阅读说明：本技术 一种促进***效果的纳米粒子及其合成方法 (Nano particles for promoting effect of treating tumor and synthesis method thereof ) 是由 易昌凤 张宏量 于 2019-09-25 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种促进治疗肿瘤效果的纳米粒子及其合成方法,其合成方法包括以下步骤：将替拉扎明溶于聚乙烯醇再进行超声处理得溶液A,在冰浴条件下将羰基锰和PLGA溶于二氯甲烷并进行超声处理得溶液B,在冰浴条件下将溶液B滴入溶液A中,超声处理后得到的产物加入至聚乙烯醇溶液中,进行超声、稀释、搅拌即得最终产物。本发明使用一种全新的设计思路,合成过程中使用配合物羰基锰,合成的纳米粒子可以在肿瘤部位释放一氧化碳(CO),CO不仅能达到良好的治疗效果,还能促进肿瘤细胞有氧呼吸,消耗氧气,进而促进替拉扎明的高效使用。(The invention provides a nano particle for promoting the effect of treating tumor and a synthetic method thereof, wherein the synthetic method comprises the following steps: dissolving tirapazamine in polyvinyl alcohol, performing ultrasonic treatment to obtain a solution A, dissolving carbonyl manganese and PLGA in dichloromethane under an ice bath condition, performing ultrasonic treatment to obtain a solution B, dripping the solution B into the solution A under the ice bath condition, adding a product obtained after ultrasonic treatment into the polyvinyl alcohol solution, performing ultrasonic treatment, diluting and stirring to obtain a final product. The invention uses a brand new design idea, the complex manganese carbonyl is used in the synthesis process, the synthesized nano particles can release carbon monoxide (CO) at the tumor part, the CO not only can achieve good treatment effect, but also can promote aerobic respiration of tumor cells and oxygen consumption, and further promote the efficient use of tirapazamine.)

一种促进***效果的纳米粒子及其合成方法

技术领域

本发明涉及生物靶向纳米医药技术领域，尤其涉及一种促进***效果的纳米粒子及其合成方法。

背景技术

肿瘤缺氧是人类和动物实体瘤的共同特征，是一种强有力的阴性临床生物标志物，被认为是癌症治疗中最有效的治疗靶点之一。一方面，肿瘤缺氧是导致许多抗癌疗法失败的主要因素。另一方面，肿瘤缺氧可能是一个有吸引力的治疗靶点，因为它是肿瘤与正常组织之间主要差异的基础。缺氧激活的药物(HAPs)对低氧细胞具有选择性较高的毒性，在较高的氧张力区域如正常组织中具有较低的毒性。因此，HAP具有选择性杀死缺氧细胞的潜力，从而将肿瘤缺氧从问题转化为选择性治疗优势。Tirapazamine(TPZ)即替拉扎明，一种代表性的HAP，在缺氧条件下比在体外有氧条件下对小鼠和人类癌细胞系中表现出高达300倍的毒性。作为前药，TPZ可以在低氧条件下通过单电子还原反应被刺激产生瞬时氧化自由基中间体。

尽管肿瘤区域是一种缺氧的环境，但仍不足以激活TPZ的效果，如何降低肿瘤区域氧气浓度，进而提高TPZ的治疗效果是大家一种研究的问题，如使用PDT联合TPZ的治疗方案，PDT是一种消耗氧气的治疗方案，可以在治疗的同时，消耗部分氧气，进而提高TPZ的治疗效果。而在本实验中，使用一种全新的设计思路，使用配合物羰基锰，在肿瘤部位释放一氧化碳(CO)，CO不仅能达到良好的治疗效果，还能促进肿瘤细胞有氧呼吸，消耗氧气，进而促进TPZ的高效使用。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种促进***效果的纳米粒子及其合成方法，促进肿瘤细胞有氧呼吸，消耗氧气，促进替拉扎明的高效使用，达到更好的治疗效果。

本发明是这样实现的：一种促进***效果的纳米粒子的合成方法，包括以下步骤：

步骤一、称取1mg替拉扎明溶于1mL浓度为20mg/mL的聚乙烯醇中，进行超声处理促进溶解，得备用溶液A；

步骤二、称取20mg羰基锰与50mgPLGA溶于4mL二氯甲烷中，在冰浴条件下，进行超声处理促进溶解，得备用溶液B；

步骤三、将步骤二中制得备用溶液B逐滴加入至步骤一制得备用溶液A中，在冰浴条件下进行超声处理；

步骤四、在步骤三所得产物中加入至12mL浓度为50mg/mL的PVA溶液中，超声处理后，载移至100mL去离子水中，搅拌12小时，得最终产物。

进一步地，所述步骤一至步骤四中的超声处理，超声功率为400W，超声时间为60min。

由以上方法制备得到一种促进***效果的纳米粒子。

本发明具备以下有益效果：

本实验的优点在于提出了一种新的方法，使肿瘤部位加剧缺氧的程度，从而促进TPZ药物的作用。羰基锰的使用，由于肿瘤细胞里较高的双氧水浓度，会促进羰基锰的分解，产生CO，根据相关文献报道，CO具备促进肿瘤细胞有氧呼吸，所以CO不仅能达到杀死肿瘤细胞的目的，同时降低肿瘤区域氧气浓度，进而为TPZ药物的激活提供条件。

附图说明

图1为所制得的纳米粒子的电镜图；

图2为所合成的微球水合粒径；

图3为肿瘤细胞在三种粒子作用下的活性图，x轴表示羰基锰和替拉扎明的浓度，y轴表示肿瘤细胞的存活率；

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

步骤一、称取1mg替拉扎明溶于1mL浓度为20mg/mL的聚乙烯醇中，进行超声处理促进溶解，得备用溶液A；

步骤二、称取20mg羰基锰与50mgPLGA溶于4mL二氯甲烷中，在冰浴条件下，进行超声处理促进溶解，得备用溶液B；

步骤三、将步骤二中制得备用溶液B逐滴加入至步骤一制得备用溶液A中，在冰浴条件下进行超声处理；

步骤四、在步骤三所得产物中加入至12mL浓度为50mg/mL的PVA溶液中，超声处理后，载移至100mL去离子水中，搅拌12小时，得最终产物。

步骤一至步骤四中的超声处理，超声功率为400W，超声时间为60min。

由以上方法制备得到一种促进***效果的纳米粒子TPZ/CO-PLGA。

实施例2

对所制得的纳米粒子的形状结构进行研究：

在透射电子显微镜下可以观察到，该纳米粒子为100nm左右的球形结构，见图1。

实施例3

研究纳米粒子的水合粒径，见图2，得知本发明合成的PLGA微球的水合粒径为110nm左右。

实施例4

研究肿瘤细胞在三种粒子作用下，存活率的变化。从图3中可以得出，当CO与TPZ联合治疗时，可以达到最佳治疗效果。说明CO与TPZ具有相互促进作用。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。