阅读说明：本技术 一种提高莫能菌素a组分含量的工艺 (Process for improving content of monensin A component ) 是由 李承立 颜晓冬 靳连标 兰玉龙 钟建祥 于 2020-10-30 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种提高莫能菌素A组分含量的工艺,包括如下步骤：S1、按照3～5:1：190～200的重量比取豆粕粉、玉米浆和水,置于混合容器中混合,得到混合溶液；S2、将混合溶液进行高温灭菌,灭菌后降温处理,得到灭菌混合溶液；S3、向莫能菌素发酵液中分阶段以不同流速加入灭菌混合溶液,进行发酵。本发明的申请人偶然发现发酵中后期(200h以后)菌丝体代谢逐渐开始下降,菌丝体浓度增长逐渐变缓,菌丝体对有机氮源的利用能力也会呈现下降的趋势,而调整氮源投入量和速度可以控制菌丝体代谢,申请人通过调整不同时间段的投放氮源的速率,使得菌丝体的营养平衡,进而使得菌丝体可以长时间保持活力,获得比较好的代谢,迅速提高菌丝体浓度,提高A组分的含量。(The invention discloses a process for improving the content of a component A of monensin, which comprises the following steps: s1, mixing the components in a ratio of 3-5: 1: taking soybean meal powder, corn steep liquor and water according to the weight ratio of 190-200, and mixing in a mixing container to obtain a mixed solution; s2, sterilizing the mixed solution at high temperature, and cooling after sterilization to obtain a sterilized mixed solution; and S3, adding the sterilized mixed solution into the monensin fermentation liquor in stages at different flow rates, and fermenting. The applicant of the invention accidentally finds that the metabolism of the mycelium gradually begins to decline in the middle and later stages of fermentation (after 200 hours), the concentration of the mycelium gradually increases, the utilization capacity of the mycelium to an organic nitrogen source also shows a descending trend, the metabolism of the mycelium can be controlled by adjusting the input amount and speed of the nitrogen source, the applicant enables the nutrition of the mycelium to be balanced by adjusting the speed of putting the nitrogen source in different time periods, so that the mycelium can keep the activity for a long time, better metabolism is obtained, the concentration of the mycelium is rapidly improved, and the content of the component A is improved.)

一种提高莫能菌素A组分含量的工艺

技术领域

本发明涉及兽药领域，具体地讲，是涉及一种提高莫能菌素A组分含量的工艺。

背景技术

莫能菌素(monensin)，属聚醚类抗生素，在1967年首先由Haney等人从肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)的发酵液中分离得到。20世纪70年代作为抗球虫药物开始投放市场。美国、日本分别于1974年、1977年正式批准将其作为饲料添加剂，我国于1985年获批，并应用于生产。目前已有40多个国家用作肉牛、肉羊的增重剂和猪的生长促进剂。莫能菌素对阴性菌无作用，但对葡萄球菌、杆菌、梭菌、链球菌、霉菌(青霉菌、念珠菌)有一定的抑制作用。莫能菌素可以影响反刍动物瘤胃内能量代谢，改善瘤胃发酵，提高丙酸与乙酸的产出比例，降低挥发性脂肪酸，减少甲烷生成，提高蛋白质利用效率。因此能够显著提高反刍动物的饲料利用率和促进生长的作用。

常规的制备莫能菌素通常是使用无机氮源作为氮源，比如通过一次性补入硫酸铵、以及流加补入氨水控制菌丝体的代谢。

莫能菌素共4种组分，包括组分A、B、C和D，其中，组分A是莫能菌素产品的活性成分，A组分越高质量越好。莫能菌素在发酵过程中不同阶段所需要的氮源量不同，但现有的研究只对莫能菌素的制备方法进行调整，从而得到大量莫能菌素，但并未提高莫能菌素A组分的含量。

发明内容

为克服现有技术存在的问题，本发明提供一种提高莫能菌素A组分含量的工艺。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种提高莫能菌素A组分含量的工艺，包括如下步骤：

S1、按照3～5:1:190～200的重量比取豆粕粉、玉米浆和水，置于混合容器中混合，得到混合溶液；

S2、将混合溶液进行高温灭菌，灭菌后降温处理，得到灭菌混合溶液；

S3、向莫能菌素发酵液中分阶段以不同流速加入灭菌混合溶液，进行发酵。

进一步地，所述步骤S2是在121℃高温灭菌30min，并在灭菌后降温到30～40℃。

进一步地，所述步骤S3中在莫能菌素发酵液发酵在200～280h时，按照13～18L/h的速率补入灭菌混合溶液；在莫能菌素发酵液发酵在280～320h时，按照9～13L/h的速率补入灭菌混合溶液；在莫能菌素发酵液发酵在320h时，按照7～9L/h的速率补入灭菌混合溶液。

具体地，所述步骤S3中在莫能菌素发酵液发酵到200～280h时，按照15L/h的速率补入灭菌混合溶液；在莫能菌素发酵液发酵到280～320h时，按照10L/h的速率补入灭菌混合溶液；在莫能菌素发酵液发酵到320h时，按照8L/h的速率补入灭菌混合溶液。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明的申请人偶然发现发酵中后期(200h以后)菌丝体代谢逐渐开始下降，菌丝体浓度增长逐渐变缓，菌丝体对有机氮源的利用能力也会呈现下降的趋势，而调整氮源投入量和速度可以控制菌丝体代谢，从而调整A组分的含量；申请人发现通过调整不同时间段的投放氮源的速率，能够防止培养基中营养物质过剩对菌丝体代谢产生抑制，使得菌丝的营养平衡，加快菌丝发育，迅速提高菌丝体浓度，进而使得菌丝可以长时间保持活力，获得比较好的代谢，效价得到提高，而A组分是菌丝代谢的产物的主要活性成分，在菌丝高活力状态下能够持续代谢，能有效提高代谢产物的A组分，保证产品质量。

(2)本发明采用的是有机氮源(豆粕粉与玉米浆)，具有无机氮源所不具有的优点，相较于无机氮源而言，它可以缓慢释放氮源，使得氮源能够长效被菌丝体利用，避免在后期菌丝体缺乏氮源使用，除了能够为菌丝体代谢提供氮源外还能够提供少量的糖类以及生长因子，使用有机氮源能够起到菌丝体代谢旺盛，菌丝体浓度增长快的目的，并且，采用豆粕粉与玉米浆作为氮源，价格低廉，能够降低制备成本。

(3)本发明采用的有机氮源(豆粕粉与玉米浆)由于其被利用的速度比较缓慢，可以保证在菌丝体代谢的中后期能够有充足的氮源使用，保证代谢产物的生成，提高A组分，并且玉米浆中含有少量微量元素，能够促进莫能菌素产品菌丝体的代谢。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，本发明的方式包括但不仅限于以下实施例。

实施例1

通过取40kg豆粕粉、10kg玉米浆，加入1950L水中，配置成2000L混合溶液；将混合溶液置于121℃下灭菌30min，将其自然冷却降温至35℃，在发酵200h后的44m³莫能菌素发酵液中以15L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液；在发酵到280h时，以10L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液；在发酵到320h时，以8L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液，直至放罐。

对比例1

不在44m³莫能菌素发酵液中添加灭菌后的混合溶液，其他条件与实施例1相同，按正常发酵处理，直至放罐。

实施例2

通过取40kg豆粕粉、10kg玉米浆，加入1950L水中，配置成2000L混合溶液；将混合溶液置于121℃下灭菌30min，将其自然冷却降温至35℃，在发酵200h后的44m³莫能菌素发酵液中以15L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液，直至放罐。

实施例3

通过取30kg豆粕粉、10kg玉米浆，加入1970L水中，配置成2000L混合溶液；将混合溶液置于121℃下灭菌30min，将其自然冷却降温至35℃，在发酵200h后的44m³莫能菌素发酵液中以18L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液；在发酵到280h时，以13L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液；在发酵到320h时，以9L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液，直至放罐。

实施例4

通过取50kg豆粕粉、10kg玉米浆，加入1940L水中，配置成2000L混合溶液；将混合溶液置于121℃下灭菌30min，将其自然冷却降温至35℃，在发酵200h后的44m³莫能菌素发酵液中以13L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液；在发酵到280h时，以9L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液；在发酵到320h时，以7L/h的速率流加补入灭菌后的混合溶液，直至放罐。

将实施例1-4和对比例1发酵的菌丝体进行检测，检测结果如表1所示。

表1

根据表1可知，培养过程中实施例1的生物量、效价、A组分至放罐时增长幅度最大，菌丝代谢最旺盛，A组分提高的最多。

对比生物量，在发酵200h后开始添加有机氮源补入到莫能菌素发酵液中，在放罐时进行检测，添加有机氮源的菌丝体生物量相较于不添加有机氮源的菌丝体生物量明显增加，而根据不同时间段对莫能菌素发酵液中以不同的速度补充有机氮源，所收获的生物量明显高于一直按照固定速度补充有机氮源的生物量，可以证明刚进行补入时菌丝体代谢处于迅速阶段，利用营养物质较多，基础培养基中营养物质不能够保证这个阶段的菌丝体代谢，因此在此阶段开始补入有机氮源，随着发酵培养时间边长，菌丝体代谢能力也逐渐减弱，所需营养物质也逐渐变少，因此要逐渐降低补入有机氮源的速率，分不同时间段进行不同速率的补入，能够切实贴合菌丝体生长的需求，保持菌丝体生长活力，获得比较好的代谢，迅速提高菌丝体浓度。

对比三组的A组分含量，实施例1放罐检测出的A组分含量远高于实施例2和对比例，可以证明通过调整不同时间段的投放氮源的速率，使得菌丝的营养平衡，进而使得菌丝可以长时间保持活力，获得比较好的代谢，迅速提高菌丝体浓度，能够提高A组分的含量。

对比三组的生物效价，可以明显看出，实施例1放罐时的菌种的生物效价高于实施例2和对比例，可以证明通过调整不同时间段的投放氮源的速率，可以提高A组分含量，进而使得放罐的菌种具有更高的生物利用率。

上述实施例仅为本发明的优选实施方式之一，不应当用于限制本发明的保护范围，但凡在本发明的主体设计思想和精神上作出的毫无实质意义的改动或润色，其所解决的技术问题仍然与本发明一致的，均应当包含在本发明的保护范围之内。