阿司匹林在制备治疗子宫内膜增生药物中的应用
阅读说明：本技术 阿司匹林在制备治疗子宫内膜增生药物中的应用 (Application of aspirin in preparation of medicine for treating endometrial hyperplasia ) 是由 孙洋 徐强 瞿娇 丁衍 张涛 于 2021-08-20 设计创作，主要内容包括：本发明公开了阿司匹林的新用途,具体涉及阿司匹林在制备治疗子宫内膜增生药物中的应用。针对雌激素诱导的子宫内膜增生的疾病模型,阿司匹林能有效抑制食蟹猴以及小鼠的子宫内膜厚度。阿司匹林能显著改善小鼠以及食蟹猴子宫内膜增生的症状,故其可应用于治疗子宫内膜增生,临床上增加了阿司匹林的新用途。(The invention discloses a new application of aspirin, and particularly relates to an application of aspirin in preparation of a medicine for treating endometrial hyperplasia. Aiming at disease models of estrogen-induced endometrial hyperplasia, aspirin can effectively inhibit the thickness of the endometrium of cynomolgus monkeys and mice. Aspirin can remarkably improve the endometrial hyperplasia symptoms of mice and cynomolgus monkeys, so that aspirin can be applied to treating endometrial hyperplasia, and the new application of aspirin is increased clinically.)
一、
技术领域
本发明涉及阿司匹林的新用途，具体涉及阿司匹林在制备治疗子宫内膜增生药物中的应用。
二、
背景技术
子宫内膜增生(endometrial hyperplasia)指子宫内膜腺体增生和(或)腺体间质比例增加的子宫内膜增生性病变，是有一定癌变倾向的妇科常见疾病，通常认为致病因素与长期无孕激素拮抗的雌激素刺激有关。临床子宫内膜增生多见于围绝经期女性，近年年轻育龄女性中的发生率也明显上升。子宫内膜增生主要临床表现为异常子宫出血(abnormal uterine bleeding)，如经期延长、月经过多、经间期出血及绝经后出血，出血时间长和量多者可并发贫血及感染，育龄期患者可出现不孕，部分患者还可发生恶变。有2％-10％异常子宫出血和3％-10％绝经后出血均由子宫内膜增生引起。因子宫内膜增生中的不典型增生有癌变的趋势与风险，了解其发病机制，对其进行早期诊断及合理治疗，对防治病变进一步进展至关重要。
阿司匹林又名乙酰水杨酸，作为水杨酸的衍生物于1897年发明，该化合物通常用作止痛剂、解热药和消炎药。关于其治疗子宫内膜增生的独特药理作用方面，迄今未见报道。本发明主要发现了阿司匹林对食蟹猴以及小鼠的子宫内膜增生模型具有显著的改善作用。
阿司匹林结构式如下：
三、
发明内容
为了解决现有的临床治疗子宫内膜增生的激素疗法的弊端，如依从性差、有用药禁忌、易复发和引起乳腺疾病等，本发明案例提出了阿司匹林可用于子宫内膜增生相关疾病的治疗。
对雌激素皮下注射诱导食蟹猴以及小鼠的子宫内膜增生模型，腹腔给药阿司匹林能显著缓解食蟹猴以及小鼠的子宫内膜增生现象，其注射阿司匹林的浓度分别为3.2mg/kg、10mg/kg。该结果提示，阿司匹林能改善食蟹猴以及小鼠的子宫内膜增生现象，故其可在子宫内膜增生的治疗药物中得到应用。
四、有益效果
本发明首次发现阿司匹林可以治疗子宫内膜增生，是阿司匹林的新的适应性症，具体如下：
子宫内膜增生是指子宫内膜腺体增生和(或)腺体间质比例增加的子宫内膜增生性病变，是有一定癌变倾向的妇科常见疾病，通常认为致病因素与长期无孕激素拮抗的雌激素刺激有关。子宫内膜增生主要临床表现为异常子宫出血，如经期延长、月经过多、经间期出血及绝经后出血，出血时间长和量多者可并发贫血及感染，育龄期患者可出现不孕，部分患者还可发生恶变。目前，治疗子宫内膜增生的方法有多种，需要根据子宫内膜增生程度、患者年龄和是否有生育要求制定个性化方案。对于不伴非典型增生者可考虑应用孕激素等药物治疗，但长期用药患者依从性差、有用药禁忌、易复发和引起乳腺疾病等弊端，也不能用于乳腺恶性肿瘤患者，且需反复诊断性刮宫或宫腔镜检查，可损伤子宫内膜以致影响生育功能。对内膜不典型增生患者，则需行子宫内膜去除术，甚至切除子宫，更不易为患者接受。因此，寻找子宫内膜增生新干预靶点和治疗药物是目前妇科常见病亟待解决的难题。
本发明采用阿司匹林治疗雌激素诱导的小鼠以及食蟹猴子宫内膜增生的模型，实验表明腹腔注射阿司匹林能显著降低小鼠以及食蟹猴子宫组织的重量、子宫内膜腺体间质的比例。
以上结果提示，阿司匹林能显著改善小鼠以及食蟹猴子宫内膜增生的症状，故其可应用于治疗子宫内膜增生。
五、
附图说明
图1阿司匹林抑制雌激素诱导的小鼠子宫内膜增生。
C57BL/6j雌性小鼠，8-10周龄，饲养于SPF级动物房，21±2℃，自由饮水取食，12h昼夜交替。将小鼠随机分为4组，正常组，雌二醇(50μg/kg)组，阿司匹林(10mg/kg)组，孕激素组(10mg/kg)。雌二醇组、孕激素组和阿司匹林组，每天皮下注射雌二醇100μl，此外，阿司匹林组需腹腔注射阿司匹林，孕激素组每日腹腔注射孕激素。每天一次，每次100μl，正常组给予等量溶剂。给药治疗21天后，最后实验动物进行安乐死，取其子宫进行拍照
图2阿司匹林抑制雌激素诱导的小鼠子宫重量的增加。
将小鼠随机分为4组，正常组，雌二醇(50μg/kg)组，阿司匹林(10mg/kg)组，孕激素组(10mg/kg)。雌二醇组、孕激素组和阿司匹林组，每天皮下注射雌二醇100μl，此外，阿司匹林组需腹腔注射阿司匹林，孕激素组每日腹腔注射孕激素。每日给药，持续21天后，对实验动物进行安乐死，取其子宫进行称重。结果以平均数±标准差表示。**：P<0.01，***：P<0.001vs Estradiol；(Student’s-ttest)。
图3小鼠子宫内膜组织切片苏木素-伊红染色(HE染色)结果。
将小鼠随机分为4组，正常组，雌二醇(50μg/kg)组，阿司匹林(10mg/kg)组，孕激素组(10mg/kg)。雌二醇组、孕激素组和阿司匹林组，每天皮下注射雌二醇100μl，此外，阿司匹林组需腹腔注射阿司匹林；孕激素组每日腹腔注射孕激素。每日给药，持续21天后，对实验动物进行安乐死，取其子宫固定脱水包埋切片，进行HE染色。
图4阿司匹林抑制雌激素诱导的小鼠子宫内膜腺体间质比例的增加。
将小鼠随机分为4组，正常组，雌二醇(50μg/kg)组，阿司匹林(10mg/kg)组，孕激素组(10mg/kg)。雌二醇组、孕激素组和阿司匹林组，每天皮下注射雌二醇100μl，此外，阿司匹林组需腹腔注射阿司匹林；孕激素组每日腹腔注射孕激素。每日给药，持续21天后，对实验动物进行安乐死，取其子宫固定脱水包埋切片，进行HE染色，观察并统计其子宫内膜组织腺体间质比例。结果以平均数±标准差表示。**：P<0.01，***：P<0.001vs Estradiol；(Student’s-t test)。
图5阿司匹林抑制雌激素诱导的食蟹猴子宫内膜增生。
将食蟹猴随机分为3组，对照组，雌激素组，阿司匹林组。雌激素组和阿司匹林组，每天皮下注射500μL雌激素(64μg/kg)，此外，阿司匹林组腹腔注射4mL阿司匹林(3.2mg/kg)，每天一次，对照组给予等量溶剂。给药治疗5周并在每周对实验动物进行超声检查。
图6食蟹猴子宫内膜组织切片HE染色结果。
将食蟹猴随机分为3组，对照组，雌激素组，阿司匹林组。雌激素组和阿司匹林组，每天皮下注射500μL雌激素(64μg/kg)，此外，阿司匹林组腹腔注射4mL阿司匹林(3.2mg/kg)，每天一次，对照组给予等量溶剂。给药治疗5周，最后，对实验动物进行安乐死，取其子宫进行固定脱水包埋切片，进行HE染色。
图7阿司匹林抑制雌激素诱导的食蟹猴子宫内膜腺体间质比例的增加。
将食蟹猴随机分为3组，对照组，雌激素组，阿司匹林组。雌激素组和阿司匹林组，每天皮下注射500μL雌激素(64μg/kg)，此外，阿司匹林组腹腔注射4mL阿司匹林(3.2mg/kg)，每天一次，对照组给予等量溶剂。给药治疗5周，最后，对实验动物进行安乐死，取其子宫进行固定脱水包埋切片，进行HE染色。观察并统计其子宫内膜组织腺体间质比例。结果以平均数±标准差表示。**：P<0.01，***：P<0.001vs Estradiol；(Student’s-t test)。
六、
具体实施方式
实施例1：阿司匹林抑制雌激素皮下注射诱导的小鼠子宫内膜增生
技术方法：雌激素皮下注射诱导的小鼠子宫内膜增生模型、HE染色
将小鼠随机分为4组，正常组，雌二醇(50μg/kg)组，阿司匹林(10mg/kg)组，孕激素组(10mg/kg)。雌二醇组、孕激素组和阿司匹林组，每天皮下注射雌二醇100μl，此外，阿司匹林组需腹腔注射阿司匹林；孕激素组每日腹腔注射孕激素。每天一次，每次100μl，对照组给予等量溶剂。给药治疗21天后，最后实验动物进行安乐死，取其子宫进行拍照、称重后，固定脱水包埋切片，进行HE染色观察其子宫内膜组织增生情况。
实施例2：阿司匹林抑制雌激素皮下注射诱导的食蟹猴子宫内膜增生
技术方法：雌激素皮下注射诱导的小鼠子宫内膜增生模型、HE染色
取食蟹猴，4岁，饲养于SPF级动物房，21±2℃，自由饮水取食，12h昼夜交替。将食蟹猴随机分为3组，对照组，雌激素(64μg/kg)组，阿司匹林(3.2mg/kg)组。雌激素组和阿司匹林组，每天皮下注射雌激素500μL，此外，阿司匹林组腹腔注射阿司匹林，每天一次，每次4mL，对照组给予等量溶剂。给药治疗5周并在每周对实验动物进行超声检查，最后，对实验动物进行安乐死，取其子宫进行固定脱水包埋切片，进行HE染色观察其子宫内膜组织增生情况。七、阿司匹林药理实验结果分析：
阿司匹林对雌激素诱发的小鼠子宫内膜增生模型的改善作用。
如图1所示，21天后，与对照组相比，雌激素组小鼠子宫组织增大，阳性对照药物孕激素组子宫组织增大有改善的现象，阿司匹林给药组小鼠子宫组织增大被显著改善。阿司匹林能够明显改善雌激素诱导的小鼠子宫增大。
如图2所示，对各组小鼠子宫重量进行统计，与对照组相比，雌激素组小鼠子宫重量显著升高，阳性对照药物孕激素以及阿司匹林均显著改善了小鼠子宫重量。因此，阿司匹林能够明显改善雌激素诱导的小鼠子宫增大。
如图3所示，HE染色结果表明，与对照组相比，雌激素组小鼠子宫内膜腺体过度生长，孕激素组以及阿司匹林组子宫内膜腺体生长有改善的现象。阿司匹林能够明显改善雌激素诱导的小鼠子宫内膜腺体生长。
如图4所示，根据HE染色结果对小鼠子宫内膜腺体与间质的比例进行统计，结果表明，与对照组相比，雌激素组小鼠子宫内膜腺体间质比例显著升高，阳性对照药物孕激素以及阿司匹林均显著降低了小鼠子宫内膜腺体间质比例。因此，阿司匹林能够明显改善雌激素诱导的小鼠子宫内膜腺体生长。
如图5所示，给药治疗5周并在每周对实验动物进行超声检查，与对照组相比，雌激素组食蟹猴子宫内膜厚度增加，阿司匹林给药组食蟹猴子宫内膜增生的现象被改善。阿司匹林能够明显改善雌激素诱导的食蟹猴子宫内膜增生。
如图6所示，HE染色结果表明，与对照组相比，雌激素组食蟹猴子宫内膜腺体过度生长，阿司匹林组食蟹猴内膜腺体生长有改善的现象。阿司匹林能够明显改善雌激素诱导的食蟹猴子宫内膜腺体生长。
如图7所示，根据HE染色结果，对食蟹猴子宫内膜腺体间质比例统计表明，与对照组相比，雌激素组食蟹猴子宫内膜腺体间质比例显著升高，而阿司匹林显著逆转了食蟹猴子宫内膜腺体间质比例的增高。因此，阿司匹林能够明显改善雌激素诱导的食蟹猴子宫内膜腺体生长。