短效选择性糖皮质激素受体调节剂
阅读说明：本技术 短效选择性糖皮质激素受体调节剂 (Short acting selective glucocorticoid receptor modulators ) 是由 鲁斯·蒂尔洛夫-埃克尔特 于 2019-12-23 设计创作，主要内容包括：本发明提供了用于预防、缓解或治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病的短效选择性糖皮质激素受体调节剂,以及包含所述调节剂的立即释放和多次延迟脉冲释放的组合物。(The present invention provides short acting selective glucocorticoid receptor modulators for use in the prevention, alleviation or treatment of symptoms, disorders and diseases associated with acute stress or transient hypercortisolism, as well as compositions comprising immediate release and multiple delayed pulse release of such modulators.)
与相关申请的交叉引用
本申请要求2018年12月28日提交的美国临时专利申请号62/785,761的利益，所述临时申请整体通过参考并入本文。
技术领域
本发明总的来说涉及预防、缓解和治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病的领域。更具体来说，本发明涉及通过给药包括但不限于羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(例如RU-43044)、21-羟基-6,19-氧化孕酮、16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯(例如ORG 36410)、地塞米松的17-β-甲酰胺和Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇的短效选择性糖皮质激素受体调节剂(“SASGRM”)的立即释放、延迟释放和/或脉冲释放组合物，来预防、缓解和治疗与应激相关的学业和教育问题、适应障碍、失眠障碍和昼夜节律障碍的症状。
背景技术
在整个本说明书中引用了包括专利、出版的申请、技术文章和学术论文在内的各种不同出版物。每个这些引用的出版物为所有目的整体通过参考并入本文。
所有生物体必须维持动态平衡或体内稳态。当体内稳态被扰乱或认为被扰乱时出现应激，从而触发适应性应答以重建体内稳态。1应激系统的主要外周效应物之一是糖皮质激素，在人类中最重要的糖皮质激素是皮质醇。2
皮质醇是一种由肾上腺合成并分泌的多效甾类激素。它是应激反应的主要介导物之一，也是睡眠-觉醒周期的主要介导物，并且作用于包括心血管系统、能量代谢、免疫和大脑在内的许多身体系统和器官，其中皮质醇水平影响认知、记忆、睡眠-觉醒系统和其他大脑功能和神经递质。4
皮质醇通过与核激素超家族的两个成员糖皮质激素受体(“GR”)和盐皮质激素受体(“MR”)结合来发挥其作用。所述GR起到配体激活的转录因子的作用，通过各种不同机制激活或阻遏靶基因转录，包括作为同二聚体或异二聚体与GR响应元件结合，通过与其他转录因子的蛋白质-蛋白质相互作用，或通过螯合其他转录因子以抑制它们与DNA的结合5。
皮质醇水平具有由下丘脑的视交叉上核中的起搏器驱动的昼夜节律，每日峰值出现在清晨睡眠-觉醒转变时附近，而最低水平出现在傍晚和前半夜。此外，皮质醇水平通过下丘脑-垂体-肾上腺(PA)轴受到负反馈调控，其中皮质醇抑制激活其合成和分泌的激素，即下丘脑中的促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和垂体腺中的促肾上腺皮质激素(ACTH)。4除了皮质醇的昼夜节律之外，所述反馈回路还引起皮质醇分泌的亚昼夜节律模式，具有几乎每小时的皮质醇峰值脉冲。6这种脉冲节律对于皮质醇信号传导的生物学结果来说是重要的。最后，酶11-β-羟基甾类脱氢酶(11βHSD)1型和2型调节局部皮质醇浓度，并取决于器官影响MR、GR或两者是否被皮质醇占据。7
因此，皮质醇水平的控制及其作用方式非常复杂，它与GR结合的结果取决于局部皮质醇浓度、其脉动性、GR的表达水平、MR的共表达、以及组织和细胞特异性辅助因子和辅助阻遏物在分子水平上的存在。这种复杂性极大阻碍了在体内有活性并在各种不同器官或生物系统中的所需活性与对HPA轴的代谢和免疫抑制作用之间显示出完全无关联的选择性SASGREM的识别。
与对应激源的预期反应不成比例的痛苦被定义为适应障碍。8症状在临床上是显著的，导致明显的痛苦和功能障碍。这种痛苦和障碍与应激源有关。
在压力下伴有功能障碍的最常见适应障碍之一是学业中断。例如，许多学生无法应对由学习工作量或即将到来的考试而造成的压力。在学业和社会压力的有效实验设置(特里尔社会压力测试(Trier Social Stress Test))中，已显示皮质醇在这种情况下上升。9皮质醇上升的时序可以损害记忆巩固和记忆提取，除了急性焦虑之外，还会导致学业中断。10
由充满压力的一天导致的过度觉醒会严重延迟睡眠开始并扰乱睡眠维持。所述与压力相关的失眠导致表现下降，并将压力和失眠联系在一起，形成恶性循环。睡眠受两个振荡过程、即睡眠稳态和昼夜节律起搏器的相互作用的调节。11昼夜节律睡眠-觉醒周期由位于下丘脑前部视交叉上核中的昼夜节律起搏器调控，其时序与光/暗和社交活动同步(相伴而行)。睡眠阶段与反映下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴活动的日周性变化的皮质醇分泌模式密切相关。皮质醇在觉醒后不久达到峰值(皮质醇觉醒反应)，然后在白天下降，在午夜左右达到最低(最低点)。皮质醇的变化与睡眠周期相吻合，其中在以慢波睡眠(SWS)为主的前半夜中皮质醇水平低，在以快速眼动(REM)睡眠为主的后半夜中皮质醇增加。4
某些睡眠障碍与皮质醇增多、皮质醇分泌的时序和幅度紊乱以及HPA轴的过度活跃相关。已显示，与具有正常客观睡眠持续时间的表型相反，具有主观慢性原发性失眠和客观短睡眠持续时间的失眠表型与皮质醇血浆水平升高相关。12
在健康衰老中睡眠模式的变化包括SWS减少、早醒和觉醒次数增加，并且已与HPA轴过度活跃相关联。还发现在跨时区旅行或实验性突然时移后，皮质醇的血浆水平显著提高，并伴有皮质醇分泌的时间模式的深刻变化。13已发现，昼夜节律的长期破坏与唾液皮质醇升高和颞叶萎缩有关。14
发明内容
本发明描述了缓解、预防和治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病的方法，所述方法包括向需要的对象给药短效选择性糖皮质激素受体调节剂(“SASGRM”)，包括但不限于选自下述的SASGRM化合物：
羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮，例如式I的化合物RU-43044
21-羟基-6,19-氧化孕酮，例如式II的化合物
16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯，例如式III的化合物ORG 36410of
地塞米松的17-β-甲酰胺，例如式IV的化合物
和
Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇，例如式V的化合物
或其组合及其可药用盐和溶剂化物，其量能够有效地预防、缓解或治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病。急性应激或暂时性皮质醇增多症的状态包括与应激相关的学业和教育问题、适应障碍、失眠障碍和昼夜节律障碍。具体来说，与对应激源的预期反应不成比例的痛苦被定义为适应障碍。症状在临床上是显著的，导致明显的痛苦和功能障碍。这种痛苦和障碍与应激源有关。
具体来说，与暂时性皮质醇增多症相关的失眠障碍包括应激相关的急性失眠以及包括具有客观短睡眠持续时间的慢性失眠在内的某些形式的慢性失眠。昼夜节律障碍包括时差型和轮班型昼夜节律障碍。
本发明还描述了包含多个粒子的组合物，所述多个粒子包括立即释放粒子和/或延迟释放粒子，它们包含一定量的SASGRM以及它们的可药用载体和任选的其他治疗剂。所述组合物的SASGRM包括但不限于：羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮，例如式I的化合物；21-羟基-6,19-氧化孕酮，例如式II的化合物；16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯，例如式III的化合物；地塞米松的17-β-甲酰胺，例如式IV的化合物；和Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇，例如式V的化合物；及其可药用盐和溶剂化物及其任何组合。所述组合物可以优选地包含例如立即释放和/或延迟释放粒子或其组合，它们包含式I、式II、式III、式IV或式V的SASGRM及其可药用盐和溶剂化物及其任何组合，以及它们的可药用载体和任选的其他治疗剂。所述延迟释放粒子可以包含脉冲释放粒子。
在某些情况下，所述组合物包含含有立即释放粒子的群体，以及含有脉冲释放粒子的第一和第二群体。所述第一脉冲释放粒子群体在从所述立即释放粒子释放所述SASGRM后的一段滞后期后释放所述SASGRM，并且所述第二脉冲释放粒子群体在从所述第一脉冲释放粒子群体释放所述SASGRM后的一段滞后期后释放所述SASGRM。在某些情况下，所述组合物还包含第三脉冲释放粒子群体，其在从所述第二脉冲释放粒子群体释放所述SASGRM的一段滞后期后释放所述SASGRM。每个滞后期可以在约0.5小时至约3小时、优选地约0.5小时至约2.5小时、更优选地约1小时至约2小时的范围内。
本发明还描述了引起延迟释放或脉冲释放模式的组合物，其包含式I、式II、式III、式IV或式V中的每一种SASGRM及其可药用盐和溶剂化物及其任何组合，以及它们的可药用载体和任选的其他治疗剂。所述组合物包括含SASGRM粒子的立即释放群体和含SASGRM粒子的一个或多个延迟释放或脉冲释放群体，及其可药用盐和溶剂化物及其任何组合，以及它们的可药用载体和任选的其他治疗剂。每个粒子中的SASGRM可以包含式I、式II、式III、式IV或式V及其可药用盐和溶剂化物或其任何组合。所述组合物包括有效预防、缓解或治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病的量的SASGRM。
第一脉冲释放粒子群体在从所述立即释放粒子释放所述SASGRM后的一段滞后期后释放所述SASGRM。在某些情况下，第二脉冲释放粒子群体在从所述第一脉冲释放粒子群体释放所述SASGRM后的一段滞后期后释放所述SASGRM。在某些情况下，第三脉冲释放粒子群体在从所述第二脉冲释放粒子群体释放所述SASGRM的一段滞后期后释放所述SASGRM。每个滞后期可以在约0.5小时至约24小时、优选地1小时至约18小时的范围内。每个滞后期可以在约1小时至约6小时、优选地约1小时至约5小时的范围内。每个滞后期可以在约0.5小时至约3小时的范围内。每个滞后期可以在约0.5小时至约2.5小时的范围内。每个滞后期可以在约1小时至约2小时的范围内。因此，所述组合物可以包含SASGRM脉冲释放粒子的一个、两个、三个或更多个群体。
所述立即释放、延迟释放和/或脉冲释放粒子可以包含包衣。所述包衣可以包含水溶性聚合物。所述水溶性聚合物可以包含甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基丙烯酸共聚物、邻苯二甲酸乙酸纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮/乙酸乙烯酯共聚物、L、S、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚氧化乙烯、透明质酸、藻酸盐、卡拉胶、明胶或其任何组合。所述包衣可以包含水不溶性聚合物。所述水不溶性聚合物可以包含聚乙酸乙烯酯、乙酸纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、乙酸丁酸纤维素、乙酸丙酸纤维素、非结晶纤维素、聚乙烯、壳聚糖、聚乙烯醇、聚丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯、RS、RL、RS30D、RL30D、NE30D、K100M、K15M或其任何组合。
所述包衣可以任选地包括塑化剂。所述塑化剂可以包含柠檬酸三乙酯。所述包衣可以任选地包括助流剂。所述助流剂可以包含滑石。所述包衣可以任选地包括渗透剂。
所述立即释放,延迟释放和/或脉冲释放粒子可以包含密封包衣。
所述立即释放、延迟释放和脉冲释放粒子可以被包含在包含所有粒子类型(包括所有延迟释放和/或所有脉冲释放群体在内)的剂型中。所述立即、延迟释放和脉冲释放粒子可以位于分开的剂型中。每个延迟释放和/或脉冲释放群体可以位于分开的剂型中。所述剂型可以包括片剂、囊片(caplet)或胶囊，例如明胶胶囊。
附图说明
图1是对于小鼠进入次数而言，来自于表2的实施例2实验1的结果的图；
图2是对于在开放区花费的时间而言，来自于表2的实施例2实验1的结果的图；
图3是对于小鼠进入次数而言，来自于表4的实施例2实验2的结果的图；
图4是对于在开放区花费的时间而言，来自于表4的实施例2实验4的结果的图；
图5是对于小鼠进入次数而言，来自于表6的实施例2实验3的结果的图；并且
图6是对于在开放区花费的时间而言，来自于表6的实施例2实验3的结果的图。
发明详述
在整个本说明书和权利要求书中使用了与本发明的各个方面相关的各种不同术语。除非另有指明，否则此类术语将被赋予它们在本领域中的普通含义。其他具体定义的术语应该以与本文中提供的定义相一致的方式解释。
当在本文中使用时，没有具体数目的指称包括复数指称物，除非上下文明确陈述不是如此。
术语“立即释放”在本领域中是已知的，并包括经过配制(优选被配制成口服剂型)的组合物和活性成分，以在给药后立即或尽可能快地释放出所述组合物或活性成分，而不延迟或延长所述组合物或活性成分的溶解或吸收。
术语“延迟释放”在本领域中是已知的，并且包括经过配制(优选被配制成口服剂型)的组合物和活性成分，以仅在所述组合物或活性成分的初始给药后的某个时间点释放出而不是给药后立即释放出所述组合物或活性成分。
术语“延迟释放”是本领域中已知的一种延迟释放的形式，并且包括经过配制(优选被配制成口服剂型)的组合物和活性成分，用于在预定的非释放期、即滞后时间后立即在短时间内快速和瞬时释放出所述组合物或活性成分，或借助在滞后时间、即不释放所述组合物或活性成分的一段时间后迅速且完全地递送所述组合物或活性成分的机制。所述术语还包括具有脉冲组分的受控释放剂型，优选为口服剂型，其在初始的立即释放脉冲后产生至少一个定时脉冲，每个脉冲的特征在于快速且基本上完全地释放出所述活性成分。此类系统在本领域中被称为脉冲式化合物递送系统(PDDS)、时间控制系统或S型释放系统，并包括可商购的系统例如PulsincapTM、 和
羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮包含式I的RU-43044((10R,13S,17S)-17-羟基-13-甲基-10-[(4-甲基苯基)甲基]-17-丙-1-炔基-2,6,7,8,12,14,15,16-八氢-1H-环戊并[a]菲-3-酮，也被称为17-β-羟基-17-α-19-(4-甲基苯基)雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮)：
21-羟基-6,19-氧化孕酮包含式II的化合物：
16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯包含式III的ORG 36410((11-β,16-α,17-β)-11-(4-异丙基苯基)-16,17-二羟基-17-(1-丙炔基)雌甾-4,9-二烯-3-酮)：
地塞米松的17-β-甲酰胺包含式IV的化合物：
并且
Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇包含式V的化合物：
术语对象和患者可互换使用。对象可以是任何生物体，包括哺乳动物例如农场动物(例如马、奶牛、绵羊、猪)、实验室动物(例如小鼠、大鼠、兔)、伴侣动物(例如狗、猫)和非人类灵长动物(例如新世界猴和旧世界猴)。在优选情况下，所述对象是人类。
与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状和疾病包括与应激相关的学业和教育问题、适应障碍、失眠障碍和昼夜节律障碍。学业和教育问题的非限制性实例是学校考试不及格，收到不及格的分数或等级或成绩不佳(低于根据个体的智力能力所预期的)。适应障碍的非限制性实例包括伴有焦虑的适应障碍，其特征是紧张、担心、神经过敏或分离性焦虑。失眠和昼夜节律障碍的非限制性实例包括由时区变化(例如时差)和轮班工作造成的短期睡眠扰乱，以及由压力事件(例如家庭、财务或工作相关的困扰)和正常例行睡眠和/或环境的总体变化引起的睡眠扰乱，以及某些形式的慢性失眠，如伴有客观短睡眠持续时间的与暂时性皮质醇增多症相关的慢性失眠。
本发明的SASGRM，包括羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(例如式I)、21-羟基-6,19-氧化孕酮(例如式II)、16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯(例如式III)、地塞米松的17-β-甲酰胺(例如式IV)和Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式V)，当作为连续、适当定时和定制的药剂给药时，预防、缓解、治疗和/或有益地影响与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病。本发明的SASGRM，包括羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(例如式I)、21-羟基-6,19-氧化孕酮(例如式II)、16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯(例如式III)、Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式IV)和Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式V)，具有有限的代谢稳定性，跨过血脑屏障，在糖皮质激素受体处具有选择性拮抗活性，并且在口服给药后不实质性改变血液中的皮质醇水平(即不破坏HPA轴)，所述性质在有益地影响基于单剂或间歇式多剂的方案的方面可以被有利地利用，对于预防、缓解和治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病来说是理想的。因此，本发明描述了使用本发明的SASGRM，包括羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(例如式I)、21-羟基-6,19-氧化孕酮(例如式II)、16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯(例如式III)、Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式IV)和Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式V)或其任何组合及其可药用盐和溶剂化物以及此类SASGRM包括羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(例如式I)、21-羟基-6,19-氧化孕酮(例如式II)、16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯(例如式III)、Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式IV)和Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式V)或其任何组合及其可药用盐和溶剂化物在内，的组合物缓解、预防和治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病的方法，以及此类组合物用于预防、缓解和治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状和疾病的用途。优选地，所述组合物是包含所述SASGRM的延迟释放粒子和/或脉冲释放粒子的药物组合物。
本发明还提供了本发明的SASGRM，包括羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(例如式I)、21-羟基-6,19-氧化孕酮(例如式II)、16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯(例如式III)、Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式IV)和Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式V)或其任何组合及其可药用盐和溶剂化物在内，用于制造药物的用途，所述药物用于缓解、预防和治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病。优选地，所述药物是包含所述SASGRM的延迟释放粒子和/或脉冲释放粒子的药物。
通常，用于缓解、预防和治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病的方法包括向需要的对象给药有效量的SASGRM，包括羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(例如式I)、21-羟基-6,19-氧化孕酮(例如式II)、16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯(例如式III)、Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式IV)和Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式V)或其任何组合及其可药用盐和溶剂化物在内，作为用于对抗、预防、缓解或治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病的方案的一部分。具有有效的代谢稳定性、跨过血脑屏障、在糖皮质激素受体处具有选择性拮抗活性并且不实质性提高血液中的皮质醇水平的其他SASGRM，也可用作对抗、预防、缓解或治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病的方案的一部分。
对抗、预防、缓解或治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病所需的本发明的SASGRM，包括羟基-雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮(例如式I)、21-羟基-6,19-氧化孕酮(例如式II)、16-羟基-11-(取代的苯基)-雌甾-4,9-二烯(例如式III)、Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式IV)和Δ1-11-氧杂-11-脱氧皮质醇(例如式V)或其任何组合及其可药用盐和溶剂化物在内的量，当然将随着具体化合物、给药途径、接受者的年龄和状况以及所对抗、预防、缓解或治疗的具体症状、障碍或疾病而变。
适合于任何上述症状、障碍或疾病的每日剂量将在0.01至100mg/千克接受者(例如人类)体重/天的范围内，优选地在0.01至30mg/千克体重/天的范围内，最优选地在0.1至30mg/千克、0.1至20mg/千克、1至30mg/千克、1至10mg/千克、1至3mg/千克体重/天的范围内。所述剂量可以是1、3、10、30或100mg/千克体重/天。所述所需剂量可以作为在一整天内以适合的时间间隔给药的1、2、3、4、5个或更多个分药剂提供。最优选地，所述药剂在接受者即将睡觉之前提供。
SASGRM或其组合可以例如配制为组合物、优选配制为药物组合物，位于例如本文中所描述或示例的立即释放、延迟释放和/或脉冲释放粒子中。SASGRM或其组合优选地以一定方式给药，使得它可以跨过所述对象的血脑屏障并拮抗脑细胞中的糖皮质激素受体，以使学业表现和对压力形势的适应提高，和/或可以在急性应激发作或跨时区旅行或轮班工作后诱导和/或维持睡眠。所述对象优选为人类，并优选地需要预防、缓解或治疗在学业或教育环境中因考试情况、公开演讲或需要对压力做出调整的类似社交情况而引起急性应激的症状，以及需要预防、缓解或治疗与暂时性皮质醇增多症相关的失眠和昼夜节律障碍。
由于所述在糖皮质激素受体处具有选择性拮抗活性的SASGRM旨在靶向大脑的细胞，因此所述药剂优选地自由通过血脑屏障。所述SASGRM优选地按照适合于允许所述SASGRM到达它们的靶细胞的任何方法或途径给药。给药可以是被动的或经引导。给药优选为口服。在某些情况下，给药可以是非口服给药，例如所述SASGRM的直肠、阴道、鼻内、局部(包括透皮、颊和舌下)或肠胃外给药。所述组合物可以通过药学领域中公知的任何方法例如在本文实施例中描述的方法，或使用例如在最新版的《Remington制药学》(Remington’sPharmaceutical Sciences)(特别是参见药物制剂及其制备)中描述的方法来制备。
优选地，所述SASGRM单独地或与一种或多种SASGRM的立即递送组合，以适当延迟的释放或定时脉冲的方式递送。当按照定时脉冲方式递送时，所述SASGRM的短半衰期导致药理活性的真正脉冲，而不是例如使用米非司酮时所看到的持续的药理活性。所述SASGRM的药理活性的各独立脉冲可以与健康对象中发现的皮质醇水平的亚昼夜模式同步，从而使下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴被皮质醇的解抑制最小化。此外，皮质醇分泌的昼夜节律、特别是被称为觉醒反应的早晨的皮质醇峰值得以维持，因此保留了对象充分适应正常压力的能力。
优选地，所述用于缓解、预防和治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病的SASGRM的释放模式包含从立即释放组合物的单次释放，其优选地与为期几个小时的一次或多次延迟或脉冲释放组合，所述延迟或脉冲释放始于立即释放，随后是一次或多次延迟或脉冲释放，在每次释放之间存在总时长为0.5-24小时、优选为0.5-18小时、更优选为0.5-5小时、更优选为0.5-3小时的滞后时间。所述延迟或脉冲释放优选地在睡眠开始之后。所述SASGRM脉冲化合物递送系统可以包括任何适合的脉冲数目，包括2、3、4或5次脉冲。包括所述立即释放(第1次脉冲)在内，所述脉冲化合物递送系统还可以包括在所述第一次脉冲后的一段滞后期后的第二次脉冲，和任选的在所述第二次脉冲后的一段滞后期后的第三次脉冲，和任选的在所述第三次脉冲后的一段滞后期后的第四次脉冲。在某些优选情况下，所述脉冲化合物递送系统包括总共两次脉冲。在某些优选情况下，所述脉冲化合物递送系统包括总共三次脉冲。在某些优选情况下，所述脉冲化合物递送系统包括总共四次脉冲。
所述滞后期包括在来自于所述含SASGRM粒子的每个群体的SASGRM的脉冲递送之间的时间。优选地，所述脉冲之间的滞后期为约0.5小时至约24小时，优选为约0.5至约5小时，优选为0.5小时至约3小时，更优选为约0.5-1小时，更优选为至约1-3小时，更优选为约1小时至约2小时。所述脉冲之间的滞后期可以为约0.5小时、1小时、约1.5小时、约1.75小时、约2小时、约2.25小时、约2.5小时、约2.75小时、约3小时、约3.5小时、约4小时、约4.5小时、约5小时、约5.5小时、约6小时或约18小时。
因此，所述SASGRM优选地按照2至4种不同的含化合物级分递送，所述级分包含快速/立即释放级分、在滞后期后释放所述SASGRM的中速释放级分、在第二滞后期后释放所述SASGRM的中速至缓慢释放级分和在第三滞后期后释放所述SASGRM的缓慢释放级分。所述最后的释放优选地发生在所述立即释放之后约5至约9小时，更优选地发生在所述立即释放之后约5小时或约6小时。中间释放和最后释放的剂量可以低于先前释放的剂量。
在总体化合物递送系统的粒子级分的基础上，所述SASGRM优选地按照立即释放系统，更优选地按照任选地与立即释放系统组合的延迟或脉冲释放系统来递送。例如，含有SASGRM的粒子的2至4个群体可以被制备成更大的剂型，其中每个粒子群体被设计成根据所需时间框架释放所述SASGRM。因此，所述含有SASGRM的粒子可以被制备成例如片剂或囊片，或者可以被制备成胶囊。所述延迟或脉冲释放系统也可以包含分开给药的含SASGRM粒子群体例如立即释放片剂、囊片或胶囊，和一个或多个分开的延迟或脉冲释放片剂、囊片或胶囊。
所述含SASGRM粒子可以包含粒子、球粒、微粒、纳米粒子、微型片剂、珠粒、颗粒或其混合物。当配制成片剂或囊片递送形式时，所述粒子可以被压制在一起。当配制成胶囊递送形式时，所述粒子可以被装填在胶囊中。可以使用片剂、囊片或胶囊之外的适合的递送形式。
所述粒子可以包含惰性核心，例如其上包被有SASGRM的糖种。除了SASGRM之外，所述粒子可以包括一种或多种赋形剂和/或一个或多个包衣。常用赋形剂在本领域中是已知的，并且包括但不限于溶解增强剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、助流剂、掩味剂或调味剂、甜味剂、染料和其他已知的赋形剂。所述包衣可以帮助维持粒子形式以及影响释放速率和/或释放位置。所述包衣优选地包含水溶性和/或水不溶性聚合物或共聚物，并且可以是pH依赖性或非pH依赖性的。在某些情况下，所述粒子包含密封层，其可以包住所述含SASGRM核心和/或延迟或脉冲释放包衣粒子。对于粒子的立即释放群体来说，可以使用密封层来代替包衣层。
适合的水溶性聚合物包括但不限于甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸乙酸纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮/乙酸乙烯酯共聚物、甲基丙烯酸共聚物例如L和S、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚氧化乙烯、透明质酸、藻酸盐、卡拉胶、明胶及其任何组合。
适合的水不溶性聚合物包括但不限于聚乙酸乙烯酯、乙酸纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、乙酸丁酸纤维素、乙酸丙酸纤维素、非结晶纤维素、聚乙烯、壳聚糖、聚乙烯醇、聚丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯、RS、RL、RS30D、RL30D和NE30D和其他品牌的聚合物，以及K100M和K15M和其他品牌的聚合物，及其任何组合。
在某些情况下，在所述包衣中可以包括塑化剂。适合的塑化剂包括但不限于甘油、甘油、三醋精、三乙酸甘油酯、甘油山梨糖醇、乙酸酯、聚乙二醇(PEG)、柠檬酸三乙酯、乙酰基柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二己酯、蓖麻油、菜籽油、橄榄油、芝麻油、单乙酰化和双乙酰化甘油酯及其任何组合。
在某些情况下，在所述包衣中可以包括助流剂。适合的助流剂包括但不限于硬脂酸镁、硅酸钙、硅酸镁、滑石、单硬脂酸甘油酯及其任何组合。
在某些情况下，在所述包衣中可以包括渗透剂。适合的渗透剂的类别包括但不限于盐类、糖类和酸类。适合的渗透剂包括但不限于氯化镁、硫酸镁、氯化钾、磷酸钾、氯化钠、磷酸钠、亚硫酸钠、柠檬酸钠、柠檬酸、苹果酸、延胡索酸、酒石酸、甘露糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇、右旋糖、果糖、半乳糖及其任何组合。
可以将所述聚合物包衣添加到所述SASGRM核心，以使每个粒子获得约1％至约40％的重量增加。可以添加所述聚合物包衣，以使每个粒子获得约2％至约20％、约2％至约15％、约2％至约13％、约2％至约12％、约2％至约10％、约2％至约9％、约2％至约8％、约2％至约7％、约2％至约5％、约3％至约30％、约3％至约20％、约3％至约15％、约3％至约13％、约3％至约12％、约3％至约10％、约3％至约9％、约3％至约8％、约3％至约7％、约3％至约6％、约3％至约5％、约5％至约30％、约5％至约25％、约5％至约15％、约5％至约12％、约5％至约10％、约6％至约15％、约6％至约12％、约6％至约10％、约8％至约13％、约8％至约12％、约8％至约10％、约9％至约12％、约9％至约13％、约9％至约11％、约10％至约40％、约10％至约20％、约10％至约15％、约15％至约25％、约15％至约20％、约20％至约30％、约20％至约25％、约25％至约40％、约25％至约30％或约30％至约35％的重量增加。旨在包含所述第二次、第三次或第四次脉冲释放的粒子可以包含越来越多的重量增加，其中越厚的聚合物包衣允许越长的释放延迟。
在某些情况下，所述立即释放粒子包含来自于所述聚合物包衣的约2％、约3％、约4％、约5％或约6％的重量增加。所述第二延迟或脉冲释放粒子包含来自于所述聚合物包衣的约5％、约6％、约7％、约8％或约9％的重量增加。所述第三和随后的延迟或脉冲释放粒子包含来自于所述聚合物包衣的约8％、约9％、约10％、约11％或约12％的重量增加。
提供了下述实施例以更详细地描述本发明。它们旨在说明而不是限制本发明。
具体实施方式
实施例1
式I、式II、式III、式IV和式V的代谢稳定性和血脑屏障通过性
式I-V的每种化合物的代谢稳定性是未知的或已知非常短(例如式I的体外数据，报告的半衰期在大鼠肝脏微粒体中为0.33小时，在大鼠肝细胞中小于0.2小时；式IV据报道在大鼠肝脏微粒体中在30分钟内转变成未被鉴定的代谢物)。这导致以前对此类短效GR配体的开发中止，支持代谢上更加稳定的化合物。
可以调查式I、式II、式III、式IV和式V的每种化合物的代谢稳定性。与米非司酮(RU-486，一种也表现出抗糖皮质激素性质的孕酮受体调节剂)相比，所述化合物在体外和体内应具有有限的代谢稳定性。
为了确定代谢稳定性，将式I、式II、式III、式IV和式V在DMSO中的10-3M储用溶液稀释至10-6M，并分别在pH 7.4的磷酸钾缓冲液中的合并的人类和大鼠肝脏微粒体制备物中，在37℃温育超过45分钟，并在0、5、15、30、45和60分钟取样。使用酮色林或睾酮作为阳性对照。所述反应通过使用有机溶剂脱蛋白来终止，并在混合和离心后，通过液相色谱-质谱术(LC-MS)/MS分析样品。式I、式II、式III、式IV和式V应该分别在合并的人类和大鼠微粒体中显示出5分钟至1小时的半衰期。
然后，可以在小鼠体内调查式I、式II、式III、式IV和式V的代谢稳定性。将式I、式II、式III、式IV和式V悬浮在0.5％(w/v)羧甲基纤维素中，并将30mg/kg和100mg/kg的单次口服剂量通过口饲管给药到雄性CD-1小鼠(28-36g)，每组n＝3。剂量为10mg/kg的米非司酮和媒介物对照被用作参比。在给药后0、5、15、30分钟和1、2、4、8和24小时通过尾部取血获得多个血液样品，并将全血收集在肝素包被的管中。在以2000x g离心10分钟后获得血浆，并对样品进行LC-MS/MS。在口管饲后小鼠中的血浆半衰期在30至90分钟之间。在相同样品的不同等分试样中分析皮质甾酮，并且直至30mg/kg的剂量未发现式I、式II、式III、式IV和式V显著提高。
接下来，评估式I、式II、式III、式IV和式V与血脑屏障(BBB)的相互作用。作为这项研究的一部分，使用在pH 7.4和37℃下针对含有5μM测试化合物和作为参比化合物的华法林(一种抗凝剂)的磷酸盐缓冲盐水的平衡透析，研究了与大鼠和人类血浆蛋白的结合。在达到平衡后从样品(供体)和缓冲液(接受者)小室取出等分试样，并进行LC-MS/MS。式I、式II、式III、式IV和式V在两个物种中显示出低于50％的血浆蛋白结合。相反，对于米非司酮来说，已报道了在大鼠和人类血清中超过95％的血浆蛋白结合。BBB透过在体外使用合生的MDCK细胞单层和在所述单层的顶侧和底侧上剂量为5μM的测试化合物，在pH 7.4下进行90分钟的评估。在对样品进行LC-MS/MS分析后，确定在两个方向上的表观渗透率和外排比。式I、式II、式III、式IV和式V具有中至高的BBB透过潜力。
实施例2
在应激诱导的焦虑的小鼠模型中的短效选择性糖皮质激素受体调节剂
式I、式II、式III、式IV和式V构成了具有相似生物学特性的化学结构多样的SASGRM。它们显示出对糖皮质激素受体(GR)结合的选择性，在体外选择性的GR拮抗作用，在体外和体内有限的代谢稳定性，作为小鼠中HPA轴解抑制的指示物在口服给药后体内皮质甾酮水平不提高，血浆蛋白结合低以及中至高的BBB透过潜力。
在应激诱导的焦虑的小鼠模型中，通过高架十字迷宫试验(EPM)测试了作为SASGRM类别中的代表性化合物的式III(也被称为PND-001)(实验1)。EPM依赖于一方面是啮齿动物探索新环境的倾向性与另一方面是这种探索的压力之间的内在冲突，从而避免了对明亮的开放臂的厌恶特性。具体来说，降低焦虑的化合物提高进入开放臂的频率和在开放臂中花费的时间。
将4至5周龄的雄性CD-1小鼠分组饲养(每笼6或7只小鼠)并维持在具有受控的温度(21-22℃)和反向光暗周期(12h/12h；开灯：17:30–05:30；关灯：05:30–17:30)的房间中，食物和水可随意取用。
在EPM试验之前24小时和6小时，s.c.给药式III和媒介物(5％二甲基亚砜(DMSO)和95％聚乙二醇400(PEG400))。
在EPM试验之前60分钟，p.o.给药作为阳性对照的地西泮。
式III以10、30和100mg/kg的剂量进行测试。地西泮在EPM试验之前60分钟p.o.给药，并以1mg/kg的剂量进行测试。(参见表1)。
表1：治疗计划
实验程序：
将小鼠随机分派到不同实验组之一。每只动物通过其组名、笼子编号、实验系列(天)和用永固油墨书写在尾巴上的数字(从1至12)来识别。
装置是一个用有机玻璃覆盖的PVC迷宫，被分成四个相等的探索臂(21×8cm)，它们都由一个小平台(8×8cm)相互连接。所述装置被放置在地面上方59厘米处。两个臂是开放的，另外两个臂用墙(高：21厘米)封闭。
在化合物给药后，将小鼠放置在与封闭臂相对的平台上。在5分钟时间段内记录进入的次数和在每个臂中花费的时间。当动物将4只爪放置在臂中时，它被认为进入所述臂。
在每只动物之间用酒精(70°)清洁所述装置。将尿液和粪便从迷宫中移除。
在所述试验期间，动物操作和操作人员的可见性被尽可能地最小化。
计算和统计分析
对结果数据进行方差分析(ANOVA)。将Fisher’s PLSD用于成对比较，p值≤0.05被认为是显著的。
结果
式III治疗的小鼠显示出探访次数和在开放臂中花费的时间的显著增加(表2)。
如图1中所示，式III与进入开放臂的次数的显著增加相关。与媒介物处理的小鼠的表现相比，对于10、30和100mg/kg的式III来说，所述增加分别为103％、81％和119％。图1的图表对于所有组来说具有n＝12的平均值+/-均值标准误差。
如图2中所示，式III也引起在开放臂中花费的时间的增加。与媒介物处理的小鼠相比，对于10、30和100mg/kg的式III来说，所述增加分别为224％、154％和219％。图2的图对于所有组来说具有n＝12的平均值+/-均值标准误差。
地西泮治疗与进入次数和在开放臂中花费的时间两者的显著增加相关。与媒介物处理的小鼠的表现相比，所述增加分别为233％和327％。
表2：在EPM试验期间的行为表现
在高架十字迷宫试验中的下一个实验(实验2：如在与实验1所描述的相同的实验程序和分析下所述来进行)中，研究了式III(也被称为PND001)在较低剂量下的效能。此外，在实验1中显示出式III的效能的剂量下研究了式IV(也被称为PND002)的效能。化合物或媒介物(5％二甲基亚砜(DMSO)和95％聚乙二醇400(PEG400))在EPM试验之前24小时和6小时s.c.给药(表3)。
表3：治疗计划
式III(PND 001)以1、3和10mg/kg的剂量进行测试。式IV(PND002)以30mg/kg的剂量进行测试。作为阳性对照的地西泮在EPM试验之前60分钟以1mg/kg的剂量p.o给药并进行测试。
如图3和表4中所示，PND 001与进入开放臂的次数的显著增加相关。图3的图表对于所有组来说具有n＝12的平均值+/-SD。与媒介物处理的小鼠的表现相比，对于1、3和10mg/kg的PND 001来说，所述增加分别为50％、93％和56％，其中两个较高的剂量达到统计显著。如图4和表4中所示，PND 001还引起在开放臂中花费的时间的增加，其在所有剂量下统计学显著不同于媒介物。图4的图表对于所有组来说具有n＝12的平均值+/-SD。与媒介物处理的小鼠相比，对于1、3和10mg/kg的PND 001来说，所述增加分别为60％、112％和70％。PND 002治疗与进入次数和在开放臂中花费的时间两者的显著增加相关。与媒介物处理的小鼠的表现相比，所述增加分别为77％和90％。作为阴性对照的地西泮治疗与进入次数和在开放臂中花费的时间两者的显著增加相关。与媒介物处理的小鼠的表现相比，所述增加分别为146％和151％。
表4：EPM试验期间的行为表现(实验2)
在高架十字迷宫试验中的第三个实验(实验3：如在与实验1所描述的相同的实验程序和分析下所述来进行)中，研究了给药途径和方案的影响。式III(也被称为PND001)或媒介物(5％二甲基亚砜(DMSO)和95％聚乙二醇400(PEG400))通过管饲(p.o.)给药。作为阳性对照的地西泮在EPM试验之前30分钟i.p.给药。
PND 001以在实验2中具有最高效能的3mg/kg的剂量进行测试，并在EPM试验之前6小时和1小时两次给药，或仅在试验之前1小时给药一次。地西泮在EPM试验之前30分钟以1mg/kg的剂量i.p.给药并进行测试(参见表5)。
表5：治疗计划(实验3)
*注：第3组在试验之前6小时接受媒介物给药，以获得与第1和4组一致的给药次数。
如表6和图6中所示，PND 001引起在开放臂中花费的时间的增加。图6的图表对于所有组来说具有n＝8的平均值+/-均值标准误差。与媒介物处理的小鼠相比，对于使用PND001的1小时前治疗和1小时与6小时前治疗来说，所述增加分别为50％和91％。只有在1小时和6小时时前治疗达到统计显著。在1小时和6小时时前治疗而不是仅在1小时时前治疗，显示出进入次数的增加。如表6和图5中所示，与实验2中在相同剂量下使用24小时和6小时s.c.前治疗所看到的相比，进入次数近似加倍，但与这个实验中的媒介物相比没有达到统计显著。图5的图表对于所有组来说具有n＝8的平均值+/-均值标准误差。
作为阳性对照的地西泮治疗与进入次数和在开放臂中花费的时间两者的显著增加相关。与媒介物处理的小鼠的表现相比，所述增加分别为400％和270％。
表6：EPM试验期间的行为表现(实验3)
基于式III和式IV在小鼠焦虑模型中的反映出对应激的适应的结果，被配制成适合的药物剂型的式I、式II和式V的化合物和具有相似生物学特性(对GR的特异性、在CNS中纯粹的GR拮抗活性、短的血浆半衰期和BBB的透过)的SASGREM，可以用作预防、缓解或治疗与急性应激或暂时性皮质醇增多症相关的症状、障碍和疾病，特别是调整(急性)失眠、皮质醇增多症相关性慢性失眠和时差型和轮班型昼夜节律障碍的有益药物。
适合于SASGREM例如式I、式II、式III、式IV和式V在应激障碍、特别是与皮质醇增多症相关的睡眠障碍中的目标用途的药物剂型包括口服给药的受控释放剂型，其具有延迟释放或脉冲释放组分，在初始的立即释放脉冲后产生至少一次定时的脉冲，每次脉冲的特征是快速且基本上完全地释放出所述活性成分。此类系统被称为延迟释放系统、脉冲式化合物递送系统(PDDS)、时间控制系统或S型释放系统。
实施例3
用于(微粉化RU 43044(式I)的)立即释放的包衣球丸的制备
RU 43044(式I)的粒子尺寸，可以例如通过使用特定的研磨技术例如在氮气压力下在钢制室中的喷射流研磨来显著降低。当将RU 43044(式I)粉末以约50m/s的速度进料到研磨室，并使被一系列喷气喷嘴加速到约300m/s的速度的较快粒子与所述输入的较慢粒子碰撞时，微粉化发生。使用激光衍射测量，可以通过上述喷射研磨技术实现的RU 43044的粒径分布(以体积计)为约2-3μm(d50)、10-12μm(d99)和<15μm(d100)。
优选的剂型是由尺寸为1-3mm的多颗粒构成的多颗粒系统，其确保快速胃排空、胃通过时间的低可变性和优化的化合物吸收。
步骤1.含有RU 43044(式I)的未包衣球丸的制备。向60克微晶纤维素(PH-101)和8克羟丙基甲基纤维素(HPMC E6)的混合物添加30克(g)微粉化RU 43044(式I)。在将所述干粉均化后，通过添加适量PVP(25.000MW)水溶液(5％，w/w)将所述混合物成粒。使用CLS挤出机20(2mm孔口直径)在室温下以25rpm将所述得到的湿颗粒挤出，然后使用带有摩擦板的CLS MBS 120滚圆机将所述挤出物滚圆。将所述得到的球形丸粒干燥至湿度为3-5％，其含有约30％(w/w)的微粉化RU 43044(式I)。
步骤2.含有微粉化RU 43044(式I)的用于立即释放的包衣球丸的制备。使用剪切混合器制备100ml喷雾悬液，其含有溶解/悬浮在丙酮/异丙醇1:1中的6.25克氨基甲基丙烯酸酯共聚物–NF(E100)、0.625克聚乙二醇(PEG 6000)和3.1克(g)滑石粉。最后将所述喷雾悬液通过0.5mm筛。
使用Caleva实验室包衣机MCD 2将所述得到的悬液喷洒在50克根据步骤1制备的球丸上。过程条件被设置为：喷涂速率0.2-0.3g/min，入口温度40℃-45℃，流速在2巴下60L/min，空气温度30℃-35℃。维持喷涂直至由于包衣的施加而使重量增加5％。最后将所述球丸在30℃-35℃的空气温度下固化约1小时。
实施例4
用于(微粉化RU 43044(式I)的)延迟或脉冲释放的分层球丸的制备
使用剪切混合器制备喷雾悬液，其含有溶解/悬浮在300克丙酮/异丙醇1:1中的5.25克季胺基甲基丙烯酸酯共聚物(RL PO A型)、17.25克季胺基甲基丙烯酸酯共聚物(RS PO B型)、3.5克柠檬酸三乙酯(TEC)和5.25克滑石粉。最后将所述喷雾悬液通过0.5mm筛。
使用Caleva实验室包衣机MCD 2将所述得到的悬液喷洒在50克(g)根据步骤2(实施例3)制备的球丸上。过程条件被设置为：喷涂速率0.2-0.3g/min，入口温度40℃-45℃，流速在2巴下60L/min，空气温度30℃-35℃。维持喷涂直至由于包衣的施加而使重量增加7％。最后将所述球丸在30℃-35℃的空气温度下固化约1小时。
考虑到了所述包衣膜的调制渗透性和掺入到多颗粒粒子的核心中的渗透剂。为了在包衣的多颗粒内实现适合的渗透压，可以应用具有亲水本性的药用级渗透原。它们优选是低分子量糖类例如果糖、蔗糖、甘露糖醇，无机盐例如磷酸钠，或有机酸例如柠檬酸或酒石酸。在口服给药后胃肠液穿透过包衣剂型的膜时，所述渗透原的溶解产生渗透压，其最终导致聚合物膜破裂并自发且完全地释放出所述化合物。
所述包衣的破坏受到胃肠液透过率的影响，所述透过率可以通过向所述包衣添加亲水性的低或高分子量化合物来调节。此类调节剂可以是生理惰性的水溶性聚合物例如低分子量甲基纤维素或羟丙基甲基纤维素(HPMC)，糖类，如单糖例如果糖和葡萄糖，二糖例如乳糖、蔗糖，或多糖例如纤维素、直链淀粉和葡聚糖。
为了实现释放脉冲的适合定时，所述调节剂可以为所述多颗粒的至少10％，至少约20重量％，并且通常不超过约50重量％，优选地不超过约40重量％。所述聚合物包衣可占所述多颗粒的至少约5重量％且不超过50重量％。
调节剂与活性药剂的准确比例可通过配方设计实验来确定，所述实验产生不同类型、含有不同量的调节剂的多颗粒。USP批准的溶解或释放测试的方法可用于测量释放速率(<711>，USP 32NF 27,2009，Vol.1，具有从1L到4L不等的标称容量的装置1)。为了更好地模拟消化系统中存在的条件，如果需要在无限下沉条件下进行测试，可以替代性使用符合USP的流通池装置(装置4)来确定溶解速率。随时间而变的溶解的化合物的检测可以遵照现有技术的各种不同方法，例如分光光度法、HPLC、质谱法等，直到吸光度变得恒定或直到超过90％的化合物已被释放。
实施例5
用于立即释放RU 43044(式I)的包衣球丸的化合物释放特性的评估
使用根据充分描述的转篮法(Sotax AT)的USP装置来测定根据实施例3步骤2制造的球丸的RU 43044(式I)的体外释放速率。溶解媒介物为900ml去离子水。在试验期间将温度设定并控制在37℃。将篮子的旋转速度设定到50rpm并保持恒定。在测试开始时将单位剂量的球丸置于干燥篮子中。
为了确定RU 43044的浓度，在5、10、20、30、45、60和90分钟时从溶解媒介物获取样品，并通过Distek 10μm PE滤器过滤。将装备有吸收为245nm的UV光谱仪的常规HPLC设备用于测量样品中RU 43044的浓度。存在所述化合物从所述剂型的立即释放。45分钟后，超过80％的剂量被释放，90分钟后，所述化合物几乎被完全释放并溶解在所述溶解媒介物中。释放的化合物的量和释放的时间曲线受到包衣的量、滑石粉的量、固化时间和篮子搅拌速率的影响。
实施例6
用于延迟或脉冲释放RU 43044(式I)的分层球丸的化合物释放特性的评估
在测试开始时，将单位剂量的来自于实施例4的球丸置于干燥篮子中。关于旋转速度、温度和溶解媒介物的测试条件与实施例5中相同。为了确定RU 43044(式I)的浓度，在30、60、90、120、150、180和240分钟时从溶解媒介物获取样品，并通过Distek 10μm PE滤器过滤。将装备有吸收波长为245nm的UV光谱仪的常规HPLC设备用于测量样品中RU 43044(式I)的浓度。存在所述化合物从所述剂型的延迟释放。60(90)分钟后，不超过10％(15％)的剂量被释放，120分钟后，不超过20％的所述化合物被释放，150分钟后，不超过80％的所述化合物被释放，并且180分钟后释放几乎完全。释放的化合物的量和释放的时间曲线受到包衣的量、滑石粉的量、固化时间和篮子搅拌速率的影响。
本发明不限于上文描述和示例的实施方式，而是可以在权利要求书的范围内进行改编和修改。
参考文献
1.de Kloet ER；Joels,M.；Holsboer F，应激与大脑：从适应到疾病(Stress andthe brain:from adaptation to disease)，Nature reviews neuroscience 2005.
2.Sapolsky,R.M.；Romero,M.L.；Munck,A.U.，糖皮质激素如何影响应激反应？整合容许性、抑制性、刺激性和准备性行动(How do glucocorticoids influence stressresponses？Integrating permissive,suppressive,stimulatory,and preparativeactions)，Endocrine reviews 2000,21(1),55-89.
3.Tsigos,C.；Kyrou,I.；Kassi,E.；Chrousos,G.P.，应激、内分泌生理学和病理生理学(Stress,endocrine physiology and pathophysiology)，2016.
4.Thorsley D；Leproult R；Spiegel K；Reifman J.，血浆皮质醇浓度的昼夜节律和睡眠非稳态调节的现象学模型(A phenomenological model for circadian and sleepallostatic modulation of plasma cortisol concentration)，American Journal ofPhysiology-Endocrinology and Metabolism 2012,303(10).
5.Bellavance,M.；Rivest S，HPA-免疫轴和糖皮质激素在大脑中的免疫调节作用(The HPA-Immune Axis and the Immunomodulatory Actions of Glucocorticoids inthe Brain)，Frontiers in Immunology 2014,5.
6.McMaster,A.；Jangani,M.；Sommer,P.；Han,N.；B.，亚昼夜皮质醇脉动编码独特的、生物学上重要的信号(Ultradian cortisol pulsatility encodes adistinct,biologically important signal)，2011.
7.Martocchia,A.；Curto,M.；Toussan,L.；Stefanelli,M.；Falaschi,P.，针对慢性障碍期间糖皮质激素介导的脑损伤的药理学策略(Pharmacological strategiesagainst glucocorticoid-mediated brain damage during chronic disorders)，Recentpatents on CNS drug discovery 2011,6(3),196-204.
8.Strain,J.J.；and anxiety,F.，将适应障碍当作对DSM-5的应激反应综合征(Considering adjustment disorders as stress response syndromes for DSM-5)，Depression and anxiety 2011.
9.Wiemers,U.S.；Schoofs,D.；Stress,W.，友好版的特里尔社会压力测试在健康男性和女性中不激活HPA轴(A friendly version of the Trier Social Stress Testdoes not activate the HPA axis in healthy men and women)，Stress 2013.
10.Vogel,S.；npj of Learning,S.，压力下的学习和记忆：对课堂的启示(Learning and memory under stress:implications for the classroom)，npj Scienceof Learning 2016.
11.Borbely,A.A.；Daan,S.；Wirz-Justice A；Deboer T，睡眠调节的两过程模型：重新评估(The two-process model of sleep regulation:a reappraisal)，Journal ofSleep Res 2016.
12.Alexandros,N.,V；Julio,F.；Duanping,L.；Edward,O.B.，伴有客观短睡眠持续时间的失眠：所述障碍的生物学上最严重的的表型(Insomnia with objective shortsleep duration:The most biologically severe phenotype of the disorder)，SleepMedicine Reviews 2013,17(4),241-254.
13.Caufriez A；Moreno R；Leproult R；Vertongen F；Van Cauter E；CopinschiG，休息-活动周期的8小时前移对皮质醇的24小时分布情况的直接影响(Immediateeffects of an 8-h advance shift of the rest-activity cycle on 24-h profilesof cortisol)，American Journal of Physiology-Endocrinology and Metabolism2002,282(5).
14.Kwangwook,C.，长期“时差”引起颞叶萎缩和空间认知缺陷(Chronic'jet lag'produces temporal lobe atrophy and spatial cognitive deficits)NatureNeuroscience 2001,4(6).
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