阅读说明：本技术 一种仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法 (Thin-layer identification method for renshu stomach-invigorating granules ) 是由 郑艳萍 刁和芳 赵开军 徐董欣 王海丽 于 2020-07-20 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法,它包括莪术药材的鉴别,薏苡仁药材鉴别,黄芩苷鉴别,白术药材鉴别,白花蛇舌草鉴别,仙鹤草鉴别,半边莲鉴别。本发明提供的仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法,针对每种药材,筛选出最佳的供试品制备工艺和薄层色谱鉴别的条件,工艺设计合理,可操作性强,能对白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲和白花蛇舌草进行准确的鉴别,该方法具有鉴别速度快、鉴别准确率高,且检测成本低,在仁术健胃颗粒的质量控制,保证仁术健胃颗粒临床功效方面具有重要的意义。(The invention discloses a thin-layer identification method of Renzhu stomach-invigorating granules, which comprises identification of a zedoary medicinal material, identification of a coix seed medicinal material, identification of baicalin, identification of a bighead atractylodes rhizome medicinal material, identification of spreading hedyotis herb, identification of hairyvein agrimony and identification of Chinese lobelia herb. The thin-layer identification method of the Renzhu stomach-invigorating granules provided by the invention screens out the optimal preparation process of a sample and the optimal conditions of thin-layer chromatography identification for each medicinal material, has reasonable process design and strong operability, can accurately identify the Atractylodes macrocephala, the coix seed, the scutellaria baicalensis, the agrimony, the zedoary, the Chinese lobelia and the oldenlandia diffusa, has high identification speed, high identification accuracy and low detection cost, and has important significance in the quality control of the Renzhu stomach-invigorating granules and the guarantee of the clinical efficacy of the Renzhu stomach-invigorating granules.)

一种仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法

技术领域

本发明涉及一种中药制剂的鉴别方法，具体涉及一种仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法，属于中药制剂质量检测技术领域。

背景技术

仁术健胃颗粒由全国名中医、江苏省中医院(国家中医脾胃病临床研究基地)脾胃病科学术带头人单兆伟教授研究开发，四十余年来单兆伟教授通过系列临床及基础研究总结提出萎缩性胃炎胃黏膜癌前病变的主要病机特点是“气虚血瘀热郁”，制定“益气活血清热”为主要治疗法则，研究开发仁术健胃颗粒，该院内制剂由中药黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草制成。多项研究表明，仁术健胃颗粒具有良好的治疗萎缩性胃炎胃黏膜癌前期病变的疗效，该药作为江苏省中医院院内制剂已有二十余年的应用基础，2004年9月以来累计约使用100万盒；其中2019年使用量约为20万盒，具有非常好的临床疗效。但是该制剂还未有全面、客观、多指标的质量评价方法。本发明提供一种操作简单，检测成本低，对仁术健胃颗粒多种成分进行检测的薄层检测方法。

发明内容

发明目的：本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种操作简单，检测成本低，对仁术健胃颗粒多种成分进行检测的薄层检测方法。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法，它包括以下步骤：

(1)莪术药材的鉴别

(2)薏苡仁药材鉴别

(3)黄芩苷鉴别

(4)白术药材鉴别

(5)白花蛇舌草鉴别

(6)仙鹤草鉴别

(7)半边莲鉴别。

具体的，本发明所述的一种仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法，其包括以下步骤：

(1)莪术药材的鉴别

取莪术粉末，加石油醚，超声处理，滤过，滤液浓缩，作为供试品溶液；另取莪术对照药材粉末，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)薏苡仁药材鉴别

取薏苡仁粉末，加石油醚，超声处理，滤过，取滤液，作为供试品溶液；另取薏苡仁对照药材，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取薏苡仁供试品溶液和对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-***-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点；

(3)黄芩苷鉴别

取黄芩粉末，加甲醇，加热回流，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用稀盐酸调pH值至约为2～3，用醋酸乙酯振摇提取，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成黄芩苷对照品溶液；照薄层色谱法，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(4)白术药材鉴别

取白术，加乙醇，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为白术供试品溶液；另取白术对照药材，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法，吸取白术供试品溶液和对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚：醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(5)白花蛇舌草鉴别

取白花蛇舌草粉末，加正己烷，超声处理，滤过，取滤液作为白花蛇舌草供试品溶液；另取白术对照药材，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法，吸取白花蛇舌草供试品溶液和对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(6)仙鹤草鉴别

取仙鹤草粉末，加石油醚，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷溶解，用氧氧化钠溶液提取，弃去三氣甲焼液，用稀盐酸调节pH值至1～2,用三氢甲烷振摇提取，合并三氣甲烷液，加水洗涤，弃去水液，三氣甲烧液浓缩，作为仙鹤草供试品溶液；另敢仙鹤草对照药材，同法制成对照药材溶液；再取仙鹤草酚B对照品，加三氣甲烷制成仙鹤草酚B对照品溶液；照薄厚色谱法，吸取上述三种仙鹤草供试品溶液、仙鹤草对照药材溶液和仙鹤草酚B对照品溶液，分别点于冏一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酿-醋酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(7)半边莲鉴别

取半边莲粉末，加甲醇超声处理，放冷滤过，滤液蒸干残渣甲醇使溶解，作为半边莲供试品溶液；另取半边莲对照药材，同法制成半边莲对照药材溶液；照薄层色谱法，吸取上述半边莲供试品溶液和半边莲对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三甲-甲醇为展开剂，展开，取出晾干，啧硫酸乙醇液，加热至斑点显色淸晰分别置日光和紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

作为优选方案，以上所述的仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法，包括以下步骤：

(1)莪术药材的鉴别

取莪术粉末5g，加石油醚30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为莪术供试品溶液；另取莪术对照药材粉末1g，同法制成莪术对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比10:1石油醚-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸乙醇溶液；莪术供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)薏苡仁药材鉴别

取薏苡仁粉末5g，加石油醚30ml，超声处理30分钟，滤过，取滤液，作为薏苡仁供试品溶液，另取薏苡仁对照药材1g，同法制成薏苡仁对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比83：17：1的石油醚-***-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点；

(3)黄芩苷鉴别

取黄芩粉末5g，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用稀盐酸调pH值至约为2，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为黄芩供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为黄芩苷对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5:3:1:1醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(4)白术药材鉴别

取白术5g，加乙醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为白术供试品溶液；另取白术对照药材1g，同法制成白术对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比5:1石油醚：醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(5)白花蛇舌草鉴别

取白花蛇舌草粉末5g，加正己烷20ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液作为白花蛇舌草供试品溶液；另取白术对照药材0.5g，同法制成白花蛇舌草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比50：1的石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(6)仙鹤草鉴别

取仙鹤草粉末5g，加石油醚40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干；残渣加三氯甲烷10ml溶解，用5％氧氧化钠溶液10ml提取，弃去三氣甲焼液，用稀盐酸调节pH值至1～2，用三氢甲烷振摇提取2次，每次10ml，合并三氣甲烷液，加水10ml洗涤，弃去水液，三氣甲烧液浓缩至1ml，作为仙鹤草供试品溶液；另敢仙鹤草对照药材2g，同法制成仙鹤草对照药材溶液；再取仙鹤草酚B对照品，加三氣甲烷制成每1ml含0.5mg的仙鹤草酚B溶液，作为仙鹤草酚B对照品溶液；照薄厚色谱法试验，吸取上述三种溶液各10微升分别点于冏一硅胶G薄层板上，以体积比100:9:5石油醚-乙酸乙酿-醋酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃：加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(7)半边莲鉴别

取半边莲粉末5g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，放冷滤过，滤液蒸干残渣甲醇2ml使溶解，作为半边莲供试品溶液；另取半边莲对照药材lg，同法制成对照药材液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比9:1三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出晾干啧10％硫酸乙醇液，在105℃热至斑点显色淸晰分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

有益效果：本发明提供的仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法具有以下优点：

本发明提供的仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法，针对每种药材，筛选出最佳的供试品制备工艺和薄层色谱鉴别的条件，工艺设计合理，可操作性强，能对白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲和白花蛇舌草进行准确的鉴别，该方法具有鉴别速度快、鉴别准确率高，且检测成本低，在仁术健胃颗粒的质量控制，保证仁术健胃颗粒临床功效方面具有重要的意义。

附图说明

图1为莪术药材的薄层鉴别图。

图2为薏苡仁药材的薄层鉴别图。

图3为黄芩药材的薄层鉴别图。

图4为白术药材的薄层鉴别图。

具体实施方式

下面通过实施例详细描述本发明，该实施例不应解释为对本发明的限制。

实施例1

仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法，包括以下步骤：

(1)莪术药材的鉴别

取莪术粉末5g，加石油醚30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为莪术供试品溶液；另取莪术对照药材粉末1g，同法制成莪术对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比10:1石油醚-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸乙醇溶液；莪术供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；如图1所示。

(2)薏苡仁药材鉴别

取薏苡仁粉末5g，加石油醚30ml，超声处理30分钟，滤过，取滤液，作为薏苡仁供试品溶液，另取薏苡仁对照药材1g，同法制成薏苡仁对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比83：17：1的石油醚-***-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点；如图2所示。

(3)黄芩苷鉴别

取黄芩粉末5g，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用稀盐酸调pH值至约为2，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为黄芩供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为黄芩苷对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5:3:1:1醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；如图3所示。

(4)白术药材鉴别

取白术5g，加乙醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为白术供试品溶液；另取白术对照药材1g，同法制成白术对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比5:1石油醚：醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；如图4所示。

(5)白花蛇舌草鉴别

取白花蛇舌草粉末5g，加正己烷20ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液作为白花蛇舌草供试品溶液；另取白术对照药材0.5g，同法制成白花蛇舌草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比50：1的石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(6)仙鹤草鉴别

取仙鹤草粉末5g，加石油醚40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干；残渣加三氯甲烷10ml溶解，用5％氧氧化钠溶液10ml提取，弃去三氣甲焼液，用稀盐酸调节pH值至1～2，用三氢甲烷振摇提取2次，每次10ml，合并三氣甲烷液，加水10ml洗涤，弃去水液，三氣甲烧液浓缩至1ml，作为仙鹤草供试品溶液；另敢仙鹤草对照药材2g，同法制成仙鹤草对照药材溶液；再取仙鹤草酚B对照品，加三氣甲烷制成每1ml含0.5mg的仙鹤草酚B溶液，作为仙鹤草酚B对照品溶液；照薄厚色谱法试验，吸取上述三种溶液各10微升分别点于冏一硅胶G薄层板上，以体积比100:9:5石油醚-乙酸乙酿-醋酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃：加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(7)半边莲鉴别

取半边莲粉末5g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，放冷滤过，滤液蒸干残渣甲醇2ml使溶解，作为半边莲供试品溶液；另取半边莲对照药材lg，同法制成对照药材液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比9:1三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出晾干啧10％硫酸乙醇液，在105℃热至斑点显色淸晰分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

以上表明，本发明采用薄层鉴别方法，能快速准确地鉴别各药材，为保证质量和临床疗效具有重要的应用价值。