具体实施方式

下面结合说明书附图和具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。

实施例1三氟尿苷在J-Lat 10.6细胞系对CHAF1A的降解实验。

发明人之前的研究已经发现宿主蛋白CHAF1A是HIV-1潜伏的形成与维持的关键因子，是一个安全有效的HIV-1潜伏感染激活靶点。因此检测不同浓度的三氟尿苷对CHAF1A的降解效果，以确认最合适的药物作用浓度。

一、实验方法

取适量生长良好的J-Lat 10.6细胞铺板。使用的培养基：1640培养基，10％胎牛血清以及1％青链霉素混合液，培养条件：5％二氧化碳、37℃。

分别向培养基中加入终浓度为50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、3.125μM、1.5625μM、0.78125μM、0.390625μM三氟尿苷处理细胞，PBS处理组作为对照，48小时收样进行WesternBlot检测，观察不同浓度的三氟尿苷对CHAF1A的降解效果。

二、实验结果

实验结果如图1所示。从图中可以看出，三氟尿苷可以显著降解J-Lat 10.6细胞的CHAF1A，降解效果对着药物浓度增加而增强。

实施例2三氟尿苷在J-Lat 10.6细胞系中的对潜伏感染的激活效应

一、实验方法

1)取生长良好的J-Lat 10.6细胞铺板，使用的培养基：1640培养基，10％胎牛血清以及1％青链霉素混合液，培养条件：5％二氧化碳、37℃。

每孔2孔明板5细胞；分别加入终浓度为50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、3.125μM的三氟尿苷，阴性对照使用PBS，以TNF-α处理组和JQ-1处理组为阳性对照组。

2)培养48h,离心收取细胞，弃上清，使用PBS清洗一次，弃上清，然后用PBS重悬；

3)使用流式细胞仪检测相应细胞的GFP表达水平，并作统计图分析结果。

二、实验结果

实验结果如图2和图3所示。从图中可以看出，三氟尿苷可以有效激活J-Lat 10.6细胞潜伏感染的HIV-1。

实施例3氟尿苷激活感染者临床样本的HIV-1

一、实验方法

1)取生长良好的J-Lat细胞铺板，使用的培养基：1640培养基，10％胎牛血清以及1％青链霉素混合液，培养条件：5％二氧化碳、37℃。分别加入不同浓度的三氟尿苷，终浓度分别为：100μM，25μM，6.25μM，1.5625μM，.0390625μM，0.097656μM，0.024414μM，0.006104μM，0.001526μM，0.000381μM，0μM。

2)培养48h，离心收取细胞，弃上清，使用PBS清洗一次，弃上清，然后用PBS重悬；

3)使用流式细胞仪检测相应细胞的GFP表达水平，并作统计图分析结果。

二、实验结果

实验结果如图4所示。从实验结果可以看出，三氟尿苷的EC50是2.259μM(由prism软件计算得出)，具有较好的潜伏感染的激活效果。

实施例4三氟尿苷激活感染者临床样本的HIV-1

一、实验方法

1)从HIV-1携带者血液样本分离PBMCs，分离CD4+T淋巴细胞。HIV-1携带者血液样本由广州市第八人民医院提供，参与者都接受联合抗逆转录病毒治疗，处于潜伏感染期，近6个月血浆中无法检测到HIV-1RNA copy(＜50copy/ml)，感染者CD4+T细胞数大于350个/μl。取得了病人的书面同意，所进行的实验获中山大学伦理委员会批准，在P2实验室进行，实验过程中采用匿名编号。

2)将CD4+T淋巴细胞分成三组，一组用aCD3/aCD28抗体激活作为阳性对照，aCD3/aCD28抗体是已被证实的在体外显著激活潜伏感染的激活剂；一组细胞用100μM三氟尿苷处理作为实验组；一组用相同体积的PBS缓冲液处理作为阴性对照。

3)处理48h后，用PBS分别清洗三组细胞，分别收培养基上清液和细胞，Trizol法提取RNA，用qPCR检测HIV-1RNA的拷贝数。

二、实验结果

实验结果如图5所示。从实验结果可以看出，三氟尿苷和阳性对照组aCD3/aCD28一样能够显著激活感染者临床样本的HIV-1。