马尼地平联用辛伐他汀及其药物组合在制备用于治疗胰腺癌的药物中的应用
阅读说明：本技术 马尼地平联用辛伐他汀及其药物组合在制备用于治疗胰腺癌的药物中的应用 (Application of manidipine combined simvastatin and pharmaceutical composition thereof in preparation of medicines for treating pancreatic cancer ) 是由 朱志远 刘聪聪 刘军 于 2019-12-31 设计创作，主要内容包括：本发明揭露马尼地平联用辛伐他汀及其药物组合在制备用于治疗胰腺癌的药物中的用途。马尼地平联用辛伐他汀后能够明显的增强辛伐他丁对胰腺癌的治疗效果,降低辛伐他汀的使用剂量,为抑制胰腺癌生长、胰腺癌的治疗提供一种新的治疗方案。(The invention discloses manidipine combined simvastatin and application of a medicine composition thereof in preparing a medicine for treating pancreatic cancer. After manidipine is combined with simvastatin, the treatment effect of simvastatin on pancreatic cancer can be obviously enhanced, the dosage of simvastatin is reduced, and a new treatment scheme is provided for inhibiting the growth of pancreatic cancer and treating pancreatic cancer.)
技术领域
本发明涉及药物治疗学领域，具体涉及马尼地平联用辛伐他汀及其药物组合在制备用于治疗胰腺癌的药物中的应用。
背景技术
胰腺癌是一种恶性程度高、疾病进程发展迅速并且预后差的癌症。虽然胰腺癌的发病率只占新生癌症的3％左右，但在发达国家死于胰腺癌的病患人数在恶性肿瘤中居第4位，在我国居第6位，5年总体生存率只有7％，相对死亡率居十大恶性肿瘤之首。预计到2030年，胰腺癌将超过乳腺癌、***癌和结肠癌，成为仅次于肺癌的第二大致死癌症。
目前胰腺癌最有效的治疗手段仍是手术切除。如果胰腺癌没有出现***转移并且只局限于胰腺导管，患者进行手术切除治愈率将大幅度提升，甚至可以将患者的生存期延长至10年，然而处于这个阶段的患者只占临床诊断病例的一小部分(<20％)，超过50％的胰腺癌确诊时已出现明显的远端转移，不适于手术切除。由此可见，影响胰腺癌预后的主要原因是胰腺癌具有极易局部浸润和远处转移的生物学特性，以致胰腺癌明确诊断时多属晚期，手术切除率低。并且，到目前为止，抗胰腺癌的治疗药物的效果均不理想，抗胰腺癌的创新药物开发也遭遇较大瓶颈。
辛伐他汀(simvastatin)为临床上常用的降脂药物，目前的研究发现辛伐他汀也具有广泛的抗肿瘤作用，包括乳腺癌、甲状腺癌、***癌等，也包括胰腺癌。
马尼地平(Manidipine)为临床上常用的降压药，对低肾素型高血压的降压效果更明显，其机制为对钙离子通道的拮抗作用起到降压效果。
到目前为止，马尼地平联用辛伐他汀治疗胰腺癌的作用没有报道过。
发明内容
本发明目的在于提供马尼地平联用辛伐他汀及其药物组合在制备用于治疗胰腺癌的药物中的用途。
本发明为马尼地平联用辛伐他汀在制备用于抑制胰腺癌生长的药物中的用途。
本发明为一种包括马尼地平、辛伐他汀的药物组合在制备用于治疗胰腺癌的药物中的用途。
本发明为一种包括马尼地平、辛伐他汀的药物组合在制备用于抑制胰腺癌生长的药物中的用途。
本发明为一种用于治疗胰腺癌的药物，其具有马尼地平和辛伐他汀。
本发明为一种用于抑制胰腺癌生长的药物，其具有马尼地平和辛伐他汀。
本发明提供马尼地平联用辛伐他汀及其药物组合在制备用于治疗胰腺癌的药物中的用途，马尼地平联用辛伐他汀后能够明显的增强辛伐他丁对胰腺癌的治疗效果，降低辛伐他汀的使用剂量，为抑制胰腺癌生长、胰腺癌的治疗提供一种新的治疗方案。
附图说明
图1表明马尼地平或辛伐他汀抑制胰腺癌细胞的活力。马尼地平具有较弱的抑制胰腺癌细胞(PANC-1)活力作用(图1a)，辛伐他汀具有明显的抑制胰腺癌细胞(PANC-1)活力作用(图1b)，其IC50为3μM；
图2表明马尼地平显著增加辛伐他汀抑制胰腺癌细胞的活力。马尼地平(10μM)能够明显增加辛伐他汀抑制胰腺癌细胞活力，两者联用后辛伐他汀抑制胰腺癌细胞活力的IC50值为0.2μM；
图3表明马尼地平显著增加辛伐他汀抑制胰腺癌肿瘤生长的效应。其中，10mg/kg/day的马尼地平对于胰腺癌肿瘤的生长基本没有抑制作用，30mg/kg/day的辛伐他汀能够一定程度抑制胰腺癌肿瘤的生长，而马尼地平(10mg/kg/day)对辛伐他汀抑制胰腺癌肿瘤生长的作用具有明显的增强。
具体实施方式
下面结合具体实施例对该发明作进一步说明，但该等实施例不应解释为限制本发明创造思路。
本发明为马尼地平联用辛伐他汀在制备用于抑制胰腺癌生长的药物中的用途。
本发明为一种包括马尼地平、辛伐他汀的药物组合在制备用于治疗胰腺癌的药物中的用途。
本发明为一种包括马尼地平、辛伐他汀的药物组合在制备用于抑制胰腺癌生长的药物中的用途。
本发明为一种用于治疗胰腺癌的药物，其具有马尼地平和辛伐他汀。
本发明为一种用于抑制胰腺癌生长的药物，其具有马尼地平和辛伐他汀。
试验实施例1：马尼地平或辛伐他汀抑制胰腺癌细胞的活力。
本发明在人胰腺癌细胞株(PANC-1)中通过MTT实验检测马尼地平或者辛伐他汀是否能够抑制胰腺癌细胞的活力。结果表明马尼地平只能轻微抑制胰腺癌细胞活力，而辛伐他汀具有明显的抑制胰腺癌细胞活力的作用。
1、实验原理
噻唑蓝(3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3，5-di-phenytetrazoliumromide，MTT)是一种粉末状化学试剂，活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能，蓝紫色结晶能够在二甲基亚砜(DMSO)中被溶解成为紫色的甲瓒，其在OD490的波长下具有明显的光吸收。因此，可以通过酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与活细胞数成正比。因此，可以通过MTT实验检测化合物对细胞活力的影响。
2、实验材料与方法
1)细胞培养试剂均购于Gibico公司，DMSO购于Sigma公司，MTT购于上海生物工程有限公司。
2)MTT实验：PANC-1细胞以每孔3000个细胞数接种于96孔板，化合物加入培养液中的终浓度按照40uM开始四倍稀释，化合物孵育浓度分别为(40,000；10,000；2,500；625；156.25；39.063；9.766；2.441；0.61；0nM)，化合物孵育3天时间，然后通过MTT检测细胞活力。MTT配制成为5mg/ml，每孔中加入10μL，继续孵育4小时，然后吸尽培养液，每孔加入100μL的DMSO，振荡溶解10分钟，随后通过酶标仪于490nM处测定光吸收值，然后计算化合物对PANC-1细胞抑制的IC50值。
3、实验结果
结果如图1所示，马尼地平对人胰腺癌细胞(PANC-1细胞)具有较弱的抑制作用，其IC50值超过40μM(如图1a)，而辛伐他汀具有明显的胰腺癌细胞活力抑制作用，其IC50值为3μM(如图1b)。
试验实施例2：马尼地平显著增加辛伐他汀抑制胰腺癌细胞的活力。
1、实验原理
噻唑蓝(3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3，5-di-phenytetrazoliumromide，MTT)是一种粉末状化学试剂，活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能，蓝紫色结晶能够在二甲基亚砜(DMSO)中被溶解成为紫色的甲瓒，其在OD490的波长下具有明显的光吸收。因此，可以通过酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与活细胞数成正比。因此，可以通过MTT实验检测化合物对细胞活力的影响。
2、实验材料与方法
1)细胞培养试剂均购于Gibico公司，DMSO购于Sigma公司，MTT购于上海生物工程有限公司。
2)MTT实验：PANC-1细胞以每孔3000个细胞数接种于96孔板，辛伐他汀加入培养液中的终浓度按照40uM开始四倍稀释，化合物孵育浓度分别为(40,000；10,000；2,500；625；156.25；39.063；9.766；2.441；0.61；0nM)，同时加入终浓度为10μM的马尼地平，化合物孵育3天时间，然后通过MTT检测细胞活力。MTT配制成为5mg/ml，每孔中加入10μL，继续孵育4小时，然后吸尽培养液，每孔加入100μL的DMSO，振荡溶解10分钟，随后通过酶标仪于490nM处测定光吸收值，然后计算化合物对PANC-1细胞抑制的IC50值。
3、实验结果
结果如图2所示，对胰腺癌细胞本身没有明显影响的马尼地平(10μM)能够明显增加辛伐他汀对人胰腺癌细胞(PANC-1细胞)的抑制作用，使其IC50值达到0.2μM。表明马尼地平能够增加辛伐他汀对胰腺癌的活力抑制作用，马尼地平联用辛伐他汀能够起到明显的治疗胰腺癌作用。
试验实施例3：马尼地平显著增加辛伐他汀抑制胰腺癌肿瘤生长的效应。
1、实验原理
Nude裸鼠为无胸腺小鼠，其免疫力下降适合作为人源肿瘤细胞的异种抑制实验。本实验通过将人源胰腺癌细胞(PANC-1细胞)接种于Nude小鼠皮下，形成人源肿瘤细胞的异种接种。然后通过检测肿瘤体积的指标评价评价化合物抗肿瘤活性。
2、实验方法及材料
1)实验动物：
50只裸鼠，进行PANC-1细胞皮下移植，10-15天后选择裸鼠肿瘤体积为100-300mm3的成功造模小鼠40只，根据肿瘤体积随机分组，尽量满足每组小鼠肿瘤体积平均值差异较小，无统计学意义，组间小鼠的肿瘤体积的SD值小于平均值的1/3。
2)实验材料：
马尼地平和辛伐他汀均购买于上海毕得医药科技有限公司，DMEM培养液，小牛胚胎血清，PS等细胞培养试剂均购买于Gibico公司。
3)实验方法：
本实验采用人员胰腺癌PANC-1细胞皮下接瘤造肿瘤模型，PANC-1细胞培养扩大后，以5*106/只小鼠接种于裸鼠皮下，随后每三天监测一次皮下肿瘤生长情况，于10-15天后选取裸鼠肿瘤体积为100-300mm3的成功造模小鼠40只，随机分为4组，每组10只，尽量满足每组小鼠肿瘤体积平均值差异较小，无统计学意义，组间小鼠的肿瘤体积的SD值小于平均值的1/3。分组后，开始腹腔注射给予不同化合物(溶剂组、马尼地平组(10mg/kg/day)、辛伐他汀组(30mg/kg/day)和马尼地平(10mg/kg/day)+辛伐他汀组(30mg/kg/day))，持续3周，给药期间，每三天监测肿瘤体积。以肿瘤大小评价药物对于肿瘤的治疗效果。
3、实验结果
结果如图3所示，马尼地平(10mg/kg/day)对于胰腺癌肿瘤的基本没有抑制作用，辛伐他汀(30mg/kg/day)对胰腺癌肿瘤的大小具有抑制作用，同时马尼地平(10mg/kg/day)对辛伐他汀抑制胰腺癌大小的作用具有明显的增强。表明马尼地平能够增强辛伐他汀治疗胰腺癌的作用，马尼地平联用辛伐他汀具有高效的抗胰腺癌的作用。
以上仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其它相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。