具体实施方式

[定义]

在本说明书中，“肽”以及“蛋白质”这种用语彼此可互换使用，指通过酰胺键结合的氨基酸的聚合物。“肽”或“蛋白质”可以是天然氨基酸的聚合物，也可以是天然氨基酸与非天然氨基酸(天然氨基酸的化学类似物、修饰衍生物等)的聚合物，还可以是非天然氨基酸的聚合物。除非特别说明，氨基酸序列从N末端侧向C末端侧记载。

对于构成“肽”或“蛋白质”的氨基酸残基的数量没有特别的限定，具有两个以上的氨基酸残基的氨基酸聚合物也包含在“肽”或“蛋白质”中。在本说明书中，除非特别说明，将氨基酸残基数量多的聚合物(例如100个氨基酸残基以上)记载为“蛋白质”，将氨基酸残基数量少的聚合物(例如小于100个氨基酸)记载为“肽”。

在本说明书中，“多核苷酸”以及“核酸”这种用语彼此可互换使用，指核苷酸通过磷酸二酯键结合的核苷酸聚合物。“多核苷酸”以及“核酸”可以是DNA，也可以是RNA，还可以由DNA与RNA的组合构成。另外，“多核苷酸”以及“核酸”可以是天然核苷酸的聚合物，也可以是天然核苷酸与非天然核苷酸(天然核苷酸的类似物、碱基部分、糖部分以及磷酸部分中的至少一个部分被修饰的核苷酸(例如硫代磷酸酯骨架)等)的聚合物，还可以是非天然核苷酸的聚合物。除非特别说明，碱基序列从5’侧向3’侧记载。

在本说明书中，“基因”这种用语指包含编码特定的蛋白质的至少一个可读框(开放阅读框)的多核苷酸。基因可以包含外显子以及内含子双方。

在本说明书中，与多核苷酸有关使用的“可操作地连接”这种用语的意思是指第一碱基序列与第二碱基序列充分地接近配置，第一碱基序列可以影响第二碱基序列或第二碱基序列的控制下的区域。例如，多核苷酸“与启动子可操作地连接”的意思是指该多核苷酸以在该启动子的控制下表达的方式连接。

在本说明书中，“启动子能够发挥功能”的意思是指在对象的细胞内，启动子能够表达与该启动子可操作地连接的多核苷酸。

在本说明书中，“可表达的状态”的意思是指在导入了多核苷酸的细胞内，该多核苷酸或基因处于可被转录的状态。

在本说明书中，“表达载体”的意思是指包含对象多肽的载体，且是具备在导入了该载体的细胞内使对象多核苷酸成为可表达的状态的系统的载体。

在本说明书中，“药物递送组合物”的意思是指用于向生物体内的任意的部位(脏器、器官、组织、疾病部位等)递送药物的组合物。

在本说明书中，“药物载体”的意思是指用于药物的递送的载体。药物载体可以是有机物和无机物中的任一者。在药物载体由有机物构成的情况下，所述药物载体可以是细胞。

在本说明书中，细胞“内包药物”的意思是指药物存在于细胞内和/或药物存在于细胞膜。在药物存在于细胞内的情况下，药物可以存在于细胞器的内部。

在本说明书中，药物“局部存在于袋状膜结构”的意思是指药物的大部分存在于对象的袋状膜结构的内部(袋的内部)或形成袋状膜结构的膜(下称“袋状膜”)。在药物局部存在于细胞具有的袋状膜结构的情况下，内包于细胞中的全部药物无需存在于该袋状膜结构的内部或袋状膜，一部分的药物也可以存在于该袋状膜结构的外部。在药物“局部存在于袋状膜结构”的情况下，存在于该袋状结构的药物的比例可以是例如细胞内包的全部药物量的50％以上，优选为60％以上，更优选为70％以上，进一步优选为80％以上。

在本说明书中，“低分子化合物”的意思是指分子量约2000以下的化合物。但是，分子量2000以下的肽以及核酸不包含在“低分子化合物”内。

在本说明书中，“合成高分子化合物”的意思是指分子量为2000以上的非天然化合物。“非天然化合物”的意思是指在自然界不存在的化合物。作为合成高分子化合物，可以举出各种合成聚合物(聚烯烃、聚酯、聚酰胺、聚乙二醇、聚(2-噁唑啉)等)。人工化学合成的肽、蛋白质以及核酸不包含在“合成高分子化合物”内。

在本说明书中，“外源性物质”的意思是指从细胞外导入的物质或基于从细胞外导入的物质在细胞内生成的物质。作为基于从细胞外导入的物质在细胞内生成的物质的具体例子，例如可以举出：导入了外来基因的细胞中的所述外来基因的转录产物(mRNA)以及翻译产物(蛋白质)，导入了前药的细胞中的所述前药的活性代谢物(显示目标的药效的药剂)等。外源性物质是与细胞本来具有的物质(内源性物质)不同的物质。

在本说明书中，“药物”的意思是指在生物体中显示有益活性的物质。药物显示的有益活性没有特别的限定，包括生理活性、药理活性、生物活性以及对诊断等有用的化学活性等。例如，所述活性可以包括：作为医药品的有效成分众所周知的化合物具有的药理活性，以及给予到体内使用的诊断药物具有的化学活性或生理活性。作为所述活性，例如可以举出免疫诱导活性、免疫增强活性、抗癌活性、信号传导抑制活性、信号传导促进活性、代谢拮抗活性、镇痛活性、抗炎活性、杀菌活性、抗病毒活性、抗过敏活性、酶抑制活性、造影作用、荧光活性等，但不限于这些活性。药物也可以是在生物体内释放出显示有益活性的化合物的那些化合物(所谓的前药)。

在本说明书中，“医药品”包括医疗用医药品以及用于疾病的治疗、预防或增进健康而服用的广义的药物。“医药品”不论是否为公开注册的药、也不论是医疗用或医疗用以外的药物都可以。

在本说明书中，“食品”以包括通常的食品、健康食品、营养辅助食品、健康辅助食品、功能性食品、美容辅助食品以及保健品等的概念使用。

在本说明书中，“变异株”的意思是指在原始细胞株的基因组(包括核基因组、叶绿体基因组、线粒体基因组，下同)自然发生地或人为地产生了变异的细胞株。使基因组产生变异的人为方法没有特别的限定。作为所述人为的方法，例如可以举出：紫外线照射、放射线照射、利用亚硝酸等化学处理，基因导入、基因组编辑等基因工程的方法等。

在本说明书中，“YFU3株的变异株”是指在YFU3株的基因组中产生了突变的藻类株且具有二倍体的细胞形态以及单倍体的细胞形态的藻类株。“HKN1株的变异株”是指在HKN1株的基因组中产生了突变的藻类株且具有二倍体的细胞形态以及单倍体的细胞形态的藻类株。

在本说明书中，“近缘种”例如是rbcL基因、18SrRNA基因或16sRNA基因的碱基序列与原来的生物种的所述基因的碱基序列具有90％以上的同一性的细胞株。在生物种为藻类的情况下，所述比较对象的基因是rbcL基因或18SrRNA基因，优选为rbcL基因。原来的藻类具有的rbcL基因的碱基序列与近缘种的藻类具有的rbcL基因的碱基序列的同一性优选为95％以上，更优选为97％以上，进一步优选为98％以上，特别优选为99％以上。藻类具有的rbcL基因的碱基序列可以通过众所周知的方法得到。例如，通过众所周知的方法从作为对象的藻类的细胞提取DNA，通过PCR法等将rbcL基因的DNA片段扩增，利用DNA序列分析仪对扩增后的DNA片段的碱基序列进行分析，由此能够得到作为对象的藻类的rbcL基因的碱基序列。

[药物递送组合物]

在一实施方式中，本发明提供一种药物递送组合物，其包含内包药物的耐酸性细胞。在优选的实施方式中，所述药物局部存在于所述耐酸性细胞具有的袋状膜结构中。

＜耐酸性细胞＞

在本说明书中，“耐酸性细胞”的意思是指对酸性条件具有抗性的细胞。作为所述酸性条件，具体而言，可以举出pH1～3的pH条件。耐酸性细胞优选为对pH1～4的pH条件具有抗性，更优选为对pH1～5的pH条件具有抗性。

对酸性条件“具有抗性”的意思是指在酸性条件下不发生细胞破裂，不发生细胞内容物的溶出。

耐酸性细胞可以是活细胞，也可以是死细胞，但是优选为维持细胞的形态的细胞。耐酸性细胞优选为细胞膜和/或其外膜未发生破损、没有发生细胞内容物的溶出的细胞。在耐酸性细胞为活细胞的情况下，该细胞能够在酸性条件下生长。

耐酸性细胞的细胞种类没有特别的限定。作为耐酸性细胞，例如可以举出耐酸性的藻类细胞。作为这种藻类细胞，例如可以优选例示从酸性温泉等酸性环境分离出的微藻的细胞。作为这种微藻的具体例子，例如可以举出属于温泉红藻纲(Cyanidiophyceae)的藻类。

温泉红藻纲分类学上分类为红藻门(Rhodophyta)、温泉红藻纲(Cyanidiophyceae)。在温泉红藻纲中在当前分类有Cyanidioschyzon属、Cyanidium属以及Galdieria属的三个属。耐酸性细胞可以是属于这些属中的任一个属。例如通过使用了18SrRNA基因或叶绿体核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚单位(rbcL)基因的碱基序列的系统分析，能够判断某个藻类是否属于温泉红藻纲。系统分析只要通过众所周知的方法进行即可。图7中示出了基于属于温泉红藻纲的藻类的rbcL基因的碱基序列的分子系统树。

在属于温泉红藻纲的藻类中，存在有具有二倍体的细胞形态以及单倍体的细胞形态双方的藻类。二倍体的细胞形态通过减数分裂而能够产生单倍体的细胞形态。而且，认为单倍体的细胞通过两个细胞的接合而产生二倍体的细胞。

单倍体的细胞与二倍体的细胞相比，使用了基因重组技术的转化体的制备是容易的。因此，如后面所述地，在将编码作为药物的肽的基因导入耐酸性细胞的情况下，可以优选使用单倍体的细胞。另外，使用单倍体的细胞制备多个导入了任意药物编码基因的转化体，通过对这些转化体之间进行杂交，由此能够制备兼具多个药物编码基因、内包多个药物的二倍体。

对于藻类是二倍体还是单倍体的判断可以通过确认相同基因座的拷贝数来进行。即，若相同基因座的拷贝数为1，则判断为单倍体。另外，也可以利用下一代序列分析仪等判断藻类是单倍体。例如，利用下一代序列分析仪等取得全部基因组的序列读段，将这些序列读段组装后，针对组装得到的序列，对序列读段进行作图定位(mapping)。在二倍体中，在基因组上的各个区域中能够找到各等位基因的碱基的不同，但是在单倍体中，由于只存在一个等位基因，所以无法找到这种区域。

或者，也可以用DAPI等核染色试剂对细胞进行染色，与已知是单倍体的细胞进行比较，将表示同等的荧光亮度的细胞判断为单倍体，将表示约2倍的荧光亮度的细胞判断为二倍体。或者，也可以用DAPI等核染色试剂对细胞进行染色，与已知是二倍体的细胞进行比较，将表示同等的荧光亮度的细胞判断为二倍体，将表示约1/2倍的荧光亮度的细胞判断为单倍体。

为了在肠内快速地释放药物，耐酸性细胞优选为不具有坚固的细胞壁。在本说明书中，“不具有坚固的细胞壁”的意思是指在下述(A)～(C)的细胞破裂处理中的任一种处理中发生细胞破裂。

(A)将细胞悬浮在pH7以上的等渗溶液中放置1周以上。

(B)将细胞悬浮在蒸馏水中放置1分钟以上。

(C)进行细胞的干燥处理并将细胞悬浮在pH7以上的等渗溶液中。

在上述(A)～(C)中，在细胞是培养细胞的情况下，也可以在进行各处理之前，通过离心分离等除去培养基，用等渗溶液等对藻类细胞进行清洗。

在上述(A)以及(C)中，作为等渗溶液，可以举出包含10％蔗糖以及20mM的HEPES的pH7的缓冲液。

在上述(C)中，作为干燥处理，可以举出在冰箱内(4℃)的干燥、冷冻干燥等。在干燥处理中使用通过离心分离回收的藻类细胞的沉淀。当在冰箱内干燥的情况下，干燥处理时间根据细胞量的不同而不同，可以例示3天以上。

另外，将上述(A)～(C)的细胞破裂处理后的细胞悬浮液离心分离(1500×g，3分钟)，求出离心上清液中的蛋白质质量与细胞悬浮液中的总蛋白质质量的比率，由此能够判断是否产生了细胞破裂。具体而言，在通过下列算式求出的破裂率为20％以上的情况下，可以判断为产生了细胞破裂。

或者，也可以用光学显微镜(例如倍率600倍)观察细胞悬浮液中的细胞，在产生了细胞破裂的细胞的比率是细胞整体的10％程度以上且优选为20％程度以上的情况下，判断为产生了细胞破裂。

在细胞不具有坚固的细胞壁的情况下，在利用光学显微镜的观察(例如倍率600倍)中，通常观察不到细胞壁。另外，通过在pH6以下的条件下的温和的低渗处理是否产生细胞破裂不影响是否为不具有坚固的细胞壁的藻类的判断。

在上述(A)以及(C)的细胞破裂处理中，由于可以使用pH7以上的等渗溶液，所以在上述(A)以及(C)的任一种的细胞破裂处理中发生细胞破裂的细胞可以说是在pH7以上的条件下发生细胞破裂的细胞。为了在肠中快速地释放药物，耐酸性细胞优选为在pH7以上的条件下发生细胞破裂的细胞。

另外，通过将细胞浸渍到pH7以上的缓冲液等中观察10～30分钟左右，确认藻类细胞是否破裂，由此能够判断该细胞是否为在pH7以上的条件下破裂的细胞。

作为具有上述这种特征的耐酸性细胞，在属于温泉红藻纲的藻类中，例如可以举出属于Cyanidioschyzon merolae、Galdieria属的藻类的单倍体以及属于Cyanidium属的藻类的单倍体等。这些藻类可以从酸性温泉等酸性环境下分离，也可以从菌种保藏机构等取得。作为这种菌种保藏，可以举出国立研究开发法人国立环境研究所微生物系统保存设施(日本茨城县筑波市小野川16-2)、American Type Culture Collection(ATCC：美国菌种保藏中心；10801University Boulevard Manassas,VA 20110，美国)等。

作为属于Galdieria属的藻类的单倍体，可以举出Galdieria sulphuraria及Galdieria partita的单倍体以及它们的近缘种、变异株以及后代的单倍体等。例如，对从菌种保藏等取得的属于Galdieria属的藻类的二倍体到成为静止期为止进行培养，其后也通过继续任意期间培养，在培养液中出现单倍体的细胞。可以回收该单倍体的细胞，作为耐酸性细胞使用。

作为属于Cyanidium属的藻类的单倍体，可以举出Cyanidium sp.YFU3株(FERMBP-22334)(下称“YFU3株”)的单倍体、以及Cyanidium sp.HKN1株(FERM BP-22333)(下称“HKN1株”)的单倍体以及它们的近缘种、变异株以及后代等。

YFU3株(单倍体)是从日本大分县由布市的温泉的高温酸性水分离出的单细胞红藻。YFU3株在2017年5月30日作为保藏号FERM P-22334保藏于独立行政法人制品评价技术基盘机构专利生物保藏中心(特许微生物保藏中心)(日本千叶县木更津市上总镰足2-5-8)，作为保藏号FERM BP-22334在2018年4月20日移交为国际保藏。

HKN1株是从日本神奈川县足柄下郡箱根町的温泉的高温酸性水分离出的单细胞红藻。HKN1株(单倍体)在2017年5月30日作为保藏号FERM P-22333保藏于独立行政法人制品评价技术基盘机构专利生物保藏中心(特许微生物保藏中心)，作为保藏号FERM BP-22333在2018年4月20日移交为国际保藏。

属于温泉红藻纲的藻类，可以使用微藻培养用的培养基进行培养。作为培养基，没有特别的限定，可以例示包含氮源、磷源、微量元素(锌、硼、钴、铜、锰、钼、铁等)等的无机盐培养基。例如，作为氮源，可以举出铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐、尿素、氨类等，作为磷源，可以举出磷酸盐等。作为这种培养基，例如可以举出2×Allen培养基(AllenMB.Arch.Microbiol.1959 32:270-277.)、M-Allen培养基(Minoda A et al.Plant CellPhysiol.2004 45:667-71.)、MA2培养基(Ohnuma M et al.Plant Cell Physiol.2008Jan；49(1):117-20.)等。

属于温泉红藻纲的藻类也可以通过使用了酸性温泉排水的培养基进行培养。“酸性温泉排水”的意思是指从温泉设施排出的酸性的排水。作为酸性温泉排水，没有特别的限定，优选为pH1.0～4.0，更优选为pH1.0～3.0。“使用了酸性温泉排水的培养基”的意思是指向酸性温泉排水中添加氮源、磷源、微量元素等而制备出的培养基。作为使用了酸性温泉排水的培养基，优选为向酸性温泉排水添加氮源得到的培养基，更优选为添加了氮源以及磷源得到的培养基(例如参照Hirooka S and Miyagishima S.Y.(2016)Cultivation ofAcidophilic Algae Galdieria sulphuraria and Pseudochlorella sp.YKT1 in MediaDerived from Acidic Hot Springs.Front Microbiol.Dec 20；7:2022.)。作为氮源，可以举出铵盐(硫酸铵等)、尿素、硝酸盐(硝酸钠等)等，优选为铵盐、尿素，更优选为铵盐。作为氮源的添加量，例如，作为氮添加量可以举出1～50mM。对于氮源的添加量，以氮添加量计优选为5～40mM，更优选为10～30mM。作为磷源，可以举出磷酸盐(磷酸二氢钾等)。作为磷源的添加量，以磷添加量计可以举出0.1～10mM，对于磷源的添加量，以磷添加量计优选为0.5～5mM，更优选为1～3mM。作为属于温泉红藻纲的藻类，由于也可以通过使用了酸性温泉排水的培养基进行培养，所以能够有效利用酸性温泉排水，并且能够以低成本进行培养。

在属于温泉红藻纲的藻类是属于Galdieria属的藻类的情况下，作为上述的氮源，优选为铵盐、尿素，更优选为铵盐。在属于温泉红藻纲的藻类为属于Cyanidium属的藻类的情况下，作为上述的氮源，优选为铵盐、硝酸盐，更优选为铵盐。

如上所述地，属于温泉红藻纲的藻类，能够在比较宽松的培养条件下高密度地增殖。作为pH条件，可以例示pH1.0～6.0，优选为pH1.0～5.0。当在室外培养的情况下，为了防止其它生物的增殖，优选在酸度高的条件下进行培养，作为这种条件可以举出pH1.0～3.0。

作为温度条件，可以例示15～50℃，优选为30～50℃。当在室外进行培养的情况下，为了防止其它生物的增殖，优选在高温下进行培养，作为这种条件可以举出35～50℃。

作为光强度，可以例示5～2000μmol/m²s，优选为5～1500μmol/m²s。当在室外培养的情况下，只要在太阳光下培养即可。当在室内培养的情况下，可以在连续光下培养，也可以设置明暗周期(10L:14D等)。

＜药物＞

对于耐酸性细胞内包的药物没有特别的限定，可以是任意药物。作为药物，例如可以举出低分子化合物、肽、蛋白质、核酸、脂质、糖类、维生素类、激素类、合成高分子化合物等，但不限于这些。其中，优选药物是从由低分子化合物、肽、蛋白质以及核酸构成的组中选择的至少一种的药物。

作为低分子化合物，可以没有特别限定地使用作为医药品的有效成分被公众所知的低分子化合物。低分子化合物可以是用于诊断药物的造影剂、荧光色素等。作为低分子化合物，例如可以举出免疫增强剂、抗癌剂、信号传导抑制剂、代谢拮抗剂、镇痛剂、抗炎剂、抗生物质、抗过敏剂、中枢神经系统疾病治疗药、循环器官疾病治疗药、呼吸器官系统疾病治疗药、消化器官系统疾病治疗药、泌尿生殖器官疾病治疗药等、造影剂、荧光色素等，但不限于这些。低分子化合物不限于医药品的有效成分，也可以是食品中的成分(例如氨基酸、维生素等营养成分等)以及食品添加物(香料等)。

作为核酸，例如可以举出作为核酸医药使用的核酸分子等(siRNA、miRNA、反义RNA、适配体、引诱物(decoy)、CpG低聚核酸等)。

作为合成高分子化合物，可以举出聚烯烃、聚酯、聚酰胺等在工业上制造的高分子化合物且粒状或球状的高分子化合物。其中，也有能够期待免疫增强作用的高分子化合物。

药物可以是包含低分子化合物的微胶囊，也可以是缓释性微胶囊或者依赖于温度、pH、压力等环境而释放药物的微胶囊。

作为肽或蛋白质(下面也统称为“药物肽”)，可以没有特别限定地使用作为医药品的有效成分已为公知的肽以及蛋白质。作为药物肽，例如可以举出抗原、细胞因子、生长因子、激素、酶、抗体、抗体片段、配体、血液成分蛋白质等，但不限于这些。

其中，作为药物肽，优选为具有免疫原性的药物肽。药物肽“具有免疫原性”的意思是指在给予了该药物肽的生物体内能够诱导针对该药物肽的免疫。由药物肽诱导的免疫可以是细胞性免疫，也可以是体液免疫，还可以是它们双方。

药物肽更优选为有助于肠道免疫的药物肽。“肠道免疫”的意思是指用于阻止异物从肠道向体内侵入的生物体防御系统。肠道免疫系统由派尔斑(派伊尔氏淋巴集结)等淋巴组织、粘膜固有层的免疫活性细胞、肠道上皮细胞以及存在于其间的淋巴细胞等构成。有助于肠道免疫的药物肽可以是对这些肠道免疫系统中的任一种以上起作用并且强化肠道免疫系统的药物肽。

作为有助于肠道免疫的药物肽，例如可以举出病原性微生物或病原性病毒(下面也统称为“病原菌”)的免疫原性肽或免疫原性蛋白质。可以根据本实施方式的药物递送组合物的适用对象感染的感染病，适当选择免疫原性的药物肽。免疫原性肽或免疫原性蛋白质也称为抗原性肽或抗原性蛋白质。

例如，在将本实施方式的药物递送组合物应用于人的情况下，作为药物肽可以使用人病原菌的免疫原性肽或免疫原性蛋白质。作为人的病原菌，例如可以举出狂犬病病毒、轮状病毒、流感病毒、艾滋病毒、脊髓灰质炎病毒、A型肝炎病毒、B型肝炎病毒、人乳头瘤病毒、霍乱弧菌、沙门菌、结核菌、肺炎链球菌、炭疽菌、伤寒杆菌等，但不限于这些。

例如，在将本实施方式的药物递送组合物应用于家畜的情况下，作为药物肽可以使用家畜病原菌的免疫原性肽或免疫原性蛋白质。作为家畜病原菌，例如可以举出狂犬病病毒、牛轮状病毒、牛冠状病毒、赤羽病病毒、牛腺病毒、牛副流感病毒、牛沙门菌、结核菌、猪圆环病毒、猪流感病毒、猪细小病毒、猪霍乱病毒、猪链球菌等，但不限于这些。

例如，可以使用构成病原性病毒的外膜或衣壳的蛋白质的全长蛋白质或它们的部分肽或者病原性细菌的细胞膜蛋白质的全长蛋白质或它们的部分肽来设计免疫原性肽或免疫原性蛋白质。例如，在病原菌为狂犬病病毒的情况下，作为免疫原性蛋白质，可以例示糖蛋白(碱基序列为序列号1，氨基酸序列为序列号2)的全长或其部分肽。

(药物向袋状膜结构的局部存在化)

在耐酸性细胞的细胞中，优选药物局部存在于耐酸性细胞所具有的袋状膜结构。在本说明书中，“袋状膜结构”的意思是指由生物体膜或生物膜模拟结构划分为袋状的结构，作为具体例子，可以举出细胞膜、细胞器以及外源性脂质体等。作为细胞器，例如可以举出线粒体、叶绿体、内质网、液泡、细胞核、过氧化物酶体以及高尔基体等，但不限于这些。“外源性脂质体”的意思是指从外部导入细胞的脂质体。

药物通过局部存在于耐酸性细胞的袋状膜结构，能够抑制细胞质中的分解酶导致的药物分解。因此，一直到耐酸性细胞被递送至生物体内的规定部位(例如肠)且耐酸性细胞发生细胞破裂为止，能够将药物保护起来以避免由细胞内酶导致的分解。

对于使药物局部存在于袋状膜结构的方法没有特别的限定，例如可以举出利用对于向任意袋状结构移动进行指示的信号肽(下称“移动信号”)或者向该袋状结构移动的蛋白质(下称“移动蛋白”)的方法。例如，使将任意袋状结构作为目标的移动信号或移动蛋白与药物结合，导入耐酸性细胞，由此能够使药物局部存在于该袋状结构。例如，在使药物局部存在于线粒体、液泡、过氧化物酶体、内质网、细胞膜、高尔基体以及细胞核中的任意部位的情况下，可以使药物与针对线粒体、液泡、过氧化物酶体、内质网、细胞膜、高尔基体或细胞核的移动信号(信号肽)或移动蛋白结合。对于这些移动信号以及移动蛋白，可以根据耐酸性细胞的种类，选择各种各样的众所周知的移动信号以及移动蛋白。或者，也可以通过利用密度梯度离心等的细胞分级分离法将想要局部存在药物的袋状膜结构从耐酸性细胞分离，分析该袋状膜结构中的蛋白质，由此取得针对该袋状膜结构的移动信号或移动蛋白。

例如，在作为耐酸性细胞使用Cyanidioschyzon merolae的情况下，作为移动信号或移动蛋白，例如可以使用如下的移动信号或移动蛋白。

作为针对叶绿体的移动蛋白，可以使用由叶绿体前蛋白移位酶SecA亚基(chloroplast preprotein translocase SecA subunit)(CMQ393C；碱基序列为序列号3，氨基酸序列为序列号4)的N末端侧130残基(碱基序列为序列号5，氨基酸序列为序列号6)构成的蛋白质等(Sumiya et al 2016,Proc Natl Acad Sci U S A.113(47):E7629-E7638；PMID:27837024)。

作为针对线粒体的基质的移动信号，可以使用由EF-TU(CMS502C)(碱基序列为序列号7，氨基酸序列为序列号8)的N末端侧78残基(碱基序列为序列号9，氨基酸序列为序列号10)构成的肽等(Imoto et al 2013,BMJ.300(6735):1316-8；PMID:2369666)。

作为针对液泡的移动蛋白，可以使用异戊二烯化Rab受体PRA1(prenylated RabacceptorPRA1)(CMJ260C)(碱基序列为序列号7，氨基酸序列为序列号8)、ABC转运体(ABCtransporter)(CMS401C)(碱基序列为序列号13，氨基酸序列为序列号14)或O-甲基转移酶(o-methyltransferase)(CMT369C)(碱基序列为序列号15，氨基酸序列为序列号16)等(Yagisawa et al 2009,Plant J.60(5):882-93；PMID:19709388)。

作为针对过氧化物酶体的移动蛋白，可以使用过氧化氢酶(Catalase)(CMI050C)(碱基序列为序列号17，氨基酸序列为序列号18)(Moriyama et al 2014,Planta.240(3):585-98；PMID:25009310)。

作为针对内质网的移动蛋白，可以使用ACC1(CMM188C)(碱基序列为序列号19，氨基酸序列为序列号20)、PAP(CMT239C)(碱基序列为序列号21，氨基酸序列为序列号22)或ALA1(CMR396C)(碱基序列为序列号23，氨基酸序列为序列号24)等(Mori et al 2016,Front Plant Sci.7:958；PMID:27446184)。

作为针对细胞膜的移动蛋白，可以使用ALA1(CMR396C)等(Mori et al 2016,Front Plant Sci.7:958；PMID:27446184)。由于ALA1(CMR396C)也是针对内质网的移动蛋白，所以通过使用ALA1(CMR396C)，能够使药物局部存在于细胞膜以及内质网双方。

作为针对高尔基体的移动蛋白，可以使用Got1(CMI302C)(碱基序列为序列号25，氨基酸序列：序列号286)等(Yagisawa et al 2013,Protoplasma.250(4)：943-8；PMID：23197134)。

作为针对细胞核的移动蛋白，可以使用拓扑异构酶I型IB(Topoisomerase I typeIB)(CMM263C)(碱基序列：序列号27，氨基酸序列：序列号28)等(Moriyama et al 2014,Genome Biol Evol.6(1)：228-37；PMID：24407855)。

在药物为药物肽的情况下，所述药物肽可以作为与移动信号或移动蛋白的融合蛋白而内包于耐酸性细胞中。通过使药物肽成为与移动信号或移动蛋白的融合蛋白，能够使药物局部存在于该移动信号或移动蛋白作为目标的袋状膜结构。

例如，通过将编码药物肽与移动信号或移动蛋白的融合蛋白的基因(下面也称为“融合蛋白基因”)导入耐酸性细胞并且在该耐酸性细胞内表达融合蛋白，该融合蛋白移动至所述移动信号或移动蛋白作为目标的袋状膜结构。作为其结果，所述融合蛋白中包含的药物肽局部存在于所述袋状膜结构。因此，在优选的方式中，耐酸性细胞是以可表达的状态导入了包含移动信号或移动蛋白与药物肽的融合蛋白的融合蛋白基因的细胞，并且是具有所述融合蛋白基因的细胞。另外，在优选的方式中，耐酸性细胞是表达了所述融合蛋白基因的细胞。

所述融合蛋白基因除了包含药物肽的编码序列以及移动信号或移动蛋白的编码序列以外，还可以包含编码提高肠道细胞的识别的肽的序列等。作为提高肠道细胞的识别的肽，例如可以举出Co1肽(序列号43)等。

药物肽与移动信号或移动蛋白的融合蛋白基因优选可操作地连接于耐酸性细胞中能够发挥功能的启动子。启动子只要是在耐酸性细胞中能够发挥功能的启动子，则没有特别的限定，从维持细胞内的药物量的观点出发，优选表达量多的持家基因的启动子。例如，在耐酸性细胞是Cyanidioschyzon merolae的情况下，作为启动子，例如可以适合使用APCC(CMO250C)的启动子(例，-600～-1；“-1”表示紧靠起始密码子的前面的核苷酸)、CPCC(CMP166C)的启动子、过氧化氢酶(CMI050C)的启动子等。Cyanidioschyzon merolae的APCC的启动子序列示于序列号29，Cyanidioschyzon merolae的CPCC(CMP166C)的启动子序列示于序列号30，Cyanidioschyzon merolae的过氧化氢酶(CMI050C)的启动子序列示于序列号31。这些Cyanidioschyzon merolae的启动子也可以在其它的属于温泉红藻纲的藻类中使用。

对于编码所述融合蛋白的基因而言，以可表达的状态导入耐酸性细胞，例如以表达载体的形态导入耐酸性细胞。表达载体除了包含所述融合蛋白以及启动子以外，还可以包含增强子、多聚A附加信号、终止子、3’UTR等控制序列、药剂抗性基因等标记基因。作为终止子以及3’UTR，例如可以例示β微管蛋白的3’UTR。

对于载体的种类没有特别的限定，可以根据耐酸性细胞的种类适当选择使用通常使用的表达载体。载体可以是直链状，也可以是环状，可以为质粒等非病毒载体，也可以为病毒载体(例如，慢病毒载体等逆转录病毒载体)，还可以是基于转座子的载体。

在耐酸性细胞为Cyanidioschyzon merolae的情况下，作为选择标记，可以使用URA5.3基因(CMK046C)。在Cyanidioschyzon merolae中存在作为尿嘧啶营养缺陷型的变异株的Cyanidioschyzon merolae M4株(Minoda et al.,Plant Cell Physiol.2004Jun；45(6)：667-71.)。Cyanidioschyzon merolae M4株在URA5.3基因具有变异，无法合成尿嘧啶。因此，Cyanidioschyzon merolae M4株在不含尿嘧啶的培养基中无法生长。因此，通过将Cyanidioschyzon merolae M4株作为亲株并将野生株的URA5.3基因用于选择标记，由此能够选择导入了融合基因的转化体。更具体而言，将可操作地连接于启动子的所述融合蛋白基因与Cyanidioschyzon merolae野生株(例如，10D株)的URA5.3基因集连接，导入Cyanidioschyzon merolae M4株。其后，通过在不含尿嘧啶的培养基中进行培养，由此能够得到导入了所述融合蛋白基因的细胞。

对于将任意的融合蛋白基因导入耐酸性细胞的方法没有特别的限定，可以使用众所周知的方法。作为基因导入法，例如可以举出聚乙二醇法、脂质体转染法、微注射法、DEAE葡聚糖法、基因枪法、电穿孔法、磷酸钙法等。

融合蛋白基因在耐酸性细胞中可以作为质粒等存在，也可以插入核基因组、叶绿体基因组以及线粒体基因组中的任一方。在将融合蛋白基因插入基因组的情况下，可以插入基因组的特定位置，也可以随机地插入基因组。

作为将融合蛋白基因插入基因组的特定的位置的方法，可以使用同源重组。例如，对于Cyanidioschyzon merolae，由于已经完成了全基因组序列的解读(Matsuzaki M etal.,Nature.2004Apr 8；428(6983)：653-7.)，所以能够将融合蛋白基因插入基因组上的所希望的位置。对于Cyanidioschyzon merolae的融合蛋白基因的插入位置没有特别的限定，例如可以例示CMD184C与CMD185C之间的区域。

在融合蛋白基因中，配置药物肽以及移动信号或移动蛋白的顺序可以根据移动信号或移动蛋白的种类适当选择。通常，移动信号或移动蛋白的编码序列配置在比药物肽的编码序列更靠5’侧。

在将编码药物肽的基因(下称“药物肽基因”)插入叶绿体基因组或线粒体基因组的情况下，药物肽无需一定是与移动信号或移动蛋白的融合蛋白。例如，将药物肽基因与在叶绿体中能够发挥功能的启动子可操作地连接，以可表达的状态插入叶绿体基因组，在叶绿体内表达药物肽基因，由此能够使药物肽局部存在于叶绿体。同样地，将药物肽基因与在线粒体中能够发挥功能的启动子可操作地连接，以可表达的状态插入线粒体基因组，使药物肽基因在线粒体内表达，由此能够使药物肽局部存在于线粒体。

在本实施方式的药物递送组合物中，药物优选为局部存在于细胞器，更优选为局部存在于叶绿体。另外，药物优选为药物肽，优选以与移动信号或移动蛋白的融合蛋白的形态局部存在于成为该移动信号或移动蛋白的目标的细胞器。所述移动信号或移动蛋白更优选为叶绿体移动信号或叶绿体移动蛋白。

＜任意成分＞

本实施方式的药物递送组合物除了包含所述耐酸性细胞以外，还可以包含其它成分。作为其它成分，没有特别的限定，例如可以举出药学上容许的载体等。“药学上容许的载体”的意思是指不妨碍耐酸性细胞内包药物的功能且对该给药对象不显示实质上的毒性的载体。“不显示实质上的毒性”的意思是指其成分在通常使用的给药量下对给药对象不显示毒性。作为药学上容许的载体，没有特别的限定，可以举出赋形剂、结合剂、崩解剂、润滑剂、乳化剂、稳定剂、稀释剂、油性基剂、增粘剂、抗氧化剂、还原剂、氧化剂、鳌和剂、溶剂等。药学上容许的载体可以单独使用一种，也可以并用两种以上。药学上容许的载体优选为对耐酸性细胞不造成损伤的载体。

本实施方式的药物递送组合物可以适当地与其它成分混合，按照通用方法形成为颗粒剂、片剂、胶状剂、液体制剂、胶囊剂等的形态。在这些药剂形态中，优选为对耐酸性细胞不造成损伤的药剂形态，例如优选为胶状剂、液体制剂、胶囊剂等。例如，如后述的实施例所示，可以作为包含耐酸性细胞的海藻酸的固化体的形态。另外，除了海藻酸以外，也可以使用明胶、琼脂、卡拉胶、槐豆胶、瓜尔胶、黄原胶、果胶、结冷胶、罗望子胶、阿拉伯树胶等增粘剂或凝胶化剂，将包含耐酸性细胞的悬浮液固化，用作本实施方式的药物递送组合物。对用于所述耐酸性细胞的悬浮的介质没有特别的限定，优选为不使耐酸性细胞发生细胞破裂的介质，优选为pH1～6左右的等渗溶液。作为所述等渗溶液，例如可以举出用于耐酸性细胞的培养的培养基以及调整成pH1～6左右的葡萄糖等渗溶液、蔗糖等渗溶液以及各种缓冲液(磷酸缓冲生理盐水、HEPES缓冲液、柠檬酸缓冲液、Tris缓冲液(三羟甲基氨基甲烷缓冲液)等)等。在一实施方式中，药物递送组合物是利用增粘剂或凝胶化剂的耐酸性细胞的固化体。通过使药物递送组合物成为利用增粘剂和/或凝胶化剂的固化体，能够防止耐酸性细胞的干燥。“利用增粘剂或凝胶化剂的耐酸性细胞的固化体”是指用增粘剂或凝胶化剂将耐酸性细胞的悬浮液凝胶化、固化得到的固化体。换言之，“利用增粘剂或凝胶化剂的耐酸性细胞的固化体”是含有耐酸性细胞以及由增粘剂及凝胶化剂构成的组中选择的至少一种的凝胶组合物。

对于本实施方式的药物递送组合物的给药路径没有特别的限定，可以口服给药也可以是非口服给药，优选为口服给药。在本实施方式的药物递送组合物中，由于药物内包于耐酸性细胞中，所以能够抑制胃酸导致的药物分解。因此，本实施方式的药物递送组合物适合口服给药。

本实施方式的药物递送组合物的药物递送目标优选为肠(肠道)，更优选为小肠。若口服给予本实施方式的药物递送组合物，则药物被保护在耐酸性细胞的细胞内并通过胃。接着，当到达肠时，由于肠道内的中性～弱碱性的pH条件(pH7以上)，耐酸性细胞发生细胞破裂，药物释放到肠道内。释放到肠道内的药物在肠道内起作用，有助于肠道免疫的强化等。此外，通过肠道免疫的强化，也能够期待激活其它的粘膜免疫以及全身免疫。

如以上所述的，根据本实施方式的药物递送组合物，由于药物内包于耐酸性细胞中，所以能够抑制胃中的药物的分解，能够将药物递送至肠。另外，在耐酸性细胞中，由于药物局部存在于袋状膜结构，所以将药物保护起来以避免由细胞质中的分解酶导致的分解。

此外，通过使用导入了药物肽基因或包含药物肽的编码序列的融合蛋白基因的耐酸性细胞，能够简易地使内包药物的耐酸性细胞增殖。尤其是，属于温泉红藻纲的藻类由于在酸度高且其它生物无法生存的条件下也能够增殖，所以也能够在室外大量培养。因此，能够期待降低制造成本。

[饲料]

在一实施方式中，本发明提供一种包含上述实施方式的药物递送组合物的饲料。

对于给予本实施方式的饲料的动物种类没有特别的限定。例如可以举出家畜类(牛、猪、鸡、马、绵羊、山羊等)、宠物(狗、猫、仓鼠、兔、鹦鹉、热带鱼、爬行动物类、两栖类、昆虫等)、水产动物(鱼类、贝类等)、试验动物(小鼠、大鼠、豚鼠等)等，但不限于这些。

本实施方式的饲料除了上述实施方式的药物递送组合物以外，还可以包含其它成分。作为其它成分，例如可以举出通常使用的饲料(包括家畜饲料、水产饲料、宠物食品)等。例如，上述实施方式的药物递送组合物可以作为饲料添加剂来添加到已有的饲料中。对于添加上述实施方式的药物递送组合物的饲料没有特别的限定，可以根据对象动物适当选择。通过将所述实施方式的药物递送组合物添加到通常饲料中来给予动物，能够使动物通过通常的摄食行动来摄取药物。

用于本实施方式的饲料的所述药物递送组合物可以是任何形态，但为了防止药物从所述耐酸性细胞漏出，优选为不损伤所述耐酸性细胞的细胞的形态。例如可以举出上述例示过的胶状剂、胶囊剂以及通过凝胶化剂和/或增粘剂固化了的形态等。在将所述药物递送组合物作为饲料添加物添加到饲料中的情况下，例如只要将利用增粘剂和/或凝胶化剂的所述药物递送组合物的固化体调整成适当的大小并添加到饲料中进行混合即可。或者，也可以在将所述药物递送组合物添加到饲料中并进行混合后，使用凝胶化剂和/或增粘剂将混合物固化。可以根据动物的大小，将所述固化体酌情制备成适当的大小。通过形成为利用增粘剂和/或凝胶化剂的固化体，能够防止耐酸性细胞的干燥。

对于本实施方式的饲料中的上述实施方式的药物递送组合物的含量没有特别的限定，可以根据饲料的种类适当地设定。例如，作为饲料中的药物递送组合物的含量，可以例示0.01～80质量％，优选为0.1～70质量％，进一步优选为0.1～60质量％，特别优选为0.1～50质量％。作为饲料中的耐酸性细胞的含量，例如可以例示0.1～100mg(湿重)/g、0.5～80mg(湿重)/g、1～60mg(湿重)/g等。

根据本实施方式的饲料，由于包含上述实施方式的药物递送组合物，所以能够将任意药物作为饲料使动物摄取。如上所述地，所述药物递送组合物能够将任意药物保护起来以避免胃中分解并且递送至肠。因此，通过将在肠中起作用的药物用于所述药物递送组合物，能够有效地使该药物作用于动物的肠。另外，在药物是具有免疫原性的药物肽的情况下，对于摄取了药物递送组合物的动物，能够有效地激活肠道免疫。此外，通过激活肠道免疫，也能够期待激活其它的粘膜免疫以及全身免疫。

在另外的方式中，本发明提供一种动物的饲养方法，其包括使动物摄食包含上述实施方式的药物递送组合物的饲料。

此外，在另外的方式中，本发明提供一种对动物赋予肠道免疫的方法，其包括使动物摄食包含上述实施方式的药物递送组合物的饲料。

[医药品]

在一实施方式中，本发明提供一种包含上述实施方式的药物递送组合物的医药品。

本实施方式的医药品可以是人用医药品，也可以是动物用医药品。在动物用医药品的情况下，对适用的动物种类没有特别的限定。例如可以举出家畜类(牛、猪、鸡、马、绵羊、山羊等)、宠物(狗、猫、仓鼠、兔、鹦鹉、热带鱼、爬行动物类、两栖类、昆虫等)、水产动物(鱼类、贝类等)、试验动物(小鼠、大鼠、豚鼠等)等，但不限于这些。

本实施方式的医药品除了上述实施方式的药物递送组合物以外，还可以包含其它成分。作为其它成分，没有特别的限定，可以举出药学上容许的载体。“药学上容许的载体”的意思是指不妨碍药物的功能且对其给药对象不显示实质上的毒性载体。另外，“不显示实质上的毒性”的意思是指其成分在通常使用的给药量内对给药对象不显示毒性。作为药学上容许的载体，没有特别的限定，可以举出赋形剂、结合剂、崩解剂、润滑剂、乳化剂、稳定剂、稀释剂、油性基剂、增粘剂、抗氧化剂、还原剂、氧化剂、鳌和剂、溶剂等。药学上容许的载体可以单独使用一种，也可以并用两种以上。其它成分可以是上述以外的成分，例如可以没有特别限制地使用通常用于医药品的医药品添加物。另外，其它成分也可以是除了上述药物递送组合物中包含的药物以外的活性成分。对于上述活性物质没有特别的限定，例如可以举出整肠剂、抗炎剂、抗生物质、抗菌性物质、生药、结构促进剂、退热剂、镇痛剂等。

对于本实施方式的医药品的剂型没有特别的限定，但是为了防止药物从所述耐酸性细胞漏出，优选为所述耐酸性细胞不发生细胞损伤的形态。例如可以举出片剂、颗粒剂、胶状剂、胶囊剂、液体制剂及糖浆剂等。例如，本实施方式的医药品也可以包含利用增粘剂和/或凝胶化剂的耐酸性细胞的固化体。

本实施方式的医药品中的上述实施方式的药物递送组合物的含量没有特别的限定，可以根据所述药物递送组合物包含的药剂的种类，适当地设定含量。例如，作为医药品中的药物递送组合物的含量，可以例示0.01～80质量％，优选为0.1～70质量％，进一步优选为0.1～60质量％，特别优选为0.1～50质量％。作为医药品中的耐酸性细胞的含量，例如可以例示0.1～100mg(湿重)/g、0.5～80mg(湿重)/g、1～60mg(湿重)/g等。

本实施方式的医药品的给药路径没有特别的限定，可以是口服给药，也可以是非口服给药，优选为口服给药。对于本实施方式的医药品，由于药物内包于耐酸性细胞中，所以能够抑制胃酸导致的药物分解。

本实施方式的医药品的药物递送目标优选为肠(肠道)，更优选为小肠。

基于本实施方式的医药品，由于包含上述实施方式的药物递送组合物，所以能够将任意药物保护起来以避免胃中分解，从而能够将药物递送至肠内。因此，通过将在肠中起作用的药物用于所述药物递送组合物，能够有效地使该药物作用于肠。另外，在药物是具有免疫原性的药物肽的情况下，对于摄取了药物递送组合物的动物，能够有效地激活肠道免疫。此外，通过激活肠道免疫，也能够期待激活其它的粘膜免疫以及全身免疫。

因此，本实施方式的医药品能够用于人的疾病的预防、治疗、增进健康。尤其适合用于如下药物：希望不在胃中而在肠中吸收的药物，因胃酸而分解或变得不溶从而妨碍肠内吸收的药物，用于肠内一次吸收多种药物的医药品等。

在另外的方式中，本发明提供一种药物的给药方法，其包括向对象口服给予包含上述实施方式的药物递送组合物的医药品。

此外，在另外的方式中，本发明提供一种向对象赋予肠道免疫的方法，其包括向对象口服给予包含上述实施方式的药物递送组合物的医药品。

[食品]

在一实施方式中，本发明提供一种包含上述实施方式的药物递送组合物的食品。

本实施方式的食品可以是通常食品也可以是营养辅助食品、功能性食品或保健品等。所述药物递送组合物可以作为食品添加剂添加到食品中。

在本实施方式的食品中，食品的种类没有特别的限定，但是为了防止药物从所述耐酸性细胞漏出，优选为所述耐酸性细胞不发生细胞损伤的形态，优选不是干燥食品。作为食品，例如可以举出：青汁(green juice)、清凉饮料、碳酸饮料、营养饮料、水果饮料、蔬菜饮料、乳酸饮料、乳饮料、运动饮料、茶、咖啡等饮料；咖喱酱、炖菜汤、速溶汤等各种汤类；冰激凌、冰冻果子露、刨冰等冰制食品类；饴糖、果冻、果酱、奶油等糕点类；鱼糕、鱼肉山芋饼、火腿、香肠等水产·畜产加工食品；加工乳、发酵乳、黄油、芝士、酸奶等乳制品；沙司、色拉调料、味噌、酱油、调味汁等调味料；各种软罐头食品等其它加工食品等；但不限于这些。

在本实施方式的食品中，所述药物递送组合物的含量没有特别的限定，可以根据食品种类进行适当设定。例如，考虑食品的味道等，作为食品中的药物递送组合物的含量，可以例示0.01～80质量％，优选为0.1～70质量％，进一步优选为0.1～60质量％，特别优选为0.1～50质量％。作为食品中的耐酸性细胞的含量，例如可以例示0.1～100mg(湿重)/g、0.5～80mg(湿重)/g、1～60mg(湿重)/g等。

另外，在食品为功能性食品、营养辅助食品或保健品等的情况下，可以是上述这种通常食品的形态，也可以是颗粒剂、片剂、胶状剂、饮剂等形态。例如，本实施方式的食品可以包含利用增粘剂和/或凝胶化剂的耐酸性细胞的固化体。

根据本实施方式的食品，由于包含上述实施方式的药物递送组合物，所以可以将任意药物作为食品摄取。如上所述地，所述药物递送组合物能够将任意药物保护起来以避免胃中分解从而能够递送至肠内。本实施方式的食品在想要不受胃酸的影响地在肠内吸收一个以上的特定营养成分的情况下是有用的。

[药物载体]

在一实施方式中，本发明提供一种包含耐酸性细胞的药物载体。

本实施方式的药物载体包含的耐酸性细胞与上述“[药物递送组合物]”的“＜耐酸性细胞＞”中已说明过的耐酸性细胞相同，优选的例子也可以举出同样的例子。所述耐酸性细胞对酸具有抗性，即使在胃这种酸性环境下细胞也不破损。因此，通过将药物内包在细胞中，可以作为耐酸性的药物载体使用。将药物内包在细胞中的方法可以举出与上述“[药物递送组合物]”中记载的方法相同的方法。本实施方式的药物载体优选由耐酸性细胞构成。

本实施方式的药物载体可以适合用于将药物递送至肠内，可以适合用于口服给药的医药品或者口服摄取的饲料或食品。

[药物胶囊]

在一实施方式中，本发明提供一种在所述实施方式的药物载体中内包有药物的药物胶囊。

所述耐酸性细胞在细胞中内包有药物，如在后述的实施例中所示，在胃这种酸性环境下，几乎不会发生药物的释放。因此，包含所述耐酸性细胞的药物载体通过在所述耐酸性细胞的细胞中内包药物，能够用作耐酸性的药物胶囊。本实施方式的药物胶囊将把药物递送至肠内作为目的，可以用作口服药物胶囊。

[耐酸性细胞]

在一实施方式中，本发明提供一种在细胞中内包药物的耐酸性细胞。在优选的实施方式中，所述药物局部存在于耐酸性细胞所具有的袋状膜结构。

本实施方式的耐酸性细胞与上述实施方式的药物递送组合物包含的耐酸性细胞相同，优选的例子也可以举出相同的例子。或者，所述药物局部存在于耐酸性细胞所具有的袋状膜结构之外。在药物局部存在于袋状膜结构之外的情况下，药物存在于耐酸性细胞的细胞质。

药物没有特别的限定，例如优选从由低分子化合物、肽、蛋白质以及核酸构成的组中选择的至少一种药物。例如，在会受到来自细胞质中分解酶等影响的药物的情况下，优选药物局部存在于袋状膜结构中。通过局部存在于袋状膜结构，能够将药物保护起来以避免来自细胞质中分解酶等的影响。因此，能够有效地将药物递送至生物体内的规定部位。例如，在药物为肽、蛋白质或核酸的情况下，容易受到细胞质中的蛋白酶或核酸酶的影响；因此，优选为局部存在于袋状膜结构中。另一方面，在作为难以受到细胞质中的分解酶等的影响的药物(例如低分子化合物)的情况下，药物也可以局部存在于袋状膜结构外。

另外，在一实施方式中，本发明提供一种包含外源性物质的耐酸性细胞。

本实施方式的耐酸性细胞与上述“[药物递送组合物]”的“＜耐酸性细胞＞”中已说明过的耐酸性细胞相同，优选的例子也是相同的。

外源性物质没有特别的限定，可以举出药物、毒物、染料、香料、以及对生物体的作用不明的化合物等，但不限于这些。所述外源性物质导入耐酸性细胞的导入方法没有特别的限定，例如可以举出：与细胞透过性物质(细胞透过性肽等)结合的方法，以及内包在细胞透过型微团内的方法等。另外，在外源性物质为药物的情况下，可以举出与上述“[药物递送组合物]”所述的方法相同的方法。

本实施方式的耐酸性细胞例如可以用于递送外源性物质。更具体而言，本实施方式的耐酸性细胞可以应用于口服用组合物，该口服用组合物用于将外源性物质递送至肠内。

此外，在另外的方式中，本发明提供一种含有所述耐酸性细胞的饲料。

此外，在另外的方式中，本发明提供一种含有所述耐酸性细胞的医药品。

此外，在另外的方式中，本发明提供一种含有所述耐酸性细胞的食品。

此外，在另外的方式中，本发明提供一种所述外源性物质的给药方法，其包括向对象口服给予所述耐酸性细胞。

此外，在另外的方式中，本发明提供一种动物的饲养方法，其包括使动物摄食所述耐酸性细胞。

此外，在另外的方式中，本发明提供一种肠道免疫的赋予方法，其包括口服给予所述耐酸性细胞。

[耐酸性细胞的制造方法]

在一实施方式中，本发明提供一种内包有药物的耐酸性细胞的制造方法，其包括将编码融合蛋白的基因导入耐酸性细胞的步骤，所述融合蛋白包含：作为药物的肽或蛋白质，以及相对于细胞膜或细胞器局部存在的肽或蛋白质。

本实施方式的制造方法可以通过在上述“[药物递送组合物]＜耐酸性细胞＞(药物向袋状膜结构的局部存在化)”中记载的方式来进行。

实施例

下面，通过实施例对本发明进行说明，但是本发明不限于下面的实施例。

[实施例1]

(GAPDH-GP-sfGFP表达株的制备)

为了将GAPDH-GP-sfGFP的DNA片段插入Cyanidioschyzon merolae 10D的染色体的CMD184C(基因编号)的下游，首先如以下所示地制备了质粒pD184-HSp-GAPDH-GP-sfGFP。

该质粒设计成在pQE80质粒(大肠杆菌内的维持、复制用；QIAGEN公司制)的多克隆位点依次排列下面的序列。序列从5’侧开始依次排列成CMD184C基因的后半部(基因可读框(ORF)的773bp-2773bp以及包括终止密码子的下游25bp)、热激(HS)启动子(接近HSP20/CMJ101C基因起始密码子的上游的序列200bp；Sumiya et al2014,Plos One.22；9(10)：e111261；PMID：25337786)、GAPDH(CMJ042C基因的可读框1bp-1209bp；GAPDH记载于Moriyama et al2014,Planta.240(3)：585-98；PMID：25009310)、狂犬病病毒糖蛋白基因GP(ORF全长1-1572bp，UniProtKB accession No.P19462)、β微管蛋白终止子(β-tubulin/CMN263C基因的包括终止密码子的下游200bp)、URA筛选标记以及CMD185基因的下游(从终止密码子下游28bp到1880bp的碱基序列)。为了加热培养基诱导GAPDH-GP-sfGFP的表达，HS启动子是必需的。URA筛选标记是GAPDH-GP-sfGFP株的筛选所必需的。为了通过同源重组将DNA片段插入CMD184C下游，CMD184C的后半部和下游的序列以及CMD185C基因的下游是必需的。

首先，为了制备质粒pD184-HSp-GAPDH-GP-sfGFP，准备了下面的(1)、(2)、(3)、(4)以及(5)的各DNA片段。

(1)将质粒pD184-APCCp-EGFP-URA_Cm-Cm(包含pQE80(序列号32)、CMD184C的后半部(序列号33)、APCC启动子(序列号34)、EGFP(序列号35)、β微管蛋白终止子(序列号36)、URA筛选标记(序列号37)以及CMD185C基因的下游的DNA序列(序列号38)；Fujiwara et al2013,PLoS One.8(9)：e73608；PMID：24039997)作为模板，使用引物组[#1d184(+25)R/#2bT3’(+1)F]，通过PCR法，将除了APCC启动子以及EGFP的部分的DNA序列扩增。(1)的DNA片段的碱基序列示于序列号31。

(2)将C.merolae 10D的基因组DNA作为模板，使用引物组[#3HS(-200)Fd184/#4HS(-1)R]，通过PCR法将HS启动子的DNA序列(序列号39)扩增。

(3)将C.merolae 10D的基因组DNA作为模板，使用引物组[#5J042(1)Fhs/#6J042(1209)R-link3]，通过PCR法将GAPDH基因可读框(序列号40)扩增。

(4)根据C.merolae的密码子使用频率对GP的DNA序列进行了化学合成(序列号41)，将其作为模板，使用引物组[#7GP(1)F-linker3/#8GP(1572)R-linker2]，通过PCR法进行了扩增。

(5)将pAPCC-promoter-sfGFP-pmE2F-URA(Miyagishima et al 2014,NatCommun.5：3807；PMID：24806410)作为模板，使用引物组[#9sfGFP(1)F-linker2/#10sfGFP(714)Rbt]，通过PCR法将sfGFP(序列号42)扩增。

将上述(1)、(2)、(3)、(4)以及(5)的各DNA片段混合，使用In-Fusion(注册商标)HDCloning Kit(产品编号为639648，TAKARA)，将它们融合，以置换pD184-APCCp-EGFP-URA_Cm-Gs的APCC启动子以及EGFP的部分的方式插入HS启动子、GAPDH、GP以及sfGFP。InFusion反应后，导入大肠杆菌感受态细胞，将质粒扩增，得到了pD184-HSp-GAPDH-GP-sfGFP。接着，将其作为模板，使用引物组[#11D184(1200)F/#12D184(+1400)R]，通过PCR法，将连接有CMD184基因的后半部(基因ORF的1200bp-2773bp以及包括终止密码子的下游25bp)、HS启动子、GAPDH、GP、sfGFP、β微管蛋白终止子、URA筛选标记以及CMD184C基因的下游(从终止密码子下游28bp到1440bp的碱基序列)的DNA片段扩增。

通过PEG法(Ohnuma et al 2008,Plant Cell Physiol.49(1)：117-20；PMID：18003671)将该DNA片段导入C.merolae的尿嘧啶营养缺陷型株M4(Minoda et al 2004,Plant Cell Physiol.45(6)：667-71.；PMID：15215501)，使用不含有尿嘧啶的MA2固体培养基进行筛选，得到了GAPDH-GP-sfGFP表达株。

(GAPDH-GP-sfGFP蛋白质的蛋白酶体引起的分解的评价)

对如上所述地制备出的C.merolae的GAPDH-GP-sfGFP表达株(下称“GAPDH-GP-sfGFP表达株”)在放入锥形瓶的MA2培养基60mL中以OD750＝0.2的细胞浓度进行继代培养，在光照射下(50μmolm^-2s^-1)、40℃下进行了2天的旋转培养(表达前)。接着，将该培养液每次20mL地转移到两个锥形瓶中。为了通过热刺激诱导GAPDH-GP-sfGFP基因表达，将所述两个锥形瓶转移到50℃的恒温箱内，在光照射下持续1小时进行了旋转培养。在就要转移到50℃下之前，为了阻碍蛋白酶体对蛋白质的分解，在所述两个锥形瓶的一方中以最终浓度成为100μM的方式添加了蛋白酶体抑制剂MG-132(MG-132(+))(Nishida et al 2005；Mol BiolCell.16(5)：2493-502；PMID：15772156)。在另一方的锥形瓶中作为对照仅添加了40μL的作为MG-132的溶剂的DMSO(MG-132(-))。通过免疫印迹法，确认GAPDH-GP-sfGFP蛋白质的表达，通过带型的比较，验证了蛋白酶体抑制的效果。在GAPDH-GP-sfGFP蛋白质的检测中使用了抗GFP抗体(clone JL-8，产品编号为632381，Takara)。

图1中示出了免疫印迹的结果。在MG-132(-)中，与MG-132(+)相比较，GAPDH-GP-sfGFP蛋白质的带变薄。根据该结果，显示出了GAPDH-GP-sfGFP蛋白质在表达后有一部分被蛋白酶体分解。

(GAPDH-GP-sfGFP蛋白质的细胞内局部存在的分析)

为了对GAPDH-GP-sfGFP蛋白质的细胞内局部存在进行分析，在光照射下、50℃、MG-132存在下对GAPDH-GP-sfGFP表达株进行了1小时的培养后，用荧光显微镜观察了GAPDH-GP-sfGFP蛋白质的荧光。

图2中示出了GAPDH-GP-sfGFP表达株的荧光显微镜图像。根据sfGFP的荧光信号，显示了GAPDH-GP-sfGFP蛋白质局部存在于细胞质。图2(A)的图像(PC)是表示细胞的轮廓的相位差显微镜图像，图2(B)的图像(Chl)是叶绿体的自发荧光图像，图2(C)的图像(sfGFP)是sfGFP的荧光图像。

[实施例2]

(Chl-TP-3HA-GP-Col表达株的制备)

为了将用于表达Chl-TP-3HA-GP-Col(参照图3)的DNA片段插入C.merolae 10D的染色体的CMD184C(基因编号)的下游，首先如以下所示地制备了质粒pD184-APCCp-Chl-TP-3HA-GP-Col。

该质粒设计成在pQE80质粒的多克隆位点从5’侧依次排列下面的序列。序列从5’侧开始依次排列成CMD184C基因的后半部(基因ORF的773bp-2773bp以及包括终止密码子的下游25bp)、APCC启动子(接近APCC/CMO250C基因起始密码子的上游的序列600bp)、叶绿体移动信号Chl-TP(SECA/CMQ393C基因ORF的1bp-390bp；Sumiya et al2016,Proc Natl AcadSci U S A.113(47):E7629-E7638；PMID：27837024)、编码3xHA标签的序列(用于利用HA抗体确认表达)、狂犬病病毒糖蛋白基因GP(1572bp，UniProtKB accession No.P19462)、编码Col肽的序列(Col肽：SFHQLPARSPLP(序列号43)、提高与肠道免疫有关的M细胞的抗原识别的肽；Kim et al 2010,J Immunol.185(10)：5787-95；PMID：20952686)、β微管蛋白基因终止子(β-tubulin/CMN263C基因的包括终止密码子的下游200bp)、URA_Cm-Gs筛选标记以及CMD185基因的下游(从终止密码子下游28bp到880bp的碱基序列)。为了通过同源重组将DNA片段插入CMD184C下游，CMD184C的后半部和下游的序列以及CMD185基因的下游是必需的。为了不断地表达Chl-TP-HA-GP-Col，APCC启动子是必需的(Watanabe et al 2011,J GenAppl Microbiol.57(1)：69-72；PMID：21478650)。为了筛选插入了Chl-TP-3HA-GP-Col的转化体，URA_Cm-Gs筛选标记是必需的(Imamura et al 2010,Plant Cell Physiol.51(5)：707-17；PMID：20375110)，此外能够提高使该基因多拷贝化的蛋白质表达量(Fujiwara et al2013,PloS One 8(9)：e73608；PMID：24039997)。

为了制备质粒pD184-APCCp-Chl-TP-HA-GP-Col，准备了下面的(1)、(2)、(3)以及(4)的DNA片段。

(1)将质粒pD184-APCCp-EGFP-URA_Cm-Gs(包括pQE80(序列号32)、CMD184C的后半部(序列号33)、APCC启动子(序列号34)、EGFP(序列号35)、β微管蛋白终止子(序列号36)、URA_Cm-Gs筛选标记(序列号44)以及CMD185基因的下游的DNA序列(序列号38)；Fujiwara etal 2013,PLoS One.8(9)：e73608；PMID：24039997)作为模板，使用引物[#13APCC(-1)R/#14bT3’(+1)]，通过PCR法，对除了EGFP的部分的DNA序列进行了扩增。

(2)将C.merolae 10D的基因组DNA作为模板，使用引物组[#15SecA(1)Fapcc/#16SecA(390)R-linker-ha]，通过PCR法，对Chl-TP的DNA序列(序列号45)进行了扩增。

(3)将包含3xHA(序列号46)的质粒DNA：pBSb-THA(Ohnuma et al2008,Plant CellPhysiol.49(1)：117-20；PMID：18003671)作为模板，使用引物组[#17HA(1)F/#18HA(90)R]，通过PCR法对3xHA(序列号46)进行了扩增。

(4)根据C.merolae的密码子使用频率对GP的ORF进行了化学合成(序列号40)，将其作为模板，使用引物组[#19GP(1)Fha/#20Col-GP(1680)Rbt]，通过PCR法进行了扩增。

将上述(1)、(2)、(3)以及(4)的各DNA片段混合，使用In-Fusion(注册商标)HDCloning Kit(产品编号为639648，TAKARA)将它们融合，以替换pD184-APCCp-EGFP-URA_Cm-Gs的EGFP部分的方式插入了Chl-TP、3x HA以及狂犬病病毒糖蛋白ORF。在InFusion反应后，导入到大肠杆菌感受态细胞内对质粒进行了扩增，得到了pD184-APCCp-Chl-TP-3HA-GP-bt-URA_Cm-Gs。接着，将其作为模板，使用引物[#11D184(1200)F/#12D 184(+1400)R]，通过PCR法，对连接有CMD184C基因的后半部(基因ORF的1200bp-2773bp以及包括终止密码子的下游25bp)、APCC启动子、Chl-TP、3xHA、GP、Col肽、β微管蛋白终止子、URACm-Gs筛选标记以及CMD185C基因的下游(从第28号到第1440bp号的碱基序列)的DNA片段进行了扩增。

通过PEG法(Ohnuma et al 2008,Plant Cell Physiol.49(1)：117-20；PMID：18003671)，将该DNA片段导入C.merolae的尿嘧啶营养缺陷型株M4(Minoda et al 2004,Plant Cell Physiol.45(6)：667-71；PMID：15215501)，用不含有尿嘧啶的MA2固体培养基进行筛选，得到了Chl-TP-3HA-GP-Col表达株。

(Chl-TP-3HA-GP-Col蛋白质的蛋白酶体引起的分解的评价)

在放入了锥形瓶的MA2培养基60mL中以OD750＝0.2的细胞浓度分别对如上所述地制备出的C.merolae的ChlTP-sfGFP-HA-GP-Col表达株(下称“Chl-TP-3HA-GP-Col表达株”)以及作为负对照的野生株(WT)进行继代培养，在光照射下(50μmol m^-2s^-1)、在40℃下进行了2天的旋转培养。接着，将各株的培养液每次20mL地分别转移到两个锥形瓶中。为了阻碍蛋白酶体引起的蛋白质分解，向所述两个锥形瓶的一方以最终浓度成为100μM添加了蛋白酶体抑制剂MG-132(MG-132(+))(Nishida et al 2005；Mol Biol Cell.16(5)：2493-502；PMID：15772156)。作为对照，向另一方的锥形瓶中仅添加了作为MG-132的溶剂的DMSO 40μL(MG-132(-))。通过免疫印迹法，确认ChlTP-sfGFP-HA-GP-Col蛋白质的表达，通过带型的比较验证了蛋白酶体抑制的效果。在ChlTP-sfGFP-HA-GP-Col蛋白质的检测中使用了抗HA抗体(clone 16B12，产品编号为901503，Biolegend)。

图4中示出了免疫印迹的结果。在MG-132(-)以及MG-132(+)之间，未观察到ChlTP-sfGFP-HA-GP-Col蛋白质的带型的不同。根据该结果，显示了ChlTP-sfGFP-HA-GP-Col蛋白质没有被蛋白酶体分解。

(ChlTP-sfGFP-HA-GP-Co1蛋白质的细胞内局部存在的分析)

为了对ChlTP-sfGFP-HA-GP-Col蛋白质的细胞内局部存在进行分析，固定了在光照射下、在40℃且不存在MG-132的条件下培养了2天后的Chl-TP-3HA-GP-Col表达株，使用抗HA抗体，进行免疫荧光染色。

图5中示出了免疫荧光染色的结果。根据抗HA抗体的信号，显示了ChlTP-sfGFP-HA-GP-Co1蛋白质局部存在于叶绿体(位于中央部分的类囊体与被膜之间)。图5(A)的图像(PC)是示出细胞的轮廓的相位差显微镜图像，图5(B)的图像(Chl)是叶绿体的自发荧光图像，图5(C)的图像(anti-HA)是利用抗HA抗体的免疫荧光染色图像。能够确认通过抗HA抗体检测到的ChlTP-sfGFP-HA-GP-Col蛋白质局部存在于叶绿体。

表1示出了在实施例1以及实施例2中使用的引物的序列。

[表1]

[实施例3]

(对小鼠给予GAPDH-GP-sfGFP表达株)

以成为1.3×10⁸个细胞/mL(OD750＝4)的方式将GAPDH-GP-sfGFP表达株悬浮在300mM葡萄糖液(等渗溶液)中，使用探子将悬浮液250μL直接递送至小鼠(ICR系)的胃中。其后，在0、0.5、1.0小时后，摘出胃、小肠上部以及小肠下部，使摘出的各脏器悬浮在300mM葡萄糖液1mL中。将所述悬浮液离心后，分取出其上清液，进行了针对sfGFP的酶联免疫吸附试验(ELISA Assay)，测定了450nm的吸光度。

表2中示出了各脏器的sfGFP的相对浓度(利用酶联免疫吸附试验的450nm的吸光度)的测定结果。sfGFP在胃中几乎未检测到，从紧接着给药之后在小肠中检测到了。该结果显示了藻体的细胞在给药后立即从胃移动至肠内，在胃中未破裂，在肠中破裂了。

[表2]

[实施例4]

(对小鼠喂食包含sfGFP表达株的海藻酸固化饲料)

将在细胞质中表达并标记了sfGFP后的C.merolae 10D(Sumiya et al 2014,PLoSOne.9(10)：e111261；PMID：25337786)的细胞(sfGFP表达株)与市售饲料(CLEA RodentDiet CE-2，CLEA Japan,Inc.)混合，如以下所示地用海藻酸使混合物固化，作为饲料试样。

将悬浮有sfGFP表达株的300mM葡萄糖液(等渗溶液)(OD750＝4)27mL以3000g离心10分钟，采集了沉淀的细胞。将所述sfGFP表达株的细胞以及1.12g的市售饲料(CE-2)悬浮到包含1％海藻酸钠的2.5％蔗糖溶液10mL中。接着，将所述悬浮液向10％氯化钙溶液滴下，得到了包含sfGFP表达株以及市售饲料的海藻酸固化体的饲料试样。所述饲料试样中的sfGFP表达株的含量为4.6mg湿重/g(一粒80～110mg)。

使小鼠(ICR系)自由地摄取所述饲料试样4小时之后，进行了通常饲养。在摄取开始的4、8、24以及48小时后摘出了小鼠的胃肠、小肠上部、小肠下部。将摘出的各脏器悬浮在300mM葡萄糖溶液中，以1000g进行了离心后，回收上清液，作为sfGFP的细胞外浓度测定用试样。在上清液回收后，添加与回收到的上清液等量的蒸馏水(DW)将沉淀再次悬浮，以1000g进行了离心后，回收上清液，作为sfGFP的细胞内浓度测定用试样。用市售的ELISAkit(GFP ELISA kit；cat no.ab171581，abcam)对所述细胞外浓度测定用试样以及细胞内浓度测定用试样中的sfGFP量进行定量，分别作为细胞外浓度以及细胞内浓度。

表3中示出了各脏器中的sfGFP的相对浓度(利用酶联免疫吸附试验的450nm的吸光度)的测定结果。对于sfGFP，细胞外浓度以及细胞内浓度都是小肠一方以更高于胃的浓度被检测到。另外，在小肠下部，与小肠上部相比较，sfGFP浓度高，细胞内浓度与细胞外浓度的比率也增加。该结果表示藻体的细胞在小肠内破裂，sfGFP被小肠细胞取入。

[表3]

[实施例5]

(给药试验以及血清的采集)

作为“对照悬浮液给予组”，以成为1.3×10⁸个细胞/mL(OD750＝4)的方式将sfGFP表达株悬浮在300mM葡萄糖液(等渗溶液)中，使用探子将悬浮液300μL直接递送至小鼠(ICR系个体三个)的胃内。每隔一周进行了相同量的经口给药，进行了6次，在最终给药2周后采集了血清。

作为“悬浮液给予组”，以成为1.3×10⁸个细胞/mL(OD750＝4)的方式将Chl-TP-3HA-GP-Col表达株(C.merolae的ChlTP-sfGFP-HA-GP-Col蛋白质表达株)悬浮到300mM葡萄糖液中，使用探子将悬浮液300μL直接递送至小鼠(ICR系个体四个)的胃内。每隔一周进行了相同量的经口给药，进行了6次，在最终给药2周后采集了血清。

作为“海藻酸固化饲料给予组”，对悬浮有Chl-TP-3HA-GP-Col表达株(C.merolae的ChlTP-sfGFP-HA-GP-Col蛋白质表达株)的300mM葡萄糖液(OD750＝4)27mL以3000g进行了10分钟离心，采集了沉淀的细胞。将Chl-TP-3HA-GP-Col表达株的细胞以及1.12g的市售饲料(CE-2)悬浮到包含1％海藻酸钠的2.5％蔗糖溶液10mL中。接着，将该悬浮液向10％氯化钙溶液滴下，得到了包含Chl-TP-3HA-GP-Col表达株以及市售饲料的海藻酸固化体的饲料试样。Chl-TP-3HA-GP-Col株的含量为4.6mg湿重/g(一粒80～110mg)。使小鼠(ICR系个体四个)自由摄取饲料试样后，进行了通常饲养。隔周进行饲料试样的摄食，进行了6次，在最终摄食2周后采集了血清。

(抗GP蛋白质抗体产生的评价)

通过免疫印迹法确认了抗GP蛋白质抗体的产生。首先，为了在狂犬病病毒的GP蛋白质的氨基末端融合6×组氨酸标签序列，将GP基因的ORF克隆到pQE80载体(包含6×组氨酸标签序列，产品编号为32923，QIAGEN)中制备了质粒。将该质粒导入大肠杆菌，表达了6×组氨酸标签融合GP蛋白质(蛋白质大小为约50kDa)。使用镍柱(产品编号为17531901，GE医疗)将该蛋白质浓缩。接着，利用SDS-PAGE法通过电泳将6×组氨酸标签融合GP蛋白质浓缩液分离。将蛋白质从电泳后的凝胶转移到聚偏二氟乙烯(PVDF)薄膜(产品编号为IPVH00010，默克公司)上。将转移后的薄膜浸渍到从各小鼠个体采集到的血清的稀释液中，在室温下进行了1小时的孵育。通过将血清在Tris缓冲液(pH7.5，包含0.1％Tween20)中稀释到五百分之一，由此制备了血清稀释液。将血清中包含的抗GP蛋白质抗体的有无作为与位于50kDa附近的GP蛋白质的抗体反应的有无来进行判断。

(结果)

图6中示出了免疫印迹的结果。在作为负对照的“对照给予组(液)”的小鼠个体1、2、3的血清稀释液中，在作为狂犬病GP蛋白质的分子量大小的约50kDa的位置未检测到带(图6(C))。与此相对，在“海藻酸固化饲料给予组”的小鼠个体2、3、4(图6(A))以及“悬浮液给予组”的小鼠个体3、4(图6(B))中，在约50kDa的位置检测到带。根据该结果显示了，给予表达了狂犬病GP蛋白质的C.merolae的悬浮液或海藻酸固化饲料的小鼠产生了抗GP蛋白质抗体。

(考察)

在“对照悬浮液给予组”的小鼠个体2中，检测到大小比6×组氨酸标签融合GP蛋白质的预测大小更小的带，这被认为该小鼠个体具有的抗体相对于6×组氨酸标签融合GP蛋白质浓缩液中包含的来自大肠杆菌的蛋白质而言与GP蛋白质的给予无关系地发生了非特异性反应的情况。

根据一系列的实施例确认到，利用用于本发明的耐酸性细胞适当地导入的抗原性蛋白质能够被递送至小肠上部以后的部位。另外确认到，即使在将导入了本发明的抗原性蛋白质的耐酸性细胞作为能够在通常的畜产、养殖业中使用的形态混入至饲料中的情况下，也能够同样地将抗原性蛋白质递送至目标的部位。此外，还确认到，通过这样递送的抗原性蛋白质驱动肠道免疫系统，在血中产生了抗体。

序列表

<110> 日本科学技术振兴机构（Japan Science and Technology Agency）

<120> 药物递送组合物(DRUG DELIVERY COMPOSITION)

<130> PC-29322

<150> JP2019-069029

<151> 2019-03-29

<160> 66

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 2140

<212> DNA

<213> 狂犬病病毒(Rabies virus)

<400> 1

acattttgag cctcttggat gtgaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 60

aaaaaaaaaa aaaaaactat taacatccct caaaagactt aaggaaagat ggttcctcag 120

gttcttttgt ttgcacccct cctggttttt ccattgtgtt tcgggaagtt ccccatttac 180

acgataccag acaaacttgg tccctggagc cctattgact tacaccatct cagctgtcca 240

aataacctgg ttgtggagga cgaaggatgt accaacctgt ccgggttctc ttacatggaa 300

cttaaagtgg gatacatctc agccataaaa gtgaacgggt tcacttgcac aggtgttgtg 360

acagaggcag aaacctacac caactttgtt ggttatgtca caaccacatt caagagaaag 420

catttccgcc ccaccccaga cgcatgtaga gccgcgtata actggaagat ggccggtgac 480

cccagatatg aagagtctct acacaatccg taccccgact accattggct tcgaactgta 540

aaaaccacca aagagtctct cgttatcata tccccaagtg tgacagattt ggacccatat 600

gacaaatccc ttcactcaag ggtcttccct ggcggaaatt gctcaggaat aacggtgtcc 660

tcgacctact gctcaactaa tcatgattac accatctgga tgcctgagaa tctgagacta 720

gggacatctt gtgacatttt tacccatagc agagggaaga gagcatccaa aggagacaag 780

acttgcggct ttgtggatga aagaggcctg tataagtctt taaagggagc atgcaaactc 840

aagttatgtg gagttctcgg acttagactt atggatggaa catgggtcgc gatgcaaaca 900

tcagatgaga ccaaatggtg ccctccaggt cagttggtga atttgcacga ctttcgctca 960

gacgagattg agcatctcgt tgaggaagag ttagtcaaga aaagagagga gtgtctggat 1020

gcactagagt ccatcatgac caccaagtca gtgagtttca gacgtctcag tcacctgaga 1080

aaacttgtcc ctgggtttgg aaaagcatat accatattca acaaaacctt gatggaggct 1140

gatgctcact acaagtctgt ccagacctgg aatgagatca tcccctcaaa agggtgtttg 1200

agagttgggg agaggtgtca tccccatgtg aacggggtgt ttttcaatgg tataatatta 1260

gggtctgacg gccatgttct aatcccagag atgcagtcat ccctcctcca gcaacatatg 1320

gagttgttgg aatcttcagt tatccccctg atgcacccct tggcagaccc ttctacagtt 1380

ttcaaagacg gtgatgaggt tgaggatttt gttgaagttc acctccccga tgtgcataaa 1440

caggtctcag gagttgacct gggtctcccg aaatggggga agtatgtatt gatgattgca 1500

ggggccttga ttgccctgat gttgataatt ttcctgatga catgttgcag aagagtcaat 1560

cgaccagaat ctacacaaag caatcttgga gggacaggga gaaatgtgtc agtcccttcc 1620

caaagcggaa aagtcatatc ttcatgggag tcatataaga gtggaggcga gaccagactg 1680

tgaaggccgg tcatcctttt gacacctcaa gtccagagga taacctcctc tcggggttgg 1740

ggggaatctt gggatccagt agtcctcctt gaactccatc caacagggta gatttaagag 1800

tcatgagact ttcattaatc atatcagttg atcagacatg gtcgtgtaga ttctcataac 1860

acgggagatc ttctagcagt ttcagtgacc aacggtgctt tcattctcca ggaactgata 1920

ccaaaggttg tggacaagcc aaggggtgct tcggattact ctgtgcttgg gcacagaaag 1980

aggtcatagt ttgccccttg atagcggatt caacatgaat taactaagaa aggcgatctg 2040

cctcccatga aggacataag caatagttca caatcatctt gcatctcagt gaagtgtaca 2100

taactataaa gggctgggtc atctaagcat ttcagtcgag 2140

<210> 2

<211> 524

<212> PRT

<213> 狂犬病病毒(Rabies virus)

<400> 2

Met Val Pro Gln Val Leu Leu Phe Ala Pro Leu Leu Val Phe Pro Leu

1 5 10 15

Cys Phe Gly Lys Phe Pro Ile Tyr Thr Ile Pro Asp Lys Leu Gly Pro

20 25 30

Trp Ser Pro Ile Asp Leu His His Leu Ser Cys Pro Asn Asn Leu Val

35 40 45

Val Glu Asp Glu Gly Cys Thr Asn Leu Ser Gly Phe Ser Tyr Met Glu

50 55 60

Leu Lys Val Gly Tyr Ile Ser Ala Ile Lys Val Asn Gly Phe Thr Cys

65 70 75 80

Thr Gly Val Val Thr Glu Ala Glu Thr Tyr Thr Asn Phe Val Gly Tyr

85 90 95

Val Thr Thr Thr Phe Lys Arg Lys His Phe Arg Pro Thr Pro Asp Ala

100 105 110

Cys Arg Ala Ala Tyr Asn Trp Lys Met Ala Gly Asp Pro Arg Tyr Glu

115 120 125

Glu Ser Leu His Asn Pro Tyr Pro Asp Tyr His Trp Leu Arg Thr Val

130 135 140

Lys Thr Thr Lys Glu Ser Leu Val Ile Ile Ser Pro Ser Val Thr Asp

145 150 155 160

Leu Asp Pro Tyr Asp Lys Ser Leu His Ser Arg Val Phe Pro Gly Gly

165 170 175

Asn Cys Ser Gly Ile Thr Val Ser Ser Thr Tyr Cys Ser Thr Asn His

180 185 190

Asp Tyr Thr Ile Trp Met Pro Glu Asn Leu Arg Leu Gly Thr Ser Cys

195 200 205

Asp Ile Phe Thr His Ser Arg Gly Lys Arg Ala Ser Lys Gly Asp Lys

210 215 220

Thr Cys Gly Phe Val Asp Glu Arg Gly Leu Tyr Lys Ser Leu Lys Gly

225 230 235 240

Ala Cys Lys Leu Lys Leu Cys Gly Val Leu Gly Leu Arg Leu Met Asp

245 250 255

Gly Thr Trp Val Ala Met Gln Thr Ser Asp Glu Thr Lys Trp Cys Pro

260 265 270

Pro Gly Gln Leu Val Asn Leu His Asp Phe Arg Ser Asp Glu Ile Glu

275 280 285

His Leu Val Glu Glu Glu Leu Val Lys Lys Arg Glu Glu Cys Leu Asp

290 295 300

Ala Leu Glu Ser Ile Met Thr Thr Lys Ser Val Ser Phe Arg Arg Leu

305 310 315 320

Ser His Leu Arg Lys Leu Val Pro Gly Phe Gly Lys Ala Tyr Thr Ile

325 330 335

Phe Asn Lys Thr Leu Met Glu Ala Asp Ala His Tyr Lys Ser Val Gln

340 345 350

Thr Trp Asn Glu Ile Ile Pro Ser Lys Gly Cys Leu Arg Val Gly Glu

355 360 365

Arg Cys His Pro His Val Asn Gly Val Phe Phe Asn Gly Ile Ile Leu

370 375 380

Gly Ser Asp Gly His Val Leu Ile Pro Glu Met Gln Ser Ser Leu Leu

385 390 395 400

Gln Gln His Met Glu Leu Leu Glu Ser Ser Val Ile Pro Leu Met His

405 410 415

Pro Leu Ala Asp Pro Ser Thr Val Phe Lys Asp Gly Asp Glu Val Glu

420 425 430

Asp Phe Val Glu Val His Leu Pro Asp Val His Lys Gln Val Ser Gly

435 440 445

Val Asp Leu Gly Leu Pro Lys Trp Gly Lys Tyr Val Leu Met Ile Ala

450 455 460

Gly Ala Leu Ile Ala Leu Met Leu Ile Ile Phe Leu Met Thr Cys Cys

465 470 475 480

Arg Arg Val Asn Arg Pro Glu Ser Thr Gln Ser Asn Leu Gly Gly Thr

485 490 495

Gly Arg Asn Val Ser Val Pro Ser Gln Ser Gly Lys Val Ile Ser Ser

500 505 510

Trp Glu Ser Tyr Lys Ser Gly Gly Glu Thr Arg Leu

515 520

<210> 3

<211> 3033

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 3

atgttccatg tgacgtaccc gttcacgcag agacaatgct ttctccgttc acgagaagcg 60

tgccttgcaa cgttgccagc tggtgctttt cgaaagcacc tgtggcgccc ttcgtgctgg 120

tcgttccgca cacgtcttcg taaagaggcg tcgctacgga aatccacagt tctcgctccg 180

cttactcgcc gtctgcagct gagtctcttc ggcctcccag agcggttcgt tcgcaagtcc 240

aagtcgccgg tctcggcaga gtccagtgtc gccactgagc tcacacgtga tcgggtcaaa 300

gatccgacgc tcgcgaagta ctgggataca cttctggaaa tcaatgcact ggaggcggaa 360

ctggaacaac tcaaaagcga tgaactcaga gctcgcttgg atgccctgcg gagaaacgac 420

tcggtgcgga gcggggaccc gccactggcc gaggtattcg ccatcgttcg agaggccgca 480

cgtcggacgc tcagcatgcg acccttcgat gtgcaggttc ttggtggcct tgcactcttt 540

cacggttgcg tagcggagat cgccaccggt gaggggaaaa cgctcatcgc aacgatgccg 600

gcatgtgcca gcgcgctagc ggctcgcggt accgtcctgg tcgtgacggt gaacgattac 660

ctctgccgtc gcgactttga aaacatgggt ccactgtatc gctccctggg tttctctgtc 720

gggtgtgtga ccagcgccac agagcgggcg gcacgtcaac gagcatacgc ttgcgatatc 780

acctatgtga cgaatgcgga gcttggattc gactatctac gcgaccatct ggtgctgagc 840

gctgctgatc aagtgcttgt gaggcccaag cccttctact tttgtctact ggatgaggcc 900

gactcaatca tgatagatga agcgcgtaca ccgctgatca tttcccaggc tgcagaggcg 960

cccacagaga aatacgctac tgccgctaaa ctggctgcaa acctgcagcg ggatcggcac 1020

tacacggtct atgaaaagga gcgcaatgtc actttgacag gcgccggtta cgaagcatgt 1080

gaggaggcac tgcaagtgcc aacgctcttc gccgcagcgg atccgtgggc gccctttgtg 1140

ctgaatgcac tcaaggcgaa ggagctctat caacgtgata tagattatgt cgttcggggt 1200

gatcaagtgc taatcgtgga tgagtttacc ggtcgagtac tgcaaggtag gcgctggtca 1260

gagggtctgc accaggccat cgaggccaag gaggggctcg ctgtccgcac tgaaccgcgg 1320

actgtagctt ccatctcgta tcagtccttc tttcgcctgt ttcctcgtct ggcaggcatg 1380

acgggcaccg ctgctaccga tgcagcagag atacgcgaaa cgtacggact cgaggtggtc 1440

gttgtgccca ccgcgctacc tgtcgttcgc cgagactacc ccgatgtggt gtttcgaacg 1500

agtcgcggca aacttcttgc tgtggtcgca gaaattcgac gcctgcacct tcgaaaagtg 1560

cccgtcctgg ttggaaccac cagtattgaa gctagtgagc gaatcagcgc ccttttgagc 1620

gaaggcgaac gcgttccgca cgaggttctg aatgcacgtc cggagaacgc tgaacgtgag 1680

agcgaaatca tcgcccaagc aggtcgtcta ggagcggtta cgatcgcaac aaacatggct 1740

ggacgaggaa ccgatatcgt gctgggtgga aacgtgtcca gtctagcacg cgctcttctc 1800

cagagggagc tgcttgccac gttcgctctg gggcctgaat gctcctctgg ggccggcgac 1860

cgcgcatcca ccgagcattt cctctcgtgt ctcgaagagg cggagcatca ccagctgcac 1920

tgctttggag aaaaaatcgc tgaggcactg cgttcccagc gttcgacgga tcccggtccg 1980

cggcttatca tcgaatccat ggagcagctg catcagctga tgctgcaagc tgccgagttt 2040

caagagccaa cgttgccctt ctctgccgag gcccaggagc tggtaagaga ggcacttcag 2100

tggctggaaa agcagctgcg tccgcggctc gatgcagagc gcgcagctgt gctggacctc 2160

ggtggcctgc acatcctcgg aactgaacga cacgagtcac gccgcatcga taaccagttg 2220

cggggtcgtg caggtcgcca aggtgacccc ggatgttcgc gtttcttcct gtcgctggag 2280

gaccccatct tcagggtgtt tgggggtgat cggatggctc gcctcgccga agcgtttcgt 2340

ctggacgaaa caacccccat cgagagcgtc caggttgcgc gtacgctgga caatgtccag 2400

cgcagcatcg agcaatatta tgcggggatt cggaagcagt tattcgctta tgatgaggtg 2460

ctttcccaac aacggaaggt actgtatcga cagcgaaacc gctttttgga agccgatgaa 2520

gcgctcctat tcggttcgga tgcggcagca gcccgggcct ctggggtgct tgctggcctc 2580

gcgggcgact ggatacgaac gacgattcag gatattctcc aagcaaatcg tcgagatccg 2640

gcaaaatgcg ttcagaaatt gaaagcgttc ttcccagggg cgcttctgaa cgagagcatg 2700

tgccagtccg cagcagctat cgaccaagtt gccgccgctg ttggcgtacg gctctcgcaa 2760

caccggcgga tgttgcaaca gagcgcaccg cagcaggatg ttgctgtctt tcgctatttg 2820

gcactggttc agcatgatca gctctggagt gaacatttac gaaaattagc gcttttgcgg 2880

gacatgtcgt ctttgcagac gttgcggcag gtagatccgt tgcaacagta tcagcaagat 2940

agttttcagc tctttgaaca gatgatggca caaataaggc gcaacactgt atactcgttt 3000

ttcaagtatt cgccggggcc aacggtatcc gcg 3033

<210> 4

<211> 1011

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 4

Met Phe His Val Thr Tyr Pro Phe Thr Gln Arg Gln Cys Phe Leu Arg

1 5 10 15

Ser Arg Glu Ala Cys Leu Ala Thr Leu Pro Ala Gly Ala Phe Arg Lys

20 25 30

His Leu Trp Arg Pro Ser Cys Trp Ser Phe Arg Thr Arg Leu Arg Lys

35 40 45

Glu Ala Ser Leu Arg Lys Ser Thr Val Leu Ala Pro Leu Thr Arg Arg

50 55 60

Leu Gln Leu Ser Leu Phe Gly Leu Pro Glu Arg Phe Val Arg Lys Ser

65 70 75 80

Lys Ser Pro Val Ser Ala Glu Ser Ser Val Ala Thr Glu Leu Thr Arg

85 90 95

Asp Arg Val Lys Asp Pro Thr Leu Ala Lys Tyr Trp Asp Thr Leu Leu

100 105 110

Glu Ile Asn Ala Leu Glu Ala Glu Leu Glu Gln Leu Lys Ser Asp Glu

115 120 125

Leu Arg Ala Arg Leu Asp Ala Leu Arg Arg Asn Asp Ser Val Arg Ser

130 135 140

Gly Asp Pro Pro Leu Ala Glu Val Phe Ala Ile Val Arg Glu Ala Ala

145 150 155 160

Arg Arg Thr Leu Ser Met Arg Pro Phe Asp Val Gln Val Leu Gly Gly

165 170 175

Leu Ala Leu Phe His Gly Cys Val Ala Glu Ile Ala Thr Gly Glu Gly

180 185 190

Lys Thr Leu Ile Ala Thr Met Pro Ala Cys Ala Ser Ala Leu Ala Ala

195 200 205

Arg Gly Thr Val Leu Val Val Thr Val Asn Asp Tyr Leu Cys Arg Arg

210 215 220

Asp Phe Glu Asn Met Gly Pro Leu Tyr Arg Ser Leu Gly Phe Ser Val

225 230 235 240

Gly Cys Val Thr Ser Ala Thr Glu Arg Ala Ala Arg Gln Arg Ala Tyr

245 250 255

Ala Cys Asp Ile Thr Tyr Val Thr Asn Ala Glu Leu Gly Phe Asp Tyr

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Leu Arg Asp His Leu Val Leu Ser Ala Ala Asp Gln Val Leu Val Arg

275 280 285

Pro Lys Pro Phe Tyr Phe Cys Leu Leu Asp Glu Ala Asp Ser Ile Met

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Ile Asp Glu Ala Arg Thr Pro Leu Ile Ile Ser Gln Ala Ala Glu Ala

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Pro Thr Glu Lys Tyr Ala Thr Ala Ala Lys Leu Ala Ala Asn Leu Gln

325 330 335

Arg Asp Arg His Tyr Thr Val Tyr Glu Lys Glu Arg Asn Val Thr Leu

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Thr Gly Ala Gly Tyr Glu Ala Cys Glu Glu Ala Leu Gln Val Pro Thr

355 360 365

Leu Phe Ala Ala Ala Asp Pro Trp Ala Pro Phe Val Leu Asn Ala Leu

370 375 380

Lys Ala Lys Glu Leu Tyr Gln Arg Asp Ile Asp Tyr Val Val Arg Gly

385 390 395 400

Asp Gln Val Leu Ile Val Asp Glu Phe Thr Gly Arg Val Leu Gln Gly

405 410 415

Arg Arg Trp Ser Glu Gly Leu His Gln Ala Ile Glu Ala Lys Glu Gly

420 425 430

Leu Ala Val Arg Thr Glu Pro Arg Thr Val Ala Ser Ile Ser Tyr Gln

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Ser Phe Phe Arg Leu Phe Pro Arg Leu Ala Gly Met Thr Gly Thr Ala

450 455 460

Ala Thr Asp Ala Ala Glu Ile Arg Glu Thr Tyr Gly Leu Glu Val Val

465 470 475 480

Val Val Pro Thr Ala Leu Pro Val Val Arg Arg Asp Tyr Pro Asp Val

485 490 495

Val Phe Arg Thr Ser Arg Gly Lys Leu Leu Ala Val Val Ala Glu Ile

500 505 510

Arg Arg Leu His Leu Arg Lys Val Pro Val Leu Val Gly Thr Thr Ser

515 520 525

Ile Glu Ala Ser Glu Arg Ile Ser Ala Leu Leu Ser Glu Gly Glu Arg

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Val Pro His Glu Val Leu Asn Ala Arg Pro Glu Asn Ala Glu Arg Glu

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Ser Glu Ile Ile Ala Gln Ala Gly Arg Leu Gly Ala Val Thr Ile Ala

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Thr Asn Met Ala Gly Arg Gly Thr Asp Ile Val Leu Gly Gly Asn Val

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Ser Ser Leu Ala Arg Ala Leu Leu Gln Arg Glu Leu Leu Ala Thr Phe

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Cys Phe Gly Glu Lys Ile Ala Glu Ala Leu Arg Ser Gln Arg Ser Thr

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Asp Asn Gln Leu Arg Gly Arg Ala Gly Arg Gln Gly Asp Pro Gly Cys

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Ser Arg Phe Phe Leu Ser Leu Glu Asp Pro Ile Phe Arg Val Phe Gly

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Gly Asp Arg Met Ala Arg Leu Ala Glu Ala Phe Arg Leu Asp Glu Thr

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Asn Arg Phe Leu Glu Ala Asp Glu Ala Leu Leu Phe Gly Ser Asp Ala

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Ala Ala Ala Arg Ala Ser Gly Val Leu Ala Gly Leu Ala Gly Asp Trp

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Ile Arg Thr Thr Ile Gln Asp Ile Leu Gln Ala Asn Arg Arg Asp Pro

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Ala Lys Cys Val Gln Lys Leu Lys Ala Phe Phe Pro Gly Ala Leu Leu

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Asn Glu Ser Met Cys Gln Ser Ala Ala Ala Ile Asp Gln Val Ala Ala

900 905 910

Ala Val Gly Val Arg Leu Ser Gln His Arg Arg Met Leu Gln Gln Ser

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Asp Met Ser Ser Leu Gln Thr Leu Arg Gln Val Asp Pro Leu Gln Gln

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Val Ser Ala

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<210> 5

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 5

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<210> 6

<211> 130

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 6

Met Phe His Val Thr Tyr Pro Phe Thr Gln Arg Gln Cys Phe Leu Arg

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Ser Arg Glu Ala Cys Leu Ala Thr Leu Pro Ala Gly Ala Phe Arg Lys

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His Leu Trp Arg Pro Ser Cys Trp Ser Phe Arg Thr Arg Leu Arg Lys

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Asp Arg Val Lys Asp Pro Thr Leu Ala Lys Tyr Trp Asp Thr Leu Leu

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Glu Ile Asn Ala Leu Glu Ala Glu Leu Glu Gln Leu Lys Ser Asp Glu

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Leu Arg

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 7

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caagagcacg tactgctatc gaagcaggta ggtgttccga actttgttgt atacctgaac 600

aaatgtgata tggtcgacga tccggaactt ttggacttgg tcgaattaga ggtgcgtgaa 660

ctactcagca agtacgaata cgatggcgac aacgtgccga tcgtgcgggg ctctgccctg 720

aaggcattgc agggcgatca gagcgagctt ggctgtgggt ccatccacaa gctcctggag 780

attctcgaca aggtcccaat acccaaaaga gaccttgaaa aaccgttcct gatgcccatt 840

gaagatagct ttagcattac tggccgagga acggtggtta cgggacgcgt ggagaccggt 900

atcctacgcc ctggtgatga aatcgaaatc gtcggacttc gtcctcccga ggtagcacca 960

atgcgcacga tcgtcaccgg tatcgagact ttcaagcagt cgcttcctta cgcagaggct 1020

ggcgagaatg ttggctgtct gcttcgcggg gtcaagcgcg aagacgtgtt gcgcggtcag 1080

gttctagcga aaccgggaac ctccagagcg caccgcaagt tcgaggctga cgtttacatt 1140

cttactcagg aggaaggcgg ccgccataca ccattcttca gcaactatcg tcctcaattc 1200

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<210> 8

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<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 8

Met Ser Val Ser Cys Gly Arg Arg Ile Phe Ser Asp Ile Val Arg Gln

1 5 10 15

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20 25 30

Thr Arg Asn Ala Thr Val Trp Arg Ser Tyr Arg Thr Thr Thr Leu Gln

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Tyr Pro Arg Leu Trp Glu Leu Arg Ala Ser Arg Phe Leu Ser Gly Glu

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Gly Met Gly His Val Asp His Gly Lys Thr Thr Leu Ala Ala Ala Ile

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Thr Lys Val Leu Ala Glu Thr Gly Gly Ala Arg Tyr Thr Ala Tyr Glu

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Glu Ile Asp Lys Ala Pro Glu Glu Arg Ala Arg Gly Ile Thr Ile Asn

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Asp Cys Pro Gly His Arg Asp Phe Val Lys Asn Phe Ile Thr Gly Ala

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Ala Gln Val Asp Thr Ala Ile Leu Val Val Ser Gly Pro Asp Gly Pro

165 170 175

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Pro Asn Phe Val Val Tyr Leu Asn Lys Cys Asp Met Val Asp Asp Pro

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210 215 220

Tyr Glu Tyr Asp Gly Asp Asn Val Pro Ile Val Arg Gly Ser Ala Leu

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Lys Ala Leu Gln Gly Asp Gln Ser Glu Leu Gly Cys Gly Ser Ile His

245 250 255

Lys Leu Leu Glu Ile Leu Asp Lys Val Pro Ile Pro Lys Arg Asp Leu

260 265 270

Glu Lys Pro Phe Leu Met Pro Ile Glu Asp Ser Phe Ser Ile Thr Gly

275 280 285

Arg Gly Thr Val Val Thr Gly Arg Val Glu Thr Gly Ile Leu Arg Pro

290 295 300

Gly Asp Glu Ile Glu Ile Val Gly Leu Arg Pro Pro Glu Val Ala Pro

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Met Arg Thr Ile Val Thr Gly Ile Glu Thr Phe Lys Gln Ser Leu Pro

325 330 335

Tyr Ala Glu Ala Gly Glu Asn Val Gly Cys Leu Leu Arg Gly Val Lys

340 345 350

Arg Glu Asp Val Leu Arg Gly Gln Val Leu Ala Lys Pro Gly Thr Ser

355 360 365

Arg Ala His Arg Lys Phe Glu Ala Asp Val Tyr Ile Leu Thr Gln Glu

370 375 380

Glu Gly Gly Arg His Thr Pro Phe Phe Ser Asn Tyr Arg Pro Gln Phe

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Phe Val Arg Thr Ala Asp Val Thr Gly Arg Phe Leu Leu Pro Pro Glu

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Val Glu Met Cys Met Pro Gly Asp Arg Val Arg Cys Ala Val Glu Leu

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Gly Gly Arg Thr Val Gly Ala Gly Leu Val Thr Lys Val Ile Glu

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 9

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<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 10

Met Ser Val Ser Cys Gly Arg Arg Ile Phe Ser Asp Ile Val Arg Gln

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Val Arg Thr Phe Ala Thr Val Gly Val Asp Ala Arg Ser Leu Ala Gly

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Thr Arg Asn Ala Thr Val Trp Arg Ser Tyr Arg Thr Thr Thr Leu Gln

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 11

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<211> 230

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 12

Met Gly Val Pro Gln Ile Thr Ser Asn Thr Val Ala Pro Val Glu Arg

1 5 10 15

Lys Val Glu Arg Gly Ser Tyr Gly Ala Thr Ala Pro Ala Ala Pro Ala

20 25 30

Ala Ala Phe Ala Ser Thr Glu Ser Glu Leu Ile Arg Asp Ser Asp Pro

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Ser Leu Ser Thr Met Trp Leu Pro Val Asp Leu Ser Val Gln Leu Thr

50 55 60

Pro Lys Glu Arg Leu Gln Leu Ala Trp Ser Ala Ala Arg Pro Trp Arg

65 70 75 80

Glu Trp Ala Ala Leu His Ala Leu Ala Pro Pro Pro Pro Ser Ser Trp

85 90 95

Leu Asp Trp Ser Ala Arg Val Arg Thr Asn Leu Glu Leu Tyr Ala Trp

100 105 110

Asn Tyr Leu Phe Val Ala Leu Val Met Phe Ile Val Thr Gly Leu Phe

115 120 125

Tyr Pro Trp Ser Ala Leu Leu Leu Ile Ser Trp Leu Leu Leu Ala Leu

130 135 140

Tyr Met Gly Val Arg Thr Ala Asp Ala Val Gly Gly Glu Asp Ala Ser

145 150 155 160

Leu Gly Ala Arg Met Phe Gln Asn Trp Pro Gly Tyr Ile Arg Tyr Ile

165 170 175

Leu Leu Gly Gly Leu Leu Thr Leu Met Leu Phe Leu Thr Asp Val Val

180 185 190

Ala Leu Ala Leu Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ala Ala Val Thr Leu Ala

195 200 205

His Ala Ala Leu His Asp Pro Val Ala Val Leu Ser Ala Arg Asn Ala

210 215 220

Glu Tyr Thr Val Ala Pro

225 230

<210> 13

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 13

atggtgatca gcacccaggg aaacgtctca ggttccgttc cgaatacgct cagagcgaaa 60

cctgagcaaa cgcttcaggc gtcgaggcct gccaccaggg ccgtctctgc agcgcttgac 120

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cctttcatgt cattcagcaa ccgcttaagt ccaaaagctg gcacagatac tctttcggtg 240

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actcgaccca tacttcggaa tatctgtttc gaagtacgcg acggagagac ggtgtttatc 540

atcggcccgt caggagctgg caagtctcga cttcttcgac tggtgaaccg cttagaggag 600

ccttcaggtg gtcaagtccg gctgtggggc acaccagtgc cagcgtaccc tccaggcgag 660

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ttgtcagggg gtgagcgagc tcgcctcggc ctcacgcgag tgcttttgca gcaaccacga 1020

atcctactgc tggacgaggt cacttcaagt ctggacgcag caacagcggc tcaagtattg 1080

caacgtttat cggactggaa agaacgcatc cgggccacaa tactcatagt gacgcacaga 1140

ctctcggagg ttaccgacgg ccagctcatt cttgtgcggg acggggagct gttcttacgc 1200

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<210> 14

<211> 429

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 14

Met Val Ile Ser Thr Gln Gly Asn Val Ser Gly Ser Val Pro Asn Thr

1 5 10 15

Leu Arg Ala Lys Pro Glu Gln Thr Leu Gln Ala Ser Arg Pro Ala Thr

20 25 30

Arg Ala Val Ser Ala Ala Leu Asp Phe Cys Ala Gly Val Ala Ala Ala

35 40 45

Val Ser Gly Ile Ser Val Pro Gly Gly Tyr Phe Pro Pro Phe Met Ser

50 55 60

Phe Ser Asn Arg Leu Ser Pro Lys Ala Gly Thr Asp Thr Leu Ser Val

65 70 75 80

Ser Asn Gln Glu Ser Thr Arg Glu Asp Ala Asp Ala Val Leu Ser Thr

85 90 95

Ala Ala Ala Ser Leu Ala Thr Asp Leu Glu Tyr Gly Ser Ala Thr Glu

100 105 110

Arg His His Glu Asn Ile Asp Pro Ile Arg Pro Val Thr Arg Asp Ser

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Gly Ala Phe Val Glu Asn Tyr Pro Ser Gly Thr Arg Glu Val Ala Ile

130 135 140

Ala Phe Glu Gly Val Thr Leu Ser Ala Ser Thr Gln Ala Ala Gly Thr

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Thr Arg Pro Ile Leu Arg Asn Ile Cys Phe Glu Val Arg Asp Gly Glu

165 170 175

Thr Val Phe Ile Ile Gly Pro Ser Gly Ala Gly Lys Ser Arg Leu Leu

180 185 190

Arg Leu Val Asn Arg Leu Glu Glu Pro Ser Gly Gly Gln Val Arg Leu

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Trp Gly Thr Pro Val Pro Ala Tyr Pro Pro Gly Glu Leu Arg Gly Lys

210 215 220

Leu Val Gly Phe Leu Ser Gln Gln Pro Ala Leu Pro Cys Leu Ala His

225 230 235 240

Arg Arg Pro Gly Leu Leu Glu Ala Leu Arg Arg Leu Val Thr Arg Glu

245 250 255

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260 265 270

Asn Thr Glu Glu Pro Ala Lys Ser Ala Leu Glu Thr Leu Val Arg Leu

275 280 285

Gly Val Val Ser Arg Thr Glu Leu Glu Gln Arg Leu Pro Glu Ala Leu

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His Ile Ala Gly Leu Ser Arg Thr Ile Leu Asp Arg Pro Leu Ala Ala

305 310 315 320

Leu Ser Gly Gly Glu Arg Ala Arg Leu Gly Leu Thr Arg Val Leu Leu

325 330 335

Gln Gln Pro Arg Ile Leu Leu Leu Asp Glu Val Thr Ser Ser Leu Asp

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Ala Ala Thr Ala Ala Gln Val Leu Gln Arg Leu Ser Asp Trp Lys Glu

355 360 365

Arg Ile Arg Ala Thr Ile Leu Ile Val Thr His Arg Leu Ser Glu Val

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Thr Asp Gly Gln Leu Ile Leu Val Arg Asp Gly Glu Leu Phe Leu Arg

385 390 395 400

Gly Asp Ala Arg Ala Leu Leu Gly Thr Ala Asp Thr Ala Ala Ser Ile

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His Arg Leu Leu Thr Gly Glu Ser Leu Gly Ala Thr Lys

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<210> 15

<211> 1362

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 15

atgtcgtcca tctgggagca aatgagatct ctgctgttcg gagcgagtgg atcgtatgct 60

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<210> 16

<211> 454

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 16

Met Ser Ser Ile Trp Glu Gln Met Arg Ser Leu Leu Phe Gly Ala Ser

1 5 10 15

Gly Ser Tyr Ala Asp Ala Ala Asp Thr Pro Gln Gly Leu Ala Phe Glu

20 25 30

Gln Arg Leu Val Ala Arg His Gly Asn Thr Leu Pro Pro Trp Pro Leu

35 40 45

Phe Lys Leu Gly Ala Val Tyr Gly Val Gly Pro Val Pro Pro Asn Leu

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Arg Ala Leu Leu Asp Gly Ser Phe Phe Leu Ile Gly Ala Cys Leu Gly

65 70 75 80

Thr Ala Ala Leu Phe Asp Phe Ala Gly Ile Ile Gly Arg Arg Gly Gly

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Gly Val Thr Ala Ala Glu Val Ala Lys Glu Cys Asn Cys Ala Asp Val

100 105 110

Asn Ala Val Gly Arg Val Leu Arg Ala Cys Glu Asn Trp Gly Tyr Phe

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Glu Ser Tyr Val Pro Arg Asp Cys Asp Ser Lys Ser Val Ser Asn Glu

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Gln Arg Leu Trp Arg Asn Thr Leu Leu Ser Ala Leu Leu Arg Glu Asp

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His Pro His Ser Val Arg Ala Gln Ile Met His Leu Tyr Val Asp Ile

165 170 175

Phe Pro Ala Ser Ala Leu Leu Phe Glu Thr Ile Arg Asp Thr Pro Ser

180 185 190

Asn Asp Val Glu Thr Asp Gly Leu Arg Ala Arg Ala Asp Ala Ser Ala

195 200 205

Thr Lys Gln Pro Ser Ala Phe Glu Arg Val His Gln Cys Thr Phe Trp

210 215 220

Glu Tyr Leu Ser Ser His Pro Asp Arg Trp Asp Val Phe Asn Arg Ala

225 230 235 240

Met Arg Ser Ser Asp Ala Leu Leu Gly Ser Thr Ile Met Lys Asp Ile

245 250 255

Asp Trp Gly Arg Tyr Leu Arg Val Ile Asp Leu Gly Ala Ala Asp Gly

260 265 270

Ser Leu Val Tyr His Leu Leu Ser Ala Phe Ala Leu Lys Ala Val Ile

275 280 285

Phe Asp Leu Pro Pro Val Ile Glu His Ala Lys Ala Tyr Trp Asn Thr

290 295 300

Ser Pro Glu Arg Ser Ala Met Val Ala Ser Gly Arg Val Gln Phe Ala

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Ala Gly Asp Leu Phe Asp Ala Thr Thr Val Pro Ala Ala Glu Glu Gly

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Asp Ile Tyr Val Met Arg Asn Ile Trp His Asp Trp Arg Asp Pro Asp

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Cys Ile Arg Ile Gly Arg Ser Val Arg Ala Ala Ile Gly Asp Val Arg

355 360 365

Asn Val Lys Leu Val Ile Leu Glu Ala Ser Ile Asp Gln Tyr Pro Arg

370 375 380

Gly Ser Leu Leu Glu Arg Phe Arg Val Ala Leu Asp Gln Ile Met Phe

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Thr Ala Phe Arg Ser Lys Glu Arg Asp Arg Ile Glu Phe Asp Ala Leu

405 410 415

Leu Arg Arg Cys Gly Phe Gln Leu Thr Glu Val Arg His Leu Arg Ala

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Ser Leu Val Ala Val Ile Ala Glu Pro Leu Ser His Trp Val Gln Ser

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450

<210> 17

<211> 1488

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 17

atggacccaa ccaagtatac accacgcgat acttttgacg tgaacgtgct taccacgaac 60

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<210> 18

<211> 496

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 18

Met Asp Pro Thr Lys Tyr Thr Pro Arg Asp Thr Phe Asp Val Asn Val

1 5 10 15

Leu Thr Thr Asn Ala Gly Gln Pro Val Thr Asn Asn Gln Ser Ser Arg

20 25 30

Thr Val Gly Pro Arg Gly Pro Val Leu Leu Glu Asp Tyr His Leu Leu

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Glu Lys Leu Ala Asn Phe Asp Arg Glu Arg Gln Pro Glu Arg Val Val

50 55 60

His Ala Arg Gly Val Thr Ala Lys Gly Tyr Phe Glu Val Thr His Asp

65 70 75 80

Ile Thr Asp Leu Thr Cys Ala Asp Met Phe Ala Glu Val Gly Arg Arg

85 90 95

Thr Pro Val Ala Val Arg Phe Ser Thr Val Ile His Ser Arg His Ser

100 105 110

Pro Glu Thr Leu Arg Asp Pro Arg Gly Phe Ala Val Lys Phe Tyr Thr

115 120 125

Arg Glu Gly Ile Trp Asp Leu Val Gly Asn Asn Leu Pro Val Phe Phe

130 135 140

Ile Arg Asp Ala Ile Lys Phe Pro Asp Leu Ile His Ala Phe Lys Pro

145 150 155 160

Asn Pro Arg Thr Glu Ala Gln Glu Ser Trp Arg Ile Leu Asp Phe Leu

165 170 175

Ser Asn Gln His Glu Ser Leu Asn Met Leu Thr Phe Leu Phe Asp Asp

180 185 190

Glu Gly Ile Pro Lys Asp Tyr Arg His Met Arg Gly Ser Gly Val His

195 200 205

Ser Phe Arg Leu Val Thr Arg Asp Gly Arg Ser Thr Tyr Val Arg Phe

210 215 220

His Trp Arg Pro Lys Cys Gly Met Glu Asn Leu Leu Asp Glu Glu Ala

225 230 235 240

Ala Val Val Cys Gly Gln Asp Phe Ser His Ala Thr His Asp Leu Ile

245 250 255

Arg Ala Ile Asp Arg Gly Asp Tyr Pro Glu Trp Ala Leu Tyr Ile Gln

260 265 270

Thr Met Asp Pro Ala Met Val Glu Asn His Val Phe Pro Trp Gly Asp

275 280 285

Pro Leu Asp Ala Thr Arg Glu Trp Pro Glu Lys Asp Phe Pro Leu Arg

290 295 300

Pro Val Gly Arg Met Val Leu Asn Gln Asn Cys Asp Asn Gln Phe Leu

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Glu Asn Glu Gln Ile Ala Phe Ser Pro Ala Leu Val Val Pro Gly Ile

325 330 335

Tyr Tyr Ser Asp Asp Lys Leu Leu Gln Gly Arg Leu Phe Ser Tyr Ala

340 345 350

Asp Thr Gln Arg Tyr Arg Ile Gly Ala Asn Tyr Leu Gln Leu Pro Ile

355 360 365

Asn Ala Pro Lys Asn Pro Phe His Asn Asn His Tyr Asp Gly Gln Gln

370 375 380

Asn Trp Met Leu Arg Gln Gly Glu Val Asn Tyr Tyr Pro Ser Arg Val

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Asp Pro Val Pro Glu Ala Pro Pro Ala Ala Phe Pro Thr Pro Arg Asp

405 410 415

Glu Leu Arg Gly Gln Arg Val Lys Gln Leu Val Pro Asn Gln Cys Asp

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Phe Val Gln Pro Gly Glu Arg Tyr Arg Ser Phe Asp Pro Ala Arg Lys

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Glu Arg Phe Val Asn Arg Ile Ala Lys Leu Leu Thr Asp Glu Arg Val

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Thr Pro Glu Leu Arg Ala Ile Trp Leu Glu Leu Trp Ser Lys Cys Asp

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Ala Glu Leu Gly Ala Ala Leu Ala Thr Arg Val Lys Gln Cys Thr Met

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<210> 19

<211> 8157

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 19

atgggggatt tgggtgaaca tgcaccgtcg aatggctccg caaaggatag cgttcggcgc 60

tatgttgagg aacacggcgg tagtagacca attcagcgct tattggtcgc aaacaacgga 120

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gatcccattt atcgccacat tgatccacca gcggctttcc agctggagct gaatcgattg 3960

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ccgatgatcg actccatcga tgctgtggta cgcgaagtcg actacgatcc acgagtggct 5580

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gcaagtgtgg tctcgtcgtc gggctcgtcg gtgtcgtcca atggtccggt tgcgacaggt 5700

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cgggtgagcc tcgtatcgac caagcctgca accggtgtcg aggaggttcc cgcggcgttg 5940

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tcatcatcag cagcagcaac agcagcaaca acaacaacaa caacaacaac aacaacaaca 7440

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tcaacggcgg acggcttgcc agccttcgag gcagacggtc ggagttcgct cgagcaaaca 7560

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cggatgcaac ataagcgcgc gattcgccga gtggtaccct ggcgaacaag tcgcacgttt 7680

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caggccgcac cacgacgtgt cttgtcgggt cgtggtctgc tgcgacgctt cctcggg 8157

<210> 20

<211> 2719

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 20

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Ser Met Arg Arg Trp Ala Tyr Glu Ala Phe Gly Ser Glu Arg Ala Leu

50 55 60

Glu Phe Val Ala Met Ala Thr Pro Glu Asp Val Gln Ala Asn Ala Asp

65 70 75 80

Tyr Ile Arg Leu Ala Asp Leu Phe Val Pro Val Pro Gly Gly Ser Asn

85 90 95

Asn His Asn Tyr Ala Asn Val Glu Leu Ile Val Asp Ile Ala Glu Arg

100 105 110

Asn Glu Cys Asp Ala Val Trp Ala Gly Trp Gly His Ala Ser Glu Asn

115 120 125

Pro Leu Leu Pro Ala Arg Leu Ala Glu Thr Gly Ile Ala Phe Leu Gly

130 135 140

Pro Asp Ala Ile Ala Met Arg Ala Leu Gly Asp Lys Ile Ser Ser Thr

145 150 155 160

Leu Leu Ala Gln Ser Ala Asp Val Pro Val Val Ser Trp Asn Gly Asp

165 170 175

Asp Leu Lys Val Thr Phe His Arg Glu Arg Gly Gly Ile Asp Glu Glu

180 185 190

Arg Tyr Arg Arg Ala Cys Val Ala Asn Val Asp Glu Ala Arg Ala Ala

195 200 205

Ala Asp Arg Ile Gly Tyr Pro Val Met Ile Lys Ala Ser Glu Gly Gly

210 215 220

Gly Gly Lys Gly Ile Arg Leu Cys Arg Arg Pro Glu Asp Val Arg Asp

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Ala Phe Arg Gln Val Ala Gly Glu Ile Pro Gly Ser Pro Ile Phe Ile

245 250 255

Met Lys Met Val Asp Gln Ala Arg His Leu Glu Val Gln Ile Val Ala

260 265 270

Asp Glu Tyr Gly His Ala Ile Ala Leu Tyr Gly Arg Asp Cys Ser Val

275 280 285

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Lys Met Val Gly Tyr Val Gly Ala Gly Thr Val Glu Tyr Leu Tyr Asp

325 330 335

Gly Arg Arg Phe Tyr Phe Leu Glu Leu Asn Pro Arg Leu Gln Val Glu

340 345 350

His Pro Val Thr Glu Trp Ile Thr Gly Val Asn Leu Pro Ala Val Gln

355 360 365

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370 375 380

Ala Leu Tyr Gly Asn Arg Pro Asp Leu Asp Leu Glu Arg His Gln Pro

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Asn Pro Pro His Gly His Val Ile Ala Cys Arg Val Thr Ala Glu Asn

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Pro Asn Ala Phe His Val Ser Leu Ala Gln His Pro Glu Glu Arg Val

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Arg Leu Ser Ile Asp Gly Arg Thr Cys Val Phe Pro Gly Glu Met Asp

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Ala Leu Ser Phe Leu Ala Gly Arg Ile Pro Ser Thr Leu His Ala Ala

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820 825 830

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885 890 895

Val Asn Thr Glu Lys Tyr Phe Ala Gln Gly Arg Arg Leu Asp Glu Val

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Leu Phe Asp Leu Arg Glu Gln His Arg Glu His Leu Glu Val Val Ala

915 920 925

Asp Ile Met Leu Ala His Ala Gln Leu Ala Arg Lys Asn Gln Leu Met

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Leu Ala Leu Leu Asp His Ile Ala Ala Asp Ala Ser Leu Leu Arg Ser

945 950 955 960

Val Ile Val Arg Gln Cys Leu His Glu Val Ala Ala Phe Ile His Pro

965 970 975

Asp Tyr Ser Gln Leu Ala Leu Arg Ala Arg Leu Leu Leu Ala Ser Ser

980 985 990

Arg Arg Arg Ala Leu Pro Glu Arg Arg Glu Arg Leu Cys Lys Gln Ile

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Leu His Ala Val Val Glu Ser Gln Glu Ser Ile Leu Asp Ala Leu

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Arg Ala Leu Trp Arg Phe Gln Tyr Arg Ser Asn Leu Asn Ala Phe

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Ala Ser Ala Pro Leu Ala Arg Arg Gln Leu Arg Ser Tyr Asp Ser

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Ser Ala Glu Gly Ile Gly Val Asn Val Leu Thr Ile Ala Ile Pro

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Ala Asp Ala Asp Asp Arg Leu Gln Ala Ser Asn Ala Asn Asp Ser

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Arg Ala Phe Val Arg Gln Ala Glu Val Tyr Ala Ser Pro Ser Asp

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Ser Ile Asp Val Asp Asp Val Glu Ala Ile Cys Thr Arg Leu Phe

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Tyr Arg Phe Ser Ser Arg Cys Trp Arg Leu Arg Val Phe Met Val

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Ile Tyr Gly Ala Glu Asp Gly Ile Gly Val Glu Asn Leu Met Gly

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Ile Met Tyr Pro Asn Gly Val Thr His Leu Arg Val Ser Asn Asp

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Arg Thr Ala Ser Tyr Ala Gly Ala Asn Ala Ala Thr Ala Ala Ala

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Pro Gly Ala Ser Ser Leu Ala Thr Ser Gly Ala Ala Leu Ala Asn

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Pro Ala Thr Gly Val Glu Glu Val Pro Ala Ala Leu Pro Ser Gly

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Ser Ser Ser Leu Ala Leu Arg Ser Thr Ala Val Ala Ala Pro Val

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Ser Val Ala Ser Ala Gly Ala Pro Leu Asn Thr Thr Gly Ser Ile

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Phe Ser Gly Gly Ala His Asp Met Phe Gln Glu Ile Leu Lys Phe

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Val Asp Ile Lys Phe Arg Thr Arg Asp Leu Leu Lys Thr Met Gln

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Arg Leu Leu Pro Ser Ser Arg Arg Asp Glu Ser Asp Ser Ser Ala

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Ser Asp Val Val Gly Met Leu Ser Leu Asp Ala Ser Ser Ser Ser

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Gly Leu Gly Asp Leu Glu Ala Pro Ser Ser Gly Glu Gln Ala Ala

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Gly

<210> 21

<211> 1596

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 21

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cagttaggag ccctgctgca agctgcagca ccgctcgtat tcatcttgcg ctatgcgctt 840

gacatggcca tgcaagcgag tccgttccgg tcctcgatcc tccaggtgca tgcggacccg 900

gggctgctcg aggaacggcg tgaaatcatg cgtccaacga cgccgttttc gctcttcttg 960

atagaatatc atcagcgtga tccgatcttc gggcgcttca tggctctctg ctccatgctg 1020

cctcaacttt tattcgccgc agaggtcaca gctgtctact gttggcgaag tccgcgcgca 1080

ttgctcctag ctgttggcca gattgtgaac gagacgctga gctacgcact caagcgatcg 1140

tgtcggatac ctcgcccgcc aatcgctcga ctggaagcag atgcgttcgg ttggccctct 1200

tcacacgctc agttcatgtc ctacttgtac gttttctacg tactctatgt gtctaggcca 1260

cagcgcaagg catcatcgag ccacaacggt gaaatgatgc accagacgct tccgaagcgg 1320

aggaagacga ccgattcaat ttcggaaacc gtggcagtga tgtttttgct aggtctgtca 1380

tccgttctgg tggctgcctc aagagtatac ctggcatatc attatcccag tcaggtttgg 1440

tatggaatca tcatgggcac tattttcgcg ataacctggt tccttgcgag tgaaaacgtt 1500

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<210> 22

<211> 532

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 22

Met Leu Leu Ala Glu Ser Leu Gly Gly Val Ala Phe Val Thr Val His

1 5 10 15

Thr Val Leu Cys Val Ala Val Leu Tyr Leu Pro Trp Asn Arg Gly Asp

20 25 30

Arg Glu Ser Phe Arg Val Thr Cys Leu Gly Ala Leu Ser Thr Cys Ala

35 40 45

Val Ile Ala Leu Ser Leu Val Asn Leu Gln Leu Phe Phe Thr Gly Leu

50 55 60

Thr Trp Arg Glu Leu Ser Arg Thr Tyr His Trp Leu Arg Pro Trp His

65 70 75 80

Ser Trp Gln Val Tyr Leu Leu Asp Ser Gly Gly Phe Leu Val Leu Leu

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Phe Leu His Glu Tyr Arg Lys Arg Gln Gln Thr Pro Val Lys Ser Ser

100 105 110

Ser Ser Ser Thr Cys Ala Ser Thr Ser Gln Ser Ala Cys Pro Asn Ala

115 120 125

Glu Asn Gly Ile Tyr Arg Asn Glu Arg Arg Asn Thr Trp Cys Met Phe

130 135 140

Arg Ser Leu Leu Ile Ala Pro Ile Thr Glu Glu Leu Leu Phe Arg Cys

145 150 155 160

Val Phe Asp Ala Ala Met Arg Ser Ala Gln Val Pro Glu Leu Ala Ser

165 170 175

Met Ile Phe Asn Gly Val Met Phe Ala Val Ala His Ala His His Tyr

180 185 190

Phe Arg His Gln Ser Arg Ser Leu Leu Gly Lys Gln Leu Leu Val Thr

195 200 205

Phe Cys Phe Gly Cys Val Gln Val Val Cys Leu Arg Arg Thr Asp Tyr

210 215 220

Ser Leu Trp Ala Cys Ile Ala Thr His Ala Leu Ala Asn Ala Leu Asp

225 230 235 240

Leu Gln Lys Val Phe Ser Asp Arg Gly Ala Ser His Phe Leu Tyr Gly

245 250 255

Asp Val Gly His Gln Leu Gly Ala Leu Leu Gln Ala Ala Ala Pro Leu

260 265 270

Val Phe Ile Leu Arg Tyr Ala Leu Asp Met Ala Met Gln Ala Ser Pro

275 280 285

Phe Arg Ser Ser Ile Leu Gln Val His Ala Asp Pro Gly Leu Leu Glu

290 295 300

Glu Arg Arg Glu Ile Met Arg Pro Thr Thr Pro Phe Ser Leu Phe Leu

305 310 315 320

Ile Glu Tyr His Gln Arg Asp Pro Ile Phe Gly Arg Phe Met Ala Leu

325 330 335

Cys Ser Met Leu Pro Gln Leu Leu Phe Ala Ala Glu Val Thr Ala Val

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Tyr Cys Trp Arg Ser Pro Arg Ala Leu Leu Leu Ala Val Gly Gln Ile

355 360 365

Val Asn Glu Thr Leu Ser Tyr Ala Leu Lys Arg Ser Cys Arg Ile Pro

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Arg Pro Pro Ile Ala Arg Leu Glu Ala Asp Ala Phe Gly Trp Pro Ser

385 390 395 400

Ser His Ala Gln Phe Met Ser Tyr Leu Tyr Val Phe Tyr Val Leu Tyr

405 410 415

Val Ser Arg Pro Gln Arg Lys Ala Ser Ser Ser His Asn Gly Glu Met

420 425 430

Met His Gln Thr Leu Pro Lys Arg Arg Lys Thr Thr Asp Ser Ile Ser

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Glu Thr Val Ala Val Met Phe Leu Leu Gly Leu Ser Ser Val Leu Val

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Ala Ala Ser Arg Val Tyr Leu Ala Tyr His Tyr Pro Ser Gln Val Trp

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Tyr Gly Ile Ile Met Gly Thr Ile Phe Ala Ile Thr Trp Phe Leu Ala

485 490 495

Ser Glu Asn Val Phe Leu Ser Tyr Val Arg Ser Leu Arg Ile Leu Val

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Trp Leu Gly Phe Gly Glu Asp Asp Ser Asp Leu Phe Arg Ser Ile Leu

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Arg Asp Val His

530

<210> 23

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 23

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catttgtttt gtaggagttc ggcaaatcgt agagtctgcg ggaagctttt tactggttca 120

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gcgcagcaga ttccaccttt atttgctgag gtcgctgatg gagcttttgc attcaaccct 900

gatcctatcg aggtcatgga ggcaattcgc acactataca aagttcgtca aacgcttatt 960

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gagcgaggcg ctacagtaat tcgtctcggc ggaactcact taaccccctg cgcacaggat 1080

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<210> 24

<211> 417

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 24

Met Ser Cys Lys Gly Ala Ala Phe Gly Phe Ala Thr Leu Asn Gly Leu

1 5 10 15

Ser Val Arg Arg His Leu Phe Cys Arg Ser Ser Ala Asn Arg Arg Val

20 25 30

Cys Gly Lys Leu Phe Thr Gly Ser Gln Cys Pro Arg Ala Pro Arg Tyr

35 40 45

Phe Leu Val His Thr Asp Lys Ser Ala Gly Asn Thr Pro Ser Thr Arg

50 55 60

Gly Trp Glu Glu Tyr Ala Gly Asn Phe Ile Phe Arg Pro Pro His Val

65 70 75 80

Ile Val Arg Pro Ser Gln Arg Thr Ala Tyr Gly Thr Gly Asn Gly Thr

85 90 95

Pro Leu Pro Pro Lys Ala Leu Val His Phe Leu Gly Gly Ala Phe Val

100 105 110

Gly Ala Ala Pro Gln Val Ala Tyr Arg Trp Phe Leu Glu Gln Leu Ala

115 120 125

Leu Glu Gly Phe Val Val Val Ala Thr Pro Tyr Arg Leu Ser Phe Asp

130 135 140

His Leu Trp Thr Met Asp Asp Val Leu Thr Arg Phe Ser Ala Ala Ala

145 150 155 160

Gly Met Leu Ala Leu Asp Tyr Gly Pro Ile Pro Val Val Gly Ile Gly

165 170 175

His Ser Leu Gly Ala Leu Leu His Thr Leu Gly Gly Ser Leu Phe Cys

180 185 190

Asn Ala Asp Gly Tyr Lys Ala Ala Asn Val Leu Ile Ala Phe Asn Asn

195 200 205

Arg Arg Ala Glu Asp Ala Ile Pro Leu Phe Arg Glu Phe Ile Ala Pro

210 215 220

Val Val Lys Thr Val Ala Gln Thr Gly Glu Leu Ser Asp Val Ile Glu

225 230 235 240

Arg Leu Val Ile Asp Gly Pro Ala Thr Phe Asp Thr Leu Phe Asp Thr

245 250 255

Val Thr Asp Val Val Phe Pro Gly Ser Arg Asp Ser Glu Leu Phe Ala

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Leu Val Arg Gln Ser Arg Ala Leu Ala Gln Gln Ile Pro Pro Leu Phe

275 280 285

Ala Glu Val Ala Asp Gly Ala Phe Ala Phe Asn Pro Asp Pro Ile Glu

290 295 300

Val Met Glu Ala Ile Arg Thr Leu Tyr Lys Val Arg Gln Thr Leu Ile

305 310 315 320

Val Ser Phe Lys Asn Asp Ile Leu Asp Asp Ser Arg Ser Leu Gln Lys

325 330 335

Ala Leu Asp Pro Glu Arg Gly Ala Thr Val Ile Arg Leu Gly Gly Thr

340 345 350

His Leu Thr Pro Cys Ala Gln Asp Phe Leu Asp Pro Arg Leu Arg Gln

355 360 365

Ser Ser Phe Phe Ser Ser Phe Thr Cys Glu Lys Asp Asn Asp Thr Ser

370 375 380

Tyr Ile Leu Arg Glu Ala Met Arg Arg Ile Val Leu Arg Glu Ala Met

385 390 395 400

Leu Met Lys Asn Ser Val Val Ala Tyr Leu Asp Arg Ala Leu Gly Met

405 410 415

Glu

<210> 25

<211> 447

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 25

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<211> 149

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 26

Met Asn Asp Tyr Gln Lys Ile Gly Val Thr Leu Ser Ala Ile Ser Val

1 5 10 15

Leu Phe Tyr Gly Leu Gly Val Val Leu Phe Phe Asp Thr Gly Leu Ile

20 25 30

Ser Ile Ala Ser Val Leu Phe Thr Ser Ser Leu Phe Phe Ile Leu Gly

35 40 45

Phe Lys Arg Ala Ala Arg Phe Phe Phe Ser Arg Arg Lys Leu Arg Ala

50 55 60

Ser Ala Leu Phe Phe Gly Gly Phe Gly Leu Val Leu Leu Arg Trp Pro

65 70 75 80

Val Leu Gly Thr Leu Val Gln Ala Val Gly Ala Leu Trp Leu Phe Leu

85 90 95

Ser Phe Ile Pro Ile Ala Met Thr Phe Leu Arg Gln Val Pro Val Leu

100 105 110

Gly Gln Leu Val Asp Thr Ser Ile Val Arg Arg Ile Leu Arg Arg Leu

115 120 125

Ser Ala Ala Ser Gly Tyr Leu Glu Thr Asn Gly Gly Ile Gly Phe Glu

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145

<210> 27

<211> 2118

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 27

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gggcgcggtg accatccgct aatgggccga gtcaaacgtc gcatattccc agaggatgtc 840

acactgaatc ttggtcgtga cgcacctatt ccgccgtgtc catttaaagg ccatgactgg 900

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cgcgataagc tagaggagag cagagcgtat cttgaggcgc tcaaaatggc tcgaggaaag 1680

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<211> 706

<212> PRT

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 28

Met His Gln Gln Asp Pro Asp Glu Ile Pro Leu Ser Glu Leu Leu Gly

1 5 10 15

Asn Ser Gly Glu Ser Val Pro Arg Val Val Ser Val Ala Arg Gln Gly

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Gly Phe Gly Ala Pro Ser Ile Gln Val Ala Lys Lys Ser Ser Ser Ala

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Ala Leu Ser Glu Asp Glu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Ile Gly Thr Glu

50 55 60

Arg Lys Lys Glu Cys Ser Arg Arg Lys Gly Lys Val Glu Pro Cys Arg

65 70 75 80

Lys Ala Pro Lys Arg Lys Cys Glu Arg Met Lys Ala Glu Lys His Arg

85 90 95

Lys Ala Lys Lys Leu Gln Ala Thr Ser Thr Lys His Arg Ala Glu Asp

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Glu Ser Ile Lys Trp Cys Ser Leu Glu His Asn Gly Val Leu Phe Pro

115 120 125

Pro Glu Tyr Glu Pro His Gly Arg Pro Leu Leu Tyr Asp Gly Cys Glu

130 135 140

Ile Ala Leu Pro Pro Glu Ala Glu Glu Val Ala Thr Phe Tyr Ala Ser

145 150 155 160

Lys Leu Gly Thr Val Tyr Leu Glu Lys Glu Thr Phe Arg Lys Asn Phe

165 170 175

Phe Asp Asp Phe Arg Lys Thr Leu Pro Val Asp Leu Arg Lys Arg Ile

180 185 190

Val Lys Leu Glu His Cys Asp Phe Ser Arg Ile Arg Glu Tyr Leu Asp

195 200 205

Glu Leu Lys Glu Arg Lys Gln Ser Met Pro Pro Ser Lys Arg Lys Glu

210 215 220

Leu Arg Glu Ala Glu Ala Gln Arg Val Ala His Tyr Thr Val Ala Ile

225 230 235 240

Val Asp Gly Arg Lys Glu Lys Val Ala Asn Tyr Arg Val Glu Pro Pro

245 250 255

Gly Leu Phe Leu Gly Arg Gly Asp His Pro Leu Met Gly Arg Val Lys

260 265 270

Arg Arg Ile Phe Pro Glu Asp Val Thr Leu Asn Leu Gly Arg Asp Ala

275 280 285

Pro Ile Pro Pro Cys Pro Phe Lys Gly His Asp Trp Gly Ser Ile Val

290 295 300

His Asn Gln Arg Val Thr Trp Leu Ala Cys Trp Arg Asp Pro Ile Ser

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Asp Glu Tyr Lys Tyr Val Trp Leu Ser Ala Ser Ser His Phe Lys Ala

325 330 335

Met Ser Asp Gln Glu Lys Phe Glu Lys Ala Gln Gln Leu Ser Lys His

340 345 350

Ile Thr Lys Ile Arg Asn Glu Tyr Thr Lys Gly Leu Glu Ser Ala Asp

355 360 365

Arg His Thr Gln Gln Arg Ser Val Ala Leu Tyr Leu Ile Asp Lys Leu

370 375 380

Ala Leu Arg Val Gly Asn Glu Lys Gly Glu Asp Glu Ala Asp Thr Val

385 390 395 400

Gly Cys Cys Ser Leu Arg Val Glu His Ile Thr Leu Gln Glu Pro Asn

405 410 415

Ile Val Gln Leu Asp Phe Leu Gly Lys Asp Ser Met Arg Tyr Phe Asn

420 425 430

Arg Val Arg Val Glu Ala Leu Val Phe His Arg Leu Arg Glu Phe Leu

435 440 445

Lys Gly Lys Arg Val Ser Asp Asn Val Phe Asp Glu Leu Lys Val Glu

450 455 460

Glu Leu Asn Asp Tyr Leu Lys Ser Leu Met Pro Gly Leu Ser Ala Lys

465 470 475 480

Val Phe Arg Thr Tyr Asn Ala Ser Tyr Thr Leu Asp Lys Leu Leu His

485 490 495

Ser Val Lys Thr Pro Gly Pro Asp Ile His Ser Arg Leu Leu Phe Tyr

500 505 510

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Val Ser Leu Ser Thr Ser Lys Ile Asn Tyr Leu Asp Pro Arg Ile Thr

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

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cgtcttttga ctcacaactt cgcgatatct ttgttctctg tgtttcttcg ttcgttgacc 600

<210> 30

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 30

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agcctcactt gggcatatac cagtgagtgg gtgcgggcac cactagtccg gtgaactcgg 120

ccggtcagcc aaatcctcca cccggaaggt tcgcaccgtc actgcagcga gcgcagtcca 180

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catgcccgcc catgtgtcgg acccattccg tgcaagcgag gcacgtcgag cgatttgggg 300

cgcgtgcata ggcccgcgca cgatgaatga tctggttgca tgcgtacaca aacaggactt 360

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tagcgagatc tccgacgacg gacgtgggtc gagattcgat ttcggaggcc gcacgacgca 540

aaaaggtcat tcgagtttgt gtctgcggac tctgaacgtt cctcgtaaag cacttctga 599

<210> 31

<211> 500

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 31

ccctcactgg catggcaaag ccgttctgtc tccgtgccgc atctgctcca ggggtgtaag 60

cgcgattgcg aatgctcaag gaaggttacg tgcacagtgg aatgcacgaa ataaccagta 120

catccgaaag gaagtacaag taatggaacc tgaaggtagg gtccagcagc atgatgggcg 180

ctttcccgaa tgtcaatacc gatctatcgc gcaatctggc ctccatggtc catagaagcg 240

ctttggcatc ggcgggagaa ccgggcgtcg ccccgcgctg cgctccatgg aacaatgctc 300

aaatcacgaa taaattgtac tttattaaat ctgtatgtac tatgatgtac aaaatagcat 360

tccaggaatc ccgagatcac acacgcgctc gagacgtgaa ctgtctcgtc actctcggct 420

acggcttcat cttcctcgta tttcttcgcc attagatacg agtgcggtaa gattctgggc 480

tgaagttttc aatattagtg 500

<210> 32

<211> 4700

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> pQE80

<400> 32

tagctgagct tggactcctg ttgatagatc cagtaatgac ctcagaactc catctggatt 60

tgttcagaac gctcggttgc cgccgggcgt tttttattgg tgagaatcca agctagcttg 120

gcgagatttt caggagctaa ggaagctaaa atggagaaaa aaatcactgg atataccacc 180

gttgatatat cccaatggca tcgtaaagaa cattttgagg catttcagtc agttgctcaa 240

tgtacctata accagaccgt tcagctggat attacggcct ttttaaagac cgtaaagaaa 300

aataagcaca agttttatcc ggcctttatt cacattcttg cccgcctgat gaatgctcat 360

ccggaatttc gtatggcaat gaaagacggt gagctggtga tatgggatag tgttcaccct 420

tgttacaccg ttttccatga gcaaactgaa acgttttcat cgctctggag tgaataccac 480

gacgatttcc ggcagtttct acacatatat tcgcaagatg tggcgtgtta cggtgaaaac 540

ctggcctatt tccctaaagg gtttattgag aatatgtttt tcgtctcagc caatccctgg 600

gtgagtttca ccagttttga tttaaacgtg gccaatatgg acaacttctt cgcccccgtt 660

ttcaccatgg gcaaatatta tacgcaaggc gacaaggtgc tgatgccgct ggcgattcag 720

gttcatcatg ccgtttgtga tggcttccat gtcggcagaa tgcttaatga attacaacag 780

tactgcgatg agtggcaggg cggggcgtaa tttttttaag gcagttattg gtgcccttaa 840

acgcctgggg taatgactct ctagcttgag gcatcaaata aaacgaaagg ctcagtcgaa 900

agactgggcc tttcgtttta tctgttgttt gtcggtgaac gctctcctga gtaggacaaa 960

tccgccctct agattacgtg cagtcgatga taagctgtca aacatgagaa ttgtgcctaa 1020

tgagtgagct aacttacatt aattgcgttg cgctcactgc ccgctttcca gtcgggaaac 1080

ctgtcgtgcc agctgcatta atgaatcggc caacgcgcgg ggagaggcgg tttgcgtatt 1140

gggcgccagg gtggtttttc ttttcaccag tgagacgggc aacagctgat tgcccttcac 1200

cgcctggccc tgagagagtt gcagcaagcg gtccacgctg gtttgcccca gcaggcgaaa 1260

atcctgtttg atggtggtta acggcgggat ataacatgag ctgtcttcgg tatcgtcgta 1320

tcccactacc gagatatccg caccaacgcg cagcccggac tcggtaatgg cgcgcattgc 1380

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catttgcatg gtttgttgaa aaccggacat ggcactccag tcgccttccc gttccgctat 1500

cggctgaatt tgattgcgag tgagatattt atgccagcca gccagacgca gacgcgccga 1560

gacagaactt aatgggcccg ctaacagcgc gatttgctgg tgacccaatg cgaccagatg 1620

ctccacgccc agtcgcgtac cgtcttcatg ggagaaaata atactgttga tgggtgtctg 1680

gtcagagaca tcaagaaata acgccggaac attagtgcag gcagcttcca cagcaatggc 1740

atcctggtca tccagcggat agttaatgat cagcccactg acgcgttgcg cgagaagatt 1800

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cacgcggttg ggaatgtaat tcagctccgc catcgccgct tccacttttt cccgcgtttt 2040

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atactctgcg acatcgtata acgttactgg tttcacattc accaccctga attgactctc 2160

ttccgggcgc tatcatgcca taccgcgaaa ggttttgcac cattcgatgg tgtcggaatt 2220

tcgggcagcg ttgggtcctg gccacgggtg cgcatgatct agagctgcct cgcgcgtttc 2280

ggtgatgacg gtgaaaacct ctgacacatg cagctcccgg agacggtcac agcttgtctg 2340

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cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat 2520

gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgct cttccgcttc ctcgctcact gactcgctgc 2580

gctcggtcgt tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc aaaggcggta atacggttat 2640

ccacagaatc aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc aaaaggccag caaaaggcca 2700

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atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta taaagatacc 2820

aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg ccgcttaccg 2880

gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcatagc tcacgctgta 2940

ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac gaaccccccg 3000

ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac ccggtaagac 3060

acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg aggtatgtag 3120

gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga aggacagtat 3180

ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt agctcttgat 3240

ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt ttgcaagcag cagattacgc 3300

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agatcctttt aaattaaaaa tgaagtttta aatcaatcta aagtatatat gagtaaactt 3480

ggtctgacag ttaccaatgc ttaatcagtg aggcacctat ctcagcgatc tgtctatttc 3540

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catctggccc cagtgctgca atgataccgc gagacccacg ctcaccggct ccagatttat 3660

cagcaataaa ccagccagcc ggaagggccg agcgcagaag tggtcctgca actttatccg 3720

cctccatcca gtctattaat tgttgccggg aagctagagt aagtagttcg ccagttaata 3780

gtttgcgcaa cgttgttgcc attgctacag gcatcgtggt gtcacgctcg tcgtttggta 3840

tggcttcatt cagctccggt tcccaacgat caaggcgagt tacatgatcc cccatgttgt 3900

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tgttatcact catggttatg gcagcactgc ataattctct tactgtcatg ccatccgtaa 4020

gatgcttttc tgtgactggt gagtactcaa ccaagtcatt ctgagaatag tgtatgcggc 4080

gaccgagttg ctcttgcccg gcgtcaatac gggataatac cgcgccacat agcagaactt 4140

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tgttgagatc cagttcgatg taacccactc gtgcacccaa ctgatcttca gcatctttta 4260

ctttcaccag cgtttctggg tgagcaaaaa caggaaggca aaatgccgca aaaaagggaa 4320

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ttatcatgac attaacctat aaaaataggc gtatcacgag gccctttcgt cttcacctcg 4560

agaaatcata aaaaatttat ttgctttgtg agcggataac aattataata gattcaattg 4620

tgagcggata acaatttcac acagaattca ttaaagagga gaaattaact atgagaggat 4680

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<210> 33

<211> 1986

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 33

gcgtgagtca gttcactgac aataagggaa acttgcgctt caaatgggag ccagccgagg 60

ccgtgttggc ggtggcattc gatgttcctg tgcccgggta tgatacatac aattgcatca 120

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gctcacatac tgtcaatggt gtcgcggaaa tacactcgga actcgtgcga acccgtctct 780

tccctgattt taaccgcttc gagccgaaaa agtttgtgaa catcacaaac ggtgtgaccc 840

ctcgacgctg gatactggaa gcaaatcccg ccttgagtgc ggtgttttcc cgctggacgg 900

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accctgacct gcaacgggaa tttttcgaag ccaaaaagga aaataagcgg cgtctcgctg 1020

aatacattcg agaaaagaat ggcgtccacg tggatgtgaa tgccctcttc gacatccagg 1080

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ctgccggcat ggaggcgtca ggaacgagca acatgaagtt tgtgatgaac ggcggtctca 1440

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tgtactgcgg tcaagacact tttcaggaaa ttgtacgagc cctcgatcca gccaacgact 1680

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cctataggga ccagcgctcg tggctggcta agtgtattgt gagcacggct cgcatgggta 1800

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gtgacg 1986

<210> 34

<211> 600

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

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<210> 35

<211> 717

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

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<210> 36

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 36

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<211> 2757

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 37

gaactgaggg gcgaacgcag tcctccttgc attgttaagc aaaaaatatt ctctacaagc 60

aatttgtgta caatctatat ggtacgctgc gtagagattt gcatgtcctg ctctacagtg 120

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cacggctaat tcctaatggg cagaagcaag cgtcggctcc cacaaagttc agtagaacgg 2340

cgggggtcag ttgccacgaa cgctttacgt gcggcatcaa gatgatattt cattgcgaat 2400

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<212> DNA

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tatatgaata gattggacac tgcatttcct gggtccaata acgccatcga acaaaatgga 840

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<212> DNA

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<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

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cgcgctacga gccgcgaggc cgtcggaccc cggctgcagg ctggtgacca gcctggtgcc 120

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gtcatcgagg caacgggtgt ctttatctca agggacgggg caggcaagca catcgaagcg 540

ggtgccaaaa aggtggtcat cacagcgcca gcgaaaggcg aaggcgtccc gacctttgtc 600

atgggtctga acaacaccca gtataaccac gccaccgacc atgtggtgag caacgcgtcg 660

tgcaccacca acggcatggc accgttcgtg aaggtgctcg acgaggaatt cggcatcgtt 720

tccggcatga tgaccacgac gcattcgtat accggggacc agcgtctgct ggatgcatcg 780

catcgcgacc tgcgtcgcgc ccgtgcggcc gcgttgaaca tcgtgccgac ctcgacgggt 840

gccgcgcagg cggttgcgct ggtgtatcca ccagtgaagg gcaagctcac cggcattgcc 900

ctgcgagtgc cgaccccgaa cgtttctatc gtcgactttg tctgcacggt gaagaaacca 960

acgttcaagg aggaagtgaa tgcagctttc gtacgagcag cggaagggcc aatgaagggt 1020

atcctggcgg tgagcgatga gccgctcgtc tcatcggatt atcggatgaa cgtcaactca 1080

agcattgtgg atgcagcgct gacgacggtg atgggtgata cgctcgtcaa agtggtagcc 1140

tggtacgaca acgagtatgg ctacagtcaa cgggttgtgg acttggccaa ctacatagcg 1200

cagcatttc 1209

<210> 41

<211> 1572

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> 密码子优化的GP (codon optimized GP)

<400> 41

atggttccac aagcactgtt gctcgtgcct attctaggct tttccctgtg tttcgggaag 60

tttccgattt acaccattcc tgacacgttg ggcccatgga gtccgatcga catccatcac 120

ctgagctgcc caaacaactt ggtggttgag gatgaaggtt gcacgaatct ttccggtttc 180

tcgtatatgg aactgaaggt tggttacact agtgcgatca aggtgaacgg ttttacatgc 240

acaggagtcg ttaccgaagc ggagacatat accaactttg taggctacgt gaccactacg 300

ttcaaacgga agcactttcg cccgactcct gatgcctgca gagctgctta caactggaag 360

atggcaggag atccgcgtta tgaggagtcg ctccactccc cgtatccaga ttaccattgg 420

ctgcgaacag tgaagacgac taaggagagc ctggtcatca tatcgccctc agttgctgac 480

ctcgacccct atgacaatag cctgcattcg cgggtctttc ctagtggcaa atgcagcggg 540

ataacccgct cttcggtgta ctgctccact aaccacgact acacggtgtg gatgcctgag 600

atcttgcgac tcggcacgtc atgcgacatt ttcaccaaca gtcgaggcaa acgcgtgagc 660

aaagggagta cgacgtgtgg cttcatcgac gagaggggcc tctacaagtc actcaaaggg 720

gcctgcaagc tcaagctgtg tggcgttctt ggcctacgct tgatggatgg aacctgggta 780

tcaatgcaga catccaatga gacgaagtgg tgtccaccaa atcagctcgt aaatctccac 840

gacttacgct ccgatgaact ggaacatctg gtgattgaag agctcgtcaa gaaacgcgaa 900

gagtgcttag atgcgctcga gtccatcatt acgacgaaaa gcgtcagctt ccgccggctt 960

tcacacctgc gaaagctggt tcccggcttt ggtaaggcct acacgatctt caacaagacc 1020

ttgatggagg cagaagccca ctacaaatcg gtgcgtacct ggaacgagat cataccctct 1080

aaagggtgtc ttcgggtcgg aggtcgttgt catccgcatg tcaatggggt gtttttcaac 1140

ggcattatcc ttggtcccga tggtcacgtc ctgattccgg agatgcagtc gagcctcttg 1200

cagcagcata tcgagctcct ggagtcgtct gtgattccgc ttatgcatcc actcgcggat 1260

ccctttaccg tgttcaagga cggtgacgaa actgaggact tcatcgaggt ccacttaccg 1320

gacgtccacg aacaggtatc gggagtggat ctggggctgc ctaactgggg aaagtatgtg 1380

ctgcttagcg caggaacgct aatcgcgctc gttttgatca ttttcctaat gacctgttgc 1440

cgcaaggttg accggccgga aagtacgcaa cgctctctgc gtggtacagg ccgtaacgtc 1500

tcggttacgt cacaatcggg caaattcatc aacagctggg agtcgtacaa atccggtggc 1560

gaaacaggcc tt 1572

<210> 42

<211> 717

<212> DNA

<213> 维多利亚水母(Aequorea victoria)

<400> 42

atgagcaagg gcgaggagct gttcaccggg gtggtgccca tcctggtcga gctggacggc 60

gacgtaaacg gccacaagtt cagcgtgcgt ggcgagggcg agggcgatgc caccaacggc 120

aagctgaccc tgaagttcat ctgcaccacc ggcaagctgc ccgtgccctg gcccaccctc 180

gtgaccaccc tgacctacgg cgtgcagtgc ttcagccgct accccgacca catgaagcgt 240

cacgacttct tcaagtccgc catgcccgaa ggctacgtcc aggagcgcac catctcgttc 300

aaggacgacg gcacatacaa gacccgcgcc gaggtgaagt tcgagggcga caccctggtg 360

aaccgcatcg agctgaaggg catcgacttc aaggaggacg gcaacatcct ggggcacaag 420

ctggagtaca actttaacag ccacaacgtc tatatcacag ccgacaagca gaagaacggc 480

atcaaggcaa acttcaagat ccgccacaac gttgaggacg gcagcgtgca gctcgccgac 540

cactaccagc agaacacccc catcggcgac ggccccgtgc tgctgcccga caaccactac 600

ctgagcaccc agtccgttct gagcaaagac cccaacgaga agcgcgatca catggtcctg 660

ctggagttcg tgaccgccgc cgggatcact cacggcatgg acgagctgta caagtaa 717

<210> 43

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> Co1肽(Co1 peptide)

<400> 43

Ser Phe His Gln Leu Pro Ala Arg Ser Pro Leu Pro

1 5 10

<210> 44

<211> 2781

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 44

gaactgaggg gcgaacgcag tcctccttgc attgttaagc aaaaaatatt ctctacaagc 60

aatttgtgta caatctatat ggtacgctgc gtagagattt gcatgtcctg ctctacagtg 120

cgaagaagca ttctatttta cgcagcggga gtaaagcaaa atcgagttga acgactatct 180

gacgcctacg caaagcgatt ccgcgtaccg tgtatctgca aagtagcact tcttaatggt 240

agagccgcaa ttgagaacgt tcggagtgtt ttcctggttc tgctggatgg atttttggta 300

aactatattt aatcttctag tgggaggatg attgcgcggg caaaaccata ttttccagga 360

tgagtcgtac tgaaagaagc acagtattca ctatgccggg cgaggtaggt gctagtttgg 420

gtttgacctc acgcgatgcg cacaacggct gcggaatacg cacaactcga tactgatcgt 480

cgagtcggca agactgcaac atgctcatgg ctcaggtcat ccgaagagaa acctcaccat 540

aaataccgtg ttcatacttc acatcgtaca taagaaaaat tacttttcag gccctctaca 600

ataaataaaa ttggattcca cttatcgcgt ttattgagag atttaccgga cgcttccgtc 660

gcaaaaaaaa gaagagacat aagaaacttg acccactgtg tagaaggaga gcaaacaccg 720

caaagccctg cgaaaacctc atgcggtgat gtcgcgccct gctgcgatcg taacgaaggc 780

cattcgtcgc cacgcgcaac gcagggcaag agacggcttg cgtacggtgc agaacaccga 840

actggctgtg aagaggatct cttctttgtc agtactaaaa ggcgtcgctt tctgggaatg 900

gagcagcttg ccaaggatct ttttgagata ggtgcggtca agtttggcac gttcaaactc 960

aagtctggga tagcgtctcc attctatgtc gatctgcgcg ttgctgtctc gtatcctcga 1020

gttctgagaa gcattgcggc tctgtaccta gagtgcttgc aggacttttc tggcgctttc 1080

gacgttattt gcggggttcc atacactgcg ctcccttttg cgacagcaat ggctgtgcag 1140

ggagacttac ctatggttat gtgtcgaaag gaggtcaaag accatggaac acggcgagtt 1200

gttgaaggtg ctttcacaca aggctctcgt tgcttaataa tcgaggacgt tgttacaagt 1260

ggttcaagta ttctggaagt tgtgggcgca ttgcgcgcag agggtctcaa agtggatcac 1320

gcgatcgtct tgcttgatag ggagcaaggc gggtgtgagg cgcttctcgg ccagggaata 1380

gggctccgat ctgttttccg catcagcgac cttgtcggaa cactccgcca ctcaggtcgg 1440

ttatcagttg aacaagtaac cgagttgttt gattatttcc actcaaccaa agtatcatcg 1500

agtcctctga gtaactctat tcaaagtgga tataaagtgc atcctctttc ctttgaacaa 1560

cgtctttcat tgattcgaaa caaagttggc cgtcggctat tggaaattat gttaaagaag 1620

cagtcgaacc ttgcagtggc agcggatgta acaaccagtg aagaattatt atccattgcc 1680

aatgaagtgg gtccacaaat atgcatttta aagacacata tggatattat tcaagattgg 1740

acggaaagcg tatctgaaaa actcgttcat ttagctaagt tgcatcactt tttgatattt 1800

gaagacagaa agtttgcaga tattggcaat actgtggaat tacagttgac tggaggtata 1860

tttcatattg cacagtgggc agacatagtg aatgctcata tcattgctgg tcctggaact 1920

attcaagcgc taagtcgatc tgctgaacat tgcggtattt tgttattagc acaaatgagt 1980

agcaaaggga acttggcagt acaagaatat acgcaaaagg cattagaatt tgctcaacaa 2040

tatgaagatg ctgtttttgg ttttatatca ttgggttgta ttggagatcc aaactttctt 2100

tattttactc ctggagtgaa gttagaagga ggaggtgact ctttaggtca acaatatacg 2160

gatcctaaga cagttattgc tattcaagga agcgatgtag ctattgtagg gaggggaatt 2220

attcagtctt ctaatcgacg tgaagcagca tcaacttatc gaaaagcctg ttgggatgct 2280

tatttacaac gacttgaaga atacgttgaa taattcctaa tgggcagaag caagcgtcgg 2340

ctcccacaaa gttcagtaga acggcggggg tcagttgcca cgaacgcttt acgtgcggca 2400

tcaagatgat atttcattgc gaatggagtt cgtcgacgtc agttgcatcc gcagaatgct 2460

tctttgtttc ggatatgtcc gcggcctgtg cccgcaacga atgttcctag aagtacattt 2520

cacggcgcct tgaacatgta gttaagataa gcgctcgaaa tcgtccctga ttcggcagtg 2580

actgtcccta gagctggatc ctatggtttc ttgaccctgt ggctacaata tgcgctcgac 2640

accgtcgaag atcagggaat cgctctagtg tcggcctgat ttccaccaag tgcactctgc 2700

actttttgaa atttttggag gacccattaa aaaaataaat gcaaggattc ctaagaatag 2760

agatacagtc agctgctagg g 2781

<210> 45

<211> 390

<212> DNA

<213> Cyanidioschyzon merolae (一种红藻)

<400> 45

atgttccatg tgacgtaccc gttcacgcag agacaatgct ttctccgttc acgagaagcg 60

tgccttgcaa cgttgccagc tggtgctttt cgaaagcacc tgtggcgccc ttcgtgctgg 120

tcgttccgca cacgtcttcg taaagaggcg tcgctacgga aatccacagt tctcgctccg 180

cttactcgcc gtctgcagct gagtctcttc ggcctcccag agcggttcgt tcgcaagtcc 240

aagtcgccgg tctcggcaga gtccagtgtc gccactgagc tcacacgtga tcgggtcaaa 300

gatccgacgc tcgcgaagta ctgggataca cttctggaaa tcaatgcact ggaggcggaa 360

ctggaacaac tcaaaagcga tgaactcaga 390

<210> 46

<211> 90

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> HA tag

<400> 46

atgtacccat acgatgttcc tgactatgcg ggctatccct atgacgtccc ggactatgca 60

ggataccctt atgacgttcc agattacgct 90

<210> 47

<211> 30

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> d184(+25)R

<400> 47

cgtcaccctc gggacttgat gtttacgttc 30

<210> 48

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> bT3'(+1)F

<400> 48

taaactagct atttatctgg tacatatcat tcataagcac atg 43

<210> 49

<211> 39

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> HS(-200)Fd184

<400> 49

gtcccgaggg tgacgcttat agcttacgtg gcggattcg 39

<210> 50

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> HS(-1)R

<400> 50

gaatccctgg ttctctcaca gg 22

<210> 51

<211> 35

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> J042(1)Fhs

<400> 51

gagaaccagg gattcatggt gtttacgtgt gctgc 35

<210> 52

<211> 41

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> J042(1209)R-link3

<400> 52

ggcgcctgca ccggatccga aatgctgcgc tatgtagttg g 41

<210> 53

<211> 35

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> GP(1)F-linker3

<400> 53

tccggtgcag gcgccatggt tccacaagca ctgtt 35

<210> 54

<211> 32

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> GP(1572)R-linker2

<400> 54

tccaccgcct ccaccaaggc ctgtttcgcc ac 32

<210> 55

<211> 35

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> sfGFP(1)F-linker2

<400> 55

ggtggaggcg gtggaggcat gagcaagggc gagga 35

<210> 56

<211> 35

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> sfGFP(714)Rbt

<400> 56

taaatagcta gtttacttgt acagctcgtc catgc 35

<210> 57

<211> 28

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> D184(1200)F

<400> 57

cgccttctcc tggacgagta cgcattgg 28

<210> 58

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> D184(+1400)R

<400> 58

ccagagccct accggcacgc c 21

<210> 59

<211> 23

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> APCC(-1)R

<400> 59

ggtcaacgaa cgaagaaaca cag 23

<210> 60

<211> 43

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> bT3'(+1)

<400> 60

taaactagct atttatctgg tacatatcat tcataagcac atg 43

<210> 61

<211> 35

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> SecA(1)Fapcc

<400> 61

cttcgttcgt tgaccatgtt ccatgtgacg taccc 35

<210> 62

<211> 90

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> SecA(390)R-linker-ha

<400> 62

atcgtatggg tacatcccgg tgaacagctc ctcgcccttg ctcataccac cacctccgcc 60

acctctgagt tcatcgcttt tgagttgttc 90

<210> 63

<211> 32

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> HA(1)F

<400> 63

atgtacccat acgatgttcc tgactatgcg gg 32

<210> 64

<211> 32

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> HA(90)R

<400> 64

agcgtaatct ggaacgtcat aagggtatcc tg 32

<210> 65

<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> GP(1)Fha

<400> 65

gttccagatt acgctatggt tccacaagca ctgttgc 37

<210> 66

<211> 69

<212> DNA

<213> 人工序列 (Artificial sequence)

<220>

<223> Co1-GP(1680)Rbt

<400> 66

taaatagcta gtttatggga gcggcgagcg cgccggcagc tggtggaagc taaggcctgt 60

ttcgccacc 69

PCT/RO/134表