具体实施方式

下面通过具体实施方式对本发明进行详细说明，本发明的特点和优点将随着这些说明而变得更为清楚、明确。

所述溶石剂包含低毒性多乙二醇醚或多乙二醇醚酯中的一种或多种。

所述低毒性多乙二醇醚或多乙二醇醚酯选自二乙二醇二乙醚、二乙二醇单乙醚、三乙二醇单乙醚或二乙二醇单乙醚醋酸酯中的一种或多种，优选选自二乙二醇二乙醚、二乙二醇单乙醚或二乙二醇单乙醚醋酸酯中的一种或多种，更优选选自二乙二醇二乙醚或二乙二醇单乙醚醋酸酯的一种或两种。

本发明中，通过大量实验发现，多乙二醇醚或多乙二醇醚酯可以很快溶解胆结石，并且可以和水配制使用，随着溶石剂中多乙二醇醚含量的减少，溶解速度虽有所降低，但仍可以在短时间内完成体外溶石。

本发明中，所述胆固醇型胆结石中胆固醇质量浓度大于70％；所述胆色素型胆结石中胆固醇质量浓度小于30％，混合型胆结石中胆固醇质量浓度为30％～70％。

本发明中，以二乙二醇二乙醚作为单剂型溶石剂为例，当相对于1mL水而言，二乙二醇二乙醚加入量由1mL变化到10mL时，溶解一定量胆固醇型胆结石的时间逐步缩短，并且当二乙二醇二乙醚与水的体积比为1:1时仍能够较快的溶解胆固醇型结石，仅残留粉状细小颗粒，在临床使用时，可随溶石剂一并排出，当提高溶石剂浓度后，残留的细小颗粒随即消失。在体外溶解胆固醇型胆结石实验中，二乙二醇二乙醚溶石剂体积浓度大于等于50％时，可以在10～100min内达到100％的溶石率。

所述二乙二醇二乙醚溶石剂溶解胆固醇型胆结石时，二乙二醇二乙醚与水的体积比为(1～20):1，优选为(1～15):1，更优选为(1～10):1。

二乙二醇二乙醚单剂型溶石剂在溶解混合型和胆色素型胆结石时所需浓度较胆固醇型胆结石要大。当相对于1mL水而言，二乙二醇二乙醚加入量由2mL变化到10mL时，在溶解一定量混合型胆结石时，可以在30min内完全溶解结石，达到100％的溶石率；在溶解一定量胆色素型胆结石时，溶石速率迅速减慢，在100min时，溶石率可达到20％～25％。在继续溶解结石的过程中二乙二醇二乙醚与水的体积比为2:1的二乙二醇二乙醚单剂型溶石剂比高浓度的二乙二醇二乙醚单剂型溶石剂表现出了更好的溶石效果。二乙二醇二乙醚与水体积比为2:1时，溶石剂可以在400min内完全溶解胆色素型胆结石。

所述二乙二醇二乙醚溶石剂溶解胆色素型和混合型胆结石时，二乙二醇二乙醚与水的体积比为(2～30):1，优选为(2～25):1，更优选为(2～20):1。

增大二乙二醇二乙醚的浓度可以缩短溶石时间，但是会增加对人体的刺激性和损害性(LD50大鼠口服4970mg/kg，LD50兔子皮肤6700μL/kg，数据来源：美国国家职业安全卫生研究所NIOSH)，降低浓度会增加溶石时间，因此，在使用时，需要调节二乙二醇二乙醚的浓度以满足使用要求。

本发明中，以三乙二醇单乙醚作为单剂型溶石剂为例，三乙二醇单乙醚与水配合使用，在体外溶石实验中，体积分数在85％以上的三乙二醇单乙醚溶石剂可以在100min内超声溶解胆固醇型和混合型胆结石，无任何残留，溶石率到达100％，当三乙二醇单乙醚降到中等浓度时，溶石速率迅速下降，很难溶解胆固醇型胆结石。

体积分数在85％以上的三乙二醇单乙醚溶石剂在溶解胆色素型胆结石时，溶石速率较为缓慢，溶石时间为100min时，溶石率可达到17％。

所述三乙二醇单乙醚溶石剂溶解胆结石时，三乙二醇单乙醚与水的体积比为(4～20):1，优选为(4～15):1，更优选为(4～10):1。三乙二醇单乙醚毒性低(LD50大鼠口服10.6g/kg，LD50兔子皮肤8.2g/kg，数据来源：Patty's Toxicology(第五版)V(1-9):221)，可以与其他溶剂配合使用，降低毒性，提高溶石效果。

本发明中，以二乙二醇单乙醚醋酸酯为单剂型溶石剂进行溶石时，高浓度的二乙二醇单乙醚醋酸酯溶石剂对胆固醇型和混合型胆结石表现出了很好的溶石效果，可以在20min内超声溶解胆固醇型胆结石，40min内超声溶解混合胆结石，无任何残留，溶石率到达100％。所述高浓度二乙二醇单乙醚醋酸酯溶石剂在溶解胆色素型胆结石时，100min时溶石率可到达21.3％。

所述二乙二醇单乙醚醋酸酯溶石剂中，二乙二醇单乙醚醋酸酯与水的体积比为(8～30):1，优选为(8～25):1，更优选为(8～20):1。

二乙二醇单乙醚醋酸酯属于微毒物质(LD50大鼠口服11g/kg，LD50兔子皮肤15.1mg/kg，数据来源：联合碳化物公司数据)，用于体内溶石时可减少人体损害，胆囊和胆管刺激等。

在本发明中，单剂型多乙二醇醚和多乙二醇醚酯溶石剂对胆固醇型和混合型胆结石具有良好的溶石效果，可在短时间内完全溶解结石，在溶解胆色素型胆结石时，较胆固醇型和混合型结石溶石时间长，在临床使用时，可针对性调整，用于将结石溶解为可排出的光滑块状结石，利于胆色素型胆结石的排出。

传统溶石剂甲基叔丁醚(MTBE)毒性较大(LD50大鼠口服4g/kg，数据来源：美国国家职业安全卫生研究所NIOSH)，沸点为55℃，但甲基叔丁醚的挥发性比较强，应用于人体时仍存在挥发而产生高压，同时，甲基叔丁醚会产生使人非常不舒服的刺激性气味。在体外甲基叔丁醚能在60～100分钟内完全溶解胆固醇含量在40％～94％的胆结石。体内动物实验表明甲基叔丁醚能在4～16小时内完全溶解植入狗胆囊内的直径为l.8cm^-1胆固醇含量为90％～94％的人类胆固醇胆结石。(中国社区医师,2004,101(6):2～4)。但甲基叔丁醚很难溶解胆固醇含量在30％以下的胆色素型胆结石。在相关动物实验和人体代谢观察中，MTBE在大鼠和人体内表现出相似的整体代谢，MTBE在酶的作用下氧化去甲基化生成甲醛和叔丁醇(TBA)，甲醛快速代谢形成甲酸盐和CO₂，而TBA进一步代谢主要生成α-羟基异丁酸，其中甲醛对人体损伤较大。有资料显示，人体内催化MTBE生物转化形成甲醛和TBA的酶只在肝脏中大量存在，可推测人体对MTBE的代谢主要发生在肝脏，并且代谢产物对肝肾损伤较大。

在本发明中，溶石剂为带有二乙二醇链或三乙二醇链的单乙醚、二乙醚。二醇链的代谢点主要是“—OH”，乙醇脱氢酶将醇基氧化成羧酸，损害性很小，也有可能被甲基化，此时代谢点被占用，同时乙醚基团在人体中的代谢产物毒性也很低。本发明中的溶石剂均为溶于水或与水配合使用，便于绝大部分溶石剂在溶石后从体内抽出、清洗掉，残留量非常少，因此，本发明中的溶石剂有望大幅降低溶石剂对人体的伤害。

在本发明的一种优选方式中，所述溶石剂还包括表面活性剂、蛋白溶解剂或抗炎剂。

在溶石剂中添加表面活性剂不但可以增溶，还具有乳化、润湿、去污、杀菌等作用。所述表面活性剂选自新洁尔灭、卵磷脂、氨基酸型、甜菜碱型、聚乙二醇、聚山梨醇酯、泊洛沙姆，优选选自卵磷脂、聚乙二醇、聚山梨醇酯、泊洛沙姆，更优选为卵磷脂或泊洛沙姆。

卵磷脂可以调节血清脂质水平，能够降低胆固醇水平，保护肝脏，加强免疫力以及抗脂肪肝的活力。将卵磷脂加入到溶石剂中，可以提供一定的肝脏保护能力，降低溶石剂对肝脏的损伤。

泊洛沙姆是聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯三嵌段共聚物，其中聚氧乙烯链具有相对亲水性，聚氧丙烯链具有相对亲油性。本发明中加入泊洛沙姆，一方面可以使其与水形成均一稳定的溶石剂，另一方面由于加入泊洛沙姆可以减少多烷烃醇丁醚的使用量，减少溶石剂对人体的副作用。

目前，胆固醇型胆结石中，70％以上为胆固醇，还会含有少量胆红素、胆酸、磷脂、蛋白、游离脂肪酸以及钙盐、镁盐等；混合型胆结石中，30％～70％为胆固醇，还含有胆色素和钙盐等；胆色素型胆结石的主要成分有游离胆色素、胆色素多聚体、各种钙盐和黏液糖蛋白、钙盐、细菌、虫卵等。因此，为了促进胆结石的溶石效果，本发明中，优选加入蛋白溶解剂。为了提高肝胆道、胆囊对溶石剂的抵抗能力，优选加入抗炎剂。

所述蛋白溶解剂选自盐酸胍、尿素、硫脲、3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐(CHAPS)、二硫苏糖醇(DTT)，优选为盐酸胍、尿素或CHAPS，更优选为盐酸胍、尿素或硫脲中的一种或多种。

硫脲能够破坏蛋白质分子间形成的氢键，防止由氢键引起的蛋白质聚集以及蛋白迁移过程中二级结构的形成。在使用过程中需要配合尿素进行使用。

CHAPS作为蛋白溶解剂，是一种两性表面活性剂，分子结构中具有一个胆酸和硫代甜菜碱，可以保护蛋白质的天然状态，溶解膜蛋白，从而解除蛋白与蛋白间的相互作用。

DTT可以还原蛋白质中二硫键，阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。其中，第一步反应所形成的中间态很不稳定，因为DTT上的第二个巯基趋向于与被氧化的硫原子连接，使中间态很快被转化为DTT的环状氧化结构，从而完成对二硫键的还原。

盐酸胍和尿素对疏水氨基酸残基有增溶作用，因为盐酸胍和尿素具有形成氢键的能力，盐酸胍和尿素在高浓度(4～8mol/L)水溶液时能断裂氢键，使得盐酸胍和尿素能够很好的溶解非极性残基，使蛋白质分子内部的疏水残基伸展和溶解性增加，从而使蛋白质发生不同程度的变性。

在室温下，3～4mol/L盐酸胍可使球状蛋白质从天然状态转变至变性状态的中点，通常增加变性剂浓度可提高变性程度，浓度为6mol/L的盐酸胍可以使蛋白质完全转变为变性状态。盐酸胍由于具有离子特性，在8mol/L盐酸胍溶液中，蛋白质一般以无规卷曲构象的完全变性状态存在。

尿素溶解能力较盐酸胍弱，溶解速度慢，蛋白在尿素中的溶解度为70％～90％，尿素在作用时间较长或温度较高时会裂解形成氰酸盐，对重组蛋白质的氨基进行共价修饰，具有不电离、中性、成本低等优点。

盐酸胍溶解能力和变性能力相对尿素较强，不会造成重组蛋白质的共价修饰，但成本高，在酸性条件下易产生沉淀；尿素溶解能力相对较弱，但具有不电离、呈中性、成本低、蛋白质复性后不会造成大量蛋白质沉淀等优点。在实际应用中，根据溶石剂使用环境进行选择使用。

所述溶石剂中盐酸胍的浓度为0.1～8mol/L，优选为1～7mol/L，更优选为2～6mol/L。

所述溶石剂中尿素的浓度为0.1～8mol/L，优选为1～7mol/L，更优选为2～6mol/L。

所述抗炎剂选自牛磺胆酸、牛黄脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、熊脱氧胆酸，优选选自牛磺胆酸、牛黄脱氧胆酸，更优选为牛磺胆酸。牛磺胆酸能够降低炎症组织毛细血管的通透性，抑制炎症性肿胀，抑制一氧化氮、前列腺素E2、组胺等炎症介质的产生。

所述的溶石剂的给药方式，包括经皮经肝胆道置管(PTCD)或经内镜下逆行胆囊插管(ERCG)等途径，将溶石剂灌注进入胆囊，使其直接和胆石接触，如图1所示。

本发明中的溶石剂，总体使用量少，通过加入水进行稀释，不但可以实现溶解胆固醇型、胆色素型和混合型胆结石，还可以降低醚类溶剂使用量，减少人体副作用的产生。加入表面活性剂、蛋白溶解剂或抗炎剂可以促进溶石效果，减少组织损伤，进一步减少醚类溶剂的使用量，有望达到良好临床使用效果。

实施例

实施例1

将二乙二醇二乙醚与水按照10mL:1mL、8mL:4mL、5mL:5mL的体积比进行混合，磁力搅拌2min，得到均匀稳定的溶石剂1-1、溶石剂1-2、溶石剂1-3。

分别称三颗约0.12g完整的胆固醇型胆结石(胆结石来源于病人，女，44岁)分别放入上述溶石剂中，用超声波清洗机(超声波功率240W)破碎溶解结石，每10min记录一次实验现象。10min时，溶石剂1-1中胆结石完全溶解；30min时，溶石剂1-2中胆结石完全溶解；100min时，溶石剂1-3中胆结石完全溶解。使用针头直径为0.7毫米的注射器，将上述剩余液体吸出，溶石剂1-1、溶石剂1-2对应的烧杯中有无任何残留，仅溶石剂1-3对应的烧杯中有少量粉状物质。

分别称三颗约0.15g完整的混合型胆结石(胆结石来源于病人，女，33岁)分别放入溶石剂1-1、溶石剂1-2和溶石剂1-3中，用超声波清洗机(超声波功率240W)破碎溶解结石，每10min记录一次实验现象。溶石剂1-1、溶石剂1-2和溶石剂1-3分别在10min内、30min内和110min内完全溶解混合型胆结石。使用针头直径为0.7毫米的注射器均可将烧杯中的溶石剂1-1、溶石剂1-2和溶石剂1-3吸出，杯底无杂质。

分别称三颗约0.1g完整的胆色素型胆结石(胆结石来源于病人，男，67岁)分别放入溶石剂1-1、溶石剂1-2和溶石剂1-3中，用超声波清洗机(超声波功率240W)破碎溶解结石，每10min记录一次实验现象。溶石剂1-1、溶石剂1-2和溶石剂1-3分别在510min内、400min内和620min内完全溶解胆色素型胆结石。使用针头直径为0.7毫米的注射器，将烧杯中的溶石剂1-1、溶石剂1-2吸出，杯底无杂质。溶石剂1-3被针头直径为0.7毫米的注射器吸出后，杯底有少量粉状物质残留。在实际治疗过程中，粉状物质可随溶石剂以及清洗剂一并排出到体外。

溶石剂1-3在溶解胆固醇型胆结石、混合型胆结石和胆色素型胆结石过程中，溶石效果如图2所示。溶石剂1-3本身为无色透明液体，加入淡黄色胆固醇型胆结石后，随着溶石的进行，溶石剂逐渐变为淡黄色，并随时间的增长溶剂颜色变为黄色，胆固醇型结石在溶石过程中先是变小后逐渐溶解消失。在溶解褐色混合型胆结石后，溶石剂变为黄色，后逐渐变为红褐色液体，混合型结石溶解消失。溶石剂1-3在溶解胆色素型胆结石时，溶石剂先是变为红褐色，后变为黑褐色，胆色素型胆结石先是部分溶解并分散为小颗粒，后逐步溶解，杯底残留细小颗粒，临床使用中可随溶石剂和清洗剂排出体外。

说明二乙二醇二乙醚可以很好的溶解胆固醇型和混合型胆结石，即使降低到中等浓度也能够完全溶解胆固醇型胆结石。

实施例2

将三乙二醇单乙醚与水按照10mL:1mL、8mL:4mL、5mL:5mL的体积比进行混合，磁力搅拌2min，得到均匀稳定的溶石剂2-1、溶石剂2-2、溶石剂2-3。

称三颗约0.12g的完整的胆固醇型胆结石(胆结石来源于病人，女，44岁)分别放入上述溶石剂中，用超声波清洗机(超声波功率240W)破碎溶解结石，每10min记录一次实验现象。90min时，溶石剂2-1中胆结石完全溶解，溶石剂2-2和溶石剂2-3中的胆结石变化不大。使用针头直径为0.7毫米的注射器，将溶石剂2-1溶解后的液体吸出，杯底无残留。

分别称三颗约0.15g完整的混合型胆结石(胆结石来源于病人，女，33岁)放入溶石剂2-1中，用超声波清洗机(超声波功率240W)破碎溶解结石，每10min记录一次实验现象。溶石剂2-1在90min内完全溶解混合型胆结石。使用针头直径为0.7毫米的注射器，将烧杯中的溶石剂2-1吸出，杯底无杂质。

分别称三颗约0.1g完整的胆色素型胆结石(胆结石来源于病人，男，67岁)放入溶石剂2-1中，用超声波清洗机(超声波功率240W)破碎溶解结石，每10min记录一次实验现象。在510min内完全溶解胆色素型胆结石。使用针头直径为0.7毫米的注射器，将烧杯中的溶石剂2-1吸出，杯底无杂质。

溶石剂2-1在溶解胆固醇型胆结石、混合型胆结石和胆色素型胆结石过程中，溶石效果如图3所示。

溶石剂2-1本身为无色透明液体。加入淡黄色胆固醇型胆结石后，随着溶石的进行，溶石剂逐渐变为淡黄色，并随时间的增长溶剂颜色加深变为黄色，胆固醇型结石在溶石过程中先是变小后逐渐溶解消失。

在溶解褐色混合型胆结石时，溶石剂先是变为黄色，后逐渐变为红褐色液体，混合型结石溶解消失。

溶石剂2-1在胆色素型胆结石时，溶石剂先是变为黄褐色，后变为黑褐色，胆色素型胆结石先是部分溶解并分散为小颗粒，后逐步溶解，杯底残留细小颗粒，临床使用中可随溶石剂和清洗剂排出体外。

说明三乙二醇单乙醚在高浓度下溶石效果好，并且三乙二醇单乙醚的毒性低，可以与其他溶剂配合使用，降低溶石剂毒性，提高溶石效果。

实施例3

将二乙二醇单乙基醚醋酸酯与水按照10mL:1mL、8mL:4mL、5mL:5mL的体积比进行混合，磁力搅拌2min，得到均匀稳定的溶石剂3-1、溶石剂3-2、溶石剂3-3。

称三颗约0.12g的完整的胆固醇型胆结石(胆结石来源于病人，女，44岁)分别放入上述溶石剂中，用超声波清洗机(超声波功率240W)破碎溶解结石，每10min记录一次实验现象。10min时，溶石剂3-1中胆结石完全溶解；100min时，溶石剂3-2、溶石剂3-3仍未完全溶解，以胆结石减少质量计算，溶石率分别为83％和67％。使用针头直径为0.7毫米的注射器，将烧杯中的溶石剂3-1吸出，杯底无杂质。

分别称三颗约0.15g完整的混合型胆结石(胆结石来源于病人，女，33岁)放入溶石剂3-1中，用超声波清洗机(超声波功率240W)破碎溶解结石，每10min记录一次实验现象。溶石剂3-1在40min内完全溶解混合型胆结石。使用针头直径为0.7毫米的注射器，将烧杯中的溶石剂3-1吸出，杯底无杂质。

分别称三颗约0.1g完整的胆色素型胆结石(胆结石来源于病人，男，67岁)放入溶石剂3-1中，用超声波清洗机(超声波功率240W)破碎溶解结石，每10min记录一次实验现象。在470min内完全溶解胆色素型胆结石。使用针头直径为0.7毫米的注射器，将烧杯中的溶石剂3-1吸出，杯底无杂质。

溶石剂3-1在溶解胆固醇型胆结石、混合型胆结石和胆色素型胆结石过程中，溶石效果如图4所示。

溶石剂3-1本身为无色透明液体。加入淡黄色胆固醇型胆结石后，随着溶石的进行，溶石剂逐渐变为淡黄色，并随时间的增长溶剂颜色变为黄色，胆固醇型结石在溶石过程中先是变小后逐渐溶解消失。

在溶解褐色混合型胆结石时，溶石剂先是变为黄色，后逐渐变为黄褐色液体，混合型结石溶解消失。

溶石剂3-1在胆色素型胆结石时，溶石剂先是变为黄褐色，后变为黑褐色，胆色素型胆结石先是部分溶解并分散为小颗粒，后逐步溶解消失。

说明二乙二醇单乙基醚醋酸酯在高浓度下溶石效果好，并且二乙二醇单乙基醚醋酸酯的毒性低，可以与其他溶剂配合使用，降低溶石剂毒性，提高溶石效果。

实施例4

溶石剂对胆结石溶解手术中所使用的乳胶管的溶胀作用。不同的溶剂导致乳胶管的溶胀程度不同，严重的溶胀会给胆结石溶解手术带来很大的负面影响。

研究以下四种溶石剂对乳胶管的溶胀程度的影响：

溶石剂1-1：二乙二醇二乙醚:水＝10mL:1mL；

溶石剂1-2：二乙二醇二乙醚:水＝8mL:4mL；

溶石剂2-1：三乙二醇单乙醚:水＝10mL:1mL；

溶石剂3-1：二乙二醇单乙基醚醋酸酯:水＝10mL:1mL。

取等四段长乳胶管，完全浸泡在上述四种溶石剂中24小时后，比较乳胶管浸泡前后的质量、体积、长度的变化。采用去离子水作为阴性对照组，采用传统溶石剂乙酸异戊酯和甲基叔丁基醚作为阳性对照组。

浸泡前，称取乳胶管质量，并用钢板尺测量乳胶管长度。量筒中加入定量去离子水，在将乳胶管放入量筒中浸没，读取前后差值计为乳胶管体积。

将乳胶管在室温下自然干燥1小时后，置于上述四种溶石剂中，并将对比乳胶管置于足量的去离子水、乙酸异戊酯和甲基叔丁基醚中浸泡24h。浸泡结束后，在室温下自然干燥1小时后，以上述同样的方法测量乳胶管的质量、长度和体积，结果如表1所示。

表1乳胶管浸泡前后变化比值

从乳胶管浸泡前后数据变化可以看出，现有的溶石剂乙酸异戊酯和甲基叔丁基醚会明显造成乳胶管的溶胀，而本发明中提供的溶石剂对乳胶管的溶胀明显降低。

以上结合具体实施方式和/或范例性实例以及附图对本发明进行了详细说明，不过这些说明并不能理解为对本发明的限制。本领域技术人员理解，在不偏离本发明精神和范围的情况下，可以对本发明技术方案及其实施方式进行多种等价替换、修饰或改进，这些均落入本发明的范围内。本发明的保护范围以所附权利要求为准。