阅读说明：本技术 化合物as1842856的用途 (Application of compound AS1842856 ) 是由 朱维莉 陆林 时杰 丁增波 李素霞 武潇 黄英杰 吴萍 薛言学 于 2019-11-26 设计创作，主要内容包括：本发明公开了化合物AS1842856的用途。本发明化合物AS1842856或其药用盐应用于制备预防和/或治疗合成毒品成瘾的药物中。本发明化合物AS1842856实验证明在小鼠甲基苯丙胺戒断模型中表现出明显的抗焦虑作用、抗抑郁作用和改善认知功能的作用,说明其具有预防和/或治疗合成毒品成瘾的作用,能够用于治疗甲基苯丙胺的戒断症状,从而减少复吸。(The invention discloses application of a compound AS 1842856. The compound AS1842856 or the medicinal salt thereof is applied to preparing the medicine for preventing and/or treating the addiction to the synthetic drugs. Experiments of the compound AS1842856 prove that the compound AS1842856 has obvious anxiolytic effect, antidepressant effect and cognitive function improving effect in a mouse methamphetamine withdrawal model, so that the compound AS1842856 has the effect of preventing and/or treating addiction to synthetic drugs, can be used for treating withdrawal symptoms of methamphetamine, and further reduces relapse.)

化合物AS1842856的用途

技术领域

本发明涉及化合物AS1842856的用途，具体涉及化合物AS1842856在制备预防和/或治疗合成毒品成瘾的药物中的用途。

背景技术

目前全球毒品滥用问题依然十分严竣，据***毒品与犯罪问题办公室(UNODC)《2017年世界毒品报告》数据显示，截止到2015年年底，全球有2.5亿人在使用非法药物。由于药物滥用导致的疾病人数更是逐年攀升，由此导致巨大的经济损失和严重的社会问题。近年来，毒品滥用问题不断发生新变化，呈现出滥用***等阿片类传统毒品人员比例下降，而滥用新型合成毒品人员比例显著上升。公安部《2018中国毒品形势报告》指出，截至2018年年底，甲基***(俗称“***”)已经成为滥用的“头号毒品”。全国现有吸毒人员240.4万名，其中滥用***人员高达135万名，占吸毒人员总数的56.1％，***已经取代***成为我国滥用人数最多的毒品。根据甲基***等合成毒品自身的特点，有其针对性的诊断治疗指导原则。合成毒品有害使用应早期发现与干预，主要采取药物、心理、社会综合治疗的模式，促进躯体、心理、社会的全面康复，重建健康的生活方式，从而预防复发。

众所周知，长期使用毒品不仅严重危害吸毒者的精神心理健康，更与心血管疾病、代谢相关疾病息息相关。例如，多项流行病学证据均指出长期吸烟能显著增加2型糖尿病风险。叉头转录因子O亚族1(forkhead box transcription factor O1，FoxO1)是forkhead蛋白家族的一个亚群，在脂肪细胞及胰岛β细胞胰岛素作用的发挥中起重要作用。动物实验研究表明，抑制肥胖大鼠脑内FoxO1可以逆转高脂饮食引起的肥胖。

化合物AS1842856是一种人工合成的FoxO1选择性小分子抑制剂，其CAS号为836620-48-5，命名为5-氨基-7-(环己基氨基)-1-乙基-6-氟-4-氧代-1，4-二氢喹啉-3-羧酸或5-氨基-7-(环己基氨基)-1-乙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-3-喹啉羧酸，其结构式如下式I所示：

研究发现化合物AS1842856能够剂量依赖性与去磷酸化FoxO1结合，使FoxO1从细胞核向细胞质转移，导致细胞质中p-FoxO1的蛋白水平升高和细胞核中FoxO1的蛋白水平降低，抑制FoxO1活性。然而，FoxO1抑制剂AS1842856在治疗合成毒品成瘾领域的临床前研究证据，尚无人报道。

发明内容

本发明的目的是提供化合物AS1842856的用途，具体提供化合物AS1842856或其药用盐在制备预防和/或治疗合成毒品成瘾的药物中的用途。

本发明提供的化合物AS1842856或其药用盐在制备预防和/或治疗合成毒品成瘾的药物中的应用。

上述的应用中，所述合成毒品成瘾包括甲基***的成瘾，合成毒品具体可为右旋甲基***盐酸盐。

本发明提供了一种预防和/或治疗合成毒品成瘾的药物，其活性成分为所述化合物AS1842856或其药用盐。

上述的药物中，所述药物的剂型为药学上可接受的剂型。

上述的药物中，所述药物的剂型具为口服剂型、注射剂型、吸入剂型和舌下剂型中的至少一种。

上述的药物中，所述药物的给药单位剂量可为15～50mg/kg，具体可为30mg/kg、15～30mg/kg、30～50mg/kg或20～40mg/kg。

本发明中，所述药物的辅料为本领域公知的常规辅料，具体可为羧甲基纤维素-钠。

本发明中，采用液体剂型时，所述药物的浓度可为0.5～5mg/ml，具体可为1.5mg/ml、0.5～5mg/ml、0.5～5mg/ml或1～3mg/ml。具体一种配制方法为：取15mg AS1842856溶于10ml 1％羧甲基纤维素-钠(CMC-Na)，得到均匀的混悬液(如果药粉有聚团，可以涡旋和超声打散)。具体通过口服给药。

本发明具有以下优点：

本发明化合物AS1842856实验证明在小鼠甲基***戒断模型中表现出明显的抗焦虑作用、抗抑郁作用和改善认知功能的作用，说明其具有预防和/或治疗合成毒品成瘾的作用，能够用于治疗甲基***的戒断症状，从而减少复吸。

附图说明

图1是制作小鼠甲基***戒断模型的流程图。

图2是化合物AS1842856对甲基***戒断小鼠在新环境抑制摄食实验中焦虑行为影响的示意图。

图3是化合物AS1842856对甲基***戒断小鼠在高架十字迷宫实验中焦虑行为影响的示意图。

图4是化合物AS1842856对甲基***戒断小鼠在社会交互行实验中抑郁行为影响的示意图。

图5是化合物AS1842856对甲基***戒断小鼠在强迫游泳实验中抑郁行为影响的示意图。

图6是化合物AS1842856对甲基***戒断小鼠在悬尾实验中抑郁行为影响的示意图。

图7是化合物AS1842856对甲基***戒断小鼠在新物体识别实验中认知功能影响的示意图。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中，实验动物为4-6周C57BL/6雄性小鼠(体重20-22g)，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2016-0011。

下述实施例中，所用甲基***为右旋甲基***盐酸盐，由公安部禁毒情报技术中心提供(批号2043-201404)，纯度99.1％。小鼠甲基***腹腔注射剂量为5mg/kg(ip)，取2.5mg右旋甲基***盐酸盐，溶于10ml无菌生理盐水，小鼠腹腔注射体积为0.2ml/10g体重。

下述实施例中，化合物AS1842856购自美国MCE公司。

下述实施例中，化合物AS1842856是按照包括如下步骤的方法制备得到的：按照AS1842856小鼠灌胃给药量30mg/kg，小鼠一般灌胃药液体积为0.2ml/10g体重，所配药物浓度为1.5mg/ml。具体配制方法为，取15mg AS1842856溶于10ml 1％羧甲基纤维素-钠(CMC-Na)，得到均匀的混悬液(如果药粉有聚团，可以涡旋和超声打散)。

下述实施例中涉及的动物行为学测试方法均为实验室常规方法，具体操作如下：

小鼠新环境抑制摄食实验：实验在42cm×42cm×25cm的顶部开放的有机玻璃箱中进行，中央区域摆放一颗小鼠日常进食饲料。小鼠禁食24小时后，单独放入实验装置中，以摄食潜伏期作为评价焦虑样行为的指标，即从小鼠放入实验装置开始至小鼠嘴部接触食物为止的时间(秒)。摄食实验时间为5分钟，最长潜伏期为300秒。

小鼠高架十字迷宫实验：高架十字迷宫装置由两个闭合臂、两个开放臂和中心区域组成，开放臂和闭合臂臂长33cm，宽5cm，闭合臂高25cm，中心区域为5cm×5cm，高架十字迷宫距离地面55cm。测试开始时，将小鼠置于设备中心区域，并使小鼠头部朝向开放臂，小鼠在高架十字迷宫中自由活动5min，分别记录小鼠在开放臂和闭合臂的停留时间(秒)，实验结果以小鼠在开放臂的停留时间/小鼠在闭合臂的停留时间表示。

小鼠社会交互行为实验：实验在42cm×42cm×25cm的开放场内进行。社会交互行为实验分为两个阶段，每个阶段2.5分钟，两个阶段中间间隔30秒。第一阶段将C57BL/6测试小鼠随机放置到交互区域远端的角落处，交互区域内放置一个3cm×6cm×25cm的布满小孔的塑料透明小盒，盒内不放置C57BL/6小鼠，让C57BL/6测试小鼠在开场内自由活动，记录C57BL/6测试小鼠在交互区域停留的时间(秒)。第二阶段，向透明小盒内放置一只C57BL/6小鼠，再次将C57BL/6测试小鼠放回到开场的角落处，观察C57BL/6测试小鼠与透明小盒内C57BL/6小鼠的交互情况，并记录C57BL/6测试小鼠在交互区域停留的时间(秒)。社交比率＝第二阶段小鼠在交互区域停留的时间/第一阶段小鼠在交互区域停留的时间。

小鼠强迫游泳实验：强迫游泳实验在直径20cm×高30cm的有机玻璃缸中进行，水深15cm，水温23±1℃。小鼠游泳时，保证其不能依靠四肢或尾巴支撑，并保证鼻尖能够露出水面呼吸。实验前1天，依次将各组小鼠分别放入玻璃缸中进行15分钟的游泳预适应。第2天，进行强迫游泳测试。小鼠游泳时间为6分钟，实验开始2分钟后，记录后4分钟小鼠漂浮不动时间(秒)，并作为绝望行为的指标。

小鼠悬尾实验：小鼠悬尾试验装置为长15cm×宽15cm×高50cm的白色有机树脂。实验时，用白色胶布在小鼠尾尖1cm处将其倒置固定于悬挂杆上，悬挂杆距地面高度为50cm，记录小鼠在6分钟内的静止不动时间(秒)，即小鼠被动悬挂时，除呼吸引起的肢体或身体运动外，没有其它任何肢体或身体运动。

小鼠新物体识别实验：实验在42cm×42cm×25cm的顶部开放的有机玻璃箱中进行。第1天，将小鼠单独依次放入有机玻璃箱中10分钟，使其适应环境。第2天，将两个相同的圆柱体A(直径5cm，高4.5cm)放入有机玻璃箱中央位置，随后将小鼠放入有机玻璃箱中5分钟，使其自由探索两个圆柱体(物体A)。第3天，将其中一个圆柱体用一个形状不同但体积大小相似的新物体(边长为4.5cm的立方体)(物体B)所代替。然后，再次将小鼠放入有机玻璃箱中5分钟，记录小鼠在物体A和物体B的探索时间(小鼠的鼻子距离物体小于2cm)。测试过程中的识别指数按以下公式计算：新物体识别指数＝物体B的探索时间/(物体A的探索时间+物体B的探索时间)，探索时间单位为秒。

数据统计：数据分析采用GraphPad Prism7软件(GraphPad Software Inc.)。结果均以平均值±标准误(mean±SEM)表示，所有数据均采用D′Agostino&Pearson normality和Brown-Forsythe分别进行正态分布和方差齐性检验。若数据符合正态分布和方差齐性，对单因素的两组数据采用Unpaired t-test，对单因素的多组数据采用One-way ANOVA分析。若数据不符合正态分布和方差齐性，则采用Mann-Whitney检验，Kruskal-Wallis One-way ANOVA分析。多组间的两两比较均用Tukey′s multiple comparisons test分析。以P＜0.05作为显著性差异标准。

实施例1、小鼠甲基***戒断模型的制备

按照图1所示实验流程，具体过程如下。

1.实验分组：小组随机分为4组，分别为生理盐水组、甲基***-无戒断组；甲基***-戒断组；甲基***-戒断+AS1842856组，每组10-11只小鼠。

2.实验共分为四个阶段：

第一阶段：实验开始前，各组小鼠在动物房适应性饲养8天，5-6只/笼，自由饮水进食。

动物房恒温(22±2℃)、恒湿(50±10％)，光照周期为12/12h昼夜节律控制(8:00关灯，20:00开灯)。动物接受的所有操作均符合实验动物伦理学，遵循国家和北京大学医学部动物使用和保护委员会颁布的条例。

第二阶段：甲基***长期给药阶段，除生理盐水组外，各组小鼠每天腹腔注射右旋甲基***盐酸盐(5mg/kg，ip)，每天注射1次，连续10天；生理盐水组小鼠每天腹腔注射相同体积的无菌生理盐水。

第三阶段：甲基***戒断阶段，从实验第11天开始，除甲基***-无戒断组小鼠继续腹腔注射7天右旋甲基***盐酸盐(5mg/kg，i.p.)外，其余三组小鼠每天腹腔注射无菌生理盐水，连续7天。其中，甲基***-戒断+AS1842856组小鼠，除每天腹腔注射生理盐水外，还灌胃给予AS1842856(30mg/kg，p.o.)，每天灌胃1次，连续灌胃7天。

第四阶段：行为学测试阶段，在实验的第18天，各组小鼠分别进行新环境抑制摄食实验、高架十字迷宫实验、社会交互行为实验、新物体识别实验、强迫游泳实验和悬尾实验。

实施例2、化合物AS1842856在小鼠甲基***戒断模型中表现出明显的抗焦虑作用

如图2所示，在小鼠新环境抑制摄食实验中，单因素方差分析结果显示，与生理盐水组和甲基***-无戒断组相比，经历7天甲基***戒断的小鼠摄食潜伏期明显增加(P＜0.0001)，而在戒断期灌胃给予化合物AS1842856则显著缩短小鼠的摄食潜伏期(P＜0.0001)。此外，在小鼠高架十字迷宫实验中，单因素方差分析结果显示，与生理盐水组(P＜0.001)和甲基***-无戒断组(P＜0.01)相比，经历7天甲基***戒断的小鼠在开放臂的停留时间明显减少，而在戒断期灌胃给予化合物AS1842856则显著增加小鼠在高架十字迷宫的开放臂停留时间(P＜0.001，图3所示)。上述实验结果表明，甲基***戒断7天的小鼠表现显著的焦虑样行为，而在戒断的同时给予化合物AS1842856能够有效逆转由戒断引起的小鼠焦虑样行为。

实施例3、化合物AS1842856在小鼠甲基***戒断模型中表现出明显的抗抑郁作用

如图4所示，在社会交互行为实验中，单因素方差分析结果显示，与生理盐水组和甲基***-无戒断组相比，经历7天甲基***戒断的小鼠社交比率明显下降(P＜0.0001)，而在戒断期灌胃给予化合物AS1842856则显著增加小鼠的社交比率(P＜0.0001)。同时，在小鼠强迫游泳实验中，单因素方差分析结果显示，与生理盐水组(P＜0.05)和甲基***-无戒断组(P＜0.01)相比，经历7天甲基***戒断的小鼠的游泳不动时间明显增加，而在戒断期灌胃给予化合物AS1842856则显著减少小鼠在强迫游泳实验中的不动时间(P＜0.01，图5所示)。此外，在小鼠悬尾实验中，单因素方差分析结果显示，与生理盐水组(P＜0.0001)和甲基***-无戒断组(P＜0.001)相比，经历7天甲基***戒断的小鼠在悬尾实验中的不动时间明显增多，而在戒断期灌胃给予化合物AS1842856则显著减少小鼠的不动时间(P＜0.01，图6所示)。

上述实验结果表明，甲基***戒断7天的小鼠表现显著的抑郁样行为，具体表现为社交比率明显下降、强迫游泳和悬尾实验不动时间延长，而在戒断的同时给予化合物AS1842856能够有效逆转由戒断引起的小鼠上述抑郁样行为。

实施例4、化合物AS1842856在小鼠甲基***戒断模型中表现出明显的改善认知功能的作用

如图7所示，在新物体识别实验中，单因素方差分析结果显示，与生理盐水组(P＜0.001)和甲基***-无戒断组相比，经历7天甲基***戒断的小鼠对新物体的识别指数明显下降(P＜0.001)，提示小鼠的认知功能受损；而在戒断期灌胃给予化合物AS1842856则显著增加小鼠对新物体的识别指数(P＜0.01)。这一实验结果表明，甲基***戒断7天的小鼠表现显著的认知功能下降，而在戒断的同时给予化合物AS1842856能够有效改善小鼠的认知功能。