抗病毒的膦酸酯类似物的盐及其制备方法
阅读说明：本技术 抗病毒的膦酸酯类似物的盐及其制备方法 (Antiviral phosphonate analog salts and methods of making the same ) 是由 M·S·富尔 A·A·萨万特 D·R·拉奥 G·马尔霍特拉 M·G·甘格拉德 于 2018-03-16 设计创作，主要内容包括：本发明涉及式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的某些酸式盐、其制备方法；包含这些化合物的药物组合物以及用于治疗疾病的方法,所述疾病对抑制核苷酸逆转录酶的活性产生响应。<Image he="325" wi="700" file="DDA0002204353820000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(The present invention relates to certain acid salts of (((1- (6-amino-9H-purin-9-yl) propan-2-yloxy) methyl) (phenoxy) phosphoryloxy) methyl pivalate of formula (I), methods of preparing the same; pharmaceutical compositions comprising these compounds and methods for treating diseases that respond to inhibition of nucleotide reverse transcriptase activity.)
发明领域
本发明涉及(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐及其制备方法、包含其的药物组合物和使用其的治疗方法。
相关背景技术：
在WO 2014/068265中公开了式(I)的化合物(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯。
有价值的药理学性质归因于该化合物。例如，它可用作核苷酸逆转录酶抑制剂以用于治疗对抑制蛋白激酶的活性产生响应的疾病。
不断需要现有的核苷酸逆转录酶抑制剂的新形式或改进形式以开发用于治疗癌症和其他疾病的新的、改进的和更有效的药物制剂。本文所述的盐形式和其制备方法就是针对这些需要和其他目的。
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本发明尤其涉及(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐。
在一个方面，本发明提供(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐，该酸式盐选自：
(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯磷酸盐(磷酸盐)；
(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯草酸盐(草酸盐)；
(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯琥珀酸盐(琥珀酸盐)；
(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯柠檬酸盐(柠檬酸盐)；
或其溶剂化物或水合物。
在某些方面，本发明的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐可以是溶剂化形式。溶剂化形式的实例包括但不限于与乙醇、四氢呋喃、二***、丙酮和/或水(即水合物)形成的溶剂化物。因此，在本发明的上下文中，术语“溶剂化物”包括水合物。
另一方面，本发明提供(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酒石酸盐(酒石酸盐)，或其溶剂化物或水合物，其XRD图谱包括在约4.73和20.65°2θ±0.2°2θ处的峰。
在又一方面，本发明提供(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯富马酸盐(富马酸盐)，或其溶剂化物或水合物，其XRD图谱包括在约5.03、23.59和29.02°2θ±0.2°2θ处的峰。
在某些方面，本发明的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酯的酸式盐可以是基本上结晶的或无定形的。盐的结晶或无定形结构中的溶剂分子的数目不受限制，并且例如可以为每摩尔(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酯约0.1至约7摩尔溶剂。
在本发明的另一方面，(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酯的酸式盐可以是去溶剂化形式。
本发明还提供(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酯的酸式盐的一种或多种多晶型形式。
本发明还涉及制备(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酯的各种结晶的酸式盐的方法，该方法包括以下步骤：使(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯游离碱与酸在合适的溶剂中反应，并且之后任选地分离如此形成的酸加成盐，所述酸选自富马酸、酒石酸、磷酸、草酸、琥珀酸或柠檬酸。
本发明还涉及药物组合物，其包含：
(a)(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐(其可以以结晶或无定形形式存在)，或其溶剂化物或水合物；和
(b)至少一种药学上可接受的赋形剂。
本发明还涉及治疗对抑制核苷酸逆转录酶的活性产生响应的疾病，如HIV和/或AIDS的方法，该方法包括向需要这种治疗的受试者施用治疗有效量的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐，或其溶剂化物或水合物的步骤。
附图简要说明：
图1示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的磷酸盐的晶型I的X-射线粉末衍射图谱(XRD)。
图2示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的磷酸盐的晶型I的红外(IR)吸收光谱。
图3示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的磷酸盐的晶型I的差示扫描量热法(DSC)图。
图4示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的草酸盐的晶型II的X-射线粉末衍射图谱(XRD)。
图5示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的草酸盐的晶型II的红外(IR)吸收光谱。
图6示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的草酸盐的晶型II的差示扫描量热法(DSC)图。
图7示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的琥珀酸盐的晶型III的X-射线粉末衍射图谱(XRD)。
图8示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的琥珀酸盐的晶型III的红外(IR)吸收光谱。
图9示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的琥珀酸盐的晶型III的差示扫描量热法(DSC)图。
图10示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的柠檬酸盐的晶型IV的X-射线粉末衍射图谱(XRD)。
图11示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的柠檬酸盐的晶型IV的红外(IR)吸收光谱。
图12示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的柠檬酸盐的晶型IV的差示扫描量热法(DSC)图。
图13示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酒石酸盐的晶型V的X-射线粉末衍射图谱(XRD)。
图14示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酒石酸盐的晶型V的红外(IR)吸收光谱。
图15示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酒石酸盐的晶型V的差示扫描量热法(DSC)图。
图16示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的富马酸盐的晶型VI的X-射线粉末衍射图谱(XRD)。
图17示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的富马酸盐的晶型VI的红外(IR)吸收光谱。
图18示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的富马酸盐的晶型VI的差示扫描量热法(DSC)图。
图19示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的富马酸盐与替诺福韦地索普西富马酸盐(Tenofovir DisoproxilFumarate)(TDF)和替诺福韦阿芬那酰胺富马酸盐(Tenofovir Alafenamide Fumarate)(TAF)的固有溶出数据比较。
图20示出了(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的各种酸式盐的固有溶出数据。
发明详述
本发明尤其提供核苷酸逆转录酶抑制剂(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐，或其溶剂化物或水合物，该酸式盐选自磷酸盐、草酸盐、琥珀酸盐和柠檬酸盐。
这些盐调节一种或多种核苷酸逆转录酶的活性，并且可用于例如治疗与核苷酸逆转录酶表达或活性相关的疾病，例如获得性免疫缺陷综合征(AIDS)和/或HIV感染。
本发明的盐相对于游离碱形式具有多种有利的性质。特别地，这些盐是高度结晶的，这将有助于制备药物制剂并改善活性成分的一般处理、操作和储存。与游离碱形式相比，本发明的盐还具有优异的水溶性、溶解速率、化学稳定性(具有更长的保存期限)、与赋形剂的相容性以及再现性。
式(I)的化合物(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯可以作为具有(R,R)、(S,S)、(R,S)或(S,R)构型的非对映异构体存在。优选地，式(I)的化合物或其酸式盐是(R,R)非对映异构体的形式。因此，本发明的盐还包括盐中存在的所有非对映异构体。
本发明的盐还包括盐中存在的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序数但不同质量数的原子。例如，氢的同位素包括氚和氘。
本发明的酸式盐可以通过以下制备：在溶液中混合式(I)的游离碱化合物和含有所需盐形式的阴离子的酸，然后任选地通过已知方法从反应溶液中分离出固体盐产物，该已知方法包括但不限于结晶和/或沉淀和/或蒸发等。其他成盐技术是本领域已知的并且可以用作替代方法。
已经发现，在上述方法中使用某些溶剂产生式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐的不同多晶型形式，其可以表现出如上所述的一种或多种有利特性。下文更详细地描述了制备本文所述的多晶型物的方法，以及这些多晶型物的表征。
由于多晶型形式通过X-射线衍射图中的峰位置可靠地表征，本发明的多晶型物已经通过粉末X-射线衍射光谱法表征，其产生特定结晶形式的指纹。
在一个方面，式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的药学上可接受的酸加成盐是式(Ia)的磷酸盐：
根据本发明的磷酸盐是磷酸与(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的1:1盐。因此，磷酸盐是式(Ia)的单磷酸盐。
另一方面，本发明涉及制备式(Ia)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯磷酸盐的方法，其包括使式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的游离碱与磷酸反应：
根据本发明的磷酸盐的特征在于在研磨和压制期间良好的结晶性和低的非晶化(amorphisation)。此外，它不吸湿，并且易溶于生理学上可接受的溶剂中。
另一方面，本发明提供式(Ia)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯磷酸盐的结晶多晶型形式，以下称为晶型I。
在一个方面，晶型I的特征在于X-射线粉末衍射图谱包括以下2θ值，所述2θ值是在使用CuKα辐射的Rigaku，MiniFlex 2台式X-射线粉末衍射仪上测量的。
在一个方面，晶型I的特征在于XRD图谱包括在3.25和16.58°2θ±0.2°2θ处的峰。XRD图谱可包括在9.80和23.34°2θ±0.2°2θ处的其他峰。XRD图谱可还包括在9.5、13.2、17.26、19.09、24.84和29.16°2θ±0.2°2θ处的其他峰。
在一个方面，晶型I具有基本上如图1所示的XRD图谱。
在一个方面，晶型I的XRD图谱具有在如表1所示的2θ值处的峰。
表1
衍射角(2θ值)
强度(％)
3.25
100.0
9.50
14.79
9.80
20.23
13.2
13.03
16.58
57.63
17.26
11.94
19.09
10.19
23.34
22.63
24.84
19.12
29.16
11.66
晶形I还可以通过IR光谱进行表征，其IR光谱包括在约2974cm-1、1750cm-1、1703cm-1、1612cm-1、1591cm-1、1518cm-1、1489cm-1、1414cm-1、1266cm-1、1236cm-1、1199cm-1、1130cm-1、1079cm-1、1049cm-1、1018cm-1、986cm-1、928cm-1、885cm-1、760cm-1、717cm-1和687cm-1±2cm-1处的特征峰。
在一个方面，晶型I具有基本上如图2所示的IR光谱。
晶型I还可以通过DSC图谱进行表征，其DSC图谱表现出在约133℃至约136℃之间的(放热)显著峰，优选表现出在约133℃处的峰。
在另一方面，晶型I具有基本上如图3所示的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
本领域技术人员将认识到，晶型I可以通过其他已知的分析和/或光谱方法进一步表征，其包括但不限于热重分析(TGA)、动态蒸汽吸附(DVS)、固态NMR和拉曼光谱。
另一方面，式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的药学上可接受的酸加成盐是式(Ib)的草酸盐：
根据本发明的草酸盐是草酸与(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的1:1盐。因此，草酸盐是式(Ib)的单草酸盐。
另一方面，本发明涉及用于制备式(Ib)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯草酸盐的方法，该方法包括使式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的游离碱与草酸反应。
根据本发明的草酸盐的特征在于在研磨和压制期间良好的结晶性和低的非晶化。此外，它不吸湿，并且易溶于生理学上可接受的溶剂中。
另一方面，本发明提供式(Ib)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯草酸盐的结晶多晶型形式，以下称为晶型II。
在一个方面，晶型II的特征在于X-射线粉末衍射图谱包括以下2θ值，所述2θ值是在使用CuKα辐射的Rigaku，MiniFlex 2台式X-射线粉末衍射仪上测量的。
在一个方面，晶型II的特征在于XRD图谱包括在4.16、21.30和25.7°2θ±0.2°2θ处的峰。XRD图谱可包括在15.65、17.00、17.70、19.35、23.15和30.12°2θ±0.2°2θ处的其他峰。
在一个方面，晶型II具有基本上如图4所示的XRD图谱。
在一个方面，晶型II的XRD图谱具有在如表2所示的2θ值处的峰。
表2
衍射角(2θ值)
强度(％)
4.16
100.0
15.65
12.43
17.00
18.10
17.70
14.63
19.35
12.76
23.15
11.04
25.7
32.84
30.12
17.37
晶形II还可以通过IR光谱进行表征，其IR光谱包括在约3088cm-1、3185cm-1、2979cm-1、1735cm-1、1693cm-1，1596cm-1、1512cm-1、1491cm-1、1455cm-1、1411cm-1、1368cm-1、1350cm-1、1264cm-1、1229cm-1、1202cm-1、1137cm-1、1071cm-1、1024cm-1、994cm-1、908cm-1、885cm-1、820cm-1、765cm-1、748cm-1、716cm-1、704cm-1和689cm-1±2cm-1处的特征IR光谱峰。
在一个方面，晶型II具有基本上如图5所示的IR光谱图案。
晶型II还可以通过DSC图谱进行表征，其DSC图谱表现出在约164℃至约168℃之间的(放热)显著峰，优选表现出在约164.9℃处的峰。
在另一方面，晶型II具有基本上如图6所示的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
本领域技术人员将认识到，晶型II可以通过其他已知的分析和/或光谱方法进一步表征，其包括但不限于热重分析(TGA)、动态蒸汽吸附(DVS)、固态NMR和拉曼光谱。
另一方面，式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的药学上可接受的酸加成盐是式(Ic)的琥珀酸盐：
根据本发明的琥珀酸盐是琥珀酸与(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的1:1盐。因此，琥珀酸盐是式(Ic)的单琥珀酸盐。
另一方面，本发明涉及用于制备式(Ic)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯琥珀酸盐的方法，该方法包括使式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的游离碱与琥珀酸反应。
根据本发明的琥珀酸盐的特征在于在研磨和压制期间良好的结晶性和低的非晶化。此外，它不吸湿，并且易溶于生理学上可接受的溶剂中。
另一方面，本发明提供式(Ic)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯琥珀酸盐的结晶多晶型形式，以下称为晶型III。
晶型III的特征可以在于X-射线粉末衍射图谱包括以下2θ值，所述2θ值是在使用CuKα辐射的Rigaku，MiniFlex 2台式X-射线粉末衍射仪上测量的。
晶型III的特征在于XRD图谱包括在5.07、19.2、20.2、22.40和24.8°2θ±0.2°2θ处的峰。XRD图谱可包括在15.83、26.20、27.87和30.12°2θ±0.2°2θ处的其他峰。XRD图谱可还包括在10.10、11.67、15.07、17.90、18.31、21.55和23.22°2θ±0.2°2θ处的其他峰。
在一个方面，晶型III具有基本上如图7所示的XRD图谱。
在一个方面，晶型III的XRD图谱具有在如表3所示的2θ值处的峰。
表3
晶形III还可以通过IR光谱进行表征，其IR光谱包括在约3331cm-1、3165cm-1、2976cm-1、1751cm-1、1664cm-1、1618cm-1、1488cm-1、1418cm-1、1397cm-1、1316cm-1、1273cm-1、1194cm-1、1134cm-1、1097cm-1、1067cm-1，1019cm-1、986cm-1、931cm-1、892cm-1、827cm-1、796cm-1、719cm-1和688cm-1±2cm-1处的特征IR光谱峰。
在一个方面，晶型III可具有基本上如图8所示的IR光谱图案。
晶型III还可以通过DSC图谱进行表征，其DSC图谱表现出在约137℃至约143℃之间的(放热)显著峰，优选表现出在约137.2℃处的峰。
在另一方面，晶型III可具有基本上如图9所示的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
本领域技术人员将认识到，晶型III可以通过其他已知的分析和/或光谱方法进一步表征，其包括但不限于热重分析(TGA)、动态蒸汽吸附(DVS)、固态NMR和拉曼光谱。
另一方面，式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的药学上可接受的酸加成盐是式(Id)的柠檬酸盐：
根据本发明的柠檬酸盐是柠檬酸与(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的1:1盐。因此，柠檬酸盐是式(Id)的单柠檬酸盐。
另一方面，本发明涉及用于制备式(Id)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯柠檬酸盐的方法，该方法包括使式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的游离碱与柠檬酸反应。
根据本发明的柠檬酸盐的特征在于在研磨和压制期间良好的结晶性和低的非晶化。此外，它不吸湿，并且易溶于生理学上可接受的溶剂中。
另一方面，本发明提供式(Id)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯柠檬酸盐的结晶多晶型形式，以下称为晶型IV。
在一个方面，晶型IV的特征在于X-射线粉末衍射图谱包括以下2θ值，所述2θ值是在使用CuKα辐射的Rigaku，MiniFlex 2台式X-射线粉末衍射仪上测量的。
晶型IV的特征可在于XRD图谱包括在5.48、11.15、15.4、16.22、22.57和25.68°2θ±0.2°2θ处的峰。XRD图谱可包括在7.63、14.45、20.10、20.55和21.01°2θ±0.2°2θ处的其他峰。XRD图谱还包括在12.01、16.77、17.50、18.67、21.62、25.21和28.52°2θ±0.2°2θ处的其他峰。
在一个方面，晶型IV具有基本上如图10所示的XRD图谱。
在一个方面，晶型IV的XRD图谱具有在如表4所示的2θ值处的峰。
表4
衍射角(2θ值)
强度(％)
5.48
70.22
7.63
23.87
11.15
70.20
12.01
132.43
14.45
24.28
15.4
59.63
16.22
52.79
16.77
11.88
17.50
19.20
18.67
15.37
20.10
43.86
20.55
23.07
21.01
26.68
21.62
16.67
22.57
100.0
25.21
19.41
25.68
61.92
28.52
16.48
晶形IV还可以通过IR光谱进行表征，其IR光谱包括在约2977cm-1、1741cm-1、1679cm-1、1663cm-1、1622cm-1、1590cm-1、1488cm-1、1458cm-1、1421cm-1、1396cm-1、1252cm-1、1197cm-1、1127cm-1、1023cm-1、985cm-1、823cm-1、793cm-1、720cm-1和688cm-1±2cm-1处的特征IR光谱峰。
在一个方面，晶型IV可具有基本上如图11所示的IR光谱图案。
晶型IV还可以通过DSC图谱进行表征，其DSC图谱表现出在约102℃至108℃之间的(放热)显著峰，优选表现出在约102.9℃处的峰。
在另一方面，晶型IV可具有基本上如图12所示的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
本领域技术人员将认识到，晶型IV可以通过其他已知的分析和/或光谱方法进一步表征，其包括但不限于热重分析(TGA)、动态蒸汽吸附(DVS)、固态NMR和拉曼光谱。
另一方面，本发明提供式(Id)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酒石酸盐的结晶多晶型，以下称为晶型V。
在一个方面，晶型V的特征在于X-射线粉末衍射图谱包括以下2θ值，所述2θ值是在使用CuKα辐射的Rigaku，MiniFlex 2台式X-射线粉末衍射仪上测量的。
在一个方面，晶型V的特征在于XRD图谱包括在4.73和20.65°2θ±0.2°2θ处的峰。XRD图谱可包括在16.47、24.33、25.07和29.26°2θ±0.2°2θ处的其他峰。
晶型V具有基本上如图13所示的X-射线粉末衍射(XRD)图谱。
结晶多晶型形式V的XRD图谱可具有在如表5所示的2θ值处的峰。
表5
衍射角(2θ值)
强度(％)
4.73
100.0
16.47
20.39
20.65
55.90
24.33
20.10
25.07
22.85
29.26
28.48
晶形V还可以通过IR光谱进行表征，其IR光谱包括在约3315cm-1、2975cm-1、1745cm-1、1726cm-1、1679cm-1、1624cm-1、1591cm-1、1489cm-1、1420cm-1、1389cm-1、1324cm-1、1273cm-1、1199cm-1、1141cm-1、1104cm-1、1068cm-1、1025cm-1、984cm-1、831cm-1、806cm-1、764cm-1、715cm-1和681cm-1±2cm-1处的特征IR光谱峰。
在一个方面，晶型V可具有基本上如图14所示的IR光谱图案。
晶型V还可以通过DSC图谱进行表征，其DSC图谱表现出在约137℃至约143℃之间的(放热)显著峰，优选表现出在约137.2℃处的峰。
在另一方面，晶型V可具有基本上如图15所示的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
本领域技术人员将认识到，晶型V可以通过其他已知的分析和/或光谱方法进一步表征，其包括但不限于热重分析(TGA)、动态蒸汽吸附(DVS)、固态NMR和拉曼光谱。
另一方面，本发明涉及用于制备式(Ie)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酒石酸盐的晶型V的方法，该方法包括使式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的游离碱与酒石酸反应。
另一方面，本发明提供式(If)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯富马酸盐的结晶多晶型形式，以下称为晶型VI。
在一个方面，晶型VI的特征在于X-射线粉末衍射图谱包括以下2θ值，所述2θ值是在使用CuKα辐射的Rigaku，MiniFlex 2台式X-射线粉末衍射仪上测量的。
另一方面，晶型VI的特征在于XRD图谱包括在5.03、23.59和29.02°2θ±0.2°2θ处的峰。XRD图谱可包括在20.80、21.2和26.04°2θ±0.2°2θ处的其他峰。XRD图谱还包括在11.26、12.89、17.42和20.02°2θ±0.2°2θ处的其他峰。
在一个方面，晶型VI具有基本上如图16所示的XRD图谱。
在一个方面，晶型VI的XRD图谱具有在如表6所示的2θ值处的峰。
表6
衍射角(2θ值)
强度(％)
5.03
72.78
11.26
18.00
12.89
10.52
17.42
12.14
20.02
13.44
20.80
21.50
21.20
28.14
23.59
100.0
26.04
34.30
29.02
31.13
晶形VI还可以通过IR光谱进行表征，其IR光谱包括在约3182cm-1、3049cm-1、2976cm-1、1751cm-1、1618cm-1、1489cm-1、1458cm-1、1419cm-1、1395cm-1、1277cm-1、1184cm-1、1098cm-1、1068cm-1，980cm-1、931cm-1、830cm-1、787cm-1、762cm-1、723cm-1和687cm-1±2cm-1处的特征IR光谱峰。
在一个方面，晶型VI可具有基本上如图17所示的IR光谱图案。
晶型VI还可以通过DSC图谱进行表征，其DSC图谱表现出在约119.8℃至约123℃之间的(放热)显著峰，优选表现出在约119.8℃处的峰。
在另一方面，晶型VI可具有基本上如图18所示的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
本领域技术人员将认识到，晶型VI可以通过其他已知的分析和/或光谱方法进一步表征，其包括但不限于热重分析(TGA)、动态蒸汽吸附(DVIS)、固态NMR和拉曼光谱。
另一方面，本发明涉及用于制备式(Ie)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酒石酸盐的晶型VI的方法，该方法包括使式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的游离碱与富马酸反应。
在一个方面，式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯通过使式(II)的化合物9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤与式(III)的氯甲基新戊酸酯在辅助碱存在下进行反应而制备。辅助碱可以是无机或有机碱，并且优选是有机碱。在一个方面，辅助碱优选为叔胺，特别是三烷基胺。该反应适合在选自极性非质子溶剂或其混合物的溶剂存在下进行。
通过首先分离游离碱或不分离游离碱，可将式(I)的化合物(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯转化为酸加成盐。在一个方面，式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯未经分离，即游离碱被原位转化为酸式盐。
在一个方面，将式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯溶解在合适的溶剂中以促进酸式盐的形成。合适的溶剂包括但不限于极性溶剂及其混合物。合适的溶剂的实例包括但不限于醇类，例如甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇、1,2-二甲氧基乙醇、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、乙二醇、其类似物或混合物；醚类，如四氢呋喃、二***、1,4-二烷、DIPE、MTBE及其类似物；酮类，如丙酮、MIBK；非质子极性溶剂如DMF、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜或其混合物；酯类，如乙酸乙酯和乙酸异丙酯；氯化溶剂，如氯仿、二氯甲烷；腈类，如乙腈；烃类，如苯、甲苯、二甲苯或其类似物或混合物。优选地，溶剂是选自非质子溶剂、烃、醚、醇和酮的一种或多种溶剂。更优选地，溶剂选自异丙醇(IPA)、甲醇和丙酮，或其任意组合。
用磷酸、草酸、琥珀酸盐、柠檬酸、富马酸或酒石酸处理含有式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的溶液。酸可以是溶液或固体的形式。所得酸加成盐可通过任何已知技术分离为固体，该技术包括但不限于冷却、骤冷、完全或部分蒸馏溶剂、和/或过滤。
或者，可以通过盐互变方法制备根据本发明的式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸加成盐。该方法包括使(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐与合适的碱反应以形成式(I)的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的游离碱，然后将如此形成的游离碱(通过添加酸)转化为酸式盐形式。
在某些方面，本文所述的酸式盐和多晶型形式可以潜在地表现出改善的性质。例如，在某些方面，本文所述的酸式盐和多晶型形式可以潜在地表现出改善的稳定性。这种改善的稳定性可能对式(I)化合物的制备具有潜在的有益影响，例如提供将工艺中间体储存延长的时间段的能力。改善的稳定性还可能使式(I)化合物的组合物或药物组合物受益。在其他方面，本文所述的盐和多晶型形式还可以潜在地导致式(I)化合物的产率提高，或潜在地导致式(I)化合物的质量改善。在某些方面，本文所述的盐和多晶型物还可以表现出改善的药代动力学性质和/或潜在地改善的生物利用度。
本发明的酸式盐和多晶型形式可以通过适合于待治疗病症的任何途径进行给药。合适的给药途径包括但不限于口服、直肠、鼻、肺、局部、***和肠胃外途径。
本发明的药物组合物包含本文公开类型的式(I)化合物或其药学上可接受的酸加成盐，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂，和任选的一种或多种其他活性药物成分。
在一个方面，配制本发明的药物组合物以使其中存在的活性药物成分立即释放。在另一方面，配制本发明的药物组合物以使其中存在的活性药物成分受控地释放。受控的释放包括活性药物成分的延迟的、持续的和脉冲的释放。
合适的药物赋形剂是本领域已知的，其包括但不限于载体(carrier)、稀释剂和/或运载体(vehicle)。在与药物组合物的其他成分相容并且对患者无害的意义上而言，赋形剂必须是“可接受的”。可以选择赋形剂以提供所存在的活性药物成分的所需释放曲线。
本发明的药物组合物包含治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的酸加成盐。合适的剂量包括但不限于25mg、50mg、100mg、150mg、200mg、250mg和300mg。
在本发明的一个方面，提供了具有如图20所示的固有溶出曲线的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐。
在本发明的一个方面，提供了具有如表8所示的固有溶出曲线的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酸式盐。
在本发明的一个方面，(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯富马酸盐表现出在约30分钟的至少约10％，和/或约60分钟的约20％，和/或约120分钟的约40％，和/或约180分钟的约60％，和/或约240分钟的约80％的溶出。
在本发明的另一方面，(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯草酸盐表现出在约30分钟的至少约5％，和/或约60分钟的约10％，和/或约120分钟的约30％，和/或约180分钟的约40％，和/或约240分钟的约60％的溶出。
在本发明的另一方面，(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯磷酸盐表现出在约30分钟的至少约90％的溶出。
在本发明的另一方面，(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯柠檬酸盐表现出在约30分钟的至少约20％，和/或约60分钟的约40％，和/或约120分钟的约70％的溶出。
在本发明的另一方面，(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯琥珀酸盐表现出在30分钟的至少约10％，和/或约60分钟的约30％，和/或约180分钟的约80％，和/或约240分钟的约90％的溶出。
在本发明的另一方面，(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯酒石酸盐表现出在约30分钟的至少约10％，和/或约60分钟的约20％，和/或约120分钟的约40％，和/或约180分钟的约70％，和/或约240分钟的约80％的溶出。
以下实施例包括优选的方面，用于说明本发明的实践，应理解，所示出的细节是作为实例并且是为了说明性地讨论本发明的优选方面。
实施例
XRD
使用市售的Rigaku，Minflex 2台式衍射仪，使用铜-K-α辐射源测量粉末X-射线衍射图谱。2θ值的测量精确到±0.2度。
DSC
使用以下市售装置和实验条件获得差示扫描量热法(DSC)数据：
仪器制造和型号：TA Waters和Discovery DSC
温度范围：30至200℃
加热速率：每分钟10℃
N2流速：50ml
样品盘类型：Tzero密封盘
IR
在市售的Bruker Alpha IR光谱仪上记录IR光谱。使用KBr分散体(样品浓度1％)通过已知方法制备样品。
实施例-1：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的磷酸盐的制备
在室温下，在碳酸二甲酯(500ml)中搅拌9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤(100gm，0.275mol)。在室温下将四丁基溴化铵(30gm，0.093mol)和N,N-二异丙基乙胺(53.3gm，0.41mol)添加到反应物料中。将反应物料的温度升至60-65℃。将新戊酸氯甲酯(62gm，0.41mol)添加至60-65℃下的反应物料中。将反应物料在60-65℃下进一步搅拌5小时，并在真空下蒸馏出有机溶剂。将残余物溶于二氯甲烷(500ml)中，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在异丙醇(500ml)中搅拌。向反应物料中添加正磷酸(32gm，0.32mol)并将反应物料的温度升至70-75℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的磷酸盐。产量：110gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型I的结晶磷酸盐(图1-3)。
实施例-2：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的草酸盐的制备
在室温下，在碳酸二甲酯(500ml)中搅拌9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤(100gm，0.275mol)。在室温下将四丁基溴化铵(30gm，0.093mol)和N,N-二异丙基乙胺(53.3gm，0.41mol)添加到反应物料中。将反应物料的温度升至60-65℃。将新戊酸氯甲酯(62gm，0.41mol)添加至60-65℃下的反应物料中。将反应物料在60-65℃下进一步搅拌5小时，并在真空下蒸馏出有机溶剂。将残余物溶于二氯甲烷(500ml)中，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在甲醇(500ml)中搅拌。向反应物料中添加草酸(38gm，0.30mol)并将反应物料的温度升至55-60℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的草酸盐。产量：115gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型II的结晶草酸盐(图4-6)。
实施例-3：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的琥珀酸盐的制备
在室温下，在碳酸二甲酯(500ml)中搅拌9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤(100gm，0.275mol)。在室温下将四丁基溴化铵(30gm，0.093mol)和N,N-二异丙基乙胺(53.3gm，0.41mol)添加到反应物料中。将反应物料的温度升至60-65℃。将新戊酸氯甲酯(62gm，0.41mol)添加至60-65℃下的反应物料中。将反应物料在60-65℃下进一步搅拌5小时，并在真空下蒸馏出有机溶剂。将残余物溶于二氯甲烷(500ml)中，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在丙酮(500ml)中搅拌。向反应物料中添加琥珀酸(33gm，0.27mol)并将反应物料的温度升至50-55℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的琥珀酸盐。产量：95gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型III的结晶琥珀酸盐(图7-9)。
实施例-4：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的柠檬酸盐的制备
在室温下，在碳酸二甲酯(500ml)中搅拌9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤(100gm，0.275mol)。在室温下将四丁基溴化铵(30gm，0.093mol)和N,N-二异丙基乙胺(53.3gm，0.41mol)添加到反应物料中。将反应物料的温度升至60-65℃。将新戊酸氯甲酯(62gm，0.41mol)添加至60-65℃下的反应物料中。将反应物料在60-65℃下进一步搅拌5小时，并在真空下蒸馏出有机溶剂。将残余物溶于二氯甲烷(500ml)中，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在丙酮(500ml)中搅拌。向反应物料中添加柠檬酸(52gm，0.27mol)并将反应物料的温度升至50-55℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的草酸盐。产量：115gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型IV的结晶柠檬酸盐(图10-12)。
实施例-5：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酒石酸盐的制备
在室温下，在碳酸二甲酯(500ml)中搅拌9-[2-(膦酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤(100gm，0.275mol)。在室温下将四丁基溴化铵(30gm，0.093mol)和N,N-二异丙基乙胺(53.3gm，0.41mol)添加到反应物料中。将反应物料的温度升至60-65℃。将新戊酸氯甲酯(62gm，0.41mol)添加至60-65℃下的反应物料中。将反应物料在60-65℃下进一步搅拌5小时，并在真空下蒸馏出有机溶剂。将残余物溶于二氯甲烷(500ml)中，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在丙酮(500ml)中搅拌。向反应物料中添加L(+)-酒石酸(41gm，0.27mol)并将反应物料的温度升至50-55℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的草酸盐。产量：80gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型V的结晶酒石酸盐(图13-15)。
实施例-6：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的富马酸盐的制备
在室温下，在二氯甲烷(500ml)和纯水(300ml)的混合物中搅拌(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的磷酸盐(100gm，0.17mol)。将氨水(100ml)添加到反应物料中，并在室温下搅拌15分钟。分离有机层，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在异丙醇(500ml)中搅拌。向反应物料中添加富马酸(20gm，0.17mol)，并将反应物料的温度升至70-75℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的富马酸盐。产量：80gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型VI的结晶富马酸盐(图16-18)。
实施例-7：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的酒石酸盐的制备
在室温下，在二氯甲烷(500ml)和纯水(300ml)的混合物中搅拌(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的磷酸盐(100gm，0.17mol)。将氨水(100ml)添加到反应物料中，并在室温下搅拌15分钟。分离有机层，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在丙酮(500ml)中搅拌。向反应物料中添加酒石酸(26gm，0.17mol)，并将反应物料的温度升至50-55℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的酒石酸盐。产量：70gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型V的结晶酒石酸盐(图13-15)。
实施例-8：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的草酸盐的制备
在室温下，在二氯甲烷(500ml)和纯水(300ml)的混合物中搅拌(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的磷酸盐(100gm，0.17mol)。将氨水(100ml)添加到反应物料中，并在室温下搅拌15分钟。分离有机层，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在甲醇(500ml)中搅拌。向反应物料中添加草酸(22gm，0.17mol)，并将反应物料的温度升至50-55℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的草酸盐。产量：80gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型II的结晶草酸盐(图4-6)。
实施例-9：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的柠檬酸盐的制备
在室温下，在二氯甲烷(500ml)和纯水(300ml)的混合物中搅拌(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的磷酸盐(100gm，0.17mol)。将氨水(100ml)添加到反应物料中，并在室温下搅拌15分钟。分离有机层，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在丙酮(500ml)中搅拌。向反应物料中添加柠檬酸(33gm，0.17mol)，并将反应物料的温度升至50-55℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的柠檬酸盐。产量：80gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型IV的结晶柠檬酸盐(图10-12)。
实施例-10：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的琥珀酸盐的制备
在室温下，在二氯甲烷(500ml)和纯水(300ml)的混合物中搅拌(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的磷酸盐(100gm，0.17mol)。将氨水(100ml)添加到反应物料中，并在室温下搅拌15分钟。分离有机层，并用10％磷酸二氢钠缓冲溶液(200ml)洗涤。完全蒸馏出二氯甲烷，将残余物在丙酮(500ml)中搅拌。向反应物料中添加琥珀酸(22gm，0.17mol)，并将反应物料的温度升至50-55℃。将反应物料冷却至室温，通过过滤分离固体，得到结晶形式的琥珀酸盐。产量：65gm。
通过XRD、IR和DSC表征晶型III的结晶琥珀酸盐(图7-9)。
实施例11：片剂的制备：
制备包含(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的盐的压片混合物的一般方法。
制备仅包含根据实施例1-10中任一个所制备的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的盐(即没有赋形剂)的压片混合物(200mg)，并使用在2吨压制压力下操作的自动KBR压机压制2分钟而制成小球。
制备包含TAF的压片混合物的一般方法：
类似地，制备仅包含TAF(即没有赋形剂)的压片混合物(200mg)，并使用在2吨压制压力下操作的自动KBR压机压制2分钟而制成小球。
制备包含TDF的压片混合物的一般方法：
类似地，制备仅包含TDF(即没有赋形剂)的压片混合物(200mg)，并使用在2吨压制压力下操作的自动KBR压机压制2分钟而制成小球。
在LAB INDIA DISSO 2000中对200mg小球进行体外溶出研究。
将小球固定在PFTE支架中，使得仅小球表面与溶出介质接触。在37±0.5℃下将PFTE装载的支架置于溶出容器中，该容器含有900ml的pH为7.4的0.1M的HCl。对于实验设计的每次运行，测量两个小球。在75rpm的桨叶旋转下进行搅拌。溶出进行120分钟，并通过在指定时间除去10ml样品来测定溶解在测试介质中的活性成分的浓度。
溶出介质：0.01N HCl
RPM：75
碗温：37℃
浴温：37.5℃
样品重量：200mg
样品制备：通过在2吨压力下压制样品2分钟来制备小球。
注意：在HPLC上分析等分试样。
(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的浓度通过HPLC UV方法在300nm的最大波长下在如下所述的条件下定量：
标准品制备：用溶出介质将25mg标准品溶解至25ml。用溶出介质将5ml该溶液稀释至25ml。用稀释剂将另外5ml该溶液稀释至10ml。
样品制备：制备200mg样品小球并使其溶解。以预定的时间间隔从溶出篮中取出10ml等分试样。用稀释剂将5ml这些等分试样稀释至10ml。
实施例12：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的富马酸盐片剂的制备：
将200mg的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的富马酸盐的输入API用于小球制备。
从相应的富马酸盐片剂中释放的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯(TD)、替诺福韦阿芬那酰胺(TAF)和替诺福韦地索普西(TDF)的百分比随时间的变化如图19所示。固有溶出速率来自该曲线的斜率。表7以表格形式示出了结果。观察到化合物(I)的富马酸盐具有比TAF和TDF慢的溶出曲线(如下表所示)，因此可用于缓释或持续释放的制剂。
表7：化合物(I)与TA和TD的％释放的比较
实施例13：(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的盐的片剂的制备：
为了测量(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的盐的固有溶出，测量样品以比较不同参数设置的影响。以适当的时间间隔，自动样品收集器从溶出介质中取出等分试样用于分析。取样的时间间隔可以在例如5分钟至120分钟之间变化，这取决于所用药物和溶出介质的性质。适用于这些操作的溶出设备包括LAB INDIA DISSO2000。浴温为-37.5℃。
将200mg的每种(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的富马酸盐、草酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐和酒石酸盐的输入API用于小球制备。
从相应的盐片剂中释放的(((1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙-2-基氧基)甲基)(苯氧基)磷酰氧基)甲基新戊酸酯的百分比随时间的变化如图20所示。固有溶出速率来自该曲线的斜率。表8以表格形式示出了结果。
表8：化合物(I)从相应盐中的％释放的比较
上述数据表明，与其他盐相比，磷酸盐具有最快的溶出曲线。因此可以用于立即释放的制剂。然而，与其他盐相比，草酸盐具有最慢的溶出曲线，因此可用于持续释放的制剂中。