N-乙酰神经氨酸组合物和使用方法
阅读说明：本技术 N-乙酰神经氨酸组合物和使用方法 (N-acetylneuraminic acid compositions and methods of use ) 是由 简·雷默雷特 霍格内·维克 于 2018-10-11 设计创作，主要内容包括：本发明涉及病毒性疾病领域,并且尤其涉及天然化合物抑制病毒和病毒感染的用途。提供了包含NANA的组合物用于治疗或预防病毒感染,诸如引起普通感冒的那些病毒感染。(The present invention relates to the field of viral diseases and in particular to the use of natural compounds to inhibit viruses and viral infections. Compositions comprising NANA are provided for treating or preventing viral infections, such as those causing the common cold.)
发明领域
本发明涉及包含N-乙酰神经氨酸(唾液酸，Neu5Ac或NANA)的组合物的用途。包含NANA的组合物用于诱导生理反应，诸如减轻感冒症状和预防感冒发作。
背景技术
据一些估计，在一年之中，美国有10亿人患感冒。感冒在儿童中最为普遍，而且似乎与青少年对感染的抵抗力相对不足以及在日托中心和学校与其他儿童的接触有关。儿童一年患感冒约六到十次。在有儿童上学的家庭中，每个儿童一年感冒的次数可高达12次。尽管范围广泛地变化，但是成年人平均一年感冒约两到四次。女性，特别是20至30岁的女性，比男性更容易患感冒，可能是因为她们与儿童的接触更密切。平均而言，60岁以上的人一年患感冒不到一次。
普通感冒的经济影响是巨大的。国家卫生统计中心(NCHS)估计，在1994年，美国有6600万例普通感冒需要医疗关注或导致活动受限。根据NCHS，在1994年，感冒导致2400万天的活动受限和2000万天的失学。
已知有200多种不同的病毒会引起普通感冒的症状。有些病毒，诸如鼻病毒，很少会产生严重的病。其他病毒，诸如副流感病毒和呼吸道合胞病毒，在成年人中产生轻度感染，但可在幼儿中使严重的下呼吸系统感染突然发生。鼻病毒(来自希腊语rhin，意为“鼻”)导致了所有成年人中的估计30％至35％的感冒，并且在早秋、春季和夏季最为活跃。已经鉴定出超过110种不同的鼻病毒类型。这些试剂在人鼻黏膜的温度33摄氏度[约91华氏度(F)]的温度下生长最佳。冠状病毒被认为引起所有成年人中的大部分感冒。它们主要在冬季和早春引起感冒。在30多个分离菌株中，有三或四个感染人类。冠状病毒作为致病剂的重要性很难评估，因为与鼻病毒不同，冠状病毒很难在实验室中生长。
在美国，大多数感冒发生在秋季和冬季。从8月底或9月初开始，感冒的发病率会在数周内缓慢增加，并保持高水平，直到3月或4月才会下降。季节性的变化可能与学校开学和寒冷天气有关，这促使人们花更多的时间在室内并且增加了病毒将在人与人之间传播的机会。
普通感冒的症状通常在感染后两到三天开始，并且通常包括流鼻涕、鼻呼吸阻塞、窦膜肿胀、打喷嚏、喉咙痛、咳嗽和头痛。发烧通常是轻微的，但婴儿和幼儿可升至102°F。感冒症状可持续两到14天，但三分之二的人会在一周内康复。如果症状经常出现或持续远超过两周，则可能是过敏而非感冒的结果。感冒偶尔会导致中耳或鼻窦的继发细菌感染，需要使用抗生素进行治疗。高烧、腺体明显肿胀、鼻窦中严重的面痛以及产生黏液的咳嗽，可能表明并发症或更严重的病需要医生的关注。
病毒通过克服身体复杂的防御系统而引起感染。身体的第一道防线是由鼻和喉咙中的膜产生的黏液。黏液捕获吸入的物质：花粉、灰尘、细菌和病毒。当病毒穿透黏液并进入细胞时，它会征用蛋白质制造机器以制造新的病毒，进而攻击周围的细胞。
感冒症状可能是身体对病毒入侵的免疫反应的结果。鼻中被病毒感染的细胞发出将专门的白细胞募集到感染部位的信号。进而，这些细胞发出一系列免疫系统化学物质，诸如激肽。这些化学物质可能通过引起鼻膜肿胀和发炎、来自毛细管和***中蛋白质和流体的渗漏以及黏液产生的增加而导致普通感冒的症状。由免疫系统细胞在鼻膜中释放的激肽和其他化学物质是深入研究的主题。研究人员正在检验阻断它们的药物或它们所结合的细胞上的受体是否可能使感冒患者受益。
尽管经济和健康成本与感冒相关，但很少有药物或天然化合物被证明可对抗引起感冒的病毒。本领域需要用于预防和治疗感冒的天然化合物。
发明内容
本发明涉及包含N-乙酰神经氨酸(唾液酸，Neu5Ac或NANA)的组合物的用途。包含NANA的组合物用于诱导生理反应，诸如减轻感冒症状和预防感冒发作。
在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗、抑制、减轻或预防感冒或减少与感冒有关的症状的组合物，该组合物包含有效浓度的NANA。在一些实施方式中，该组合物进一步包含赋形剂。在一些实施方式中，该组合物被配制用于口服给药。在一些实施方式中，该组合物被配制成片剂。在一些实施方式中，该组合物被配制成胶囊。在一些实施方式中，该组合物进一步包含食品。在一些实施方式中，该组合物被配制成用于鼻给药的喷鼻剂。在一些实施方式中，该组合物是凝胶。在一些实施方式中，该组合物是水溶液。在一些实施方式中，该组合物被配制成用于局部或鼻内给药的泵式喷雾剂、气溶胶喷雾剂、凝胶、粉末、洗剂、泡沫或乳膏。在一些实施方式中，该有效浓度为约1nM至约10mM。
在一些实施方式中，该组合物进一步包含触变剂(例如，包括但不限于岩藻多糖、藻酸盐或壳聚糖)。在一些实施方式中，触变剂为甘露糖醛酸。在一些实施方式中，甘露糖醛酸以0.01至2.0％(例如，0.01至1.0％或0.1％至0.5％)的w/w百分比范围存在于该组合物中。
在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗人类或动物受试者的方法，该方法包括提供包含有效浓度的NANA的组合物并鼻内给药所述组合物。在一些实施方式中，该组合物选自由凝胶、溶液、喷雾剂、粉末、乳膏、泡沫和洗剂组成的组。在一些实施方式中，有效浓度为约1nM至约10mM。
在一些实施方式中，本发明提供了治疗、减轻、改善、减少或抑制病毒感染的方法，该方法包括使所述病毒与有效浓度的NANA接触，其中所述病毒选自由流感病毒、鼻病毒、腺病毒、疱疹病毒和诺如病毒(noroviruses)组成的组。在一些实施方式中，有效浓度为约1nM至约10mM。
在一些实施方式中，本发明提供了治疗、减轻、改善或抑制病毒感染，或减少与病毒感染有关的症状或暴发的方法，该方法包括口服给药有效浓度的NANA，其中所述病毒选自由流感病毒、鼻病毒、腺病毒、疱疹病毒(例如HSV-1或HSV-2)和诺如病毒组成的组。在一些实施方式中，有效量为约0.1至5克/天、并且更优选为0.5至5克/天并且最优选为约1至3克/天。在一些实施方式中，有效量足以减少感染疱疹例如HSV-1(单纯疱疹病毒I型)或HSV-2(单纯疱疹病毒I型)的受试者中疱疹暴发的频率。在一些实施方式中，有效量足以抑制或预防感染疱疹的受试者中的疱疹暴发。疱疹暴发可包括疮疡或病变的发生，尤其是水疱样病变，以及还有类似于丘疹、红斑等的其他病变。在一些实施方式中，暴发是HSV-1暴发并且包括口、牙龈和鼻周围的病变。在一些实施方式中，暴发是HSV-2暴发并且包括生殖器区域周围的病变。
在一些实施方式中，本发明提供了包含有效浓度的NANA酸的动物饲料。
在一些实施方式中，本发明提供了包括在其上沉积有NANA的固体支撑物的装置，其中所述装置被配置为覆盖动物或人类的体腔。
在一些实施方式中，本发明提供了用于给药抗病毒溶液的装置，该装置包括含有包含NANA和推进剂的溶液的容器。
在一些实施方式中，本发明提供了用于给药包含NANA的抗病毒溶液的装置，该装置包括含有包含NANA的溶液的容器、泵和喷嘴，其中所述泵的致动导致所述包含NANA的溶液通过所述喷嘴排出。
在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗怀疑被鼻病毒污染的场所的方法，该方法包括在使得降低可生存或感染性鼻病毒的百分比的条件下，将所述场所暴露于包含NANA的组合物。在一些实施方式中，场所是表面。在一些实施方式中，场所是封闭空间。在一些实施方式中，封闭空间是房间。在一些实施方式中，封闭空间是车辆。在一些实施方式中，包含NANA的组合物作为气溶胶喷雾剂提供。在一些实施方式中，包含NANA的组合物作为泡沫提供。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了用于在人类或动物受试者中预防、抑制、治疗、减轻、减少或改善上呼吸道疾患，预防、抑制、治疗、减轻、减少或改善上呼吸道病毒感染，减少因上呼吸系统感染而引起的病假或休假日，和/或减少公共交通期间上呼吸道病毒感染的方法，所述方法包括：在使得所述预防、抑制或治疗上呼吸道疾患；抑制或治疗上呼吸道病毒感染；减少病假或休假日；和/或减少公共交通期间上呼吸道病毒感染的条件下，鼻内给药受试者包含有效浓度的N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物。在一些优选的实施方式中，上呼吸道疾患选自由鼻内干燥和普通感冒的发展和/或存在以及鼻病毒感染组成的组。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了包含有效量的N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物用于实现以下中的一种或多种的用途：预防、抑制、治疗、减轻或改善上呼吸道疾患，预防、抑制、治疗、减轻或改善上呼吸道病毒感染，减少因上呼吸系统感染而引起的病假或休假日，和/或减少公共交通期间上呼吸道病毒感染。在一些优选的实施方式中，上呼吸道疾患选自由鼻内干燥和普通感冒的发展和/或存在以及鼻病毒感染组成的组。
在一些优选的实施方式中，水溶液中NANA的有效浓度为约0.1至约10mg/ml。在一些优选的实施方式中，水溶液中NANA的有效浓度为约0.5至约5mg/ml。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为约0.1至5.0mg NANA/鼻孔/天。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为约0.1至1.0mg NANA/鼻孔/天。在一些优选的实施方式中，包含N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物的pH，优选在水溶液中，为2.0至4.0。在一些优选的实施方式中，包含N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物的pH，优选在水溶液中，为2.5至3.7。在一些优选的实施方式中，包含N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物的pH，优选在水溶液中，为2.8至3.2。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为以每天2到8次给药递送。在一些优选的实施方式中，该组合物进一步包括触变剂。在一些优选的实施方式中，触变剂选自由岩藻多糖、藻酸盐和壳聚糖组成的组。在一些优选的实施方式中，触变剂是甘露糖醛酸。在一些优选的实施方式中，甘露糖醛酸以0.01至2.0％的w/w百分比范围存在于所述组合物中。在一些优选的实施方式中，甘露糖醛酸以0.01至1.0％的w/w百分比范围存在于所述组合物中。在一些优选的实施方式中，所述甘露糖醛酸以0.1％至0.5％的w/w百分比范围存在于所述组合物中。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了组合物，该组合物包含：适用于施用到黏膜的0.1至10mg/ml NANA的水溶液。在一些优选的实施方式中，包含N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物的pH，优选在水溶液中，为2.0至4.0。在一些优选的实施方式中，包含N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物的pH，优选在水溶液中，为2.5至3.7。在一些优选的实施方式中，包含N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物的pH，优选在水溶液中，为2.8至3.2。在一些优选的实施方式中，NANA的有效浓度在水溶液中为约0.5至约5mg/ml。在一些优选的实施方式中，该组合物进一步包含触变剂。在一些优选的实施方式中，触变剂选自由岩藻多糖、藻酸盐和壳聚糖组成的组。在一些优选的实施方式中，触变剂是甘露糖醛酸。在一些优选的实施方式中，甘露糖醛酸以0.01至2.0％的w/w百分比范围存在于所述组合物中。在一些优选的实施方式中，甘露糖醛酸以0.01至1.0％的w/w百分比范围存在于所述组合物中。在一些优选的实施方式中，甘露糖醛酸以0.1％至0.5％的w/w百分比范围存在于所述组合物中。在一些优选的实施方式中，该组合物是喷鼻剂。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了含有上述任一种组合物的喷雾瓶，该喷雾瓶被配置成将喷鼻剂施用到动物或人类的鼻。在一些优选的实施方式中，该喷雾瓶被校准以递送包含0.03至1.0mg NANA/喷雾的喷雾剂量。在一些优选的实施方式中，该喷雾瓶被校准以递送包含0.05至0.3mg NANA/喷雾的喷雾剂量。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了上述任一种组合物或喷雾瓶用于治疗、减轻、抑制、减少其频率、改善或预防上呼吸道疾患，治疗、减轻、抑制、减少其频率、改善或预防上呼吸道病毒感染，减少因上呼吸系统感染而引起的病假或休假日，和/或减少公共交通期间上呼吸道病毒感染。在一些优选的实施方式中，上呼吸道疾患选自由鼻内干燥和普通感冒的发展和/或存在以及鼻病毒感染组成的组。在优选的实施方式中，应当理解，观察到的预防、降低、减轻、抑制或减少是与未经治疗的受试者相比的。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了上述任一种组合物或喷雾瓶用于1)预防、降低、减轻、抑制人类受试者流鼻涕或减少其频率；2)预防、降低、减轻、抑制人类受试者打鼾或减少其频率；3)预防、降低、减轻、抑制患有慢性鼻腔堵塞的受试者的鼻腔堵塞或减少其频率；4)治疗、减轻或预防慢性免疫缺陷；5)治疗、减轻、抑制、减少、改善或预防肾炎或肾小球肾炎。在优选的实施方式中，应当理解，观察到的预防、降低、减轻、抑制或减少是与未经治疗的受试者相比的。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了上述的任一种组合物或喷雾瓶用于在感染疱疹病毒的受试者中治疗、预防、改善或减少疱疹暴发。在优选的实施方式中，应当理解，观察到的预防、降低、减轻、抑制或减少是与未经治疗的受试者相比的。在一些优选的实施方式中，疱疹病毒是HSV-1或HSV-2。在一些优选的实施方式中，NANA的有效量是每天0.5至5克的每日剂量。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了在感染疱疹病毒的受试者中治疗、预防、改善或减少疱疹暴发的方法，该方法包括在使得该受试者经历的疱疹暴发的发生率频率降低的条件下，向该受试者给药有效量的NANA。在优选的实施方式中，应当理解，观察到的预防、降低、减轻、抑制或减少是与未经治疗的受试者相比的。在一些优选的实施方式中，疱疹病毒是HSV-1或HSV-2。在一些优选的实施方式中，NANA的有效量是每天0.5至5克的每日剂量。
本文描述了另外的实施方式。
附图说明
图1示出了唾液酸N-乙酰神经氨酸(NANA或Neu5Ac)和N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)的结构。2
图2示出了唾液酸如何结合成较大的糖缀合物的通用结构。3
图3示出了常见食物(肉、鱼和海鲜)中的Neu5Ac含量。
图4示出了家禽和乳制品中的以皮摩尔/微克产品计的Neu5Ac含量。
图5示出了以微克/100克食物计的Neu5Ac含量。
定义
如本文所用，术语“功能性食物”是指包含生物活性营养保健剂的食物产品。
如本文所用，术语“营养保健剂”和相关术语是指具有健康促进、疾病预防或药用特性的天然、生物活性化学化合物。营养保健剂的实例包括但不限于洋葱(Allium Cepa)、大蒜(Allium Sativum)、芦荟(Aloe Vera)、白芷(Angelica Species)、天然存在的抗氧化剂、米曲霉酶疗法(Aspergillus Oryzae Enzyme Therapy)、大麦草(barley grass)、菠萝蛋白酶(Bromelain)、肉碱(Carnitine)、类胡萝卜素(Carotenoids)和类黄酮(Flavonoids)、儿茶素(Catechin)、积雪草(Centella Asiatica)(雷公根(Gotu kola))、辅酶Q10(Coenzyme Q10)、中成药(Chinese Prepared Medicines)、毛喉鞘蕊花(ColeusForskohlii)、印度没药(Commiphora Mukul)、锐刺山楂(Crataegus Oxyacantha)(山楂(Hawthorne))、姜黄(Curcuma Longa)(姜黄根(Turmeric))、紫锥花属种(EchinaceaSpecies)(紫锥花(Purple Coneflower))、刺五加(Eleutherococcus Senticosus)(西伯利亚人参(Siberian Ginseng))、麻黄属种(Ephedra Species)、膳食鱼油消费品和鱼油补充剂、染料木黄酮(Genistein)、银杏(Ginkgo Biloba)、甘草属(Glycyrrhiza)(甘草(Licorice))、贯叶连翘(Hypericum Perforatum)(圣约翰草(St.John's Wort))、黄连碱(Hydrastis)(金印草(Goldenseal))和其他含黄连素(Berberine)的植物、乳杆菌(Lactobacillus)、山梗莱属(Lobelia)(路单利草(Indian Tobacco))、互叶白千层(Melaleuca Alternifolia)、欧薄荷(Mentha Piperita)、NANA、人参(Panax Ginseng)、胰酶(Pancreatic Enzymes)、卡瓦胡椒(Piper Mythisticum)、原花青素低聚物(Procyanidolic Oligomers)、非洲臀果木(Pygeum Africanum)、槲皮素(Quercetin)、撒尔沙植物种(Sarsaparilla Species)、锯叶棕(Serenoa Repens)(锯棕榈(Saw palmetto)、萨巴棕(Sabal serrulata))、水飞蓟(Silybum Marianum)(乳蓟(Milk Thistle))、迷迭香/柠檬香蜂草(Rosemary/Lemon balm)、***盐、褐色钟花树(Tabebuia Avellanedae)(重蚁木(LaPacho))、蒲公英(Taraxacum Officinale)、小白菊(Tanacetum Parthenium)(白菊花(Feverfew))、紫杉醇(Taxol)、熊果(Uva Ursi)(熊莓(Bearberry))、欧洲越橘(VacciniumMyrtillus)(蓝莓(Blueberry))、缬草(Valerian Officinalis)、白果槲寄生(ViscumAlbum)(槲寄生(Mistletoe))、维生素A、β-胡萝卜素和其他类胡萝卜素以及生姜(ZingiberOfficinale)(姜(Ginger))。
如本文所用，术语“受试者”和“患者”是指任何动物，诸如像狗、猫、鸟、牲畜的哺乳动物，并且优选人。“受试者”和“患者”的具体实例包括但不限于患普通感冒(例如鼻病毒感染)或处于普通感冒(例如鼻病毒感染)风险的个体。
如本文所用，术语“生理上可接受的载体”是指通常与油性药物一起使用的任何载体或赋形剂。此类载体或赋形剂包括但不限于油类、淀粉、蔗糖和乳糖。
如本文所用，术语“口服递送媒介物”是指口服递送药物的任何方式，包括但不限于胶囊、丸剂、片剂和糖浆剂。
如本文所用，术语“食物产品”是指适合于人类、非反刍动物或反刍动物消耗的任何食物或饲料。“食物产品”可以是经制备且经包装的食物(例如，蛋黄酱、沙拉酱、面包或奶酪食物)或动物饲料(例如，经挤出且成粒的动物饲料或粗混合饲料)。“经制备的食物产品”意指经批准供人类消耗的任何预包装食物。
如本文所用，术语“食品”是指适合人类或动物消耗的任何物质。
如本文所用，术语“膳食补充剂”是指以单剂量单位或多剂量单位包装的少量用于补充人类或动物饮食的化合物。膳食补充剂通常不提供大量卡路里，但可能含有其他微量营养素(例如，维生素或矿物质)。
如本文所用，术语“营养补充剂”是指包含与卡路里来源组合的“膳食补充剂”的组合物。在一些实施方式中，营养补充剂是餐食替代品或补充剂(例如，营养或能量棒或营养饮料或浓缩物)。
具体实施方式
本发明涉及营养保健品领域，并且尤其涉及包含(NANA)的营养保健品。包含NANA的组合物用于诱导生理反应，诸如减轻感冒症状或预防感冒发作。
唾液酸是神经氨酸(具有九个碳原子的单糖)的N-或O-取代的衍生物的通用名称。该物质首先是在唾液中描述的，因此它的名字以希腊语唾液：sialon命名。唾液酸天然存在于细胞表面和许多可溶性蛋白质上的糖分子、蛋白质和脂质的致密且复杂的编织物的末端。分子、细胞和遗传研究显示，唾液酸参与控制细胞和细胞基质的相互作用、细胞表面上的分子间相互作用以及在细胞的直接细胞外环境中与其他分子的相互作用1。
Neu5Ac可以用酶CMAH(胞苷一磷酸-N-乙酰神经氨酸羟化酶)转化成Neu5Gc。由于在编码该酶的基因中一处缺失，因此在人类中未发现该酶。因此，人们假定人在史前时代已经失去了该基因的功能并且因而失去了将NeuAc转化成Neu5Gc的能力。与动物和一些其他生物体不同，人类只能合成Neu5Ac。2
如在图2中详细描述的，两种最常见的唾液酸是N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)和N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)(左图2a)。Neu5AC中的5号碳原子(正方形)可被酶促修饰为一个N-乙酰基，并进一步羟基化以形成Neu5Gc(圆圈)。几个碳原子(C4、C7；C8和C9)上的羟基可以进一步被修饰，例如用O-乙酰基、O-硫酸根、O-乳酰基、O-甲基和O-磷酸根基团修饰。唾液酸通过不同的葡糖苷键附接到糖蛋白和糖脂上的碳水化合物链上。最常见的键是与半乳糖部分结合的α2,3，与半乳糖或N-乙酰基半乳糖胺部分结合的α2,6，以及与聚糖上另一个唾液酸部分结合的α2.8。唾液酸裂解气道上皮-并能充当病毒的受体。用聚糖微阵列和其他复杂方法的最新研究显示了细胞表面上的含唾液酸的受体与病毒蛋白质之间的相互作用的复杂性。这为研究病毒如何粘附在气道上皮中的细胞表面提供了机会4。
根据Schalcter(2017)5，Neu5Ac在摄取后被迅速吸收。它也通过尿液被迅速***出。在唾液、尿液和人脑中发现了唾液酸的最高浓度。
Neu5Ac的独特结构提供了具有多个重要功能基团：羧基、羟基、N-乙酰基和甘油功能的分子。与单糖相比，这些基团为氢键、盐桥和非极性相互作用提供了多种可能性(Schnaars et al 2014)。对于能够繁殖并产生感染的病毒，病毒不会仅仅粘在上皮表面，而且还会酶促地渗透细胞以使用细胞自身的复制机制。此外，新的病毒颗粒可能会从细胞中出来。细胞膜的“开放”可以通过神经氨酸酶(一种从糖缀合物上裂解唾液酸的酶)发生。病毒酶因此提供了新病毒颗粒的额外传播。研究已经显示，它们还将能中和含硅酸的可溶性蛋白质，否则含硅酸的可溶性蛋白质将干扰表面结合病毒6、7。
预期唾液酸的供应可以清洁并可能还阻止病毒与细胞表面的结合，使得抑制病毒复制。研究显示，唾液酸必须与糖缀合物结合才能使它们能够用作病毒颗粒的受体。为了做到这一点，唾液酸必须首先通过胞饮作用在细胞中被吸收-以便在细胞核中被激活并在高尔基体中进一步缀合在细胞表面上运输的缀合物8。
Neu等人(2011)认为，尽管结合蛋白在不同病毒的病毒表面，并且不同病毒类型的结构显示出很大差异，但它们与宿主细胞上的唾液酸之间的相互作用却显示出惊人的相似性。这是由于唾液酸缀合物上的羧基和N-乙酰基氮原子在空间中如何特殊地定向——与其他单糖有一些不同。因此，宿主细胞受体表面能够结合许多不同的病毒——这对有机体既有好处也有坏处。
很早之前就已知，母乳具有保护婴儿免受感染的能力9。人母乳具有高含量的具有缀合和游离唾液酸的复合寡糖10。对人母乳的研究显示，包含唾液酸的复合寡糖可充当阻止细菌粘附至细胞表面的可溶性受体11。Martín-Sosa(2002)12显示，如果此类寡糖失去唾液酸，则它们不会像唾液酸存在时那样有效地阻止大肠杆菌与肠上皮的结合。
如果不仅寡糖而且可溶性唾液酸都可以阻止多功能受体(针对不同的病毒类型)，那么，设想唾液酸可以抑制病毒感染或替代地随后的细菌感染。在外部给药唾液酸的情况下，过量的唾液酸可能存在于上皮捕获/复合病毒颗粒中，使得它们不会到达细胞表面或充当假受体。非缀合的唾液酸可以替代地抑制病毒酶-神经氨酸酶-它为宿主细胞内的有效病毒复制打开细胞表面。然而，本发明不限于特定机制。
干燥的鼻黏膜往往是一个问题，其已显示使用唾液酸会更好地保持水分。这可能是由于添加了唾液酸的黏液层变得更加湿润，因为具有多个官能团的唾液酸具有通过氢键结合水的强大能力。
尽管经过几十年的研究，但与病毒造成的人类疾病负担相比，有效的抗病毒化合物仍然相对较少。加上某些病毒的高突变率，使得耐受抗病毒物质的突变体以惊人的速度和频率出现，现在对通用抗病毒剂的需求与以往一样重要。
因此，本文提供了用于治疗或预防普通感冒和其他病毒感染的包含NANA的组合物。
人鼻病毒(HRV)是微小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)的成员。迄今为止，已经鉴定出100多种不同的血清型。这种多样的病毒家族被认为是造成80％以上的上呼吸道感染的原因(Heikkinen&Jarvinen,2003)。作为普通感冒的主要原因，无论是就它们所引起的疾病还是对社会的经济影响而言，鼻病毒都是主要的人类病原体。
流感已被确定为一种严重的人类苦难，可导致局部流行病和全球性急性呼吸系统感染大流行。在美国，每年流感病毒导致20,000至40,000例死亡和最高达300,000例住院病例(Sandhu&Mossad,2001)。在1918年的大流行中，普遍认为有超过4000万人死亡。尽管儿童和年轻人感染的病例更多，但严重的病在老年人、免疫功能低下个体或患有诸如哮喘、糖尿病、肾衰竭和心脏疾病的慢性病的人中更为常见。每年的流行病在北半球为11月至3月，并且在南半球为4月至9月(Cox N.J&Subbarao K,2000)。
引起人类重大疾病的两类流感病毒被称为A型流感病毒和B型流感病毒。认为B型流感病毒仅感染人类，而A型流感病毒已知会感染多种动物物种。两者都导致季节性流行病，并且因此，都包含在每年流感疫苗中。
单纯疱疹病毒1型(HSV-1)是引起人类感染的疱疹病毒科(Herpesviridae)的成员。HSV-1在世界范围内分布，估计有60-95％的成年人口受到感染(Brady,R.C.&Bernstein,D.I.,2004)。HSV-1常与口腔疾病有关，通常导致面部病变的形成。这是一种重要的嗜神经病毒，可以感染中枢神经系统(Immergluck et al.,1998)。一旦病毒获得了进入感觉神经节中神经元的通道，就可以建立潜在的感染(Kramer et al.,2003)。对所涉及的生物过程知之甚少，但在某些应激条件下，会触发再活化，通常会导致外部病变的再度出现(Itzhaki&Lin,1998；Qiu and Abdel-Meguid 1999)。单纯疱疹病毒2型(HSV-2)是疱疹病毒科的成员，可引起人类生殖器感染。
腺病毒是引起广泛疾病的一组病毒。已知它们会感染眼睛的衬里、呼吸道、肠和尿路，并且也是常见感冒症状的致病剂之一。基于生物学和抗原特性，该病毒可分成从A到F六个亚群(Horwitz,1996；Shenk 1996)。腺病毒感染的治疗建议通常是卧床休息，并与症状的治疗有关，因为目前尚无针对该病毒的有效特异性抗病毒物质。
诺如病毒是病毒性肠胃炎的最常见原因(Caul et al.,1993；Hedberg&Osterholm,1993)。因此，诺如病毒有时被称为‘冬季呕吐病毒’，因为它在冬季期间更为明显。该病毒极具感染性，并且在受感染个体的呕吐物和粪便中存在。目前，诺如病毒不能通过常规手段在实验室中生长。然而，在去年，繁殖技术上已经取得了一些进展，其包括使用具有小肠上皮细胞的生物反应器(Straub et al.,2007)。然而，目前有必要使用替代病毒来测试对诺如病毒的潜在杀病毒效果。最公认的替代诺如病毒的病毒是猫杯状病毒，其与诺如病毒一样，属于杯状病毒科(Caliciviridae)家族的病毒(Slomka et al.,1998；Doultree et al.,1999)。
在一些优选的实施方式中，本发明提供了使用NANA组合物用于预防和/或治疗由以下病毒家族的成员引起的病毒感染的NANA组合物方法：微小核糖核酸病毒科、杯状病毒科、腺病毒科(Adenoviridae)、疱疹病毒科和正粘病毒科(Orthomyxoviridae)，并且特别是由鼻病毒引起的普通感冒。
下面详细描述了示例性制剂。然而，在一些实施方式中，NANA被配制成用于局部、鼻内、***内、***内或舌下给药的洗剂、喷雾剂、凝胶、软膏、粉末、水性或非水性溶液；用于肠内给药的胶囊、粉末或片剂；或用于肠胃外给药的溶液。
本发明的NANA组合物可以任何合适的形式递送。在一些实施方式中，NANA优选为约大于90％、95％、99％或99.9％的纯度。在一些实施方式中，NANA是HPLC纯化的。例如，NANA可以从例如Sigma Chemical Company,St.Louis,MO商购。在一些实施方式中，本发明提供了治疗、减轻、改善或抑制病毒感染，或减少与病毒感染有关的症状或暴发的方法，该方法包括口服给药有效浓度的NANA，其中所述病毒选自由流感病毒、鼻病毒、腺病毒、疱疹病毒和诺如病毒组成的组。在一些实施方式中，有效量为约0.1至5克/天、并且更优选为0.5至5克/天并且最优选为约1至3克/天。在一些实施方式中，有效量足以减少感染疱疹的受试者中疱疹暴发的频率。在一些实施方式中，有效量足以抑制或预防感染疱疹的受试者中的疱疹暴发。疱疹暴发可包括疮疡或病变的发生，尤其是水疱样病变，以及还有类似于丘疹、红斑等的其他病变。在一些实施方式中，暴发是HSV-1暴发，并且包括口、牙龈和鼻周围的病变。在一些实施方式中，暴发是HSV-2暴发，并且包括生殖器区域周围的病变。
在一些优选的实施方式中，NANA在水溶液中的有效浓度为约0.1至约10mg/ml，例如，用于治疗、减轻、改善、减少或抑制鼻病毒或流感病毒感染或与鼻病毒或流感病毒感染有关的症状。在一些优选的实施方式中，NANA在水溶液中的有效浓度为约0.5至约5mg/ml。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为约0.1至5.0mg NANA/鼻孔/天。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为约0.1至1.0mg NANA/鼻孔/天。在一些优选的实施方式中，包含N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物的pH，优选在水溶液中，为2.0至4.0。在一些优选的实施方式中，包含N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物的pH，优选在水溶液中，为2.5至3.7。在一些优选的实施方式中，包含N-乙酰神经氨酸(NANA)的组合物的pH，优选在水溶液中，为2.8至3.2。
在一些实施方式中，NANA组合物以水溶液(包括凝胶)的形式提供，适合用作喷雾或薄雾。在一些实施方式中，将水性NANA溶液掺入诸如预压缩泵的泵喷雾容器或诸如雾化器或冷薄雾系统的装置中，用于以细薄雾或喷雾形式递送到鼻、口或肺中。在一些优选的实施方式中，本发明提供了一种喷雾瓶，其配置用于将含有上述任一种组合物的喷鼻剂施用到动物或人类的鼻中。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为约0.1至5.0mg NANA/鼻孔/天。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为约0.1至1.0mg NANA/鼻孔/天。在一些优选的实施方式中，喷雾瓶被校准以递送包含0.03至1.0mg NANA/喷雾的喷雾剂量。在一些优选的实施方式中，喷雾瓶被校准以递送包含0.05至0.3mg NANA/喷雾的喷雾剂量。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为以每天从喷雾瓶中2至8次给药，即2至8泵喷雾剂递送到每个鼻孔。
在一些实施方式中，组合物进一步包含触变剂(例如，包括但不限于岩藻多糖、藻酸盐或壳聚糖)。在一些实施方式中，触变剂是甘露糖醛酸。在一些实施方式中，甘露糖醛酸以0.01至2.0％(例如0.01至1.0％或0.1％至0.5％)的w/w百分比范围存在于组合物中。
在一些实施方式中，本发明的NANA组合物含有药学上可接受的赋形剂，该赋形剂有效地形成包含该组合物的药剂的固体颗粒的触变悬浮液，诸如美国专利No.7,122,206中所述的那些。赋形剂优选以一定的量存在，以在不使用期间和将组合物喷入鼻腔期间，以及当组合物沉积在鼻腔黏膜表面或鼻腔内或身体别处的内皮表面上时保持药剂颗粒悬浮在组合物中。在一些实施方式中，组合物在静止时的粘度相对较高，例如约400至约1000cp。当组合物经受剪切力时，例如，在喷雾前经受其被搅拌所涉及的力时，组合物的粘度降低(例如，至约50至约200cp)，并且其易于流过喷雾装置并以细羽流的形式从中离开，其渗透并沉积在鼻的至少以下部分的黏膜表面上：鼻的前部区域(额鼻腔)；额窦；上颌窦；以及位于鼻腔的鼻甲骨(concha)上的鼻甲(turbinate)。因此，NANA组合物包含自由流动的液体，并且呈喷雾形式，进入所需的黏膜并沉积在所需的黏膜上的细薄雾。在沉积且相对无应力的形式下，组合物的粘度增加并呈凝胶状形式，其包括悬浮在其中的药剂颗粒，并且抵抗被存在于鼻腔中的固有黏膜纤毛力从鼻道中清除。
可以使用能够维持药剂的固体颗粒基本上均匀地分散在组合物中并赋予组合物所需的触变特性的任何药学上可接受的材料。这种材料被称为“悬浮剂”。悬浮剂的实例包括羧甲基纤维素、硅酸镁铝(veegum)、黄芪胶、膨润土、甲基纤维素和聚乙二醇。优选的悬浮剂是微晶纤维素和羧甲基纤维素的混合物，前者优选以大量存在，最优选以约85至约95wt.％的量存在，其中后者成分占混合物的约5至约15wt.％。
悬浮剂占组合物的量将根据特定的药剂和使用的量、所使用的特定的悬浮剂、组成组合物的其他成分的性质和量以及所需的特定粘度值而变化。一般而言，据信最广泛使用的组合物将包含约1至约5wt.％的悬浮剂。
本发明的NANA组合物优选地包括赋予组合物所需特性的其他成分。在一些实施方式中，使用分散剂或湿润剂。可以使用有效湿润颗粒并且是药学上可接受的任何分散剂。可以使用的分散剂的实例是脂肪醇、酯和醚，包括例如以商标Pluronic、Tergitol、Span和Tween出售的分散剂。优选使用亲水性非离子表面活性剂。利用以商标Polysorbate 80可获得的聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯已取得了优异的结果。
在一些实施方式中，组合物包含抗氧化剂。可以在组合物中使用的药学上可接受的抗氧化剂的实例包括抗坏血酸、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、8-羟基喹啉和N-乙酰半胱氨酸。推荐组合物包含约0.001至约0.01wt.％的抗氧化剂。
此外，出于稳定性的目的，应保护NANA组合物免受微生物污染和生长的影响。可以在组合物中使用的药学上可接受的抗微生物剂的实例包括季铵化合物，例如，苯扎氯铵、苄索氯铵、溴化十六烷基三甲铵和氯化十六烷基吡啶；汞试剂，例如硝酸苯汞、醋酸苯汞和硫柳汞；醇试剂，例如氯丁醇、苯乙醇和苯甲醇；抗菌酯，例如对羟基苯甲酸的酯；以及其他抗微生物剂，诸如氯己定、氯甲酚和多粘菌素。推荐组合物包含约0.001至约1wt.％的抗微生物剂。
如上所述，本发明的一个方面包括组合物，该组合物是无臭的并且含有作为抗氧化剂和作为抗微生物剂起作用的稳定剂的混合物。该混合物包含具有抗微生物特性的季铵化合物和通常被认为是螯合剂的材料。材料与药剂(例如曲安奈德(triamcinoloneacetonide))的这种组合在组合物中的使用产生了对氧化降解和细菌生长等具有抗性的高度稳定的组合物。在优选的形式中，混合物包含苯扎氯铵和乙二胺四乙酸二钠。
无臭组合物通常将包含约0.004至约0.02wt.％的季铵化合物和约0.01至约0.5wt.％的螯合剂。由于使用了上述化合物的混合物，因此无需在组合物中包含被视为抗氧化剂的材料。
本发明的组合物优选包含等渗剂，其起到防止由组合物刺激鼻黏膜的作用。无水形式的右旋糖是优选的等渗剂。可使用的其他药学上可接受的等渗剂的实例包括氯化钠、右旋糖和氯化钙。推荐该组合物包含最高约5wt.％的等渗剂。
NANA组合物的pH将根据所使用的特定药剂并考虑生物可接受性和药剂的稳定性而变化。通常，组合物的pH将在约4.5至约7.5的范围内。含有曲安奈德的组合物的优选的pH为约4.5至约6，最优选约5。可用于调节组合物pH的药学上可接受的材料的实例包括盐酸和氢氧化钠。
本发明的NANA组合物可以以任何合适的方式制备。在优选形式中，形成药剂固体颗粒和分散剂的水性悬浮液，并将该水性悬浮液与含有悬浮剂的水性悬浮液合并。前者优选通过将药剂添加到分散剂的水溶液中并充分混合来制备。后者通过在添加悬浮剂之前酸化水(pH约4.7至约5.3)来制备。在特别优选的形式中，将四元化合物(抗微生物剂)的水溶液添加到药剂的水性悬浮液中，并将其他成分(例如，等渗剂、抗氧化剂或螯合剂)添加到触变性悬浮液中。上述各批次的组合物在合并前均充分混合。合并组合物批次的优选方式是将其中一个批次，优选“药剂”批次引入另一批次的底部，例如，通过向上泵送该批次穿过另一批次。将包含合并批次的组合物充分混合。优选的制备方法的使用提供了高效且有效的方式来配制具有基本均匀地分散在其中的药剂固体颗粒的组合物，同时避免了通常与水基药物组合物的制备相关的问题，例如过度发泡以及颗粒分散的不均匀性。
施用于每个鼻道的NANA的量将根据所治疗病症的性质和所治疗个体的性质而变化。在一些优选的实施方式中，NANA在水溶液中的有效浓度为约0.1至约10mg/ml。在一些优选的实施方式中，NANA在水溶液中的有效浓度为约0.5至约5mg/ml。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为约0.001至0.1mg NANA/鼻孔/天。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量为约0.01至0.05mg NANA/鼻孔/天。在一些优选的实施方式中，NANA的每日剂量以每天2至8次给药递送。
因此，本发明提供了一种制品，其包括喷雾瓶，在该喷雾瓶中具有用于递送到诸如鼻的体腔中的NANA溶液或粉末。喷雾瓶可优选地包括用于将NANA组合物从瓶中排出的泵系统，诸如压缩泵、喷雾泵或预压缩泵。在一些优选的实施方式中，喷雾瓶被校准以递送包含0.001至0.02mgNANA/喷雾的喷雾剂量。在一些优选的实施方式中，喷雾瓶被校准以递送包含0.004至0.01mg NANA/喷雾的喷雾剂量。
在一些实施方式中，本发明提供了一种制品，该制品是一种可佩戴在诸如个体的口或鼻的体腔上的装置。在一些实施方式中，该装置是口罩，诸如外科口罩。在优选的实施方式中，口罩包括固体支撑物或基质，诸如聚合物基质或织造织物基质，其中掺入了NANA组合物。在一些实施方式中，NANA组合物作为水溶液、凝胶或粉末喷涂到基质上。在一些实施方式中，当通过口罩呼吸时，病毒在接触口罩时被灭活。在一些实施方式中，基质涂有NANA组合物以提供每cm2的基质约0.01微克至约100毫克的NANA，优选每cm2约1微克至约1毫克的NANA。
在一些实施方式中，NANA被配制用于口服递送。本发明的补充剂的成分优选包含在可接受的用于口服消耗的赋形剂和/或载体中。载体的实际形式以及因而补充剂本身不是关键的。载体可以是液体、凝胶、囊形片、胶囊、粉末、固体片剂(包衣的或未包衣的)、茶等。补充剂优选为片剂或胶囊的形式，并且最优选为硬明胶胶囊的形式。合适的赋形剂和/或载体包括麦芽糖糊精、碳酸钙、磷酸二钙、磷酸三钙、微晶纤维素、右旋糖、米粉、硬脂酸镁、硬脂酸、交联羧甲基纤维素钠、羟乙酸淀粉钠、交联聚维酮、蔗糖、植物胶、乳糖、甲基纤维素、聚维酮、羧甲基纤维素、玉米淀粉等(包括其混合物)。优选的载体包括碳酸钙、硬脂酸镁、麦芽糖糊精及其混合物。使用常规技术将各种成分与赋形剂和/或载体混合并形成所需的形式。本发明的片剂或胶囊可涂有在约6.0至7.0的pH下溶解的肠溶包衣。在小肠溶解但不在胃中溶解的合适的肠溶包衣是乙酸邻苯二甲酸纤维素。有关配制和给药的技术的更多细节可以在最新版的《雷明顿药物科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)》(MaackPublishing Co.,Easton,PA)中找到。
在一些实施方式中，配制上述口服递送媒介物以提供每日剂量为0.1g至10.0g之间的NANA，优选0.5至2.0g之间的NANA，并且甚至更优选约1.0g的NANA。在一些实施方式中，NANA的有效量是抑制目标病毒的生长和增殖或使病毒失活所需的量。在一些实施方式中，有效量是足以在目标部位(诸如循环血流)或在体腔(诸如鼻道或鼻窦)中提供约1纳摩尔至10微摩尔的NANA浓度的NANA的量。
在一些实施方式中，NANA以可用于大气处理(诸如通过薄雾)的流体提供。在一些实施方式中，本发明提供了一种装置，该装置包括储液器、泵和喷嘴，其中储液器包括包含NANA的流体，该流体可以经由泵通过喷嘴排出以提供包含NANA的薄雾。在一些实施方式中，装置是加湿器，而在其他实施方式中，装置是自动薄雾分配器。在一些实施方式中，在适当的气溶胶喷雾分配装置中提供作为气溶胶喷雾的NANA。因此，在一些实施方式中，本发明提供了包含NANA和气溶胶推进剂的装置或组合物。推进剂包括但不限于挥发性烃的混合物，通常为丙烷、正丁烷和异丁烯、二甲醚(DME)、甲***、氧化亚氮、二氧化碳和氢氟烷烃(HFA)：HFA 134a(1,1,1,2-四氟乙烷)或HFA 227(1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷)或两者的组合。通常，NANA流体将与推进剂混溶。NANA流体可优选地被配制成气溶胶薄雾、泡沫凝胶、乳膏或洗剂。
现代气溶胶喷雾产品有三个主要部分：罐、阀和执行器或按钮。罐最通常是涂漆的马口铁(带有一层锡的钢)并可由2或3块压接在一起的金属制成。铝罐也是常见的并且通常用于更昂贵的产品。阀压接在罐的平台(rig)上，该部件的设计对于确定喷雾速率很重要。用户按下执行器以打开阀；执行器中喷嘴的形状和大小控制气溶胶喷雾的扩散。
在一些实施方式中，本发明的装置包括活塞屏障系统。使用活塞屏障系统的包装通常用于高度粘性的产品，诸如后发泡凝胶、稠乳膏和洗剂。活塞屏障系统的主要益处是确保了产品与推进剂的分离，在整个其消费者寿命过程中保持了制剂的纯度和完整性。活塞屏障系统还提供了受控且均匀的产品排出速率，具有最小的产品保留率，并且是经济的。
在一些实施方式中，本发明的装置包括罐中袋系统(或BOV“阀上袋”)。该系统用气密的多层层压小袋将产品与增压剂分离，从而保持了完整的制剂完整性，因此只分配纯产品。在该实施方式中，在袋中提供了NANA流体。在其众多益处中，罐中袋系统延长了产品的保质期。其他优点包括全方位(360度)分配、安静且非冷排放。
这些装置用于需要抗病毒喷雾剂、泡沫、凝胶或其他流体的场合。例如，这些装置用于分配抗病毒薄雾以处理所需的环境或空间，诸如建筑物中的房间，诸如办公室、厨房、小隔间或盥洗室，或车辆，诸如火车车厢、飞机、公共汽车或出租车、货车或汽车，或动物禁闭设施，诸如谷仓、屠宰场、禽舍等。装置也可用于在诸如工作台面、地板、淋浴器等的表面上分配含有NANA的流体。在一些实施方式中，装置被用于将含有NANA的薄雾注入建筑物、谷仓或车辆的通风系统中。
在还进一步的实施方式中，本发明提供了可以施用到眼睛的在溶液(诸如生理盐水溶液)中包含NANA的NANA组合物。因此，在一些实施方式中，本发明提供了一种制品，其包括装备有喷嘴的容器以向眼睛提供NANA溶液滴。预期，除了对眼睛和周围组织的影响外，通过眼和泪道给药的NANA还将直接进入鼻窦和相关的腔内。因此，给药在滴眼液中的NANA和/或附加的抗微生物剂或抗病毒物质是给药NANA或其他化合物以通过眼和泪道以及鼻窦、黏液内表面(用于提供局部和全身治疗的有效吸附)来治疗眼感染、窦感染和全身性治疗的有效方法。
在其他实施方式中，NANA作为适合于由消费者添加到食物或饮料中的粉末或液体提供。例如，在一些实施方式中，膳食补充剂可以粉末形式给药至个体，例如通过混合到饮料中或通过搅拌到半固体食物(诸如布丁、配料(topping)、沙司、果泥、烹煮的谷物或沙拉酱)中，或者通过其他方式添加到食物中来使用。
在一些实施方式中，NANA被提供在供给农场动物(诸如家禽、牛、猪、羊等)的水中，或被用于渔业用水中。在其他实施方式中，NANA被提供在自来水或瓶装水中供人类使用。
NANA组合物可包含一种或多种惰性成分，尤其是在希望限制通过膳食补充剂添加到饮食中的卡路里数量的情况。例如，本发明的膳食补充剂也可含有任选的成分，包括例如草药、维生素、矿物质、增强剂、着色剂、甜味剂、调味剂、惰性成分等。例如，本发明的组合物可含有以下中的一种或多种：抗坏血酸盐(抗坏血酸、抗坏血酸矿物盐、蔷薇果、金虎尾等)、脱氢表雄酮(DHEA)、何首乌(Fo-Ti或Ho Shu Wu)(亚洲传统疗法常用的草药)、猫爪藤(古代草药成分)、绿茶(多酚)、肌醇、海带、红皮藻、生物类黄酮、麦芽糖糊精、荨麻、烟酸、烟酰胺、迷迭香、硒、硅石(二氧化硅、硅胶、马尾草、问荆等)、螺旋藻、锌等。此类任选成分可以是天然存在的或浓缩的形式。
在一些实施方式中，组合物进一步包含维生素和矿物质，包括但不限于磷酸三钙或乙酸三钙；磷酸氢二钾；硫酸镁或氧化镁；盐(氯化钠)；氯化钾或乙酸钾；抗坏血酸；正磷酸铁；烟酰胺；硫酸锌或氧化锌；泛酸钙；葡糖酸铜；核黄素；β-胡萝卜素；盐酸吡哆醇；单硝酸硫胺酯；叶酸；生物素；氯化铬或吡啶甲酸铬；碘化钾；硒酸钠；钼酸钠；叶绿醌；维生素D3；氰钴胺；***钠；硫酸铜；维生素A；维生素C；肌醇；碘化钾。维生素和矿物质的合适的剂量可例如通过查询美国RDA指南来获得。
本发明提供了包含营养保健剂的膳食补充剂，优选NANA本身或与一种或多种附加的营养保健剂的组合。营养保健剂是具有健康促进、疾病预防或药用特性的天然、生物活性化学化合物。营养保健品的实例包括但不限于洋葱、大蒜、芦荟、白芷、天然存在的抗氧化剂、米曲霉酶疗法、大麦草、菠萝蛋白酶、肉碱、类胡萝卜素和类黄酮、儿茶素、积雪草(雷公根)、辅酶Q10、中成药、毛喉鞘蕊花、印度没药、共轭亚油酸(CLA)、锐刺山楂(山楂)、姜黄(姜黄根)、紫锥花属种(紫锥花)、刺五加(西伯利亚人参)、麻黄属种、膳食鱼油消费品和鱼油补充剂、染料木黄酮、银杏、甘草属(甘草)、贯叶连翘(圣约翰草)、黄连碱(金印草)和其他含黄连素的植物、乳杆菌、山梗莱属(路单利草)、互叶白千层、甲基萘醌、欧薄荷、人参、胰酶、卡瓦胡椒、原花青素低聚物、非洲臀果木、槲皮素、撒尔沙植物种、锯叶棕(锯棕榈、萨巴棕)、水飞蓟(乳蓟)、迷迭香/柠檬香蜂草、***盐、褐色钟花树(重蚁木)、蒲公英、小白菊(白菊花)、紫杉醇、熊果(熊莓)、欧洲越橘(蓝莓)、缬草、白果槲寄生(槲寄生)、维生素A、β-胡萝卜素和其他类胡萝卜素以及生姜(姜)。
几种营养保健剂用于治疗病毒性疾病(例如，染料木黄酮(在大豆/红三叶草中)、迷迭香/柠檬香蜂草、***盐、大麦草、月桂酸、苦味叶下珠/珠子草(Phyllanthusamarus/niruri)(参见，例如，Nicolson,G.(1998)J.Medicine 1:123-128；通过引用以其整体并入本文)。附加的抗病毒营养保健剂包括但不限于儿茶素、类黄酮、紫锥花属、药鼠李(cascara)和NANA。
在优选的实施方式中，本发明提供了包含膳食补充剂(例如NANA)的组合物，该组合物用于诱导生理反应，诸如减轻或治疗感冒症状，预防感冒发作，增加能量和增加受试者的健康感。此类组合物可以含有例如0.1g至10.0g之间的膳食补充剂(例如NANA)、优选0.5g至2.0g之间的膳食补充剂(例如NANA)、并且甚至更优选约1.0g的膳食补充剂(例如NANA)。此外，优选以足以诱导所需生理反应(例如，减轻感冒症状、预防感冒发作)的量提供膳食补充剂(例如NANA)。在一些实施方式中，提供组合物用于诱导前述反应之一，而在其他实施方式中，提供组合物用于诱导两种或更多种前述反应。
本发明进一步提供了用于治疗以上讨论的生理状况(例如感冒等)的方法。
本发明的膳食补充剂可以进一步以任何形式(例如，丸剂、食物产品等)给药。在优选的实施方式中，膳食补充剂作为饮料、棒、粉末、丸剂或奶昔的形式提供(例如，如下文更详细描述的营养补充剂)。
本发明的膳食补充剂可每日服用一次或多次。优选地，膳食补充剂每日口服给药一至两次。当然，给药频率将取决于每单位(胶囊或片剂)的剂量和所需的摄取水平。剂量水平/单位可进行调整，从而以合理数量的单位(例如，一天服用两次的两个胶囊或片剂)来提供所推荐水平的每日成分(例如，大约1g营养保健剂)。在优选的实施方式中，每天的剂量加起来等于每种成分的每日摄取量。在优选的实施方式中，膳食补充剂随餐或餐前服用。在其他实施方式中，膳食补充剂不随餐服用。在优选的实施方式中，膳食补充剂增加饱腹感并导致热量摄取量减少和随后的体重减轻。在特别优选的实施方式中，膳食补充剂调控病毒(例如，腺病毒)。
在其他实施方式中，本发明提供了包含NANA的营养补充剂(例如，能量棒或代餐棒或饮料)。营养补充剂可以充当餐食或零食替代品，并且通常提供营养卡路里。优选地，营养补充剂提供均衡量的碳水化合物、蛋白质和脂肪。营养补充剂可进一步包括简单、中等链长的碳水化合物，或多糖，或其组合。可选择单糖用于所需感官特性。未烹煮玉米淀粉是复合碳水化合物的一个实例。如果希望玉米淀粉维持其高分子量结构，则其应仅包含在未经烹煮或热处理的食物制剂或其部分中，因为热量会将复合碳水化合物分解成简单碳水化合物，其中简单碳水化合物是单糖或二糖。在一种实施方式中，营养补充剂含有三种链长水平的碳水化合物来源的组合(简单、中等和复合的；例如蔗糖、麦芽糖糊精和未烹煮玉米淀粉)。
待掺入本发明的营养补充剂的蛋白质来源可以是营养制剂中使用的任何合适的蛋白质，并且可以包括乳清蛋白质、乳清蛋白质浓缩物、乳清粉末、蛋、大豆粉、大豆奶大豆蛋白质、大豆蛋白质分离物、酪蛋白酸盐(例如，酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钙钠、酪蛋白酸钙、酪蛋白酸钾)、动植物蛋白质及其混合物。在选择蛋白质来源时，应首先考虑蛋白质的生物学价值，其中发现酪蛋白酸盐、乳清、乳白蛋白、卵白蛋白和全卵蛋白质的生物学价值最高。在优选的实施方式中，蛋白质是乳清蛋白质浓缩物和酪蛋白酸钙的组合。这些蛋白质具有很高的生物学价值；也就是说，它们具有高比例的必需氨基酸。参见Modern Nutrition inHealth and Disease,eighth edition,Lea&Febiger,publishers,1986,especiallyVolume 1,pages 30-32。
营养补充剂还可含有其他成分，诸如其他维生素、矿物质、抗氧化剂、纤维和其他膳食补充剂(例如，蛋白质、氨基酸、胆碱、卵磷脂、ω-3脂肪酸)中的一种或组合。这些成分中的一种或多种的选择取决于制剂、设计、消费者偏好和最终用户。添加到本发明的膳食补充剂中的这些成分的量是本领域技术人员熟知的。美国RDA可为儿童和成年人提供此类剂量的量的指导。可添加的另外的维生素和矿物质包括但不限于磷酸三钙或乙酸三钙；磷酸氢二钾；硫酸镁或氧化镁；盐(氯化钠)；氯化钾或乙酸钾；抗坏血酸；正磷酸铁；烟酰胺；硫酸锌或氧化锌；泛酸钙；葡糖酸铜；核黄素；β-胡萝卜素；盐酸吡哆醇；单硝酸硫胺酯；叶酸；生物素；氯化铬或吡啶甲酸铬；碘化钾；硒酸钠；钼酸钠；叶绿醌；维生素D3；氰钴胺；***钠；硫酸铜；维生素A；维生素C；肌醇；碘化钾。
调味剂、着色剂、香料、坚果等可掺入产品中。调味剂可以为调味提取物、挥发油、巧克力调味料、花生酱调味料、饼干屑、脆米、香草或任何可商购的调味料的形式。可用的调味料的实例包括但不限于纯茴香提取物、仿香蕉提取物、仿樱桃提取物、巧克力提取物、纯柠檬提取物、纯橙提取物、纯薄荷提取物、仿菠萝提取物、仿朗姆酒提取物、仿草莓提取物或纯香草提取物；或挥发油，诸如香蜂草油、月桂油、佛手柑油、香柏油、核桃油、樱桃油、肉桂油、丁香油或薄荷油；花生酱、巧克力调味料、香草饼干屑、奶油糖果或太妃糖。在一种实施方式中，膳食补充剂含有可可或巧克力。
为了最终产品的稳定性，可以添加乳化剂。合适的乳化剂的实例包括但不限于卵磷脂(例如，来自鸡蛋或大豆)和/或甘油单酯和甘油二酯。其他乳化剂对于本领域技术人员而言是显而易见的，并且一种或多种合适的乳化剂的选择将部分取决于制剂和最终产品。
防腐剂也可以添加到营养补充剂中，以延长产品的保质期。优选地，使用诸如山梨酸钾、山梨酸钠、苯甲酸钾、苯甲酸钠或EDTA钙二钠的防腐剂。
除了上文所述的碳水化合物之外，营养补充剂可含有天然或人造(优选地为低卡路里)甜味剂，例如糖类、环己氨基磺酸盐(cyclamate)、天冬胺(aspartamine)、阿斯巴甜(aspartame)、乙酰磺胺酸钾和/或山梨醇。如果营养补充剂是供超重或肥胖个体或易患高血糖症的II型糖尿病的个体消耗的，那么此类人造甜味剂是可取的。
营养补充剂可以以多种形式提供，以及可以通过多种生产方法提供。在优选的实施方式中，为了制造食物棒，将液体成分烹煮；将干燥成分与液体成分一起添加到混合器中并混合，直至达到面团相；将面团放入挤出机中并挤出；将挤出的面团切成适当的长度；并且将产品冷却。除了本文具体列出的成分以外，棒还可含有其他营养物和填充剂，以增强味道。
营养补充剂的份量优选含有0.1g至10.0g之间的NANA，优选0.5至2.0g之间的NANA，并且甚至更优选约1.0g的NANA。本领域技术人员理解，可以在本文描述的成分中添加其他成分，例如，用于加工或制造营养补充剂的填充剂、乳化剂、防腐剂等。
在还进一步的实施方式中，本发明提供了功能性食物，包括食物产品、经制备的食物产品或包含营养保健剂的食品。例如，在一些实施方式中，提供了包含营养保健剂的饮料和固体或半固体食物。这些形式可包括但不限于饮料(例如，软饮品、奶和其他乳饮品以及低糖饮品)、烘焙商品、布丁、乳制品、糖果、零食食物、或冷冻糖果或新奇产品(例如，冰淇淋、奶昔)、经制备的冷冻餐食、糖块、快餐产品(例如薯条)、汤、涂抹酱、调味汁、沙拉酱、经制备的肉制品、奶酪、酸奶和任何其他含脂肪或油的食物以及食物成分(例如小麦粉)。
食物产品的份量优选含有0.1g至10.0g之间的NANA，优选0.5至2.0g之间的NANA，并且甚至更优选约1.0g的NANA。
在一些实施方式中，本发明考虑将NANA给药至除人之外的动物(或如上所述的人类)。优选的动物包括但不限于家禽、鱼类、伴侣动物(诸如狗和猫)、马、猪和反刍动物(诸如牛和羊)。NANA可以出于上述任何目的进行给药，例如，预防病毒感染、治疗病毒感染等。在一些优选的实施方式中，本发明提供了使用NANA组合物在动物中用于预防和/或治疗由以下病毒家族的成员引起的病毒感染的NANA组合物方法：微小核糖核酸病毒科、杯状病毒科、腺病毒科、疱疹病毒科和正粘病毒科。以上详细描述了示例性制剂。然而，在一些实施方式中，NANA被配制成用于局部、鼻内、***内、***内或舌下给药的洗剂、喷雾剂、凝胶、软膏、粉末、水性或非水性溶液；用于肠内给药的胶囊、粉末或片剂；或用于肠胃外给药的溶液。在一些实施方式中，NANA优选作为粉末的组分提供，该粉末可以溶解在供动物引用或用来给动物洗澡的水中。在一些实施方式中，NANA作为液体提供，该液体可以被雾化或起薄雾到谷仓或其他容纳动物的围栏中。在其他实施方式中，NANA作为溶液供应，该溶液可以被注入到为动物设计的水系统中。
在一些实施方式中，本发明提供了包含NANA的动物饲料。动物饲料优选如本领域已知的进行配制。示例性动物饲料包括为家禽、鱼类、伴侣动物(诸如狗和猫)、马、猪和反刍动物(诸如牛和羊)配制的日常食物。在一些实施方式中，NANA作为补充剂提供，该补充剂可以在混合或制造动物饲料时掺加到动物饲料中。在优选的实施方式中，配制饲料以提供每日剂量为0.1g至10.0g之间的NANA，优选0.5g至2.0g之间的NANA，并且甚至更优选约1.0g的NANA。
实施例
实施例1
在很长一段时间(约10年)里，一些个体偶尔使用含唾液酸的喷鼻剂的试验版作为他们用唾液酸研究的一部分。令他们惊讶的是，使用这种喷雾剂可产生更少的感冒和/或更少严重的感冒症状。
产品VIIRAL喷鼻剂的易用性已于2017年在10个挪威家庭中进行了为期8周的测试，每个家庭由4个成员组成；两个成年人和两个儿童或青少年。在测试期期间，两名测试受试者(一名成年人和一名儿童)使用VIIRAL喷鼻剂(每天两次；每次每个鼻孔两次喷雾)；而两个人(一名成年人和一名儿童/青少年)则没有接受任何类型的喷鼻剂或其他防冻补救措施(anti-icing remedies)。每周登记潜在的副作用、味觉、嗅觉、喷雾瓶的设计和使用，以及如果有任何可用的用途，对任何主观感冒症状的影响。
测试证实，喷雾瓶按预期工作，没有味觉和嗅觉或其他不幸的影响。测试进一步证实，产品使用安全且易于管理。测试还提供了数据，该数据显示，在当前时期(1月中旬-3月中旬)定期使用VIIRAL喷鼻剂的趋势有助于减少鼻紧和上气道不适的事件——关于每个家庭的测试“安慰剂组”——以及在8周的测试期内未使用任何类型的喷鼻剂或其他相关治疗的人可知。
实施例2
在单盲随机安慰剂对照设置中测试了一大批健康志愿者。确定短期使用(4周)含唾液酸Neu5Ac的VIIRAL喷鼻剂是否对潜在疾患(尤其是上呼吸道中的)具有预防作用。这些疾患是鼻内干燥和感冒的发展/存在。包括的群体是SAS航空公司机组人员的专业人员中的志愿者。
在飞行过程中，机组人员或多或少地在“密闭空间”里工作。这些人员与来自不同地理区域具有不同背景和健康状态的人的刺激物、细菌和病毒密切接触并暴露于这些刺激物、细菌和病毒中。他们还经受时差、温度的巨大变化、空气污染、日节律变化和不同大气压。因此，鉴于呼吸系统暴露，可以称机组职员具有特别暴露的工作场所。
参与者被要求每周就一组自己的观察结果提供反馈，观察结果在0-10的标度上进行分级。参与者被要求使用整体标度来更好地区分反应选项。
假设是VIIRAL喷鼻剂有助于增加上呼吸道的水分和更清洁黏膜，使得削弱感染条件，并减少感冒时的刺激和炎症程度。减少感冒症状发生率的第二增益是SAS服务员的病假减少了。
VIIRAL喷鼻剂的生产。VIIRAL喷鼻剂由挪威公司Pharmatech AS；Vallehellene4；1664制造。VIIRAL喷鼻剂是用Neu5Ac在0.9％NaCl水溶液中制备的。喷雾盒是容纳20ml体积的标准喷雾器。喷雾瓶每20mL含有150mg唾液酸/Neu5Ac，即7.5mg/ml。由SigmaAldrich提供的纯Neu5Ac用作唾液酸成分。
Neu5Ac的信息：
CAS号：131--48--6
经验式：C 11 H 19 N0 9
分子量：309.27
白色粉末，mp 185至-187摄氏度。
易溶于水
安慰剂的生产。安慰剂产品以与具有Neu5Ac的VIIRAL喷雾剂相同的方式来制造——但不添加Neu5Ac，即在水溶液中添加0.9％NaCl。研究中所有的喷雾瓶都贴有标签，以便参与者无法识别内容物。
耐久性VIIRAL喷鼻剂。VIIRAL喷鼻剂的耐久性基于供应商保证的Neu5Ac在水溶液中的耐久性。
Neu5Ac是食物中的天然存在的组分——即唾液酸是天然产物。图3和图4示出了所分析的食物中Neu5Ac的含量(以皮摩尔/微克食物计)。水果和蔬菜(所分析的那些：胡萝卜、黄瓜、沙拉、番茄、马铃薯、柠檬、酸橙、橄榄油、豆腐、橙子、香蕉、草莓、桃子、苹果)不含唾液酸13。
从图3和图4中看出，绝大多数正常饮食的人有规律地消耗大量的Neu5Ac。图3和图4指示了以皮摩尔/微克产品计的Neu5Ac的量——因此所有值都是可比较的。
图3显示，基于制备方法(生的、烹煮的、油炸的等)，肉制品中Neu5Ac的含量可能略有变化——但羊肉和牛肉的差异不是很大。对于猪，图3显示，在这项研究中，相比以不同方式烹煮的猪肉，煮熟的肉和猪肉猪肉香肠中有更多的Neu5Ac。贝类和其他海鲜显示出很少或低的Neu5Ac含量，而一些类型的鱼并且尤其是鱼子酱/鱼卵中则含有大量Neu5Ac。
图4示出了Neu5Ac的进一步含量——以皮摩尔/微克食物计显示的家禽和奶制品中多种食物(柱的蓝色部分)中的结合/缀合形式。如所示出的，切达(cheddar)奶酪含有最大量的Neu5Ac，而且含有最多缀合的Neu5Ac(蓝色柱)。基于图3和图4中描述的数据，计算饮食中Neu5Ac的总含量。数据如下图5所示。因此，在肉类、鱼类和乳制品的正常饮食中，每天消耗相对大量的Neu5Ac。
这些图显示，在由肉类、鱼类、海鲜和乳制品组成的正常饮食中，我们每天消耗大量的Neu5Ac。
毒性。Neu5Ac的毒性已根据标准测试小组针对口服耐受性和生育力14以及致突变性和遗传毒性(genotoxisitet)15进行了测试。未检测到毒性作用。在大鼠中，Neu5Ac的NOAEL确定为974mg/kg体重/天。
基于毒性数据、常见食物中的含量、Neu5Ac在VIIRAL喷鼻剂中的快速***和期望浓度以及上述试验，品质保证研究得出结论：本研究中给药该产品是安全的。
研究设计。研究作为盲安慰剂对照随机研究呈现。有关研究的信息已准备好并发送给所有参与者。
测试周期1：
测试组A：
目标：70-80人使用VIIRAL喷雾剂(150mg唾液酸/20mL)——总暴露量9.2mg/天，持续4周。
测试组B：
目标：70-80人服用安慰剂喷雾剂暴露量0mg/天，持续4周。
喷雾盒的递送。给予参与者随机标记有盒号的盲喷雾盒。引渡前将所有盒称重。在研究开始时递送100％的产品(2瓶VIIRAL喷鼻剂)。用过的喷雾盒不应丢弃，而应递交给研究者基础机构。负责研究的人员收集所有使用后的喷雾盒进行检查，以确保良好的依从性说明。
测试周期2：
测试周期2的方案与测试周期1相同。
测试组C：
目标：70-80人使用VIIRAL喷雾剂(150mg唾液酸/20mL)——总暴露量9.2mg/天，持续4周。
测试组D：
目标：70-80人服用安慰剂喷雾剂，暴露量0mg/天，持续4周。
包含和排除标准。包含：
·18岁及以上——两种性别
·在SAS担任机组人员的员工
排除：
·哮喘
·呼吸系统过敏
·慢性肺疾病
·正在为慢性疾病服用药剂的人和癌症患者
·最近六至十二个月内接种过疫苗的个体。
·怀孕
VIIRAL喷鼻剂——剂量和日常使用。VIIRAL喷鼻剂被设计并且应与其他常见的鼻喷雾器一样使用，例如0.9％盐水喷雾器——既用于那些接受含有Neu5Ac的喷雾剂的人，并且也用于
那些得到安慰剂喷雾剂的人。每个Neu5Ac喷雾瓶每20mL含有150mg唾液酸。每个喷雾瓶平均给予130次“喷淋”，并且每个测试人员每天每个鼻孔喷2x2次—主要是每个早上和每个晚上，即每天喷8次。这意味着测试受试者平均每天要暴露9.2mg唾液酸/Neu5Ac。(假定摄取规定剂量)。基于已经做出的以及关于结果所预期的安全评估选择剂量。
如果需要，参与者可以用其他方式采取全天2x4次喷雾(每个鼻孔4次)，只要一天中的总量达到8次喷雾即可。时间输入于报告表中。
研究周期。测试受试者如所述使用喷鼻剂持续4周。
获得的报告和信息。通过专门精心制作的计算机软件(一种app)每周电子记录一次(主要在每周同一天)观察结果，该计算机软件可以下载到平板电脑或手机上。计算机程序/app由挪威公司eStep制作。数据存储在机构的服务器上。有关使用喷雾剂的条件/反应/响应的信息以使用VAS标度的表格阐明。用于报告的所使用的标度范围为从0至10。数字0指示没有变化，10指示每个参数的最大有益效果。鼓励参与者使用完整标度。计算机程序/“app”也具有输入评论的地方。需要密码登录。数据在公司网站上自动处理。
观察指标。作为研究中的观察指标，使用以下：
·回答了所有问题和使用了的喷鼻剂的数量(依从性)
·整个测试周期的总体状况：指示测试受试者是否患有感冒或其他呼吸系统问题——以及测试周期期间的潜在变化的总体状态
·使用VIIRAL喷鼻剂后的湿润的总体感觉
·使用VIIRAL喷鼻剂后的或鼻开放的总体感觉
·与测试周期之前相比，测试周期期间的缺勤减少、没有变化或增加的经历。
每天参与者也会考虑他们自己的健康——关注上气道的状况。
访问数据。收集到的数据(参见上文)将自动进入公司的密码保护网站。负责人有权访问匿名数据。
统计方法。标准统计方法用于数据处理，优选寿命分析。
基于试验研究，预期下降约10％。每个方案有80个人体，我们估计我们有力量可检测到积极治疗与安慰剂之间大约20％的差异。
实施例3
SAS(斯堪的纳维亚航空公司)多年来在他们的机舱人员之中的病假百分比很高。2017年年中，在Viiral AS与SAS之间建立了联系——包括公司的HR和卫生保健部。同意设计使用Viiral喷鼻剂的临床测试——测试使用该产品是否可以减少在SAS机舱人员员工之中的“病假天数”的数目的假设。
SAS在Gardemoen机场以双盲设置分发了研究材料(安慰剂和活性Viiral喷鼻剂)。研究参与者与分发测试物质的SAS人员都不知道化合物A和B是活性物质还是安慰剂。研究进行了4周。
研究化合物-Viiral喷鼻剂和安慰剂。Viiral喷鼻剂(A)含有神经氨酸，1mg/ml溶于等渗(0.9％)盐水(NaCl)中，pH为3.0。每个喷雾瓶含有20mL，相当于140“剂量”。安慰剂喷鼻剂(B)含有等渗(0.9％)盐水(NaCl)。每个喷雾瓶含有20mL，相当于140“剂量”。使用每天两次每个鼻孔2次双喷雾(每天8次喷雾)，每个人在4周的测试周期期间应进行8x 28＝224次喷雾；意味着每个测试人员2个喷雾瓶。
研究设计和研究方案中的问题。研究被设计为双盲随机临床试验。研究化合物(A和B)由SAS人员分发，SAS人员不知道两种化合物(A或B)中的哪一种代表“活性”化合物——Viiral喷鼻剂。安慰剂化合物(B)含有0.9％的盐水-其本身被认为减少鼻中的“干燥”，并由此减少鼻炎/上呼吸道刺激的发展风险。
安慰剂研究化合物(B)在递送到SAS站点以分发研究物质上略有延迟。这解释了A组和B组中被招募个体数量的“失衡”。
研究方案包括6个问题——应在1、2、3和4周后回答(因此应将6个问题回答4次)。
1.上周您是否每天使用2x 4次喷雾剂剂量？
2.您是否感到鼻中“湿润”增加？
3.您是否感到鼻更“开放”？
4.上周您是否经历了更多的干燥、感冒或其他问题？
5.上周您是否有更多的精力——与使用喷鼻剂相关？
6.上周您是否因为上气道疾病而休假在家？
如果是的话，多少天？
研究结果
参与和依从性(问题1)
·在为研究招募的总共127个个体中，78个参与活性组(A)并且49个参与安慰剂组(B)。
·每个个体应回答5份问卷，意味着508份问卷的回答代表100％。
·总共返回了完整的445份问卷(87.6％)；活性组(A)271份，以及安慰剂组(B)174份。
·总共来自Viiral组(A)的68个个体和来自安慰剂组(B)的43个个体完成了4周的测试周期，表示依从性为86％。
·关于每天摄取2x 4剂量的问题——整个组的依从性为88％。
·未完成4周测试周期的个体(稍后)将在特殊表格中描述。
鼻中的湿润(问题2)
·对于活性组(A)，在1、2、3和4周后相对经历的改善分别为1.15；1.46；1.59和1.42。
·对于安慰剂组(B)，在1、2、3和4周后相对经历的改善分别为1.30；1.40；1.27和1.40。
·结论：在测试人的活性组和安慰剂组中都描述了鼻中“稍微更好的湿润”的经历；其中活性成分组(A)的经历稍微更好。然而，活性组(A)中54％的参与者经历了鼻中更加湿润。
鼻开放(问题3)
·通过对这个问题的个体评论，认识到鼻膜中的“鼻开放”与“湿润”的经历之间数据不一致。
·对于活性组(A)，在1、2、3和4周后的数字分别为：1.15；1.14；1.23和1.17，
·对于(B)安慰剂组，数字为1.20、1.43、1.02和1.2，
·结论——两组的研究起点均存在小差异。如果有任何不同，则观察结果有利于安慰剂组(B)。在活性组(A)中，总共50％的参与者经历了鼻更开放。
“鼻紧”、感冒或上气道问题的发生率(问题4)
·这个问题将比较少的问题/改善的情况排列较高的数目的更多问题。测试人员误解了这种“改变”的逻辑，并因此答案令人困惑。这可以在添加到答案中的个体评论中看到。因此，我们决定不评价问题4的答案。
您是否在测试周期期间有更多的精力(问题5)
·对于活性组(A)，在1、2、3和4周后的数字分别为0.25；0.42；0.29和0.41。
·对于安慰剂组(B)，数字分别为0.37；0.60；0.71和0.57。
·结论：两组的变化都很小。A组中19％的参与者在他们的日常生活中经历了更多的精力。
您是否因上气道疾病而休假(如果有的话，是多少天)(问题6)
·在活性组中，整个4周周期的生病天数(68人)为41天——如果按每周工作7天计算，病假占2.23％；或者如果按每周工作5天计算，则病假占3.13％。
·在安慰剂组中，生病天数(43人)为63天——按每周工作7天计算，占5.29％，并且如果使用每周工作5天计算，则占7.23％。
主要结论：
1.研究——双盲随机临床试验——已在127个个体中进行，其中88％依从性与返回测试问题所需答案和给药每日8次喷雾剂量有关。
2.研究的主要参数(问题6)是评估Viiral喷鼻剂是否可以减少导致SAS机舱人员无法工作的生病天数。4周的临床试验已经记录，与服用安慰剂的人员相比，服用Viiral喷鼻剂的SAS人员组病假减少了超过56.7％。这意味着在4周的试验周期内，与Viiral组相比，安慰剂组的病假高131％(与Viiral组的2.23％的病假相比，安慰剂组的病假为5.29％)。
3.进一步在接受活性产品(A)-Viiral喷鼻剂的参与者中有超过50％报告“更好的鼻品质”的经历(问题2和5)。
实施例4
实施例3中描述的NANA喷鼻剂已经在一系列个体测试病例中给药于许多其他受试者。在所有情况下，每日剂量均如上所述。这些病例的结果可总结如下。
1.在多个病例中，流鼻涕的年长受试者注意到流鼻涕明显减少或流鼻涕完全停止。
2.在多个病例中，受试者报告打鼾减少或停止。
3.患有慢性鼻腔阻塞的5岁患者在使用NANA喷鼻剂后摆脱了每日鼻中的阻塞和疮疡。
4.患有慢性免疫缺陷的年轻足球运动员接受了NANA喷鼻剂后，立即恢复了正常的训练能力。过去，他在每次参加训练和比赛后都会或多或少地患上流感样症状。
5.患有肾脏疾病的免疫缺陷青少年开始NANA喷鼻剂治疗。受试者的肾小球肾炎和蛋白质***在治疗后大大降低。
实施例5
对50岁患慢性疱疹暴发的受试者每日给药3克NANA的剂量，该受试者的暴发大约每隔一周发作一次持续了10年。在开始NANA治疗后，受试者已经两个月没有疱疹暴发了。
参考文献
1Ronald L.Schnaars,Rita Gerardy-Schahn,and Herbert Hildebrandt:sialicAcids in the Brain:Gangliosides and Polysialic Acid Nervous SystemDevelopment,Stability,Disease,and Regeneration.Physiol Rev.2014Apr；94(2):461-518.doi:10.1152/physrev.00033.2013
2Norbert Sprenger and Peter I.Duncan:sialic Acid Utilization.2012American Society for Nutrition.Adv.Nutr.3:392S-397S,2012；doi:10.3945/an.111.001479.
3Jennifer E.Stencel-Baerenwald,Kerstin Reiss,Dirk M.Reiter,ThiloStehle,and Terence S.Dermody:The sweet spot:Defining virus-sialic acidinteractions.Nat Rev Microbiol.2014November；12(11):739-749.doi:10.1038/nrmicro3346.
3B Wang and J Brand-Miller:The role and potential of sialic acid inhuman nutrition.Review.
4Ursula Neu,Johannes Bauer,and Thilo Stehle.Viruses and sialic Acids:Rules of Engagement.Curr Opin Struct Biol.2011October；21(5):610-618.doi:10.1016/j.sbi.2011.08.009.
5Schalcter M:N-Acetylneuraminic Acid(Neu5Ac).www.glyconutritionforlife.org/Science_of_Glyconutrients/N-AcetylneuraminicAcid_(Neu5Ac)php
6Ajit Varki,sialic acids in human health and disease.Trends MolMed.2008August；14(8):351-360.doi:10.1016/j.molmed.2008.06.002.
7 Thilo Stehle,Zaigham M.Khan:Rules and Exceptions:sialic AcidVariants and Their Role in Determining Viral Tropism.Journal of Virologyp.7696-7699 July 2014 Volume 88 Number 14
8 Muriel Bardor,Dzung H.Nguyen,Sandra Diaz,and Ajit Varki:Mechanismof Uptake and Incorporation of the Non-human sialic acid N-GlycolylneuraminicAcid into Human Cells.J Biol Chem Vol.280,No.6,Issue of February 11,pp.4228-4237,2005
9 Newburg,DS:Do the binding properties of oligosaccharides in milkprotect human infants from gastrointestinal bacteria？J.Nutr.127:980S-984S,1997.
10 Heine,W；Wutzke,KD；Radke M.Sialic acid in breast milk and infantformula food.Monatsschr Kinderheilkd.1993 December；141(12):946 to-50.
11 Boehm,G and Stahl,B.Oligosaccharides in milk.J.Nutr 2007,vol 137,p847S-849S
12 Martín-Sosa,S,Martín,M-J and Hueso,P:The Sialylated Fraction ofMilk oligosaccharides Ice Partially Responsible for Binding twoenterotoxigenic and Uropathogenic Escherichia coli Human Strains.J.Nutr.132:3067-3072,2002
13 Samraj AN,Pearce OM,
14 GRAS Notice(GRN)No.602http://www.fda.gov/Food/IngredientsPackagingLabeling/GRAS/NoticeInventory /default.htmORIGINALSUBMISSION
15Choi,SH,Baldin,N.,Wagner,VO(2I),Roy,S.,Rose,J.,Thosrud,BA,Pnothirath,P.&
以上说明书中提到的所有出版物和专利均通过引用并入本文。在不脱离本发明的范围和精神的情况下，本发明的所描述的方法和系统的各种修改和变化对本领域技术人员而言将是显而易见的。尽管已经结合具体优选的实施方式对本发明进行了描述，但是应理解，所要求保护的发明不应当被不适当地限制于这些具体实施方式。实际上，对于相关领域的技术人员来说显而易见的用于实施本发明所描述的模式的各种修改旨在在所附权利要求的范围内。
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