阅读说明：本技术 用于治疗乳腺癌和***癌的组合物 (Composition for treating breast and prostate cancer ) 是由 E·巴斯金-贝 J·艾斯内尔 E·伍德森 于 2018-12-06 设计创作，主要内容包括：本发明描述了包含赛维罗奈和/或地塞米松的药物组合物和给药方案,以及治疗疾病、障碍或其症状的方法。(Pharmaceutical compositions and dosing regimens comprising sevelamer and/or dexamethasone are described, as well as methods of treating diseases, disorders, or symptoms thereof.)

具体实施方式

来说明本发明。

通用实验方法

本文方案的结构中变量的定义与本文所描述式中的对应位置的变量的定义是相匹配的。

赛维罗奈(aka VT-464和INO-464；1-(6,7-双(二氟甲氧基)萘-2-基)-2-甲基-1- (1H-1,2,3-***-4-基)丙-1-醇)的合成

实施例1

1-(6,7-双(二氟甲氧基)萘-2-基)-2-甲基-1-(1H-1,2,3-***-4-基)丙-1-醇(3)

在-40℃向A(18g，69mmol)在DCM(180mL)中的搅拌的溶液中滴加BBr₃(87.2g，348mmol)。在完成添加后，在-40℃下继续搅拌1小时，并在室温搅拌1小时。将反应混合物倒入冷水中，然后用DCM(2×200mL)萃取水层。将合并的有机萃取液用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。过滤并减压蒸发溶剂后，将粗产物经柱色谱(SiO₂，100-200mesh)纯化，得到K(9.0g，39mmol，56％)为棕色固体。¹H NMR(200MHz,CDCl3):δ8.29(s,1H),7.88(dd,J＝8.8,1.6Hz,1H),7.68(d,J＝8.6Hz,1H),7.36(s,1H),7.26(s,1H),5.88(br s,2H),3.79-3.63(m,1H),1.27(d,J＝6.8Hz,6H)。

向K(5.0g，21.7mmol)在DMF(50mL)中的搅拌的溶液中加入溴二氟乙酸乙酯(17.6g，86.6mmol)和K₂CO₃(18g，130mmol)，并将该混合物在110℃搅拌48h。将反应混合物倒入冷水中，然后用DCM(2×100mL)萃取水层。将合并的有机萃取物用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，并经无水Na₂SO₄干燥。过滤并减压蒸发溶剂后，将粗产物经柱色谱(SiO₂,100-200mesh)纯化，得到L(2.3g，4.3mmol,32％)，为固体。¹H NMR(500MHz,CDCl3):δ8.40(s,1H),8.05(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.86(d,J＝9.0Hz,1H),7.79(s,1H),7.68(s,1H),6.67(t,J_F,H＝73Hz,1H),6.65(t,J_F,H＝73Hz,1H),3.72-3.65(m,1H),1.27(d,J＝7.0Hz,6H)。

在-78℃和惰性气氛下向N-SEM-1,2,3-***(2.25g，11.8mmol)在无水醚(25mL)中的搅拌的溶液中滴加t-BuLi(0.69g，10.7mmol)。在-78℃搅拌1小时后，将在无水醚(25mL)中的化合物-L(1.5g，2.83mmol)加入反应混合物中，并在-78℃继续搅拌另外1小时。用饱和NH₄Cl溶液猝灭反应混合物，并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，减压浓缩，得到M(2.0g)，为稠浆状物。将粗产物不经进一步纯化直接用于下一步。

在室温和惰性气氛下向M(3.0g，5.6mmol)在THF(30mL)中的搅拌的溶液中加入TBAF(1.48g，5.67mmol，1M在THF中)和CsF(2.58g，16.8mmol)。将反应混合物在80℃搅拌4h。将混合物真空浓缩；将得到的残余物在水和DCM之间分配。分离有机相，用DCM(2×25mL)萃取水层；将合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，减压浓缩，得到粗物质。将粗物质通过柱色谱(SiO₂，100-200目)纯化，得到3(2.2g，5.5mmol，61％)，为白色固体。¹H NMR(500MHz,CDCl3):δ11.4(br，1H)，8.03(s，1H)，7.76-7.61(m,5H),6.60(t,J_F,H＝74Hz,2H)。2.88(br s,1H),2.86-2.80(m,1H),0.97(d,J＝7.0Hz,3H),0.80(d,J＝7.0Hz,3H)。HPLC:96％。MS(ESI):m/z 398[M+H]⁺。

(3)的(-)-对映体

手性制备型HPLC说明:

柱:Chiralpak IC,250x 4.6mm,5-微米

流动相:A)正己烷,B)IPA

等度洗脱:A:B(95:5)

流速:1.00mL/min

HPLC:99.5％(13mg，分离为白色粉末)。

旋光度[α]_D:-54°(c＝0.5％，在MeOH中)。

用赛维罗奈治疗男性***癌

满足表1中所列纳入标准的男性每天一次施用赛维罗奈(600mg；4×150mg片剂)，直至满足表2中的任何标准。表3记录了每个男性受试者的各种筛选的临床筛选数据和筛选时间表。

表1–***癌治疗研究的纳入标准

表3–程序和筛选的时间表

注释:

¹在筛选时收集全部病历。在C1D1，确认病历，并在签署知情同意和C1D1之间的任何新事件更新病历。

²生命体征包括坐位血压、脉搏、呼吸率和体温(仅在筛查时包括身高)。

³如果在C1D1的7天内已经完成，不需要重复。

⁴通过显微镜检查尿分析，包括比重、血红蛋白、葡萄糖、酮和蛋白质。

⁵可在知情同意的8周内进行；疾病程度的评估应包括所有合适的放射照相或闪烁照相方法以记录转移性疾病区域。

⁶如果安全和可行，受试者将在基线进行肿瘤活检。如果安全和可行，在研究结束时将对显示从治疗获益的证据的受试者(定义为经治疗PSA或PFS的下降≥50％＞6个月)进行肿瘤活组织检查。没有疾病的放射照相证据的受试者将不需要活组织检查。进入研究时的血沉棕黄层样品和进入研究时和处于进展时的肿瘤样品之一将被送去进行DNA测序+/-RNA测序。根据研究开始时的可用性来确定准确的测序方法。如果安全和可行，相对于骨损伤，优选软组织损伤的活组织检查。

⁷应当尽一切努力使这些在接受赛维罗奈期间或在其之后尽可能快地执行。这是为了在分析这些样品时能够准确评估所有正在进行的药效学药物作用。如果这些重复生物标志物研究已经在前14天中作为另一研究访视的一部分进行，则不需要它们。

用赛维罗奈和***(Sevi-D)治疗男性***癌

每天一次对满足表1中所列纳入标准的男性施用赛维罗奈(600mg；4x 150mg片)和***(0.5mg)，直至满足表2中的任何标准。表3记录了每个男性受试者的各种筛选的临床筛选数据和筛选时间表。

用赛维罗奈治疗男性和女性乳腺癌

满足表4中所列纳入标准的受试者每天一次施用赛维罗奈(男性受试者600mg，4x150mg片；女性受试者450mg，3x 150mg片)，直至满足表2中的任何标准。表5记录了每个男性受试者的各种筛选的临床筛选数据和筛选时间表。

表4–乳腺癌治疗研究的纳入标准

表5–程序和筛选的时间表

注释:

1.在筛选时收集全部病历。在C1D1，确认病历，并在签署知情同意和C1D1之间的任何新事件更新病历。

2.身体检查应该是简短的，并且针对已知异常的区域，或者由临床发现和/或受试者主诉驱动。

3.生命体征包括坐位血压、脉搏、呼吸率和体温，并且应当在单个时间点收集。

4.CBC包括白细胞计数、血红蛋白、血细胞比容、白细胞计数差异(绝对计数)和血小板计数。

5.如果在C1D1的7天内完成，则不需要在C1D1重复评估。

6.在治疗之前不需要获得结果。

7.血清化学包括钠、钾、氯化物、碳酸氢盐、BUN、肌酸酐、葡萄糖、AST、ALT、碱性磷酸酶、总胆红素、总蛋白质、镁、钙、磷。

8.通过显微镜检查法进行尿分析，包括比重、pH、葡萄糖、酮、胆红素、血红蛋白和蛋白质。

9.具有生育能力的妇女的妊娠试验必须在C1D1的72小时内完成。

10.内分泌组是一个早晨时间点，应当按照实验室手册进行处理和储存。

11.评估应包括基线时的胸部、腹部和骨盆的CT或MRI以及骨闪烁照相。筛选评估必须在知情同意的8周内完成。在治疗的前12个月和其后每3个月，扫描应在偶数周期结束时(例如，在周期2、4、6、8等之后)重复。扫描可以在计划访视日期的+/-7天完成。在基线和临床指示的患有骨疾病的受试者中随后要进行骨扫描。在治疗结束4周内和开始新疗法之前进行EOT扫描。

12.C1D1时受试者的PK方案是单个早晨时间点。应在所述时间点抽取样本，然后从C4D1开始每个偶数周期抽取。应当记录PK抽取前的最后一个剂量的赛维罗奈的时间和日期。2期受试者的PK样品的时间选择可以基于出现的数据而改变。

13.受试者将具有存档的肿瘤组织标本，或在筛查期间提交用于生物标志物分析的近期活检标本。

14.应当从签署知情同意书的时间直到最后一次给予研究药物后30天或直到受试者开始另一方案为止报告不良事件和伴随药物。在医疗历史页面上应收集在C1D1之前发生的不良事件。

15.指导研究受试者每晚随晚餐服用赛维罗奈(除非发起者和/或医疗监护人建议在一天的其他时间施用)。

16.指导受试者从C1D1开始每天早晨口服***。

17.EOT访视在最后一个剂量的赛维罗奈或研究活动中止后30天(±7天)进行。在窗口外异常情况下，EOT访视应当在开始新疗法之前完成。

18.收集外周血用于药物基因组学(仅筛选)，ctDNA。药物基因组学ctDNA的收集时间可以基于出现的数据而改变。

19.在最后一次施用赛维罗奈后每3个月收集存活信息，直至死亡或研究数据截止日期。

用赛维罗奈和***(Sevi-D)治疗男性和女性乳腺癌

满足表4中所列纳入标准的受试者每天一次施用赛维罗奈(男性受试者600mg，4×150mg片；女性受试者450mg，3×150mg片)和***(0.5mg)，直至满足表2中的任何标准。表5记录了每个男性受试者的各种筛选的临床筛选数据和筛选时间表。

病历

在筛选期间获得了仔细的病历，注意了受试者的疾病史(例如***癌或乳腺癌)和所述疾病的先前疗法，并在接受用赛维罗奈或赛维罗奈和***(Sevi-D)治疗的第一天进行了回顾。获得了受试者病历的其它相关方面。也记录了以前使用抗雄激素和抗激素药物治疗***癌。

ECOG表现状态

以下是ECOG表现状态评估的等级水平:

等级	ECOG
		0	全体力，可进行所有的疾病前行为而不受限制
1	限制体力活动但不卧床并能进行轻快或久坐的工作，例如，轻家务劳动、办公室工作
		2	能走动，能够进行所有自我护理，但不能进行任何工作活动。清醒时间多于约50％
3	仅能有限自理，50％以上清醒时限制在床上或椅子上
		4	完全丧失能力。不能进行任何自我护理。完全限于床或椅子
5	死亡

转移性疾病程度的测定

除非在知情同意日的8周内进行，否则所有受试者在筛查时都经历由骨骼闪烁照相术和腹部和骨盆的CT或磁共振成像组成的疾病程度评估。在筛选时具有可评价的和/或可测量的转移的受试者经历对他们的疾病程度的重复评价或根据临床指示重复评价。在整个研究中成像模式应当根据损害保持一致。

全血细胞计数(CBC)

在最初的筛选和所有研究访视中获得HGB、HCT、WBC、差异(优选绝对值)和血小板计数。

血清化学

在最初筛选和所有研究访视时获得钠、钾、氯化物、碳酸氢盐、BUN、葡萄糖、肌酸酐、AST、ALT、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、胆红素、总蛋白、白蛋白、球蛋白、钙、镁、磷、肌钙蛋白I和T、以及肌酸激酶-MB。

尿分析

在筛选和最后访视时，通过尿样的显微镜检查测量比重和血红蛋白、葡萄糖、酮和蛋白质。

肿瘤活检

如果认为是安全可行的，则收集受试者的正常组织(血沉棕黄层)，并进行肿瘤活检(无疾病的放射照相证据的受试者不需要活检)。将血沉棕黄层和肿瘤送去进行DNA测序+/-RNA表达分析。还收集血样并送到威斯康星大学使用其VERSA平台进行CTC分析。

循环肿瘤细胞(CTC)

收集血样并送到EPIC Sciences公司(San Diego，California)以进行CTC分析，使用其下一代CTC平台在基线和在表3和6中概述的研究时间表期间的特定时间点进行。还收集血样并送到威斯康星大学以使用其VERSA平台进行CTC分析。

在初始筛选时，在接受用赛维罗奈或赛维罗奈和***的治疗的第一天，在接受第一个剂量的赛维罗奈或赛维罗奈和***(Sevi-D)15天后，并且每4至8周直至进展时间，测定CTC(典型的、EMT样的、小细胞和凋亡亚型)。

分析样品的CTC数目(典型、EMT样、小细胞和凋亡亚型)、用于AR表达和定位的免疫荧光、AR v7的存在(具有N和C末端表达)、用于GR的免疫荧光和用于ERG/PTEN的FISH。

循环肿瘤DNA(ctDNA)

检测了与对赛维罗奈或赛维罗奈和***响应有关的ctDNA中的变体多态性和突变。系列收集ctDNA用于随时间的靶向测序和关联肿瘤测序(当可药用时)。

来自WBC血沉棕黄层的基因组DNA

WBC血沉棕黄层从用于ctDNA的相同管获得。来自一个血沉棕黄层样品的基因组DNA用于肿瘤活检的分析。分析基因组DNA用于CYP17裂解酶、其它CYP酶、药物转运蛋白和其它基因中的多态性，所述其它基因可能与赛维罗奈或赛维罗奈和***的效力或不良事件有关(例如DMET芯片)。

内分泌物组

收集血样用于评价类固醇激素变化，作为CYP17抑制随时间的药效学指标(例如，DHEA、DHEA-S、雄甾烯二酮、睾酮、皮质醇、皮质酮、孕酮、孕烯醇酮、***、雌酮和ACTH)。

安全性分析

安全性分析组由接受至少1个剂量的赛维罗奈的所有受试者组成。安全参数包括不良事件报告、身体检查发现、生命体征、安全实验室确定、ACTH刺激测试、ECG和Holter监测的结果。根据最新MedDRA编码词典通过系统器官类别、优选术语和高级术语列出的不良事件。所有不良事件都按类型、严重性和因果关系分类。除了所有不良事件之外，还描述了严重不良事件、药物相关不良事件、3级或更高不良事件、药物相关3级或更高不良事件和导致中止或死亡的不良事件。使用世界卫生组织(WHO)药品词典按照治疗类别和优选术语对伴随药物进行分类。

功效分析

功效分析组由接受至少1个剂量的赛维罗奈并具有至少1个PSA的给药后评估的所有受试者组成；对于在筛选时具有可评估的和/或可测量的转移的受试者，需要1个转移性疾病的给药后评估。通过剂量将PSA的变化与基线进行比较；还测定了从基线的最大变化和在第12周的变化，以及响应的持续时间。还将腹部和骨盆的CT或MRI上观察到的软组织损伤的最大变化，以及根据PCWG2标准的骨闪烁照相变化与基线比较，并通过剂量总结。在第2周期结束时第一次再分期扫描时存在新的骨损伤(可能是骨潮红)的情况下，将随后的扫描与作为新基线扫描的该扫描进行比较，但是如果在第4周期结束时的下一次扫描中注意到有进展，则进展日期是注意到第一次新损伤的时间(Scher HI,Halabi S,Tannock I,MorrisM,Sternberg CN,Carducci MA等人.Design and end points of clinical trials forpatients with progressive prostate cancer and castrate levels oftestosterone:recommendations of the Prostate Cancer Clinical Trials WorkingGroup.J Clin Oncol 2008；26(7):1148-1159)。关于功效分析的其它细节将在统计分析计划中描述。

相关生物标记分析

研究的探索性终点是评估PSA响应和PFS终点的潜在生物标志物的预测准确性。其它探索性目的包括通过进展后肿瘤组织的生物标记分析评估对赛维罗奈的抗性机制。Cox成比例危险回归模型(对进展终点的时间)和逻辑回归模型(对PSA响应终点)用于评估单独的基线因子和与其他生物标志物(例如，临床参数、LDH、Hb)组合的基线因子的预后显著性。对于每个回归模型，c-指数将用于量化这些生物标志物的预测准确性。模型将由群组分组以将四个群组捆绑成一个相关分析。

结果

用赛维罗奈或赛维罗奈和***(Sevi-D)治疗男性***癌

图1收集了以下情况的***癌研究结果：1)用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗的患者(在图1中称为"无***")；2)用赛维罗奈和≥30天的***治疗的患者(在图1中称为"加***")；和3)在第1周期第1天研究的3天内用赛维罗奈和***治疗的患者(在图1中称为"***的新受试者")。图2将在赛维罗奈或赛维罗奈和***给药之前用恩杂鲁胺或阿比特龙治疗失败的患者(即，单失败)的***癌研究结果总结为Swim图，而图3描述在赛维罗奈或赛维罗奈和***给药之前用恩杂鲁胺和阿比特龙治疗失败的患者(即，双失败)的Swim图。图4和5分别收集了用SEVI(即，赛维罗奈)和SEVI-D(赛维罗奈和***)治疗的单失败和双失败患者的Kaplan-Meier评价(放射照相进展和PSA进展)。

图6总结了用以下各项治疗的双失败患者进展的中位数时间(放射照相进展和PSA进展)：1)用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗(在图6中称为"无***")；和2)用赛维罗奈和≥30天的***治疗(在图6中称为"加***")。

图7收集了用SEVI治疗的患者的内分泌情况，其特征为ACTH增加不大，皮质醇减少不大，雄激素减少不大，以及"上游"类固醇的有限增加。图8收集了用SEVI-D治疗的患者的内分泌情况，其特征为ACTH和皮质醇减少，肾上腺雄激素减少，而"上游"类固醇不受影响或减少，所有这些都是相对于用SEVI治疗而言的。

图9总结了双失败患者的治疗期间出现的不良事件(TEAE)：1)用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗(在图9中称为"无***")；2)用赛维罗奈和≥30天的***治疗(在图9中称为"加***")；和3)在第1周期第1天研究的3天内用赛维罗奈和***治疗(在图9中称为"***的新受试者")。图10显示了双失败患者的不良事件等级水平分类：1)用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗(在图10中称为"无***")；和2)在第1周期第1天研究的3天内用赛维罗奈和***治疗(在图10中称为"***的新受试者")。

图11证明了在第1周期第1天研究的3天内用赛维罗奈和***治疗的患者(在图11中称为"***的新受试者")相对于用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗的患者(在图11中称为"无***")的改善的相对风险。

用SEVI和SEVI-D治疗男性和女性乳腺癌

图12收集了以下情况的乳腺癌研究结果：1)用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗的患者(在图12中称为"无***")；2)用赛维罗奈和≥30天的***治疗的患者(在图12中称为"加***")；和3)在第1周期第1天研究的3天内用赛维罗奈和***治疗的患者(在图12中称为"***的新受试者")。图13将用SEVI或SEVI-D治疗的患者的三阴性乳腺癌研究结果总结为Swim图，其中83％的SEVI-D患者符合CBR16标准。图14将用SEVI或SEVI-D治疗、且对晚期疾病有≥2种在先疗法或对晚期疾病有＜2种在先疗法的患者的三阴性乳腺癌研究结果总结为Swim图。图15将用SEVI或SEVI-D治疗的患有内脏疾病或未患有内脏疾病的患者的三阴性乳腺癌研究结果总结为Swim图。图16收集了在第1周期第1天研究的3天内用赛维罗奈和***治疗的女性(在图16中称为"***的新受试者")的三阴性乳腺癌研究结果，其中63％的受试者继续进行SEVI-D治疗。图17收集了以下情况的乳腺癌研究结果：1)用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗的男性；和2)用赛维罗奈和≥30天的***治疗的男性。

图18描述了用SEVI和SEV-D治疗的女性患者的乳腺癌肿瘤测定的百分比变化的瀑布图。图19收集了女性乳腺癌受试者中孕酮的响应：1)用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗(在图19中称为"赛维罗奈(无***)")；和2)用赛维罗奈和≥30天的***治疗(在图19中称为"赛维罗奈(***)")。图20证明用SEVI或SEVI-D治疗的ER⁺乳腺癌患者相对于用阿比特龙和强的松治疗的患者(在图20中称为"阿比特龙/强的松")就孕酮而言无临床相关增加。

图21显示女性乳腺癌患者的治疗期间出现的不良事件(TEAE)：1)用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗(在图21中称为"无***")；2)用赛维罗奈和≥30天的***治疗(在图21中称为"加***")；和3)在第1周期第1天研究的3天内用赛维罗奈和***治疗(在图21中称为"***的新受试者")。图22显示女性乳腺癌患者的不良事件等级水平分类：1)用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗(在图22中称为"无***")；和2)在第1周期第1天研究的3天内用赛维罗奈和***治疗(在图22中称为"***的新受试者")。图23显示在第1周期第1天研究的3天内用赛维罗奈和***治疗的乳腺癌患者(在图23中称为"新***")相对于用赛维罗奈治疗而在研究期间的任何时间没有用***治疗的患者(在图23中称为"无***")的改善的相对风险。

参考引用

本申请中引用的所有参考(包括参考文献、授权专利、公开的专利申请和共同待决的专利申请)的内容通过引用全部明确地并入本文。

等效形式

本领域的技术人员仅使用常规的实验可认识或者能够确定本文所述的本发明的具体实施方案的许多等效形式。这些等效形式旨在包括在所附权利要求中。