一类4-磺酰亚胺-1H-吡咯类Mcl-1抑制剂及其抗肿瘤医药用途
阅读说明：本技术 一类4-磺酰亚胺-1H-吡咯类Mcl-1抑制剂及其抗肿瘤医药用途 (4-sulfimide-1H-pyrrole Mcl-1 inhibitor and anti-tumor medical application thereof ) 是由 尤启冬 姜正羽 于泽洲 朱鹏举 仝媛媛 金雨辉 郭小可 徐晓莉 王磊 于 2021-10-11 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一类4-磺酰亚胺-1H-吡咯类Mcl-1抑制剂及其抗肿瘤医药用途。本发明提供了一种4-磺酰亚胺-1H-吡咯类化合物,该化合物具有良好的Mcl-1抑制活性,部分化合物对Mcl-1的抑制活性达到纳摩尔级,且对Bcl-2蛋白有较好的选择性,具有开发成抗肿瘤药物的前景。(The invention discloses a 4-sulfimide-1H-pyrrole Mcl-1 inhibitor and an anti-tumor medical application thereof. The invention provides a 4-sulfimide-1H-pyrrole compound, which has good Mcl-1 inhibitory activity, part of the compound has nanomolar inhibitory activity to Mcl-1, has good selectivity to Bcl-2 protein, and has a prospect of being developed into antitumor drugs.)
技术领域
本发明属于药物化学领域，具体涉及一类4-磺酰亚胺-1H-吡咯类Mcl-1抑制剂及其抗肿瘤医药用途。
背景技术
细胞凋亡又称细胞程序性死亡，其对于清除有害细胞和潜在的危险细胞以及维持细胞内环境有重要作用。Mcl-1作为抗凋亡蛋白通常在肿瘤细胞中过表达，并且与癌症的发生和耐药性的产生密切相关，因而作为肿瘤治疗的潜在靶点被深入研究。
内源性凋亡通路中的一个重要过程是促凋亡蛋白Bax/Bak互相结合形成二聚体使线粒体外膜去极化，使得细胞色素c等凋亡因子外流，诱导下游凋亡信号通路转导。Mcl-1则能够通过其疏水沟槽与Bax/Bak结合抑制其二聚体的形成从而抑制细胞凋亡。
小分子的BH3模拟物能够模拟BH3结构域与Mcl-1蛋白的结合从而抑制Mcl-1与促凋亡蛋白的相互作用，这一策略被广泛地应用于Mcl-1小分子抑制剂的设计。近年来，越来越多小分子抑制剂被报道，一些具有高活性及良好成药性Mcl-1正在进行临床研究，有望成为新的癌症治疗药物。
发明内容
本发明的目的在于提供一类4-磺酰亚胺-1H-吡咯类Mcl-1抑制剂及其抗肿瘤医药用途。
本发明上述目的通过如下技术方案实现：
一种4-磺酰亚胺-1H-吡咯类化合物，其化学结构为如下通式所示：
其中，R代表H、甲基、乙基、异丙基、环丙基、乙酰基、甲酰苯基、苯基、3-噻吩基、 2-吡啶基、2-嘧啶基、2-噻嗪基、5-嘧啶基、1-萘基、2-萘基、2-甲基苯基、3-甲基苯基、4- 甲基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、3-硝基苯基、4-硝基苯基、3,4-二甲基苯基、4-乙基苯基、4-异丙基苯基、4-叔丁基苯基、4-哌嗪苯基、N-4-甲基哌嗪苯基、Boc-4-哌嗪苯基、3-乙基苯基、3-异丙基苯基、3-叔丁基苯基、3-乙氧基苯基、3- 腈基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-三氟甲基苯基、3-乙酰氨基苯基、苄基、3-甲基苄基、3- 氯苄基、3-氟苄基、3-甲氧基苄基、4-甲基苄基、4-氯苄基、4-氟苄基、4-甲氧基苄基、4-叔丁基苄基、4-苯基苄基、4-乙炔基苄基、3-氯-4苯基苄基或3-氯-4乙炔基苄基。
一种制备上述4-磺酰亚胺-1H-吡咯类化合物的方法，R为H，包括如下步骤：对甲苯硫酚在三乙胺磺酰氯的作用下形成活性中间体，与原料I-1反应生成不同的硫醚中间体I-2；原料I-3在乙腈中，以碳酸钾为缚酸剂，与1,3二溴丙烷进行亲核取代反应得到中间体I-4；以碳酸铯为碱，I-2和I-4进行亲核取代反应得到中间体I-5，I-5经PIDA、氨基甲酸铵氧化生成 I-6，I-6在NaOH作用下水解生成目标产物；合成路线如下：
一种制备上述4-磺酰亚胺-1H-吡咯类化合物的方法，R为甲基、乙基、异丙基、环丙基、正丙基、苄基、3-甲基苄基、3-氯苄基、3-氟苄基、3-甲氧基苄基、4-甲基苄基、4-氯苄基、4-氟苄基、4-甲氧基苄基、4-叔丁基苄基、4-苯基苄基、4-乙炔基苄基、3-氯-4苯基苄基或3-氯-4乙炔基苄基，包括如下步骤：在NaH作用下，起始原料II-1与对应的碘带烷烃或对应的溴苄反应得到中间体II-2，II-2经NaOH水解得到目标产物；合成路线如下：
一种制备上述4-磺酰亚胺-1H-吡咯类化合物的方法，R为乙酰基或甲酰苯基，包括如下步骤：在三乙胺作用下，III-1与乙酰氯或苯甲酰氯反应得到中间体III-2，III-2经NaOH水解得到目标产物；合成路线如下：
一种制备上述4-磺酰亚胺-1H-吡咯类化合物的方法，R为苯基、3-噻吩基、2-吡啶基、2- 嘧啶基、2-噻嗪基、5-嘧啶基、1-萘基、2-萘基、2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2- 甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、3-硝基苯基、4-硝基苯基、3,4-二甲基苯基、4-乙基苯基、4-异丙基苯基、4-叔丁基苯基、4-哌嗪苯基、N-4-甲基哌嗪苯基、Boc-4- 哌嗪苯基、3-乙基苯基、3-异丙基苯基、3-叔丁基苯基、3-乙氧基苯基、3-腈基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-三氟甲基苯基或3-乙酰氨基苯基，包括如下步骤：以Cs2CO3为碱，在Pd(OAc)2, Ruphos的催化条件下，IV-1与不同溴带芳烃经Buchward反应得到中间体IV-2，中间体IV-2 经NaOH水解得到目标产物；合成路线如下：
上述4-磺酰亚胺-1H-吡咯类化合物用于制备Mcl-1抑制剂药物的用途。
上述4-磺酰亚胺-1H-吡咯类化合物用于制备抗肿瘤药物的用途。
有益效果：
本发明提供了一种4-磺酰亚胺-1H-吡咯类化合物，该化合物具有良好的Mcl-1抑制活性，部分化合物对Mcl-1的抑制活性达到纳摩尔级，且对Bcl-2蛋白有较好的选择性，具有开发成抗肿瘤药物的前景。
附图说明
图1为化合物DDO-8298的胃肠液稳定性；
图2为化合物DDO-8299的胃肠液稳定性。
具体实施方式
下面结合实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。
实施例1：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8248)
(1)3,5-二甲基-4-(对甲苯硫基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯的制备
将4-甲基苯硫酚(2,5g,20mmol，2eq)、三乙胺(cat.)溶于30ml DCM，冰浴条件下缓慢滴加SO2Cl2(2eq)，撤去冰浴，室温条件下搅拌1h后将上述溶液加入到3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(1eq)的DCM(30ml)溶液中，室温反应0.5h。反应完全后，缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液至气泡完全消失，用DCM萃取(3次)，合并有机相，饱和食盐水洗、硫酸钠干燥、悬干溶剂，粗品用DCM重结晶，得到白色固体1.5g，产率51.9％。
(2)5-(3-溴丙氧基)-2-氯-1,3-二甲基苯的制备
将4-氯-3,5-二甲基苯酚(25.6mmol，4g，1eq)溶于40ml乙腈中，加入碳酸钾(3eq)、1,3-二溴丙烷(3eq)，回流3h。反应完全后冷却至室温，加入150ml水，EA萃取3次，合并有机相，饱和食盐水洗、硫酸钠干燥，悬干有机相，制砂，柱层析(PE)，得无色液体 6g，产率85.2％。
(3)1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(对甲苯甲硫基)-1H-吡咯 -2-羧酸乙酯的制备
将上述3,5-二甲基-4-(对甲苯硫基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(1mmol，0.289g，1eq)溶于20ml DMF中，加入碳酸铯(2eq)，50℃搅拌5min后加入上述5-(3-溴丙氧基)-2-氯 -1,3-二甲基苯(2eq)，反应完全后冷却至室温，加入60ml水，EA萃取3次，合并有机相，饱和食盐水洗、硫酸钠干燥，悬干有机相，制砂，柱层析(EA：PE＝20:1)得到无色液体0.35 g，产率76.4％。
(4)1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基苯基磺酰亚胺基) -1H-吡咯-2-羧酸乙酯的制备
将上述1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(对甲苯甲硫基)-1H-吡咯 -2-羧酸乙酯溶于DCM/MeOH(1:5)后，加入氨基甲酸铵(1.5eq)。室温搅拌10分钟后，加入PIDA(2eq)；反应完全后,制砂、柱层析(DCM/MeOH＝100:1 to 30:1v/v)得到深黄色固体,产率:76％。
(5)标题化合物的制备
将上述1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基苯基磺酰亚胺基) -1H-吡咯-2-羧酸乙酯(0.3g，0.58mmol，1eq)溶于乙醇/四氢呋喃混合溶液(7ml/7ml), 加入NaOH(2M，10eq)，50℃加热搅拌过夜，反应完全后冷却至室温，加1M HCl至pH＝1，过滤、水洗滤饼、干燥得淡黄色固体0.252g，产率95％,熔点：204-205℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ7.72(d,J＝8.2Hz,2H),7.29(d,J＝8.0Hz,2H),6.75(s,2H),4.39(t,J＝7.1Hz,2H),3.86(t,J＝5.7Hz,2H),2.56(s,3H),2.37(s,3H),2.33(s,3H),2.29(s,6H),2.03–1.96 (m,2H).HRMS(ESI):calcd for C25H29ClN2O4S[M+H]+489.1615,found485.1609.HPLC (80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝8.43min,95.6％.
实施例2：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-甲基-4-甲基苯基磺酰亚胺基) -3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8249)
(1)1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯的制备
将上述1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基苯基磺酰亚胺基) -1H-吡咯-2-羧酸乙酯(0.5g)溶于DMF(10ml),冰浴条件下，加入NaH(2eq)。搅拌10分钟后,加入CH3I(2eq)。反应完全后,撤去冰浴，缓缓加入30ml H2O，EA萃取三次，合并有机相、饱和食盐水洗、硫酸钠干燥。制砂、柱层析得无色油状物。
(2)标题化合物的制备
将上述1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基苯基磺酰亚胺基) -1H-吡咯-2-羧酸乙酯(0.3g，0.58mmol，1eq)溶于乙醇/四氢呋喃混合溶液(7ml/7ml), 加入NaOH(2M，10eq)，50℃加热搅拌过夜，反应完全后冷却至室温，加1M HCl至pH＝1，过滤、水洗滤饼、干燥得棕色固体,熔点78％,熔点178-179℃.1H NMR(300MHz,CDCl3) δ7.91(d,J＝6.3Hz,2H),7.42(d,J＝6.1Hz,2H),6.63(s,2H),4.53(s,2H),3.89(s,2H),2.90(s, 3H),2.60(s,3H),2.44(s,3H),2.36(s,6H),2.19(s,2H).HRMS(ESI):calcd forC26H31ClN2O4S [M+H]+503.1767,found 503.1771.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝7.53min, 96.9％.
实施例3：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-乙基-4-甲基苯基磺酰亚胺基) -3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8250)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、碘乙烷按照实施例2制备。黄色固体,产率：76％,熔点：211-212℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ7.86–7.76(m,2H),7.43(d,J＝8.0Hz,2H),6.75(s,2H),4.45(q,J＝7.3,6.7Hz,2H),3.86(s,2H),3.03(dt,J＝16.5,7.2Hz,2H),2.54(s,3H),2.40(s, 3H),2.37(s,3H),2.30(s,6H),2.14–1.99(m,2H),1.17(t,J＝7.1Hz,3H).HRMS(ESI):calcd for C27H33ClN2O4S[M+H]+517.1928,found 517.1928.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA): tR＝7.82min,97.8％.
实施例4：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-环丙基-4-甲基苯基磺酰亚胺基) -3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8251)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、碘代环丙烷按照实施例2制备.绿色固体,产率：83％,熔点 204-205℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.93(d,J＝5.9Hz,2H),7.37(s,2H),6.69(s,2H),4.59 (s,2H),3.95(s,2H),2.75(s,3H),2.63(s,3H),2.50(s,3H),2.43(s,6H),2.24(s,2H),1.06–0.51 (m,5H).HRMS(ESI):calcd for C28H23ClN2O4S[M+H]+529.1928,found529.1925.HPLC (80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝9.72min,98.5％.
实施例5：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-异丙基-4-甲基苯基磺酰亚胺基) -3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8252)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、碘代异丙烷按照实施例2制备，白色固体,产率：77％,熔点： 224-226℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.86(d,J＝8.0Hz,2H),6.63(s,2H),4.50(t,J＝7.1Hz, 2H),3.88(t,J＝5.0Hz,2H),3.53–3.35(m,1H),2.66(s,3H),2.52(s,3H),2.44(s,3H),2.36(s, 6H),2.22–2.12(m,2H),1.32(d,J＝5.9Hz,6H).HRMS(ESI):calcd forC28H35ClN2O4S[M+ H]+531.2084,found 531.2080.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝8.54min, 98.3％.
实施例6：4-(N-乙酰基-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基) -3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8253)
(1)4-(N-乙酰基-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯的制备
将上述1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(0.5g)溶于无水三乙胺(10ml)后加入乙酰氯(2eq)得到黄色液体, 1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.83(d,J＝7.6Hz,2H),7.25(d,J＝7.5Hz,2H),6.69(s, 2H),4.35(q,J＝8.0Hz,2H),4.15(t,J＝7.1Hz,2H),4.06(t,J＝7.1Hz,2H),2.56(s,3H),2.43(s, 3H),2.38(s,3H),2.35(s,3H),2.32(s,6H),2.10(q,J＝7.1Hz,2H),1.35(t,J＝8.0Hz,3H). ESI-MS m/z:559.2[M+H]+.
(2)标题化合物的制备
本品由上述4-(N-乙酰基-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯按照实施例2制备，白色固体,产率:87％,熔点209-211℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.94(d,J＝8.2Hz,2H),7.53(d,J＝8.1Hz,2H), 6.78(s,2H),4.48(t,J＝6.5Hz,2H),3.93(t,J＝5.3Hz,2H),2.60(s,3H),2.53(s,3H),2.44(s,3H),2.42(s,3H),2.30(s,6H).HRMS(ESI):calcd for C27H31ClN2O5S[M+H]+531.1720,found531.1725.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝8.76min,97.4％.
实施例7：4-(N-苯甲酰基-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8254)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、苯甲酰氯按照实施例6制备,黄色固体,产率:72％，熔点： 213-214℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.24(d,J＝7.4Hz,2H),7.99(d,J＝8.0Hz,2H),7.56 (t,J＝7.4Hz,1H),7.46(t,J＝7.4Hz,2H),7.37(d,J＝7.9Hz,2H),6.63(s,2H),4.53(s,2H),3.89 (s,2H),2.74(s,3H),2.48(s,3H),2.43(s,3H),2.35(s,6H).HRMS(ESI):calcd for C32H33ClN2O5S[M+H]+593.1877,found 593.1873.HPLC(80:20 methanol:waterwith 1‰TFA): tR＝6.57min,98.6％.
实施例8：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-苯基苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8255)
(1)1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-苯基苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯的制备。
将上述1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(0.5g)、溴苯(1.5eq)、醋酸钯(0.1eq),Ruphos(0.1eq),碳酸铯(2eq)加入封管中，加入甲苯(6ml)。氮气保护条件下，90℃加热过夜，制砂、柱层析(PE/EA＝40:1to 15:1v/v)纯化得到黄色油状物,1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.81(d,J ＝7.5Hz,2H),7.45(t,J＝7.5Hz,2H),7.28(dd,J＝7.6,1.5Hz,2H),7.23(d,J＝7.5Hz,3H),6.69 (s,2H),4.35(q,J＝8.0Hz,2H),4.15(t,J＝7.1Hz,2H),4.06(t,J＝7.1Hz,2H),2.58(s,3H),2.38 (s,3H),2.32(s,6H),2.30(s,3H),2.09(p,J＝7.1Hz,2H),1.35(t,J＝8.0Hz,3H).ESI-MS m/z: 593.2[M+H]+.
(2)标题化合物的制备
本品由上述1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-苯基苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯按照实施例2制备，白色固体,产率：67％，熔点：203-205℃. 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝7.9Hz,2H),7.30(s,4H),7.18(s,2H),6.92(t,J＝6.3 Hz,1H),6.59(s,2H),4.46(s,2H),3.80(s,2H),2.65(s,3H),2.53(s,3H),2.43(s,3H),2.35(s, 6H),2.11(s,2H).HRMS(ESI):calcd for C32H33ClN2O5S[M+H]+565.1928,found 565.1923. HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝10.2min,97.1％.
实施例9：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(噻吩-2- 基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8256)
本品由上述1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基) -3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、2-溴噻吩按照实施例8制备，产率:64％，红色固体,熔点：195-196℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.82(s,1H),7.86(d,J＝7.9Hz,2H),7.39(d,J＝ 7.8Hz,2H),7.31(s,1H),6.83(d,J＝4.5Hz,1H),6.74(s,2H),6.49(s,1H),4.42(s,2H),3.81(s, 2H),2.58(s,3H),2.38(s,3H),2.34(s,3H),2.31(s,6H),2.02(s,2H).HRMS(ESI):calcd for C29H31ClN2O4S2[M+H]+571.1488,found 571.1470.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA): tR＝9.58min,98.3％.
实施例10：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(嘧啶-2- 基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8257)
本品由上述1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基) -3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-溴吡啶按照实施例8制备，产率:73％，黄色固体，熔点： 208-209℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.45(s,1H),8.25(s,1H),7.89(s,3H),7.41(d,J＝37.6 Hz,3H),6.60(s,2H),4.52(s,2H),3.85(s,2H),2.67(s,3H),2.46(s,6H),2.35(s,6H),2.17(s, 2H).HRMS(ESI):calcd for C30H32ClN3O4S[M+H]+566.1880,found566.1875.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝8.64min,97.6％.
实施例11：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(嘧啶-2- 基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8258)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、2-溴嘧啶按照实施例8制备，紫色固体,产率:69％,熔点： 213-214℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.60(d,J＝4.4Hz,2H),7.93(d,J＝7.8Hz,2H),7.46(d,J＝7.7Hz,2H),7.10(t,J＝4.4Hz,1H),6.74(s,2H),4.45(s,2H),3.85(s,2H),2.59(s, 3H),2.41(s,3H),2.30(s,6H),2.25(s,3H).HRMS(ESI):calcd for C29H31ClN4O4S[M+H]+ 567.1840,found 567.1833.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝7.85min,96.1％.
实施例12：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(吡嗪-2- 基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8259)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、2-溴噻嗪按照实施例8制备，白色固体,产率:82％,熔点： 197-198℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ12.79(s,1H),7.86(d,J＝8.2Hz,2H),7.37(d,J＝ 8.2Hz,2H),6.92(d,J＝8.8Hz,2H),6.70(s,2H),4.40(t,J＝6.4Hz,2H),3.81(t,J＝5.0Hz,2H), 3.64(s,3H),2.59(s,3H),2.38(s,3H),2.32(s,3H),2.30(s,6H).HRMS(ESI):calcd for C29H31ClN4O4S[M+H]+567.1863,found 567.1861.HPLC(80:20 methanol:waterwith 1‰TFA): tR＝9.76min,96.8％.
实施例13：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(嘧啶-5- 基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8260)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、5-溴嘧啶按照实施例8制备，白色固体,产率：74％,熔点： 189-190℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ9.02(s,1H),8.83(s,2H),8.17(d,J＝6.6Hz,2H),7.57 (d,J＝3.3Hz,2H),6.84(s,2H),4.73(s,2H),4.07(s,2H),2.90(s,3H),2.69(s,6H),2.59(s,6H), 2.38(s,2H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ162.52,156.68,155.80,143.67,142.24,140.10, 136.96,136.33,130.27,127.95,126.99,125.59,121.14,115.93,115.05,92.50,64.88,56.47,42.66, 30.25,21.38,20.88,12.04,11.37.HRMS(ESI):calcdfor C29H31ClN4O4S[M+H]+567.1826, found 567.1833.HPLC(80:20 methanol:water with1‰TFA):tR＝9.26min,98.5％.
实施例14：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(萘-1-基) 苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8261)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、1溴代萘按照实施例8制备，绿色固体,产率:77％,熔点： 190-191℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ12.83(s,1H),8.60(d,J＝9.1Hz,1H),8.06(d,J＝ 8.3Hz,2H),7.86–7.78(m,1H),7.52(dd,J＝6.5,2.9Hz,2H),7.47(d,J＝8.3Hz,2H),7.39(d,J ＝8.2Hz,1H),7.19(t,J＝7.8Hz,1H),7.03(d,J＝7.3Hz,1H),6.70(s,2H),4.41(t,J＝6.8Hz, 2H),3.79(t,J＝5.4Hz,2H),2.58(s,3H),2.42(s,3H),2.29(s,6H),2.24(s,3H),1.98(dd,J＝12.8, 7.1Hz,2H).HRMS(ESI):calcd for C35H35ClN2O4S[M+H]+615.2076,found 615.2084.HPLC (80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝5.49min,98.5％.
实施例15：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(萘-2-基) 苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8262)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、2溴代萘按照实施例8制备，棕色固体,产率:59％,熔点196-195℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ7.94(d,J＝8.3Hz,2H),7.73(t,J＝7.8Hz,2H),7.64(d,J＝8.1Hz,1H),7.44–7.25(m,6H),6.71(s,2H),4.50–4.32(m,2H),3.80(t,J＝5.6Hz, 2H),2.67(s,3H),2.39(s,3H),2.35(s,3H),2.29(s,6H),2.06–1.94(m,2H).HRMS(ESI):calcd for C35H35ClN2O4S[M+H]+615.2073,found 615.2084.HPLC(80:20methanol:water with 1‰ TFA):tR＝9.72min,96.7％.
实施例16：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(邻甲苯基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8263)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、2-溴甲苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:64％.熔点： 203-204℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.99(d,J＝8.3Hz,2H),7.31(d,J＝8.1Hz,2H),7.16 (d,J＝6.9Hz,1H),7.06(d,J＝7.5Hz,1H),6.93(t,J＝7.5Hz,1H),6.84(t,J＝6.9Hz,1H),6.59 (s,2H),4.48(t,J＝6.7Hz,2H),3.80(s,2H),2.66(s,3H),2.47(s,3H),2.47(s,3H),2.45(s,3H), 2.19–2.04(m,2H).HRMS(ESI):calcd for C35H35ClN2O4S[M+H]+579.2084,found 579.2075.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝8.54min,98.2％.
实施例17：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(间甲苯基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8264)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-溴甲苯按照实施例8制备，黄色,固体,产率:73％,熔点： 211-212℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.00–7.88(m,2H),7.31(s,2H),7.12–6.91(m,3H),6.75(d,J＝7.2Hz,1H),6.60(s,2H),4.48(s,2H),3.83(s,2H),2.68(s,3H),2.54(s,3H),2.44(s, 3H),2.36(s,6H),2.28(s,3H).HRMS(ESI):calcd for C32H35ClN2O4S[M+H]+579.2080,found 579.2084.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝9.58min,97.9％.
实施例18：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(对甲苯基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8265)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-溴甲苯按照实施例8制备，白色固体,产率:87％.熔点： 183-184℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝7.9Hz,2H),7.30(d,J＝6.6Hz,2H),7.07 (d,J＝8.1Hz,2H),6.99(d,J＝8.0Hz,2H),6.60(s,2H),4.47(t,J＝6.3Hz,2H),3.82(t,J＝4.3 Hz,2H),2.67(s,3H),2.53(s,3H),2.44(s,3H),2.36(s,6H),2.27(s,3H),2.12(s,2H).13C NMR (75MHz,d6-DMSO)δ162.59,156.69,143.14,140.33,140.17,136.94,130.07,129.84,128.59, 127.18,125.57,122.75,121.00,116.61,115.05,30.25,21.33,20.88,20.68,12.06,11.31.HPLC (80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝10.03min,97.2％.
实施例19：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(2-甲氧基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8266)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、2-甲氧基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:75％,熔点 187-188℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝8.2Hz,2H),7.30(d,J＝6.5Hz,2H),7.07 (t,J＝8.4Hz,1H),6.75(d,J＝7.3Hz,2H),6.60(s,2H),6.54–6.47(m,1H),4.48(t,J＝6.7Hz, 2H),3.83(t,J＝5.9Hz,2H),3.77(s,3H),2.67(s,3H),2.55(s,3H),2.44(s,3H),2.36(s,6H),2.12 (dt,J＝12.7,7.1Hz,2H).HRMS(ESI):calcd for C32H35ClN2O5S[M+H]+595.2028,found 595.2033.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝9.76min,96.8％.
实施例20：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-甲氧基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8267)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-甲氧基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,熔点:85％,熔点 178-179℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝8.2Hz,2H),7.30(d,J＝6.5Hz,2H),7.07 (t,J＝8.4Hz,1H),6.75(d,J＝7.3Hz,2H),6.60(s,2H),6.54–6.47(m,1H),4.48(t,J＝6.7Hz, 2H),3.83(t,J＝5.9Hz,2H),3.77(s,3H),2.67(s,3H),2.55(s,3H),2.44(s,3H),2.36(s,6H),2.12 (dt,J＝12.7,7.1Hz,2H).HRMS(ESI):calcd for C32H35ClN2O5S[M+H]+595.2026,found 595.2033.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝9.89min,98.4％.
实施例21：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(4-甲氧基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8268)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-甲氧基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:85％,熔点： 189-190℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.79(s,-1H),7.86(d,J＝8.2Hz,2H),7.37(d,J＝ 8.2Hz,2H),6.92(d,J＝8.8Hz,2H),6.70(s,2H),4.40(t,J＝6.4Hz,2H),3.81(t,J＝5.0Hz,2H), 3.64(s,3H),2.59(s,3H),2.38(s,3H),2.32(s,3H),2.30(s,6H),2.03–1.96(m,2H).HRMS(ESI): calcd for C29H31ClN4O4S[M+H]+595.2029,found 595.2033.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝8.87min,97.4％.
实施例22：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(2-硝基苯基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8269)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、2-硝基溴苯按照实施例8制备，橘黄色固体,熔点:77％,熔点： 186-187℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ12.95(s,1H),7.90(d,J＝8.3Hz,2H),7.73(d,J＝ 7.1Hz,1H),7.45(d,J＝8.2Hz,2H),7.32(t,J＝7.7Hz,1H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),6.98(t,J＝ 7.5Hz,1H),6.71(s,2H),4.43(t,J＝6.5Hz,2H),3.80(s,2H),2.57(s,3H),2.40(s,3H),2.30(s, 6H),2.27(s,3H),2.09–1.91(m,2H).HRMS(ESI):calcd forC31H32ClN3O6S[M+H]+610.1764, found 610.1779.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝6.58min,97.9％.
实施例23：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(3-硝基苯基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8270)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-硝基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,熔点:73％,熔点 198-199℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ8.34(t,J＝1.5Hz,1H),8.26(dt,J＝7.5,1.5Hz, 1H),7.81(d,J＝7.5Hz,2H),7.65(t,J＝7.5Hz,1H),7.59(dt,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.23(d,J＝7.6 Hz,2H),6.69(s,2H),4.13(t,J＝7.1Hz,2H),4.06(t,J＝7.1Hz,2H),2.58(s,3H),2.42(s,3H), 2.37(d,J＝0.9Hz,3H),2.31(s,6H),2.08(p,J＝7.1Hz,2H).HRMS(ESI):calcd for C31H32ClN3O6S[M-H]-608.1621,found 608.1628.HPLC(80:20methanol:water with 1‰TFA): tR＝6.93min,98.2％.
实施例24：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(4-硝基苯基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8271)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-硝基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:68％,熔点 207-208℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ12.97(s,1H),8.06(d,J＝9.1Hz,2H),7.94(d,J＝ 8.3Hz,2H),7.45(d,J＝8.2Hz,2H),7.13(d,J＝9.1Hz,2H),6.71(s,2H),4.44(t,J＝6.7Hz,2H), 3.82(t,J＝5.6Hz,2H),2.61(s,3H),2.41(s,3H),2.32(s,3H),2.29(s,6H),2.03(q,J＝6.0Hz, 2H).HRMS(ESI):calcd for C31H32ClN3O6S[M+H]+610.1779,found610.1763.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝7.24min,97.5％.
实施例25：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3,4-二甲基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO8272)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3，4-二甲基溴苯按照实施例8制备，黄色固体，产率:57％,熔点：203-204℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ9.40(s,1H),7.59(d,J＝7.5Hz,2H),7.16(d, J＝6.8Hz,2H),7.11(d,J＝7.7Hz,2H),7.06(dd,J＝7.5,1.8Hz,1H),6.66(s,2H),4.34(t,J＝ 7.0Hz,2H),4.22(t,J＝7.1Hz,2H),2.42(s,3H),2.23(s,12H),2.16(s,3H),2.08(s,3H),1.98(p, J＝7.1Hz,2H).HRMS(ESI):calcd for C31H32ClN3O6S[M+H]+593.2163,found 593.2169. HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝8.35min,98.4％.
实施例26：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(4-乙基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8273)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-乙基溴苯按照实施例8制备，白色固体,产率:65％,熔点： 215-216℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.94(d,J＝8.2Hz,2H),7.27(s,2H),7.03(q,J＝8.4 Hz,4H),6.60(s,2H),4.46(t,J＝6.8Hz,2H),3.82(t,J＝5.3Hz,2H),2.67(s,3H),2.63–2.53(m, 5H),2.43(s,3H),2.35(s,6H),2.11(q,J＝6.6,6.1Hz,2H),1.20(t,J＝7.6Hz,3H).HRMS(ESI): calcd for C33H37ClN2O4S[M+H]+593.2241,found 593.2235.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝9.54min,98.2％.
实施例27：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(4-异丙基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8274)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-异丙基溴苯按照实施例8制备，淡黄色固体,产率:72％,熔点 211-212℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ7.87(d,J＝8.2Hz,2H),7.38(d,J＝8.2Hz,2H), 7.00(d,J＝8.5Hz,2H),6.91(d,J＝8.3Hz,2H),6.73(s,2H),4.55–4.25(m,2H),3.95–3.66(m, 2H),2.74(p,J＝6.9Hz,1H),2.60(s,3H),2.38(s,4H),2.33(s,3H),2.30(s,6H),2.04–1.95(m, 2H),1.13(d,J＝6.8Hz,6H).13C NMR(75MHz,d6-DMSO)δ162.65,156.68,143.34,143.12, 141.13,140.44,140.01,136.93,130.10,127.12,125.57,122.68,121.12,116.78,115.06,33.04, 24.35,21.33,20.88,12.06,11.33.HRMS(ESI):calcd for C34H39ClN2O4S[M+H]+607.2397, found 607.2389.HPLC(80:20 methanol:waterwith 1‰TFA):tR＝12.1min,97.4％.
实施例28：4-(N-(4-(叔丁基)苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8275)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-叔丁基溴苯按照实施例8制备，白色固体,产率：67％,熔点： 219-220℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.94(d,J＝8.2Hz,2H),7.27(s,2H),7.19(d,J＝8.6 Hz,2H),7.06(d,J＝8.5Hz,2H),6.60(s,2H),4.47(t,J＝6.9Hz,2H),3.83(t,J＝5.4Hz,2H), 2.67(s,3H),2.55(s,3H),2.43(s,3H),2.35(s,6H),2.12(q,J＝5.9Hz,2H),1.28(s,9H).13C NMR(75MHz,d6-DMSO)δ162.59,156.69,143.43,143.13,142.98,140.49,140.06,136.94, 130.11,128.58,127.12,126.01,125.58,122.38,121.04,116.91,115.08,34.14,31.65,21.35,20.89, 12.08,11.35.HRMS(ESI):calcd for C35H41ClN2O4S[M+H]+621.2554,found 621.2547.
实施例29：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(4-(哌嗪-1-基)苯基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8276)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-哌嗪基溴苯按照实施例8制备，白色固体,产率:64％,熔点： 221-222℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.81(d,J＝7.5Hz,2H),7.24(d,J＝7.5Hz,4H), 6.73(d,J＝7.5Hz,2H),6.69(s,2H),4.13(t,J＝7.1Hz,2H),4.07(t,J＝7.1Hz,2H),3.38(t,J＝ 7.0Hz,4H),3.09(td,J＝7.1,5.0Hz,4H),2.58(s,3H),2.45–2.42(m,3H),2.37(s,3H),2.27(s, 6H),2.08(p,J＝7.1Hz,2H),1.93(p,J＝5.1Hz,1H).HRMS(ESI):calcd for C35H41ClN4O4S[M- H]-647.2459,found 647.2460.HPLC(80:20methanol:water with 1‰TFA):tR＝7.65min,96.9％.
实施例30：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(4-(4- 甲基哌嗪-1-基)苯基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8277)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-甲基哌嗪基溴苯按照实施例8制备，白色固体,产率:57％,熔点：217-218℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.00–7.91(m,2H),7.29(d,J＝9.4Hz,2H),7.03 (d,J＝8.7Hz,2H),6.60(d,J＝5.6Hz,4H),4.43(t,J＝6.7Hz,2H),3.81(s,2H),3.30(s,8H),2.84 (s,3H),2.69(s,3H),2.43(s,6H),2.34(s,6H),2.09(s,2H).HRMS(ESI):calcd for C36H43ClN4O4S[M+H]+663.2772,found 663.2776.HPLC(80:20 methanol:waterwith 1‰TFA): tR＝8.47min,98.2％.
实施例31：4-(N-(4-(4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8278)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-Boc哌嗪基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:62％,熔点：207-208℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.2Hz,2H),7.28(d,J＝8.2Hz,2H), 7.07(d,J＝8.7Hz,2H),6.80(d,J＝8.5Hz,2H),6.59(s,2H),4.46(t,J＝5.9Hz,2H),3.82(t,J＝ 4.7Hz,2H),3.58(s,4H),3.02(s,4H),2.66(s,3H),2.52(s,3H),2.43(s,3H),2.35(s,6H),2.10(s, 2H),1.51(s,9H).HRMS(ESI):calcd for C40H49ClN4O6S[M+H]+749.3140,found 749.3136. HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝9.89min,98.3％.
实施例32：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-乙基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8279)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-乙基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:53％,熔点： 178-179℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝8.2Hz,2H),7.28(s,2H),7.13–6.91(m, 3H),6.77(d,J＝7.5Hz,1H),6.60(s,2H),4.47(t,J＝6.5Hz,2H),3.82(t,J＝5.1Hz,2H),2.67(s, 3H),2.63–2.51(m,5H),2.44(s,3H),2.36(s,6H),2.12(dd,J＝9.9,5.6Hz,2H),1.19(t,J＝7.6 Hz,3H).HRMS(ESI):calcd for C33H37ClN2O4S[M+H]+593.2220,found593.2228.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝12.3min,98.7％.
实施例33：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-异丙基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8280)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-异丙基溴苯按照实施例8制备，黄色固体，产率:71％,熔点： 183-184℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.03(d,J＝9.0Hz,2H),7.39(d,J＝5.3Hz,2H),7.20– 7.11(m,2H),7.06(d,J＝5.4Hz,1H),6.89(d,J＝8.5Hz,1H),6.67(s,2H),4.54(s,2H),3.90(s, 2H),2.98–2.83(m,1H),2.72(s,3H),2.59(s,3H),2.51(s,3H),2.43(s,6H),2.17(s,2H),1.29(s, 3H),1.26(s,3H).HRMS(ESI):calcd for C34H39ClN2O4S[M+H]+607.2397,found 607.2389. HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝12.8min,96.6％.
实施例34：4-(N-(3-(叔丁基)苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8281)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-叔丁基溴苯按照实施例8制备，黄色固体，产率:64％,熔点： 187-188℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.03(d,J＝8.2Hz,2H),7.36(d,J＝5.9Hz,3H),7.16 (t,J＝7.6Hz,1H),7.02(d,J＝9.1Hz,2H),6.66(s,2H),4.63–4.45(m,2H),3.95–3.82(m,2H), 2.72(s,3H),2.58(s,3H),2.50(s,3H),2.42(s,6H),2.20–2.10(m,2H),1.34(s,9H).HRMS(ESI): calcd for C35H41ClN2O4S[M+H]+621.2554,found 621,2549.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝13.1min,96.8％.
实施例35：4-(N-([[1,1'-联苯]-3-基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8282)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-溴联苯按照实施例8制备，白色固体,产率:67％,熔点： 193-194℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.13(s,2H),7.80(s,1H),7.57(s,10H),6.70(s,2H), 4.59(s,2H),3.95(s,2H),2.40(s,12H).13C NMR(75MHz,d6-DMSO)δ162.59,156.71,146.42, 143.44,141.41,140.85,140.19,136.98,130.25,129.94,129.36,128.59,127.84,127.31,127.00, 125.61,121.29,120.00,116.38,115.11,64.98,42.73,30.32,21.44,20.95,12.17,11.45.HRMS (ESI):calcd for C37H37ClN2O4S[M+H]+641.2230,found641.2235.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝15.7min,96.3％.
实施例36：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-乙氧基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8283)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-乙氧基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:72％,熔点 203-204℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.08(s,2H),7.44(s,2H),7.24–7.04(m,3H),6.72(d, J＝13.5Hz,3H),4.59(s,2H),4.12–4.00(m,2H),3.96(s,2H),2.51(s,3H),2.46(s,3H),2.40(s, 9H),2.26(s,2H),1.42(t,J＝6.3Hz,3H).HRMS(ESI):calcd forC33H37ClN2O5S[M+H]+ 609.2190,found 609.2182.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝9.72min,97.8％.
实施例37：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-氰基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8284)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-腈基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:62％,熔点 210-211℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ12.93(s,-1H),7.91(d,J＝8.1Hz,2H),7.42(d,J＝ 8.1Hz,2H),7.36–7.19(m,4H),6.71(s,2H),4.42(t,J＝6.1Hz,2H),3.81(s,2H),2.58(s,3H), 2.39(s,3H),2.33(s,3H),2.30(s,6H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ167.77,162.48,156.64, 146.06,143.45,140.26,139.90,136.89,131.87,130.18,129.45,128.36,127.16,125.52,121.21, 115.95,114.99,64.85,42.64,30.17,21.33,20.85,12.02,11.32.HRMS(ESI):calcd for C37H37ClN2O4S[M+Na]+612.1694,found612.1691.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA): tR＝5.58min,96.8％.
实施例38：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-氟苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8285)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-氟溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:67％,熔点： 215-216℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.93(d,J＝8.2Hz,2H),7.32(d,J＝5.1Hz,2H),7.11 (q,J＝7.8Hz,1H),6.88(dd,J＝18.0,9.5Hz,2H),6.63(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),6.60(s,2H),4.49 (t,J＝6.5Hz,2H),3.82(t,J＝5.0Hz,2H),2.67(s,3H),2.52(s,3H),2.45(s,3H),2.36(s,6H). HRMS(ESI):calcd for C31H32ClFN2O4S[M+H]+583.1829,found583.1834.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝7.04min,97.5％.
实施例39：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-氯苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8286)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-氯溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:58％,熔点： 189-190℃.1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ7.89(d,J＝8.3Hz,2H),7.40(d,J＝8.3Hz,2H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),7.01(t,J＝1.9Hz,1H),6.97–6.86(m,2H),6.72(s,2H),4.43(t,J＝6.6 Hz,2H),3.82(t,J＝5.9Hz,2H),2.59(s,3H),2.39(s,3H),2.33(s,3H),2.30(s,8H).13CNMR(75 MHz,d6-DMSO)δ162.53,156.68,147.57,143.62,140.26,139.84,136.95,133.54,130.80,130.27, 128.46,127.14,125.60,122.37,121.38,115.85,115.06,21.37,20.90,12.08,11.36.HRMS(ESI): calcd for C31H32Cl2N2O4S[M+H]+599.1525,found599.1532.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝12.3min,97.7％.
实施例40：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8287)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-三氟甲基溴苯按照实施例8制备，黄色固体,产率:67％,熔点：173-174℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.99(d,J＝7.6Hz,2H),7.40(d,J＝16.1Hz,3H), 7.35–7.25(m,2H),7.19(d,J＝6.8Hz,1H),6.63(s,2H),4.54(s,2H),3.85(s,2H),2.73(s,3H), 2.52(s,3H),2.49(s,3H),2.39(s,6H),2.15(s,2H).HRMS(ESI):calcd forC32H32ClF3N2O4S[M+ H]+633.1787,found 633.1796.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝7.81min, 96.8％.
实施例41：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-甲酰基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8288)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-甲酰基溴苯按照实施例8制备，白色固体,产率:87％,熔点： 168-169℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ9.87(s,1H),9.40(s,1H),8.09(s,1H),7.75(d,J ＝7.3Hz,1H),7.59(d,J＝7.5Hz,2H),7.53(t,J＝7.4Hz,1H),7.49(dt,J＝7.3,1.9Hz,1H),7.16 (d,J＝6.8Hz,2H),6.66(s,2H),4.34(t,J＝7.0Hz,2H),4.22(t,J＝7.1Hz,2H),2.42(s,3H),2.23 (s,6H),2.16(s,3H),2.08(s,3H),1.98(p,J＝7.1Hz,2H).熔点178-179℃.HRMS(ESI):calcd for C32H33ClN2O5S[M+Na]+615.1692,found615.1696.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰ TFA):tR＝8.26min,98.3％.
实施例42：4-(N-(3-乙酰氨基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8289)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-甲酰基溴苯按照实施例8制备，棕色固体,产率:76％,熔点： 189-190℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.93(d,J＝8.0Hz,2H),7.30–7.05(m,5H),6.89(d,J ＝8.0Hz,1H),6.59(s,2H),4.45(t,J＝7.3Hz,2H),3.80(t,J＝5.6Hz,2H),2.66(s,3H),2.52(s, 3H),2.43(s,3H),2.34(s,6H),2.12(d,J＝13.8Hz,5H).HRMS(ESI):calcdfor C33H36ClN3O5S [M+Na]+644.1954,found 644.1962.HPLC(80:20 methanol:water with1‰TFA):tR＝6.53min, 98.5％.
实施例43：4-(N-苄基-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基) -3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8290)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、苄基溴按照实施例2制备，白色固体,收率:75％,熔点：187-188℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.93(s,2H),7.47–7.31(m,5H),7.28(s,2H),6.64(s,2H),4.46(d,J＝25.3Hz,4H),3.88(s,2H),2.53(s,3H),2.48(s,3H),2.40(s,3H),2.36(s, 6H),2.24–2.11(m,2H).HRMS(ESI):calcd for C32H35ClN2O4S[M+H]+579.2084,found 579.2079.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝10.4min,97.8％.
实施例44：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(3-甲基苄基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8291)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-甲基溴苄按照实施例2制备，黄色固体,收率:78％,熔点 179-180℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.84(d,J＝8.1Hz,2H),7.41(d,J＝8.1Hz,2H),7.18(dd,J＝9.3,6.5Hz,3H),7.05(d,J＝6.7Hz,1H),6.76(s,2H),4.54–4.40(m,2H),4.04(d,J ＝14.9Hz,1H),2.40(s,3H),2.36(s,3H),2.07(dt,J＝11.7,7.0Hz,2H).HRMS(ESI):calcd for C33H37ClN2O4S[M+H]+593.2241,found 593.2235.HPLC(80:20 methanol:waterwith 1‰TFA): tR＝11.3min,98.8％.
实施例45：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-氯苄基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8292)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-甲基溴苄按照实施例2制备，收率:65％,熔点：177-179℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.93(s,2H),7.39(s,2H),7.27–6.91(m,4H),6.64(s,2H),4.44 (d,J＝30.2Hz,4H),3.89(s,2H),2.49(s,3H),2.36(s,6H),2.22(d,J＝5.3Hz,6H),2.10(d,J＝ 3.1Hz,2H).HRMS(ESI):calcd for C32H34Cl2N2O4S[M+H]+613.1695,found 613.1687.HPLC (80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝12.7min,97.8％.
实施例46：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-氟苄基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8293)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-氟溴苄按照实施例2制备，黄色固体,收率:84％,熔点： 190-191℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.83(d,J＝8.0Hz,2H),7.37(t,J＝8.5Hz,3H),7.21(d,J＝8.7Hz,2H),7.08–7.02(m,1H),6.77(d,J＝5.8Hz,2H),4.45(s,2H),4.21(s,1H), 4.04(d,J＝15.6Hz,1H),3.93–3.82(m,2H),2.46–2.24(m,15H),2.06(dd,J＝13.7,6.9Hz, 2H).HRMS(ESI):calcd for C32H34ClFN2O4S[M+H]+597.1990,found 597.1985.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝12.7min,97.8％.
实施例47：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(3-甲氧基苄基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8294)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、3-甲氧基溴苄按照实施例2制备，白色固体,收率:65％,熔点： 195-196℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.82(d,J＝8.0Hz,2H),7.38(d,J＝8.0Hz,2H), 7.22(t,J＝7.8Hz,1H),7.02–6.90(m,2H),6.77(d,J＝6.2Hz,3H),4.44(s,2H),4.15(d,J＝15.2Hz,1H),4.02(d,J＝14.5Hz,1H),3.87(s,2H),3.75(s,3H),2.57(s,3H),2.38(d,J＝3.1Hz, 6H),2.29(s,6H),2.07(s,2H).HRMS(ESI):calcd forC33H37ClFN2O5S[M+H]+609.2183,found 609.2190.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝9.75min,98.2％.
实施例48：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-4-(4-甲基-N-(4-甲基苄基)苯基磺酰亚胺基)-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8295)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-甲基溴苄按照实施例2制备，黄色固体,收率:73％,熔点： 170-171℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.91(d,J＝7.3Hz,2H),7.32(s,4H),7.10(d,J＝ 7.0Hz,2H),6.63(s,2H),4.49(s,2H),4.30(dd,J＝21.5,7.1Hz,2H),3.88(s,2H),2.57(s,3H), 2.45(s,6H),2.35(s,9H),2.16(s,2H).HRMS(ESI):calcd forC33H37ClN2O4S[M+H]+593.2241, found 593.2233.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝13.2min,98.1％.
实施例49：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(4-氯苄基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8296)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-氯溴苄按照实施例2制备，淡黄色固体,收率:67％,熔点： 175-176℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.81(d,J＝8.3Hz,2H),7.38(d,J＝6.2Hz,6H), 6.76(s,2H),4.44(q,J＝6.2Hz,2H),4.15(d,J＝15.4Hz,1H),4.01(d,J＝15.3Hz,1H),3.91– 3.82(m,2H),2.37(d,J＝5.9Hz,6H),2.29(s,6H),2.12–2.03(m,2H).HRMS(ESI):calcd for C32H34Cl2N2O4S[M+H]+613.1695,found 613.1689.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA): tR＝13.5min,97.8％.
实施例50：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(4-氟苄基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8297)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-氟溴苄按照实施例2制备，Red固体,熔点:72％,熔点192-193℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.59(d,J＝7.5Hz,2H),7.18–7.11(m,4H),6.97(dd,J＝8.8,7.6Hz,2H),6.66(s,2H),4.34(t,J＝7.0Hz,2H),4.22(t,J＝7.1Hz,2H),2.60(s, 2H),2.42(s,3H),2.23(s,6H),2.16(s,3H),2.08(s,3H),1.98(p,J＝7.1Hz,2H).HRMS(ESI): calcd for C32H34ClFN2O4S[M+H]+597.1990,found 597.1982.HPLC(80:20methanol:water with 1‰TFA):tR＝12.9min,98.2％.
实施例51：4-(N-(4-(叔丁基)苄基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8298)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-叔丁基溴苄按照实施例2制备，白色固体,收率:75％,熔点： 201-202℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.91(s,2H),7.35(s,6H),6.63(s,2H),4.50(s, 2H),4.31(d,J＝29.9Hz,2H),3.88(s,2H),2.63(s,3H),2.51(s,3H),2.43(s,3H),2.35(s,6H), 2.16(s,2H),1.34(s,9H).HRMS(ESI):calcd for C36H43ClN2O4S[M+H]+635.2710,found 635.2706.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝13.2min,98.5％.
实施例52：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8299)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-甲氧基溴苄按照实施例2制备，白色固体,收率:62％,熔点： 193-194℃.1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.59(d,J＝7.5Hz,2H),7.19–7.14(m,4H), 6.78(d,J＝7.6Hz,2H),6.66(s,2H),4.34(t,J＝7.0Hz,2H),4.22(t,J＝7.1Hz,2H),3.80(s,3H), 2.60(s,2H),2.42(d,J＝1.2Hz,3H),2.23(s,6H),2.16(s,3H),2.08(s,3H),1.98(p,J＝7.1Hz, 2H).HRMS(ESI):calcd for C33H37ClFN2O5S[M+H]+609.2183,found 609.2186.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA):tR＝9.82min,96.7％.
实施例53：4-(N-([[1,1'-联苯]-4-基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8300)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-联苯溴苄按照实施例2制备，白色固体,收率:54％,熔点： 176-177℃，1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.83(d,J＝8.1Hz,2H),7.67(d,J＝7.3Hz,2H), 7.60(d,J＝8.1Hz,2H),7.48(t,J＝7.7Hz,5H),7.38(d,J＝7.5Hz,2H),6.76(s,2H),4.45(q,J＝ 5.7Hz,2H),4.22(d,J＝15.1Hz,1H),4.07(d,J＝15.1Hz,1H),3.86(d,J＝5.2Hz,2H),2.58(s, 3H),2.39(d,J＝3.5Hz,6H),2.28(s,6H),2.12–2.01(m,2H).HRMS(ESI):calcd for C37H37ClN2O4S[M+H]+641.2241,found 641.2249.HPLC(80:20 methanol:water with 1‰TFA): tR＝10.15min,97.4％.
实施例54：1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N-(4-乙炔基苯基)-4-甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸(DDO-8301)
本品由1-(3-(4-氯-3,5-二甲基苯氧基)丙基)-4-(N，4-二甲基苯基磺酰亚胺基)-3,5- 二甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯、4-乙炔基溴苄按照实施例2制备，黄色固体，收率:65％,熔点： 184-185℃，1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.83(d,J＝8.3Hz,2H),7.42(dt,J＝11.9,5.0Hz, 6H),6.76(s,2H),4.53–4.40(m,2H),4.20(d,J＝15.5Hz,1H),4.15(s,1H),4.07(d,J＝14.9Hz, 1H),3.86(dq,J＝9.8,5.5,4.9Hz,2H),2.55(s,3H),2.39(s,3H),2.36(s,3H),2.28(s,6H),2.06 (dd,J＝11.1,5.2Hz,2H).HRMS(ESI):calcd for C33H33ClN2O4S[M-H]-587.1771,found 587.1767.HPLC(80:20 methanol:waterwith1‰TFA):tR＝8.45min,98.2％.
实施例55：效果实施例
1、采用荧光偏正的方法测试(FP实验)测试化合物对Mcl-1的抑制活性
采用FP方法测试目标化合物对Mcl-1的抑制活性，蛋白终浓度为20nM，所选探针为FITC-Bak-BH3，探针浓度为10nM。测试使用384孔黑板(型号为Corning3676)，测试终体积选择40μL，所测试化合物和FITC-Bak-BH3多肽荧光探针溶于DMSO(10mmol母液) 中备用。将化合物用HEPES缓冲液倍比稀释11个浓度梯度，每个孔板加入20μL稀释好的化合物，再依次加入10μL缓冲液稀释好的10nM探针和10μL12nM蛋白。每个化合物浓度设定两个复孔，实验设置空白对照(10μL探针+40μL buffer，记为Pmin)和阴性对照(10μL探针+10μL蛋白+20μLbuffer，记为Pmax)。之后在摇床上室温震摇孵育 30min，用SpectraMax Multi-ModeMicroplateReader (Molecular Devices)扫板，激发波长设置为485nm，发射波长设置为535nm，测试孔读数记为Pobs。抑制率计算公式为：抑制率(％) ＝[1-(Pobs-Pmin)/(Pmax-Pmin)]×100％，采用Graphpad Prism 6.0软件计算IC50。Ki按照以下公式进行计算：
Ki＝[I]50/([L]50/Kd+[P]0/Kd+1)
其中[I]50代表化合物的半数抑制浓度，[L]50代表探针浓度，[P]0代表蛋白浓度，Kd代表蛋白与探针的解离常数。
测试结果表明大部分化合物具有Mcl-1低微摩尔级抑制活性，其中部分化合物具有纳摩尔级抑制活性，所有化合物在10微摩尔浓度下对Bcl-2蛋白均无明显抑制活性，结果见表1。
表1所有化合物的Mcl-1抑制活性和Bcl-2抑制活性
2、对肿瘤细胞的抗增殖实验(MTT实验)
测试本发明所述化合物DDO-8300、DDO-8301对人类多发性骨髓瘤细胞株H929细胞株、急性白血病细胞株Mv-4-11、乳腺癌细胞株SK-BR3、非小细胞肺癌细胞株NCI-H23抗增殖、慢性髓细胞白血病细胞株K562(对Mcl-1抑制剂不敏感)的抗增殖活性。方法：以H929细胞株为例，将肿瘤细胞细胞接种于96孔平板中(每孔约有4000个细胞)，于37℃，5％CO2 条件下孵育24小时后，将不同浓度的化合物加入至细胞中，再培养72小时后，各小孔中分别加入20μl MTT的PBS溶液(浓度为5mg/ml)，于37℃孵育4小时，除去MTT和培养基，每个小孔中分别加入150μL DMSO，于490nm下检测(采用Thermo Multiskan Spectrum读板器)，测试结果用Graphpad Prism 6.0分析。
测试结果表明DDO-8300、DDO-8301对H929细胞、Mv4-11细胞活性较好，DDO-8301对K562细胞选择性较好，结果见表2。
表2 DDO-8300、DDO-8301的体外抗肿瘤增殖活性
3、透膜性评价
我们采用PAMPA人工膜模型测定代表化合物DDO-8300和DDO-8301的膜透过率(Pe)，结果见表4，结果表明两个化合物均具可接受的膜透过性。
表4代表性化合物的体外抗肿瘤活性评价
4、DDO-8300、DDO-8301在人工胃肠液中的稳定性评价
我们使用HPLC方法测定化合物在人工胃肠液中孵育0.25、0.5、1、2、4、6、12小时后的含量，计算其降解剩余百分含量。37℃条件下，选取浓度为200μM的化合物分别在胃肠液中孵育指定的时间，根据上述色谱条件进行测定，记录其峰面积，计算剩余百分率。结果显示(图1、图2)，化合物DDO-8300、DDO-8301在模拟人体胃肠道环境的溶液中比较稳定，受胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响比较小。
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。
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