于治疗多种原因引起的过敏性皮炎有较好的治疗效果，动物试验显示柠檬烯可以抑制DNCB丙酮溶液诱导的接触性皮炎，同时具有抑制被动皮肤过敏反应及肥大细胞脱颗粒的效应。

具体实施方式

下面结合具体实施例本发明作进一步的详细说明，但本发明的保护范围并不限于所述内容。

实施例1

柠檬烯在制备抗过敏性皮炎药物中的应用，下面通过动物试验详细分析柠檬烯对过敏性皮炎的影响。

1、实验分组：

①正常对照组

②模型组

③柠檬烯低剂量组(100mg/kg/d)

④柠檬烯中剂量组(200mg/kg/d)

⑤柠檬烯高剂量组(400mg/kg/d)

⑥阳性药地塞米松组(0.41mg/kg/d)

2、造模

上述6个实验组，每组12只SD大鼠，雄性，180-220g，除正常对照组外，剩余动物分别在去毛腹部(2cm×2cm)和右耳两面涂抹7％的DNCB(二硝基氯苯)丙酮溶液50μL致敏，24h后再次涂抹1％的50μLDNCB丙酮溶液强化刺激，之后每5d涂抹50μL1％的DNCB丙酮溶液致敏，共3次。

3、干预及评估方法

(1)于造模的第9d起，每组中随机选取六只药物灌胃，每日灌胃1次，连续给药10d；给药前以及给药结束后，拍照记录大鼠背部皮损并进行严重程度评分。

(2)于造模第9d起，每组剩余六只外涂药物(低剂量组100mg/m²、中剂量组200mg/m²、高剂量组400mg/m²、地塞米松组0.41mg/m²)，每日2次，连续给药10d；给药前以及给药结束后，拍照记录大鼠背部皮损并进行严重程度评分。

(3)颈椎脱臼处死大鼠，剪下左右耳壳，打孔器取下直径8mm的耳片，称重，计算肿胀度。

(4)评分方法：(1)皮损严重程度评分：0分无明显病变；1分轻度红肿；2分有红肿无丘疹；3分中度红肿，结痂，无溃烂、苔藓化者；4分严重红肿并有苔藓化丘疹溃烂者；(2)耳壳肿胀程度评分。

4、结果：灌胃及外涂试验药物后大鼠皮损变化

(1)干预前后背部皮肤皮损严重程度评分，如表1所示。

表1干预前后背部皮肤皮损严重程度评分

(2)干预后左右耳片肿胀度评价(左右耳片重量差值)如表2所示。

表2干预后左右耳片肿胀度评价(左右耳片重量差值)

通过表1和表2可以看出柠檬烯具有抑制DNCB丙酮溶液诱导的Ⅳ型变态反应的能力，这种抑制作用呈剂量依赖关系，同时局部外用柠檬烯及系统给药均具有这样的作用，但局部外用抗Ⅳ型变态反应作用更强。

实施例2

柠檬烯对被动皮肤过敏反应(PCA)及肥大细胞脱颗粒的影响

1、实验分组

①、正常对照组

②、模型组

③、柠檬烯低剂量组(100mg/kg/d)

④、柠檬烯中剂量组(200mg/kg/d)

⑤、柠檬烯高剂量组(400mg/kg/d)

⑥、阳性药地塞米松组(0.41mg/kg/d)

2、试验方法

(1)大鼠抗血清制备：雄性大鼠，180～220g，每侧大腿肌肉注射1％卵清蛋白0.5mL，同时腹腔注射5％氢氧化铝凝胶0.1mL；14天后取血，2000rpm离心10分钟，制备大鼠抗卵清蛋白血清，置低温冰箱保存(-20℃)。

(2)氢氧化铝凝胶制备：称取适量氯化铝，加少量生理盐水溶解，用氢氧化钠溶液调pH至8。

3、干预及评估方法

上述6个实验组，每组6只SD大鼠，雄性，180-220g，正常组与模型组灌胃生理盐水，其余组别按照分组进行药物灌胃，每日一次，连续灌胃5d；另除正常对照组外，剩余动物分别于第5d在背部皮下注射稀释的抗血清致敏(1:2稀释)，每点注射0.1mL，共注射2点，24h后经尾静脉注射2％卵清蛋白(10mL/kg，同时1mL溶液中添加2.5mg伊文思蓝)进行攻击，激发免疫反应，30min后，处死大鼠，剪下背部皮肤，测量蓝斑点直径。

处死的大鼠的头部切开，将颅骨剥下并置于95％的乙醇中1h，再放进无水甲醇中过夜。接着进行30min的0.18％中性红酒精溶液中染色，清水冲洗、骨膜分离、处理、观察，对肥大细胞中的细胞脱颗粒个数进行观察。

4、结果

表3柠檬烯对被动皮肤过敏反应(PCA)的影响(cm±s)

空白对照

阴性组

高剂量组

中剂量组

低剂量组

地塞米松组

皮斑直径

1.03±0.09

1.51±0.17

1.16±0.17

1.31±0.23

1.37±0.18

1.11±0.018

表4肥大细胞脱颗粒对比(％，χ±s)

由表3和表4系统使用柠檬烯具有抑制被动皮肤过敏反应及肥大细胞脱颗粒的效应，柠檬烯具有抗Ⅰ型变态反应的能力，这种抑制作用呈剂量依赖关系。

综上所述：柠檬烯可以抑制DNCB丙酮溶液诱导的接触性皮炎，同时具有抑制被动皮肤过敏反应及肥大细胞脱颗粒的效应。基于前述的过敏性皮炎的发病机理，柠檬烯对其他以瘙痒及皮疹为表现的过敏性皮炎也具有治疗作用，即柠檬烯可以用于治疗多种原因引起的过敏性皮炎，且具有较好的治疗效果。