一种防治脑梗塞的药物组合物及其用途
阅读说明：本技术 一种防治脑梗塞的药物组合物及其用途 (Pharmaceutical composition for preventing and treating cerebral infarction and application thereof ) 是由 李丛言 孙瑞雪 孙光涛 于 2020-06-17 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种防治脑梗塞的药物组合物及其用途,其包含白术内酯II、洛伐他汀和B族维生素作为药物活性成分,三种药物活性成分之间存在协同增效的作用。所述药物组合物能够显著降低脑梗塞面积,改善神经功能系统,产生明显优于单药使用的治疗效果,防治脑梗塞的效果明显。(The invention relates to a pharmaceutical composition for preventing and treating cerebral infarction and application thereof, wherein the pharmaceutical composition comprises atractylenolide II, lovastatin and B vitamins as pharmaceutical active ingredients, and the three pharmaceutical active ingredients have a synergistic effect. The pharmaceutical composition can obviously reduce the area of cerebral infarction, improve the nervous system, produce the treatment effect obviously superior to that of single medicine use, and has obvious effect of preventing and treating cerebral infarction.)
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体地，涉及一种防治脑梗塞的药物组合物及其用途。
背景技术
脑梗塞又称脑梗死、缺血性脑卒中，是指因脑部血液供应障碍，缺血、缺氧所导致的局限性脑组织的缺血性坏死或软化，是临床上常见的心脑血管和神经系统疾病，具有发病率高、死亡率高等特点，已成为公共卫生面临的重大挑战之一。脑梗塞属于突发性脑部疾病，目前发病趋势年轻化，在任何年龄段均有可能发生，脑部坏死程度因血栓部位及大小不同而有差别。脑梗塞多发病较急，多无前驱症状，局灶性神经体征在数分钟至数小时达到高峰，并且多表现完全性卒中，意识清楚或轻度意识障碍，颈内动脉或大脑中动脉主干栓塞导致大面积脑梗死，可发生严重脑水肿，颅内压增高，甚至脑疝和昏迷。
目前，对于脑梗塞的损伤机制主要有以下几种：一、神经兴奋性毒性，过量的谷氨酸导致细胞内钙释放从而引起神经细胞凋亡；二、细胞外钙离子大量进入细胞内造成钙超载从而导致神经细胞凋亡；三、氧化自由基大量产生引起级联的神经兴奋性毒性、炎症反应等，从而导致细胞凋亡；四、炎症反应，在脑梗塞过程中，脑组织中炎症细胞被激活(例如白细胞)，释放大量炎症因子(例如IL-1或TNF-α)，直接对神经细胞造成损伤。
临床上对脑梗塞的治疗原则以尽早改善脑缺血区的血液循环、促进神经功能恢复等为主。临床上使用的药物中在发病时主要以溶栓药物为主，例如重组组织纤溶酶原激活剂是目前较为公认的有效药物之一，但是在使用过程中存在诸多的副作用，并且治疗时间窗有限，如果在错误的时间窗使用，容易造成再灌注损伤，从而导致患者死亡。随着对脑梗塞机理研究的不断深入，神经保护剂或神经再生剂也尝试着应用到治疗脑梗塞当中，例如，依达拉奉，其通过抗氧化机制来达到脑神经细胞的保护作用，再例如洛伐他汀，其通过抗炎以及抗氧化作用来达到神经细胞保护作用，而神经生长因子(例如，NGF)也尝试通过注射给药来达到促进脑梗塞损伤部位神经再生的作用。
但是在临床上多是单独使用上述药物，缓解症状、缩短病程等方面效果有限。因此，存在开发复方联用制剂、提高对脑梗塞的防治效果的需要。
发明内容
为了克服现有防治脑梗塞存在的问题和不足，本发明提供了一种防治脑梗塞的药物组合物，其药物活性成分之间存在协同增效作用，有效防治脑梗塞，并降低脑梗塞引发的神经功能损害等的发生率，更好地满足患者的治疗需要。
本发明的技术方案如下：
一种防治脑梗塞的药物组合物，其有效成分包含白术内酯II、洛伐他汀和B族维生素。
在一个实施方案中，白术内酯II、洛伐他汀和B族维生素的质量比为1-8:3-20:0.5-3，优选的质量比为2-6:5-10:0.5-2，具体地，可以为5:10:1或5:5:0.5。
在一种优选的实施方案中，三种活性成分的质量总和占所述药物组合物总质量的1-15％(重量)，上述含量优选为3-12％(重量)，更优选为4-10％(重量)，具体地，可以为2％，4％，5％，7％。
在一个实施方案中，B族维生素选自维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸、泛酸、叶酸、生物素中的一种或几种。
在一个实施方案中，B族维生素优选维生素B1：叶酸：生物素为1:1:2的混合物。
在一个实施方案中，所述的药物的剂型选自口服制剂和静脉给药制剂，优选为片剂、胶囊剂、静脉注射液或静脉输注液。
为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、增溶剂、助溶剂、抗氧化剂、pH调节剂、等渗调节剂、乳化剂、注射用水、非水溶剂、基质等。填充剂包括淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括甜味剂及各种香精；防腐剂包括尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；增溶剂包括非离子型的吐温类，如吐温80、吐温60,等；助溶剂包括有机酸及其钠盐、氨基酸和维生素类等；抗氧化剂包括亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、没食子酸丙酯、谷胱甘肽、硫代硫酸钠、硫脲、巯基乙酸、焦亚硫酸钠、焦亚硫酸钾、维生素E等；pH调节剂包括盐酸、硫酸、乳酸、苹果酸、醋酸、枸橼酸、氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠等；等渗调节剂包括氯化钠、葡萄糖、果糖、甘油、山梨醇、甘露醇等；乳化剂包括磷脂、胆固醇、泊洛沙姆等；基质包括：PEG6000，PEG4000等。
本发明的另一目的还在于提供一种所述药物组合物在制备防治脑梗塞的药物中的用途。
白术内酯II是黑龙江省道地药材北苍术的活性成分之一，现有技术表明其在治疗胃溃疡、抗腹泻、抗炎以及抗老年痴呆方面具有一定的治疗作用。洛伐他汀是本领域常用的降血脂药物，现代研究表明在其在防治脑梗塞方面具有明显的治疗作用，可能的药理机制为预防血管中的血栓形成、通过激活eNOS、抗氧化以及抗炎作用防止神经细胞的调防，从而起到神经保护作用。再考虑到高血脂是诱发脑梗塞的重要因素之一，因此洛伐他汀是一个非常具有市场前景的防治脑梗塞药物。本发明在洛伐他汀基础上结合黑龙江省丰富的药用植物资源，发现白术内酯类化合物与洛伐他汀在防治脑梗塞方面体现了明显的协同作用。进一步地，为了更加方便临床应用结合脑梗塞患者代谢紊乱症状，患者体内B族维生素缺乏，因此在组合物中另添加了B族维生素成分，从而使药物组合物的疗效达到最佳。
有益效果
本发明的药物组合物通过以特定配比将白术内酯II、洛伐他汀和B族维生素复配联合使用，显著降低脑梗塞面积，改善神经功能系统，产生明显优于单药使用的治疗效果，防治脑梗塞的效果明显。
具体实施方式
在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。
应当理解的是，在说明书和权利要求书中使用的术语或词语不应当理解为具有在字典中限定的含义，而应理解为在以下原则的基础上具有与其在本发明上下文中的含义一致的含义：术语的概念可以适当地由发明人为了对本发明的最佳说明而限定。
实施例1
一种防治脑梗塞的药物组合物，其有效成分包括5:10:1的白术内酯II、洛伐他汀、B族维生素，其中B族维生素是质量比为1:1:2的维生素B1：叶酸：生物素，所述有效成分占所述药物组合物总质量的5％。加入药学上可接受的辅料，通过常规制剂方法，制成口服片剂。
实施例2
一种防治脑梗塞的药物组合物，其有效成分包括5:5:0.5的白术内酯II、洛伐他汀、B族维生素，其中B族维生素是质量比为2:1的维生素B1：维生素B6，所述有效成分占所述药物组合物总质量的6％。加入药学上可接受的辅料，通过常规制剂方法，制成口服片剂。
试验例1：白术内酯II和洛伐他汀联用的缺氧缺糖/复氧复糖模型细胞试验
1材料
神经生长因子诱导后的高分化P12细胞。
2方法
将P12细胞接种于RPMI 1640培养液中，并进行常规培养，每3天换1次液，待细胞融合度达到80％进行传代。取对数生长期的PC12细胞，随机分为9组，分别为正常对照组，模型组，白术内酯II组1，白术内酯II组2，洛伐他汀组1，洛伐他汀组2，联合给药组1，联合给药组2和联合给药组3。除了正常对照组之外，将其它8组建立缺氧缺糖/复氧复糖细胞模型：PC12细胞弃去正常细胞培养液(RPMI 1640培养液)，用预热的PBS清洗2次，更换培养液为无糖Earle′s培养液模拟细胞缺血状态，然后放入含94％N2+5％CO2+1％O2的37℃三气培养箱内培养，氧糖剥夺3h后，更换无糖Earle′s培养液为正常细胞培养液，放入37℃5％CO2培养箱中培养12h。正常对照组正常培养，不做任何处理；模型组和各给药组剥夺3h后复氧复糖的同时加入相应的药物，直到培养结束。
MTT法检测细胞活性：加入MTT(终浓度为0.5g·L-1)，置于CO2培养箱中继续培养4h。小心吸取全部培养基，每孔加入150μL DMSO，室温震荡10min，酶联免疫监测仪测OD490nm值，检测细胞活性，细胞活性＝给药组OD值/正常对照组OD值×100％。
3统计学处理
应用SPSS19.0进行方差分析。实验结果以(x±s)表示，p<0.05为差异有统计学意义。
4实验结果
与正常对照组相比，模型组细胞活性明显下降(p<0.05)；与模型组相比，白术内酯II单味药组有轻微的改善作用，洛伐他汀组改善明显，两者联用后效果明显提高。经观察以白术内酯II与洛伐他汀质量比在1:2时协同作用最佳，而1:1组和2:1组仅体现了较弱的协同作用，因此在后续试验中本发明以1:2组作为基础配比进行筛选。
表1各组对细胞活性的作用(x±s，n＝5)
注：与正常对照组相比，^p<0.05；与模型组相比，*p<0.05。
试验例2本发明药物组合物的缺氧缺糖/复氧复糖模型细胞试验
在试验例1的结果基础上，本发明进一步考察了白术内酯II、洛伐他汀和B族维生素联用的给药方案，B族维生素的组成质量比为1:1:2的维生素B1：叶酸：生物素。
试验方法同试验例1，具体结果如下：
表2各组对细胞活性的作用(x±s，n＝5)
注：与正常对照组相比，^p<0.05；与模型组相比，*p<0.05。
试验例3本发明药物组合物对防治脑梗塞的动物试验效果
1材料
选取雄性8周龄SD大鼠60只，体重为200-250g，在SPF环境中自由进食和饮水，适应性喂养1周后进行。实验动物相关处置均符合《中华人民共和国实验动物管理条例》要求。
2试验方法
将大鼠随机均分为6组，分别为假手术组、模型组、白术内酯II组、洛伐他汀组、联合给药1组(白术内酯II：洛伐他汀的质量比为1:2)和联合给药2组(白术内酯II：洛伐他汀：B族维生素的质量比为5:10:1，B族维生素的组成质量比为1:1:2的维生素B1：叶酸：生物素)，每组10只。采用线栓法制备动物大脑中动脉栓塞模型：用戊巴比妥(40mg/kg)麻醉后将大鼠仰卧于手术台上，沿颈正中线行手术切口，钝性分离肌肉，充分暴露右侧血管，分离劲总动脉、颈内动脉和颈外动脉，结扎颈外动脉，在颈外动脉上切开一个小切口，将预先浸在肝素钠溶液中的尼龙渔线从开口插入颈内动脉20mm，阻塞大脑血流并结扎，阻塞大脑血流，去除动脉夹，用生理盐水清洗切口后逐层缝合，分笼饲养。假手术组只分离血管，不阻塞血流。造模成功后，各给药组分别给予相应药物30mg/kg，给药方式为腹腔注射，每日1次，连续给药14d，末次给药完成后处死大鼠进行相关检测。
3标本采集与检测
1)神经功能评分。根据Bed-erson′s评分标准进行神经功能评分，采用双盲法，于造模后14d后评价。
2)脑梗死体积检测。处死大鼠取完整脑组织，于-20℃冰箱放置20min，行冠状位切片，厚度2mm，用TTC染液中孵育30min，用4％的甲醛固定2h后拍照，用Image Pro Plus6.0软件计算梗死体积。
4统计学处理
应用IBM SPSS19.0进行分析。实验结果以(x±s)表示，采用单因素方差分析进行检验，组间比较用SNK-q检验。p<0.05为差异有统计学意义。
5实验结果-神经功能评分、脑梗塞体积比较
与假手术组比较，模型组的神经功能评分、脑梗塞体积显著升高(p<0.05)。与模型组相比，联合给药组神经功能评分、脑梗塞体积降低地更为显著，效果明显优于其它药物组。
表3神经功能评分、脑梗塞体积和含水量比较(x±s)
组别
n
神经功能评分(分)
脑梗塞体积(％)
假手术组
10
0
0
模型组
10
3.60±0.51
34.38±3.64
白术内酯II组
10
3.23±0.64
30.52±2.97
洛伐他汀组
10
2.42±0.42**
24.31±3.25**
联合给药1组
10
1.79±0.48**
17.84±3.84**
联合给药2组
10
1.54±0.37**
12.19±3.11**
与模型组相比，**p<0.01，*p<0.05
从以上动物试验观察结果可以看出，将白术内酯II、洛伐他汀和B族维生素复配联合使用，显著降低脑梗塞面积，改善神经功能系统，产生明显优于单药使用的治疗效果，在防治脑梗塞中发挥了显著的治疗效果。
以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。