阅读说明：本技术 用于治疗炎症疾病的喹啉衍生物 (Quinoline derivatives for the treatment of inflammatory diseases ) 是由 P·鲍雷蒂 H·埃尔利希 D·谢雷 J·塔泽 于 2019-12-19 设计创作，主要内容包括：本公开涉及式(I)化合物或其代谢物中的任一种或其药学上可接受的盐,用于治疗和/或预防炎性疾病、障碍或病况,其中各R独立地是氢,卤素,-CN,羟基,(C-(1)-C-(3))氟烷基,(C-(1)-C-(3))氟烷氧基,(C-(3)-C-(6))环烷基,-NO-(2),-NR-(1)R-(2),(C-(1)-C-(4))烷氧基,苯氧基,-NR-(1)-SO-(2)-NR-(1)R-(2),-NR-(1)-SO-(2)-R-(1),-NR-(1)-C(＝O)-R-(1),-NR-(1)-C(＝O)-NR-(1)R-(2),-SO-(2)-NR-(1)R-(2),-SO-(3)H,-O-SO-(2)-OR-(3),-O-P(＝O)-(OR-(3))(OR-(4)),-O-CH-(2)-COOR-(3),(C-(1)-C-(3))烷基；各R’独立地是氢,(C-(1)-C-(3))烷基,羟基,卤素,-NO-(2),-NR-(1)R-(2),吗啉基,吗啉代,N-甲基哌嗪基,(C-(1)-C-(3))氟烷基,(C-(1)-C-(4))烷氧基,-O-P(＝O)-(OR-(3))(OR-(4)),-CN,-NH-SO-(2)-N(CH-(3))-(2)基团,或其它基团。本发明还涉及式(IV)化合物或其药学上可接受的盐,用于治疗和/或预防炎性疾病、障碍或病况,其中V,Z,R,R’,n和n’如上文描述。(The present disclosure relates to compounds of formula (I) or any one of its metabolites or a pharmaceutically acceptable salt thereof, for use in the treatment and/or prevention of an inflammatory disease, disorder or condition, wherein each R is independently hydrogen, halogen, -CN, hydroxy, (C) 1 ‑C 3 ) Fluoroalkyl group, (C) 1 ‑C 3 ) Fluoroalkoxy group, (C) 3 ‑C 6 ) Cycloalkyl, -NO 2 ，‑NR 1 R 2 ，(C 1 ‑C 4 ) Alkoxy, phenoxy, -NR 1 ‑SO 2 ‑NR 1 R 2 ，‑NR 1 ‑SO 2 ‑R 1 ，‑NR 1 ‑C(＝O)‑R 1 ，‑NR 1 ‑C(＝O)‑NR 1 R 2 ，‑SO 2 ‑NR 1 R 2 ，‑SO 3 H，‑O‑SO 2 ‑OR 3 ，‑O‑P(＝O)‑(OR 3 )(OR 4 )，‑O‑CH 2 ‑COOR 3 ，(C 1 ‑C 3 ) An alkyl group; each R' is independently hydrogen, (C) 1 ‑C 3 ) Alkyl, hydroxy, halogen, -NO 2 ，‑NR 1 R 2 Morpholinyl, morpholino, N-methylpiperazinyl, (C) 1 ‑C 3 ) Fluoroalkyl group, (C) 1 ‑C 4 ) Alkoxy, -O-P (═ O) - (OR) 3 )(OR 4 )，‑CN，‑NH‑SO 2 ‑N(CH 3 ) 2 A group, or other group. The invention also relates to compounds of formula (IV) or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein V, Z, R ', n and n' are as described above, for use in the treatment and/or prevention of an inflammatory disease, disorder or condition.)

具体实施方式

，8-氯-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)喹啉-2-胺的结晶多晶型形式表征为通过XRPD分析表示的2-Θ角度的下述主要峰：7.3，14.6，23.5和28.4(各自±0.2)和可以进一步显示表示为2-Θ角度的下述额外峰：12.1，17.3，18.4，23.0；24.2，24.9，27.4和29.1(各自±0.2)和甚至任选地表示为2-Θ角度的下述额外峰：13.7，16.3，16.9，18.1，22.4和29.6(各自±0.2)。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗炎性疾病、障碍或病况的方法，包括向有需要的患者给予选自表1的化合物：

表1(如前文所定义的式Ia化合物)

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗炎性疾病、障碍或病况的方法，包括向有需要的患者给予选自表2的化合物：

表2(如前文所定义的式(Ib)化合物)

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗炎性疾病、障碍或病况的方法，包括向有需要的患者给予选自表3的化合物：

表3(与化合物(Ia)和(Ib)不同的式(I)化合物)

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，本文描述的化合物呈盐形式，选自硫酸盐、氢溴酸盐、柠檬酸盐、三氟乙酸盐、抗坏血酸盐、盐酸盐、酒石酸盐、三氟甲磺酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、甲酸盐、乙酸盐、富马酸盐和磺酸盐。在某些实施方式中，本文描述的化合物呈烷基磺酸盐或芳基磺酸盐的盐形式。在某些实施方式中，本文描述的化合物呈甲磺酸盐，三氟甲磺酸盐，乙二磺酸盐，苯磺酸盐和甲苯磺酸盐的盐形式。

在一个方面，本发明提供本文描述的化合物的代谢物。在某些实施方式中，本发明提供本文描述的化合物的N-葡糖苷酸代谢物。在某些实施方式中，本发明提供用于治疗炎性疾病、障碍或病况的方法，包括向有需要的患者给予本文描述的化合物的N-葡糖苷酸代谢物。

在某些实施方式中，本发明提供式(IV)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中各变量V，Z，R，R’，n和n’如前文所定义和本文实施方式所描述，单独或组合地存在，条件是所述化合物不是

在某些实施方式中，本发明提供式IVa化合物：

或其药学上可接受的盐，其中各变量R，R’，n和n’独立地如前文所定义和本文实施方式中所描述，单独和组合地存在。

在某些实施方式中，本发明提供式(IVb)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中各变量R，R’，n和n’独立地是如前文所定义和本文实施方式所描述，单独和组合地存在，条件是所述化合物不是

在某些实施方式中，本发明提供式(IVc)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中各变量R，R’，n和n’独立地如前文所定义和本文实施方式中所描述，单独和组合地存在。

在某些实施方式中，本发明提供式(IVb’)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中各变量R，R’，和n独立地是如前文所定义和本文实施方式所描述，单独和组合地存在，条件是所述化合物不是

在某些实施方式中，本发明提供式(IVd)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中各变量R，R’，R’"独立地是如前文所定义和本文实施方式所描述，单独和组合地存在，条件是所述化合物不是

在某些实施方式中，本发明提供方法用于治疗炎性疾病、障碍或病况，包括向有需要的患者给予式(IV)、(IVa)、(IVb)、(IVc)、(IVb’)和(IVd)中任一种的化合物或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗炎性疾病、障碍或病况的方法，包括向有需要的患者给予下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，本发明提供式(IV)化合物：

或其药学上可接受的盐，其用于治疗和/或预防如前文所定义的炎性疾病、障碍或病况，其中V，Z，R，R’，n和n’如前文所定义。

本发明还提供式(IV)化合物，其用于治疗和/或预防如前文所定义的炎性疾病、障碍或病况，其中化合物具有式(IVb)：

或其药学上可接受的盐，其中R，n，R’，n’如前文所定义。

本文还提供式(IVb)化合物，其用于治疗和/或预防如前文所定义的炎性疾病、障碍或病况，其中化合物具有式(IVb’)：

或其药学上可接受的盐，其中R，n，R’，n’如前文所定义。

本文还提供式(IVb’)化合物，其用于治疗和/或预防如前文所定义的炎性疾病、障碍或病况，其中所述化合物是

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或其代谢物在患者中的水平。在某些实施方式中，在患者生物学样品中测量如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或其代谢物的水平。在某些实施方式中，患者的生物学样品是血液，血浆，组织，唾液和/或血清样品。

在进一步的实施方式中，本发明提供如前文所定义的用途的化合物(I)、(Ib)、(Ib’)、(IV)、(IVb)或(IVb’)，用于治疗患者，其中在使用期间测量如前文所定义的式(I)化合物，(Ib)、(Ib’)、(IV)、(IVb)或(IVb’)或其药学上可接受的盐在患者血液、血浆、组织、唾液和/或血清样品中的水平。

在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ib’)、(Ic)和(Id)化合物或其药学上可接受的盐在患者中的水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量式(IV)、(IVa)、(IVb)、(IVb’)、(IVc)和(IVd)化合物或其药学上可接受的盐在患者中的水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量式(I)和(IV)化合物或其药学上可接受的盐在患者中的总水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量式(I)和(IV)化合物或其药学上可接受的盐在患者中的总水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量式(Ia)和(IVa)化合物或其药学上可接受的盐在患者中的总水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量式(Ib)和(IVb)化合物或其药学上可接受的盐在患者中的总水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量式(Ib’)和(IVb’)化合物或其药学上可接受的盐在患者中的总水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量式(Ic)和(IVc)化合物或其药学上可接受的盐在患者中的总水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量式Id和(IVd)化合物或其药学上可接受的盐在患者中的总水平。

在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括测量和/或监测生物标记在患者中的存在和/或水平。在某些实施方式中，测量在患者的生物学样品中的生物标记的存在和/或水平。在某些实施方式中，患者的生物学样品是血液样品。在某些实施方式中，患者的生物学样品是组织样品。在某些实施方式中，在本发明方法中测量和/或监测的生物标记是miR-124，如WO 2014/111892中所述，通过援引将其全部内容并入本文。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括在给予如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物之前测量和/或监测miR-124在患者中的存在和/或表达水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括在用如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物治疗过程期间测量和/或监测miR-124在患者中的存在和/或表达水平。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括通过测量和/或监测miR-124在患者中的存在和/或表达水平选择用如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物治疗的患者。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括通过测量和/或监测miR-124在患者中的存在和/或表达水平从用如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物治疗中排除患者。在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法还包括通过测量和/或监测miR-124在患者中的存在和/或表达水平来调节(比如增加或减少)待给予患者的如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物的给药方案(比如给药量和/或给药计划)。

在某些实施方式中，用于治疗炎性疾病、障碍或病况的本发明方法包含将miR-124在患者中的测量表达水平与对照参考值比较。用于比较miR-124在患者中的测量表达水平的对照参考值得自对照样品。对照样品能够获自各种来源。在某些实施方式中，对照样品在治疗之前或在疾病存在之前获自患者(比如存档血液样品或组织样品)。在某些实施方式中，对照样品获自群体的一组正常、非患病成员。在某些实施方式中，对照样品在用如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物治疗之前获自患者。在某些实施方式中，细胞测试能够在生物学样品上进行。

在某些实施方式中，与对照参考值相比miR-124在患者中经调节的存在和/或表达水平指出炎性疾病、障碍或病况。在某些实施方式中，与对照参考值相比miR-124在患者中的经调节的存在和/或表达水平指示用给予患者的如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物治疗的效力。术语"调节"或"经调节的存在和/或表达水平"意指生物标记的存在或表达水平被诱导或增加，或另选地被抑制或减少。

在某些实施方式中，相对对照参考值测得miR-124降低或抑制的存在或降低的表达水平指出炎性疾病、障碍或病况。在某些实施方式中，相对对照参考值测得的miR-124存在诱导或增加或表达水平增加指出如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物的效力。在某些实施方式中，在用如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物治疗的患者中测得的miR-124的表达水平相对对照参考值是2倍、4倍、6倍、8倍或10倍。

从而，根据具体实施方式，本发明还提供如前文所定义的用途的式(I)、(Ib)、(Ib’)、(IV)、(IVb)或(IVb’)化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗患者，其中在使用之前和在使用期间测量miR-124在患者血液和/或组织样品中的存在和/或表达水平。

在某些实施方式中，本发明提供监测疾病、障碍或病况的严重性和/或监测治疗(包括但不限于如本文描述的治疗)的效力的算法，其组合-124水平和细胞因子或又一生物标记的水平，或式(I)化合物或(IV)或其药学上可接受的盐的水平。在某些实施方式中，治疗方法如本文描述的包含用算法来监测疾病、障碍或病况的严重性和/或监测治疗的效力，所述算法组合miR-124水平和细胞因子或又一生物标记的水平，或式(I)化合物或(IV)或其药学上可接受的盐的水平。

本文还提供根据本发明的用途的化合物，其中用算法来监测疾病、障碍或病况的严重性和/或监测用途或治疗的效力，所述算法组合miR-124水平和细胞因子或又一生物标记的水平，或如本文所定义的式(I)或(IV)化合物或其药学上可接受的盐的水平。

本文还提供根据本发明的用途的化合物，其中用算法来选择使用或治疗的患者，所述算法组合miR-124水平和细胞因子或又一生物标记的水平，或如本文所定义的式(I)或(IV)化合物或其药学上可接受的盐的水平。

本文还提供监测疾病、障碍或病况的严重性和/或监测治疗的效力的算法，其组合miR-124水平和细胞因子或又一生物标记的水平，或如前文所定义的式(I)或(IV)化合物或其药学上可接受的盐的水平。

从而，根据具体实施方式，本发明还提供如前文所定义的用途的式(I)、(Ib)、(Ib’)、(IV)、(IVb)或(IVb’)化合物，其中用算法来监测疾病、障碍或病况的严重性和/或监测用途的效力，所述算法组合miR-124水平和细胞因子或又一生物标记的水平，或式(I)、(Ib)、(Ib’)、(IV)、(IVb)或(IVb’)化合物或其药学上可接受的盐的水平。

用途、配制剂和给药

药学上可接受的组合物

根据又一实施方式，本发明提供组合物包含本发明化合物或其药学上可接受的衍生物和药学上可接受的载体、助剂或媒介物。在某些实施方式中，本发明组合物配制用于向需要所述组合物的患者给药。在某些实施方式中，本发明组合物配制用于向患者口服给药。

术语"患者"如本文所用意指动物，优选哺乳动物，和最优选人类。

术语"药学上可接受的载体、助剂或媒介物"是指非毒性载体、助剂或媒介物，其不破坏与之配制的化合物的药理学活性。本发明组合物中可以使用的药学上可接受的载体、助剂或媒介物包括但不限于离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白比如人血清白蛋白，缓冲剂物质比如磷酸盐，甘氨酸，山梨酸，山梨酸钾，饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物，水，盐或电解质比如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢二钾，氯化钠，锌盐，胶体二氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，纤维素基物质，聚乙二醇，羧甲纤维素钠，聚丙烯酸类，蜡，聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物，聚乙二醇和羊毛脂。

"药学上可接受的衍生物"意指本发明化合物的任何无毒的盐、酯、酯的盐或其它衍生物，其在向接受者给药后能够直接或间接提供本发明化合物或其活性的代谢物或残余物。

适于本发明的"生物学样品"能够是生物学流体，比如血液、血浆或血清、唾液，间质流体或尿样；细胞样品，比如细胞培养物、细胞系或PBMC样品，活组织检查比如口腔组织、胃肠道组织、皮肤、口腔粘膜样品或来自临床试验的多种样品。

生物学样品能够是粗样品或能够在贮藏、处理或测量之前以各种程度纯化。在某些实施方式中，生物学样品选自生物学组织样品，全血样品，拭子样品，血浆样品，血清样品，唾液样品，阴道液样品，精液样品，咽液样品，滑膜样品，支气管或胸膜液样品，粪液样品，脑脊髓液样品，泪液样品和组织培养物上清液样品。

本发明组合物可以口服，经肠胃外，吸入喷雾，局部，直肠，鼻部，颊部，阴道或经由植入储库给予。术语"肠胃外"如本文所用包括皮下，静脉内，肌内，关节内，滑膜内，胸骨内，鞘内，肝内，病灶内和颅内注射或输注技术。优选，组合物口服，经腹膜内或经静脉内给予。本发明组合物的无菌可注射形式可以是含水或含油的悬浮液。这些悬浮液可以根据本领域已知的技术用适宜的分散或润湿剂和助悬剂配制。无菌可注射制剂还可以是无毒经肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如1,3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的媒介物和溶剂是水，林格溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌非挥发油常规用作溶剂或悬浮介质。

出于该意图，可以使用任何温和非挥发油包括合成的甘油单或二酯。脂肪酸比如油酸及其甘油酯衍生物可用于制备可注射剂，比如天然药学上可接受的油比如橄榄油或蓖麻油，特别是其聚氧基乙基化形式。这些油溶液或悬浮液还可以含有长链醇稀释剂或分散剂比如羧甲基纤维素或在配制药学上可接受的剂型包括乳液和悬浮液中一般使用的相似分散剂。其它一般使用的表面活性剂比如Tweens、Spans和其它乳化剂或一般用于制备药学上可接受的固体、液体或其它剂型的生物利用度增强剂还可以用于配制意图。

药学上可接受的本发明组合物可以以任何口服可接受的剂型口服给予，包括但不限于胶囊、片剂、含水悬浮液或溶液。在片剂用于口服用途的情况下，一般使用的载体包括乳糖和玉米淀粉。一般还加入润滑剂比如硬脂酸镁。对于以胶囊形式口服给药，有用的稀释剂包括乳糖和干玉米淀粉。在口服使用需要含水悬浮液的情况下，活性成分与乳化和助悬剂组合。如果希望，还可以加入某些甜味剂、调味剂或着色剂。

另选地，本发明药学上可接受的组合物可以以直肠给药栓剂形式给予。这些能够通过将试剂与适宜的无刺激性赋形剂混合制备，其在室温下固体但在直肠温度是液体并因此在直肠熔化释放药物。所述物质包括可可油，蜂蜡和聚乙二醇。

本发明药学上可接受的组合物还可以局部给予，特别是在治疗靶标包括局部施用可容易接触的区域或器官的情况下，包括眼、皮肤或小肠道疾病。对于各自这些区域或器官容易地制备适宜的局部配制剂。

小肠道的局部施用能够在直肠栓剂配制剂(参见上文)或在适宜的灌肠配制剂中进行。还可以使用局部透皮的贴剂。

对于局部施用，所提供的药学上可接受的组合物可以在适宜的软膏剂中配制，其含有悬浮或溶于一种或多种载体的活性组分。局部给药本发明化合物的载体包括但不限于矿物油，液体凡士林，白色凡士林，丙二醇，聚氧乙烯，聚氧丙烯化合物，乳化蜡和水。另选地，所提供的药学上可接受的组合物能够在适宜洗剂或霜剂中配制，其含有悬浮或溶于一种或多种药学上可接受的载体的活性组分。

适宜的载体包括但不限于矿物油，脱水山梨糖醇单硬脂酸盐，聚山梨酸酯60，鲸蜡基酯蜡，鲸蜡硬脂醇，2-辛基十二烷醇，苄醇和水。

对于眼用，所提供的药学上可接受的组合物可以配制为等渗、pH调节无菌盐水中的微粒化悬浮液，或优选等渗pH调节无菌盐水中的溶液，含或不含防腐剂比如氯化苄烷铵。另选地，对于眼用，药学上可接受的组合物可以在软膏剂比如凡士林中配制。

本发明药学上可接受的组合物还可以通过鼻气雾剂或吸入给予。所述组合物根据药物制剂领域熟知的技术制备并且可以制备为盐水中的溶液，使用苄醇或其它适宜的防腐剂、增强生物利用度的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其它常规溶剂化或分散剂。最优选，本发明药学上可接受的组合物配制用于口服给药。所述配制剂可以与或不与食品给予。

在某些实施方式中，本发明药学上可接受的组合物不与食品给予。在其它实施方式中，本发明药学上可接受的组合物与食品给予。

可以与载体物质组合产生单个剂型组合物的本发明化合物的量将取决于所治疗的宿主、特定给药模式而变化。优选，所提供的组合物应配制为使得能够向患者接受这些组合物的给予剂量0.01-100mg/kg体重/天的抑制剂。

还应理解，任何特定患者的特定剂量和治疗方案将取决于各种因素，包括所用特定化合物的活性，年龄，体重，一般健康，性别，膳食，给药时间，排泄速率，药物组合，和治疗医师的判断和所治疗的具体疾病的严重性。本发明化合物在组合物中的量也取决于组合物中的具体化合物。

化合物和药学上可接受的组合物的用途

本文描述的化合物和组合物一般用于治疗炎性疾病、障碍或病况。

如本文所用，术语"治疗"、"处理"和"治理"是指逆转、减轻、延缓如本文描述的疾病或障碍或其一种或多种症状发作，或者抑制其进展。在某些实施方式中，治疗可以在已发展一种或多种症状之后给予。在其它实施方式中，治疗可以在不存在症状的情况下给予。例如，可以在症状发作之前向易感个体给予治疗(例如考虑症状病史和/或遗传或其它易感性因素)。治疗还可以在症状消退后继续，从而例如预防或延缓其复发。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗炎性疾病、障碍或病况的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物或组合物。

炎性疾病、障碍或病况

如本文描述的化合物用于治疗炎性或阻塞性气道疾病，使得例如组织损伤、呼吸道炎症、支气管高反应性、重塑或疾病进展降低。在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是炎性或阻塞性气道疾病，包括但不限于任何类型或起源的哮喘，包括内部(非变应性)哮喘和外部(变应性)哮喘，轻微哮喘，中度哮喘，严重哮喘，支气管哮喘，运动诱发性哮喘，职业性哮喘和哮喘诱导的继发细菌感染。哮喘治疗也理解为包含治疗例如小于4或5岁的受试者，其展示哮鸣症状和诊断或可诊断为"气喘婴儿"，这是有重要医学意义的已确立的患者类别并且目前常常确认为初期或早期哮喘。

如本文描述的化合物用于治疗异种免疫疾病。在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是异种免疫疾病，包括但不限于移植物抗宿主病，移植，输注，过敏反应，变态反应(例如对花粉、胶乳、药物、食品、昆虫毒物、动物毛发、动物皮屑、尘螨或蟑螂壳的变态反应)，I型超敏感性，变应性结膜炎，变应性鼻炎，和特应性皮炎。

治疗哮喘的预防效力将展示为降低的症状侵袭(例如急性哮喘或支气管收缩侵袭)频率或严重性，肺功能改善或呼吸道高反应性改善。其还可以展示为对其它症状性治疗(比如用于或期望限制或中断发生中的症状性侵袭的治疗，例如抗炎或支气管扩张治疗)的需求降低。哮喘的预防性益处在易于"早劣化"的受试者中可以尤其明显。"早劣化"是已知晓的哮喘综合征，常见于实质百分比的哮喘并且表征为哮喘侵袭，其时间例如在约4至6am之间，也即通常基本上远离任何预先给予的症状性哮喘治疗的时间。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况选自急性肺损伤(ALI)，成人/急性呼吸窘迫综合症(ARDS)，慢性梗阻性肺、呼吸道或肺脏病(COPD，COAD或COLD)，包括慢性支气管炎或与其相关的呼吸困难，气肿，以及其它药物治疗(尤其是其它吸入药物治疗)导致的呼吸道高反应性恶化。在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是支气管炎，其中支气管炎具有任何类型或起源，包括但不限于急性，花生仁吸入性，卡他性，格鲁布性，慢性或痨病样支气管炎。在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是任何类型或起源的尘肺(炎性、一般职业性的肺病，频繁伴随慢性或急性呼吸道梗阻，并且由重复吸入粉末引起)，包括例如矾土肺，炭末沉着病，石棉沉着病，石末沉着病，睫毛脱落，铁尘肺，矽肺，烟草中毒和棉尘肺。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是嗜酸性粒细胞相关障碍，例如嗜酸性细胞增多症。在某些实施方式中，嗜酸性粒细胞相关障碍是呼吸道的嗜酸性粒细胞相关障碍(例如牵涉肺组织的病态嗜酸性浸润)，包括嗜酸性粒细胞增多症(其影响呼吸道和/或肺)，以及例如与Loffler综合征继发或伴随的呼吸道嗜酸性粒细胞相关障碍，嗜酸性肺炎，寄生物(尤其是后生动物)侵袭(包括热带嗜酸性细胞增多症)，支气管肺曲霉病，结节性多动脉炎(包括Churg-Strauss综合征)，嗜酸性肉芽肿和由药物反应引起的影响呼吸道的嗜酸性粒细胞相关障碍。

如本文描述的化合物也用于治疗皮肤的炎性或变应性病况。在某些实施方式中，皮肤的炎性或变应性病况选自牛皮癣，接触性皮炎，特应性皮炎，斑秃，多形红斑，疱疹样皮炎，硬皮病，白斑，超敏反应脉管炎，荨麻疹，大疱性类天疱疮，红斑狼疮，系统性红斑狼疮，寻常性天疱疮，落叶状天疱疮，副肿瘤性天疱疮，后天性大疱性表皮松解，寻常痤疮，和皮肤的其它炎性或变应性病况。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是具有炎性组分的疾病或病况，例如眼疾病和病况比如眼变态反应，结膜炎，干燥性角结膜炎，葡萄膜炎和春季结膜炎，影响鼻的疾病和病况，包括变应性鼻炎，和牵涉自身免疫反应的或具有自身免疫组分或病原学的炎性疾病，包括自身免疫血液学障碍(例如溶血性贫血，再生障碍性贫血，纯红细胞贫血和特发性血小板减少症)，系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎，多软骨炎，硬皮病，Wegener肉芽肿病，皮肤肌炎，慢性肝炎，重症肌无力，Steven-Johnson综合征，特发性口炎性腹泻，自身免疫炎性肠病(例如溃疡性结肠炎和克罗恩病)，肠易激综合征，乳糜泻，牙周炎，透明膜病，肾脏疾病，肾小球疾病，酒精肝病，多发性硬化，内分泌眼病，格雷夫斯氏病，肉瘤样病，肺泡炎，慢性超敏感性肺炎，多发性硬化，原发性胆汁性肝硬化，葡萄膜炎(前葡萄膜炎和后葡萄膜炎)，斯耶格伦氏综合征，干燥性角结膜炎，葡萄膜炎和春季角结膜炎，间质肺纤维化，牛皮癣关节炎，全身性幼年特发性关节炎，冷凝集素相关周期性综合征，Muckle-Wells综合征，肾炎，脉管炎，憩室炎，间质膀胱炎，肾小球肾炎(存在和不存在肾病综合征，例如包括特发性肾病综合征或微小病变肾病)，慢性肉芽肿病，子宫内膜异位症，钩端螺旋体病肾病，青光眼，视网膜病，老化，头痛，疼痛，复合区域疼痛综合征，心脏肥大，肌肉萎缩，异化障碍，肥胖，胎儿生长迟缓，肠失效，高胆固醇血症，心脏病，慢性心力衰竭，间皮瘤，无汗性外胚层发育不良，Behcet疾病，色素失调症，佩吉特病，急性或慢性胰腺炎，遗传性周期性发热综合征，哮喘(变应性和非变应性，轻微，中度，严重，支气管和锻炼诱导)，急性肺损伤，急性呼吸窘迫综合症，嗜酸性细胞增多症，超敏感性，过敏反应，鼻窦炎，眼变态反应，二氧化硅诱导的疾病，COPD(损伤，呼吸道炎症，支气管高反应性，重塑或疾病进展的降低)，肺病，囊性纤维化，酸诱导的肺损伤，肺动脉高压，多神经病，白内障，与系统性硬化症相关的肌肉炎症，包涵体肌炎，重症肌无力，甲状腺炎，艾迪生病，扁平苔癣，I型糖尿病或II型糖尿病，阑尾炎，特应性皮炎，哮喘，变态反应，眼睑炎，毛细支气管炎，支气管炎，滑囊炎，宫颈炎，胆管炎，胆囊炎，慢性移植排异反应，结肠炎，结膜炎，克罗恩病，膀胱炎，泪腺炎，皮炎，皮肤肌炎，脑炎，心内膜炎，子宫内膜炎，肠炎，小肠结肠炎，上髁炎，附睾炎，筋膜炎，纤维织炎，胃炎，胃肠炎，Henoch-Schonlein紫癜，肝炎，化脓性汗腺炎，免疫球蛋白A肾病，间质性肺病，喉炎，乳腺炎，脑膜炎，脊髓炎心肌炎，肌炎，肾炎，卵巢炎，睾丸炎，骨炎，耳炎，胰腺炎，腮腺炎，心包炎，腹膜炎，咽炎，胸膜炎，静脉炎，肺炎，肺炎，多肌炎，直肠炎，前列腺炎，肾盂肾炎，鼻炎，输卵管炎，鼻窦炎，口炎，滑膜炎，腱炎，扁桃体炎，溃疡性结肠炎，葡萄膜炎，阴道炎，脉管炎，或外阴炎。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是肾、肝、心脏、肺移植物中的急性或慢性移植排异反应或骨髓移植中的移植物抗宿主疾病。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是皮肤的炎性疾病、障碍或病况。在某些实施方式中，皮肤的炎性疾病、障碍或病况选自接触性皮炎，特应性皮炎，斑秃，多形红斑，疱疹样皮炎，硬皮病，白斑，超敏反应脉管炎，荨麻疹，大疱性类天疱疮，寻常性天疱疮，落叶状天疱疮，副肿瘤性天疱疮，后天性大疱性表皮松解，和皮肤的其它炎性或变应性病况。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况选自急性和慢性痛风，慢性痛风性关节炎，牛皮癣，牛皮癣关节炎，类风湿性关节炎，幼年型类风湿关节炎，系统性幼年特发性关节炎(SJIA)，冷凝集素相关周期综合征(CAPS)，Muckle-Wells综合征，和骨关节炎。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是TH17介导的疾病。在某些实施方式中，TH17介导的疾病选自系统性红斑狼疮，多发性硬化，和炎性肠病(包括克罗恩病或溃疡性结肠炎)。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况选自斯耶格伦氏综合征，过敏性障碍，骨关节炎，眼病比如眼变态反应，结膜炎，干燥性角结膜炎和春季结膜炎，和影响鼻的疾病比如变应性鼻炎。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况与移植有关。在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况与器官移植，器官移植排斥和/或移植物抗宿主病有关。在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是自身免疫障碍。在某些实施方式中，自身免疫障碍是I型糖尿病，系统性红斑狼疮，多发性硬化，牛皮癣，疾病，POEMS综合征，克罗恩病，溃疡性结肠炎，强直性脊柱炎，直立脊椎关节炎，原发性胆汁性肝硬化，自身免疫性肝炎，或炎性肠病。

在某些实施方式中，炎性疾病、障碍或病况是炎性障碍。在某些实施方式中，炎性障碍是类风湿性关节炎，哮喘，慢性阻塞性肺疾病，牛皮癣，肝肿大，克罗恩病，溃疡性结肠炎，强直性脊柱炎，直立脊椎关节炎，原发性胆汁性肝硬化，风湿性多肌痛，巨细胞动脉炎，或炎性肠病。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗胰中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，胰中的炎性疾病、障碍或病况选自1型糖尿病，2型糖尿病，急性和慢性胰腺炎。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗肾中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，肾中的炎性疾病、障碍或病况选自肾小球硬化症，肾小球肾炎，肾炎，急性肾损伤，Berger病，肺出血肾炎综合征，韦格纳肉芽肿病，和肾移植急性或慢性排异反应。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗肝中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，肝中的炎性疾病、障碍或病况选自非酒精性脂肪肝炎(NASH)，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，胆汁郁积型肝病，硬化性胆管炎，和肝移植急性或慢性排异反应。

本文还提供如前文所定义的用途的如前文所定义的式(I)、(Ib)或(Ib’)化合物，其中肝中的炎性疾病、障碍或病况选自非酒精性脂肪肝炎(NASH)，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，胆汁郁积型肝病，硬化性胆管炎和肝移植急性或慢性排异反应。

非酒精性脂肪肝病(NAFLD)实际上涵盖从非酒精性脂肪肝(NAFL)到非酒精性脂肪肝炎(NASH)的各种疾病。所述疾病的诊断现今意味着侵入性的肝活组织检查。此外需要具有适宜的疗法。

NAFLD表征为主要大泡型的脂肪变性和在>5％的肝细胞上存在可视的皮脂腺病一般被认为是脂肪肝的有效定义。NAFLD活性得分(NAS)一般通过评价肝活组织检查观察的进行中的肝损伤的严重性用来定义和定量疾病活性。NAS从而是评价NASH活性的临床终点之一(Sanyal AJ.等人，Hepatology，2011；54:344)。得分基于皮脂腺病(0-3)、炎症(0-3)和肝细胞气球样变(0-2)的严重性的评价。

从下文实施例2可见，下式8-氯-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)喹啉-2-胺及其代谢物

在非酒精性脂肪肝炎STAM模型中测试，其是评价化合物治疗NASH活性的充分建立的模型。所述化合物显示与媒介物组相比的NAS降低趋势，预期其在治疗胆汁郁积型肝病、硬化性胆管炎和NAFLD、包括NAFL和NASH中的应用。

另外，如下文实施例2第4.3和4.4点展示，8-氯-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)喹啉-2-胺降低Α-SMA和降低肝中的F4/80-阳性面积。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗肺或心脏中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，肺中的炎性疾病、障碍或病况选自慢性阻塞性肺疾病(COPD)，哮喘，肺纤维化，肺动脉高压，肉瘤样病，心肌炎，心包炎和肺或心脏移植急性或慢性排异反应。

本文还提供如前文所定义用途的如前文所定义的式(I)、(Ib)或(Ib’)化合物，其中炎性疾病、障碍或病况选自慢性阻塞性肺疾病(COPD)，哮喘，肺纤维化，肺动脉高压，肉瘤样病，心肌炎，心包炎和肺或心脏移植急性或慢性排异反应。

从下文实施例3可见，8-氯-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)喹啉-2-胺在Sugen缺氧模型中测试时显示降低平均肺动脉压力于70mg/kg的倾向。

从下文实施例4可见，8-氯-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)喹啉-2-胺在肺动脉高血压的大鼠野百合碱中显著降低已通过野百合碱诱导肺动脉高压的雌性大鼠的肺压力。

全部所述结果预期其在治疗肺纤维化，肺动脉高压，肉瘤样病，心肌炎和心包炎中的用途。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗皮肤中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，皮肤中的炎性疾病、障碍或病况选自接触性皮炎，特应性皮炎，牛皮癣，斑秃，多形红斑，疱疹样皮炎，硬皮病，白斑，超敏反应脉管炎，荨麻疹，大疱性类天疱疮，寻常性天疱疮，落叶状天疱疮，副肿瘤性天疱疮，后天性大疱性表皮松解，痤疮，瘢痕疙瘩，和皮肤的其它炎性或变应性病况。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗血管/血液中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，血管/血液中的炎性疾病、障碍或病况选自Behcet疾病，脉管炎，脓毒症，肿瘤血管生成，动脉粥样硬化，增殖性血管病，和再狭窄。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗眼中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，眼中的炎性疾病、障碍或病况选自结膜炎，巩膜炎，巩膜外层炎，全葡萄膜炎，脉络膜炎，脉络膜视网膜炎，视神经视网膜炎，葡萄膜炎，眼眶炎性病，和视神经炎。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗中枢或周围神经系统中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，中枢或周围神经系统中的炎性疾病、障碍或病况选自非病毒性和病毒性脑炎和脑膜炎，抑郁，神经性疼痛包括慢性痛，外伤性脑损伤包括卒中，阿尔茨海默氏疾病，帕金森病，脊髓炎，1型夏-马-图三氏病(包括CMT1A和CMT1B)，多发性硬化，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，克罗伊茨费尔特-雅各布病，脱髓鞘多神经病和外周神经病。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗自身免疫性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，自身免疫性疾病、障碍或病况选自狼疮包括皮肤和肾中，格-巴二氏综合征，重症肌无力，乔本氏甲状腺炎，特发性紫癜，再生障碍性贫血，格雷夫斯病，和心肌炎。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗肠中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，肠中的炎性疾病、障碍或病况选自肠失效，溃疡性结肠炎和克罗恩病。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗繁殖系统中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，繁殖系统中的炎性疾病、障碍或病况选自子宫内膜异位症，子宫纤维瘤，前列腺发育不良或生长，和宫颈发育不良。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗骨和/或关节中的炎性疾病、障碍或病况的方法。在某些实施方式中，骨和/或关节中的炎性疾病、障碍或病况选自幼年特发性关节炎，牛皮癣关节炎，牙周炎，和手、足、踝、膝、髋、肩、肘或脊柱关节炎和/或脱矿化。

组合治疗

取决于待治疗的特定病况或疾病，可以将通常给予治疗所述病况的额外治疗剂与如本文描述的化合物和组合物组合给予。如本文所用，通常给予治疗特定疾病或病况的额外治疗剂称为"适用于所治疗的疾病或病况"。

在某些实施方式中，本发明提供用于治疗炎性疾病、障碍或病况的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物或组合物和与之组合的又一治疗剂。

那些额外试剂可以与所提供的联合疗法分开给予，充当多次给药方案的一部分。另选地，那些试剂可以是单一剂型的一部分，与本发明化合物在单一组合物中一起混合。如果作为多次给药方案的一部分给予，则两种活性剂可以同时、依次或在彼此间隔的时间段(通常在五小时以内)内提供。

如本文所用，术语"组合"、"联合"和有关术语是指按照本发明同时或依次给予治疗剂。例如，本发明组合可以与又一治疗剂同时或依次在分开的单元剂型中给予或在单一单元剂型中一起给予。

额外治疗剂在本发明组合物中的量将不超过在包含该治疗剂作为唯一活性剂的组合物中会通常给予的量。优选，额外治疗剂在本公开组合物中的量是在包含该试剂作为唯一治疗活性剂的组合物中通常存在量的约50％至100％。

组合可以带来加合或增效效果，其中可以用化合物之一或两者的更低剂量来获得相似的效力，或者其中相同剂量可以带来显著改善的效力。

在某些实施方式中，本发明提供组合物，包含如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂。治疗剂可以与如本文描述的化合物一起给予，或者可以在给予如本文描述的化合物之前或之后给予。适宜的治疗剂进一步详细描述如下。在某些实施方式中，如本文描述的化合物可以在治疗剂之前多至5分钟，10分钟，15分钟，30分钟，1小时，2小时，3小时，4小时，5，小时，6小时，7小时，8小时，9小时，10小时，11小时，12小时，13小时，14小时，15小时，16小时，17小时或18小时给予。在某些实施方式中，如本文描述的化合物可以在治疗剂之后多至5分钟，10分钟，15分钟，30分钟，1小时，2小时，3小时，4小时，5，小时，6小时，7小时，8小时，9小时，10小时，11小时，12小时，13小时，14小时，15小时，16小时，17小时或18小时给予。

在某些实施方式中，本发明提供通过向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂来治疗炎性疾病、障碍或病况的方法。所述额外治疗剂可以是小分子或重组体生物学试剂，并且包括例如对乙酰氨基酚，非甾族抗炎药物(NSAIDS)比如阿司匹林，布洛芬，萘普生，依托度酸和塞来考昔，秋水仙碱皮质类固醇比如泼尼松，泼尼松龙，甲泼尼龙，氢化可的松等，丙磺舒，别嘌醇，非布司他柳氮磺吡啶抗疟剂比如羟氯喹和氯喹甲氨蝶呤金盐比如硫代葡萄糖金硫代苹果酸金和金诺芬D-青霉胺(或)，硫唑嘌呤环磷酰胺苯丁酸氮芥环胞素 他克莫司，西罗莫司，麦考酚酯，来氟米特和"抗-TNF"试剂比如依那西普英利昔单抗戈利木单抗培舍珠单抗和阿达木单抗"抗-IL-1"试剂比如阿那白滞素和利钠西普抗-T细胞抗体比如Thymoglobulin，IV免疫球蛋白(IVIg)，卡那奴单抗抗-Jak抑制剂比如tofacitinib，抗体比如利妥昔单抗"抗-T-细胞"试剂比如阿巴西普"抗-IL-6"试剂比如托珠单抗双氯芬酸，可的松，透明质酸(或)，单克隆抗体比如他尼珠单抗，抗凝剂比如肝素(或)和华法林止泻药比如地芬诺酯和洛哌丁胺胆汁酸结合剂比如考来烯胺，阿洛司琼芦比前列酮缓泻药比如氧化镁乳液，聚乙二醇和抗胆碱能或抗痉挛剂比如双环维林β-2激动剂比如沙丁胺醇(HFA，HFA)，左旋沙丁胺醇奥西那林乙酸吡布特罗硫酸特布他林昔萘酸沙美特罗和福莫特罗抗胆碱能剂比如异丙托溴铵和噻托溴铵吸入的皮质类固醇比如二丙酸倍氯米松(和)，曲安奈德莫米松布地奈德和氟尼缩松色甘酸二钠甲基黄嘌呤比如茶碱 和氨茶碱，IgE抗体比如奥马珠单抗核苷逆转录酶抑制剂比如齐多夫定阿巴卡韦阿巴卡韦/拉米夫定阿巴卡韦/拉米夫定/齐多夫定去羟肌苷恩曲他滨拉米夫定拉米夫定/齐多夫定司他夫定和扎西他滨非核苷逆转录酶抑制剂比如地拉韦啶依法韦仑nevairapine和依曲韦林核苷酸逆转录酶抑制剂比如替诺福韦蛋白酶抑制剂比如氨普那韦阿扎那韦达芦那韦呋山那韦茚地那韦洛匹那韦和利托那韦奈非那韦利托那韦沙奎那韦(或)，和替拉那韦进入抑制剂比如恩夫韦肽和马拉韦罗整合酶抑制剂比如雷特格韦多柔比星长春新碱硼替佐米和地塞米松与来那度胺的组合，抗-IL36试剂比如BI655130，二氢乳清酸脱氢酶抑制剂比如IMU-838，抗-OX40试剂比如KHK-4083，微生物组试剂比如RBX2660，SER-287，窄谱激酶抑制剂比如TOP-1288，抗-CD40试剂比如BI-655064和FFP-104，鸟苷酸环化酶激动剂比如dolcanatide，鞘氨醇激酶抑制剂比如opaganib，抗-IL-12/IL-23试剂比如AK-101，泛素蛋白质连接酶复合物抑制剂比如BBT-401，鞘氨醇受体调节剂比如BMS-986166，P38MAPK/PDE4抑制剂比如CBS-3595，CCR₉拮抗剂比如CCX-507，FimH拮抗剂比如EB-8018，HIF-PH抑制剂比如FG-6874，HIF-1α稳定剂比如GB-004，MAP3K8蛋白质抑制剂比如GS-4875，LAG-3抗体比如GSK-2831781，RIP2激酶抑制剂比如GSK-2983559，类法尼醇X受体激动剂比如MET-409，CCK2拮抗剂比如PNB-001，IL-23受体拮抗剂比如PTG-200，Purinergic P2X7受体拮抗剂比如SGM-1019，PDE4抑制剂比如Apremilast，ICAM-1抑制剂比如alicaforsen钠，抗-IL23试剂比如古塞库单抗，brazikumab和mirkizumab，抗-IL-15试剂比如AMG-714，TYK-2抑制剂比如BMS-986165，NK细胞活化剂比如CNDO-201，RIP-1激酶抑制剂比如GSK-2982772，抗-NKGD2试剂比如JNJ-4500，CXCL-10抗体比如JT-02，IL-22受体激动剂比如RG-7880，GATA-3拮抗剂比如SB-012和群落刺激因子-1受体抑制剂比如edicotinib或其任何组合。

在又一实施方式中，本发明提供治疗痛风的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂，其选自非甾族抗炎药物(NSAIDS)比如阿司匹林，布洛芬，萘普生，依托度酸和塞来考昔，秋水仙碱皮质类固醇比如泼尼松，泼尼松龙，甲泼尼龙，氢化可的松等，丙磺舒，别嘌醇和非布司他

在又一实施方式中，本发明提供治疗类风湿性关节炎的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂，其选自非甾族抗炎药物(NSAIDS)比如阿司匹林，布洛芬，萘普生，依托度酸和塞来考昔，皮质类固醇比如泼尼松，泼尼松龙，甲泼尼龙，氢化可的松，等，柳氮磺吡啶抗疟剂比如羟氯喹和氯喹甲氨蝶呤金盐比如硫代葡萄糖金硫代苹果酸金和金诺芬D-青霉胺(或)，硫唑嘌呤环磷酰胺苯丁酸氮芥环胞素来氟米特和"抗-TNF"试剂比如依那西普英利昔单抗戈利木单抗培舍珠单抗和阿达木单抗"抗-IL-1"试剂比如阿那白滞素和利钠西普抗体比如利妥昔单抗"抗-T-细胞"试剂比如阿巴西普和"抗-IL-6"试剂比如托珠单抗

在某些实施方式中，本发明提供治疗骨关节炎的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂，其选自对乙酰氨基酚，非甾族抗炎药物(NSAIDS)比如阿司匹林，布洛芬，萘普生，依托度酸和塞来考昔，双氯芬酸，可的松，透明质酸(或)和单克隆抗体比如他尼珠单抗。

在某些实施方式中，本发明提供治疗狼疮的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂，其选自对乙酰氨基酚，非甾族抗炎药物(NSAIDS)比如阿司匹林，布洛芬，萘普生，依托度酸和塞来考昔，皮质类固醇比如泼尼松，泼尼松龙，甲泼尼龙，氢化可的松等，抗疟剂比如羟氯喹和氯喹环磷酰胺甲氨蝶呤硫唑嘌呤和抗凝剂比如肝素(或)和华法林

在某些实施方式中，本发明提供治疗克罗恩病、溃疡性结肠炎或炎性肠病的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂，其选自美沙拉秦柳氮磺吡啶止泻药比如地芬诺酯和洛哌丁胺胆汁酸结合剂比如考来烯胺，阿洛司琼芦比前列酮缓泻药比如氧化镁乳液，聚乙二醇 和和抗胆碱能或抗痉挛剂比如双环维林抗-TNF疗法，类固醇，和抗生素比如Flagyl或环丙沙星。

在某些实施方式中，本发明提供治疗哮喘的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂，其选自β-2激动剂比如沙丁胺醇(HFA，HFA)，左旋沙丁胺醇奥西那林乙酸吡布特罗硫酸特布他林昔萘酸沙美特罗和福莫特罗抗胆碱能剂比如异丙托溴铵和噻托溴铵吸入的皮质类固醇比如泼尼松，泼尼松龙，二丙酸倍氯米松(和)，曲安奈德莫米松布地奈德氟尼缩松 和色甘酸二钠甲基黄嘌呤比如茶碱和氨茶碱，和IgE抗体比如奥马珠单抗

在某些实施方式中，本发明提供治疗COPD的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂，其选自β-2激动剂比如沙丁胺醇(HFA，HFA)，左旋沙丁胺醇奥西那林乙酸吡布特罗硫酸特布他林昔萘酸沙美特罗和福莫特罗抗胆碱能剂比如异丙托溴铵和噻托溴铵甲基黄嘌呤比如茶碱 和氨茶碱，吸入的皮质类固醇比如泼尼松，泼尼松龙，二丙酸倍氯米松(和)，曲安奈德莫米松布地奈德氟尼缩松和

在某些实施方式中，本发明提供治疗HIV的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂，其选自核苷逆转录酶抑制剂比如齐多夫定阿巴卡韦阿巴卡韦/拉米夫定阿巴卡韦/拉米夫定/齐多夫定去羟肌苷恩曲他滨拉米夫定拉米夫定/齐多夫定司他夫定和扎西他滨非核苷逆转录酶抑制剂比如地拉韦啶依法韦仑nevairapine和依曲韦林核苷酸逆转录酶抑制剂比如替诺福韦蛋白酶抑制剂比如氨普那韦阿扎那韦达芦那韦呋山那韦茚地那韦洛匹那韦和利托那韦奈非那韦利托那韦沙奎那韦(或)，和替拉那韦进入抑制剂比如恩夫韦肽和马拉韦罗整合酶抑制剂比如雷特格韦及其组合。

在某些实施方式中，本发明提供治疗器官移植排斥或移植物抗宿主病的方法，包括向有需要的患者给予如本文描述的化合物和一种或多种额外治疗剂，其选自类固醇，环孢素，FK506，雷帕霉素，hedgehog信号转导抑制剂，BTK抑制剂，JAK/pan-JAK抑制剂，TYK2抑制剂，PI3K抑制剂，和SYK抑制剂。

根据本发明方法的化合物和组合物可以用有效治疗炎性疾病、障碍或病况或者降低其严重性的任何量和任何给药途径给予。需要的精确量在受试者之间变化，取决于受试者的种类、年龄和一般情况，疾病或病况的严重性，特定试剂，其给药模式等。如本文描述的化合物优选配制为剂量单元形式，以便于施用和剂量均匀性。措辞"剂量单元形式"如本文所用是指适用于待治疗患者的物理离散的试剂单元。然而，应理解本发明化合物和组合物的总和每日使用将由主治医师在合理的医学判断范围内决定。用于任何特定患者或生物体的特定有效剂量水平将取决于各种因素，包括所治疗的障碍和障碍的严重性；所用特定化合物的活性；所用的特定组合物；患者的年龄，体重，一般健康，性别和膳食；给药时间，给药途径，和所用特定化合物的排泄速率；治疗的持续时间；与所用的特定化合物组合或同时使用的药物，以及医学领域熟知的其他因素。术语"患者"如本文所用意指动物，优选哺乳动物，和最优选人类。

本发明药学上可接受的组合物能够口服、直肠、经肠胃外、池内、阴道内、经腹膜内、局部(作为粉末、软膏剂或滴剂)、颊部、作为口或鼻喷雾等给予人类和其它动物，取决于所治疗感染的严重性。在某些实施方式中，本发明化合物可以以剂量水平约0.01mg/kg至约50mg/kg和优选约1mg/kg至约25mg/kg受试者体重每天，每天一次或多次口服或经肠胃外给予以获得所希望的治疗效果。

用于口服给药的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳液，微乳剂，溶液，悬浮液，糖浆剂和酏剂。除了活性化合物之外，液体剂型还可以含有本领域一般使用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂比如乙醇，异丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苄醇，苯甲酸苄酯，丙二醇，1,3-丁二醇，二甲基甲酰胺，油(尤其是棉籽油，花生油，玉米油，胚芽油，橄榄油，蓖麻油和芝麻油)，甘油，四氢糠醇，脱水山梨糖醇的聚乙二醇和脂肪酸酯，及其混合物。除惰性稀释剂之外，口服组合物还能够包括助剂比如润湿剂，乳化和助悬剂，甜味剂，调味剂和芳香剂。

可注射的制剂例如无菌可注射的含水或含油悬浮液可以根据本领域已知用适宜的分散或润湿剂和助悬剂来配制。无菌可注射的制剂还可以是无毒经肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射的溶液、悬浮液或乳液，例如1,3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的媒介物和溶剂尤其是水，林格溶液，U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，无菌非挥发油常规用作溶剂或悬浮介质。出于该意图能够使用任何温和非挥发油，包括合成的甘油单酯或二酯。此外，脂肪酸比如油酸用于制备可注射剂。

可注射的配制剂能够进行灭菌，例如借助过滤通过细菌截留滤器，或者掺入无菌固体组合物形式的灭菌试剂，其在使用前能够溶解或分散在无菌水或其它无菌可注射介质中。

为了延长本发明化合物的效果，常常希望延缓化合物从皮下或肌内注射的吸收。这可以通过使用劣水溶解度的结晶或无定形物质的液体悬浮液来实现。化合物的吸收速率然后取决于其溶解速率，其又可以取决于晶体尺寸和晶型。另选地，经肠胃外给予的化合物形式的延缓吸收通过将化合物溶解或悬浮在油媒介物中来实现。通过形成化合物在生物可降解聚合物比如聚丙交酯-聚乙醇酸交酯中的微胶囊基质制备可注射的贮库剂型。取决于化合物与聚合物的比率和所用特定聚合物的性质，能够控制化合物释放速率。其它生物可降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。贮库型可注射配制剂也通过将化合物包埋在与身体组织相容的脂质体或微乳剂中来制备。

用于直肠或阴道给药的组合物优选是栓剂，其能够通过将本文描述的化合物与适宜的无刺激性赋形剂或载体比如可可油、聚乙二醇或栓剂蜡混合制备，其在环境温度是固体但在体温是液体和因此在直肠或阴道腔中熔化并释放活性化合物。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊，片剂，丸剂，粉末和颗粒剂。在所述固体剂型中，活性化合物与至少一种惰性的、药学上可接受的赋形剂或载体混合，比如枸橼酸钠或磷酸氢钙和/或a)填料或增量剂比如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘结剂比如羧甲纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)保湿剂比如甘油，d)崩解剂比如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶解延缓剂比如石蜡，f)吸收加速剂比如季铵化合物，g)润湿剂比如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯，h)吸收剂比如高岭土和斑脱粘土，和i)润滑剂比如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠，及其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包含缓冲剂。

相似类型的固体组合物还可以用作软和硬填充明胶胶囊中的填料，其使用赋形剂比如乳糖或乳糖以及高分子量聚乙二醇等。片剂、锭剂、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型能够用包衣和壳层比如肠衣和药物制剂领域熟知的其它包衣制备。它们可以任选地含有遮光剂并且还能够是仅或优先在肠道的某些部分任选以延缓方式释放活性成分的组合物。能够使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。相似类型的固体组合物还可以用作软和硬填充明胶胶囊中的填料，其使用赋形剂比如乳糖或乳糖以及高分子量聚乙二醇等。

活性化合物还能够呈微包囊形式，含一种或多种上述赋形剂。片剂、锭剂、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型能够用包衣和壳层比如肠衣、控释包衣和药物制剂领域熟知的其它包衣制备。在所述固体剂型中，活性化合物可以与至少一种惰性稀释剂比如蔗糖、乳糖或淀粉混合。

在普通实践中，所述剂型还可以包含不同于惰性稀释剂的额外物质，例如压片润滑剂和其它压片助剂比如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包含缓冲剂。它们可以任选地含有遮光剂并且还能够是仅或优先在肠道的某些部分任选以延缓方式释放活性成分的组合物。能够使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。

用于局部或经皮给药本发明化合物的剂型包括软膏剂，糊剂，霜剂，洗剂，凝胶，粉末，溶液，喷雾剂，吸入剂或贴剂。

活性组分在无菌条件下与药学上可接受的载体和任何需要的防腐剂或缓冲剂按需要混合。眼配制剂、滴耳剂和滴眼剂也预期属于本发明范围。额外地，本发明预期使用透皮贴剂，其具有提供化合物向身体受控递送的额外优势。所述剂型能够通过将化合物溶解或分配在合适介质中制备。吸收增强剂还能够用来增加化合物穿越皮肤的通量。速率能够通过提供速率控制膜或通过将化合物分散在聚合物基质或凝胶中来控制。

本发明化合物也用作共同治疗的化合物与其它药物物质(比如抗炎性、支气管扩张或抗组胺药物物质)组合使用，特别是用于治疗梗阻性或炎性呼吸道疾病比如前文提及的那些，例如作为所述药物治疗活性的增效剂或者作为降低所述药物的所需剂量或潜在副作用的手段。本发明化合物可以与其它药物物质在固定的药物组合物中混合，或者其可以在其它药物物质之前、同时或之后分开给予。相应地，本发明包括前文描述的本发明化合物与抗炎性、支气管扩张、抗组胺或止咳的药物物质的组合，所述本发明化合物和所述药物物质位于相同或不同的药物组合物中。

适宜的抗炎药物包括类固醇，尤其是糖皮质类固醇类比如布地奈德，丙酸倍氯米松，丙醋氟替卡松，环索奈德或糠酸莫米松；非甾族糖皮质激素受体激动剂；LTB4拮抗剂比如LY293111，CGS025019C，CP-195543，SC-53228，BIIL 284，ONO 4057，SB 209247；LTD4拮抗剂比如孟鲁司特和扎鲁司特；PDE4抑制剂比如西洛司特(GlaxoSmithKline)，罗氟司特(Byk Gulden)，V-11294A(Napp)，BAY19-8004(Bayer)，SCH-5 351591(Schering-Plough)，阿罗茶碱(Almirall Prodesfarma)，PD189659/PD168787(ParkeDavis)，AWD-12-281(Asta Medica)，CDC-801(Celgene)，SeICID^TMCC-10004(Celgene)，VM554/UM565(Vernalis)，T-440(Tanabe)，KW-4490(Kyowa Hakko Kogyo)；A2a激动剂；A2b拮抗剂；和β-2肾上腺素受体激动剂比如沙丁胺醇(沙丁胺醇)，奥西那林，特布他林，沙美特罗非诺特罗，丙卡特罗，和特别是福莫特罗和其药学上可接受的盐。适宜的支气管扩张药包括抗胆碱能药或抗毒蕈碱化合物，尤其是异丙托溴铵，氧托溴铵，噻托溴铵盐和CHF 4226(Chiesi)，和格隆溴铵。

适宜的抗组胺药物物质包括西替利嗪盐酸盐，对乙酰氨基酚，富马酸氯马斯汀，异丙嗪，氯雷他定，地氯雷他定，苯海拉明和非索非那定盐酸盐，activastine，阿司咪唑，氮斯汀，依巴斯汀，依匹斯汀，咪唑斯汀和tefenadine。

本发明化合物与抗炎药物的其它有用组合是与趋化因子受体拮抗剂的那些，例如CCR-1，CCR-2，CCR-3，CCR-4，CCR-5，CCR-6，CCR-7，CCR-8，CCR-9和CCR₁₀，CXCR₁，CXCR₂，CXCR₃，CXCR₄，CXCR₅，特别是CCR-5拮抗剂比如Schering-Plough拮抗剂SC-351125，SCH-55700和SCH-D，和Takeda拮抗剂比如N-[[4-[[[6,7-二氢-2-(4-甲基苯基)-5H-苯并-环庚烯-8-基]羰基]氨基]苯基]-甲基]四氢-N,N-二甲基-2H-吡喃-4-铵氯化物(TAK-770)。

活性化合物结构通过编码数字鉴定，通用名或商品名可以取自实体版标准汇编"The Merck Index"或数据库例如Patents International(例如IMS WorldPublications)。

本发明化合物能够单独给予或与一种或多种其它治疗化合物组合给予，可能的联合疗法呈固定组合形式，或者本发明化合物和一种或多种其它治疗化合物的给予是错开的或彼此独立提供的，或固定组合和一种或多种其它治疗化合物组合给药。

那些额外试剂可以与含本发明化合物的组合物作为多次给药方案的一部分分开给予。另选地，那些试剂可以是单一剂型的一部分，与本发明化合物在单一组合物中一起混合。如果作为多次给药方案的一部分给予，两种活性剂可以同时、依次或在隔开的时间段(通常五小时内)内提供。

如本文所用，术语"组合"、"联合"和有关术语是指按照本发明同时或依次给药治疗剂。例如，本发明化合物可以与又一治疗剂同时或依次在分开的单元剂型中给予或在单一单元剂型中一起给予。相应地，本发明提供单一单元剂型，包含本发明化合物、额外治疗剂和药学上可接受的载体、助剂或媒介物。

可以与载体物质组合产生单一剂型的如本文描述的化合物和额外治疗剂(在包含上述额外治疗剂的那些组合物中)的量将取决于所治疗的宿主和特定给药模式变化。优选，本发明组合物应配制使得能够给予剂量0.01-100mg/kg体重/天的本发明化合物。

在包含额外治疗剂的那些组合物中，所述额外治疗剂和本发明化合物可以增效地起作用。因此，额外治疗剂在所述组合物中的量将小于仅使用该治疗剂的单一疗法中所需。在所述组合物中，能够给予剂量0.01-1,000μg/kg体重/天的额外治疗剂。

额外治疗剂在本发明组合物中的量将不超过在包含治疗剂作为唯一活性剂的组合物会通常给予的量。优选，额外治疗剂在本公开组合物中的量是在包含该试剂作为唯一治疗活性剂的组合物中通常存在的量的约50％至100％。

本发明化合物或其药物组合物还可以掺入组合物用于包衣可植入医学装置比如假体、人工阀、血管移植物、支架和导管。例如，血管支架已用来克服再狭窄(在受伤后血管壁再变窄)。然而，使用支架或其它可植入装置的患者有凝块形成或血小板活化风险。这些不希望的效果可以通过用包含激酶抑制剂的药学上可接受的组合物预先包衣装置来预防或缓和。用本发明化合物包衣的可植入装置是本发明的又一实施方式。

除了上述预防和/或治疗方法之外，本发明还提供预防和/或治疗如本文描述的疾病、障碍或病况的相应用途。在某些实施方式中，本发明提供如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐用于预防和/或治疗如本文描述的炎性疾病、障碍或病况的用途。在某些实施方式中，本发明提供的对炎性疾病、障碍或病况的预防和/或治疗期望用于患者，其miR-124的存在和/或表达水平通过如本文描述的方法测量和/或监测。

本文还提供如前文所定义的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ib’)、(Ic)、(Id)、(IV)、(IVa)、(IVb)、(IVb’)、(IVc)，或(IVd)化合物或其药学上可接受的盐，其用于在有需要的患者中治疗或预防炎性疾病、障碍或病况，其中炎性疾病、障碍或病况选自：

(a)胰中的炎性疾病、障碍或病况，选自1型糖尿病，2型糖尿病，急性和慢性胰腺炎；

(b)肾中的炎性疾病、障碍或病况，选自肾小球硬化症，肾小球肾炎，肾炎，急性肾损伤，Berger病，肺出血肾炎综合征，韦格纳肉芽肿病和肾移植急性或慢性排异反应；

(c)肝中的炎性疾病、障碍或病况，选自非酒精性脂肪肝炎(NASH)，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，胆汁郁积型肝病，硬化性胆管炎和肝移植急性或慢性排异反应；

(d)肺或心脏中的炎性疾病、障碍或病况，选自慢性阻塞性肺疾病(COPD)，哮喘，肺纤维化，肺动脉高压，肉瘤样病，心肌炎，心包炎和肺或心脏移植急性或慢性排异反应；

(e)皮肤中的炎性疾病、障碍或病况，选自接触性皮炎，特应性皮炎，牛皮癣，斑秃，多形红斑，疱疹样皮炎，硬皮病，白斑，超敏反应脉管炎，荨麻疹，大疱性类天疱疮，寻常性天疱疮，落叶状天疱疮，副肿瘤性天疱疮，后天性大疱性表皮松解，痤疮，瘢痕疙瘩，和皮肤的其它炎性或变应性病况；

(f)血管/血液中的炎性疾病、障碍或病况，选自Behcet疾病，脉管炎，脓毒症，肿瘤血管生成，动脉粥样硬化，增殖性血管病和再狭窄；

(g)眼中的炎性疾病、障碍或病况，选自结膜炎，巩膜炎，巩膜外层炎，全葡萄膜炎，脉络膜炎，脉络膜视网膜炎，视神经视网膜炎，葡萄膜炎，眼眶炎性病，和视神经炎；

(h)中枢或周围神经系统中的炎性疾病、障碍或病况，选自非病毒性和病毒性脑炎和脑膜炎，抑郁，神经性疼痛，包括慢性痛，外伤性脑损伤，包括卒中，阿尔茨海默氏疾病，帕金森病，脊髓炎，1型夏-马-图三氏病(包括CMT1A和CMT1B)，多发性硬化，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，克罗伊茨费尔特-雅各布病，脱髓鞘多神经病和外周神经病；

(i)自身免疫性疾病、障碍或病况，选自狼疮，包括皮肤和肾中，格-巴二氏综合征，重症肌无力，乔本氏甲状腺炎，特发性紫癜，再生障碍性贫血，格雷夫斯病，和心肌炎；

(j)肠中的炎性疾病、障碍或病况，选自肠失效，溃疡性结肠炎和克罗恩病；

(k)繁殖系统中的炎性疾病、障碍或病况，选自子宫内膜异位症，子宫纤维瘤，前列腺发育不良或生长，和宫颈发育不良；以及

(l)骨和/或关节中的炎性疾病、障碍或病况，选自幼年特发性关节炎，牛皮癣关节炎，牙周炎，和手，足，踝，膝，髋，肩，肘或脊柱关节炎和/或脱矿化。

本文还提供如前文所定义的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ib’)、(Ic)、(Id)、(IV)、(IVa)、(IVb)、(IVb’)、(IVc)，或(IVd)化合物或其药学上可接受的盐，用作期望用于患者的抗炎剂，其中在抗炎剂的所述使用过程之前和/或期间监测miR-124在所述患者血液和/或组织样品中的存在和/或表达水平。

可以用动物临床前模型来评价任何形式的8-氯-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)喹啉-2-胺及其代谢物或其药学上可接受的盐之一的抗炎活性。

实施例1

例如，在小鼠IMQ-诱导的银屑病模型中进行。牛皮癣可以通过例如在0至9天每日剂量给药IMQ诱导，并且治疗可以例如在第0天至第9天每日给予。抗炎活性可以例如通过测量牛皮癣得分来评价。

例如，在MPTP-诱导的帕金森病小鼠模型中小鼠可以在第0天以2小时间隔接受例如4次腹腔内(IP)注射20mg/ml MPTP。治疗可以例如在第0天至第7天每日给予。抗炎活性可以例如通过黑质致密部(SNpc)水平的TH免疫反应分析来评价。

例如，在MOG-诱导的实验自身免疫脑脊髓炎(EAE)鼠类模型中进行。EAE可以例如通过在研究第0天在腰椎旁区域注射MOG/CFA接种来诱导。并且为了增加血-脑屏障(BBB)渗透，全部动物可以通过在研究第0天和第2天腹腔内注射百日咳毒素(PT)进行例如补充的免疫刺激。治疗可以例如从第0天、第3天或第10天每日给予，并且消炎活性可以例如通过临床得分或/和评价细胞浸润和脱髓鞘的经由H&E染色进行脊髓的组织学评价和/或CNS/疼痛参数评价来测量。例如，在小鼠糖尿病的NOD特发性模型中进行。治疗可以每日给予，并且抗炎活性可以例如通过血糖水平和/或口服葡萄糖耐受试验来评价。

在下述实施例中，化合物A是8-氯-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)喹啉-2-胺或ABX464而化合物B是其下式代谢物

实施例2：化合物在非酒精性脂肪肝炎(NASH研究)STAM模型中的体内效力研究

A.物质和方法

1.试验物质

为了制备剂量给药溶液，称量化合物A和B并悬浮在由20％的媒介物-A1和80％的媒介物-A2构成的媒介物中。媒介物-A1的组成是0.5％(w/v)羧甲基纤维素(CMC)(400-800厘泊，在注射用水中)+2.5％(w/v)吐温80。媒介物-A2的组成是0.5％(w/v)羧甲基纤维素(CMC)(400-800厘泊，在注射用水中)。替米沙坦购自Boehringer IngelheimGmbH(德国)并溶于纯水。

2.诱导NASH

在48只雄性小鼠中诱导NASH：在出生之后2天单次皮下注射200μg链唑霉素(STZ，Sigma-Aldrich，USA)溶液，并在4周龄之后饲喂高脂肪膳食(HFD，57kcal％脂肪，Cat#HFD32，CLEA Japan，Inc.，日本)。

3.药物给药途径

化合物A和B和替米沙坦以体积10mL/kg口服给予。

4.治疗剂量

从6至9周龄，化合物A以3个剂量水平10、20和40mg/kg每日1次给予。从6至9周龄，化合物B以剂量40mg/kg每日1次给予。从6至9周龄，替米沙坦以剂量10mg/kg每日1次给予。

5.动物

C₅₇BL/6小鼠(14-天-怀孕雌性)得自Japan SLC，Inc.(日本)。研究所用的全部动物都按照日本药理学会的动物使用指南圈养和照料。

动物保持在受控条件下的SPF设施中，其温度(23±3℃)，湿度(50±20％)，照明(12-小时人工光照和避光周期；从8:00至20:00光照)和空气交换。在实验室中保持高压以防止设施污染。

动物圈养在TPX笼(CLEA日本)中，最多4只小鼠每笼。灭菌Palmas-μ(物质研究中心，日本)用于卧具且每周替换1次。

随意提供灭菌的固体HFD，其置于笼顶的金属盖上。从配有橡胶塞和吸管的水瓶随意提供纯水。水瓶每周替换1次，清洁和在高压釜中灭菌并再使用。

通过耳部打孔鉴定小鼠。各笼用特定鉴定编码标记。

6.血浆生物化学的测量

对于血浆生物化学，将非空腹血液收集在含抗凝剂(Novo-Heparin，MochidaPharmaceutical Co.Ltd.，日本)的聚丙烯管中和在4℃于1,000xg离心15分钟。收集上清液和在-80℃储存直至使用。血浆ALT通过FUJI DRI-CHEM 7000(Fujifilm，日本)测量。

7.肝甘油三酯含量的测量

肝总脂质提取物通过Folch方法(Folch J.等人，J.Biol.Chem.1957；226：497)获得。肝样品在氯仿-甲醇(2:1，v/v)中匀化和在室温下温育过夜。在用氯仿-甲醇-水(8:4：3，v/v/v)洗涤之后，将提取物蒸发至干，和溶于异丙醇。肝甘油三酯含量通过甘油三酯E-试验(FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation，日本)测量。

8.组织学分析

为了HE染色，从在Bouin溶液中预固定的肝组织石蜡块割取切片并用Lillie-Mayer苏木精(Muto Pure Chemical Co.，Ltd.，日本)和曙红溶液(FUJIFILM Wako PureChemical Corporation)染色。NAFLD活性得分(NAS)根据Kleiner(Kleiner DE.等人，Hepatology，2005；41:1313)的标准计算。为了可视化胶原沉积，将Bouin固定的肝切片用picro-Sirius红溶液(Waldeck，德国)染色。为了定量分析纤维化面积，用数字照相机(DFC₂₉₅；Leica，德国)于200-倍放大率在中央静脉周围捕获Sirius红-染色切片的亮场图像，并且在5个场/切片中的阳性面积用ImageJ软件(National Institute of Health，USA)测量。

9.样品收集

对于血浆样品，将非空腹血液收集在含抗凝剂(Novo-Heparin)的聚丙烯管中和在4℃于1,000xg离心15分钟。收集20μL上清液，在-80℃储存用于生物化学分析。收集剩余血浆和在-80℃储存用于运送。对于冷冻的肝样品，收集左侧叶并切为6片。将左侧叶、左和右中叶、和尾叶中的2片在液氮中快速冷冻并在-80℃储存用于运送。将左侧叶的另2片固定在Bouin溶液中然后包埋在石蜡中。将石蜡块储存在室温下用于组织学分析。将左侧叶的剩余片包埋在O.C.T.化合物中和在液氮中快速冷冻。样品在-80℃储存。右叶在液氮中快速冷冻，和在-80℃储存用于肝生物化学。

10.统计学测试

在GraphPad Prism 6(GraphPad Software Inc.，USA)上用Bonferroni多比较检验进行统计学分析。P值<0.05视为统计学上显著。展示趋势或倾向的条件是单尾T检验返回P值<0.1。结果表示为平均值±SD。

B.实验设计和处理

1.研究组

组1：媒介物

向8只NASH小鼠口服给予体积10mL/kg的媒介物[20％的媒介物-A1和80％的媒介物-A2]，从6至9周龄每日1次。

组2：化合物A低

向8只NASH小鼠口服给予补充化合物A的媒介物，从6至9周龄每日1次，剂量10mg/kg。

组3：化合物A中

向8只NASH小鼠口服给予补充化合物A的媒介物，从6至9周龄每日1次，剂量20mg/kg。

组4：化合物A高

向8只NASH小鼠口服给予补充化合物A的媒介物，从6至9周龄每日1次，剂量40mg/kg。

组5：化合物B

向8只NASH小鼠口服给予补充化合物B的媒介物，从6至9周龄每日1次，剂量40mg/kg。

组6：替米沙坦

向8只NASH小鼠口服给予补充替米沙坦的纯水，从6至9周龄每日1次，剂量10mg/kg。

下表4概括处理计划：

表4

2.动物监测和处死

每日监测存活率，临床征兆和行为。在治疗之前记录体重。在各次给药之后大约60分钟，观察小鼠中毒、濒死和死亡的显著临床征兆。于9周龄通过在异氟烷麻醉(PfizerInc.)下直接心脏穿刺放血处死动物。

C.结果

1.体重变化和一般状况

从第9天至第21天，替米沙坦组的平均体重显著低于媒介物组。在治疗时间段期间的任何一天在媒介物组与其它治疗组之间不存在平均体重的显著变化。

在治疗时间段期间全部组不存在死亡动物。在本研究中，没有动物显示一般状况的劣化。

2.在处死日的体重和肝重

2.1.在处死日的体重(表5)

在处死日，替米沙坦组显示与媒介物组相比的平均体重显著降低。在处死日，在媒介物组与其它治疗组之间不存在平均体重的显著差异。

2.2.肝重和肝重与体重比(表5)

替米沙坦组显示与媒介物组相比平均肝重的显著降低。化合物A低组显示与媒介物组相比平均肝重的显著增加。化合物A高和化合物B组的平均肝重与媒介物组相比倾向于增加。在媒介物组与化合物A中组之间不存在平均肝重的显著差异。

替米沙坦组的平均肝重与体重比与媒介物组相比倾向于降低。化合物A低、中和高组以及化合物B组中的平均肝重与体重比与媒介物组相比倾向于增加。

表5：体重和肝重

3.生物化学

3.1。血浆ALT(图3.1和表6)

化合物A高组显示与媒介物组相比血浆ALT水平的显著增加。化合物A低和中组以及化合物B组的血浆ALT水平与媒介物组相比倾向于增加。在媒介物组与替米沙坦组之间不存在血浆ALT水平的显著差异。

3.2.肝甘油三酯(图3.2和表2)

替米沙坦组中的肝甘油三酯含量与媒介物组相比倾向于降低。化合物B组中的肝甘油三酯含量与媒介物组相比倾向于增加。在媒介物组与其它治疗组之间不存在肝甘油三酯含量的显著差异。

表6：生物化学

4.组织学分析

4.1.HE染色和NAFLD活性得分(表7和图1、2、3和4)

分析HE-染色肝切片的代表性显微照片。图1代表NAFLD活性得分，图2代表皮脂腺病得分，图3代表炎症得分和图4代表气球样变得分。

媒介物组的肝切片展示的小泡型和大泡型脂肪沉积，肝细胞气球样变和炎性细胞浸润。替米沙坦组显示与媒介物组相比NAS的显著降低。化合物A低、中和高组以及化合物B组的NAS与媒介物组相比倾向于降低。

表7：NAFLD活性得分

NAS组分的定义

4.2.Sirius红染色和纤维化面积(表8和图5)

分析Sirius红-染色的肝切片的代表性显微照片。图5代表纤维化面积。

来自媒介物组的肝切片显示肝小叶中枢周区域的增加的胶原沉积。化合物A中组的纤维化面积(Sirius红-阳性面积)与媒介物组相比倾向于降低。化合物B组的纤维化面积与媒介物组相比倾向于增加。在媒介物组与其它治疗组之间不存在纤维化面积的显著差异。

表8：纤维化面积

4.3 Α-SMA免疫染色和a-SMA-阳性面积

媒介物组的肝切片Α-SMA免疫染色展示a-SMA-阳性细胞主要在区域3中蓄积。化合物A高和替米沙坦组的Α-SMA-阳性面积与媒介物组相比倾向于降低。(表9下文)

4.4 F4/80免疫染色

媒介物组的肝切片F4/80免疫染色展示F4/80-阳性细胞主要在区域3中蓄积。

化合物A高组显示与媒介物组相比F4/80-阳性面积的显著降低。化合物A中和化合物B组的F4/80-阳性面积与媒介物组相比倾向于降低。(表9)

表9：

结论

替米沙坦

用替米沙坦处理显示与媒介物组相比NAS的显著降低，指出在本研究中药物成功地作为阳性对照起作用。用替米沙坦处理显示与媒介物组相比肝甘油三酯含量的降低趋势。

化合物A

用化合物A在低剂量处理显示与媒介物组相比NAS的降低趋势。用化合物A在低剂量处理显示与媒介物组相比血浆ALT水平的增加趋势。

用化合物A在中剂量处理显示与媒介物组相比NAS和纤维化面积的降低趋势。用化合物A在中剂量处理显示与媒介物组相比血浆ALT水平的增加趋势。用化合物A在高剂量处理显示与媒介物组相比血浆ALT水平的显著增加。用化合物A在高剂量处理显示与媒介物组相比NAS的降低趋势。

化合物B

用化合物B处理显示与媒介物组相比NAS的降低趋势。

用化合物B处理显示与媒介物组相比血浆ALT水平、肝甘油三酯含量和纤维化面积的增加趋势。

在本研究中，化合物A和B显示与媒介物组相比NAS的降低趋势。此外，化合物A显示肝中胶原病理学沉积的降低趋势，如Sirius红染色所示。总之，化合物A在该NASH模型中显示有效的抗-NAS和抗纤维化效果而化合物B显示有效的抗-NAS效果。

实施例3：肺动脉高血压(PAH)大鼠Sugen缺氧模型中的化合物体内效力研究

实验程序

研究设计

诱导PAH

通过研究指导将动物在治疗组之间基于其体重和经胸廓超声心动描记术(在第21天)的结果随机化。在相同治疗组中的动物成对圈养。

在第0天，组2至5(参见表10)动物接受单次皮下注射sugen(20mg/kg，2mL/kg体积)溶液(10mg/mL)并返回笼中。在第0天，组1动物接受一次皮下注射2mL/kg的DMSO(sugen媒介物)并返回各自笼中。

将组2-5置于笼中，将受控空气调节为接受相当于0.10(10％)的FiO₂，使用由通气笼系统控制的氮和环境空气混合物。将它们保持在这些含氧量低的条件下21天。在缺氧情况下，每周1次清洁并更换笼，将动物暴露在环境氧水平小于10分钟。从第22天至第56天将它们暴露于环境氧水平。组1动物保持在笼中暴露于环境氧(常氧)水平56天。每日观察动物的任何行为和一般健康状态变化。

处理

在第22天(组2-5)给予化合物A、西地那非或媒介物的处理，按表10的计划和描述进行。组2-4接受每天单次给药。参照组5每天2次接受西地那非。随意提供食品和水。完成每日观察动物的行为和一般健康状态。记录每周体重。

超声心动图

在第0天，第21天和在手术日(第56天)对全部动物进行疾病进展的超声心动图监测。

血液采样

在第0天、在第22天和第56天在刚给予第一剂量之后，从全部动物(包括常氧对照)采样静脉血液(0.5ml，用EDTA抗凝)。离心EDTA-抗凝的全血以产生血浆，将血浆倾析入至少标记动物号、组ID和时间点的清洁管中，和在-80℃冷冻储存直至转移给资助人。

表10.处理组分配和处理信息

*用n＝10、12只动物的组开始以补偿是该模型中约10-20％的死亡率。

手术仪器设备和在效力研究动物中血液动力和功能参数的测量

1.在所选的手术日，将大鼠用2至2.5％异氟烷USP(Abbot Laboratories，Montreal，加拿大)/氧的混合物麻醉，置于加热垫上保持体温。

2.切开大鼠气管和通过设置为≈10ml/kg体重、频率65-70次冲击/min的正压啮齿动物呼吸器立即通气。

3.将铅II ECG接触电极置于大鼠上在手术操作期间连续监测ECG。

4.将连接至压力转导器的插管插入左股骨动脉测量动脉血压。

5.将连接至压力转导器的插管通过右颈静脉插入右房测量右房压力。

6.通过胸骨切开术暴露心脏，将20GA 1.16/Insyte引入右室并快速钩连连接至转导器的盐水填充的PE-50导管。

7.在记录右心室压力数秒后，将Insyte进一步推入肺动脉进行额外60秒的PAP记录。

8.在手术持续时间连续记录血液动力参数或直至失去PAP信号。

9.在血液动力监测之后，进一步打开胸腔暴露肺。解剖气管上的肌肉以除去肺和心脏。在称量之前用PBS冲洗收获组织除去任何多余血液。

10.为了肺组织学和铸型，过程如下：1)保留八(8)只大鼠每组以评价左肺组织学和因此如本部分8.2第12点的描述处理；2)两(2)只大鼠每组使得可以定量表征左肺三维血管结构和因此如部分8.3的描述处理用于左肺铸型。

11.为了组织学，左叶用填充固定剂(10％NBF)且附着钝顶针(23g)的10mL注射器充气。将针尖插入气管，用捆扎缝合线固定位置同时将又一注射器捆扎至肺动脉。在生理学压力(20-25mmHg)给肺轻柔充气直至全部叶完全、均匀和一致地扩展(不允许固定剂通过肺表面渗出)。这提供最佳的血管和呼吸道扩展而不导致过度的组织破裂。然后将针除去，在气管周围捆扎缝合线，和以1:20组织:固定剂比率浸入10％NBF中。将组织在福尔马林中保持24-48小时。然后将它们切为三部分(上、中和下)。将各部分送至Montreal(Quebec，加拿大)的Institute for Research in Immunology and Cancer(IRIC)从而包埋、切片和用苏木精和曙红(H&E)或von Willebrand因子(VWF)染色进行内皮细胞染色。

12.作为Fulton指数的一部分，解剖心脏将右室与带隔膜的左室分离，然后分开称量。

肺动脉的铸型程序

1.在血液动力参数记录之后，收获10只大鼠中的2只的肺和心脏并且处理用于左肺的肺动脉铸型。

2.以长度40cm切割聚乙烯(PE190)管，一端连接至18-G针而加热钝化的另一端用作进入右室(RV)的导管。将导管推至主要肺动脉(MPA)水平，将其在此固定。为了右肺铸型，将导管推入右肺的肺动脉(PA)，将其在此固定以避免左肺的灌注。

3.用设置于2ml/min的连续注射泵通过泵送2ml稀释肝素钠(5单元/ml)(APPPharmaceuticals，Inc.，Schaumburg，IL，USA)将血液从PA冲洗出来。在左室的左心房附件开小切口让溶液流出肺动脉循环。

4.为确保特别是在下肺片段中的均匀填充，将肺保持直立位。

5.将有机硅聚合物铸型化合物，即粘度25厘泊的MV-黄Microfil(cP；0.01克每厘米-秒)，与中粘度(MV)稀释剂以5:4(稀释剂：化合物)体积比混合并加至5％(体积)固化剂。然后将该新鲜混合有机硅聚合物铸型物质以2ml/min泵送通过导管直至聚合物达到RV。随聚合物进入肺循环将流速降低至0.05ml/min。

6.在聚合物在肺表面均匀可视时停止泵送。在从心脏-肺段切除之前结扎灌溉左肺的PA。

7.然后将结扎PA的左肺转移入小容器和在4℃储存24小时从而允许有机硅聚合物完全聚合。在右肺铸型的情况下，结扎右PA。

8.一旦聚合，将10％福尔马林加入容器从而用福尔马林浸没左肺(或右肺叶)和在4℃储存额外48小时。

9.然后将左肺(或右肺叶)运至Sherbrooke大学工程系(Quebec，加拿大)用Bruker(Manning Park，MA，USA)的Skyscan进行微-CT成像。图像然后转移至Fluidda inc.进行分析。

结果：

雌性的平均肺压

处理	平均肺压(mmHg)	SEM
			常氧对照	14.7	0.60
SuHx+媒介物	33.5	3.42
			SuHx+化合物A，70mg/kg QD	24.1	3.35
SuHx+化合物A，120mg/kg QD	34.4	4.22
			SuHx+西地那非，50mg/kg BID	22.5	1.85

雄性的平均肺压

处理	平均肺压(mmHg)	SEM
			常氧对照	15.8	0.73
SuHx+媒介物	41.7	3.29
			SuHx+化合物A，70mg/kg QD	26.8	2.87
SuHx+化合物A，120mg/kg QD	33.6	6.71
			SuHx+西地那非，50mg/kg BID	30.1	3.04

作为结论，在Sugen缺氧模型中用化合物A处理大鼠显示于70mg/kg降低平均肺动脉压力的倾向。

实施例4：在肺动脉高血压大鼠野百合碱模型中的化合物体内效力研究

实验系统

采集系统

用于运行Microsoft Windows XP专业版2007的联网个人电脑进行数据采集。采集软件是AxoScope10.2，使用Axon Instrument的界面Digidata。AxoScope 10.2已在其所用的有关环境下完全验证。

分析系统

分析软件是Axon Instrument的Clampfit 10.2.0.14，安装在运行MicrosoftWindows XP专业版2016的联网个人电脑上。Clampfit 10.2.0.14已在其所用的有关环境下完全验证。图像分析软件是Microsoft Office Excel 2016，其安装在运行MicrosoftWindows 10Famille的联网个人电脑上。

编纂实验数据

1.在Clampfit中打开待分析的实验踪迹。

2.记录右房压力1分钟。

3.用连续记录至少1分钟或直至失去信号的PAP来提取平均、舒张和收缩肺压。

4.用连续记录的全身性动脉压力(SAP)来提取平均、舒张和收缩动脉压力。

5.在血液动力参数记录的终点，将包括隔膜和肺叶的右和左室切除以确定湿重。

6.对各组编纂各参数并以柱状图表示，进行适当的统计学分析。

1- 平均动脉全身性压力 7- 重量增加

2- 平均动脉肺压 8- 肺重

3- 舒张肺压 9- Fulton指数

4- 收缩肺压 10- 心率

5- 收缩右室压力 11- 脉压

6- 饱和(SO₂) 12- 右房压力

实验程序：

制备野百合碱溶液

称量适当量的野百合碱和加入1/3正确体积的1.0N HCl，混合以确保野百合碱溶剂化。溶液然后用1/3正确体积的1.0N NaOH中和。溶液pH用pH试纸/条或电子pH计检查并视需要调节为中性；用注射水补完最终体积以获得20mg/mL的溶液。以3mL/kg体重(剂量是60mg/kg)向每只大鼠的肩部将野百合碱溶液皮下注射入颈上的松弛皮肤。

制备化合物A溶液

化合物A作为媒介物中的悬浮液给予。为了达到需要的浓度，用研钵和研棒将化合物A研磨为细粉末，然后与20％(最终体积)的媒介物A1混合直至获得悬浮液。然后在磁力搅拌下将80％的媒介物A2加入悬浮液。

媒介物A1：0.5％(w/v)羧甲纤维素(CMC)(400-800厘泊，在注射用水中)+2.5％(w/v)吐温80

媒介物A2：0.5％(w/v)羧甲纤维素(CMC)(400-800厘泊，在注射用水中)

用于剂量给药的媒介物：20％媒介物A1+80％媒介物A2

在给药之前将对照和化合物A剂量配制剂搅拌至少15分钟并在整个剂量给药程序中保持在连续磁力搅拌之下。

表11.化合物A的浓度溶液和给药体积

制备西地那非

称量适当量的西地那非和加入适当体积的蒸馏水获得于5mg/mL的悬浮液。用搅拌子混合悬浮液30-60分钟直至获得均匀悬浮液。仔细保持均匀悬浮液(连续搅拌)，同时将剂量吸入灌胃注射器。每次填充一支灌胃注射器，并且在填充下一支注射器之前给予。溶液在2至8℃冷冻储存和避光。期满日设为在制备之后7天。

表12.西地那非的浓度溶液和给药体积

治疗剂量	剂量给药溶液浓度	剂量给药体积
			50mg/kg bid	5mg/mL	10mL/kg

实验程序

研究设计

诱导PAH

由研究指导将动物在治疗组之间基于其体重和经胸廓超声心动描记术(第7天)的结果随机化。相同治疗组中的动物成对圈养。

组2至5(参见表13)动物在第0天接受单次皮下注射野百合碱(60mg/kg)溶液和返回笼中。组1动物在第0天接受一次皮下注射MCT媒介物并返回各自笼中。

处理

在第7天(组2-5)给予化合物A、西地那非或媒介物处理，按表13的计划和描述进行。组2-4每天接受单次给药。参照组5每天2次接受西地那非。食品和水随意提供。完成每日观察动物的行为和一般健康状态。每周记录体重。

超声心动图

疾病进展的超声心动图监测在第0天、第7天和在手术日(第28天)对全部动物进行。

血液采样

在第0天、在第7天刚给药第一剂量之后从全部动物(包括常氧对照)采样静脉血液(0.5ml，用EDTA抗凝)。在手术结束日(第28天)，在血液动力学测量之后，对大鼠进行心脏穿刺收集3ml血液。离心EDTA-抗凝的全血产生血浆，将血浆倾析入至少标记动物号、组ID和时间点的清洁管，和在-80℃冷冻储存直至转移给资助人。

表13：处理组分配和处理信息

*用n＝10、12只动物的组开始以补偿该模型中约10-20％的死亡率。

效力研究动物中的血液动力学和功能参数的测量和手术仪器设备

1.在所选的手术日，将大鼠用2至2.5％异氟烷USP(Abbot Laboratories，Montreal，加拿大)/氧混合物麻醉，置于加热垫上保持体温。

2.切开大鼠气管和通过设置于≈10ml/kg体重、65-70次冲击/min频率的正压啮齿动物呼吸器立即通气。

3.将铅II ECG接触电极置于大鼠上在手术操作期间连续监测ECG。

4.将连接至压力转导器的插管插入左股骨动脉测量动脉血压。

5.将连接至压力转导器的插管通过右颈静脉插入右房测量右房压力。

6.通过胸骨切开术暴露心脏和将20GA 1.16/Insyte引入右室和快速钩连连接至转导器的盐水填充的PE-50导管。

7.在右心室压力记录数秒之后，将Insyte进一步推入肺动脉以进行额外60秒PAP记录。

8.手术持续时间连续记录血液动力学参数或直至失去PAP信号。

9.在血液动力学监测之后，打开胸腔暴露肺。解剖气管上的肌肉除去肺和心脏。在称量之前用PBS冲洗收获的组织除去任何多余血液。

10.进一步打开胸腔暴露肺。解剖气管上的肌肉除去肺和心脏。在称量之前用PBS冲洗收获的组织除去任何多余血液。

11.为了肺组织学和铸型，过程如下：1)将八(8)只大鼠每组保留以评价左肺组织学和因此按该部分8.2第12点的描述处理；2)两(2)只大鼠每组使得可以定量表征左肺三维血管结构和因此如部分8.3的描述处理用于左肺铸型。

12.为了组织学，左叶用填充固定剂(10％NBF)和附着钝顶针(23g)的10mL注射器充气。将针尖插入气管，用捆扎缝合线固定位置同时将又一注射器捆扎至肺动脉。在生理学压力(20-25mmHg)给肺轻柔充气直至全部叶完全、均匀和一致地扩展(不允许固定剂通过肺表面渗出)。这提供最佳的血管和呼吸道扩展而不导致过度的组织破裂。然后将针除去，在气管周围捆扎缝合线，和以1:20组织:固定剂比率浸入10％NBF中。组织保持在福尔马林中24-48小时。然后将它们切为三部分(上、中和下)。将各部分送至Montreal的Institute forResearch in Immunology and Cancer(IRIC)(Quebec，加拿大)从而包埋、切片并用苏木精和曙红(H&E)和von Willebrand因子(VWF)染色用于内皮细胞染色。

13.作为Fulton指数的一部分，解剖心脏将右室与带隔膜的左室分离，然后分开称量。

肺动脉的铸型程序

1.在血液动力参数记录之后，收获10只大鼠中的2只的肺和心脏并且处理用于左肺的肺动脉铸型。

2.以长度40cm切割聚乙烯(PE190)管，一端连接至18-G针而加热钝化的另一端用作进入右室(RV)的导管。将导管推至主要肺动脉(MPA)水平，将其在此固定。为了右肺铸型，将导管推入右肺的肺动脉(PA)，将其在此固定以避免左肺的灌注。

3.用设置于2ml/min的连续注射泵通过泵送2ml稀释肝素钠(5单元/ml)(APPPharmaceuticals，Inc.，Schaumburg，IL，USA)将血液从PA冲洗出来。在左室的左心房附件开小切口让溶液流出肺动脉循环。

4.为确保特别是在下肺片段中的均匀填充，将肺保持直立位。

5.将有机硅聚合物铸型化合物，即粘度25厘泊的MV-黄Microfil(cP；0.01克每厘米-秒)，与中粘度(MV)稀释剂以5:4(稀释剂：化合物)体积比混合并加至5％(体积)固化剂。然后将该新鲜混合的有机硅聚合物铸型物质以2ml/min泵送通过导管直至聚合物达到RV。随聚合物进入肺循环将流速降低至0.05ml/min。

6.在聚合物在肺表面均匀可视时停止泵送。在从心脏-肺段切除之前结扎灌溉左肺的PA。

7.然后将结扎PA的左肺转移入小容器和在4℃储存24小时从而允许有机硅聚合物完全聚合。在右肺铸型的情况下，结扎右PA。

8.一旦聚合，将10％福尔马林加入容器从而用福尔马林浸没左肺(或右肺叶)和在4℃储存额外48小时。

9.然后将左肺(或右肺叶)运至Sherbrooke大学工程系(Quebec，加拿大)用Bruker(Manning Park，MA，USA)的Skyscan进行微-CT成像。图像然后转移至Fluidda inc.进行分析。

结果：

平均肺压：

雌性大鼠的平均肺压

结论

在本研究中，用化合物A处理显著降低已通过野百合碱诱导肺动脉高压的雌性大鼠的肺压，其中对雄性大鼠无效果。

其它示范性实施方式：

1.用于在有需要的患者中治疗炎性疾病、障碍或病况的方法，其中炎性疾病、障碍或病况选自：

a.胰中的炎性疾病、障碍或病况，选自1型糖尿病，2型糖尿病，急性和慢性胰腺炎；

b.肾中的炎性疾病、障碍或病况，选自肾小球硬化症，肾小球肾炎，肾炎，急性肾损伤，Berger病，肺出血肾炎综合征，韦格纳肉芽肿病和肾移植急性或慢性排异反应；

c.肝中的炎性疾病、障碍或病况，选自非酒精性脂肪肝炎(NASH)，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，胆汁郁积型肝病，硬化性胆管炎和肝移植急性或慢性排异反应；

d.肺或心脏中的炎性疾病、障碍或病况，选自慢性阻塞性肺疾病(COPD)，哮喘，肺纤维化，肺动脉高压，肉瘤样病，心肌炎，心包炎和肺或心脏移植急性或慢性排异反应；

e.皮肤中的炎性疾病、障碍或病况，选自接触性皮炎，特应性皮炎，牛皮癣，斑秃，多形红斑，疱疹样皮炎，硬皮病，白斑，超敏反应脉管炎，荨麻疹，大疱性类天疱疮，寻常性天疱疮，落叶状天疱疮，副肿瘤性天疱疮，后天性大疱性表皮松解，痤疮，瘢痕疙瘩，和皮肤的其它炎性或变应性病况；

f.血管/血液中的炎性疾病、障碍或病况，选自Behcet疾病，脉管炎，脓毒症，肿瘤血管生成，动脉粥样硬化，增殖性血管病和再狭窄；

g.眼中的炎性疾病、障碍或病况，选自结膜炎，巩膜炎，巩膜外层炎，全葡萄膜炎，脉络膜炎，脉络膜视网膜炎，视神经视网膜炎，葡萄膜炎，眼眶炎性病，和视神经炎；

h.中枢或周围神经系统中的炎性疾病、障碍或病况，选自非病毒性和病毒性脑炎和脑膜炎，抑郁，神经性疼痛，包括慢性痛，外伤性脑损伤，包括卒中，阿尔茨海默氏疾病，帕金森病，脊髓炎，1型夏-马-图三氏病(包括CMT1A和CMT1B)，多发性硬化，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，克罗伊茨费尔特-雅各布病，脱髓鞘多神经病和外周神经病；

i.自身免疫性疾病、障碍或病况，选自狼疮，包括皮肤和肾中，格-巴二氏综合征，重症肌无力，乔本氏甲状腺炎，特发性紫癜，再生障碍性贫血，格雷夫斯病，和心肌炎；

j.肠中的炎性疾病、障碍或病况，选自肠失效，溃疡性结肠炎和克罗恩病；

k.繁殖系统中的炎性疾病、障碍或病况，选自子宫内膜异位症，子宫纤维瘤，前列腺发育不良或生长，和宫颈发育不良；和

l.骨和/或关节中的炎性疾病、障碍或病况，选自幼年特发性关节炎，牛皮癣关节炎，牙周炎，和手、足、踝、膝、髋、肩、肘或脊柱关节炎和/或脱矿化；包括向患者给予式(I)化合物的步骤：

或其药学上可接受的盐，其中：Z是C或N；

V是C或N；

意指芳族环其中V是C或N，和在V是N的情况下，V相对Z在邻位，间位或对位；

各R独立地是氢，卤素，-CN，羟基，(C₁-C₃)氟烷基，(C₁-C₃)氟烷氧基，(C₃-C₆)环烷基，-NO₂，-NR₁R₂，(C₁-C₄)烷氧基，苯氧基，-NR₁-SO₂-NR₁R₂，-NR₁-SO₂-R₁，-NR₁-C(＝O)-R₁，-NR₁-C(＝O)-NR₁R₂，-SO₂-NR₁R₂，-SO₃H，-O-SO₂-OR₃，-O-P(＝O)-(OR₃)(OR₄)，-O-CH₂-COOR₃，(C₁-C₃)烷基，所述烷基任选被下述基团一或二取代：羟基，式(IIa)基团：

或式(IIIa)基团：

Q是N或O，条件是在Q是O的情况下R"不存在；

各R₁和R₂独立地是氢或(C₁-C₃)烷基；

各R₃和R₄独立地是氢，Li⁺，Na⁺，K⁺，N⁺(Ra)₄或苄基；

n是1，2或3；

n’是1，2或3；

各R’独立地是氢，(C₁-C₃)烷基，羟基，卤素，-NO₂，-NR₁R₂，吗啉基，吗啉代，N-甲基哌嗪基，(C₁-C₃)氟烷基，(C₁-C₄)烷氧基，-O-P(＝O)-(OR₃)(OR₄)，-CN，式(IIa)基团：

或式(IIIa)基团：

A是共价键，氧或NH；B是共价键或NH；

m是1，2，3，4或5；

p是1，2或3；

各Ra和Rb独立地是氢，(C₁-C₅)烷基或(C₃-C₆)环烷基，或者

Ra和Rb与它们附着至的氮原子一起形成饱和5元或6元杂环，所述杂环任选由一个或多个Ra取代，条件是在R’是基团(IIa)或(IIIa)的情况下，仅在其它R’基团不同于所述基团(IIa)或(IIIa)时n’可以是2或3；和

R"是氢，(C₁-C₄)烷基或如本文所定义的式(IIa)基团。

2.实施方式1的方法，其中化合物具有下式(Ia)：

或其药学上可接受的盐。

3.实施方式1的方法，其中化合物具有下式(Ib)：

或其药学上可接受的盐。

4.实施方式1的方法，其中化合物具有下式(Ic)：

或其药学上可接受的盐。

5.实施方式1的方法，其中化合物具有下式(Ib’)：

或其药学上可接受的盐。

6.实施方式1的方法，其中化合物具有下式(Id)：

或其药学上可接受的盐。

7.式(IV)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中各变量V，Z，R，R’，n和n’如实施方式1描述，条件是所述化合物不是

8.实施方式7的化合物，其中化合物具有下式(IVa)：

或其药学上可接受的盐。

9.实施方式7的化合物，其中化合物具有下式(IVb)：

或其药学上可接受的盐。

10.实施方式7的化合物，其中化合物具有下式(IVc)：

或其药学上可接受的盐。

11.实施方式7的化合物，其中化合物具有下式(IVb’)：

或其药学上可接受的盐。

12.实施方式7的化合物，其中化合物具有下式(IVd)：

或其药学上可接受的盐。

13.药物组合物，包含实施方式7-12中任一种的化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体、助剂或媒介物。

14.用于治疗炎性疾病、障碍或病况的方法，包括有需要的患者给予实施方式7-12中任一种的化合物或其药学上可接受的盐，或实施方式13的药物组合物。

15.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在胰中，选自1型糖尿病，2型糖尿病，急性和慢性胰腺炎。

16.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在肾中，选自肾小球硬化症，肾小球肾炎，肾炎，急性肾损伤，Berger病，肺出血肾炎综合征，韦格纳肉芽肿病和肾移植急性或慢性排异反应。

17.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在肝中，选自非酒精性脂肪肝炎(NASH)，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，胆汁郁积型肝病，硬化性胆管炎和肝移植急性或慢性排异反应。

18.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在肺或心脏中，选自慢性阻塞性肺疾病(COPD)，哮喘，肺纤维化，肺动脉高压，肉瘤样病，心肌炎，心包炎和肺或心脏移植急性或慢性排异反应。

19.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在皮肤中，选自接触性皮炎，特应性皮炎，牛皮癣，斑秃，多形红斑，疱疹样皮炎，硬皮病，白斑，超敏反应脉管炎，荨麻疹，大疱性类天疱疮，寻常性天疱疮，落叶状天疱疮，副肿瘤性天疱疮，后天性大疱性表皮松解，痤疮，瘢痕疙瘩，和皮肤的其它炎性或变应性病况。

20.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在血管/血液中，选自Behcet疾病，脉管炎，脓毒症，肿瘤血管生成，动脉粥样硬化，增殖性血管病和再狭窄。

21.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在眼中，选自结膜炎，巩膜炎，巩膜外层炎，全葡萄膜炎，脉络膜炎，脉络膜视网膜炎，视神经视网膜炎，葡萄膜炎，眼眶炎性病，和视神经炎。

22.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在中枢或周围神经系统中，选自非病毒性和病毒性脑炎和脑膜炎，抑郁，神经性疼痛，包括慢性痛，外伤性脑损伤，包括卒中，阿尔茨海默氏疾病，帕金森病，脊髓炎，1型夏-马-图三氏病(包括CMT1A和CMT1B)，多发性硬化，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，克罗伊茨费尔特-雅各布病，脱髓鞘多神经病和外周神经病。

23.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况是自身免疫性疾病、障碍或病况，选自狼疮，包括皮肤和肾中，格-巴二氏综合征，重症肌无力，乔本氏甲状腺炎，特发性紫癜，再生障碍性贫血，格雷夫斯病，和心肌炎。

24.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在肠中，选自肠失效，溃疡性结肠炎和克罗恩病。

25.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在繁殖的系统中，选自子宫内膜异位症，子宫纤维瘤，前列腺发育不良或生长，和宫颈发育不良。

26.实施方式1-6和14中任一种的方法，其中炎性疾病、障碍或病况在骨/骨骼和/或关节中，选自幼年特发性关节炎，牛皮癣关节炎，牙周炎，和手、足、踝、膝、髋、肩、肘或脊柱关节炎和/或脱矿化。

27.实施方式1-6和14-26中任一种的方法，还包括测量式(I)化合物或其药学上可接受的盐在患者血液，血浆，组织，唾液和/或血清样品中的水平。

28.实施方式1-6和14-27中任一种的方法，还包括测量式(IV)化合物或其药学上可接受的盐在患者血液，血浆，组织，唾液和/或血清样品中的水平。

29.实施方式1-6和14-28中任一种的方法，还包括测量式(I)和(IV)化合物或其药学上可接受的盐在患者血液，血浆，组织，唾液和/或血清样品中的总水平。

30.实施方式1-6和14-29中任一种的方法，还包括在治疗过程之前和在治疗过程期间测量miR-124在患者血液和/或组织样品中的存在和/或表达水平。

31.实施方式1-6和14-30中任一种的方法，还包括通过测量miR-124在患者血液和/或组织样品中的存在和/或表达水平来选择患者。

32.实施方式1-6和14中任一种的方法-31，还包括用算法监测疾病、障碍或病况的严重性和/或监测治疗的效力，所述算法组合miR-124水平和细胞因子或又一生物标记的水平，或式(I)化合物或(IV)或其药学上可接受的盐的水平。

33.实施方式1-6和14中任一种的方法-31，还包括用算法选择治疗的患者，所述算法组合miR-124水平和细胞因子或又一生物标记的水平，或式(I)化合物或(IV)或其药学上可接受的盐的水平。

34.监测疾病、障碍或病况的严重性和/或监测治疗的效力的算法，其组合miR-124水平和所选细胞因子或又一生物标记，或式(I)化合物或(IV)或其药学上可接受的盐的水平。