阅读说明：本技术 一种用于治疗癌症的药物组合物及其应用 (Pharmaceutical composition for treating cancer and application thereof ) 是由 卞兆祥 关晓仪 龚锐洪 陈敏婷 胡显镜 法蒂玛莎瓦特 黄春华 肖海涛 于 2019-09-17 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种用于治疗癌症的药物组合物,属于生物医药领域。所述药物组合物包括LGK974和青嵩琥酯,并且在所述药物组合物中,LGK974和青嵩琥酯摩尔浓度比为1：3～3：1。本发明还公开了LGK974和青嵩琥酯在制备用于治疗癌症的药物中的用途。本发明的药物组合物或药物能够更为有效的治疗癌症,同时降低毒副作用,具有显著的医药价值。(The invention discloses a pharmaceutical composition for treating cancer, and belongs to the field of biological medicines. The pharmaceutical composition comprises LGK974 and sweet-scented osmanthus, and the molar concentration ratio of the LGK974 to the sweet-scented amber in the pharmaceutical composition is 1: 3-3: 1. the invention also discloses application of the LGK974 and the sweet wormwood succinate in preparing a medicament for treating cancer. The pharmaceutical composition or the medicament can more effectively treat cancer, simultaneously reduces toxic and side effects, and has remarkable medical value.)

一种用于治疗癌症的药物组合物及其应用

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体地，涉及一种用于治疗癌症的药物组合物及其应用。

背景技术

在全球范围内，结肠癌都有着较高的发病率和致死率。近几十年来，人类为治疗结肠癌付出了不懈的努力，对结肠癌的研究主要集中在开发新的治疗方法和减轻治疗方法对病人的副作用。现在常用的治疗结肠癌的方法主要是手术或者化疗，但是很多情况下不仅不能高效地治疗病人，并且还具有很高的并发症的风险，一些治疗结肠癌的药物不仅有多种副作用，而且还可能会引起多重耐药。近年来联合用药逐渐成为癌症治疗的研究热点，联合用药可以通过发挥药物的协同抗癌作用,达到在减小化疗药物毒副作用的同时增加药物抗癌效果的目的。

LGK-974是一种有效的特异性PORCN抑制剂，抑制Wnt通路，其通过特异性抑制PORCN介导的酰基化修饰从而抑制Wnt配体分子如Wnt-3a的分泌，主要用于治疗依赖Wnt配体的恶性肿瘤，目前该药已处于I期临床试验阶段。LGK-974的分子式为C₂₃H₂₀N₆O。

青蒿琥酯是从植物黄花蒿茎叶中提取的有过氧基团的倍半萜内酯药物。近年来，研究发现青蒿琥酯在抗癌方面具有良好的活性，具体作为抗癌药物可能有两种应用方式：一种是作为单独使用的抗肿瘤药物；另一种是与其他肿瘤化疗药物联合使用，作为一种增敏剂的抗肿瘤药物。

然而，对于癌症治疗，目前仍然缺少十分有效的药物。

发明内容

为了解决上述技术问题，发明人意外地发现，青蒿琥酯和LGK974和的联合应用能够产生协同作用，进而更为有效的治疗癌症，同时降低毒副作用。从而完成本发明。

本发明的目的是提供一种新的抗结肠癌联合药物组合，为此，

本发明一方面提供一种用于治疗癌症的药物组合物，所述药物组合物包括LGK974和青嵩琥酯。

在本发明的一些实施方案中，所述药物组合物中，LGK974和青嵩琥酯摩尔浓度比为1：3～3：1。例如1：3、1：2、1：1、2：1、3：1。在本发明的一些优选实施方案中，所述药物组合物中，LGK974和青嵩琥酯摩尔浓度比为1：1。

本发明的第二方面提供LGK974和青嵩琥酯在制备用于治疗癌症的药物中的应用。

在本发明的一些实施方案中，所述药物中，LGK974和青嵩琥酯摩尔浓度比为1：3～3：1。例如1：3、1：2、1：1、2：1、3：1。在本发明的一些优选实施方案中，所述药物中，LGK974和青嵩琥酯摩尔浓度比为1：1。

在本发明中，所述癌症为依赖Wnt配体的恶性肿瘤。

在本发明的一些实施方案中，所述癌症为结肠癌。

本发明的有益效果

相对于现有技术，本发明的有益技术效果是：LGK974与青蒿琥酯组合具有显著地协同作用，能够更为有效的治疗癌症，同时降低毒副作用。其中组合药物的活性甚至优于常用结肠癌药物5-FU的活性。

附图说明

图1示出了LGK974(WNT974)和青蒿琥酯的组合药物与单独用药在接种结肠癌肿瘤的裸鼠体内的活性比较。

图2示出了LGK974(WNT974)和青蒿琥酯的组合药物与单独用药后接种结肠癌肿瘤的裸鼠体内肿瘤体积的大小比较。

具体实施方式

为了使本发明所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。

实施例

以下例子在此用于示范本发明的优选实施方案。本领域内的技术人员会明白，下述例子中披露的技术代表发明人发现的可以用于实施本发明的技术，因此可以视为实施本发明的优选方案。但是本领域内的技术人员根据本说明书应该明白，这里所公开的特定实施例可以做很多修改，仍然能得到相同的或者类似的结果，而非背离本发明的精神或范围。

除非另有定义，所有在此使用的技术和科学的术语，和本发明所属领域内的技术人员所通常理解的意思相同，在此公开引用及他们引用的材料都将以引用的方式被并入。

那些本领域内的技术人员将意识到或者通过常规试验就能了解许多这里所描述的发明的特定实施方案的许多等同技术。这些等同将被包含在权利要求书中。

实施例1 LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞HCTl16的抑制作用

将人结肠癌细胞HCT-116接种入96孔板中，每孔100μL细胞悬液。培养介质为DMEM培养液，并添加有10％FBS和2mM谷氨酸盐。接种24小时后，分别添加LGK974、青嵩琥酯和LGK974与青蒿琥酯的组合物，对照组培养基不加药物。添加化合物48小时后，细胞存活率采用MTT法来评估；采用Calcusyn软件计算LGK974与青嵩琥酯组合药物的协同指数(CI)。肿瘤细胞存活率＝实验组OD值/对照组ODX 100％。表1示出了LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞HCTl16的抑制作用。

表1

从表1可知，不同浓度的LGK974和青蒿琥酯均对结肠癌细胞HCTl16具有一定的抵制作用，其中，两者同时使用时，具有一定的协同作用。

实施例2 LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞SW 480的抑制作用

(2)将人结肠癌细胞SW 480接种入96孔板中，每孔100μL细胞悬液。培养介质为DMEM培养液，并添加有10％FBS和2mM谷氨酸盐。接种24小时后，分别添加LGK974、青嵩琥酯和LGK974与青蒿琥酯的组合物，对照组培养基不加药物。添加化合物48小时后，细胞存活率采用MTT法来评估；采用Calcusyn软件计算LGK974与青嵩琥酯组合药物的协同指数(CI)。肿瘤细胞存活率＝实验组OD值/对照组ODX 100％。表2示出了LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞SW 480的抑制作用

表2

从表2可知，不同浓度的LGK974和青蒿琥酯均对结肠癌细胞SW 480具有一定的抵制作用，其中，两者同时使用时，具有一定的协同作用。

实施例3 LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞SW 620的抑制作用

将人结肠癌细胞SW 620接种入96孔板中，每孔100μL细胞悬液。培养介质为DMEM培养液，并添加有10％FBS和2mM谷氨酸盐。接种24小时后，分别添加LGK974、青嵩琥酯和LGK974与青蒿琥酯的组合物，对照组培养基不加药物。添加化合物48小时后，细胞存活率采用MTT法来评估；采用Calcusyn软件计算LGK974与青嵩琥酯组合药物的协同指数(CI)。肿瘤细胞存活率＝实验组OD值/对照组ODX 100％。表3示出了LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞SW 620的抑制作用。

表3

从表3可知，不同浓度的LGK974和青蒿琥酯均对结肠癌细胞SW 620具有一定的抵制作用，其中，两者同时使用时，具有一定的协同作用。

实施例4 LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞RKO的抑制作用

将人结肠癌细胞RKO接种入96孔板中，每孔100μL细胞悬液。培养介质为DMEM培养液，并添加有10％FBS和2mM谷氨酸盐。接种24小时后，分别添加LGK974、青嵩琥酯和LGK974与青蒿琥酯的组合物，对照组培养基不加药物。添加化合物48小时后，细胞存活率采用MTT法来评估；采用Calcusyn软件计算LGK974与青嵩琥酯组合药物的协同指数(CI)。肿瘤细胞存活率＝实验组OD值/对照组ODX 100％。表4示出了LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞RKO的抑制作用。

表4

从表4可知，不同浓度的LGK974和青蒿琥酯均对结肠癌细胞RKO具有一定的抵制作用，其中，两者同时使用时，具有一定的协同作用。

实施例5 LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞HT 29的抑制作用

将人结肠癌细胞HT 29接种入96孔板中，每孔100μL细胞悬液。培养介质为DMEM培养液，并添加有10％FBS和2mM谷氨酸盐。接种24小时后，分别添加LGK974、青嵩琥酯和LGK974与青蒿琥酯的组合物，对照组培养基不加药物。添加化合物48小时后，细胞存活率采用MTT法来评估；采用Calcusyn软件计算LGK974与青嵩琥酯组合药物的协同指数(CI)。肿瘤细胞存活率＝实验组OD值/对照组ODX 100％。表5示出了LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞HT 29的抑制作用。

表5

从表5可知，不同浓度的LGK974和青蒿琥酯均对结肠癌细胞HT 29具有一定的抵制作用，其中，两者同时使用时，具有一定的协同作用。

实施例6LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞HCT-15的抑制作用

将人结肠癌细胞HCT-15接种入96孔板中，每孔100μL细胞悬液。培养介质为DMEM培养液，并添加有10％FBS和2mM谷氨酸盐。接种24小时后，分别添加LGK974、青嵩琥酯和LGK974与青蒿琥酯的组合物，对照组培养基不加药物。添加化合物48小时后，细胞存活率采用MTT法来评估；采用Calcusyn软件计算LGK974与青嵩琥酯组合药物的协同指数(CI)。肿瘤细胞存活率＝实验组OD值/对照组ODX 100％。表6示出了LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞HCT-15的抑制作用。

表6

从表6可知，不同浓度的LGK974和青蒿琥酯均对结肠癌细胞HCT-15具有一定的抵制作用，其中，两者同时使用时，具有一定的协同作用。

实施例7 LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞COLO 205的抑制作用

将人结肠癌细胞COLO 205接种入96孔板中，每孔100μL细胞悬液。培养介质为DMEM培养液，并添加有10％FBS和2mM谷氨酸盐。接种24小时后，分别添加LGK974、青嵩琥酯和LGK974与青蒿琥酯的组合物，对照组培养基不加药物。添加化合物48小时后，细胞存活率采用MTT法来评估；采用Calcusyn软件计算LGK974与青嵩琥酯组合药物的协同指数(CI)。肿瘤细胞存活率＝实验组OD值/对照组ODX 100％。表7示出了LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞COLO 205的抑制作用。

表7

从表7知，不同浓度的LGK974和青蒿琥酯均对结肠癌细胞COLO 205具有一定的抵制作用，其中，两者同时使用时，具有一定的协同作用。

实施例8 LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞COLO 325的抑制作用

将人结肠癌细胞COLO 325接种入96孔板中，每孔100μL细胞悬液。培养介质为DMEM培养液，并添加有10％FBS和2mM谷氨酸盐。接种24小时后，分别添加LGK974、青嵩琥酯和LGK974与青蒿琥酯的组合物，对照组培养基不加药物。添加化合物48小时后，细胞存活率采用MTT法来评估；采用Calcusyn软件计算LGK974与青嵩琥酯组合药物的协同指数(CI)。肿瘤细胞存活率＝实验组OD值/对照组ODX 100％。表8示出了LGK974与青嵩琥酯组合药物对结肠癌细胞COLO 325的抑制作用。

表8

从表8可知，不同浓度的LGK974和青蒿琥酯均对结肠癌细胞COLO 325具有一定的抵制作用，其中，两者同时使用时，具有一定的协同作用。

实施例9 LGK974和青蒿琥酯的组合药物对接种结肠癌肿瘤的裸鼠体内肿瘤的影响

将LGK974和青蒿琥酯的组合药物、青蒿素和常山酮进行动物实验，以5-Fu作为对照药物。采用结肠癌细胞HCT116，接种于雌性裸鼠皮下，每只接种1x10⁶个细胞，待12天后，肿瘤体积长到100mm³左右，分组给药。LGK974给药剂量为5mg/kg，青蒿琥酯的给药剂量为30mg/kg，两者联用为这两个剂量之和，5-Fu的给药剂量为10mg/kg。各组均为每天腹腔注射给药一次。给药12d后，处死实验小鼠并切除肿瘤比较。

结果显示(图1、图2)，对照组肿瘤体积最大，而用LGK974和青蒿琥酯***体积显著较小，两者联用对肿瘤的抑制效果更好，表面LGK974和青蒿琥酯具有显著的协同作用，其对结肠癌肿瘤的抑制效果甚至优于常用结肠癌药物5-氟尿嘧啶(5-FU)。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。