阅读说明：本技术 用于治疗睡眠呼吸暂停的方法和组合物 (Methods and compositions for treating sleep apnea ) 是由 D·A·韦尔曼 L·塔兰托-蒙特穆罗 于 2018-04-26 设计创作，主要内容包括：用于在受试者处于非完全意识状态时治疗例如睡眠呼吸暂停和打鼾等与咽部气道肌肉塌陷相关的病况的方法和组合物,包括给予去甲肾上腺素再摄取抑制剂(NRI)和毒蕈碱受体拮抗剂。(Methods and compositions for treating conditions associated with pharyngeal airway muscle collapse, such as sleep apnea and snoring, when a subject is not fully conscious, include administering a Norepinephrine Reuptake Inhibitor (NRI) and a muscarinic receptor antagonist.)

用于治疗睡眠呼吸暂停的方法和组合物

优先权要求

本申请要求2017年4月28日提交的美国专利申请序列No.62/491,504和2017年9月14日提交的No.62/558,814的权益。上述申请的全部内容通过参考并入本文。

联邦赞助的研究或开发

本发明在由美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的批准号HL095491下由政府资助完成。政府拥有本发明的某些权利。

技术领域

本发明至少部分地基于如下发现：用于在受试者处于非完全意识状态时治疗例如打鼾和睡眠呼吸暂停等与咽部气道塌陷(pharyngeal airway collapse)相关的病况的方法和组合物，包括给予去甲肾上腺素再摄取抑制剂(NRI)和毒蕈碱受体拮抗剂。

背景技术

阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)是在睡眠期间由咽部气道的塌陷引起的常见的病症 ¹ 。OSA具有严重的健康影响。

发明内容

本公开基于如下令人惊讶的发现：例如在OSA患者中，去甲肾上腺素能药物和抗毒蕈碱药物的给予可以增加睡眠的人的咽部肌肉活动性并且降低打鼾和睡眠呼吸暂停的严重程度。

因此，本文提供用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有与咽部气道塌陷相关的病况的受试者的方法。该方法包括向有需要的受试者给予有效量的(i)去甲肾上腺素再摄取抑制剂(NRI)和(ii)毒蕈碱受体拮抗剂。

在一些实施方案中，NRI是去甲肾上腺素选择性再摄取抑制剂(NSRI)，例如，选自由以下组成的组中的NSRI：氨甲达林(Amedalin)、托莫西汀(Atomoxetine)、CP-39,332、达来达林(Daledalin)、依地西汀(Edivoxetine)、噁泼西汀(Esreboxetine)、氯他拉明(Lortalamine)、尼索西汀(Nisoxetine)、瑞波西汀(Reboxetine)、他洛普仑(Talopram)、他舒普仑(Talsupram)、坦达明(Tandamine)和维洛沙秦(Viloxazine)。

在一些实施方案中，NRI是去甲肾上腺素非选择性再摄取抑制剂(NNRI)，例如，选自由以下组成的组中的NNRI：阿米替林(Amitriptiline)、阿莫沙平(Amoxapine)、安非他酮(Bupropion)、西拉吲哚(Ciclazindol)、地西帕明(Desipramine)、去甲文拉法辛(Desvenlafaxine)、Dexmethilphenidate、安非拉酮(Diethylpropion)、多虑平(Doxepin)、度洛西汀(Duloxetine)、丙咪嗪、左旋米那普仑(Levomilnacipran)、马尼法辛(Manifaxine)、马普替林(Maprotiline)、哌醋甲酯(Methylphenidate)、米那普仑(Milnacipran)、奈法唑酮、去甲替林(Nortriptyline)、苯二甲吗啉(Phendimetrazine)、苯甲吗啉(Phenmetrazine)、普罗替林(Protryptyline)、雷达法辛(Radafaxine)、他喷他多(Tapentadol)、替尼沙秦(Teniloxazine)和文拉法辛。

在一些实施方案中，NRI选自由托莫西汀和瑞波西汀组成的组。

在一些实施方案中，NRI为托莫西汀，并且在特定的实施方案中，托莫西汀的剂量为20-100mg，例如，25-75mg。

在一些实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂为M2受体激动剂，例如选自由阿托品、丙胺太林(propantheline)、氨甲酰甲胆碱(bethanechol)、索非那新(solifenacin)、达非那新(darifenacin)、托特罗定(tolterodine)、非索罗定(fesoterodine)、曲司氯铵(trospium)和奥昔布宁(oxybutynin)组成的组。

在一些实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂选自由以下组成的组：辛托品(Anisotropine)、苯扎托品(Benztropine)、比哌立登(Biperiden)、克利溴铵(Clidinium)、赛克立明(Cycrimine)、双环胺(Dicyclomine)、二苯马尼(Diphemanil)、地芬尼多(Diphenidol)、乙丙嗪(Ethopropazine)、格隆溴铵(Glycopyrrolate)、己环铵(Hexocyclium)、异丙酰胺、甲哌佐酯(Mepenzolate)、美噻吨(Methixene)、甲基东莨菪碱(Methscopolamine)、羟苄利明(Oxyphencyclimine)、奥芬溴铵(Oxyphenonium)、普环啶(Procyclidine)、东莨菪碱、曲地铵(Tridihexethyl)和苯海索(Trihexyphenidyl)。

在一些实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂处于速释制剂中。

在一些实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂处于缓释制剂中。

在一些实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂为奥昔布宁，并且在特定的实施方案中，奥昔布宁的剂量为2-15mg。

在一些实施方案中，奥昔布宁处于速释制剂中，例如，剂量为2.5-10mg。

在一些实施方案中，奥昔布宁处于缓释制剂中，例如，剂量为5-15mg。

在一些实施方案中，疾病或病症为阻塞性睡眠呼吸暂停(例如，AHI≥10次事件/小时)或单纯鼾症。

在一些实施方案中，非完全意识状态为睡眠。

在一些实施方案中，NRI和毒蕈碱受体拮抗剂以单一组合物给药。

在一些实施方案中，单一组合物为口服给药形式。

在一些实施方案中，口服给药形式为糖浆、丸剂、片剂、锭剂或胶囊剂。

在一些实施方案中，单一组合物为经皮给药形式，例如贴剂。

本文还提供药物组合物，其包含(i)去甲肾上腺素再摄取抑制剂(NRI)、(ii)毒蕈碱受体拮抗剂、和(iii)药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，NRI为去甲肾上腺素选择性再摄取抑制剂(NSRI)，例如，选自由以下组成的组：氨甲达林、托莫西汀、CP-39,332、达来达林、依地西汀、噁泼西汀、氯他拉明、尼索西汀、瑞波西汀、他洛普仑、他舒普仑、坦达明、和维洛沙秦。在一些实施方案中，NRI为选自由以下组成的组中的去甲肾上腺素非选择性再摄取抑制剂(NNRI)：阿米替林、阿莫沙平、安非他酮、西拉吲哚、地西帕明、去甲文拉法辛、Dexmethilphenidate、安非拉酮、多虑平、度洛西汀、丙咪嗪、左旋米那普仑、马尼法辛、马普替林、哌醋甲酯、米那普仑、奈法唑酮、去甲替林、苯二甲吗啉、苯甲吗啉、普罗替林、雷达法辛、他喷他多(Nucynta)、替尼沙秦(Lucelan，Metatone)和文拉法辛。

在一些实施方案中，NRI选自由托莫西汀和瑞波西汀组成的组。

在一些实施方案中，NRI为托莫西汀，并且在特定的实施方案中，托莫西汀的剂量为20-100mg。

在一些实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂为M2拮抗剂，例如，选自由阿托品、丙胺太林、氨甲酰甲胆碱、索非那新、达非那新、托特罗定、非索罗定、曲司氯铵和奥昔布宁组成的组。

在一些实施方案中，药物组合物的毒蕈碱受体拮抗剂组分选自由以下组成的组：辛托品、苯扎托品、比哌立登、克利溴铵、赛克立明、双环胺、二苯马尼、地芬尼多、乙丙嗪、格隆溴铵、己环铵、异丙酰胺、甲哌佐酯、美噻吨、甲基东莨菪碱、羟苄利明、奥芬溴铵、普环啶、东莨菪碱、曲地铵和苯海索。在一些实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂处于速释制剂中。在一些实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂处于缓释制剂中。

在一些实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂为奥昔布宁。在一些实施方案中，奥昔布宁处于速释制剂中，例如，剂量为2.5-10mg。在一些实施方案中，奥昔布宁处于缓释制剂中，例如，剂量为5-15mg。

还提供本文所述的组合物，用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有与咽部气道塌陷相关的病况的受试者。在一些实施方案中，疾病或病症为睡眠呼吸暂停或单纯鼾症。在一些实施方案中，疾病或病症为阻塞性睡眠呼吸暂停。

在一些实施方案中，非完全意识状态为睡眠。

在一些实施方案中，NRI和毒蕈碱受体拮抗剂以单一组合物给药。

在一些实施方案中，单一组合物为口服给药形式。

在一些实施方案中，口服给药形式为丸剂、片剂、锭剂或胶囊剂。

本文还提供去甲肾上腺素再摄取抑制剂(NRI)和毒蕈碱受体拮抗剂，用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有与咽部气道塌陷相关的病况的受试者。

此外，本文提供包含去甲肾上腺素再摄取抑制剂(NRI)和毒蕈碱受体拮抗剂的试剂盒，例如，用于本文所述的方法，例如，用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有与咽部气道塌陷相关的病况的受试者。试剂盒可以包含例如本文所要求保护的任意单独的活性药物与药学上可接受的盐或载体的另外的药物组合物，其中所述试剂盒可以包含(a)允许潜在地分开给药的分开的或共用的瓶或包装，和(b)任选地，一套试剂盒说明书。

除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。本文描述了用于本发明的方法和材料；也可以使用本领域已知的其它合适的方法和材料。材料、方法和实例仅是说明性的，并且不旨在于限制。本文提及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其它参考文献通过参考以其整体并入本文。在有冲突的情况下，包括定义的本说明书将控制。

根据以下详细的描述和附图以及权利要求，本发明的其它特征和优点将显而易见。

附图说明

图1.阻塞性呼吸暂停的图解说明。顶部通道(channel)显示睡眠的脑电图(EEG)图示。下一个通道表示气流。接下来的三个通道显示借助胸腔和腹部的移动以及食管压力的变化的呼吸用力(ventilatory effort)，所有这些均反映了呼吸肌的收缩。最后一个通道表示血氧饱和度。

图2A-图2B.在安慰剂的存在下，从清醒到睡眠，咽部肌肉活动性降低(2A)。相反，托莫西汀+奥昔布宁在睡眠期间保持咽部肌肉活动性接近清醒时的值(2B)。

图3A-图3B.参与者在入睡前30分钟以随机顺序接受治疗(托莫西汀80mg+奥昔布宁5mg)或安慰剂。结果显示，托莫西汀和奥昔布宁的组合将呼吸暂停低通气指数(apneahypopnea index，AHI)从31[10-54]降低至8[2-18](3A)。数据表示为中值[第25百分位数-第75百分位数]。当将OSA严重程度的分析限于AHI>10次事件/小时的15名受试者时，托莫西汀/奥昔布宁的组合的效果甚至更强(与安慰剂相比，AHI为-78％)(3B)。

图4.托莫西汀和奥昔布宁的组合增加睡眠期间的通气量。对于安慰剂和药物，夜间的通气量计算为在正常通气驱动力(ventilatory drive)下的平静呼吸的通气量(eupneic ventilation)的百分比。

图5.在托莫西汀/奥昔布宁夜晚期间，OSA患者的夜间最低血氧水平从安慰剂的84[79-92]提高到94[89-95]。

图6A-图6B.对于AHI>10的受试者，与安慰剂相比，托莫西汀/奥昔布宁夜晚的总睡眠时间(6A)和睡眠效率(6B)也得以改善。

图7.与安慰剂相比，仅托莫西汀和奥昔布宁的组合显示AHI的显著降低，而单独的托莫西汀或奥昔布宁无法改善AHI。

图8.在患有轻度至中度上气道塌陷的受试者中，托莫西汀和非索罗定在降低AHI方面与托莫西汀和奥昔布宁同样有效。

图9.在未用CPAP治疗的6名受试者中，托莫西汀和奥昔布宁组合(托莫西汀80mg/奥昔布宁5mg)给药在1周后使AHI降低63％。

图10A-图10B.(10A)显示托莫西汀加奥昔布宁(ato-oxy)对颏舌肌反应性的影响的分组数据。阴影区域表示斜率的四分位距。水平误差线表示基线Pes的四分位距；使基线值(EMG_GG＝100％)垂直地偏移，以便于看到误差线。(10B)示出实例原始数据以提供背景。信号表明颏舌肌活动性在睡眠期间随增加的Pes摆动而自发地增加。EMG_GG：颏舌肌的肌电图；mta：平均移动时间；Pes：食管压力。

具体实施方式

在人类中，咽部气道区域没有骨骼或软骨支撑，并且借助肌肉保持开放。当这些肌肉在睡眠期间放松时，咽部会塌陷，导致气流的中止。如图1所示，在试图克服阻塞时，呼吸用力持续并且增加，这由食管压力变化的增加来显示。由于膈肌收缩压向阻塞的气道，因此胸腔和腹部的移动处于相对的方向，迫使腹壁向外扩张，并且胸壁向内凹陷。

增加呼吸用力导致从睡眠中醒来，这在EEG上可见(图1)，并且导致气道的开放和正常呼吸的恢复。呼吸暂停期间气流的缺乏也导致缺氧，这由血氧饱和度的下降来显示(图1)。严重程度通常使用呼吸暂停低通气指数(AHI)来测量，其为每小时睡眠中发生的呼吸暂停(呼吸中止至少十秒钟)和低通气(减少的气流和氧饱和度)的合并的平均数(combinedaverage number)。参见，例如，Ruehland等人，The new AASM criteria for scoringhypopneas:Impact on the apnea hypopnea index，SLEEP 2009；32(2):150–157.

当使用OSA的严格定义(AHI≥15次事件/小时或AHI≥5次事件/小时伴有白天嗜睡)时，则估计的患病率在男性中为约15％并且在女性中为约5％。在美国，估计有3000万人患有OSA，其中约600万人被确诊。由于老龄化和增加的肥胖率，在美国OSA的患病率似乎正在增加。OSA与主要合并症和经济成本相关，包括：高血压、糖尿病、心血管疾病、机动车事故、工作场所事故、以及疲劳/丧失生产力。参见，例如，Young等人，WMJ 2009；108:246；Peppard等人，Am J Epidemiol 2013；177:1006。

当前领先的治疗 ^2,3 是持续气道正压通气(CPAP)。CPAP在几乎所有患者中都是有效的，并且约85％的确诊患者被治疗，但是依从性低。患者发现CPAP不舒服并且经常是无法忍受的；至少30％(高达80％)的患者经常不依从，因此未经治疗(Weaver,Proc Am ThoracSoc.2008Feb 15；5(2):173–178)。其它具有不同成功率的治疗方式包括口腔矫治器(10％)和外科手术(5％)，但这两种方式都不太可能在普通人群中有效。迄今为止，尚无药物治疗显示有效。

对激活睡眠中人的咽部肌肉的药物的寻找一直是令人沮丧的；已在人体中测试了例如5-羟色胺再摄取抑制剂、三环类抗抑郁药和镇静剂等药剂，并且显示在降低OSA严重程度方面无效。参见，例如，Proia和Hudgel,Chest.1991Aug；100(2):416-21；Brownell等人，NEngl J Med 1982,307:1037–1042；Sangal等人，Sleep Med.2008Jul；9(5):506-10.Epub2007Sep 27；Marshall等人，Sleep.2008Jun；31(6):824-31；Eckert等人，Clin Sci(Lond).2011Jun；120(12):505-14；Taranto-Montemurro等人，Sleep.2017Feb 1；40(2)。

令人惊讶地，我们发现去甲肾上腺素能药物和抗毒蕈碱药物的给予可以增加睡眠的人的咽部肌肉活动性，并且在OSA患者中使打鼾减少和使睡眠呼吸暂停的严重程度降低。

治疗的方法

本文所述的方法包括用于治疗与睡眠期间的咽部气道肌肉塌陷相关的病症的方法。在一些实施方案中，病症为阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)(定义为AHI≥10次事件/小时)或单纯鼾症。通常，该方法包括将本领域已知的和/或本文所述的治疗有效量的去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂给药至需要此类治疗或已确定需要此类治疗的受试者。

如在本文中所使用的，“治疗”是指减轻与咽部气道塌陷相关的病症的至少一种症状。通常，睡眠期间的咽部气道塌陷导致打鼾和/或呼吸中断(呼吸暂停或低通气)、从睡眠中醒来和减少的氧合作用(低氧血症)；因此，治疗可以导致打鼾、呼吸暂停/低通气、睡眠片段化和低氧血症中的一种或多种的减少。

出乎意料的是，用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有例如OSA等与咽部气道塌陷相关的病况的受试者的、治疗有效量的去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂的给予将导致降低的AHI。在一些实施方案中，用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有例如OSA等与咽部气道塌陷相关的病况的受试者的、治疗有效量的去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂的给予将导致AHI降低50％以上。在一些实施方案中，用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有例如OSA等与咽部气道塌陷相关的病况的受试者的、治疗有效量的去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂的给予将导致AHI降低75％以上。在其它进一步的实施方案中，用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有例如OSA等与咽部气道塌陷相关的病况的受试者的、治疗有效量的去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂的给予将导致增加的通气量。在又一实施方案中，用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有例如OSA等与咽部气道塌陷相关的病况的受试者的、治疗有效量的去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂的给予将导致增加的血氧水平。在又一实施方案中，用于在受试者处于非完全意识状态时治疗患有例如OSA等与咽部气道塌陷相关的病况的受试者的、治疗有效量的去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂的给予将导致改善的总睡眠时间、降低的AHI、增加的氧合作用、较少的睡眠片段化、增加的总睡眠时间和/或改善的主观睡眠质量。

有效量的去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂可以一次或多次、以一种或多种用途或剂量同时或分开给药。当同时给药时，可以将去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂配制为包含去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂两者的单一剂型，例如胶囊剂、片剂或溶液剂，或者配制为分开的剂型，例如一种含有去甲肾上腺素再摄取抑制剂的胶囊剂、片剂或溶液剂，以及另一种含有抗毒蕈碱药剂的胶囊剂、片剂或溶液剂。去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂中的每一种可以以每天一次或多次至每周一次或多次，包括隔天一次，同时或分开给药。在一些实施方案中，去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂每天给药。技术人员将理解，某些因素会影响有效地治疗受试者所需的剂量和时间，包括但不限于疾病或病症的严重程度、先前的治疗、受试者的总体健康状况和/或年龄、以及其它存在的疾病。此外，用治疗有效量的本文所述的治疗性化合物治疗受试者可以包括单一治疗或一系列治疗。

治疗性化合物(即，单一组合物或分开的组合物中的NRI和毒蕈碱受体拮抗剂)的剂量、毒性和治疗功效可以通过如下来确定：例如，用于确定LD50(对50％的人群致死的剂量)和ED50(在50％的人群中治疗有效的剂量)的细胞培养或实验动物中的标准药学方法。毒性效果和治疗效果之间的剂量比为治疗指数，并且其可以表示为比LD50/ED50。

从细胞培养试验和动物研究中获得的数据可以用于制定一系列用于人类的剂量。此类化合物的剂量优选在包括ED50而几乎没有或者没有毒性的循环浓度的范围内。剂量可以取决于所采用的剂型和所利用的给药途径在该范围内变化。治疗有效剂量可以最初由细胞培养试验来估计。可以在动物模型中制定剂量以达到包括在细胞培养中确定的IC50(即，达到症状的半数最大抑制的试验化合物的浓度)的循环血浆浓度范围。此类信息可用于更准确地确定在人类中有用的剂量。血浆中的水平可以例如通过高效液相色谱法来测量。

在一些实施方案中，该方法包括给予剂量为20-100mg的托莫西汀(或其剂量当量的另一种NRI)和剂量为2-15mg的奥昔布宁(或其剂量当量的另一种毒蕈碱受体拮抗剂)。在一些实施方案中，该方法包括给予80mg托莫西汀/5mg奥昔布宁；75mg托莫西汀/5mg奥昔布宁；75mg托莫西汀/6mg奥昔布宁；50mg托莫西汀/4mg奥昔布宁；或者25mg托莫西汀/3mg奥昔布宁。在其它实施方案中，该方法包括在一小时睡眠时间内给予剂量为20-100mg的托莫西汀(或其剂量当量的另一种NRI)和剂量为2-15mg的奥昔布宁(或其剂量当量的另一种毒蕈碱受体拮抗剂)。在一些实施方案中，该方法包括在睡眠时间前15-60分钟，例如，20-45分钟、15-25分钟、或20-30分钟给予80mg托莫西汀/5mg奥昔布宁；75mg托莫西汀/5mg奥昔布宁；75mg托莫西汀/6mg奥昔布宁；50mg托莫西汀/4mg奥昔布宁；或者25mg托莫西汀/3mg奥昔布宁。

在进一步的实施方案中，该方法包括以12.5:1的重量比给予托莫西汀/奥昔布宁。在其它实施方案中，该方法包括在睡眠时间前15-60分钟，例如，20-45分钟、15-25分钟、或20-30分钟以12.5:1的重量比给予托莫西汀/奥昔布宁。

药物组合物和给药的方法

本文所述的方法包括使用含有去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂作为活性成分的药物组合物。去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂可以以单一组合物或分开的组合物给药。在一些实施方案中，该方法包括给予去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂，并且没有其它活性成分，即，去甲肾上腺素再摄取抑制剂和抗毒蕈碱药剂是仅有的活性药剂。

示例性去甲肾上腺素再摄取抑制剂(NRI)包括：选择性NRI，例如，氨甲达林(UK-3540-1)、托莫西汀(Strattera)、CP-39,332、达来达林(UK-3557-15)、依地西汀(LY-2216684)、噁泼西汀、氯他拉明(LM-1404)、尼索西汀(LY-94,939)、瑞波西汀(Edronax，Vestra)、他洛普仑(Lu 3-010)、他舒普仑(Lu 5-005)、坦达明(AY-23,946)、维洛沙秦(Vivalan)；和非选择性NRI，例如，阿米替林、阿莫沙平、安非他酮、西拉吲哚、地西帕明、去甲文拉法辛、Dexmethilphenidate、安非拉酮、多虑平、度洛西汀、丙咪嗪、左旋米那普仑、马尼法辛(GW-320,659)、马普替林、哌醋甲酯、米那普仑、奈法唑酮、去甲替林、苯二甲吗啉、苯甲吗啉、普罗替林、雷达法辛(GW-353,162)、他喷他多(Nucynta)、替尼沙秦(Lucelan，Metatone)和文拉法辛。

抗毒蕈碱药剂的合适的但非限制性实例包括对M2受体具有活性的阿托品、丙胺太林、氨甲酰甲胆碱、索非那新、达非那新、托特罗定、非索罗定、曲司氯铵和奥昔布宁。其它示例性抗毒蕈碱药剂包括辛托品、苯扎托品、比哌立登、克利溴铵、赛克立明、双环胺、二苯马尼、地芬尼多、乙丙嗪、格隆溴铵、己环铵、异丙酰胺、甲哌佐酯、美噻吨、甲基东莨菪碱、羟苄利明、奥芬溴铵、普环啶、东莨菪碱、曲地铵和苯海索。

在一些实施方案中，去甲肾上腺素再摄取抑制剂为托莫西汀。在一些实施方案中，抗毒蕈碱药剂为奥昔布宁(例如，N-去乙基奥昔布宁)。

药物组合物通常包括药学上可接受的载体。如本文所使用的，术语“药学上可接受的载体”包括与药物给药相容的盐水、溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。也可以将补充的活性化合物引入组合物中，例如，包括唑吡坦、右佐匹克隆(eszopiclone)、苯二氮类、加巴喷丁、噻加滨(tiagabine)和羟丁酸钠(xyrem)的催眠药。

通常将药物组合物配制为与它们预期的给药途径相容。给药途径的实例包括全身性口服给药或经皮给药。

配制合适的药物组合物的方法是本领域已知的，参见，例如，Remington:TheScience and Practice of Pharmacy,第21版,2005；和系列Drugs and thePharmaceutical Sciences:a Series of Textbooks and Monographs(Dekker,NY)中的书籍。例如，口服组合物通常包含惰性稀释剂或可食用载体。为了口服治疗性给药的目的，可以将活性化合物与赋形剂结合并且以丸剂、片剂、锭剂或胶囊剂(例如明胶胶囊剂)的形式使用。口服组合物也可以使用流体载体制备。可以包含药学上相容的粘合剂和/或佐剂材料作为组合物的一部分。片剂、丸剂、胶囊剂和锭剂等可以包含任意的以下成分、或类似性质的化合物：粘合剂，例如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，例如淀粉或乳糖；崩解剂，例如藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，例如硬脂酸镁或Sterotes；助流剂，例如胶态二氧化硅；甜味剂，例如蔗糖或糖精；或者调味剂，例如薄荷、水杨酸甲酯或橙味调味剂。

如本文所述的一种或两种化合物(即，去甲肾上腺素再摄取抑制剂和毒蕈碱受体拮抗剂中的一种或两种)的全身性给药也可以通过经皮方式，例如使用贴剂、凝胶剂、洗剂或薄的膜剂来施用至皮肤。对于经皮给药，可以在制剂中使用适合于表皮屏障的渗透的渗透剂。此类渗透剂通常是本领域已知的。例如，对于经皮给药，可以将活性化合物配制成本领域通常已知的软膏剂、药膏、凝胶剂或乳膏剂。凝胶剂和/或洗剂可以以单独的小袋提供，或者通过每天应用的定量泵(metered-dose pump)提供。参见，例如，Cohn等人，Ther AdvUrol.2016Apr；8(2):83–90。

在一个实施方案中，将治疗性化合物与将保护治疗性化合物免于从人体快速消除的载体一起制备，例如包括植入物和微囊化递送系统的控释制剂。可以使用可生物降解的、生物相容性聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、胶原蛋白、聚原酸酯和聚乳酸。此类制剂可以使用标准技术来制备，或者从例如Alza Corporation和NovaPharmaceuticals,Inc.商购获得。脂质体悬浮液也可以用作药学上可接受的载体。这些可以根据本领域技术人员已知的方法，例如，如美国专利No.4,522,811中所述来制备。

药物组合物可以与本文所述方法中的给药或使用说明一起包括在容器、包装或分配器中。

实施例

在以下实施例中进一步描述本发明，所述实施例不限制权利要求中所述的本发明的范围。

实施例1.初步研究(Pilot Study)

在3个健康的人类个体中，在初步研究中测量选择性去甲肾上腺素再摄取抑制剂托莫西汀80mg与抗毒蕈碱药物奥昔布宁5mg组合对颏舌肌活动性的影响。

图2A-B显示服用托莫西汀和奥昔布宁的组合的三个个体的数据。图2A是安慰剂夜晚(placebo night)。第一栏中的图是安静清醒期间的颏舌肌活动性(EMG_GG，量化为最大值的百分比)。各圆圈表示单次呼吸的峰值EMG_GG，并且将其相对于相应的会厌压力作图。在稳定的NREM睡眠期间获得第二栏中的图。注意在安慰剂夜晚的睡眠期间，EMG_GG活动性(EMG_GGactivity)存在可变但明显的降低。相比之下，当这些相同的三个个体服用托莫西汀+奥昔布宁时，部分地或完全地防止与睡眠有关的咽部肌肉活动性的降低(图2B)。

从该数据清楚的是，与安慰剂相比，试验药物在NREM睡眠期间产生更高的EMG_GG活动性。在对这些药物显示REM睡眠的受试者中，EMG_GG活动性在REM睡眠中保持在清醒值的49％，表明药物在该阶段也同样有效。

实施例2.交叉研究

随后，在20例阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)人类患者中进行安慰剂对照、双盲、随机、交叉试验。参与者在睡眠前30分钟以随机顺序接受治疗(托莫西汀80mg+奥昔布宁5mg)或安慰剂。试验表明，托莫西汀和奥昔布宁的组合将呼吸暂停低通气指数(AHI)从31[10-54]降低至8[2-18]。数据表示为中值[第25百分位数-第75百分位数](图3A)。在试验期间，5名受试者在安慰剂夜晚显示没有临床显著的OSA。如果将OSA严重程度的分析限于AHI>10次事件/小时的15名受试者，则托莫西汀/奥昔布宁的组合的效果甚至更强(与安慰剂相比，AHI降低78％)(图3B)。所有OSA患者均显示OSA严重程度的改善。

在这些受试者中，与安慰剂相比，托莫西汀和奥昔布宁的组合使颏舌肌对通气驱动力的增加的反应性从0.1％max/cmH₂O增加至0.3％max/cmH₂O，这意味着对于通气驱动力(用食管压力测量)每cmH₂O的增加，与安慰剂相比，药物使颏舌肌的活动性提高2倍。在这些受试者中，这种改善的上气道肌肉活动性很可能是AHI的降低(图3A-B)和睡眠期间增加的通气量(图4)的原因。

由于改善的通气量，药物夜晚(drugs night)的氧水平(SaO₂)也增加。SaO₂的最低值从安慰剂的84％[79-92]上升至药物的94％[89-96](图5)，而氧减饱和度指数(ODI)从安慰剂夜晚期间的13[6-34]下降至药物的3[0-8]。

另外，如图6A-B所示，对于AHI>10的受试者，与安慰剂相比，在托莫西汀/奥昔布宁夜晚，总睡眠时间和睡眠效率也得以改善。

还在其中2种药物单独给药(未组合)的另外2个夜晚研究了7名OSA患者。如图7所示，与安慰剂相比，仅托莫西汀和奥昔布宁的组合显示AHI的显著降低，而单独的托莫西汀或奥昔布宁无法改善AHI。

实施例3.非索罗定研究

为了确定是否可以使用其它抗毒蕈碱药剂代替奥昔布宁，在3名患有轻度至中度上气道塌陷(在正常用力的情况下睡眠期间的通气量大于安慰剂组的平静呼吸通气量的50％)的受试者中，将4mg非索罗定(较新的缓释抗毒蕈碱药物)与80mg托莫西汀组合使用。在该亚组患者中，非索罗定在降低AHI方面与奥昔布宁同样有效。

在两名患有严重的上气道塌陷(睡眠期间的通气量低于正常通气量的50％)的患者中，托莫西汀/非索罗定的组合没有降低AHI，而托莫西汀/奥昔布宁却降低了AHI。

实施例4.前瞻性研究(Prospective Study)

为了评价托莫西汀-奥昔布宁组合的效果，在6例未经CPAP治疗的患者中进行为期一周的前瞻性研究。患者在医院进行基线睡眠研究；在家服用药物(托莫西汀80mg/奥昔布宁5mg)6晚，并且在第7晚，患者在服药后返回医院以重复睡眠研究。使用包括如下的用于临床睡眠研究的标准蒙太奇(standard montage)来进行这些研究：脑电图、眼电图、使用鼻导管和热敏电阻的流量测量、腹带和胸带、下颏肌电图和氧饱和度。图9中所示的结果显示，在1周的治疗后，AHI降低63％[53至70]，表明在1周的治疗后，药物的效果是持久的。

在三名患者中，我们测试了更低剂量的组合，即，托莫西汀80mg与奥昔布宁5mg的组合、托莫西汀50mg与奥昔布宁4mg的组合、以及托莫西汀25mg与奥昔布宁3mg的组合。与安慰剂相比，AHI显示剂量依赖性的降低，表明低于80/5mg的剂量在治疗不太严重的疾病方面会是有效的。为了当前目的，我们将轻度疾病定义为5次事件/小时<AHI<15次事件/小时，并且将中度疾病定义为15次事件/小时<AHI<30次事件/小时。

在参加最初试验的20名患者中的16名患者中，使用颏舌肌肌电图获得分组数据，以确定托莫西汀加奥昔布宁(ato-oxy)对颏舌肌反应性的影响。肌肉反应性反映在非REM睡眠中、在自主呼吸期间相对于食管压力(Pes)摆动的变化的颏舌肌肌电活动(electromyographic activity)的变化(基线的百分比)(生理背景参见图10B)。注意ato-oxy的中值反应性(实线的斜率)大于安慰剂的反应性(虚线的斜率)。图10B示出示例性原始数据以提供背景。信号表明颏舌肌活动性在睡眠期间随增加的Pes摆动而自发增加。注意气流(airflow)(气流(Flow))的恢复伴随增加的肌肉活动性。

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其它实施方案

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