阅读说明：本技术 一种溴己新在制备抗癌药物中的应用 (Application of bromhexine in preparation of anti-cancer drugs ) 是由 赵承光 杨乐和 石灵西 陈丝雨 林梦莎 朱宇 李继法 朱建东 黄晓颖 王良兴 于 2019-05-29 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种溴己新在制备抗癌药物中的应用,试验结果表明,溴己新能够显著抑制肺癌细胞的增殖,并且,当溴己新与顺铂、厄洛替尼、吉非替尼或阿法替尼联用的时候,表现出强烈的协同作用,因此,可以作为一种药物组合,达到更好的抗癌效果。(The invention discloses an application of bromhexine in preparing an anti-cancer drug, and test results show that the bromhexine can obviously inhibit the proliferation of lung cancer cells, and when the bromhexine is combined with cisplatin, erlotinib, gefitinib or afatinib, a strong synergistic effect is shown, so that the bromhexine can be used as a drug combination to achieve a better anti-cancer effect.)

一种溴己新在制备抗癌药物中的应用

技术领域

本发明属于药物制备领域，具体涉及一种溴己新在制备抗癌药物中的应用。

背景技术

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率居高不下，由于大气污染的加剧和吸烟等因素，其发病率仍不断上升。肺也是其他恶性肿瘤最常发生的转移部位。肺癌和肺转移癌的首选治疗手段是外科手术切除，然而具有手术切除机会的患者不到30％，其他治疗手段常用的包括靶向药物治疗、化疗和放疗等，虽然具有一定疗效，但都具有易产生耐药、副作用大等缺点。肺癌发病机制复杂、治疗效果差、复发转移率高且治疗副作用大、精准性差等因素均是导致总体治疗效果不佳的主要原因。因此，阐明肺癌发病机制并研究新的治疗策略具有重要的研究意义。

溴己新是目前临床上广泛应用的化痰药物。溴己新可使痰中的多糖纤维素裂解，降低痰液的粘稠度，还能引起呼吸道分泌粘液性第的小分子粘蛋白，使痰液变稀。其主要适应症是慢性支气管炎、哮喘等引起的粘液不易咳出的患者。

发明内容

本发明提供了一种溴己新在制备抗癌药物中的应用，实验结果表明，溴己新具有一定的抗癌效果，可以作为一种新的抗癌药物。

作为优选，所述的抗癌药物用于治疗肺癌。

试验结果表明，溴己新可以明显抑制肺癌细胞PC-9、A549和H460 的增殖，作为优选，所述的抗癌药物用于抑制肺癌细胞PC-9、A549和H460 的增殖。

试验结果表明，所述的抗癌药物还可以用于抑制NSCLC细胞集落形成。

作为优选，所述的抗癌药物包括活性成分；

所述的活性成分由溴己新和其他抗肺癌药物组成。

细胞试验表明，溴己新与某些特定的药物联用，可以获得较好的协同写过，作为优选，所述的其他抗肺癌药物为顺铂、厄洛替尼、吉非替尼和阿法替尼中的一种或者多种。

作为优选，所述的活性成分由溴己新和厄洛替尼组成；

所述的抗癌药物用于抑制肺癌细胞H460和PC-9的增殖。

作为进一步的优选，所述的溴己新和厄洛替尼的摩尔比为1：0.1～2，此时，两者联用具有强的协同作用，显著提高抗癌作用。

作为优选，所述的活性成分由溴己新和顺铂组成；

所述的抗癌药物用于抑制肺癌细胞H460的增殖。

作为进一步的优选，所述的溴己新和顺铂的摩尔比为1：0.1～2，此时，两者联用具有强的协同作用，显著提高抗癌作用。

同现有技术相比，本发明的有益效果体现在：

(1)本发明开发了化痰药物溴己新新的抗癌用途，尤其是作用于肺癌；

(2)本发明通过溴己新与现有抗肺癌药物的联用，两者之间可以产生强协同作用，提高抗癌效果，降低药物用量。

附图说明

图1为实施例1中MTT试验溴己新对肺癌细胞增殖的抑制作用；

图2为实施例2中溴己新抑制NSCLC细胞集落形成；

图3为实施例3中联合使用溴己新和厄洛替尼联合协同发挥抗 NSCLC活性；

图4为实施例4中联合使用溴己新和顺铂联合协同发挥抗NSCLC活性。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步的描述。

实施例1

选取了三株人非小细胞肺癌细胞株PC-9，A549，H460，通过MTT 实验观察溴己新对这些肺癌细胞增殖的影响。在96孔板中按3000个/孔铺入细胞，待细胞贴壁后加入不同药物浓度的溴己新(溶剂为DMSO)，药物作用48h后加入20ul/孔MTT溶液(5mg/ml)。继续孵育4小时后终止培养，小心吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO溶解结晶物。用酶联免疫监测仪在490nm波长上测定各孔光吸收值，观察溴己新对这些肺癌细胞增殖的影响，结果如图1所示。结果显示：作用48h后能够剂量依赖性的抑制NSCLC细胞株的增殖，其中PC-9的IC50最低，药物最敏感。

实施例2溴己新抑制NSCLC细胞集落形成。

肿瘤细胞能够无限增殖形成细胞集落，通过集落形成实验，我们可以了解化合物对细胞增殖的影响。在6孔板中按1000个/孔将细胞均匀铺入，待细胞贴壁后加入不同浓度的溴己新(25μM,50μM,100μM，溶剂为 DMSO)作用NSCLC细胞作用24h后撤去药物，加入新鲜培养基继续培养，待细胞形成肉眼可见的集落，4％多聚甲醛固定后用结晶紫染色，比较各孔间集落的大小和数量，结果如图2所示。结果表明，溴己新能剂量依赖性地抑制这两株NSCLC细胞集落形成。

实施例3溴己新增敏EGFR抑制剂发挥抗NSCLC作用

以厄洛替尼、吉非替尼和阿法替尼为代表的EGFR-TKIs是EGFR突变非小细胞肺癌的一线治疗药物。然而起初对EGFR-TKIs治疗敏感的患者几乎最终都产生耐药，使该类药物的临床疗效、应用受到限制。通过 MTT实验，发现溴己新可以增敏厄洛替尼发挥抗肿瘤作用。我们利用溴己新和不同浓度梯度的厄洛替尼(0.5μM,1μM,2.5μM,5μM,10μM)共同作用于肺癌细胞H460和PC-9，结果如图3所示，图3中，(A)溴己新和厄洛替尼单独或联合抑制H460细胞生存率。(B)溴己新和厄洛替尼单独或联合抑制PC-9细胞生存率。Br:溴己新(其浓度为5μM)、E：Erlotinib(其浓度分别为0.5μM 1μM 2.5μM 5μM和10μM)。

针对H460细胞，5μM的溴己新与0.5μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为0.04527；5μM的溴己新与1μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为 0.04092；5μM的溴己新与2.5μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为0.04212；5μM的溴己新与5μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为0.07563； 5μM的溴己新与10μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为0.04235。

针对PC-9细胞，5μM的溴己新与0.5μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为30718；5μM的溴己新与1μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为 0.29851；5μM的溴己新与2.5μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为 0.33573；5μM的溴己新与5μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为0.41023； 5μM的溴己新与10μM的厄洛替尼组合，药物联合指数为0.42154。

其中，0.9≤CI≤1.1为叠加作用，0.8≤CI<0.9为低度协同作用，0.6≤CI <0.8为中度协同作用，0.4≤CI<0.6为高度协同作用，0.2≤CI<0.4为强协同作用，由此可见，采用特定比例的联合用药能显著提高两药的抗肿瘤药效，同时降低起效的药物浓度，降低大剂量使用化疗药物带来的副作用。发现与单药相比，溴己新联合厄洛替尼作用48h后显著抑制NSCLC细胞株的增殖。

实施例4溴己新增敏顺铂发挥抗NSCLC作用

顺铂是治疗多种实体瘤的一线用药。对于没有驱动基因突变的晚期非小细胞肺癌患者，含铂的双药化疗为其一线治疗方案。此外以顺铂为主的联合化疗亦为晚期卵巢癌、骨肉瘤及神经母细胞瘤的主要治疗方案，与 ADM、CTX等联用对多部位鳞状上皮癌、移行细胞癌有效，如头颈部、宫颈、食管及泌尿系肿瘤等。通过MTT实验，发现溴己新可以增敏顺铂发挥抗肿瘤作用。我们利用溴己新和不同浓度梯度的顺铂 (0.5μM,1μM,2.5μM,5μM,10μM)共同作用于肺癌细胞H460，结果如图4 所示，图4中，(A)溴己新和顺铂单独或联合抑制H460细胞生存率。Br: 溴己新(其浓度为5μM)、Cis：Cisplatin(其浓度分别为0.5μM 1μM 2.5μM 5μM和10μM)。

针对H460细胞，5μM的溴己新与0.5μM的顺铂组合，药物联合指数为0.11780；5μM的溴己新与1μM的顺铂组合，药物联合指数为0.06475； 5μM的溴己新与2.5μM的顺铂组合，药物联合指数为0.15718；5μM的溴己新与5μM的顺铂组合，药物联合指数为0.08367；5μM的溴己新与10μM 的顺铂组合，药物联合指数为0.05789。

针对PC-9细胞，5μM的溴己新与0.5μM的顺铂组合，药物联合指数为0.26602；5μM的溴己新与1μM的顺铂组合，药物联合指数为0.23788； 5μM的溴己新与2.5μM的顺铂组合，药物联合指数为0.17607；5μM的溴己新与5μM的顺铂组合，药物联合指数为0.28761；5μM的溴己新与10μM 的顺铂组合，药物联合指数为0.26874。

发现与单药相比，溴己新联合顺铂作用48h后显著抑制H460的增殖。