阅读说明：本技术 一种具有抗非小细胞肺癌作用的药物及其用途 (A kind of drug and application thereof with anti-non-small cell lung cancer effect ) 是由 陈美姿 周融融 胡洪波 彭咏波 于 2019-07-10 设计创作，主要内容包括：本发明属于药物治疗领域,公开了一种具有抗非小细胞肺癌作用的药物及其用途。该药物的活性成分为非布司他。本发明首次提出非布司他用于治疗非小细胞肺癌的方法及其在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用,非布司他应用于治疗非小细胞肺癌将是一个很有前景的老药新用途临床策略,将使更多的非小细胞肺癌患者获益。(The invention belongs to drug therapy fields, disclose a kind of drug and application thereof with anti-non-small cell lung cancer effect.The active constituent of the drug is Febustat.The method for being used to treat non-small cell lung cancer present invention firstly provides Febustat and its application in preparation treatment non-small cell lung cancer drug, it will be a very promising use of approved drugs for nonapproved uses clinical strategy that Febustat, which is applied to treatment non-small cell lung cancer, benefit more Patients with Non-small-cell Lung.)

一种具有抗非小细胞肺癌作用的药物及其用途

技术领域

本发明属于药物治疗领域，特别涉及一种具有抗非小细胞肺癌作用的 药物及其用途。

背景技术

癌症是严重危害人类健康的一大顽症，现已成为仅次于心血管病的第 二大杀手。肺癌是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之首，其中非小细胞肺 癌(Non-small cell lungcancer，简称NSCLC)占肺癌的80％。目前，非小细 胞肺癌的主要治疗方法仍然是化疗。对于存在EGFR^L858R突变或者EGFR19 号外显子存在不同缺失突变的患者(常见亚洲、女性、非吸烟、非小细胞 肺癌患者)应用吉非替尼(Gefitinib,Gef；又名易瑞沙)靶向治疗效果较好。

肿瘤化疗普遍存在副作用较大的困扰，因为其在杀死肿瘤细胞的同时 也对正常细胞具有较强的杀伤作用，很多肿瘤患者无法耐受较大剂量的化 疗而导致治疗无法继续而死亡。虽然靶向药物吉非替尼对部分EGFR存在 突变的患者具有一定的治疗作用，在临床上也取得了显著的疗效，但使用 几个疗程后，也会产生一定的耐药性和副作用，患者一般在1～2年内会发 生复发或者转移，或产生新的突变而对吉非替尼产生耐药，所以，即使使用吉非替尼(酪氨酸激酶抑制剂)治疗仍然不能非常有效地提高非小细胞 肺癌患者的五年总生存期。有研究表明某些中药分子可降低抗癌药物在使 用过程中产生的耐药性和副作用，从而提高其治疗效用。

非布司他(Febuxostat，简称FBS)，非布佐司他，其化学名为2-[(3-氰 基-4-异丁氧基)苯基]-4-甲基-5-噻唑羧酸，为黄嘌呤氧化酶(XO)抑制剂， 适用于具有痛风症状的高尿酸血症的长期治疗，临床用药显著安全。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的首要目的在于提供 一种具有抗非小细胞肺癌作用的药物。

本发明的另一目的在于提供一种上述药物的用途。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种具有抗非小细胞肺癌作用的药物，该药物的活性成分为非布司他。

所述药物还含有药学上可接受的载体。

所述药物由常规制备工艺制备得到。

上述的药物在制备抗非小细胞肺癌药物中的用途。

所述药物可用于包括人在内的哺乳动物的药物治疗。

本发明与现有技术相比具有如下突出的优点及有益效果：

发明人分别对三种不同类型的非小细胞肺癌细胞株 NCI-H1975(EGFR^L858R/T790M)，HCC827(EGFR^E746-A750del)以及A549 (EGFR^WT)为模型进行体外MTT筛选，发现其具有很强的抗增殖活性并呈 良好的时效与量效关系，具有良好的临床用药再次开发前景。同时，等效 应剂量评价表明，复合药物对正常肝细胞L-O2的毒性尚未增加。

附图说明

图1为非布司他与吉非替尼共作用对EGFR蛋白质表达降解比较图。

图2为非布司他与吉非替尼单用及联用对H1975耐药细胞移植瘤抑制 情况图。

图3为非布司他与吉非替尼单用及联用对H1975细胞移植瘤裸鼠体重 改变图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实 施方式不限于此。

实施例1：NCI-H1975(EGFR^L858R/T790M)，HCC827(EGFR^E746-A750del)以 及A549(EGFR^WT)细胞筛选优化吉非替尼Gef和非布司他FBS组合物

取对数生长期的细胞，分别接种3×10⁴个细胞/孔于96孔板上，待生长6 小时后，离心弃上清，然后按以下分组给药：肿瘤细胞设不加药组和加药 组，其中加药组设Gef和FBS单药组，Gef和FBS联合用药不同摩尔比例 组，每组设4-6个复孔，培养24小时，弃上清，加入100μl含0.5mg/ml 的MTT(四氮唑盐)无血清培养液培养4小时，加入100μl DMSO(二甲亚砜)，放置于微型振荡仪上振荡10min，再置于酶标仪上570nm处检测 OD值。结果按照以下抑制率公式计算每种情况下肿瘤细胞生长的抑制率， 具体结果见表1。

抑制率＝(1-加药组OD值/对照组OD值)

表1为FBS作用三种不同肺癌细胞72小时后的IC₅₀抑制情况。我们可 以发现随着浓度的增加，其抑制率呈显著浓度依赖性，其中发现非布司他 对吉非替尼耐药的细胞H1975同样敏感，进一步提示FBS药物对三组非小 细胞肺癌细胞株均具有显著的治疗效应。

表1 FBS作用72小时IC₅₀(μM)

实施例2：EGFR的表达及Western blot检测

免疫Western blot抗体，购买于Abcam公司的C-Caspase-3和anti-EGFR(ab52894)(Abcam)。三种细胞分别应用吉非替尼Gef或非布司他FBS 处理48小时后，收集5×10⁶细胞应用200μl的RIPA(50mM Tris pH 8.0， 150mM NaCl，0.1％SDS，0.5％sodiumdeoxycholate，1％NP-40)添加蛋 白酶抑制剂冰上裂解30分钟后，12000rpm离心10分钟，收集上清，BCA 法测定蛋白浓度，加入2×SDS loading buffer于100℃煮10分钟。总蛋白(100μg)上样，根据蛋白的分子量大小应用8-15％SDS-PAGE凝胶电泳，然 后转移到PVDF膜上(GEhealthcare)，分别应用相应的抗体孵育，化学 发光酶底物HRP Substrate(Millipore公司)，应用LAS-4000成像系统 成像(富士)。Western blot实验结果如图1所示，我们在蛋白水平检测了 EGFR蛋白的表达水平。对三种不同的非小细胞肺癌细胞，FBS药物比Gef 组都可以更好诱导EGFR和裂解的C-Caspase-3降解。

实施例3：FBS药物抑制非小细胞肺癌荷瘤小鼠的肿瘤增长

为了检测FBS对活体非小细胞肺癌的疗效，我们使用NCI-H1975细胞 在裸鼠中建立了非小细胞肺癌小鼠肿瘤模型。包括对照组(Control)(生 理盐水)；FBS(300mg/kg/d，灌胃)和Gef(25mg/kg/d，灌胃)组及与 单用剂量等同的Gef/FBS合用组，各组10只，裸鼠皮下接种肿瘤后，当皮 下肿瘤体积大于100mm³时将小鼠随机分成四组，第7天后开始灌胃给药，每天灌胃给药一次，隔天称量体重变化和肿瘤体积，用生理盐水稀释配制 悬液。每天用游标卡尺测量肿瘤的长径和短径，并按长×宽×宽/2计算其肿 瘤皮下体积，实际肿瘤体积的变化曲线如图2(p<0.01)。各组的肿瘤起始 体积相接近。13天后，对照组的肿瘤增长率明显比其它三组快，到第16天 (灌胃给药9天)，Gef组和FBS组的肿瘤体积比对照组小，并且FBS组 的下降特别显著(图2，其中p<0.01)；体重变化跟踪显示，FBS药物组 裸鼠体重降低较小(图3，其中##，p<0.01)，提示FBS药物组合具有非 常好的治疗效果和低毒副作用。

实施例4

处方：

制备工艺：

将药物和辅料分别过80目筛，将非布司他200克与48克微晶纤维素和 12克羧甲基淀粉钠充分混合，10％淀粉浆制软材，18目筛制粒，60℃下干 燥，得颗粒1。将非布司他175克与24克微晶纤维素、15克淀粉和8克羧 甲基淀粉钠充分混合，10％淀粉浆制软材，18目筛制粒，60℃下干燥，得 颗粒2。按等量递增原则，将颗粒1和颗粒2充分混合，16目筛整粒，加入硬脂酸镁，混匀，压片，片重500mg。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和 详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是， 对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以 做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利 的保护范围应以所附权利要求为准。