阅读说明：本技术 含有异吲哚啉酮衍生物混合物的组合物及其用途 (Composition containing isoindolinone derivative mixture and application thereof ) 是由 向飞 张斌 于 2019-12-17 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种含有互不相同的第一异吲哚啉酮衍生物与第二异吲哚啉酮衍生物混合物的组合物,所述异吲哚啉酮衍生物的具体定义见说明书。本发明所述的混合物能协同地增强白钻等植物的提取物对沃氏葡萄球菌等细菌的抑制作用。(The invention provides a composition containing a mixture of a first isoindolinone derivative and a second isoindolinone derivative which are different from each other, wherein the isoindolinone derivative is specifically defined in the specification. The mixture of the invention can synergistically enhance the inhibition effect of the extract of the plants such as the rhinestone on the bacteria such as staphylococcus wowensis and the like.)

含有异吲哚啉酮衍生物混合物的组合物及其用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含有异吲哚啉酮衍生物的混合物的组合物及其用途。

背景技术

医院感染是影响医院医疗质量的重要问题。随着现代医学技术的不断发展进步，抗菌药物大量使用，临床病原菌的耐药菌株不断增加。因此，提高已有药物的抗菌活性，将会有助于改善细菌性感染患者的治疗效果。

El-Gohary NS等人合成得到了一系列具有抗菌活性的异吲哚啉酮类化合物(ArchPharm(Weinheim).2015Sep；348(9):666-80.)。Vicente T等人的研究证实，结构如式Ⅰ所示的异吲哚啉酮类化合物对鸟型分枝杆菌具有一定的抑制作用(Arch Intern Med.1993Feb22；153(4):534)。

植物提取物中富含有多种具有抗菌活性的成分，比如杨若颖等人报道称(热带生物学报,2019,10(03):226-230.)，破骨风、白钻、山八角、来角风、六耳铃、藤三七、贯众、金线草、独脚风、八百厘、穿破石等植物的提取物在100mg/L与/或500mg/L对烟草青枯菌具有一定的抗菌活性，但本发明人发现上述植物提取物对其他常见病原菌的抗菌活性有待进一步提高。

众所周知的是，中药的疗效是通过一系列相似结构的化合物群(有效成分)的协同作用而体现的。因此，寻找能与植物提取物发生协同作用的化合物群，为中西医结合治疗疑难病症提供了新的途径。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含有互不相同的第一异吲哚啉酮衍生物与第二异吲哚啉酮衍生物的混合物的组合物，所述的混合物能与白钻、藤三七、独脚风、毛老虎、金线草、追骨风等植物的提取物产生协同的抗菌作用。

为了实现上述目的，本发明一方面提供了含有互不相同且选自如下所示化合物1～44的第一异吲哚啉酮衍生物与第二异吲哚啉酮衍生物的混合物的组合物：

一方面优选的，本发明所述组合物中所述的第一异吲哚啉酮衍生物与第二异吲哚啉酮衍生物的质量比在0.01:1～100:1之间。

另一方面优选的，本发明所述的组合物中进一步含有植物提取物。

进一步优选的，本发明所述的植物提取物是选自白钻、藤三七、独脚风、毛老虎、金线草、追骨风中的一种植物的提取物。

另一方面优选的，本发明所述的组合物可制成口服固体制剂。

更优选的，本发明所述的口服固体制剂是选自片剂、胶囊剂与胶囊剂中的一种。

本发明另一方面提供了如前所述的组合物在制备用于治疗细菌感染性疾病中的用途。

优选的，本发明所述细菌感染性疾病是由选自沃氏葡萄球菌、路邓葡萄球菌、洛非不动杆菌、痤疮丙酸杆菌、木糖氧化无色杆菌、腐生葡萄球菌、鸟型分枝杆菌、巴氏葡萄球菌、奥斯陆莫拉菌、黏质沙雷氏菌、麦氏棒状杆菌、溶血性葡萄球菌、草绿色链球菌、奇异变形杆菌、嗜根考克氏菌、嗜水气单胞菌、皮氏罗尔斯顿菌、差异柠檬酸杆菌、唾液链球菌、鲍氏不动杆菌的一种细菌感染所致的疾病。

体外试验结果显示，本发明所述的异吲哚啉酮衍生物的混合物能与白钻、藤三七、独脚风、毛老虎、金线草、追骨风等多种植物的提取物产生协同的抗菌作用

具体实施方式

以下实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。对所公开的实施例的下述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例中，而是可以应用于符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的更宽的范围。虽然在本发明的实施或测试中可以使用与本发明中所述相似或等价的任何方法和材料，本文在此处列举优选的方法和材料。

制备例1植物提取物的制备

采用超声波提取法，将阴干的植物材料在40℃下烘干，粉碎后过40目筛，放入自封袋中。试验前称取50g的植物干粉，加入不同的有机溶剂进行超声波提取(如表1所示)，每次60min，重复提取3次。过滤后浓缩至干，保存于4℃冰箱内待用。

表1不同植物提取物超声波提取的有机溶剂

试验例1异吲哚啉酮衍生物的混合物对植物提取物抗菌活性的影响

本发明采用李萍等人(食品与发酵工业,2017,43(02):232-238.)所披露的方法测定如下所示受试物①～③对不同细菌的抑制作用。

(1)受试药物：①：取异吲哚啉酮衍生物化合物X与Y(X、Y选自1～44，且X≠Y)，以特定的质量比(R₁)混合，记为MIX(X-Y)；②：制备例1得到的植物提取物(PEZ，Z选自1～6)；③：①与②的受试物以质量比(R₂)形成的混合物，记为MIX(X-Y-PEZ)。

(2)试验方法

①供试样品溶液配制：取一定量的受试物，用DMF作溶剂，采用特定倍数连续稀释法配制6个浓度的供试样品溶液。

②菌悬液制备:活化后的菌种接入液体培养基(不加琼脂)，摇床培养。细菌用平板稀释法计算菌落数，用无菌生理盐水调节细菌悬液浓度均为10⁷CFU/mL。

③琼脂-孔洞扩散法测定抑菌活性操作步骤：灭菌培养基冷至50℃，加入6mL菌悬液，混匀，倒入直径9cm培养皿中，每皿15mL，静置46min。在固化后的培养基上用无菌打孔器均匀打孔(直径7mm)，记号。每孔加入40μL供试样品溶液，DMF作空白对照。细菌37℃培养18h，测量并记录抑菌圈直径(mm)，每个浓度重复3次，取平均值作为测定结果，按下式计算对供试菌种抑制率(IR)。

对于MIX(X-Y)与PEZ而言，采用IR对MIX(X-Y)的总浓度与PEZ的受试浓度(ng/mL)的对数(log(c))作图，根据线性回归方程计算出产生特定fa的抑制率时各受试物的浓度，分别记为IC_fa(A)与IC_fa(PEZ)。对于MIX(X-Y-PEZ)而言，采用IR对其中采用IR对MIX(X-Y)浓度(ng/mL)的对数作图，根据线性回归方程计算出产生特定fa的抑制率时MIX(X-Y-PEZ)中MIX(X-Y)的浓度，记为IC_fa(mixA)。

根据下式计算产生特定fa抑制率时的联合用药指数(CI)。

CI<1时，即表示存在协同作用，CI越小，协同作用越强。

表2.1受试物对沃氏葡萄球菌的抑制作用

表2.2受试物对路邓葡萄球菌的抑制作用

表2.3受试物对洛非不动杆菌的抑制作用

表2.4受试物对痤疮丙酸杆菌的抑制作用

表2.5受试物对木糖氧化无色杆菌的抑制作用

表2.6受试物对腐生葡萄球菌的抑制作用

表2.7受试物对鸟型分枝杆菌的抑制作用

表2.8受试物对巴氏葡萄球菌的抑制作用

表2.9受试物对奥斯陆莫拉菌的抑制作用

表2.10受试物对黏质沙雷氏菌的抑制作用

表2.11受试物对麦氏棒状杆菌的抑制作用

表2.12受试物对溶血性葡萄球菌的抑制作用

表2.13受试物对草绿色链球菌的抑制作用

表2.14受试物对奇异变形杆菌的抑制作用

表2.15受试物对嗜根考克氏菌的抑制作用

表2.16受试物对嗜水气单胞菌的抑制作用

表2.17受试物对皮氏罗尔斯顿菌的抑制作用

表2.18受试物对差异柠檬酸杆菌的抑制作用

表2.19受试物对唾液链球菌的抑制作用

表2.20受试物对鲍氏不动杆菌的抑制作用

实施例1含有异吲哚啉酮衍生物混合物的组合物的固体制剂的制备

处方

制备方法

取处方量的活性成分与辅料，均过100目筛。取活性成分、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮与淀粉充分混匀；取处方量的羟丙甲纤维素，配制成依羟丙甲纤维素计浓度为10％的溶液，用乳酸调节pH至3.0～4.0，加入至上述混合物料中制软材，以16目筛制粒，80℃干燥3～4h。用16目筛整粒，加入处方量的微粉硅胶与硬脂酸镁混合混匀，灌装成每粒重约500mg的胶囊；

取处方量的活性成分与辅料，均过100目筛。取活性成分、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮与淀粉充分混匀；取处方量的羟丙甲纤维素，配制成依羟丙甲纤维素计浓度为10％的溶液，用乳酸调节pH至3.0～4.0，加入至上述混合物料中制软材，以16目筛制粒，80℃干燥3～4h。用16目筛整粒，加入处方量的微粉硅胶与硬脂酸镁混合混匀，分装成每袋重约5g的颗粒剂；

取处方量的活性成分与辅料，均过100目筛。取活性成分、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮与淀粉充分混匀；取处方量的羟丙甲纤维素，配制成依羟丙甲纤维素计浓度为10％的溶液，用乳酸调节pH至3.0～4.0，加入至上述混合物料中制软材，以16目筛制粒，80℃干燥3～4h。用16目筛整粒，加入处方量的微粉硅胶与硬脂酸镁混合混匀，压制成每片重约500mg的片剂。