阅读说明：本技术 含有溶菌酶的尿素酶生化鉴定管 (Urease biochemical identification tube containing lysozyme ) 是由 李立和 刘冰 魏志斌 于 2019-10-05 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种含有溶菌酶的尿素酶生化鉴定管,属于利用可见光,通过测试反应结果颜色的变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：细菌生化鉴定管中含有溶菌酶,通过溶菌酶作用使细菌细胞壁溶解,细胞胞内酶解离出来,进行生化酶学反应,根据每种细菌含有的酶特性进行细菌学鉴定。本发明方法使细菌胞内酶解离快,细菌胞内酶能够充分反应,缩短了鉴定时间,胞内酶鉴定种类多,准确的特点。(The invention discloses a urease biochemical identification tube containing lysozyme, belonging to a method for testing materials by testing the color change of reaction results by utilizing visible light. The technical scheme of the invention is as follows: the bacteria biochemical identification tube contains lysozyme, the cell wall of the bacteria is dissolved through the action of the lysozyme, intracellular enzymes of the cells are dissociated, biochemical enzymatic reaction is carried out, and bacteriological identification is carried out according to the characteristics of the enzymes contained in each kind of bacteria. The method of the invention has the characteristics of fast dissociation of the bacterial intracellular enzyme, full reaction of the bacterial intracellular enzyme, shortened identification time, and multiple and accurate identification types of the intracellular enzyme.)

含有溶菌酶的尿素酶生化鉴定管

技术领域

本发明属于一种包含酶的测定方法；或是利用可见光，通过测试反应的结果产生颜色变化来测试材料的方法，特别是涉及一种应用溶菌酶解离菌体进行细菌生化鉴定的测定方法。

背景技术

细菌鉴定通常采用细菌平板划线进行分离，然后在增菌培养基进行增殖，通过革兰氏染色进行阳性菌、阴性菌、球菌、杆菌等分类，然后再进行细菌生化反应鉴定，根据细菌特有的生化反应和革兰氏染色和形态进行细菌菌属的鉴定。然而，细菌包含有胞内酶和胞外酶，胞外酶如（1）血浆凝固酶（Coagulase）：大多数致病性金黄色葡萄球菌能产生一种血浆凝固酶（游离血浆凝固酶），能加速人或兔血浆的凝固，保护病原菌不被吞噬或免受抗体等的作用。（2）链激酶（Streptokinase）：或称链球菌溶纤维蛋白酶（Streptococcalfibrinolysin），大多数引起人类感染的链球菌能产生链激酶。其作用是能激活溶纤维蛋白酶原或胞浆素原（Plasminogen）成为溶纤维蛋白酶或胞浆毒（Plasmin），而使纤维蛋白凝块溶解。（3）透明质酸酶（Hyaluronidase）：或称扩散因子（Spreading factor）是一种酶，可溶解机体***中的透明质酸，使***疏松，通透性增加。细菌进行生化鉴定是胞外酶和分泌酶起作用，或者是已经溶解的细菌起到生化反应，这对于细菌生化鉴定中常常具有局限性。

溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase)，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶能有效地水解细菌细胞壁的肽聚糖，其水解位点是N-乙酰胞壁酸(NAM)的1位碳原子和N-乙酰葡萄糖胺(NAG)的4位碳原子间的β-1.4糖苷键。作为细胞壁的骨架，上述结构中的任何化学键断裂，皆能导致细菌细胞壁的损伤。

发明内容

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为了能简单、方便、快捷及准确地进行细菌生化鉴定，本发明提供一种经济方便快速，准确性高、含有溶菌酶的细菌生化鉴定管。

本发明采用的技术方案是：细菌生化鉴定管中含有溶菌酶，通过溶菌酶作用使细菌细胞壁溶解，细菌胞内酶解离出来，进行细菌生化酶学反应，根据每种细菌含有的酶特性进行细菌学鉴定。本发明方法因使细菌胞内酶解离快，细菌胞内酶能够充分反应，因此，缩短了鉴定时间，酶鉴定种类多，准确的特点。

凡是在所有的细菌生化鉴定管中含有溶菌酶成分，不论何种浓度均属本发明保护范围。

具体实施方式

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下面以尿素酶细菌鉴定管实施例对本发明做进一步详细说明。

实施例1

试剂的组成：

尿素酶细菌鉴定管：100ml肉汤培养基中含有溶菌酶500U，尿素5mg，酚红40μl，产尿素酶细菌可以分解尿素产氨致使培养基变碱。指示剂为酚红，阳性为红色，阴性为橘黄色。本测定管可以制成2ml安瓶备用，为一次性使用耗材。

实施例2

以大肠埃希氏菌标准菌株ATCC 25922为例，分别以本发明含有溶菌酶的尿素酶细菌鉴定管和市售不含有溶菌酶细菌鉴定管进行生化反应测试，实验结果显示，本发明实验在3小时内结果出现阳性，而市售不含有溶菌酶细菌鉴定管在22小时出现明显阳性，阳性结果强度明显低于本发明含有溶菌酶的尿素酶细菌鉴定管。

经过以上实验比较可看出，本发明在灵敏度和反应时间明显好于原有的市售尿素酶细菌鉴定管。