A205804在制备治疗脓毒症药物中的应用
阅读说明：本技术 A205804在制备治疗脓毒症药物中的应用 (Application of A205804 in preparation of medicine for treating sepsis ) 是由 刘海鹏 曹亚娟 郑梦歌 于 2021-11-03 设计创作，主要内容包括：本发明提供了A205804在制备治疗脓毒症药物中的应用,该药物的主要活性成分为A205804或其药学上可接受的盐。本发明验证了小分子药物A205804能够显著延长脓毒症小鼠生存期,抑制脓毒症炎症因子IL-6、IL-1β、TNFα、IFNβ、CXCL-10释放。因此,A205804具有潜在的脓毒症预防和治疗价值,可用于提高脓毒症的治愈率、改善患者预后、降低医疗资源消耗。(The invention provides application of A205804 in preparation of a medicament for treating sepsis, wherein the main active ingredient of the medicament is A205804 or pharmaceutically acceptable salt thereof. The invention verifies that the micromolecular drug A205804 can obviously prolong the survival period of a sepsis mouse and inhibit the release of sepsis inflammatory factors IL-6, IL-1 beta, TNF alpha, IFN beta and CXCL-10. Therefore, the A205804 has potential sepsis prevention and treatment values, and can be used for improving the cure rate of sepsis, improving the prognosis of patients and reducing medical resource consumption.)
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体涉及A205804在制备治疗脓毒症药物中的应用。
背景技术
脓毒症(sepsis)是由细菌等病原微生物侵入机体引起的全身炎症反应综合征，其具有发病率高、病死率高、医疗费用高的特点。根据流行病学调查数据显示，全球每年有超过1900万严重脓毒症病例，并且以每年1.5％～8.0％的发病速度在上升。与此同时，全球每天约14,000人死于脓毒症及其并发症，成为重症监护病房内非心脏病人死亡的主要原因，存活的患者可能出现认知功能障碍等严重后遗症。脓毒症治疗花费高，医疗资源消耗大，对人类健康造成巨大威胁。
针对脓毒症最有效的方法是积极的全身抗炎治疗、免疫调节治疗及改善器官损害的支持治疗。近年来，尽管抗感染治疗和器官功能支持技术取得了长足的进步，但脓毒症的病死率仍高达30％～70％。因此，以脓毒症的发病机制为基础进行治疗和预防成为现代医学关注的焦点和热点，然而目前脓毒症的发病机制仍未完全阐明，涉及到复杂的全身炎症网络效应、免疫功能调节失衡、组织损伤以及宿主对不同感染病原微生物及其毒素的异常反应等多个方面。其中，炎症反应和免疫功能失衡是导致患者死亡的重要原因，机体感染病原菌后，激活宿主局部或全身炎症反应，产生并释放大量的炎性介质，如IL-6、IL-1β、TNFα、IFNβ、CXCL-10等，从而导致免疫功能失衡，在脓毒症状态下，免疫抑制又会进一步加剧全身炎症反应，导致机体多器官衰竭，直至无法逆转的死亡。
因此，针对脓毒症的发病机制，探寻具有临床转化价值的有效脓毒症治疗和预防药物是亟需解决的关键问题。
每种小分子药物都有其发挥作用的机制，适合不同的群体，并不能覆盖所有的脓毒症患者。因此，需要进一步探寻小分子药物的作用机制，以及更多有效的脓毒症治疗药物。
A205804是一种小分子化合物，其分子结构如图1所示，现有研究表明A205804用于慢性炎症疾病的研究，可显著降低炎症条件下小鼠外周血白细胞数量，黏附分子介导了白细胞在内皮细胞上的滚动黏附，A205804可显著降低人早幼粒白血病细胞(HL-60)在TNFα活化的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)上的滚动黏附，抑制黏附分子家族成员整合素E-selectin和细胞间黏附分子ICAM-1的表达。但现未有A205804用于治疗脓毒症的相关研究。
发明内容
为了克服现有技术中的缺陷，本发明提供了A205804在制备治疗脓毒症药物中的应用。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明的第一方面是提供一种治疗脓毒症的小分子化合物，该小分子化合物为结构式如式I所示的A205804或其药学上可接受的盐：
本发明的第二方面是提供一种抑制脓毒症炎症反应的药物，该药物的主要活性成分为结构式如式I所示的A205804或其药学上可接受的盐：
进一步地，上述药物还包括药学上可接受的载体或赋形剂。
本发明的第三方面是提供A205804在制备治疗脓毒症药物中的应用，该药物的主要活性成分为结构式如式I所示的A205804或其药学上可接受的盐：
进一步地，上述药物还包括药学上可接受的载体或赋形剂。
进一步地，上述药物在施用后，可发挥如下作用：
(a)显著抑制炎症因子IL-6、CXCL-10以及IFN-β表达；和
(b)延长生存期。
进一步地，上述药物的给药途径为口服、透皮、肌肉、皮下或静脉注射。
进一步地，上述药物的剂型可以为片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、霜剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
本发明的第四方面是提供A205804在制备抑制脓毒症炎症反应的药物中的应用，该药物的主要活性成分为结构式如式I所示的A205804或其药学上可接受的盐：
进一步地，上述药物还包括药学上可接受的载体或赋形剂。
进一步地，上述药物在施用后，可发挥如下作用：
(a)显著抑制炎症因子IL-6、CXCL-10以及IFN-β表达；和
(b)延长生存期。
进一步地，上述药物的给药途径为口服、透皮、肌肉、皮下或静脉注射。
进一步地，上述药物的剂型可以为片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、霜剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
本发明采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
本发明验证了小分子药物A205804能够显著延长脓毒症小鼠生存期，抑制脓毒症炎症因子IL-6、IL-1β、TNFα、IFNβ、CXCL-10释放。因此，A205804具有潜在的脓毒症预防和治疗价值，可用于提高脓毒症的治愈率、改善患者预后、降低医疗资源消耗。
附图说明
图1是小分子化合物A205804的2D(图A)和3D(图B)分子结构示意图；
图2显示了本发明一实施例中A205804抑制小鼠腹腔巨噬细胞(MPMs)脓毒症炎症反应；其中，图A显示了A205804显著抑制LPS诱导的炎症因子IL-6、CXCL-10以及IFN-β表达，并呈剂量依赖；图B显示了A205804显著抑制ISD诱导的炎症因子CXCL-10以及IFN-β表达，并剂量依赖；图C显示了A205804显著抑制cgamp诱导的炎症因子CXCL-10以及IFN-β表达，并剂量依赖；图D显示了A205804显著抑制PolyI:C诱导的炎症因子IL-6、CXCL-10以及IFN-β表达，并剂量依赖；
图3显示了本发明一实施例中A205804干预脓毒症小鼠生存期观察结果；其中，图A为脓毒症小鼠模型实验流程，图B显示了A205804干预LPS诱导的脓毒症小鼠生存期观察结果，图C显示了A205804干预PolyI:C诱导的脓毒症小鼠生存期观察结果；
图4显示了本发明一实施例中RT-PCR检测小鼠肝脏(图A)、肺脏(图B)、脾脏(图C)组织炎症细胞因子IL-6、CXCL-10、IFN-β、TNFα的表达结果。
具体实施方式
本发明提供了A205804在制备治疗脓毒症药物中的应用，该药物的主要活性成分为结构式如式I所示的A205804或其药学上可接受的盐：
在本发明一优选的实施方式中，上述药物还包括药学上可接受的载体或赋形剂。
术语“药学上可接受的盐”是指所述化合物与药学上可接受的无机酸或有机酸所形成的盐，所述的无机酸包括但不限于：盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸；所述的有机酸包括但不限于：甲酸、乙酸、丙酸、丁二酸、1,5-萘二磺酸、亚细亚酸、草酸、酒石酸、乳酸、水杨酸、苯甲酸、戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、庚二酸、己二酸、马来酸、苹果酸、氨基磺酸、苯丙酸、葡糖酸、抗坏血酸、烟酸、异烟酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸，以及氨基酸；所述“药学上可接受的”是指适用于人而无过度不良副反应(如毒性、刺激和变态反应)，即有合理的效益/风险比的物质。
术语“载体或赋形剂”包括粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂、湿润剂等中的一种或几种。
下面通过具体实施例和附图对本发明进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本发明，但是下述实施例并不限制本发明范围。
实施例中方法如无特殊说明的采用常规方法，使用的试剂如无特殊说明的使用常规市售试剂或按常规方法配制的试剂。
实施例1
本实施例在体外细胞学水平上研究A-205804抑制脓毒症炎症反应，具体的操作步骤和结果如下：
1.采用LPS(100ng/ml)刺激小鼠腹腔巨噬细胞2小时，诱导产生炎症反应，同时给予不同浓度(0、0.01、0.1、1、10μM)小分子药物A205804处理。
由图2A可知，A205804可显著抑制LPS诱导的炎症因子IL-6、CXCL-10以及IFNB表达，并且这种抑制作用呈现了药物剂量依赖。
2.固有免疫是机体防御外来病原体感染的第一道防线，过度激活导致脓毒症、自身免疫疾病等，主要包括识别病原菌RNA的Toll样受体和识别DNA的cGAS-STING信号通路。因此，我们除了采用LPS诱导TLR4启动炎症反应之外，还采用了不同的信号通路刺激物，包括ISD(cGAS激动剂，图2B)、cgamp(STING激动剂，图2C)、PolyI:C(Toll样受体TLR3激动剂，图2D)分别激活固有免疫靶基因启动下游炎症反应，同样地，同时给予不同浓度(0、0.01、0.1、1、10μM)小分子药物A205804处理。
由图2B-D可知，结果与LPS诱导的炎症反应一致，提示A205804可显著抑制炎症因子IL-6、CXCL-10以及IFN-β表达，且呈剂量依赖。
综上所述，在细胞学层面，A205804是一种有效抑制脓毒症炎症反应的小分子药物。
实施例2
本实施例在体内动物水平研究A205804抑制脓毒症炎症反应，具体的操作和结果如下：
1.LPS诱导全身急性炎症反应，D-半乳糖胺(D-galactosamine，D-gal)常被用于与LPS联合快速放大LPS效应，加剧脓毒症发生。我们采用大剂量、联合使用、单次腹腔注射致死剂量的LPS及D-gal，来诱导小鼠脓毒症模型，此方法高度可控，且重复性好，可以观察到宿主对脓毒症引起的全身急性炎症反应。根据重量换算，我们给予LPS 1ng/只联合D-gal7.5mg/只腹腔注射诱发小鼠脓毒症，同时给予A205804 10mg/kg剂量腹腔注射干预，8小时一次，实验流程图如图3A。首先我们观察小鼠的生存期，研究显示，A205804可显著延长LPS诱导的脓毒症小鼠生存期(图3B)。此外，我们采用PolyI:C 40μg/只联合的D-gal 7.5mg/只腹腔注射诱发小鼠脓毒症，同时给予同等剂量A205804腹腔注射，实验流程图如图3A，研究同样显示，A205804可显著延长PolyI:C诱导的脓毒症小鼠生存期(图3C)。
2.为了进一步观察A205804对脓毒症小鼠全身炎症反应的作用，我们通过A205804干预LPS联合D-gal诱发小鼠脓毒症后6小时，分别取小鼠的肝、肺、脾脏组织，进行RT-PCR实验，检测炎症细胞因子IL-6、CXCL-10、IFN-β、TNFα的表达。结果显示，A205804均能不同程度的抑制小鼠肝脏(图4A)、肺脏(图4B)、脾脏(4C)组织炎症细胞因子IL-6、CXCL-10、IFN-β、TNFα的表达。
综上所述，在体内动物水平层面，A205804也是一种有效抑制脓毒症炎症反应的小分子药物。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。