具体实施方式

现在将参考附图描述实施方案，其中在各个附图中相同的参考数字指定对应或等同的元件。

在本说明书中，其为靶疾病的“肺纤维化”的实例是“伴有纤维化的间质性肺病”。进一步地，在本说明书中，活体内生成的所有“纤维”表示为“纤维”。“伴有纤维化的间质性肺病”的实例包括“特发性肺纤维化(IPF)”、“疾病诱发的肺纤维化”和“其它因素诱发的肺纤维化”。此处，术语“特发性肺纤维化”指关于其无法鉴定原因的肺纤维化。术语“疾病诱发的肺纤维化”指与肺纤维化中的疾病结合发生的肺纤维化。例如，“疾病诱发的肺纤维化”是这样的肺纤维化，其中纤维化已由以下发展：过敏性肺炎(HP)、类风湿性关节炎相关的间质性肺病(RA-ILD)、系统性硬皮病相关的间质性肺病(SSc-ILD)、多发性肌炎/皮肌炎相关的间质性肺病(PM/DM-ILD)、干燥综合征相关的间质性肺病(Sjogren's ILD)、系统性红斑狼疮相关的间质性肺病(SLE-ILD)、混合性结缔组织病相关的间质性肺病(MCTD-ILD)、胶原病相关的间质性肺病(CTD-ILD)、肺结节病等等。

“其它因素诱发的肺纤维化”是例如这样的肺纤维化，其是由特发性非特异性间质性肺炎(iNSIP)，暴露于无机物质，暴露于有机物质、药物或吸烟等等引起的肺部疾病，并且在其中已发展纤维化。

在本说明书中，术语“治疗”包括疾病(所有病理状况或者一种或多种病理状况)的治愈、疾病的改善和疾病严重程度的进展的抑制。术语“治疗有效量”指足以实现这种目的的化合物(I)的剂量。

本说明书的治疗药剂也可以用作预防药剂。术语“预防”包括疾病(所有病理状况或者一种或多种病理状况)发展的预防和疾病发展的延迟。术语“预防有效量”指足以实现这种目的的化合物(I)的剂量。

化合物

本发明的化合物(I)是国际公开第2007/089034号(实施例9)中描述的化合物。本领域技术人员可以使用该公开中描述的方法或与其符合的方法来产生化合物(I)。

在实践本实施方案时，化合物(I)可以以游离形式或以其药学上可接受的盐的形式使用。

在本说明书中，化合物(I)的这种药学上可接受的盐的实例包括具有酸的盐，例如具有无机酸的盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐和磷酸盐，以及具有有机酸的盐，例如乙酸盐、富马酸盐、草酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐和马来酸盐；具有碱的盐，例如碱金属盐如钠盐和钾盐、以及碱土金属盐如钙盐；具有氨基酸的盐，例如甘氨酸盐、赖氨酸盐、精氨酸盐、鸟氨酸盐、谷氨酸盐和天冬氨酸盐；等等。

化合物(I)或其药学上可接受的盐包括其分子内盐或加合物，并且还包括其溶剂化物或水合物。

进一步地，已知化合物(I)中存在结晶多晶现象(参见国际公开第2014/024950号)。因此，在本发明中，作为活性成分的化合物(I)可以基于这种结晶多晶现象以任何结晶形式使用。

药物制剂

在实践本发明时，化合物(I)或其药学上可接受的盐(在下文中，这些可以被统称为“本发明的化合物”)可以以独立形式或以药物组合物的形式使用，所述药物组合物含有作为活性成分的本发明的化合物连同药学上可接受的载体。

这种药物组合物的实例包括片剂、丸剂、粉末、颗粒、胶囊和乳状液。

在本说明书中，作为“药学上可接受的载体”，可以使用药物制剂技术领域中常用的各种载体。

作为“药学上可接受的载体”的具体实例，例如，在固体药物制剂中，可以使用赋形剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂。

在液体药物制剂中，可以使用媒介物、溶解助剂、助悬剂、等渗剂和缓冲剂。

必要时，可以共混其它必要的添加剂，例如防腐剂。

本发明的药物组合物根据剂型、施用方法、载体等等而不同，但可以通过添加本发明的化合物来生产，所述本发明的化合物的量通常为关于药物制剂的总量的0.01–99％(w/w)，且优选为0.1–85％(w/w)。根据其形式，可以使用药物制剂技术领域中常用的方法来生产药物组合物。本发明的药物组合物可以模制成含有活性成分的缓释药物制剂。

在上文中，已描述了本发明的化合物和本发明的药物组合物。本发明的化合物和本发明的药物组合物预计具有下述极佳效应。

例如，当使用类固醇类型的MR拮抗剂如螺内酯或依普利酮时，存在关于严重副作用(例如，男性乳房发育症、月经不调、勃起功能障碍等等)的担心。然而，对于本发明的化合物和本发明的药物组合物，存在关于这种严重副作用的很少担心，并且因此，本发明的化合物和本发明的药物组合物可以具有作为药剂的高安全性。

另外，依普利酮主要通过CYP3A4进行代谢，并且因此，禁止与强CYP3A4抑制剂组合使用。然而，在本发明的化合物的情况下，代谢途径是不同的，并且因此，本发明的化合物不受这种限制并且可以与广泛范围的其它药物组合使用。因此，本发明的化合物和本发明的药物组合物在临床实践中是高度有用的。

进一步地，本发明的化合物和本发明的药物组合物在药代动力学方面具有可以长时间段维持血浆中的恒定药物水平的特征，并且因此，即使在低剂量下也可以发挥持续的效应。因此，同样从这个观点来看，本发明的化合物和本发明的药物组合物可以用作具有低毒性和高安全性的药剂。

待施用的对象

如上所述，本发明的化合物具有低毒性且预计具有很少的副作用，并且还具有作为药剂的极佳性质。因此，本发明的化合物可以安全地施用于哺乳动物(特别是人)。

施用途径

在实践本发明时，本发明的化合物可以独立地、或作为药物组合物，经口或肠胃外施用(例如，静脉内、肌内、皮下、器官内、鼻内、皮内、眼内、大脑内、直肠内、阴道内和腹膜内施用，以及对病变的施用)。

剂量

本发明的化合物的剂量根据待施用的对象、施用途径、以及待施用的对象的年龄和症状而变，但并无特别限制。例如，当本发明的化合物经口施用于肺纤维化的成年患者(具有约40–80kg，例如60kg的体重)时，其每天的剂量为例如1-30mg，优选1-25mg，甚至更优选2.5-25mg，且特别优选7.5-25mg。这个量可以按每天1-3次的给药时间表进行施用。

与其它药物组合使用

如上所述，本发明的化合物具有极低的毒性，并且可以与其它药物组合用于肺纤维化的预防或治疗，并且可以预计通过与其它药物组合的极佳预防效应和/或治疗效应。进一步地，可以预计这种组合疗法减少了其它药物的剂量并减少了其它药物的副作用。

可以与本发明的化合物组合使用的此类药物(在下文中，缩写为伴随药物)的实例包括类固醇药物(例如，泼尼松龙、甲泼尼龙等等)、免疫抑制剂(例如，环磷酰胺、环孢菌素等等)、以及抗纤维化剂(例如，尼达尼布、吡非尼酮等等)。

在实际的组合疗法中，鉴于患者的疾病类型、其症状的严重程度等等，可以适当地选择伴随药物。

本发明的伴随药物的剂型并无特别限制，并且本发明的化合物和伴随药物可以在施用时组合。例如，伴随药物可以以如下形式使用：(1)施用含有本发明的化合物和伴随药物的组合的药物制剂；(2)经由同一施用途径，同时或分开施用通过将本发明的化合物和伴随药物分开配制而获得的两种药物制剂；以及(3)经由不同施用途径，同时或分开施用通过将本发明的化合物和伴随药物分开配制而获得的两种药物制剂。可以根据临床实践中的实际情形来适当地选择优选的形式。

根据上述含有本发明的化合物的药物组合物，通过本领域技术人员，可以适当地产生含有本发明的化合物和伴随药物的组合的药物制剂。

可以基于临床使用的剂量适当地选择伴随药物的剂量。进一步地，可以根据待施用的对象的疾病和症状、施用途径、待使用的伴随药物类型等等，来适当地选择本发明的化合物和伴随药物的配合比。通常，基于待使用的伴随药物的一般临床剂量，根据临床实践中的实际情形可以适当地确定配合比。

实施例

在下文中，基于实施例更详细地描述本发明。然而，这些实施例并不限制本发明的范围。进一步地，除非另有说明，否则本发明中使用的试剂、装置和材料是商购可得的，或可以由本领域技术人员适当地制备。

实施例1：博莱霉素气道内施用诱发的小鼠肺纤维化模型中的抗纤维化作用(1)

(1)测试方法

C57/BL6NTAC小鼠(雄性；在测试起始时的体重：25g)(由The Jackson Laboratory制造)分成下述4组(每组12只小鼠)：

第1组：正常组

第2组：无药物施用组(对照组)

第3组：药物(化合物(I))施用组

第4组：药物(依普利酮；阳性对照)施用组

在测试起始当天(第0天)时，通过气道向作为测试组的第2-4组的小鼠逐滴施用博莱霉素(3.25U/kg)。代替博莱霉素，通过气道向作为正常组的第1组的小鼠逐滴施用盐水。在测试起始后的第七天(第7天)时，使用在早上和下午每天两次的给药时间表，对于第1组和第2组的小鼠，起始媒介物(0.1％HCO60+0.5％CMC)的经口管饲施用(上午和下午两次)；对于第3组的小鼠，制备化合物(I)的2mg/ml溶液，并且起始以10mg/kg剂量的其经口管饲施用(上午)和媒介物(0.1％HCO60+0.5％CMC)的经口管饲施用(下午)；并且对于第4组的小鼠，起始以50mg/kg剂量的依普利酮的经口管饲施用(上午和下午两次)。此后，直到测试起始后的第二十一天(第21天)，施用以相同的给药时间表继续。在施用完成后(第21天)，检查下述评估项目。

a)肺功能的评估

下述评估项目使用商购可得的呼吸和肺功能评估系统进行测量(测量部位：气道周围)。4项评估包括：1)深吸气量(mL)；2)顺应性(mL/cmH₂O)；3)弹性(cmH₂O/mL)；和4)阻力(cmH₂O.s/mL)。

“深吸气量”对应于在缓慢呼气到呼吸结束已完成的阶段，从肺中排出的空气量，并且是肺容积的指标。随着肺纤维化进展且肺变硬，肺容积缩小且深吸气量降低。

“顺应性”指示由于压力中的某种变化，在肺容量中的变化。大顺应性意指肺容积中的变化关于单位压力变化很大，并且指示肺易于伸展。随着肺纤维化进展且肺变硬，肺容积缩小且顺应性降低。

“弹性”是由顺应性的倒数表示的值，并且是表示肺伸展困难的指标。随着肺纤维化进展且肺变硬，弹性增加。

“阻力”意指气道阻力。阻力是在呼吸中由气流受到的阻力，并且更大的阻力意指空气更难以通过气道。

b)肺病理组织的评估

(i)通过天狼星红染色的评估(左肺叶)

肺纤维化通过活化的成纤维细胞在纤维化部位累积并产生大量I型胶原而引起。因此，基于肺组织中的胶原累积程度，可以评估肺纤维化的程度。组织中的I型胶原和III型胶原通过天狼星红染色进行染色。因此，可以对胶原累积的情形进行图像诊断，并且还可以通过计算染色阳性率来进行定量评估。

具体而言，对肺的组织切片进行上述染色，并且测量染色部位(纤维化部位)的面积并进行评估。

(ii)羟脯氨酸含量(μg)的评估(下肺叶和中肺叶)

羟脯氨酸是胶原的主要组分并且在其它蛋白质中基本上不存在。因此，通过测量组织中的羟脯氨酸含量，可以评估胶原的量。

(iii)与肺纤维化相关的基因表达波动(mRNA的定量；倍数增加)的评估(上肺叶)

根据常规方法，从匀浆化的上肺叶中提取mRNA，并且使用实时PCR系统对极少量的mRNA进行定量。

c)血液样品的评估

在距离化合物(I)的最后一次施用(第21天)2小时(在上述评估前)和18小时，在麻醉下从尾静脉中收集少量血液，并且用冷冻离心机将血浆分开，并且使用常规方法测量血浆中的化合物(I)浓度(nM)。

(2)测试结果

a)肺功能的评估

测试结果显示于图1和2中。

如图1中所示，博莱霉素减少了深吸气量并增加了弹性(第2组)。依普利酮显著改善了由于博莱霉素在肺功能中的这种降低(第4组)。

相比之下，化合物(I)也显示了显著改善所有肺功能的效应，并且发现特别是深吸气量显著改善至超过依普利酮(第3组)的效应的程度。

如图2中所示，博莱霉素降低了肺顺应性并增加了阻力(第2组)。依普利酮显著改善了由于博莱霉素在肺功能中的这种降低(第4组)。

相比之下，化合物(I)也显示了显著改善所有肺功能的效应，并且发现特别是阻力非常显著地改善至正常组的水平，超过依普利酮(第3组)的效应。

根据上文，在本测试中，从肺功能的观点来看，确认了即使与依普利酮相比，化合物(I)也具有关于肺纤维化的极佳改善效应。

b)肺病理组织的评估

(i)通过天狼星红染色的评估(左肺叶)和(ii)羟脯氨酸含量(μg)的评估(下肺叶和中肺叶)

测试结果显示于图3中。

如通过下肺叶和中肺叶中的羟脯氨酸含量(羟脯氨酸；μg)增加、以及左肺叶中的天狼星红染色中的阳性率(PSR阳性％)增加所显示的，博莱霉素增加了肺中的胶原累积(第2组)。通过博莱霉素的这种纤维化通过依普利酮(第4组)显著改善。

相比之下，化合物(I)在所有评估项目中也显示了显著改善肺纤维化的效应，并且发现特别是肺组织的羟脯氨酸含量显著改善至超过依普利酮(第3组)的效应的程度。

根据上文，在本测试中，即使从组织病理学的观点来看，确认了即使与依普利酮相比，化合物(I)也具有关于肺纤维化的极佳改善效应。

(iii)与肺纤维化有关的基因表达波动的评估

测试结果显示于图4–7中。通过评估与肺纤维化有关的基因表达波动，可以预测化合物(I)的治疗效应和预防效应。

博莱霉素增加了I型胶原、III型胶原和IV型胶原的基因表达。依普利酮不能减少这些基因表达。

相比之下，化合物(I)显著减少了这些基因表达(图4)。

根据上文，在本测试中，即使从控制直接涉及肺纤维化的胶原产生的观点来看，确认了即使与依普利酮相比，化合物(I)也具有关于肺纤维化的极佳改善效应。

博莱霉素略微增加了αSMA基因表达。依普利酮不能减少这种基因表达。相比之下，化合物(I)显著减少了这种基因表达(图5-1)。

博莱霉素显著增加了纤连蛋白基因和波形蛋白基因表达。与博莱霉素相比，依普利酮显著减少了这些基因表达。

相比之下，化合物(I)显著减少了这些基因表达(图5-2和5-3)。

根据上文，在本测试中，确认了化合物(I)具有关于涉及肺纤维化的αSMA、纤连蛋白和波形蛋白的基因表达的极佳控制能力。

博莱霉素显著增加了CTGF、PAI-1和Ccl2的基因表达。与博莱霉素相比，依普利酮显著减少了这些基因表达。

相比之下，化合物(I)显著减少了这些基因表达(图6-1–6-3)。

根据上文，在本测试中，确认了化合物(I)具有关于涉及肺纤维化的CTGF、PAI-1和Ccl2的基因表达的极佳控制能力。

博莱霉素对TGFβ的基因表达没有作用。依普利酮显示了增加基因表达的趋势，而化合物(I)显示了降低基因表达的趋势(图7)。

c)血液样品的评估

测试结果显示于图8中。

在最后一次施用后2小时和18小时，检测到血浆中足够浓度的化合物(I)。

血液动力学的这种发现指示了在化合物(I)的施用后获得了血液中的充分暴露，并且指示了化合物(I)作为肺纤维化药物的有用性。

这些结果指示了，化合物(I)对于肺纤维化具有等于或高于依普利酮的预防效应或治疗效应。

实施例2：博莱霉素皮下连续输注诱发的小鼠肺纤维化模型中的抗纤维化作用(2)

(1)测试方法

在测试起始当天(第0天)时，在麻醉下，将ALZET 1007D泵(其中贮存了博莱霉素：100U/kg，或盐水：100μl)(由ALZET制造)嵌入每只C57/BL6NTAC小鼠(雄性，在测试起始时的体重25–30g)(由Taconic Biosciences Ltd.制造)的腹腔中，并且起始对测试组(48只小鼠)的博莱霉素施用，并且另一方面，起始对正常组(24只小鼠)(第1组)的盐水施用，并且此后，施用继续7天(流速：0.5μl/小时)(在测试起始后的第十天(第10天)时去除泵)。每天测量测试组的小鼠的体重，并且在测试起始后的第七天(第7天)时，使用体重中的降低量作为指标，如下将测试组的小鼠随机分组。

第2组：无药物施用组(对照组)(12只小鼠)

第3组：药物(化合物(I)，3mg/kg)施用组(12只小鼠)

第4组：药物(化合物(I)，10mg/kg)施用组(12只小鼠)

第5组：药物(化合物(I)，30mg/kg)施用组(12只小鼠)

从测试起始后的第八天(第8天)开始，起始媒介物(0.1ml/10g体重)对于作为正常组的第1组小鼠、以及作为无药物施用组的第2组小鼠的经口管饲施用，并且另一方面，起始预定剂量的化合物(I)对于第3-5组的药物施用组小鼠的经口管饲施用(对于所有组，在早上每天一次)。此后，施用继续直到测试起始后的第二十一天(第21天)。在施用完成后，评估下述项目。

a)肺功能的评估

4项评估包括：1)深吸气量(mL)；2)顺应性(mL/cmH₂O)；3)弹性(cmH₂O/mL)；和4)阻力(cmH₂O.s/mL)。

b)肺病理组织的评估

i)通过天狼星红染色的评估(左肺叶)

ii)羟脯氨酸含量(μg)的评估(右肺叶)

c)血液样品的评估

在最后一次施用(第21天)后2小时(在上述评估前)和24小时，血浆中的化合物(I)浓度(nM)的评估(与实施例1类似，评估了通过尾静脉血液取样所获得的血液样品。)

(2)测试结果

a)肺功能的评估

测试结果显示于图9和10中。

如图9中所示，博莱霉素减少了深吸气量并增加了阻力(第2组)。相比之下，以10mg/kg和30mg/kg剂量的化合物(I)显著改善了深吸气量(第4组和第5组)，并且以30mg/kg剂量的化合物(I)显著改善了阻力(第5组)。

如图10中所示，博莱霉素增加了弹性并降低了顺应性(第2组)。化合物(I)以剂量依赖性方式显著改善了博莱霉素在这两项肺功能中的这种降低(第3-5组)。

根据上文，在本测试中，从肺功能的观点来看，确认了化合物(I)具有以剂量依赖性方式的关于肺纤维化的极佳改善效应。

b)肺病理组织的评估

测试结果显示于图11中。

如通过右肺叶中的羟脯氨酸含量增加、以及左肺叶中的天狼星红染色中的阳性率增加所显示的，博莱霉素增加了肺中的胶原累积(第2组)。相比之下，以3mg/kg和30mg/kg剂量的化合物(I)显著降低了羟脯氨酸含量(第3组和第5组)，并且以所有剂量的化合物(I)都显著降低了天狼星红染色中的阳性率(第3-5组)。

根据上文，在本测试中，即使从组织病理学的观点来看，确认了化合物(I)也具有以剂量依赖性方式的关于肺纤维化的极佳改善效应。

c)血液样品的评估

测试结果显示于图12中。

在最后一次施用后2小时，化合物(I)显示了在血浆中的剂量依赖性浓度。在最后一次施用后24小时，对于以30mg/kg剂量的化合物(I)，检测到血浆中的足够浓度。

血液动力学的这种发现指示了获得取决于剂量在血液中的化合物(I)暴露，并且指示了化合物(I)作为肺纤维化药物的有用性。

这些结果指示了化合物(I)具有剂量依赖性效应，并且指示了化合物(I)作为肺纤维化药物的有用性。

肺纤维化主要是肺的晚期纤维化，并且是引起限制性通气障碍的肺部疾病。肺纤维化被认为通过以下引起：由于肺间质中的炎症反复，关于持续肺泡上皮细胞损伤的异常损伤修复反应反复。

可以存在其中可以鉴定关于肺间质中的炎症的原因的情况，所述原因例如感染、胶原病、辐射、药物、灰尘等等，并且可以存在其中无法鉴定原因的情况。然而，当发炎的组织已变得纤维化时，它进展为肺纤维化。此处，关于其无法鉴定原因的肺纤维化被称为特发性肺纤维化。特发性肺纤维化也是频繁的且具有不良预后，并且最经常在50岁或以上的成人中发展，并且引起肺中的不可逆纤维化，并且通过减少呼吸功能而是致命的。

对于肺纤维化的治疗，一般而言，已使用类固醇药物和免疫抑制剂。然而，已累积了以下发现：特别是对于特发性肺纤维化，当类固醇药物或免疫抑制剂经过长时间段使用时，纤维化反而恶化。对于存在各种原因或原因不明的肺纤维化，一般而言，不存在可以广泛推荐用于治疗肺纤维化的药物治疗。

近年来，作为新类型的特发性肺纤维化治疗药剂，抗纤维化试剂(例如吡非尼酮、尼达尼布)上市。然而，存在这两种药物具有强副作用的问题。例如，关于吡非尼酮，使用该药物必须考虑到由于暴露于光的皮肤致癌的可能性，并且对于这种严重疾病，治疗选项实际上仍是有限的。另一方面，已报告了其为类固醇类型的盐皮质激素受体拮抗剂(MR拮抗剂)的螺内酯，改善了其为博莱霉素诱发的肺纤维化小鼠的组织纤维化指标的羟脯氨酸累积(参见European Journal of Pharmacology，718(2013)，290–298；PLOS ONE，8(11)(2013)，e81090；以及Nanomedicine(Lond.)，11(11)(2016)，1393–1406。然而，存在关于由于类固醇药物的副作用如男性乳房发育症的担心，并且对于人中的肺纤维化(特别是特发性肺纤维化)的临床有用性是未知的。

如上所述，用于肺纤维化的有效治疗目前尚未充分确立，并且强烈需要通过开发具有高安全性和高治疗有效性的新药物的早期治疗确立。

在国际公开第2007/089034号中，描述了含有本发明的化合物(I)的1,4-苯并噁嗪化合物，并且描述了化合物(I)用作MR拮抗剂。进一步地，在国际公开第2018/062134号中，描述了化合物(I)用于治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)等等。然而，没有一篇文献已具体地提到本发明的化合物(I)对肺纤维化的应用。

如上所述，用于肺纤维化的药物治疗尚未完全确立，并且开发新型预防或治疗药剂已成为医学技术领域中的紧迫任务。

根据本发明，可以提供含有作为活性成分的化合物(I)，并且可以有效且安全地用于预防或治疗肺纤维化的药剂。

除非另有说明，否则本说明书中使用的技术术语和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常理解相同的含义。

本发明提供了含有作为活性成分的化合物(I)，并且可以有效且安全地用于预防或治疗肺纤维化的新型药剂。

显而易见的是，依据上文教导，本发明的众多修改和变化是可能的。因此应理解，在所附权利要求的范围内，本发明可以以不同于如本文具体描述的方式进行实践。