具体实施方式

此处指定为化合物I的化合物2-(2-(2-(2-(4-(苯并[d]噻唑-2-基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇具有下式：

本公开内容涉及化合物I的各种结晶形式，以及制备这些结晶形式的方法。本文还描述了在本文中进一步标记为“化合物I形式I”、“化合物I形式II”、“化合物I形式III”、“化合物I形式IV”、“化合物I形式V”和“无定形化合物I”的形式的化合物I。在一些实施方案中，这些形式的化合物I可以是无水的。在一些实施方案中，化合物I的这些形式可以是溶剂化物或水合物。

本文还进一步描述了化合物I的其他结晶形式。在一些实施方案中，化合物I的结晶形式可以包括化合物I的盐或共晶。

定义

如本说明书中所使用的以下词语和短语通常意图具有如下面所陈述的含义，除了在使用它们的上下文中另外说明的情况外。

术语“肌成束蛋白”是指作为肌动蛋白交联蛋白的54-58kDa蛋白。术语“肌成束蛋白”可以指代人肌成束蛋白1的氨基酸序列。术语“肌成束蛋白”包含野生型形式的核苷酸序列或蛋白质以及其任何突变体。在一些实施方案中，“肌成束蛋白”是野生型肌成束蛋白。在一些实施方案中，“肌成束蛋白”是一种或多种突变体形式。在一些实施方案中，肌成束蛋白是人肌成束蛋白1。在一些实施方案中，肌成束蛋白被编码在与参考编号GI：347360903相对应的核苷酸序列中。在一些实施方案中，肌成束蛋白被编码在RefSeq M_003088的核苷酸序列中。在一些实施方案中，所述肌成束蛋白对应于RefSeq NP_003079.1的氨基酸序列。

术语“棘生成”等在通常和习惯意义上是指神经元的树突状棘的发育(例如生长和/或成熟)。在一些实施方案中，本文提供的化合物促进棘生成而不影响棘形态。促进是相对于化合物的施用的不存在。

如本文所使用的，术语“树突”是指神经元细胞的分支延伸。树突通常负责接收从邻近神经元的轴突传输的电化学信号。术语“树突状棘”或“树突状棘”是指神经元细胞(例如，树突上的神经元细胞)上的原生质突起。在一些实施方案中，树突状棘可以被描述为具有膜状颈，所述膜状颈可以被小头(例如头)封端。树突状棘根据其形状分类：无头、细、粗短、蘑菇或枝状。树突状棘密度是指神经元细胞的每单位长度树突状棘的总数。例如，所述树突状棘密度可以作为每微米树突状棘的数量给出。

术语“树突状棘形成”等在通常和习惯意义上是指导致树突状棘的数量增加或树突状棘的发育增加的过程。术语“树突状棘形态”等在通常和习惯意义上是指树突状棘的物理特征(例如，形状和结构)。树突状棘形态的改善是形态学的改变(例如，长度增加或宽度增加)，所述改变会导致功能性增强(例如，神经元之间的接触数量增加或相邻神经元之间的空间(例如，突触裂隙)减少)。如本领域已知的和本文公开的，用于此表征的示例性方法包含测量树突状棘的尺寸(即长度和宽度)。因此，术语“改善树突状棘形态”通常是指增加树突状棘的长度、宽度或长度和宽度两者。

“结合”是指至少两种不同的物种(例如，包含生物分子或细胞的化学化合物)变得足够接近以反应或相互作用，从而导致复合物的形成。例如，两种不同物种(例如，本文所述的蛋白质和化合物)的结合可能导致复合物的形成，其中所述物种通过非共价或共价键相互作用。在一些实施方案中，当两种不同物种(例如，本文所述的蛋白质和化合物)通过非共价键(例如，静电、范德华(van der Waals)或疏水性)相互作用时，形成所产生的复合物。

如本文中所定义的，关于蛋白质-活化剂(例如激动剂)相互作用的术语“活化(activation)”、“活化(activate)”、“活化(activating)”等意指相对于在活化剂(例如本文所述化合物)不存在情况下蛋白质的活性或功能，积极影响(例如增加)蛋白质的活性或功能。

“对照”或“对照实验”根据其普通一般含义使用，并且是指其中如在平行实验中一样对实验的受试者或试剂进行处理的实验，不同之处在于省略了实验的程序、试剂或变量。在一些实例中，对照在评价实验效果中被用作比较的标准。

“接触”根据其一般的普通含义而使用，并且是指使至少两种不同种类(例如，包含生物分子的化学化合物、或细胞)变得足够接近以相互作用的过程。术语“接触”可包含允许两种物种反应或物理触摸，其中所述两个种类可以是如本文中所描述的化合物、生物分子、蛋白质或酶。在一些实施方案中，接触包含允许本文所描述的化合物与蛋白质(例如，肌成束蛋白)或酶相互作用。

如本文中所定义的，对本领域的技术人员来说，术语“抑制(inhibition)”、“抑制(inhibit)”、“抑制(inhibiting)”等将被给予其习惯含义。关于蛋白质-抑制剂(例如拮抗剂)相互作用，术语“抑制(inhibition)”、“抑制(inhibit)”、“抑制(inhibiting)”意指相对于抑制剂不存情况下蛋白质的功能活性，消极影响(例如降低)蛋白质的功能活性。

如本文所用，在定量测量的上下文中使用的术语“约”表示指示的量±10％，或者替代地，指示的量±5％或±1％。

术语“复合物”是指由化合物I和另一分子之间的相互作用产生的形成物。

术语“溶剂化物”是指通过将化合物I与溶剂结合形成的复合物。如本文所用，术语“溶剂化物”包括水合物(即，当溶剂为水时的溶剂化物)。

术语“共晶”是指离子化或非离子化化合物I(或本文公开的任何其他形式、盐或化合物)与通过非共价相互作用连接的一种或多种非离子化共晶形成剂(例如药学上可接受的盐)的分子复合物。在某些实施方案中，与游离形式(即，游离分子、两性离子、水合物、溶剂化物等)或盐(其包括盐水合物和溶剂化物)相比，共晶可具有改进的性质。在进一步的实施方案中，改进的性质选自：增加的溶解度、增加的溶解、增加的生物利用度、增加的剂量反应、减少的吸湿性、通常无定形化合物的结晶形式、难以盐化或不可盐化的化合物的结晶形式、减少的形式多样性、更期望的形态等。

术语“共晶形成剂”或“共形成剂”是指与化合物I或本文公开的任何其他化合物相关的一种或多种本文公开的药学上可接受的碱和/或药学上可接受的酸。

本文中所给出的任何化学式或结构，包括化合物I，也意图代表这些化合物的未标记形式以及同位素标记形式。同位素标记的化合物具有由本文中所给出化学式所描绘的结构，除了一个或多个原子被具有所选择原子质量或质量数的原子所取代。可以并入本公开的化合物中的同位素的示例包括：氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如但不限于：²H(氘，D)、³H(氚)、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸F、³¹P、³²P、³⁵S、³⁶Cl、和¹²⁵I。可以制备本公开的各种同位素标记化合物，例如其中并入同位素(如³H、¹³C和¹⁴C)的化合物。此类同位素标记化合物可用于代谢研究、反应动力学研究、检测或成像技术(如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT))其中包括药物或底物组织分布测定，或者可用于患者的放射治疗。

本公开还包括化合物I，其中连接至碳原子的1至“n”个氢被氘取代，其中n是分子中的氢数。此类化合物表现出增加的代谢抗性，因此当施用于哺乳动物时可用于增加任何化合物I的半衰期。参见例如，Foster，“氘同位素在药物代谢研究中的作用(DeuteriumIsotope Effects in Studies of Drug Metabolism)”，《药理科学趋势(TrendsPharmacol.Sci.5(12):524-527(1984)。此类化合物是利用本领域中所熟知的方法而合成，例如通过使用其中一个或多个氢原子已被氘取代的起始物。

本公开的氘标记或取代的治疗性化合物可具有改善的DMPK(药物代谢和药代动力学)性质，其涉及到分布、代谢和排泄(ADME)。本公开的同位素标记化合物及其前体药物通常可以通过执行在下述的方案或者在下述的实施例和制备中所公开的过程而制备，其是通过用容易获得的同位素标记试剂代替非同位素标记试剂而制备。进一步，用较重的同位素，特别是氘(即²H或D)进行的取代可以提供由更大的代谢稳定性引起的某些治疗优点，例如增加体内半衰期或减少剂量需求或提高治疗指数。还考虑了用于诊断目的的同位素标记。

此类同位素(具体地是氘)的浓度可由同位素富集系数所定义。在本公开的化合物中，未特别指定为特定同位素的任何原子旨在表示该原子的任何同位素。除非另有说明，当把一个位置具体地指定为“H”或“氢”时，该位置应理解成以其天然丰度同位素组成而含有氢。因此，在本公开的化合物中，具体地被指定为氘(D)的任何原子旨在表示比自然丰度大的氘。

如本文所用，“药学上可接受的载体”包括对本发明的化合物或其用途无害的赋形剂或试剂，例如溶剂、稀释剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。使用此类载体和试剂来制备药物活性物质的组合物是本领域众所周知的(参见，例如，Remington's Pharmaceutical Sciences,Mace Publishing Co.,Philadelphia,Pa.第17版(1985)；以及《现代药学(Modern Pharmaceutics)》,Marcel Dekker公司,第3版,(G.S.Banker&C.T.Rhodes,Eds.)。

术语“治疗有效量”是指当以一剂或多剂向需要此类治疗的患者(特别是人)施用时，足以实现如下定义的治疗的如本文所述的化合物的量。治疗有效量将根据患者、所治疗的疾病、患者的体重和/或年龄、疾病的严重程度或由合格的开处方者或护理人员确定的施用方式而变化。

术语“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”是指出于以下目的施用本文所述的化合物：

(i)延缓疾病的发作，即，使疾病的临床症状或标志物不发展或延缓其发展；

(ii)抑制疾病，即，减缓或阻止临床症状或其标志物的发展，或疾病的传播；

和/或

(iii)缓解疾病，即，引起临床症状或严重程度标志物的消退。

“预防(prevention)”或“预防(preventing)”是指导致疾病或病症的临床症状不发展的任何疾病或病症的治疗。在一些实施方案中，可以将化合物施用于有疾病或病状的风险或具有疾病或病状的家族史的受试者(包含人)。

“受试者”是指已经或将成为治疗、观察或实验对象的动物，例如哺乳动物(包括人)。本文所述的方法可用于人类治疗和/或兽医应用。在一些实施方案中，受试者是哺乳动物。在一个实施方案中，受试者是人。当受试者是人类时，所述受试者可以被称为“患者”。

本文中所描述的方法可以应用于体内或离体的细胞群体。“体内”是指在活的个体内，如在动物或人体内。在此上下文中，本文所述的方法可以治疗性地用于个体。“离体”是指在活的个体之外。离体细胞群体的示例包括体外细胞培养物和生物样品，包含从个体获得的液体或组织样品。此类样品可以通过本领域众所周知的方法获得。示例性生物流体样品包含血液、脑脊髓液、尿液和唾液。在此上下文中，本文所述的化合物和组合物可用于多种目的，包含治疗和实验目的。例如，可以针对给定适应症、细胞类型、个体和其它参数离体使用本文所述的化合物和组合物，以确定本公开的化合物的施用的最佳时间表和/或剂量。从此用途搜集的信息可以用于实验目的或在临床中用于设置体内治疗的方案。本文所述的化合物和组合物可能适合的其它离体用途在以下进行了描述，或者对于本领域的技术人员而言将变得显而易见。所选化合物可以进一步被表征为检查人类或非人类受试者的安全剂量或耐受剂量。此类性质可以使用本领域技术人员通常已知的方法检查。

此外，如本文所用的缩写具有如下对应含义：

化合物I的形式

如上一般描述，本公开提供了化合物I的结晶形式及其共晶。本文还进一步讨论了其他形式。

结晶2-(2-(2-(2-(4-(苯并[d]噻唑-2-基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇(化合物I形式I)的特征在于X射线粉末衍射图包括以下峰：约4.6、约20.8和约23.7°2θ±0.2°2θ，如使用波长为的Cu-Kα辐射在衍射仪上测定的。衍射图包括在约9.2、约16.3、约18.6和约19.6°2θ±0.2°2θ处的另外峰。化合物I形式I的特征还在于基本上如图1所示的其完整X射线粉末衍射图。化合物I形式I的特征可以在于以下XRPD峰中的一个或多个，例如，1、2、3、4、5或6个：

在一些实施方案中，化合物I形式I的特征在于包含在约70℃±2℃处的吸热峰的差示扫描量热法(DSC)曲线。化合物I形式I的特征还在于基本上如图2所示的其完整DSC曲线。

结晶2-(2-(2-(2-(4-(苯并[d]噻唑-2-基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇(化合物I形式II)的特征在于X射线粉末衍射图包括以下峰：约9.2、约13.8和约16.1°2θ±0.2°2θ，如使用波长为的Cu-Kα辐射在衍射仪上测定的。衍射图包括在约6.9、约11.5和约18.4°2θ±0.2°2θ处的另外峰。化合物I形式II的特征还在于基本上如图3所示的其完整X射线粉末衍射图。在一些实施方案中，化合物I形式II作为湿材料存在。化合物I形式II的特征可以在于以下XRPD峰中的一个或多个，例如，1、2、3、4、5或6个：

结晶2-(2-(2-(2-(4-(苯并[d]噻唑-2-基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇(化合物I形式III)的特征在于X射线粉末衍射图包括以下峰：约7.7、约10.3和约15.3°2θ±0.2°2θ，如使用波长为的Cu-Kα辐射在衍射仪上测定的。衍射图包括在约5.1、约12.8和约18.0°2θ±0.2°2θ处的另外峰。化合物I形式III的特征还在于基本上如图4所示的其完整X射线粉末衍射图。在一些实施方案中，化合物I形式III作为湿材料存在。化合物I形式III的特征可以在于以下XRPD峰中的一个或多个，例如，1、2、3、4、5或6个：

结晶2-(2-(2-(2-(4-(苯并[d]噻唑-2-基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇(化合物I形式IV)的特征在于X射线粉末衍射图包括以下峰：约5.4、约22.4和约23.3°2θ±0.2°2θ，如使用波长为的Cu-Kα辐射在衍射仪上测定的。衍射图包括在约10.8、约18.9、约23.9和约26.8°2θ±0.2°2θ处的另外峰。化合物I形式IV的特征还在于基本上如图5所示的其完整X射线粉末衍射图。化合物I形式IV的特征可以在于以下XRPD峰中的一个或多个，例如，1、2、3、4、5或6个：

在一些实施方案中，化合物I形式IV的特征在于包括在约48℃±2℃处的吸热峰和在约59℃±2℃处的吸热峰的差示扫描量热法(DSC)曲线。化合物I形式IV的特征还在于基本上如图6所示的其完整DSC曲线。

结晶2-(2-(2-(2-(4-(苯并[d]噻唑-2-基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-醇(化合物I形式V)的特征在于X射线粉末衍射图包括以下峰：约4.6、约9.2和约23.1°2θ±0.2°2θ，如使用波长为的Cu-Kα辐射在衍射仪上测定的。衍射图包括在约13.8和约18.6°2θ±0.2°2θ处的另外峰。化合物I形式V的特征还在于基本上如图7所示的其完整X射线粉末衍射图。化合物I形式IV的特征可以在于以下XRPD峰中的一个或多个，例如，1、2、3、4、5或6个：

在一些实施方案中，化合物I形式V的特征在于包括在约70℃±2℃处的吸热峰的差示扫描量热法(DSC)曲线。化合物I形式V的特征还在于基本上如图8所示的其完整DSC曲线。

一些实施方案涉及包含如本文所述的化合物I的形式而不含任何其他形式的化合物I的组合物。在一些实施方案中，相对于其他形式的化合物I，组合物包含大于95％的如本文所述的化合物I的形式。在一些实施方案中，相对于其他形式的化合物I，组合物包含大于97％的本文所述的化合物I的形式。在一些实施方案中，相对到其他形式的化合物I，组合物包含大于99％的本文所述的化合物I形式。

一些实施方案涉及其他形式的化合物I包含如本文所述的结晶化合物I形式I的组合物。在一些实施方案中，相对于其他形式的化合物I，组合物包含大于95％的如本文所述的结晶化合物I形式I。在一些实施方案中，相对于其他形式的化合物I，组合物包含大于97％的本文所述的结晶化合物I形式I。在一些实施方案中，相对到其他形式的化合物I，组合物包含大于99％的本文所述的结晶化合物I形式I。

在一些实施方案中，组合物包含纯度大于95％的结晶化合物I形式I。在一些实施方案中，组合物包含纯度大于97％的结晶化合物I形式I。在一些实施方案中，组合物包含纯度大于99％的结晶化合物I形式I。

一些实施方案涉及制备如本文所述的化合物I形式的方法。在一些实施方案中，该方法如本文提供的实施例中所述。

在一些实施方案中，制备化合物I形式I的方法选自固体蒸气扩散、反溶剂添加、液体蒸气扩散、缓慢冷却、浆液转化、温度循环和缓慢蒸发。固体蒸气扩散可以在室温下用选自丙酮、THF、EtOH、H₂O、EtOAc、二噁烷、甲苯、DCM和乙腈的溶剂进行。反溶剂添加可以通过将选自IPA、MTBE、CPME和庚烷的反溶剂添加到化合物I在选自THF、MeOH、DCM和EtOAc的溶剂中的溶液中进行。可以通过冷却化合物I在选自MEK、二噁烷:甲苯(任选地以约1:1v/v的比率)、EtOAc:乙腈(任选地以1:1v/v的比率)、DCM:IPA(任选地以约4:1v/v的比率)和THF:庚烷(任选地以大约4:1v/v的比率)的溶剂或溶剂系统中的溶液来进行缓慢冷却。可以通过使化合物I在选自THF、EtOAc、MEK、乙腈和二噁烷:H₂O(任选地以约9:1v/v的比率)的溶剂或溶剂系统中形成溶液来进行缓慢蒸发。

在一些实施方案中，化合物I形式I在30℃/65％RH(封闭或开放)和40℃/75％RH(封闭或开放)的条件下稳定至少4周。在一些实施方案中，化合物I形式I在任选地在30℃/65％RH(封闭或开放)或40℃/75％RH(封闭或开放)的条件下储存至少4周后保持至少99％纯度。

药物组合物和剂量

如本文所述的化合物I的形式可以以药物组合物的形式施用。因此，本文还提供了含有本文所述的化合物I的形式的一种或多种以及一种或多种药学上可接受的媒剂的药物组合物，所述媒剂选自载体、佐剂和赋形剂。合适的药学上可接受的媒剂可以包含例如惰性固体稀释剂和填充剂、包含无菌水性溶液和各种有机溶剂的稀释剂、渗透增强剂、增溶剂和佐剂。此类组合物以药学领域众所周知的方式制备。参见，例如，《雷明顿药物科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)》,宾夕法尼亚州费城梅斯出版公司(MacePublishing Co.,Philadelphia,Pa.),第17版(1985)；以及《现代药学(ModernPharmaceutics)》,Marcel Dekker公司,第3版,(G.S.Banker和C.T.Rhodes编辑)。药物组合物可以单独施用或与其他治疗剂组合施用。

所述药物组合物可以单剂量或多剂量施用。药物组合物可以通过各种方法施用，包含例如直肠、颊、鼻内和透皮途径。在某种一些实施方案中，药物组合物可以通过动脉内注射、静脉内、腹膜内(“i.p.”)、肠胃外、肌肉内、皮下、口服、局部或作为吸入剂而施用。

用于使用的一种方式是肠胃外，例如通过注射。可以掺入本文所述的药物组合物以用于通过注射施用的形式包含，例如，水性或油悬浮液或乳剂与芝麻油、玉米油、棉籽油或花生油以及酏剂、甘露醇、葡萄糖或无菌水性溶液以及类似药物媒剂。

口服施用可以是另一种施用一种或多种本文所述的化合物I形式的途径。施用可以通过例如胶囊或肠溶包衣片剂。在制备包含本文所述的一种或多种化合物的药物组合物中，活性成分通常被赋形剂稀释和/或封闭在载体内，所述载体可以呈胶囊、药囊、纸或其它容器形式。当辅料剂用作稀释剂时，其可采用固体、半固体或液体材料的形式，其充当用于活性成分的赋形剂、载体、或介质。因此，组合物可以采用片剂、丸剂、粉剂、锭剂、药囊、扁囊剂、酏剂、悬浮液、乳剂、溶液、糖浆、气雾剂(呈固体或呈液体介质形式)、软膏剂(其含有例如至多达10重量％的活性成分)、软和硬明胶胶囊、无菌可注射溶液和无菌封装粉剂的形式。

合适的赋形剂的一些实例包含乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、海藻酸盐、黄芪胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、无菌水、糖浆以及甲基纤维素。制剂可以另外包含：润滑剂，如滑石粉、硬脂酸镁和矿物油；润湿剂；乳化和悬浮剂；防腐剂，如羟基苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯；甜味剂；及调味剂。

可以配制包含一种或多种本文所述的化合物I形式的组合物，以通过使用本领域已知的程序在施用于受试者后提供活性成分的快速、持续或延迟释放。用于口服施用的控释药物递送系统包含渗透泵系统和溶出系统，其包含有聚合物包衣的储库或药物-聚合物基质调配物。控释系统的实例在以下中给出：美国专利第3,845,770号；第4,326,525号；第4,902,514号；以及第5,616,345号。用于本文公开的方法的另一种调配物采用透皮递送装置(“贴剂”)。此类透皮贴剂可以用于以控制量提供本文所述的化合物I形式的连续或间断输注。用于递送药剂的经皮贴剂的构造和使用是本领域中熟知的。参见例如美国专利第5,023,252号、第4,992,445号和第5,001,139号。此类贴剂可以被构造成用于连续、脉冲或按需递送药剂。

为了制备固体组合物，如片剂，可以将主要活性成分与药物赋形剂混合以形成固体预调配组合物，所述固体预调配组合物含有本文所述的化合物I的形式的均质混合物。在提及这些预调配组合物为均质时，活性成分可以均匀地分散在整个组合物中，使得组合物可以容易地细分成同等有效的单位剂型，如片剂、丸剂和胶囊。

可以对本文所述的化合物I的形式的片剂或丸剂进行包衣或另外进行复合，以提供具有延长作用的优点的剂量或保护胃免受酸性条件的侵害。例如，片剂或丸剂可以包含内剂量组分和外剂量组分，后者呈前者之上的被膜形式。两种组分可以通过肠溶层分开，所述肠溶层用于抵抗胃中的崩解并且允许内组分完整地传递进入十二指肠或被延迟释放。多种材料可以用于此类肠溶层或包衣，此类材料包含许多聚合酸以及聚合酸与如虫胶、十六醇和乙酸纤维素等此类材料的混合物。

用于吸入或吹入的组合物可以包含药学上可接受的水性或有机溶剂中的溶液和悬浮液或其混合物以及粉剂。液体或固体组合物可以含有如上文所述的适合的药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，组合物通过口服或经鼻呼吸途径施用，用于局部或全身作用。在其它实施方案中，可通过使用惰性气体对药学上可接受的溶剂中的组合物进行雾化。雾化的溶液可以直接从雾化装置吸入，或者雾化装置可以连接到面罩帐篷或间歇性正压呼吸机上。可以从以适当方式递送调配物的装置优选地通过口服或经鼻施用溶液、悬浮液或粉剂组合物。

如本文所述的化合物I的形式可以药学有效量施用。对于口服施用，每个剂量单位可含有1mg至2克、1mg至1克或1mg至500mg的化合物I。在一些实施方案中，剂量为1mg至250mg的化合物I。在一些实施方案中，化合物I的剂量范围为每天两次约20mg至每天两次约50mg。在一些实施方案中，剂量是2mg、4mg、6mg、8mg、10mg、12mg、14mg、16mg、18mg、20mg、25mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、75mg、100mg、200mg或500mg的化合物I。然而，应该理解，实际施用的化合物的量通常由医生根据相关情况确定，所述相关情况包括待治疗的病症、选择的施用途径和共同施用化合物，以及如果适用，个体患者的年龄、体重、反应，患者症状的严重程度等。

本申请的化合物I的形式或其组合物可以使用上述任何合适的模式每天施用一次、两次、三次或四次。此外，本申请的化合物I的形式或其组合物可以每周一次或两次、每两周一次、每三周一次、每四周一次、每五周一次或每六周一次施用。在一些实施方案中，本申请的化合物I的形式或其组合物可以每天施用一次，持续4周、8周、12周、16周、20周、24周、28周、32周、36周、40周、44周、48周、52周或根据需要更长。

本申请的活性剂，例如本文所述的化合物I的形式，或其药物组合物，针对任何特定受试者的具体剂量水平将取决于多种因素，所述多种因素包含采用的具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食，施用时间、施用途径和分泌速率、药物组合以及经历疗法的受试者的特定疾病的严重度。例如，剂量可以表示为每千克受试者的体重(mg/kg)的本文所述的化合物的毫克数。介于约0.1与150mg/kg的剂量可以是适当的。在一些实施方案中，约0.1和100mg/kg可以是适当的。在其它实施方案中，介于0.5mg/kg与60mg/kg之间的剂量可以是适当的。根据受试者的体重进行归一化可特别用于当调整广泛不同大小的受试者之间的剂量时，如发生在当在儿童和成人人类两者中使用药物时或在将非人类受试者(如狗)的有效剂量转化为适用于人类受试者的剂量时。

日剂量也可以描述为每剂量或每天施用的本文所述的化合物的总量。本文所述的化合物或其盐的日剂量可以介于约1mg与4,000mg之间，介于约2,000毫克/天到4,000毫克/天之间，介于约1毫克/天到2,000毫克/天之间，介于约1毫克/天到1,000毫克/天之间，介于约10毫克/天到500毫克/天之间，介于约20毫克/天到500毫克/天之间，介于约50毫克/天到300毫克/天之间，介于约75毫克/天到200毫克/天之间或介于约15毫克/天到150毫克/天之间。

当经鼻施用时，人类受试者的总日剂量可以介于1mg与1,000mg之间，介于约1,000-2,000毫克/天之间，介于约10-500毫克/天之间，介于约50-300毫克/天之间，介于约75-200毫克/天之间或介于约100-150毫克/天之间。在各个实施方案中，日剂量为约10mg、约30mg、约50mg、约75mg、约100mg、约200mg、约300mg、约400mg、约500mg、约600mg、约700mg、约800mg、约900mg或约1000mg或其间的一定范围的值。

本文所述的化合物I的形式，或其药学上可接受的盐，或其药物组合物，可以使用上述任何合适的方式，每天施用一次、两次、三次或四次。同样，施用或治疗可以继续数天；例如，对于一个周期的治疗，通常治疗将继续至少7天、14天或28天。治疗周期是众所周知的，并且经常在约1天到28天、通常约7天或约14天的剩余期间或在周期之间交替。在其它实施方案中，治疗周期也可以是连续的。施用或治疗可以无限地继续。

在特定实施方案中，方法包括向受试者施用约1mg到800mg的初始日剂量的本文所述的化合物的形式，或其药学上课接受的盐，或其药物组合物，以及递增地增加剂量直至达到临床功效为止。可以使用约5mg、10mg、25mg、50mg或100mg的增量来增加剂量。剂量可以每日、每隔一天、每周两次或每周一次增加。

本文所述的化合物I的形式或其药学上可接受的盐或其药物组合物可在进食条件下施用。术语“进食条件”或其变型是指在施用活性成分之前或同时消耗或摄取固体或液体形式的食物或任何合适形式的卡路里。例如，本文所述的化合物I的形式，或其药学上可接受的盐，或其药物组合物，可在消耗卡路里(例如，进餐)的几分钟或几小时内施用于受试者(例如，患者)。在一些实施方案中，本文所述的化合物I形式或其药学上可接受的盐或其药物组合物可在消耗卡路里的5-10分钟、约30分钟或约60分钟内施用于受试者(例如，患者)。

治疗方法和用途

肌成束蛋白

本文描述了通过向受试者施用本文所述的化合物I形式来靶向细胞骨架蛋白来再生因神经退行性疾病而丧失的棘突触的方法。出乎意料的是，观察到对细胞骨架蛋白肌成束蛋白1(FSCN1)的抑制导致树突状棘在体内和体外的快速上调。树突状棘含有丝状肌动蛋白(F-肌动蛋白)，所述丝状肌动蛋白是赋予细胞结构并且给予其亚细胞专门化的细胞骨架聚合物。不希望受到理论的束缚，据信树突状棘需要形成F-肌动蛋白的高度分支化的组合件，并且此类组合件的形成可以借助于通过肌成束蛋白1捆扎成平行阵列来阻止或显著减少。

在一些实施方案中，提供了结合肌成束蛋白的方法，该方法包括使肌成束蛋白与有效量的本文所述的化合物I或其药学上可接受的盐接触。在一些实施方案中，所述方法抑制肌成束蛋白。据信，化合物I的形式或其药学上可接受的盐可通过抑制肌成束蛋白促进树突状棘形成。

肌成束蛋白是与其它肌动蛋白结合蛋白不具有氨基酸序列同源性的重要肌动蛋白交联剂。在脊椎动物中发现了三种形式的肌成束蛋白：肌成束蛋白1，其广泛发现于神经系统和其它地方中；肌成束蛋白2，其发现于视网膜感光细胞中；以及肌成束蛋白3，其仅发现于睾丸中。在一些实施方案中，肌成束蛋白是人肌成束蛋白1。肌成束蛋白的分子量为55kDa，可作为单体实体起作用，并将肌动蛋白丝交联成笔直、紧密且刚性的束，从而赋予肌动蛋白束以机械刚度。据信，肌成束蛋白将平行肌动蛋白丝保持在一起，以形成直径大约60-200nm的丝状伪足。

在神经元发育期间，据信f-肌动蛋白的长束将神经元的膜推出，以形成如轴突、树突、丝状伪足和片状伪足等结构。肌成束蛋白被视为与新生树突状突起的细胞骨架重组有关。因此，肌成束蛋白捆扎的肌动蛋白通常被视为轴突和树突的形成和延伸所需要的。令人惊讶地发现，抑制肌成束蛋白在肌动蛋白束的形成中的活性可促进树突状棘的形成、树突细胞质膜的突出。

神经元疾病和病状以及其治疗

具有认知组成部分的神经退行性病状的统一特征是利用谷氨酸氨基酸作为神经递质的突触(“谷氨酸能突触”)的丢失，据信所述突触在人类和其它哺乳动物中是最多类型的突触。重要的是，约90％的谷氨酸能突触涉及突触后树突状棘。大多数在神经退行性疾病中丢失的突触是轴突与树突状棘接触的突触，即所谓的“轴突突触”。在正常情况下，树突状棘的密度、形状和蛋白质组成的变化会影响突触传送的强度，并且是学习和记忆、认知柔性、对损伤和疾病的适应性以及其它过程所涉及的几种形式的突触变化(即“塑性”)的基础。据信，轴突突触的这些变化对于如海马体的结构的记忆编码功能是重要的。因此，据信海马和其它区域中树突状棘的早期和进行性丢失是阿尔茨海默氏病和其它痴呆症的记忆丢失和认知衰退的驱动力。再生棘密度的新颖方法的开发可能对许多神经退行性和发育性认知病症的治疗具有重要意义。

树突状棘是负责接收突触输入、在神经元之间的通信中提供重要功能的专门突起。树突状棘的形态和其总体密度与突触功能相关，并强烈涉及记忆和学习。脑细胞中的细胞变化可能有助于神经元疾病的发病机制。例如，脑中的树突状棘密度的异常水平(例如降低)可能有助于神经元疾病的发病。因此，据信树突状棘的改变或失调会影响突触功能，并在各种神经和精神病症，如自闭症、脆性X综合征，帕金森氏病(PD)和阿尔茨海默氏病(AD)中发挥重要作用。例如，在AD中，越来越多的证据表明，缺陷始于神经元丢失之前由淀粉样β(Aβ)蛋白引起的海马突触功能的改变。因此，靶向初始突触丢失而不是晚期阶段疾病干预的治疗策略可以为AD的治疗提供更好的预后。此外，由于大多数认知病症会引发树突状棘的形式和功能异常，因此将希望使用小分子直接靶向其以改变或减轻这些棘变化。例如，脆性X综合征的特征在于不成熟棘椎过多。

本文提供了可用于促进树突状棘生成的方法。在一些实施方案中，该方法包括向受试者施用有效量的本文所述的化合物I的形式或其药物组合物，如包括实施方案的本文所述。可以观察到树突状棘生成是每神经元的棘的平均数量或神经元单位长度的增加，所述增加可以被称为树突状棘密度的增加。可以观察到树突状棘生成为树突状棘形态的改善。例如，可以观察到树突状棘形态的改善是棘头部的平均大小的增加。可以观察到树突状棘生成是树突状棘大小、棘塑性、棘运动性、棘密度和/或突触功能的改善。可以观察到树突状棘生成是膜电位的局部空间平均的增加。可以观察到树突状棘生成是Ca²⁺的突触后浓度(例如，平均体积)的增加。可以观察到树突状棘生成是成熟到未成熟的棘的平均比例的增加。在一些实施方案中，本文描述的化合物I的形式或其药物组合物相对于对照增加树突状棘密度。在一些实施方案中，与在开始治疗时观察到的相比，本文所述的化合物I的形式或其药物组合物增加了树突状棘密度。在一些实施方案中，树突状棘密度的增加导致受试者或患者的神经元疾病或病症的症状减少。在一些实施方案中，树突状棘密度的增加通过解剖观察进行了解释。在一些实施方案中，在原代海马神经元中观察到树突状棘密度的增加。

在一些实施方案中，相对于开始用本文所述的化合物I的形式或其药物组合物治疗的时间，平均树突状棘密度增加了至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、125％、150％、175％、200％、250％、300％、400％、500％、750％或1000％或所述数字中的任何两个数字之间的任何范围，包含端点。在一些实施方案中，相对于用本文所述的化合物I的形式或其药物组合物开始治疗的时间，树突状棘密度增加约50％至约500％。在一些实施方案中，相对于用本文所述的化合物I的形式或其药物组合物开始治疗的时间，树突状棘密度增加约100％至约300％。在一些实施方案中，相对于用本文所述的化合物I的形式或其药物组合物开始治疗的时间，树突状棘密度增加约200％至约300％。在一些实施方案中，用本文所述的化合物I的形式或其药物组合物治疗的持续时间是15分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时、8小时、1天、3天、5天、7天、14天、28天、90天、180天或365天。

在一些实施方案中，所述方法通过促进新棘的形成增加了棘密度。在一些实施方案中，相对于对照(例如，化合物不存在情况下的棘密度)，所述方法将平均棘密度增加了至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、125％、150％、175％、200％、250％、300％、400％、500％、750％或1000％或所述数字中的任何两个数字之间的任何范围，包含端点。在一些实施方案中，相对于对照(例如，化合物不存在情况下的棘密度)，所述方法将平均棘密度增加了约50％到约500％。在一些实施方案中，相对于对照(例如，化合物不存在情况下的棘密度)，所述方法将棘密度增加了约100％到约300％。在一些实施方案中，相对于对照(例如，化合物不存在情况下的棘密度)，所述方法将棘密度增加了约200％到约300％。

在一些实施方案中，所述方法通过增加神经元长度增加了棘密度。在一些实施方案中，相对于用本文所述的化合物I的形式或其药物组合物开始治疗的时间，该方法增加平均神经元长度约100nm、300nm、500nm、700nm、1微米、2微米、3微米、4微米、5微米、7微米、10微米、15微米、20微米、25微米或数字中的任何两个数字之间的任何范围，包含端点。在一些实施方案中，相对于对照(例如，化合物不存在情况下的神经元长度)，所述方法将平均神经元长度增加了约500nm到约25微米。在一些实施方案中，相对于对照(例如，化合物不存在情况下的神经元长度)，所述方法将神经元长度增加了约10％到约300％。在一些实施方案中，相对于对照(例如，化合物不存在情况下的神经元长度)，所述方法将神经元长度增加了约200％到约300％。

在一些实施方案中，相对于开始用本文所述的化合物I形式或其药物组合物治疗的时间，该方法增加了每个神经元的平均棘数目。在一些实施方案中，神经元的每单位长度平均数量棘增加了至少约10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、600、700、800、900或约1000以上或数字中的任何两个数字之间的任何范围，包含端点。在一些实施方案中，时间是1小时、2小时、4小时、8小时、1天、3天、5天、7天、14天、28天、90天、180天或365天。

在一些实施方案中，本文所述的化合物I的形式或其药物组合物可用于治疗神经元疾病和病症。神经元疾病是受试者的神经系统的功能变得受损的疾病或病状。神经元疾病或病症可以是神经疾病或病症。神经元疾病或病症可以与神经退行性疾病或病症相关联。

在一个方面，提供了一种在有需要的患者中治疗神经元疾病的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的本文所述的化合物I的形式或其药物组合物。在一些实施方案中，神经元疾病是阿尔茨海默氏病。在一些实施方案中，神经元疾病是帕金森氏病。在一些实施方案中，神经元疾病是帕金森氏痴呆。在一些实施方案中，神经元疾病是自闭症。在一些实施方案中，神经元疾病是脆性X综合征。在一些实施方案中，所述疾病或病症与淀粉样斑块的累积有关(例如，以其为特征)。在一些实施方案中，神经元疾病是创伤性脑损伤。在一些实施方案中，患有神经元疾病的患者在神经元疾病发作之前、期间或之后遭受了创伤性脑损伤。在一些实施方案中，神经元疾病包含神经元受损。神经元受损可以包含神经元的有效功能萎缩或其它减少。例如，已知阿尔茨海默氏病表现为神经元受损，尤其是皮质神经元，例如海马神经元和靠近海马的神经元受损。突触的丢失可能与树突状棘的丢失和神经退行相关。

在一些实施方案中，神经元疾病与异常树突状棘形态、棘大小、棘塑性、脊运动性、棘密度和/或异常突触功能相关联。在一些实施方案中，神经元疾病与树突状棘密度的异常(例如降低)水平相关联。

在一些实施方案中，神经元疾病是阿尔茨海默氏病。在一些实施方案中，神经元疾病是帕金森氏病。在一些实施方案中，神经元疾病是伴有痴呆的帕金森氏病。在一些实施方案中，神经元疾病是自闭症。在一些实施方案中，神经元疾病是中风。在一些实施方案中，神经元疾病是创伤后应激病症(PTSD)。在一些实施方案中，神经元疾病是创伤性脑病症(TBD)。在一些实施方案中，神经元疾病是慢性创伤性脑病(CTE)。在一些实施方案中，神经元疾病是精神分裂症。在一些实施方案中，神经元疾病是痴呆(例如，普通痴呆)。在一些实施方案中，神经元疾病是注意力缺陷/多动病症(ADHD)。在一些实施方案中，神经元疾病是肌萎缩性侧索硬化症(ALS)。在一些实施方案中，神经元疾病是额颞叶变性(FTLD)(例如，FTLD-tau、FTLD-TDP或FTLD-FUS)。在一些实施方案中，神经元疾病是记忆丢失。在一些实施方案中，神经元疾病包含记忆丢失。在一些实施方案中，神经元疾病是年龄相关的记忆丢失。在一些实施方案中，神经元疾病包含年龄相关的记忆丢失。在一些实施方案中，神经元疾病是高血压性脑病。在一些实施方案中，神经元疾病是慢性应激。在一些实施方案中，神经元疾病包含慢性应激。在一些实施方案中，神经元疾病是FTLD-TDP I型。在一些实施方案中，神经元疾病是FTLD-TDP II型。在一些实施方案中，神经元疾病是FTLD-TDP III型。在一些实施方案中，神经元疾病是FTLD-TDP IV型。

可以用本文所述的化合物I的形式或其药物组合物或本文所述的方法治疗的神经元疾病的实例包含亚历山大氏病(Alexander's disease)、阿尔珀斯病(Alper'sdisease)、阿尔茨海默氏病、抑郁、围产期窒息、帕金森氏病痴呆(“PD痴呆”)、肌萎缩性侧索硬化症、共济失调性毛细血管扩张症、貝登氏病(Batten disease)(也被称为Spielmeyer-Vogt-Sjogren-貝登氏病)、海绵状脑病(例如牛海绵状脑病(疯牛病)、库鲁病(Kurudisease)、克罗伊茨费尔特-雅各布病(Creutzfeldt-Jakob disease)、致命性家族失眠、Canavan病、科克因综合征(Cockayne syndrome)、皮质基底节变性、脆性X综合征、额颞叶痴呆、格斯特曼–斯特劳斯勒–申克综合征(Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome)、亨廷顿病(Huntington's disease)、HIV相关痴呆、肯尼迪病(Kennedy's disease)、克拉伯氏病(Krabbe's disease)，路易体痴呆(Lewy body dementia)、马查多-约瑟夫病(Machado-Joseph disease)(脊髓小脑性共济失调3型)、多发性硬化症、多系统萎缩、发作性睡病、神经疏螺旋体病、帕金森氏病、比利牛斯-默兹巴赫病(Pelizaeus-Merzbacher disease)、皮克氏病(Pick's disease)、原发性侧索硬化症、朊病毒病、雷夫苏姆氏病(Refsum'sdisease)、山德霍夫氏病(Sandhoff's disease)、希尔德氏病(Schilder's disease)、继发于恶性贫血的脊髓亚急性合并变性、精神分裂症、脊髓小脑性共济失调(具有不同特性的多种类型)、脊髓性肌萎缩、Steele-Richardson-Olszewski病、Tabes dorsalis、药物-诱发的帕金森征、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、多系统萎缩、特发性帕金森氏病、常染色体显性帕金森病、家族性1型(PARK1)、帕金森病3、常染色体显性路易体(PARK3)、帕金森病4、常染色体显性路易体(PARK4)、帕金森病5(PARK5)、帕金森病6、常染色体隐性遗传性早发性(PARK6)、帕金森病2、常染色体隐性遗传性幼年(PARK2)、帕金森病7、常染色体隐性遗传性早发性(PARK7)、帕金森病8(PARK8)、帕金森病9(PARK9)、帕金森病10(PARK10)、帕金森病11(PARK11)、帕金森病12(PARK12)、帕金森疾病13(PARK13)或线粒体帕金森氏病。在一些实施方案中，神经元疾病是阿尔茨海默氏病、帕金森氏病，帕金森氏痴呆、自闭症、中风、创伤后应激病症(PTSD)、创伤性脑病症(TBD)、慢性创伤性脑病(CTE)、精神分裂症、痴呆(例如，普通痴呆)、注意力缺陷/多动病症(ADHD)、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、额颞叶变性(FTLD)(例如FTLD-tau、FTLD-TDP或FTLD-FUS)、记忆丢失(例如年龄相关的记忆丢失)、高血压性脑病或慢性应激。

在一些实施方案中，神经元疾病是阿尔茨海默氏病(AD)。阿尔茨海默氏病的特征在于所述疾病的早期阶段中的记忆丢失的症状。Apoε4载体患AD的风险更大。一般认为APOε4在清除Aε方面不如其它同种型有效，并因此会与更大的淀粉样负荷、tau磷酸化、突触毒性和突触密度降低相关。已经历创伤性脑损伤(TBI)是患上AD的另一风险因素，并且研究表明，经历TBI的那些患AD的风险显著增加。认知衰退已与突触的进行性丢失相关。随着疾病进展，症状包含混乱、长期记忆丢失、错语、词汇丢失、攻击性、易怒和/或情绪波动。在疾病的更晚期，存在身体功能丢失。患有阿尔茨海默氏病(AD)的患者表现出许多特性神经病，如氧化应激增加、线粒体功能障碍、突触功能障碍、钙稳态破坏、老年斑和神经原纤维缠结的沉积以及脑萎缩。不希望受到任何理论的束缚，据信这些神经病的原因和作用两者均为脑中的有害形式的聚集的淀粉样β(Aβ)肽的积聚。AD相关的病症包括：AD型老年性痴呆(SDAT)、额颞叶痴呆(FTD)、血管性痴呆、轻度认知受损(MCI)和年龄相关联的记忆受损(AAMI)。在一些实施方案中，提供了一种治疗或预防阿尔茨海默氏病的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本文所述的化合物I的形式或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，患者是Apoε2或Apoε3载体。在一些实施方案中，患者已经患有TBI。在一些实施方案中，患者是Apoε4载体。在一些实施方案中，患者是患有TBI的Apoε4载体。

在一些实施方案中，神经元疾病是脆性X综合征(FXS)。如本领域已知的，FXS是与多种病症(例如，自闭症和遗传性智力残疾)相关的遗传综合症。残疾可以呈现的一系列值的范围为轻度到重度。观察到，在执行需要工作记忆的任务中，患有FXS的男性开始逐渐出现更严重的问题，这通常开始于40岁之后。观察到这对于言语工作记忆尤其如此。在一些实施方案中，神经元疾病是自闭症。如本领域已知的，自闭症是神经发育的病症。不希望受到任何理论的束缚，据信自闭症通过改变神经和突触如何连接和组织来影响大脑中的信息处理。

在另外的实施方案中，提供了用于减轻、减少或逆转神经元疾病或病症的症状的组合物和方法。症状可以是本文所述的任何症状。

术语“记忆”等在通常和习惯意义上是指受试者通过其对信息进行编码、存储和检索的过程。在记忆的上下文中，术语“编码”、“注册”等在通常和习惯意义上是指接收、处理和组合影响由于化学或物理刺激引起的感觉的信息。在此上下文中，术语“存储”等在通常和习惯意义上是指所编码信息的记录的创立。在此上下文中，术语“检索”、“回忆”等在通常和习惯意义上是指回忆起存储的信息。如本领域中已知的，检索可以是对提示的响应。在一些实施方案中，记忆丢失是指编码、存储或检索信息的能力降低。在一些实施方案中，记忆可以是识别记忆或回忆记忆。在此上下文中，“识别记忆”是指对先前遇到的刺激的回忆。如本领域已知的，刺激可以是例如单词、场景、声音、气味等。记忆的更广泛的类别是“回忆记忆”，其需要检索先前学习的信息，例如受试者先前遇到的一系列动作、单词或数字的列表等。用于评估受试者展示的记忆编码、存储和检索的水平的方法是本领域众所周知的，包含本文公开的方法。例如，在一些实施方案中，方法改善有需要的受试者的记忆，其中所述受试者患有神经元疾病。在一些实施方案中，方法改善了受试者的记忆。在一些实施方案中，方法治疗了受试者的神经元或认知受损。在一些实施方案中，方法治疗了受试者的神经元受损。在一些实施方案中，方法治疗了受试者的认知受损。

进一步地，对于本文公开的任何方面，在一些实施方案中，受试者患有脑损伤。脑损伤的类型包含脑损伤(即，脑细胞的破坏或退化)、创伤性脑损伤(即，由于对脑的外力导致的损伤)、中风(即例如通过缺氧暂时或永久性损伤大脑的血管事件)以及后天性脑损伤(即出生时不存在的脑损伤)。在一些实施方案中，方法改善了受试者的记忆。在一些实施方案中，方法改善了受试者的学习。在一些实施方案中，方法治疗了受试者的神经元或认知受损。在一些实施方案中，方法治疗了受试者的神经元受损。在一些实施方案中，方法治疗了受试者的认知受损。

在一些实施方案中，提供了一种用于促进有需要的患者的树突状棘生成的方法，所述方法包括向所述患者施用本文所述的化合物I的形式或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，提供了一种治疗或预防神经元疾病或病症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本文所述的化合物I的形式或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，提供了用于治疗神经元疾病或病症的化合物I的形式或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，提供了用于制备用于治疗神经元疾病或病症的药物的化合物I的形式或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述神经元疾病或病症选自阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、帕金森氏痴呆、自闭症、脆性X综合征和创伤性脑损伤。在一些实施方案中，神经元疾病或病症是阿尔茨海默氏病。在一些实施方案中，本文所述的化合物I的形式或其药物组合物抑制f-肌动蛋白的交联。在一些实施方案中，本文所述的化合物I的形式或其药物组合物是抗转移的。

组合疗法

在一个实施方案中，本文公开的化合物I的形式可以与一种或多种另外的治疗剂组合使用，所述一种或多种另外的治疗剂用于治疗神经元疾病或病症和/或被开发以治疗神经元疾病或病症。

当用于治疗或预防上述疾病和病症时，本文所述的化合物I的形式或其药物组合物可以与一种或多种其他治疗剂，例如批准用于治疗或预防特定疾病或病症的其他治疗剂，更特别地被认为构成当前护理标准的药剂一起施用。在设想了组合疗法的情况下，可以在一种或多种药物组合物中同时、单独或依次施用活性剂。

用于治疗AD的最新策略包含控制Aβ肽的具体同种型的产生或聚集状态。另外的策略包含预防、减少或去除磷酸化的tau的毒性形式。其它策略涉及小分子靶向酶，所述酶在通过处理淀粉样前体蛋白来产生Aβ肽，以试图降低脑中的Aβ肽的丰度中发挥了作用。另外，关于非淀粉样神经病(如tau蛋白病或载脂蛋白E基因中特定突变的零星遗传)的作用的信息越来越多，这刺激了对抗神经退行的另外的策略。

一种或多种另外的治疗剂可以是他克林(tacrine)、多奈哌齐(donepezil)、加兰他敏(galantamine)、卡巴拉汀(rivastigmine)、美金胺(memantine)、左旋多巴(levodopa)、卡比多巴(carbidopa)、麦角乙脲(lisuride)、雷沙吉兰(rasagiline)、托卡朋(tolcapone)、恩他卡朋(entacapone)、氯氮平(clozapine)、地昔帕明(desipramine)、西酞普兰(citalopram)、去甲替林(nortriptyline)、帕罗西汀(paroxetine)、阿托莫西汀(atomoxetine)、文拉法辛(venlafaxine)、金刚烷胺(amantadine)、多奈哌齐(donepezil)、卡巴拉汀(rivastigmine)、溴隐亭(bromocriptine)、卡麦角林(cabergoline)、培高利特(pergolide)、普拉克索(pramipexole)、罗匹尼罗(ropinirole)、罗替戈汀(rotigotine)、阿朴吗啡(apomorphine)、苄丝肼(benserazide)、司来吉兰(selegiline)、奥米加匹(omigapil)、CEP-1347、伊拉地平(isradipine)、DOPA、锂、利鲁唑(riluzole)、左乙拉西坦(levetiracetam)、依佐加滨(ezogabine)、普瑞巴林(pregabalin)、鲁夫酰胺(rufmamide)、非尔氨酯(felbamate)、卡马西平(carbamazepine)、丙戌酸盐(valproate)、丙戊酸钠(sodium valproate)、拉莫三嗪(lamotrigine)、苯妥英(phenytoin)、奥卡西平(oxcarbazepine)、乙琥胺滨(ethosuximide)、加巴喷丁(gabapentin)、噻加宾(tiagabine)、托吡酯(topiramate)、氨己烯酸(vigabatrin)、苯巴比妥(phenobarbital)、普里米酮(primidone)、氯硝西泮(clonazepam)、干扰素β-la、干扰素β-lb、米托蒽醌(mitoxantrone)、那他珠单抗(natalizumab)、芬戈莫德(fmgolimod)、那他珠单抗、特立氟胺(teriflunomide)、富马酸二甲酯(dimethyl fumarate)、格拉替雷(glatiramer)、ATOH1基因疗法、奥扎尼珠单抗(Ozanezumab)、阿瑞洛莫(arimoclomol)、替拉西米蒂(tirasemtiv)、右旋普拉克索(dexpramipexole)、普多比啶(pridopidine)或加兰他敏(galantamine)；或如US 2018/0147263中所述的磷酸甘油酸激酶(PGK)。在一些实施方案中，一种或多种另外的治疗剂可以是乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)，例如阿考替胺(acotiamide)、α-蒎烯(alpha-pinene)、安贝氯铵(ambenonium)、地美溴铵(demecarium)、DFP(二异丙基氟磷酸盐)、多奈哌齐(donepezil)、依酚氯铵(edrophonium)、加兰他敏(galantamine)、石杉碱甲(huperzine A)、山莴苣苦素(lactucopicrin)、拉多替吉(ladostigil)、新斯的明(neostigmine)、毒扁豆碱(physostigmine)、吡斯的明(pyridostigmine)、二异丙基氟磷酸盐(dyflos)、二乙氧膦酰硫胆碱(echothiophate)、卡巴拉汀(rivastigmine)、迷迭香酸(rosmarinic acid)、他克林、恩其明(ungeremine)、扎那培齐(zanapezil)、更斯的明(ganstigmine)、非色林(phenserine)、苯乙基去甲希姆丝氨酸(phenethylnorcymserine)(PENC)、赛色林(cymserine)、噻星斯林(thiacymserine)、SPH1371(加兰他敏+)、ER 127528、RS 1259或F3796。在一些实施方案中，一种或多种另外的治疗剂可以是淀粉样清除抗体，例如巴匹珠单抗(bapineuzumab)、索拉珠单抗(solanezumab)、甘特珠单抗(gantenerumab)、克仑珠单抗(crenezumab)、泊奈组单抗(ponezumab)、BAN2401或阿杜卡奴(aducanumab)。

一种或多种另外的治疗剂可以是镇静催眠剂，如水合氯醛(chloral hydrate)、艾司唑仑(estazolam)、单盐酸氟西泮(flurazepam hydrochloride)、戊巴比妥(pentobarbital)、戊巴比妥钠(pentobarbital sodium)、苯巴比妥钠(phenobarbitalsodium)、司可巴比妥钠(secobarbital sodium)、替马西泮(temazepam)、三唑仑(triazolam)、扎来普隆(zaleplon)或酒石酸唑吡坦(zolpidem tartrate)；抗惊厥剂，如乙酰唑胺钠(acetazolamide sodium)、卡马西平(carbamazepine)、氯硝西泮(clonazepam)、二甲氯氮卓(clorazepate dipotassium)、地西泮(diazepam)、双丙戊酸钠(divalproexsodium)、乙琥胺(ethosuximde)、磷苯妥因钠(fosphenytoin sodium)、加巴喷丁(gabapentin)、拉莫三嗪(lamotrigine)、硫酸镁(magnesium sulfate)、苯巴比妥、苯巴比妥钠、苯妥英、苯妥英钠(phenytoin sodium)、普里米酮、盐酸噻加宾(tiagabinehydrochloride)、托吡酯(topiramate)、丙戊酸钠(valproate sodium)或丙戊酸(valproicacid)；抗抑郁剂，如盐酸阿米替林(amitriptyline hydrochloride)、恩波阿米替林(amitriptyline pamoate)、阿莫沙平(amoxapine)、盐酸安非他酮(bupropionhydrochloride)氢溴酸西酞普兰(citalopram hydrobromide)、盐酸氯米帕明(clomipramine hydrochloride)、盐酸地昔帕明(desipramine hydrochloride)、盐酸多塞平(doxepin hydrochloride)、盐酸氟西汀(fluoxetine hydrochloride)、盐酸丙咪嗪(imipramine hydrochloride)、帕姆酸丙米嗪(imipramine pamoate)、米氮平(mirtazapine)、盐酸奈法唑酮(nefazodone hydrochloride)、盐酸去甲替林(nortriptyline hydrochloride)、盐酸帕罗西汀(paroxetine hydrochloride)、硫酸苯乙肼(phenelzine sulfate)、盐酸舍曲林(sertraline hydrochloride)、硫酸反苯环丙胺(tranylcypromine sulfate)、马来酸曲米帕明(trimipramine maleate)或盐酸文拉法辛(venlafaxine hydrochloride)；抗焦虑药，如阿普唑仑(alprazolam)、盐酸丁螺环酮(buspirone hydrochloride)、氯氮卓(chlordiazepoxide)、盐酸氯氮卓(chlordiazepoxide hydrochloride)、二钾氯氮(clorazepate dipotassium)、安定(diazepam)、盐酸多塞平(doxepin hydrochloride)、双羟萘酸羟嗪(hydroxyzineembonate)、盐酸羟嗪(hydroxyzine hydrochloride)、双羟萘酸羟嗪(hydroxyzinepamoate)、劳拉西泮(lorazepam)、眠尔通(mephrobamate)、盐酸咪达唑仑(midazolamhydrochloride)或奥沙西泮(oxazepam)；抗精神病药，如盐酸氯丙嗪(chlorpromazinehydrochloride)、氯氮平(clozapine)、氟奋乃静癸酸酯(fluphenazine decanoate)、氟奋乃静庚酸酯(fluephenazine enanthate)、盐酸氟奋乃静(fluphenazine hydrochloride)、氟哌啶醇(haloperidol)、氟哌啶醇癸酸酯(haloperidol decanoate)、乳酸氟哌啶醇(haloperidol lactate)、盐酸洛沙平(loxapine hydrochloride)、丁二酸洛沙平(loxapine succinate)、苯磺酸美索达嗪(mesoridazine besylate)、盐酸吗茚酮(molindone hydrochloride)、奥氮平(olanzapine)、奋乃静(perphenazine)、匹莫齐特(pimozide)、丙氯拉嗪(prochlorperazine)、富马酸喹硫平(quetiapine fumarate)、利培酮(risperidone)、盐酸硫利哒嗪(thioridazine hydrochloride)、替沃噻吨(thiothixene)、盐酸替沃噻吨(thiothixene hydrochloride)或盐酸三氟拉嗪(trifluoperazine hydrochloride)；中枢神经系统兴奋剂，如硫酸安非他命(amphetaminesulfate)、咖啡因(caffeine)、硫酸右旋安非他命(dextroamphetamine sulfate)、盐酸多沙普仑(doxapram hydrochloride)、盐酸甲基安非他命(methamphetaminehydrochloride)、盐酸哌甲酯(methylphenidate hydrochloride)、莫达非尼(modafinil)、匹莫林(pemoline)或盐酸苯丁胺(phentermine hydrochloride)；抗帕金森氏病类，如盐酸金刚烷胺(amantadine hydrochloride)、甲磺酸苯扎托品(benztropine mesylate)、盐酸比哌立登(biperiden hydrochloride)、乳酸比哌立登(biperiden lactate)、甲磺酸溴隐亭(bromocriptine mesylate)、卡比多巴-左旋多巴(carbidopa-levodopa)、恩他卡朋、左旋多巴(levodopa)、甲磺酸培高利特(pergolide mesylate)、盐酸普拉克索(pramipexoledihydrochloride)、盐酸罗匹尼罗(ropinirole hydrochloride)、盐酸司来吉兰(selegiline hydrochloride)、托卡朋(tolcapone)或盐酸苯海索(trihexyphenidylhydrochloride)；或中枢神经系统药剂，如盐酸安非他酮(bupropion hydrochloride)、盐酸多奈哌齐(donepezil hydrochloride)、氟哌利多(droperidol)、马来酸氟伏沙明(fluvoxamine maleate)、碳酸锂(lithium carbonate)、柠檬酸锂(lithium citrate)、盐酸那拉曲普坦(naratriptan hydrochloride)、尼古丁·普拉克里克斯(nicotinepolacrilex)、尼古丁透皮系统(nicotine transdermal system)、异丙酚(propofol)、苯甲酸利扎曲普坦(rizatriptan benzoate)、一水盐酸西布曲明(sibutramine hydrochloridemonohydrate)、琥珀酸舒马曲坦(sumatriptan succinate)、琥珀酸舒马普坦(tacrinehydrochloride)或佐米曲普坦(zolmitriptan)；胆碱能类(例如，拟副交感神经类)，如氯贝胆碱(bethanechol chloride)、依酚氯铵(edrophonium chloride)、溴化新斯的明(neostigmine bromide)、甲基硫酸新的斯的明(neostigmine methylsulfate)、水杨酸毒扁豆碱(physostigmine salicylate)或溴化吡啶斯的明(pyridostigmine bromide)；抗胆碱能类，如硫酸阿托品(atropine sulfate)、盐酸待克明(dicyclomine hydrochloride)、格隆溴铵(glycopyrrolate)、莨菪碱(hyoscyamine)、莨菪碱硫酸盐(hyoscyaminesulfate)、溴化丙胺太林(propantheline bromide)、东莨菪碱(scopolamine)、丁溴酸东莨菪碱(scopolamine butylbromide)或氢溴酸东莨菪碱(scopolamine hydrobromide)；肾上腺素能类(拟交感神经类)，如盐酸多巴酚丁胺(dobutamine hydrochloride)、盐酸多巴胺(dopamine hydrochloride)、重酒石酸间羟胺(metaraminol bitartrate)、重酒石酸去甲肾上腺素(norepinephrine bitartrate)、盐酸去氧肾上腺素(phenylephrinehydrochloride)、盐酸伪麻黄碱(pseudoephedrine hydrochloride)或硫酸伪麻黄碱(pseudoephedrine sulfate)；肾上腺素能阻滞剂(抗交感神经类)，如甲磺酸二氢麦角胺(dihydroergotamine mesylate)、酒石酸麦角胺(ergotamine tartrate)、马来酸麦角麦角(methysergide maleate)或盐酸普萘洛尔(propranolol hydrochloride)；骨骼肌松弛剂，如巴氯芬(baclofen)、卡立普多(carisoprodol)、氯唑沙宗(chlorzoxazone)、盐酸环苯扎林(cyclobenzaprine hydrochloride)、丹特罗钠(dantrolene sodium)、美索巴莫(methocarbamol)或盐酸替扎尼定(tizanidine hydrochloride)；神经肌肉阻滞剂，如苯磺酸阿曲库铵(atracurium besylate)、苯磺顺阿曲库铵(cisatracurium besylate)、多巴曲铵(doxacurium chloride)、氯化米伐库铵(mivacurium chloride)、泮库溴铵(pancuronium bromide)、哌库溴铵(pipecuronium bromide)、溴化拉帕库铵(rapacuronium bromide)、罗库溴铵(rocuronium bromide)、氯化琥珀胆碱(succinylcholine chloride)、氯化筒箭毒碱(tubocurarine chloride)或维库溴铵(vecuronium bromide)；或皮质类固醇，如倍他米松(betamethasone)、醋酸倍他米松或倍他米松磷酸钠(betamethasone acetate or betamethasone sodium phosphate)、倍他米松磷酸钠、醋酸可的松(cortisone acetate)、地塞米松(dexamethasone)、醋酸地塞米松(dexamethasone acetate)、地塞米松磷酸钠(dexamethasone sodium phosphate)、醋酸氟氢可的松(fludrocortisone acetate)、氢化可的松(hydrocortisone)、醋酸氢化可的松(hydrocortisone acetate)、氢化可的松环戊丙酸酯(hydrocortisone cypionate)、氢化可的松琥珀酸钠(hydrocortisone sodium phosphate)、氢化可的松琥珀酸钠(hydrocortisone sodium succinate)、醋酸甲泼尼龙(methylprednisolone)、醋酸甲泼尼龙(methylprednisolone acetate)、甲基泼尼松龙琥珀酸钠(methylprednisolone sodiumsuccinate)、泼尼松龙(prednisolone)、醋酸泼尼松龙钠(prednisolone acetate)、泼尼松龙磷酸钠(prednisolone sodium phosphate)、丁乙酸泼尼松龙(prednisolonetebutate)、泼尼松(prednisone)、曲安西龙(triamcinolone)、曲安奈德(triamcinoloneacetonide)或双乙酸呋曲安奈德(triamcinolone diacetate)。

试剂盒

本文还提供了试剂盒，其包括本文所述的化合物I的形式或其药物组合物、任选的第二活性剂和合适的包装。在一个实施方案中，试剂盒进一步包含用于使用的说明书。在一方面，试剂盒包含本文所述的化合物I的形式或其药物组合物，以及用于在治疗适应症中使用药物组合物的标签和/或说明书，所述适应症包含本文所述的疾病或病状。

本文还提供了在合适容器中的包含本文所述的化合物I的形式或其药物组合物的制品。容器可以是小瓶、广口瓶、安瓿瓶、预装载的注射器、雾化器、气雾剂分配装置、滴管或静脉注射袋。

合成

在一些实施方案中，本公开提供了用于合成化合物I的方法。

可以利用本文中所公开方法及其常规修改来进行本公开的方法，所述修改鉴于本文中公开的内容和本领域已知的方法将是显而易见的。除了本文中的教导外，可使用常规的和众所周知的合成方法。本文所述的典型化合物，例如化合物I、化合物A等，或本文公开的其他式或化合物的合成可如以下实施例中所述完成。如果可获得，则可以从例如SigmaAldrich或其它化学供应商处商业购得试剂。

可利用下面所描述的一般反应方案，合成根据本发明的化合物的典型实施方案。给定试剂可以定义为一般类或类别(例如，功能或结构)，其应被解释为包括与给定描述词匹配的任何试剂。

本公开的化合物可以使用例如以下通用方法和程序从容易获得的起始材料制备。应当理解的是，除非另有说明，在给出典型或优选的工艺条件(即，反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)的情况下也可以采用其它工艺条件。最佳反应条件可随所使用的特定反应物或溶剂而变化，但这种条件可以由本领域技术人员通过常规优化程序来确定。

另外，对于本领域技术人员显而易见的是，常规的保护基可以是本文描述的。用于各种官能团的合适保护基以及用于保护和脱保护特定官能团的合适条件是在领域中是已知的。例如，在T.W.Greene和G.M.Wuts(1999)《有机合成中的保护基》，第三版，Wiley，NewYork以及其中所引用的参考文献中描述了许多保护基。

用于以下反应的起始材料通常是已知的化合物，或者可以通过已知的方法或其明显的修改来制备。例如，许多起始材料可从如下的供应商处获得：奥德里奇化学公司(Aldrich Chemical Co.)(美国威斯康星州密尔沃基(Milwaukee,Wisconsin,USA))、巴亨公司(美国加利福尼亚州托兰斯(Torrance,California,USA))、依姆卡-凯米克或西格玛公司(Emka-Chemce or Sigma)(美国密苏里州圣路易斯(St.Louis,Missouri,USA))。其它化合物可通过如下标准参考文本中所描述的过程或其明显修改而制备：《Fieser和Fieser's的用于有机合成的试剂(Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis)》第1-15卷(约翰威利父子公司(John Wiley和Sons),1991年)、《罗德氏碳化合物化学(Rodd'sChemistry of Carbon Compounds)》,第1-5卷以及《补充物(Supplementals)》(爱思唯尔科学出版社(Elsevier Science Publishers),1989年)、《有机反应(organic Reactions)》,第1-40卷(约翰威利父子公司,1991年)、《马奇的高等有机化学(March's AdvancedOrganic Chemistry)》(约翰威利父子公司,第5版,2001)以及《拉罗克的综合有机转化(Larock's Comprehensive Organic Transformations)》(VCH出版社公司(VCHPublishers Inc.),1989年)。

术语“惰性有机溶剂”或“惰性溶剂”是指在与其相关描述的反应条件下呈惰性的溶剂(包括例如苯、甲苯、乙腈、四氢呋喃(“THF”)、二甲基甲酰胺(“DMF”)、氯仿、亚甲基氯(或二氯甲烷)、乙醚、甲醇、吡啶、乙酸等)。除非另有说明，反应在惰性气体如氮气或氩气下进行。“溶剂”不必是惰性的。

在每个示例性方案中，将反应产物彼此分离和/或与起始材料分离可能是有利的。通过本领域常用的技术将每个步骤或一系列步骤的期望产物分离和/或纯化(下文中分离)至期望的均质度。通常，此类分离涉及多相萃取、从溶剂或溶剂混合物中结晶、蒸馏、升华或色谱法。色谱法可以涉及多种方法，包括例如：反相和正相；尺寸排除；离子交换；高、中、低压液相色谱方法和装置；小规模分析；模拟移动床(SMB)和制备薄层或厚层色谱，以及小规模薄层和快速色谱的技术。

另一类分离方法涉及用介质处理混合物，该介质被选择以结合或以其他方式分离期望的产物、未反应的起始材料、反应副产物等。这种介质包括吸附剂或吸收剂，例如活性炭、分子筛、离子交换介质等。或者，酸(在碱性材料的情况下)或碱(在酸性材料的情况下)、结合试剂例如抗体、结合蛋白、选择性螯合剂例如冠醚、液体/液体离子萃取试剂(LIX)等。

适当的分离方法的选择取决于所涉及材料的性质。例如，蒸馏和升华中的沸点和分子量，色谱中极性官能团的存在与否，多相萃取中材料在酸性和碱性介质中的稳定性等。本领域技术人员将应用最有可能实现所需分离的技术。

原料和试剂购自上海能化泰坦科技有限公司，这些原料未经进一步纯化直接使用。氧和湿敏反应在氮气氛下进行。反应通过薄层色谱(TLC)监测，薄层色谱板通过暴露在紫外光下进行可视化。在254nm处监测洗脱。快速柱色谱通常在硅胶(300-400目)上进行。除非另有说明，产率是指分离的色谱和光谱上均质的材料。

方案1代表化合物I的示例性合成并且可以根据本文所述的实施方案进行。考虑在方案1中所示的示例性合成可能特别有利。例如，合成避免了有毒试剂。合成还可以利用更温和的反应条件，并且可以需要更少的纯化步骤(例如避免柱色谱)。合成还可以提供更高的产率。方案1中使用的具体反应条件和试剂在下面讨论。

化合物I可以按照一般方案即方案1合成：

方案1

在一些实施方案中，提供了制备化合物I或其药学上可接受的盐的方法：

包括在包含卤化物的第一反应条件下使化合物A与化合物B接触以形成化合物I：

在制备化合物I的方法的一些实施方案中，卤化物是碱金属卤化物。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，碱金属卤化物是碱金属碘化物。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，碱金属碘化物是碘化钾。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，第一反应条件还包括无机碱。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，无机碱为碳酸钾。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，第一反应条件包括65至120℃的温度。

在一些实施方案中，制备化合物A和任选的化合物I的方法包括在包含质子酸的第二反应条件下使化合物C与化合物D接触以形成化合物A：

在制备化合物I的方法的一些实施方案中，质子酸是有机酸。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，有机酸是乙酸。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，质子酸相对于化合物C和化合物D以大于化学计量的摩尔比存在。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，质子酸溶解化合物C和化合物D。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，乙酸是非惰性溶剂。

在一些实施方案中，制备化合物B和任选的化合物I的方法包括在包含银盐的第三反应条件下使化合物E与对甲苯磺酰氯接触以形成化合物B：

在制备化合物I的方法的一些实施方案中，银盐是Ag₂O。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，第三反应条件还包括碱金属碘化物。在制备化合物I的方法的一些实施方案中，碱金属碘化物是碘化钾。

实施例

实施例1

实验步骤

将化合物I经受各种结晶条件，包括固体蒸气扩散、反溶剂添加、液体蒸气扩散、缓慢冷却、各种温度下的浆液转化、温度循环和缓慢蒸发。化合物I的结晶形式通过X射线粉末衍射(XRPD)、差示扫描量热法(DSC)和热重分析(TGA)分析，而亚稳态形式通过XRPD分析。使用带Si零背景支架的Panalytical X'Pert3 Powder XRPD进行XRPD。2θ位置根据Panalytical Si参考标准盘进行校准。所使用的仪器参数列于表1-1中。

表1-1：用于XRPD分析的参数

使用来自TA Instruments的TA Q500和Q550收集TGA数据。使用来自TAInstruments的TA Q2000进行DSC。DSC使用铟参考标准进行校准，TGA使用镍参考标准进行校准。表1-2列出了TGA和DSC测试中使用的详细参数。

表1-2：用于TGA和DSC测试的参数

使用Zeiss Axio Scope.A1显微镜捕获PLM图像。单晶生长实验中获得的样品的PLM图像是在室温下使用上海策维PXS9-T体视显微镜拍摄的。

通过SMS(表面测量系统)DVS Intrinsic测量DVS。25℃时的相对湿度根据LiCl、Mg(NO3)2和KCl的潮解点进行校准。DVS测试的实际参数如表1-3所示。

表1-3：用于DVS测试的参数

使用配备VWD检测器的Agilent 1260HPLC，纯度分析的详细色谱条件列于表1-4。

表1-4：HPLC条件和参数

对化合物I共观察到五种结晶形式，包括一种无水形式(形式I)、一种水合物/溶剂化物(形式IV)和三种亚稳态形式(形式II、III和V)。形式II和III仅以湿态存在，没有分离出固体用于热分析。获得了形式V固体，然而，形式V在约50℃在真空烘箱中干燥时变为形式I。分离的形式和条件的总结见表1-5和表1-6。

表1-5：化合物I形式的分离条件

表1-6：化合物I形式分离和简要说明

实施例2

化合物I的形式

化合物I形式I

化合物I形式I是化合物I的无水形式，并且它被认为是化合物的最热力学稳定的多晶型物。迄今为止，形式I是化合物I的鉴定出的唯一稳定的无水物形式。

通过各种方法获得化合物I形式I。图1中的XRPD结果显示形式I是结晶的。

TGA/DSC曲线(图2和图3)显示重量损失可以忽略不计，并且在70.3℃处有一个吸热峰。根据这些表征数据，形式I被认为是无水物。

使用本文提供的方法分离化合物I形式I。

化合物I形式II

通过各种方法获得形式II。XRPD结果显示形式II是结晶的。它仅以湿饼的形式存在，并在储存时变为形式II和C的混合物或形式III和形式V的混合物。为了进一步研究形式II，进行了几次重新制备的尝试，结果形成了形式III、IV、V或无定形形式，表明形式II是亚稳态形式。因此，没有获得形式II的DSC和TGA数据。

化合物I形式III

通过各种方法获得形式III。XRPD结果显示形式III是结晶的。通过在MeOH中缓慢蒸发获得的形式III固体在XRPD分析期间暴露于露天后迅速转化为形式I。为了进一步研究形式III，进行了几次重新制备的尝试，结果形成了形式I或无定形形式，表明形式III是亚稳态形式。因此，没有获得形式III的DSC和TGA数据。

化合物I形式IV

通过在MEK储备溶液中添加H₂O的反溶剂获得形式IV。XRPD结果显示形式IV是结晶的。TGA/DSC曲线显示，在150℃之前重量损失为4.4％，并在48.0和58.9℃处出现两个吸热峰。基于这些表征数据，形式IV被认为是水合物或溶剂化物。

化合物I形式V

形式V是通过各种方法获得的。XRPD结果显示形式V是结晶的。TGA/DSC曲线显示，在150℃之前重量损失为6.6％，并且在45.7℃(转变、开始)和70.2℃(熔化、峰值)时发生了两次热事件。XRPD数据还显示，形式V固体在约50℃下真空干燥后转化为形式I。在约50℃下脱水/去溶剂化，化合物I形式V转化为化合物I形式I。这些结果表明形式V是一种亚稳定的水合物/溶剂化物，在脱水/去溶剂化后转化为形式I。

无定形化合物I

在本文所述的条件下观察到无定形化合物I。

实施例3

化合物I形式的方法

溶解度

在室温下测定了化合物I在20种单一溶剂中的近似溶解度。将大约2mg粉末样品加入3mL玻璃瓶中。将相应的溶剂逐步(50μL→100μL→300μL→1000μL)加入每个小瓶中，直到粉末固体在视觉上完全溶解或加入总体积为1mL的溶剂。基于样品质量、溶剂体积和实验观察计算近似溶解度值。表3-1中总结的结果用于指导后续多晶型筛选实验设计中的溶剂选择。

表3-1：化合物I在室温下的溶解度；*表示样品在室温放置约10分钟后从澄清溶液中沉淀出来(S＜40mg/mL)，并添加额外的溶剂以完全溶解剩余的固体

固体蒸气扩散

使用9种不同的溶剂进行固体蒸气扩散实验。将大约15mg的起始材料称量到4mL的小瓶中，然后将其放入装有3mL挥发性溶剂的20mL小瓶中。然后将20mL小瓶用盖子密封并在室温下保持7天，使溶剂蒸气与样品相互作用。如果固体完全溶解在溶剂中，则在室温下进行缓慢蒸发。通过XRPD分析获得的固体。表3-2中总结的结果表明观察到形式I和形式V。

表3-2：化合物I的固体蒸气扩散实验总结；*表示粉末固体完全溶解在溶剂中，因此缓慢蒸发得到固体样品

反溶剂添加

反溶剂添加实验在12种条件下进行。将大约20mg起始材料溶解在0.5或1.0mL溶剂中以获得澄清溶液。然后过滤溶液，以每步0.2mL的速率加入反溶剂进行磁力搅拌。添加反溶剂直到不再有固体沉淀出来或溶剂总体积达到5.0mL。如果溶液保持清澈，则将样品在5℃下搅拌以诱导沉淀。如果在5℃下未发生沉淀，则在室温下进行缓慢蒸发以获得固体。通过离心分离固体沉淀物用于随后的XRPD分析。表3-3中的结果表明观察到形式I、II、III、IV和V以及无定形形式。

表3-3：化合物I的反溶剂添加实验总结；*表示通过在室温下缓慢蒸发获得固体

1：将样品保留在溶剂混合物中并在第3天重新分析；2：在第2次尝试时制备并立即分析样品；3：在第3次尝试时制备并立即分析样品；4：将样品留在溶剂混合物中并在第2次尝试的第2天重新分析

液体蒸气扩散

液体蒸气扩散实验在6种条件下进行。简而言之，将约20mg起始材料溶解在1mL溶剂中，并使用孔径为0.45μm的PTFE注射式过滤器过滤到5mL小瓶中。然后将滤液放入装有3mL挥发性溶剂的20mL小瓶中。将20mL小瓶用盖子密封并保持在室温，以允许有机溶剂蒸气与溶液相互作用至少14天。然后分离沉淀物用于XRPD分析。表3-4中总结的结果表明观察到形式I和形式II。

表3-4：化合物I的液体蒸气扩散实验总结

缓慢冷却

缓慢冷却实验在7种溶剂或溶剂组合中进行。简而言之，在50℃将约20mg起始材料溶解在0.5或1mL溶剂中，并使用孔径为0.45μm的PTFE注射式过滤器过滤到新的小瓶中。将滤液以0.1℃/min的速率从50℃缓慢冷却至5℃。在离心和XRPD分析之前，将获得的固体在5℃保持恒温。如果溶液保持澄清，则进行缓慢蒸发以获得用于XRPD分析的固体。结果总结在表3-5中。结果表明观察到形式I、III、V和无定形形式。

表3-5：化合物I的缓慢冷却实验总结；*表示冷却后溶液保持清澈，因此进行缓慢蒸发

1：干燥后变为形式I

浆料转化

浆料转化实验在室温或60℃下在17种溶剂系统中进行。在目标温度下将大约20mg的起始材料悬浮在0.35mL的溶剂中7天。分离剩余的固体用于XRPD分析。如果样品完全溶解，则添加额外的固体，直到添加了总共大约100mg的粉末固体。然后通过离心分离固体并用XRPD分析。表3-6中总结的结果表明观察到形式I和形式V。

表3-6：化合物I的浆液转化实验总结

1：添加了额外的固体(≤100mg)；2：加入～100mg固体后溶液保持澄清，7天后，将溶液保持在5℃以获得用于分析的固体

温度循环

温度循环实验在6种条件下进行。简而言之，将约20mg起始材料溶解在0.35mL溶剂中并磁力搅拌。将悬浮液在50℃下保持2小时，以0.05℃/min的速率冷却至5℃，在5℃下保持2小时，然后以3℃/min的速率升至50℃，恒温2小时，然后以0.05℃/min的速率冷却至5℃。离心前将样品保存在5℃。结果总结在表3-7中。形成形式I和形式V。

表3-7：化合物I的温度循环实验总结

*：干燥后变为形式I

缓慢蒸发

缓慢蒸发实验在7种条件下进行。将大约20mg的起始材料溶解在0.5或1.0mL的溶剂中并使用孔径为0.45μm的PTFE注射式过滤器过滤。然后使用带有3个针孔的覆盖滤液并保存在RT。收集所得固体用于XRPD分析。结果总结在表3-8中。表明观察到形式I和形式III结晶形式。

表3-8：化合物I的缓慢蒸发实验总结；*表示冷却后溶液保持清澈，因此进行缓慢蒸发

1：干燥后转化为形式I

实施例4

化合物I的固态稳定性

化合物I的固态稳定性在30℃/65％RH(开放培养皿和密闭容器)和40℃/75％RH(开放培养皿和密闭容器)的条件下评估4周。列出了用于稳定性评估的详细程序：1)称取约10mg化合物I起始材料，装入3mL玻璃小瓶中；2)对于开放培养皿条件，用覆盖小瓶并戳6个孔。对于密闭条件，分别用盖子密封小瓶并保持小瓶在相应的条件下；对于40℃/75％RH的条件，将小瓶置于40℃/75％RH的稳定室中；对于30℃/65％RH的条件，将小瓶置于30℃生化饱和碘化钾水溶液产生的密闭气氛中；4)3天、1周、2周和4周后采集样品，用于XRPD、PLM和HPLC纯度。

根据XRPD结果，在所有上述条件下储存后未观察到形式变化。PLM表征结果表明化合物I样品仍为不规则的薄片状晶体，有附聚。HPLC分析表明，在30℃/65％RH(开放和封闭)和40℃/75％RH(开放和封闭)的条件下，4周后未观察到HPLC纯度显著下降。

在30℃/65％RH(封闭和开放)和40℃/75％RH(封闭和开放)的条件下进行化合物I形式I起始材料的固态稳定性评估。X射线粉末衍射(XRPD)、偏光显微镜(PLM)和HPLC纯度在4个采样点(3天、1周、2周、4周)进行表征。在30℃/65％RH和40℃/75％RH两种条件下，4周内未观察到化合物I形式I的形式变化和显著的HPLC纯度降低。固态稳定性评价结果总结在表4-1中。

对于单晶结构测定，通过包括缓慢蒸发、液体蒸气扩散、缓慢冷却、加热-冷却和溶剂-热合成的不同方法进行了83个单晶生长实验。稳定性评价实验在40℃/75％RH条件下使用稳定室进行，而30℃/65％RH条件是在30℃生化培养箱中通过饱和碘化钾水溶液建立。

表4-1：化合物I形式I的固态稳定性评估总结(HPLC纯度)

化合物I起始材料是交付的样品。将起始材料通过XRPD、热重分析(TGA)、差示扫描量热法(DSC)、PLM和动态蒸汽吸附(DVS)进行表征。

化合物I起始材料的TGA/DSC结果显示，在150℃之前重量损失为0.45％，并且在

68.2℃(起始温度)处出现明显吸热，这可能是由于熔化所致。PLM结果显示起始材料呈现不规则形态并附聚。DVS图(图12)在25℃/80％RH下显示0.64％的吸水率，在25℃/95％RH下显示21.43％的吸水率。DVS测试后未观察到形式变化，如图13所示。样品信息和表征结果总结在表4-2中。

表4-2：化合物I起始材料的表征总结

实施例5

单晶生长

通过包括缓慢蒸发、液体蒸气扩散、缓慢冷却、加热-冷却和溶剂-热合成的不同方法进行了化合物I的总共83个单晶生长实验。然而，仅获得了薄片状和重叠晶体样品，这些样品太薄而无法进行SCXRD表征。描述了典型的实验程序和详细信息。

缓慢蒸发

共进行了40次缓慢蒸发实验，获得了一些具有薄片状形态的单晶样品。典型实验步骤：称取化合物I起始原料至3mL玻璃小瓶中，向小瓶中加入选定的溶剂以溶解固体(用涡旋振荡器或超声仪加速溶解)。用PTFE过滤器(0.45μm)和一次性注射器将溶液过滤到4mL壳体小瓶(44.6mm×14.65mm)中。在部分实验中，加入少量化合物I起始材料作为晶种。随后，将壳体小瓶用上面有针孔的PE-Plug覆盖，并放置在相应的温度下缓慢蒸发。几天后，通过PLM观察样品。详细的实验信息列于表5-1、表5-2、表5-3和表5-4中。

表5-1：化合物I的缓慢蒸发单晶生长实验

a：化合物I；b：本组实验中加入少量化合物I作为晶种；c：缓慢蒸发4天后观察实验结果

表5-2：化合物I的缓慢蒸发单晶生长实验

a：化合物I；b：本组实验中加入少量化合物I作为晶种；c：缓慢蒸发3天后观察实验结果

表5-3：化合物I的缓慢蒸发单晶生长实验

a：化合物I起始原料；b：在这批实验中加入少量起始量的化合物I作为晶种；c：缓慢蒸发1天后观察实验结果；d：缓慢蒸发4天后观察实验结果

表5-4：化合物I的缓慢蒸发单晶生长实验

a：化合物I起始原料；b：本组实验不加晶种；c：缓慢蒸发1天后观察实验结果

缓慢蒸发

共进行了22次液体蒸气扩散实验，获得了一些具有薄片状形态的单晶样品。

典型实验步骤：称取化合物I起始原料至3mL玻璃小瓶中，向小瓶中加入选定的溶剂以溶解固体(可用涡旋振荡器或超声仪加速溶解)。用PTFE过滤器(0.45μm)和一次性注射器将溶液过滤到4mL壳体小瓶(44.6mm×14.65mm)中。在部分实验中，加入非常少量的化合物I起始材料作为晶种以诱导结晶。随后，将壳体小瓶用上面有针孔的PE-Plug覆盖。然后将4ml壳体小瓶放入含有3.0ml反溶剂的20ml玻璃小瓶中，密封并在相应温度下储存用于液体蒸气扩散。几天后，通过PLM观察样品。详细的实验信息列于表5-5、表5-6和表5-7。

表5-5：化合物I的液体蒸气扩散单晶生长实验

a：化合物I起始原料；b：本组实验中加入少量化合物I作为晶种；c：液体蒸气扩散3天后观察实验结果

表5-6：化合物I的液体蒸气扩散单晶生长实验

a：化合物I起始原料；b：本批实验中加入少量化合物I作为晶种；c：液体蒸气扩散4天后观察实验结果

表5-7：化合物I的液体蒸气扩散单晶生长实验

a：化合物I起始原料；b：本批次实验不加晶种；c：EtOAc用H2O饱和；d：液体蒸气扩散2天后观察实验结果

缓慢冷却

共进行了6次缓慢冷却实验，得到了一些片状形态的单晶样品。

典型的实验程序：将化合物I起始材料称重到3ml玻璃小瓶中，并加入0.5mL选定的溶剂。通过涡旋振荡器或超声波装置加速溶解过程后，将悬浮液在50℃烘箱中保持约0.5小时。然后将热溶液过滤到另一个带有PTFE过滤器的3ml玻璃瓶中(0.45μm)和2.0ml一次性注射器(PTFE过滤器、一次性注射器和3ml玻璃瓶在50℃下预热)，加入少量起始材料到小瓶中作为晶种。然后将小瓶密封并放入生化培养箱中缓慢冷却(冷却程序：50℃→5℃，0.01℃/min)。

表5-8：化合物I的缓慢冷却单晶生长实验

a：化合物I起始原料；b：冷却程序：50℃→5℃，0.01℃/min；c：缓慢冷却4天(冷却结束)后观察实验结果

加热-冷却

共进行了9次加热-冷却实验，得到了一些片状形态的单晶样品。

典型的实验程序：将化合物I起始材料称重到3ml玻璃小瓶中，并加入0.5mL选定的溶剂。通过涡旋振荡器或超声波装置加速溶解过程后，将悬浮液在50℃烘箱中保持约0.5小时。然后将热溶液过滤到另一个带有PTFE过滤器的3ml玻璃瓶中(0.45μm)和2.0ml一次性注射器(PTFE过滤器、一次性注射器和3ml玻璃瓶在50℃下预热)。将少量起始材料作为晶种添加到小瓶中。然后将小瓶密封并放入生化培养箱中进行加热-冷却(加热-冷却程序：50℃→5℃，0.05℃/min，5个循环)。

表5-9：化合物I的加热-冷却单晶生长实验

a：化合物I起始原料；b：冷却程序：50℃→5℃，0.05℃/min，5个循环；c：缓慢冷却4天(冷却结束)后观察实验结果

溶剂-热

共进行了6次溶剂-热实验，得到了一些针状形态的单晶样品。典型的实验程序：将化合物I起始材料称重到3ml玻璃小瓶中，并加入0.4mL选定的溶剂。随后，将小瓶放入水热反应器中，密封并放入烘箱中进行溶剂-热实验(温度程序：25℃→80℃→25℃)。

表5-10化合物I的溶剂-热单晶生长实验

a：化合物I起始原料；b：温度程序：25℃→80℃→25℃；c：反应3天(冷却结束)后观察实验结果

实施例6

合成

化合物E甲苯磺酰化形成化合物B

将化合物E(99.8g)溶解在无水DCM(2.0L)中并在室温下搅拌。5分钟后，将碘化钾(18.1g)、Ag₂O(179.8g)和对甲苯磺酰氯(108.5g)依次加入溶液中。将反应混合物在N₂下剧烈搅拌过夜。硅藻土过滤除去固体后，将滤液浓缩，通过柱层析纯化(PE∶EA＝1∶1至PE∶EA＝1∶2至DCM∶MeOH＝25∶1)，得到无色油状化合物B(110.0g，61.4％产率)。¹H NMR(图18)(400

MHz，CDCl3)δ7.75(d，J＝8.0Hz，2H)，7.34(d，J＝8.0Hz，2H)，4.18-4.15(m，2H)，3.72-3.59(m，14H)。

化合物C和化合物D缩合形成化合物A

在3-L烧瓶中，将化合物C(160.3g)和化合物D(172.0g)溶解在AcOH(1.5L)中。将混合物在105℃回流3.5小时。冷却至室温后，将溶液倒入冰水中，然后过滤。将滤液浓缩并通过使用EtOH(～1.4L)重结晶纯化以产生深灰色固体化合物A(105.7g，36.3％产率)。重结晶程序：将粗产物溶解在1.4LEtOH中，在80℃下形成溶液。将该溶液回流几分钟，然后缓慢冷却至室温。收集固体并用EtOH洗涤。将固体在50℃下真空干燥约8小时。¹H NMR(图19)(400MHz，CD₃OD)δ7.95-7.91(m，4H)，7.51-7.47(m，1H)，7.40-7.36(m，1H)，6.93-6.91(m，2H)。

化合物B与化合物A的亲核加成形成化合物I

化合物I是通过化合物A和化合物B的缩合合成的。首先，化合物A和化合物B的缩合是小规模尝试的。在烧瓶中装入化合物B(5.0g)、化合物A(3.3g)、K₂CO₃(4.0g)、KI(0.2g)和干燥DMF(60mL)。将所得混合物在N₂下在80℃加热过夜。冷却至室温后，通过用EA洗涤水层将产物萃取到EA中。减压除去EA溶剂，残余物通过柱色谱法(PE∶EA＝3∶1)纯化，得到白色粉末(4.3g，74.0％产率)。然后，将化合物I的制备规模扩大到数百克。将化合物B(105.0g)、化合物A(68.5g)、K₂CO₃(83.4g)、KI(5.0g)和干燥DMF(1.1L)装入烧瓶。将所得混合物在N₂下在80℃加热过夜。冷却至室温后，通过用EA(约7L)洗涤水层(约5L H₂O)将产物萃取到EA中。在减压下除去EA的溶剂并且通过柱色谱法(PE∶EA＝3∶1)纯化残余物两次以得到白色粉末(～110.0g)。将两批化合物I混合到DCM中形成溶液。在减压下蒸发DCM溶剂以得到纯化合物I(103.0g，80.8％产率)。化合物I的结构通过¹H NMR(图20)和MS(图21)验证。MS(m/z)：[M+H]+＝404.1。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.18(d，J＝8.0Hz，1H)，8.11(d，J＝8.0Hz，2H)，7.82(d，J＝4.0Hz，1H)，7.49-7.45(m，1H)，7.38-7.34(m，1H)，7.01-6.98(m，2H)，4.18-4.15(m，2H)，3.84-3.81(m，2H)，3.67-3.61(m，10H)，3.55-3.53(m，2H)。还测试了化合物I的HPLC纯度(HPLC，230nm和254nmUV)。当在230nm处检测时，化合物I的HPLC纯度确定为99.8面积％，通过HPLC在254nm处检测为99.7面积％(分别为表6-1和6-2)。制备的化合物I的XRPD图与形式I一致。

表6-1：化合物I在230nm处的HPLC纯度

表6-2：化合物I在254nm处的HPLC纯度

材料来源与表6-3一致

表6-3：材料来源

实施例7

使用苯并噻唑化合物进行体外棘生成

为了证明该化合物促进棘生成的功效，研究了本文所述的化合物对小鼠皮层神经元的突触点和突触的影响。

在DIV 15处用5μM测试化合物处理原代小鼠皮层神经元。作为对照，将原代小鼠皮层神经元仅用载体(10％DMSO、90％磷酸盐缓冲盐水(PBS))处理。24小时后，固定DIV 16神经元，使用突触前囊泡蛋白突触素(P38)进行免疫染色，用核染料DAPI(4′，6-二脒基-2-苯基吲哚)复染并计数。在徕卡共聚焦显微镜(Leica confocal microscope)上对免疫标记的神经元进行成像。使用具有Squash插件的FIJI对P38免疫阳性突点的数量进行了分析。

在类似的实验中，使用与上述相同的DMSO/PBS缓冲溶液作为对照载体，在DIV 15处用1μM测试化合物处理原代小鼠皮层神经元。24小时后，将DIV 16神经元固定，用突触素免疫标记，用DAPI染色，并按上述方法计数。

实施例8

计算机模拟的肌成束蛋白结合

为了评估本文所述的化合物与肌成束蛋白结合并由此抑制其将肌动蛋白原纤维成束的能力的能力，使用测试化合物和人肌成束蛋白1的可用晶体结构进行计算机模拟的研究。在每个肌成束蛋白晶体结构的表面鉴定结合位点，然后在每个口袋中虚拟对接测试化合物以确定有利的结合构象。参见国际公开号WO 2019/028164(2019年2月7日)。

肌成束蛋白晶体结构的分析与制备

所有可用的肌成束蛋白晶体结构都从PDB下载并准备用于结构分析(参见Sedeh，R.S.etal.J.Mol.Biol.400，589-604(2010)；Chen，L.et al.Nature 464，1062-1066(2010)；Jansen，S.etal.J.Biol.Chem.286，30087-30096(2011)；Yang，S.etal.J.Biol.Chem.288，274-284(2013))。通过眼睛以及通过嵌入在MolSoft的ICM-Pro软件中的标准自动化协议对结构进行分析。将氢原子添加到结构中，并且关于以下进行了考虑：Asn和Gln侧链的正确朝向、配体和蛋白质电荷、组氨酸朝向和质子化状态以及任何结晶学质量标志，如高b因子或低占有率。

■口袋识别

使用了MolSoft的ICMPocketFinder算法来标识所有可用肌成束蛋白晶体结构中的潜在配体结合口袋和腔(参见An，J.，et al.Genome Inform.Int.Conf.GenomeInform.15，31-41(2004)；Kufareva，I.，et al.Nucleic Acids Res.40，D535-540(2012))。首先，搜索晶体结构3LLP的活性链A中的口袋，因为发现该结构具有最高分辨率四个“药物状”口袋被确定为具有适合结合小分子的性质。

■配体对接和评分

使用MolSoft的ICM-Docking软件，版本3.8-6a(Abagyan,R.&Totrov,M.J.Mol.Biol.235,983–1002(1994))，将测试化合物的头基以及头+尾对接到四个口袋的每个口袋。确定每个口袋的对接评分。对接评分越低，“化合物-肌成束蛋白结合口袋”相互作用越好。

位于肌动蛋白结合位点1处的口袋B被认为导致对接评分最低。在其他肌成束蛋白晶体结构中进一步研究了结合口袋B。使用对接的头基作为锚点，然后对接尾基以产生最终的能量有利的化合物姿势。

本发明的范围不受实施例中所公开的具体实施方案的限制，这些实施例旨在对本发明的几个实施方案进行说明，也不受任何在本公开范围内功能等效的实施方案的限制。实际上，除了在此示出和描述的那些之外，对本公开的各种修改对于本领域技术人员来说将变得显而易见并且旨在落入所附权利要求的范围内。为此，应当注意，一个或多个氢原子或甲基可以从与此类有机化合物的公认速记符号一致的绘制结构中省略，并且有机化学领域的技术人员将容易地理解它们的存在。