咪达唑仑纳米晶用于制备改善血脑屏障通透性的药物中的应用
阅读说明：本技术 咪达唑仑纳米晶用于制备改善血脑屏障通透性的药物中的应用 (Application of midazolam nanocrystal in preparation of medicine for improving blood brain barrier permeability ) 是由 郑爱萍 张洵 李蒙 张慧 高静 刘楠 王增明 高翔 于 2020-06-24 设计创作，主要内容包括：本发明提供了咪达唑仑纳米晶及其组合物在改善血脑屏障通透性中的药物中的应用。本发明咪达唑仑纳米晶解决了溶解度的问题,提高了生物利用度,解决了片剂和注射液用作抗惊厥、抗癫痫的药物治疗效果欠佳的问题,可有效透过血脑屏障,用于癫痫的治疗。并且本发明提供了一种技术平台,在空间保护剂和电荷稳定剂存在情况下的纳米晶制剂提高了脑部药物血脑屏障通透性。(The invention provides application of midazolam nanocrystal and a composition thereof in medicines for improving blood brain barrier permeability. The midazolam nanocrystal solves the problem of solubility, improves the bioavailability, solves the problem of poor treatment effect of tablets and injection used as anticonvulsant and antiepileptic medicaments, can effectively penetrate through a blood brain barrier, and is used for treating epilepsy. The invention also provides a technical platform, and the nanocrystalline preparation improves the blood brain barrier permeability of the brain drug in the presence of the space protective agent and the charge stabilizer.)
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及咪达唑仑纳米晶用于制备改善血脑屏障通透性的药物中的应用。
背景技术
咪达唑仑【8-氯-6-(2-氟苯基)-1-甲基-4H-咪唑并[1,5-α][1,4]苯并二氮杂卓,结构如式Ⅰ所示】通过γ-氨基丁酸(GABA)受体结合位点发挥作用，通过抑制人胶质细胞谷氨酸载体的反向转运，减少兴奋性递质谷氨酸的释放，从而有效控制惊厥发作。马来酸咪达唑仑片剂的适应症为“睡眠障碍，失眠，特别适用于入睡困难者、手术或诊断性操作前用药”。咪达唑仑注射液的适应症为“麻醉诱导前的术前用药、麻醉诱导和维持、诊断性或治疗性操作的清醒镇静”。但将片剂和注射液用作抗惊厥、抗癫痫的药物治疗效果欠佳。
咪达唑仑在中性条件下难溶于水，在pH<3时溶解度升高。咪达唑仑注射液(pH2.9-3.7)用于麻醉，将其肌肉注射用于抗惊厥时，存在刺激性高等缺陷。纳米混悬液为中性，其刺激性较小，但因咪达唑仑为难溶性药物，药物溶解和溶出成为其体内吸收的限速步骤。为此，提高药物溶出速度成为提高药物生物利用度的重要手段。如何提高咪达唑仑的溶解度、溶出度和生物利用度，开发适合于大规模工业化生产的咪达唑仑制剂及其制备方法，显著提高其有效性、安全性和稳定性成为本领域急需解决的技术问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种咪达唑仑纳米晶组合物，所述的纳米晶组合物含有咪达唑仑、分散介质和药学上可接受的载体，其中，咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，优选药学上可接受的载体选自空间保护剂、电荷稳定剂的任一种或其组合，还优选分散介质选自水、油、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的油选自大豆油、玉米油、茶油、棉籽油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶的粒径≤600nm，优选为≤500nm，更优选为≤400nm，还优选为100nm-350nm，再优选为150-300nm。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶组合物的电位绝对值大于10mV，优选大于15mV。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为1.0％-40.0％,优选为5.0％-25.0％，更优选为8-20％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为0.2％-10.0％，优选为1.0％-5.0％，更优选为1.5％-3.5％，还优选为2.0％-3.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自非离子型表面活性剂、高分子聚合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述非离子型表面活性剂选自聚山梨酯、单硬脂酸甘油酯、泊洛沙姆、司盘、卖泽、苄泽的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的高分子聚合物选自羟丙基甲基纤维素(Hypromellose,HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl pyrrolidone,PVP)、聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)、吐温、甘油、癸基葡糖苷、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、海藻酸钠的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自HPMC E5、HPMC E3、HPMC E6、HPMC E4M、HPMC K4M、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、PVP K12、PVP K17、PVP K30、PVA、吐温80、吐温20、羧甲基纤维素钠、甘油、癸基葡糖苷的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.1％-3.0％，优选为0.3％-2.0％，更优选为0.5％-1.5％。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自两性离子型表面活性剂、阴离子型表面活性剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的两性离子型表面活性剂选自卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的阴离子型表面活性剂选自十二烷基硫酸钠(SDS)、多库酯钠(DOSS)的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述电荷稳定剂选自十二烷基硫酸钠、多库酯钠、卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述电荷稳定剂的HLB值(亲水亲油平衡值)不低于10，优选不低于20，更优选不低于30。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为0.2％-10.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.1％-3.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为1.0％-40.0％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为1.0％-5.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.3％-2.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为5％-25％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为2.0％-3.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.5％-1.5％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物含有重量体积百分比为5.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC和1.0％的SDS。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物含有重量体积百分比为5.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC和0.5％的SDS。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物含有重量体积百分比为10.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC和1.0％的SDS。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物含有重量体积百分比为10.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC和0.5％的SDS。
本发明的优选技术方案中，所述药学上的可接受的载体还包括pH调节剂、防腐剂、冻干保护剂、矫味剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂选自盐酸、硫酸、氯酸、硝酸、氢溴酸、氢氟酸、磷酸、磺酸、苹果酸、山梨酸、富马酸、枸橼酸、羧酸、羟基酸、酮酸、醋酸、草酸、柠檬酸、琥珀酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、丁二酸、己二酸、丙酮酸、谷氨酸、酒石酸、乳酸、衣康酸、抗坏血酸、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二胺、磷酸二氢胺的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂为缓冲剂，优选为柠檬酸、柠檬酸钾、柠檬酸钠、苹果酸、苹果酸钠、苹果酸钾、氢氧化钾、碳酸氢钠、氢氧化钠、碳酸钾、碳酸钠、磷酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、乳酸、乳酸钠、乳酸钾、丙酸、丙酸钠、丙酸钾、酒石酸、酒石酸钠、富马酸钠、酒石酸钾、富马酸钾、富马酸的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的防腐剂选自苯甲酸或其盐、山梨酸或其盐、对羟苯甲酸酯、焦亚硫酸钠、氯己定、柠檬酸钠、丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基苯甲醚(BHA)、生育酚、乙二胺四乙酸、没食子酸丙酯、季铵化合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的矫味剂选自木糖醇、甜菊苷、罗汉果甙、甘草甜素、甜茶素、蔗糖、糖精钠、甘油、山梨醇、甘露醇、麦芽糖的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的冻干保护剂选自蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、葡聚糖、甘露醇、海藻糖、山梨醇、木糖醇、麦芽糖醇、低聚糖醇、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述纳米晶组合物的制剂形式选自混悬液、注射液、冻干粉针、微乳、气雾剂、乳膏、栓剂、凝胶、泡沫剂的任一种。
本发明的优选技术方案中，将所述的纳米晶组合物冷冻干燥，即得冻干固体制剂。
本发明的优选技术方案中，所述纳米晶组合物的给药形式选自注射给药、粘膜给药、口服给药的任一种或其组合。
本发明的目的在于提供一种咪达唑仑纳米晶组合物的制备方法，所述的纳米晶组合物含有咪达唑仑、分散介质和药学上可接受的载体，其中，咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，优选药学上可接受的载体选自空间保护剂、电荷稳定剂的任一种或其组合，还优选分散介质选自水、油、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合，所述的制备方法包括下述步骤：称取所需量的咪达唑仑、分散介质和药学上可接受的载体，将其均匀混合后，湿法研磨或高压均质，即得。
本发明的优选技术方案中，将所需量的咪达唑仑、空间保护剂、电荷稳定剂、分散介质与任选地药学上可接受的其他载体的均匀混合物经超声均质处理后，湿法研磨或高压均质，即得。
本发明的优选技术方案中，所述的超声均质的转速为10000-28000rpm，优选为13000-25000rpm，更优选为16000-22000rpm。
本发明的优选技术方案中，所述的初始研磨速度为800-2500rpm，优选为1000-2000rpm，更优选为1200-1800rpm。
本发明的优选技术方案中，所述的研磨速度增加幅度为100-1000rpm/min，优选为300-800rpm/min，更优选为500-700rpm/min。
本发明的优选技术方案中，所述的研磨速度为1500-4000rpm/min，优选为1800-3500rpm/min，更优选为2000-3000rpm/min。
本发明的优选技术方案中，所述的研磨时间为20min-72h，优选为40min-180min，更优选为60min-150min。
本发明的优选技术方案中，所述的油选自大豆油、玉米油、茶油、棉籽油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶的粒径≤600nm，优选为≤500nm，更优选为≤400nm，还优选为100nm-350nm，再优选为150-300nm。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶组合物的电位绝对值大于10mV，优选大于15mV。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为1.0％-40.0％,优选为5.0％-25.0％，更优选为8-20％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为0.2％-10.0％，优选为1.0％-5.0％，更优选为1.5％-3.5％，还优选为2.0％-3.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自非离子型表面活性剂、高分子聚合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的非离子型表面活性剂选自聚山梨酯、单硬脂酸甘油酯、泊洛沙姆、司盘、卖泽、苄泽的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的高分子聚合物选自羟丙基甲基纤维素(Hypromellose,HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl pyrrolidone,PVP)、聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)、吐温、甘油、癸基葡糖苷、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、海藻酸钠的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自HPMC E5、HPMC E3、HPMC E6、HPMC E4M、HPMC K4M、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、PVP K12、PVP K17、PVP K30、PVA、吐温80、吐温20、羧甲基纤维素钠、甘油、癸基葡糖苷的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.1％-3.0％，优选为0.3％-2.0％，更优选为0.5％-1.5％。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自两性离子型表面活性剂、阴离子型表面活性剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的两性离子型表面活性剂选自卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的阴离子型表面活性剂选自十二烷基硫酸钠(SDS)、多库酯钠(DOSS)的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自十二烷基硫酸钠、多库酯钠、卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂的HLB值不低于10，优选不低于20，更优选不低于30。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为0.2％-10.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.1％-3.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为1.0％-40.0％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为1.0％-5.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.3％-2.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为5％-25％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为2.0％-3.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.5％-1.5％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物含有重量/体积百分比为5.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC和1.0％的SDS。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物含有重量体积百分比为5.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC和0.5％的SDS。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物含有重量体积百分比为10.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC和1.0％的SDS。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物含有重量体积百分比为10.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC和0.5％的SDS。
本发明的优选技术方案中，所述药学上的可接受载体还包括pH调节剂、防腐剂、冻干保护剂、矫味剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂、防腐剂、冻干保护剂、矫味剂任选在研磨前或在研磨后加入。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂选自盐酸、硫酸、氯酸、硝酸、氢溴酸、氢氟酸、磷酸、磺酸、苹果酸、山梨酸、富马酸、枸橼酸、羧酸、羟基酸、酮酸、醋酸、草酸、柠檬酸、琥珀酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、丁二酸、己二酸、丙酮酸、谷氨酸、酒石酸、乳酸、衣康酸、抗坏血酸、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二胺、磷酸二氢胺的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂为缓冲剂，优选为柠檬酸、柠檬酸钾、柠檬酸钠、苹果酸、苹果酸钠、苹果酸钾、氢氧化钾、碳酸氢钠、氢氧化钠、碳酸钾、碳酸钠、磷酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、乳酸、乳酸钠、乳酸钾、丙酸、丙酸钾、丙酸钠、酒石酸、酒石酸钠、富马酸钠、酒石酸钾、富马酸钾、富马酸的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的防腐剂选自苯甲酸或其盐、山梨酸或其盐、对羟苯甲酸酯、焦亚硫酸钠、氯己定、柠檬酸钠、丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基苯甲醚(BHA)、生育酚、乙二胺四乙酸、没食子酸丙酯、季铵化合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的矫味剂选自木糖醇、甜菊苷、罗汉果甙、甘草甜素、甜茶素、蔗糖、糖精钠、甘油、山梨醇、甘露醇、麦芽糖的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的冻干保护剂选自蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、葡聚糖、甘露醇、海藻糖、山梨醇、木糖醇、麦芽糖醇、低聚糖醇、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述纳米晶组合物的制剂形式选自混悬液、注射液、冻干粉针、微乳、气雾剂、乳膏、栓剂、凝胶、泡沫剂的任一种。
本发明的优选技术方案中，将所述的纳米晶组合物冷冻干燥，即得冻干固体制剂。
本发明的优选技术方案中，所述纳米晶组合物的给药形式选自注射给药、粘膜给药、口服给药的任一种或其组合。
本发明的另一目的在于提供一种咪达唑仑纳米晶混悬液，所述混悬液中含有咪达唑仑、分散介质和药学上可接受的载体，其中，咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，优选药学上可接受的载体选自空间保护剂、电荷稳定剂的任一种或其组合，还优选分散介质选自水、油、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的油选自大豆油、玉米油、茶油、棉籽油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶的粒径≤600nm，优选为≤500nm，更优选为≤400nm，还优选为100nm-350nm，再优选为150-300nm。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶混悬液的电位绝对值大于10mV，优选大于15mV。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为1.0％-40.0％,优选为5.0％-25.0％，更优选为8-20％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为0.2％-10.0％，优选为1.0％-5.0％，更优选为1.5％-3.5％，还优选为2.0％-3.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自非离子型表面活性剂、高分子聚合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的非离子型表面活性剂选自聚山梨酯、单硬脂酸甘油酯、泊洛沙姆、司盘、卖泽、苄泽的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的高分子聚合物选自羟丙基甲基纤维素(Hypromellose,HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl pyrrolidone,PVP)、聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)、吐温、甘油、癸基葡糖苷、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、海藻酸钠的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自HPMC E5、HPMC E3、HPMC E6、HPMC E4M、HPMC K4M、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、PVP K12、PVP K17、PVP K30、PVA、吐温80、吐温20、羧甲基纤维素钠、甘油、癸基葡糖苷的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.1％-3.0％，优选为0.3％-2.0％，更优选为0.5％-1.5％。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自两性离子型表面活性剂、阴离子型表面活性剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的两性离子型表面活性剂选自卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的阴离子型表面活性剂选自十二烷基硫酸钠(SDS)、多库酯钠(DOSS)的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自十二烷基硫酸钠、多库酯钠、卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂的HLB值(亲水亲油平衡值)不低于10，优选不低于20，更优选不低于30。
本发明的优选技术方案中，所述的药学上可接受的载体还包括pH调节剂、防腐剂、冻干保护剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂选自盐酸、硫酸、氯酸、硝酸、氢溴酸、氢氟酸、磷酸、磺酸、苹果酸、山梨酸、富马酸、枸橼酸、羧酸、羟基酸、酮酸、醋酸、草酸、柠檬酸、琥珀酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、丁二酸、己二酸、丙酮酸、谷氨酸、酒石酸、乳酸、衣康酸、抗坏血酸、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二胺、磷酸二氢胺的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂为缓冲剂，优选为柠檬酸、柠檬酸钾、柠檬酸钠、苹果酸、苹果酸钠、苹果酸钾、氢氧化钾、碳酸氢钠、氢氧化钠、碳酸钾、碳酸钠、磷酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、乳酸、乳酸钠、乳酸钾、丙酸、丙酸钾、丙酸钠、酒石酸、酒石酸钠、富马酸钠、酒石酸钾、富马酸钾、富马酸的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的防腐剂选自苯甲酸或其盐、山梨酸或其盐、对羟苯甲酸酯、焦亚硫酸钠、氯己定、柠檬酸钠、丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基苯甲醚(BHA)、生育酚、乙二胺四乙酸、没食子酸丙酯、季铵化合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的冻干保护剂选自蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、葡聚糖、甘露醇、海藻糖、山梨醇、木糖醇、麦芽糖醇、低聚糖醇、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为0.2％-10.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.1％-3.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为1.0％-40.0％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为1.0％-5.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.3％-2.0％。
本发明的优选技术方案中，所述纳米晶混悬液中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为5％-25％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为2.0％-3.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.5％-1.5％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液含有重量体积百分比为5.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC、1.0％的SDS，余量为水。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液含有重量体积百分比为5.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC、0.5％的SDS，余量为水。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液含有重量体积百分比为10.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC、1.0％的SDS，余量为水。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液含有重量体积百分比为10.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC、0.5％的SDS，余量为水。
本发明的优选技术方案中，将所述的纳米晶混悬液冷冻干燥，即得冻干固体制剂。
本发明的优选技术方案中，所述纳米晶混悬液的给药形式为注射给药、粘膜给药、口服给药的任一种或其组合。
本发明的目的在于提供一种咪达唑仑纳米晶混悬液的制备方法，所述混悬液中含有咪达唑仑、分散介质和药学上可接受的载体，其中，咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，优选药学上可接受的载体选自空间保护剂、电荷稳定剂的任一种或其组合，还优选分散介质选自水、油、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合，所述的制备方法包括下述步骤：称取所需量的咪达唑仑、分散介质和药学上可接受的载体，将其均匀混合后，湿法研磨或高压均质，即得。
本发明的优选技术方案中，将所需量的咪达唑仑、空间保护剂、电荷稳定剂、分散介质和任选地药学上可接受的其他载体的均匀混合物经超声均质处理后，湿法研磨或高压均质，即得。
本发明的优选技术方案中，所述的超声均质转速为10000-28000rpm，优选为13000-25000rpm，更优选为16000-22000rpm。
本发明的优选技术方案中，所述的初始研磨速度为800-2500rpm，优选为1000-2000rpm，更优选为1200-1800rpm。
本发明的优选技术方案中，所述的研磨速度增加幅度为100-1000rpm/min，优选为300-800rpm/min，更优选为500-700rpm/min。
本发明的优选技术方案中，所述的研磨速度为1500-4000rpm/min，优选为1800-3500rpm/min，更优选为2000-3000rpm/min。
本发明的优选技术方案中，所述的研磨时间为20min-72h，优选为40min-180min，更优选为60-150min。
本发明的优选技术方案中，所述的油选自大豆油、玉米油、茶油、棉籽油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶的粒径≤600nm，优选为≤500nm，更优选为≤400nm，还优选为100nm-350nm，再优选为150-300nm。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶组合物的电位绝对值大于10mV，优选大于15mV。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为1.0％-40.0％,优选为5.0％-25.0％，更优选为8-20％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为0.2％-10.0％，优选为1.0％-5.0％，更优选为1.5％-3.5％，还优选为2.0％-3.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自非离子型表面活性剂、高分子聚合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的非离子型表面活性剂选自聚山梨酯、单硬脂酸甘油酯、泊洛沙姆、司盘、卖泽、苄泽的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的高分子聚合物选自羟丙基甲基纤维素(Hypromellose,HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl pyrrolidone,PVP)、聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)、吐温、甘油、癸基葡糖苷、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、海藻酸钠的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自HPMC E5、HPMC E3、HPMC E6、HPMC E4M、HPMC K4M、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、PVP K12、PVP K17、PVP K30、PVA、吐温80、吐温20、羧甲基纤维素钠、甘油、癸基葡糖苷的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.1％-3.0％，优选为0.3％-2.0％，更优选为0.5％-1.5％。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自两性离子型表面活性剂、阴离子型表面活性剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的两性离子型表面活性剂选自卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的阴离子型表面活性剂选自十二烷基硫酸钠(SDS)、多库酯钠(DOSS)的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自十二烷基硫酸钠、多库酯钠、卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂的HLB值不低于10，优选不低于20，更优选不低于30。
本发明的优选技术方案中，所述的药学上可接受载体还包括pH调节剂、防腐剂、冻干保护剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂、防腐剂、冻干保护剂任选在研磨前或在研磨后加入。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂选自盐酸、硫酸、氯酸、硝酸、氢溴酸、氢氟酸、磷酸、磺酸、苹果酸、山梨酸、富马酸、枸橼酸、羧酸、羟基酸、酮酸、醋酸、草酸、柠檬酸、琥珀酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、丁二酸、己二酸、丙酮酸、谷氨酸、酒石酸、乳酸、衣康酸、抗坏血酸、延胡索酸、α-酮戊二酸、果酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二胺、磷酸二氢胺的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的pH调节剂为缓冲剂，优选为柠檬酸、柠檬酸钾、柠檬酸钠、苹果酸、苹果酸钠、苹果酸钾、氢氧化钾、碳酸氢钠、氢氧化钠、碳酸钾、碳酸钠、磷酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、乳酸、乳酸钠、乳酸钾、丙酸、丙酸钾、丙酸钠、酒石酸、酒石酸钠、富马酸钠、酒石酸钾、富马酸钾、富马酸的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的防腐剂选自苯甲酸或其盐、山梨酸或其盐、对羟苯甲酸酯、焦亚硫酸钠、氯己定、柠檬酸钠、丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基苯甲醚(BHA)、生育酚、乙二胺四乙酸、没食子酸丙酯、季铵化合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的冻干保护剂选自蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、葡聚糖、甘露醇、海藻糖、山梨醇、木糖醇、麦芽糖醇、低聚糖醇、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为0.2％-10.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.1％-3.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为1.0％-40.0％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为1.0％-5.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.3％-2.0％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为5％-25％，空间保护剂：分散介质的重量体积百分比为2.0％-3.0％，电荷稳定剂：分散介质的重量体积百分比为0.5％-1.5％。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液含有重量体积百分比为5.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC、1.0％的SDS，余量为水。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液含有重量体积百分比为5.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC、0.5％的SDS，余量为水。
本发明的优选技术方案中，所述纳米晶混悬液含有重量体积百分比为10.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC、1.0％的SDS，余量为水。
本发明的优选技术方案中，所述纳米晶混悬液含有重量体积百分比为10.0％的咪达唑仑、2.5％的HPMC、0.5％的SDS，余量为水。
本发明的优选技术方案中，将所述的纳米晶组合物冷冻干燥，即得冻干固体制剂。
本发明的优选技术方案中，所述纳米晶混悬液的给药形式为注射给药、粘膜给药、口服给药的任一种或其组合。
本发明的另一目的在于提供一种咪达唑仑纳米晶固体组合物，所述的固体组合物中含有咪达唑仑纳米晶颗粒和药学上可接受的载体，其中，所述咪达唑仑纳米晶的粒径≤600nm，优选为≤500nm，更优选为≤400nm，还优选为100nm-350nm，再优选为150-300nm。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶颗粒由干燥本发明的咪达唑仑纳米晶组合物、咪达唑仑纳米晶混悬液的任一种制备得到。
本发明的优选技术方案中，所述的干燥选自冷冻干燥、喷雾干燥、真空干燥、减压干燥的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶颗粒中含有咪达唑仑10％-95％和药学上可接受的载体为5％-90％，优选药学上可接受的载体选自空间保护剂、电荷稳定剂、分散介质的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自非离子型表面活性剂、高分子聚合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自HPMC E5、HPMC E3、HPMC E6、HPMC E4M、HPMC K4M、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、PVP K12、PVP K17、PVP K30、PVA、吐温80、吐温20、羧甲基纤维素钠、甘油、癸基葡糖苷的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自两性离子型表面活性剂、阴离子型表面活性剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自十二烷基硫酸钠、多库酯钠、卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的药学上可接受的载体选自粘合剂、填充剂、润滑剂、矫味剂、缓冲剂、润湿剂、崩解剂、泡腾剂、其它赋形剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶固体组合物包含以下组分：咪达唑仑纳米晶颗粒60-180份、崩解剂100-200份、填充剂35-70、粘合剂35-65、润滑剂2-15。
本发明的优选技术方案中，所述的粘合剂选自聚维酮、羟丙基纤维素、甲基纤维素、羟丙甲纤维素、羧甲纤维素钠、聚乙烯醇、阿拉伯胶、糊精的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的填充剂选自乳糖、糖粉、糊精、淀粉或其衍生物、纤维素或其衍生物、无机钙盐、山梨醇、甘氨酸的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的无机钙盐选自氯化钙、硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纤维素衍生物选自微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素的任一种或其组合，优选淀粉衍生物选自羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的润滑剂选自硬脂富马酸钠、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石粉、蔗糖脂肪酸酯的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的矫味剂选自木糖醇、甜菊苷、罗汉果甙、甘草甜素、甜茶素、蔗糖、糖精钠、甘油、山梨醇、甘露醇、麦芽糖的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的润湿剂选自十二烷基硫酸钠、水、乙醇、异丙醇的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的崩解剂选自羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、部分预胶化淀粉的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶固体组合物的制剂形式选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂的任一种。
本发明的另一目的在于提供一种咪达唑仑纳米晶固体组合物的制备方法，包括以下步骤：称取所需量的咪达唑仑纳米晶颗粒与药学上可接受的载体，将其均匀混合，即得。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶固体组合物的制剂形式选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂的任一种。
本发明的优选技术方案中，所述片剂制备方法选自干法制粒、粉末直压的任一种。
本发明的优选技术方案中，所述的干法制粒法包括以下步骤：
(a)物料预处理：将咪达唑仑纳米晶颗粒、崩解剂、填充剂、润滑剂和粘合剂过筛，备用；
(b)混合：称取处方量的咪达唑仑纳米晶颗粒、崩解剂、填充剂、润滑剂和粘合剂，将其混合均匀；
(c)将(b)中混合物放置于干法制粒机制粒；
(d)总混合：将(c)所制得干颗粒与处方量的崩解剂、润滑剂、粘合剂混合均匀；
(e)压制素片：将(d)中制得的颗粒放置高速旋转压片机中压制，即得。本发明的优选技术方案中，所述的压制素片后进行包衣。
本发明的优选技术方案中，所述的粉末直压法包括下述步骤：
(a)物料预处理：将咪达唑仑纳米晶颗粒、崩解剂、填充剂、润滑剂、粘合剂过筛，备用；
(b)混合：称取处方量的活性药物咪达唑仑纳米晶颗粒、崩解剂、填充剂、润滑剂和粘合剂混合均匀；
(c)压制素片：将(b)中混合均匀样品放至高速旋转压片机中压制，即得。
本发明的优选技术方案中，所述的压制素片后进行包衣。
本发明的另一目的在于提供咪达唑仑纳米晶组合物、咪达唑仑纳米晶混悬液、咪达唑仑纳米晶固体组合物的任一种或其组合用于制备抗癫痫、抗惊厥的任一种的药物中的应用。
本发明的优选技术方案中，所述的惊厥选自发热、毒性物质、神经损害、脑发育不成熟、颅内感染、电解质失衡、代谢紊乱、环境因素、遗传因素的任一种病因或其组合病因引发的惊厥，优选为新生儿惊厥、儿童惊厥的任一种或其并发症。
本发明的优选技术方案中，所述的发热可为颅外源性发热。
本发明的优选技术方案中，所述的颅外源性发热选自水痘、流感、胃肠炎、中耳炎、呼吸道感染、扁桃体炎、接种疫苗的任一种病因或其组合病因引起的发热。
本发明的优选技术方案中，所述癫痫选自全面性癫痫发作、部分性/局灶性癫痫发作、癫痫性痉挛、反射性癫痫发作的任一种或其并发症。
本发明的优选技术方案中，所述全面性癫痫发作选自全面性强直阵挛发作、失神发作、强直发作、阵挛发作、肌阵挛发作、失张力发作的任一种或其并发症。
本发明的优选技术方案中，所述部分性癫痫发作选自简单部分性发作、复杂部分性发作、继发全面性发作的任一种或其并发症。
本发明的另一目的在于提供一种含有咪达唑仑纳米晶的药物组合物，所述的药物组合物由咪达唑仑纳米晶组合物、咪达唑仑纳米晶固体组合物、咪达唑仑纳米晶混悬液的任一种与其他抗癫痫药物、其他抗惊厥药物的任一种联合用药。
本发明的优选技术方案中，所述的其他抗癫痫药物选自钠通道阻滞剂、减少神经递质释放的药物、提高γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)介导的兴奋性抑制的药物、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体阻滞剂、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体拮抗剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的钠通道阻滞剂选自苯妥英钠、卡马西平、奥卡西平、拉莫三嗪、拉科酰胺的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的减少神经递质释放的药物选自乙琥胺、丙戊酸钠、拉莫三嗪、托吡酯、左乙拉西坦、加巴喷丁、普瑞巴林的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的提高γ-氨基丁酸介导的兴奋性抑制的药物选自苯巴比妥、苯妥英、磷苯妥英、苯二氮卓类、非氨酯、丙戊酸钠、托吡酯、噻加宾、氨乙烯酸的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体拮抗剂的药物选自吡仑帕奈、唑尼沙胺的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的抗惊厥药物选自苯巴比妥钠、地西泮、咪唑安定、苯妥英钠、利多卡因、普瑞巴林、磷苯妥英、左乙拉西坦、托吡酯、劳拉西泮、丙戊酸钠、氨己烯酸的任一种或其组合。
本发明的另一目的在于提供咪达唑仑纳米晶组合物、咪达唑仑纳米晶固体组合物、咪达唑仑纳米晶混悬液的任一种或其组合用于制备麻醉、镇静的任一种或其组合的药物中的应用。
本发明的优选技术方案中，所述的镇静为术前镇静。
本发明的优选技术方案中，所述的镇静为诊断或内镜操作前的清醒性镇静。
本发明的优选技术方案中，所述的镇静为麻醉诱导、全麻或硬膜外麻醉的术中镇静。
本发明的另一目的在于提供咪达唑仑纳米晶组合物、咪达唑仑纳米晶混悬液、咪达唑仑纳米晶固体组合物的任一种或其组合用于制备改善血脑屏障通透性中的药物中的应用。
本发明的优选技术方案中，所述咪达唑仑纳米晶的粒径≤600nm，优选为≤500nm，更优选为≤400nm，还优选为100nm-350nm，再优选为150-300nm。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶组合物、咪达唑仑纳米晶固体组合物、咪达唑仑纳米晶混悬液中含有咪达唑仑和药学上可接受的载体，其中，优选所述药学上可接受的载体选自空间保护剂、电荷稳定剂、分散介质的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶组合物含有咪达唑仑、分散介质和药学上可接受的载体，其中，咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，优选药学上可接受的载体选自空间保护剂、电荷稳定剂的任一种或其组合，还优选分散介质选自水、油、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶混悬液中含有咪达唑仑、分散介质和药学上可接受的载体，其中，咪达唑仑：分散介质的重量体积百分比为0.5％-45.0％，优选药学上可接受的载体选自空间保护剂、电荷稳定剂的任一种或其组合，还优选分散介质选自水、油、聚乙二醇、甘油的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的纳米晶固体组合物中含有咪达唑仑纳米晶颗粒和药学上可接受的载体，其中，所述的咪达唑仑纳米晶颗粒由干燥本发明的咪达唑仑纳米晶组合物、咪达唑仑纳米晶混悬液的任一种方式制备得到，优选干燥选自冷冻干燥、喷雾干燥、真空干燥、减压干燥的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的咪达唑仑纳米晶颗粒中含有咪达唑仑10％-95％和药学上可接受的载体为5％-90％。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自非离子型表面活性剂、高分子聚合物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的非离子型表面活性剂选自聚山梨酯、单硬脂酸甘油酯、泊洛沙姆、司盘、卖泽、苄泽的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的高分子聚合物选自羟丙基甲基纤维素(Hypromellose,HPMC)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl pyrrolidone,PVP)、聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)、吐温、甘油、癸基葡糖苷、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、海藻酸钠的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的空间保护剂选自HPMC E5、HPMC E3、HPMC E6、HPMC E4M、HPMC K4M、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、PVP K12、PVP K17、PVP K30、PVA、吐温80、吐温20、羧甲基纤维素钠、甘油、癸基葡糖苷的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自两性离子型表面活性剂、阴离子型表面活性剂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的两性离子型表面活性剂选自卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的阴离子型表面活性剂选自十二烷基硫酸钠(SDS)、多库酯钠(DOSS)的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂选自十二烷基硫酸钠、多库酯钠、卵磷脂、大豆磷脂的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的电荷稳定剂的HLB值不低于10，优选不低于20，更优选不低于30。
本发明的优选技术方案中，所述的改善血脑屏障通透性的药物选自脑部药物。
本发明的优选技术方案中，所述的脑部药物选自治疗脑瘤、脑神经系统病变、帕金森病、脑血管疾病药物的任一种或其组合。
本发明的优选技术方案中，所述的脑部药物选自替莫唑胺、6-苄基鸟嘌呤、阿霉素、lexiscan、甲氨蝶呤、贝伐珠单抗、利托昔单抗、吉西他滨、马尼地平、瑞戈非尼、青蒿素、紫杉醇类抗癌药、替莫唑胺、长春花生物碱类、5-氟尿嘧啶、蒽环类抗癌药、培美曲塞、铂类抗癌药、喜树碱及其衍生物、环磷酰胺、托泊替康、洛莫司汀、甲基苄肼的任一种或其组合。
本发明所述的分散介质由一种(或几种)物质的微粒(分子、离子或分子集合体等)分布在另一种物质中而形成的混合物。如溶液、胶体、混悬液、混悬液、悬浊液和乳浊液等。在分散系中，被分散成微粒的物质称“分散质”，也称“分散相”；微粒能在其中分散的物质称“分散剂”，也称“分散介质”。
本发明的溶出仪采用天大天发科技有限公司的型号为ZRS-8G的溶出仪。
本发明的纳米粒度测定、电位测定、多分散系数测定采用英国Malvern公司的型号为Nano-ES90的纳米粒度测定仪。
本发明的乳化均质机采用上海恒川机械有限公司的型号为C25的超声乳化均质机。
本发明的湿磨机采用瑞士华尔宝公司的型号为research lab的湿磨机。
除非另有说明，本发明涉及液体与液体之间的百分比时，所述的百分比为体积/体积百分比；本发明涉及液体与固体之间的百分比时，所述百分比为体积/重量百分比；本发明涉及固体与液体之间的百分比时，所述百分比为重量/体积百分比；其余为重量/重量百分比。
与现有技术相比，本发明具有下述有益的技术效果：
1、本发明的咪达唑仑纳米晶组合物具有更优的质量和疗效，且纳米晶具有粒径分布均匀、无细小颗粒聚集分层现象、稳定性好、利于改善咪达唑仑的溶解度，并具有降低药物毒副作用、刺激性低、改善生物利用度高等优点。
2、本发明的制备方法操作简便，显著缩短生产周期，进而显著降低生产成本，适合于大规模工业化生产。
附图说明
图1咪达唑仑纳米晶混悬液、咪达唑仑原料药、咪达唑仑和辅料物理混合物的释放曲线；
图2不同处方的肌肉刺激性比较；
图3咪达唑仑纳米晶混悬液、咪达唑仑溶液、地西泮溶液的抗惊厥和抗癫痫作用比较；
图4不同药物的肌肉注射给药的神经毒性比较。
具体实施方式
以下对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明权利要求保护的范围。
实施例1咪达唑仑纳米晶混悬液的制备
将2.5g HPMC E5加入至100ml水中，加热至50℃，搅拌至完全溶解后，再加入1gSDS、5g咪达唑仑，超声均质5min，使咪达唑仑充分润湿，混悬均匀。将初混物倒入湿磨机中，初始转速为1500rpm，转速每隔5min增加500rpm，直至转速达到3000rpm，持续研磨1h。将研磨好的纳米混悬液稀释200倍，检测制得的纳米晶的粒径为286.6nm，多分散系数(PDI)为0.124，Zeta电位为-23.4mV。
试验例1咪达唑仑纳米晶混悬液的体外释放实验
1、溶液配制
(1)流动相：磷酸盐缓冲液(pH3.5，0.1mol/L)：甲醇为35:65(V/V)。其中，磷酸盐缓冲液的制备为，取9.8g磷酸和4.2mL三乙胺，将其置于1L水中，用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至3.5。
(2)溶出介质：称量40.8g磷酸二氢钾，将其置于6000mL水中，搅拌溶解后，用2.0mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.4。
2、实验条件
(1)咪达唑仑纳米晶混悬液：取实施例1制备的50mg/mL纳米晶混悬液，加水，将其稀释至10mg/mL，取1mL加入溶出仪；
(2)咪达唑仑原料药：取10mg的咪达唑仑原料药，将其置于1mL水中，加入溶出仪；
(3)物理混合物：取10mg咪达唑仑+5mg HPMC E5+2mg SDS，将其置于1ml水中，加入溶出仪。
(4)以上三组，37℃，75rpm转速，采用桨法溶出，溶出介质为pH 7.4的磷酸二氢钾溶液，分别在5min、10min、20min、30min、45min、60min、2h、4h、8h取样2mL，过滤，进样检测，计算累积释放度，绘制释放曲线。
HPLC色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为磷酸盐缓冲液(0.1mol/L，pH3.5)-甲醇(35:65，v/v)；检测波长：220nm；柱温:40℃；流速:1.0ml/min；进样量：10μL。结果见表1和图1。
表1
试验例2咪达唑仑纳米晶混悬液的刺激性实验
1、实验动物
雄性新西兰大耳白兔4只，体重约2.5-3.5kg，约3-4月龄，普通级别。
2、实验方法
(1)供试品及对照品给药
给药途径：肌肉注射给药；
给药体积：5mg/3kg(每只家兔按3kg体重计算，每只给药0.5ml)；
给药频率与时间：每天给药1次，上午8：30-11：30；连续给药5天，根据体重变化调整给药体积。
(2)溶液配制
空白对照(阴性对照)：配制0.9％灭菌生理盐水。
1.7％醋酸阳性对照：将1.7g醋酸溶液加入到98.3g水中，混合均匀。
SDS+HPMC E5溶液：在100ml水中，加入1gSDS、2.5gHPMC E5，混合均匀。
咪达唑仑纳米晶混悬液(MDZ/NCs(SDS))：5％咪达唑仑，1％SDS，2.5％HPMC E5，制备同实施例1。
表2
给药后24小时，每组动物麻醉放血处死，肉眼观察和记录注射部位有无红肿、充血、渗出、变性或坏死等现象。同时对注射部位做进一步病理组织学检查。HE染色后扫描组织病理学切片。
肌肉刺激反应分级标准见表3。
表3
结果表明，空白对照：未见明显异常与炎症，反应级数0。1.7％醋酸阳性对照：组织中可见大量肌纤维坏死溶解，炎细胞较多，布满了肌肉细胞间隙，肌束间质发生水肿，肌纤维出现变性、萎缩与坏死等情况，反应级数5。SDS+HPMC E5溶液：组织染色均匀，间质未见明显异常与炎症，反应级数0。咪达唑仑纳米晶混悬液(MDZ/NCs(SDS))：肌纤维的形态结构无异常、排列整齐、分界明显，间质未见明显异常与炎症，反应级数0。结果见表4、图2。
表4病理形态学检查
实施例2咪达唑仑纳米晶混悬液的制备
将2.5g HPMC E5加入至100ml水中，加热至55℃，搅拌至完全溶解，再加入0.5gSDS、5g咪达唑仑，超声均质5min，使咪达唑仑充分润湿，混悬均匀。将初混物倒入湿磨机中，初始转速为1500rpm，每隔5min转速增加500rpm，直至3000rpm后，持续研磨1h，即得。将研磨好的纳米混悬液稀释200倍，检测制得的咪达唑仑纳米晶的粒径为267.3nm，多分散系数(PDI)为0.132，Zeta电位为-28.1mV。
试验例3咪达唑仑纳米晶混悬液稳定性研究
将实施例2制备的纳米晶混悬液分别置于4℃，25℃(室温)、40℃(加速)条件下放置，在0、1、2、3、4、5、6、7、8个月分别取样，稀释200倍，检测粒径。结果见表5。
表5
试验例4咪达唑仑纳米晶混悬液的抗惊厥和抗癫痫作用研究
1、抗惊厥和抗癫痫作用
1)戊四氮溶液6.9mg/mL的配制：称取276.00mg戊四氮，将其置于50mL离心管中，用生理盐水溶液稀释至40mL，充分混匀，备用。
2)咪达唑仑纳米晶混悬液1mg/mL的配制：精密移取1mL咪达唑仑纳米晶(浓度50mg/mL)混悬液，将其置于50mL容量瓶中，加入生理盐水溶液，将其稀释定容至刻度，充分混匀，备用。
将1mg/mL咪达唑仑纳米晶混悬液用生理盐水溶液分别稀释至0.5mg/mL、0.25mg/mL、0.125mg/mL、0.0625mg/mL，备用。
3)咪达唑仑溶液1mg/mL的配制：精密称取50.00mg咪达唑仑，将其置于50mL容量瓶中，用pH3.5生理盐水溶液稀释定容至刻度，充分混匀，备用。
将1mg/mL咪达唑仑溶液，用pH3.5的生理盐水溶液分别稀释为0.5mg/mL、0.25mg/mL、0.125mg/mL、0.0625mg/mL。
4)地西泮溶液1mg/mL的配制：精密称取50.00mg地西泮，将其置于50mL容量瓶中，用乙醇溶解兵稀释定容至50mL，充分混匀，备用。
将1mg/mL地西泮溶液用乙醇分别稀释为0.5mg/mL、0.25mg/mL、0.125mg/mL、0.0625mg/mL，备用。
模型组：SD大鼠10只，每只体重为250±20g，雌雄各半，给予6.9mg/mL的戊四氮溶液，记录大鼠惊厥数量。
咪达唑仑纳米晶混悬液试验组：SD大鼠60只分为6组，每组10只，每只体重为250±20g，雌雄各半，分别肌肉注射给予剂量为0.0625mg/kg、0.125mg/kg、0.25mg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg的咪达唑仑纳米晶混悬液，2min后，给予6.9mg/mL的戊四氮溶液，记录大鼠惊厥数量。
咪达唑仑溶液和地西泮溶液的抗惊厥和抗癫痫作用：动物分组、给药方式等实验方法同咪达唑仑纳米晶混悬液。
咪达唑仑纳米晶混悬液的神经毒性实验：SD大鼠50只分为5组，每组10只，雌雄各半，分别肌肉注射剂量0.625mg/kg、1.25mg/kg、2.5mg/kg、3.0mg/kg、4.0mg/kg的咪达唑仑纳米晶混悬液，将大鼠放置于水平棒上，记录每组的掉落只数。
咪达唑仑溶液和地西泮溶液的神经毒性实验：动物分组、给药方式等实验方法同咪达唑仑纳米晶混悬液。
结果使用SPSS 19.0软件进行统计分析，采用单因素方差分析，p<0.05时具有统计学差异，并运用Probit分析计算ED50。
结果表明，咪达唑仑纳米晶混悬液在给药剂量0.25mg/kg时，惊厥控制率能达到100％。同等剂量下，地西泮溶液的惊厥控制率为50％，咪达唑仑溶液的惊厥控制率为90％。经过Probit计算三者的ED50。结果见表6、表7、图3。
表6肌肉注射给药抗惊厥和抗癫痫作用
注：与0.0625mg·kg-1咪达唑仑纳米晶组相比，*p<0.05；与0.125mg·kg-1咪达唑仑纳米晶组相比，**p<0.01；地西泮溶液与咪达唑仑纳米晶相比，△p<0.05.
表7
2、咪达唑仑纳米晶混悬液神经毒性研究
记录每组小鼠掉落数，根据失衡率进行Probit分析计算，得到TD50。结果见表8、表9和图4。
表8肌注给药神经毒性比较
表9半数中毒剂量比较
结果表明，咪达唑仑纳米晶混悬液控制癫痫发作效果优于咪达唑仑溶液和地西泮溶液。且咪达唑仑纳米晶混悬液的治疗指数(TI,112.58)远大于地西泮(13.09)和咪达唑仑溶液(35.33)，具有更高的治疗安全性。
表10治疗指数比较
试验例5咪达唑仑纳米晶的血脑屏障通透性研究
1、实验动物
雄性SD大鼠10只，2周龄，北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号SCXK(京)2016-0011。
2、实验方法
咪达唑仑纳米晶混悬液、咪达唑仑溶液配制所采用溶液、方式参考实验例4。
(1)脑微血管内皮细胞分离与原代培养
取2周的SD大鼠，培养1天后处死，用止血钳将头夹断，泡在75％酒精中2min，并放置在D-Hank’s液中浸泡，取出脑组织置于冰中的培养皿中，获得脑皮质。
1)D-Hank’s清洗脑皮质3次，转移至不含血清的DMEM中剪碎，加入4mL 0.1％浓度的Ⅱ型胶原酶(含有120μDNasel)，在37℃的水浴中消化1.5h，每隔20min摇晃离心管。
2)1000rpm离心8min，弃去上清，加入20％BSA重悬，14000rpm，4℃离心20min，去除中层组织及大血管，留取底部沉淀。
3)加入2mL的0.1％胶原酶/分散酶与40μDNaseⅠ，消化1h，1000rpm离心8min，弃上清。
4)将3mL大鼠内皮细胞分离液1加入离心管中，在其上层缓慢加入1mL分离液2，最后加入2mL不含FBS的DMEM重悬的细胞液在最上层，确保各层液面分层清晰，4℃，1000*g，离心20min。
5)离心后的离心管液面分为三层，吸取中层内皮细胞置不含FBS的DMEM，1000rpm离心5min，洗涤2次，弃去上清。
6)加入ECM重悬接种在培养瓶中30min后转移至被FN包被的培养瓶中，加入嘌呤霉素(4μg/mL)。
7)在37℃，5％CO2细胞培养箱中培养至长满培养瓶。
(2)BMECs传代
1)吸出培养液，PBS清洗3次。
2)加入0.25％的胰蛋白酶消化1.5min，显微镜下观察消化情况，程度合适时加入培养基终止消化。
3)将消化后的细胞转移至离心管，离心速度为1000rpm，离心时间为5min，离心后弃掉上清。
4)用ECM专用培养液重悬后调整细胞密度为1*105个/mL，接种到FN包被的25cm2培养瓶。
5)在37℃，5％CO2细胞培养箱中培养至长满70％后，每天换液。
6)待细胞长满瓶后再次传代。
(3)脑微血管内皮细胞建立血脑屏障模型
1)吸去培养基，加入PBS清洗3次。
2)加入浓度为0.25％胰蛋白酶消化1-2min，显微镜下观察消化情况，程度合适时加入培养基终止消化。
3)将细胞置入15mL离心管中，1000rpm离心5min，弃上清。ECM培养液重悬，以1*106个/孔的密度接种于Transwell 24孔板上室(FN孵育)。
4)在37℃，5％CO2细胞培养箱中培养，约2-3天后观察到细胞发生融合后，进行TEER实验。
(4)TEER实验
大鼠脑微血管内皮细胞接种至24孔板上的Transwell小室中，接种密度1*106个/孔，从接种第一天检测电阻值，连续培养并监测7天，TEER值超过200Ω·cm2，体外血脑屏障(BBB)模型构建成功。
(5)CCK-8法检测咪达唑仑纳米晶混悬液的细胞毒性
细胞以每孔5×104个细胞的密度接种于96孔板，每孔加入100μL的ECM培养。细胞贴壁后，分别加入用浓度为10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL和80μg/mL的咪达唑仑纳米晶混悬液与咪达唑仑溶液，分别在24h、48h、72h取样检测。在波长450nm处测定上清液的吸光度值，以评价咪达唑仑纳米晶混悬液与咪达唑仑溶液对细胞活性的影响。细胞存活率的计算公式为：细胞存活率(％)＝A实验组/A对照组×100％。每个浓度设置6个复孔，统计其平均值。
结果显示，随着给药浓度的增加，咪达唑仑纳米晶混悬液与咪达唑仑溶液的细胞毒性均增大，存活率逐渐降低。咪达唑仑溶液在细胞中培养24h、48h、72h后的细胞毒性均大于咪达唑仑纳米晶混悬液，表明咪达唑仑纳米晶混悬液有更好的生物安全性。结果见表11。
表11咪达唑仑纳米晶混悬液在BMECs中的细胞毒性
(6)咪达唑仑纳米晶混悬液血脑屏障通透性研究
1)取长满脑微血管上皮细胞的培养瓶，PBS清洗3次，0.25％胰蛋白酶消化2min，在显微镜下观察到细胞悬浮后立即加入含10％FBS的ECM培养基终止消化。
2)取24孔板，下层加入1mL培养基，上层放入transwell小室，加入200μL含1*106个/mL培养基，再在下室加入200μL ECM培养基，保持液面持平，2-4h后测电阻值，并计算电阻值(Ω·cm2)＝(R细胞-R空白)×S膜(cm2)。
3)吸出上室与下室的ECM培养基，下室加入1200μL的D-Hanks，上室加入含药培养基200μL，含药量分别为10μg/mL的咪达唑仑纳米晶混悬液与咪达唑仑溶液。分别在5min、10min、20min、30min、45min、60min从下室取药200μL加入到进样小瓶中，取出后补液。
4)HPLC检测透过BBB的咪达唑仑浓度。HPLC方法为磷酸盐缓冲液(0.1mol/L，配制：9.81g磷酸置于1000mL水中，加入4mL三乙胺；用2mol/L NaOH调节pH至3.5)：甲醇＝35：65；柱温：30℃；λmax＝220nm；流速：1.0mL/min；进样量：10μL。
结果显示，咪达唑仑纳米晶血脑屏障的累积透过率为(18.59±0.86)％，是咪达唑仑溶液(7.44±0.14)％的2.5倍。结果见表12。
表12咪达唑仑纳米晶混悬液在血脑屏障模型中的透过率
实施例3咪达唑仑纳米晶混悬液的制备
将2.5g HPMC E5加入至100ml水中，加热至60℃，搅拌溶解后，再加入0.5g SDS、10g咪达唑仑，超声均质5min，使咪达唑仑充分润湿，混悬均匀。将初混物倒入湿磨机中，1500rpm为初始转速，每隔5min转速增加500rpm，直至3500rpm后，持续研磨2h，即得。将研磨好的纳米混悬液稀释200倍，检测粒径为223.6nm，多分散系数(PDI)为0.124，Zeta电位为-25.8mV。
实施例4咪达唑仑纳米晶混悬液的制备
将8g HPMC E5加入至100ml水中，加热至55℃，搅拌至完全溶解，再加入2g SDS、45g咪达唑仑，超声均质20min，使咪达唑仑充分润湿，混悬均匀。将初混物倒入湿磨机中，初始转速为1500rpm，每隔10min转速增加500rpm，直至3000rpm后，持续研磨4h，即得。将研磨好的纳米混悬液稀释200倍，检测制得的咪达唑仑纳米晶的粒径为245.6nm，多分散系数(PDI)为0.231，Zeta电位为-30.3mV。
实施例5咪达唑仑纳米晶混悬液的制备
将0.25g HPMC K4M加入至100ml水中，加热至55℃，搅拌至完全溶解，再加入0.05gSDS、0.5g咪达唑仑，超声均质5min，使咪达唑仑充分润湿，混悬均匀。将初混物倒入湿磨机中，初始转速为1500rpm，每隔2min转速增加500rpm，直至3000rpm后，持续研磨2h，即得。将研磨好的纳米混悬液稀释200倍，检测制得的咪达唑仑纳米晶的粒径为342.3nm，多分散系数(PDI)为0.215，Zeta电位为-18.3mV。
实施例6咪达唑仑纳米晶混悬液的制备
将2.5g HPMC E5加入至100ml水中，加热至50℃，搅拌至完全溶解后，再加入0.5gDOSS、5g咪达唑仑，超声均质5min，使咪达唑仑充分润湿，混悬均匀。将初混物倒入湿磨机中，初始转速为1500rpm，转速每隔5min增加500rpm，直至转速达到3000rpm，持续研磨1h。将研磨好的纳米混悬液稀释200倍，检测制得的纳米晶的粒径为293.4nm，多分散系数(PDI)为0.154，Zeta电位为-25.8mV。
实施例7咪达唑仑纳米晶混悬液的制备
将2.5g CMC Na加入至100ml水中，加热至50℃，搅拌至完全溶解后，再加入0.5gP188、5g咪达唑仑，超声均质5min，使咪达唑仑充分润湿，混悬均匀。将初混物倒入湿磨机中，初始转速为1500rpm，转速每隔5min增加500rpm，直至转速达到3000rpm，持续研磨1h。将研磨好的纳米混悬液稀释200倍，检测制得的纳米晶的粒径为328.4nm，多分散系数(PDI)为0.203，Zeta电位为-35.2mV。
实施例8咪达唑仑纳米晶片剂及其制备方法
咪达唑仑纳米晶片剂的组成：
咪达唑仑纳米晶片剂的制备方法，包括下述步骤：
1、将实施例3的咪达唑仑纳米晶混悬液冷冻干燥，制得其冻干颗粒；
2、将微晶纤维素、交联聚维酮、羟丙甲纤维素、滑石粉，过筛，备用；
3、称取所需量的咪达唑仑纳米晶混悬液冻干颗粒、微晶纤维素、交联聚维酮、羟丙甲纤维素、滑石粉，搅拌，将其混合均匀，将制得的均匀混合物置于高速旋转压片机中压片，即得。
以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明权利要求保护的范围。