阅读说明：本技术 一种治疗***的药物组合物及其用途 (Pharmaceutical composition for treating polycystic ovarian syndrome and application thereof ) 是由 朱小琳 韩亚光 韩延华 韩亚鹏 于 2020-07-08 设计创作，主要内容包括：本发明公开了固绿(Fast green FCF,FGF)在制备治疗多囊卵巢综合征(PCOS)药物中的应用。本发明还公开了一种用于治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的药物组合物,所述药物组合物包含固绿(Fast green FCF,FGF)和药学上可接受的赋形剂。药效学实验结果显示固绿具有良好的促排卵作用,能恢复卵巢正常形态,并降低卵巢局部炎症因子水平,能够有效治疗多囊卵巢综合征。(The invention discloses application of Fast Green FCF (FGF) in preparation of a medicine for treating polycystic ovarian syndrome (PCOS). The invention also discloses a pharmaceutical composition for treating polycystic ovary syndrome (PCOS), which comprises Fast Green FCF (FGF) and pharmaceutically acceptable excipient. Pharmacodynamic experiment results show that the green fixing has good ovulation promoting effect, can restore the normal form of the ovary, reduce the level of local inflammatory factors of the ovary and can effectively treat polycystic ovary syndrome.)

一种治疗***的药物组合物及其用途

技术领域

本发明涉及药物技术领域，具体涉及一种治疗***的药物组合物及其用途。

背景技术

囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)是妇科内分泌疾病中的一个常见病、难治病，好发于***及育龄期妇女。临床上以持续无***或稀发***、多毛、座疮、肥胖、月经稀发甚至闭经常见，现已严重影响女性的身心健康及生活质量。目前PCOS的发病机制尚未完全清楚，胰岛素抵抗和高胰岛素血症是***患者常见的代谢异常表现，且有明显的代谢后遗症，其子宫内膜癌、心血管疾病、血脂异常和Ⅱ型糖尿病风险的比例更高。

在目前PCOS已有的治疗方法中一般按不同年龄，不同情况采取不同措施：对***病人，应以调节神经、内分泌、代谢或抗雄激素过高为主，不多用促***药克罗米芬；对要求生育的病人，应在调整机体功能失调的基础上，以促***受孕为主；对已有生育的病人则以调整卵巢功能及提高神经、内分泌功能为主。目前，炔雌醇环丙孕酮、螺内酯、二甲双胍、氯米芬等对PCOS的疗效已广为报道。近年来，奥利司他、阿卡波糖、利拉鲁肤等药物也已用于PCOS的治疗。

近年来大量文献报道PCOS患者体内炎症因子水平明显增高，该病存在慢性、低度非特异性的亚临床炎症状态，PCOS患者体内的一些炎症因子及其基因变化，如白细胞计数、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白介素类(IL)、核因子KB(NF-κB)、血浆纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)，单核细胞趋化因子(MCF-1)等不同程度的升高，表明低度慢性炎症可能在PCOS的发展中发挥作用，与PCOS的发病机制有关。

发明内容

本发明的第一方面是提供固绿(Fast green FCF,FGF)在制备治疗***(PCOS)药物中的应用。

固绿(Fast green FCF,FGF)是一种被美国食品和药物管理局(FDA)批准使用的三苯基甲烷食品添加剂。其易溶于水(1mg/ml)，分子结构如下所示：

固绿广泛用于食品、药品和护肤品，也用于蛋白质染色、细胞外液鉴定记录和膜片钳等科学研究，具有很高的安全性(人类每日最高摄入量可达25mg/kg/day)。最近，关于固绿在淀粉样蛋白聚集性疾病中的治疗作用己被证实，报道称固绿可促进Aβ形成无毒的聚集体并抑制体外溶菌酶原纤维的生成，表明固绿对于治疗或预防蛋白质聚集疾病有潜在作用。另外，也有研究表明100mg/kg剂量的固绿能够显著改善小鼠痛觉过敏行为，抑制脊髓和局部组织中炎症因子水平。但是，固绿与PCOS相关疾病的活性未见文献报道。

本发明通过来曲唑建立近似于人类PCOS的动物模型，并在灌胃给予固绿后，发现固绿具有良好的促***作用，能恢复卵巢正常形态，并且可以降低卵巢局部炎症因子的水平，能够有效治疗***。

本发明的第二方面是提供一种用于治疗***的药物组合物，所述药物组合物包含固绿(Fast green FCF,FGF)和药学上可接受的赋形剂。

进一步地，所述药物组合物中还包含其他有效成分。

更进一步地，所述其他有效成分包括口服避孕药、螺内酯、氯他胺、二甲双胍或利拉鲁肽。

优选地，所述药学上可接受的赋形剂是填充剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂、稳定剂、矫味剂中的一种或多种。

更优选地，所述药物组合物被制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂或滴丸。

进一步优选地，所述片剂是普通片、包衣片、肠溶片、泡腾片、分散片、***片中的一种。

下面将结合具体实施例对本发明的优选实施方案及其效果进行描述。但是，应当理解，这些描述只是用于说明性的目的，而绝非对本发明的权利要求构成任何限制。

具体实施方式

实施例1：固绿对PCOS大鼠模型的影响

1、实验动物分组与给药

将具有规则动情周期的6周龄SD清洁级雌性大鼠30只，随机分组。每口***涂片观察动情周期的变化情况。来曲唑溶解在生理盐水中，配制浓度为1％，固绿(FGF)3g溶解在生理盐水50ml中，配置成浓度为60mg/ml。其中，

A组(10只)：空白对照组，自由饮食饮水；

B组(10只)：PCOS模型组，每日用来曲唑1mg/kg灌胃，21天后给予生理盐水5ml/kg灌胃10天；

C组(10只)：固绿组，每日用来曲唑1mg/kg灌胃，21天后给予浓度为6％的固绿溶液5ml/kg灌胃10天。

每日检测大鼠体重变化，并行***涂片观察大鼠动情周期情况。

取血清标本以及卵巢组织：在末次灌胃24小时后，所有实验大鼠均禁饮食12小时，称重后，水合氯醛腹腔注射麻醉，取下腔静脉肾静脉水平处进针抽吸4-5m1血于空白管中，室温静置30-60分钟，3000rpm离心5分钟，分装-20℃保存备用。然后处死大鼠，摘取大鼠卵巢组织，石蜡包埋后进行冷冻切片机切片，进行HE染色，选取5个切片在显微镜下计数成熟卵泡数。

放射免疫分析法检测INS(胰岛素)，T(睾酮)，LH(促黄体激素)水平。

双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清TNF-α、IL-6。

2、实验结果：

2.1动情周期的变化

A组:***脱落细胞的变化符合正常大鼠规律的动情周期。

B组和C组:在给予来曲唑的第9天出现动情周期消失，并至21天持续处于动情间期，提示无***。

C组大鼠在给固绿溶液灌胃的第6天均出现动情周期，自发恢复***，而B组持续无***，仅1只在给生理盐水灌胃的第10天恢复***。

2.2固绿对成熟卵泡数的影响

通过显微镜下计数成熟卵泡数，成熟卵泡：卵丘明显，卵泡腔很大，卵泡内膜细胞紧靠卵泡颗粒层，与颗粒层之间有一层基膜相隔，胞质清亮，胞核圆形，外膜细胞位于外层。结果见表1。

表1固绿对成熟卵泡数的影响

*表示与A组比，P<0.05；#表示与B组比，P<0.05。

2.3各组大鼠血清指标之间的比较((B组中剔除恢复***的大鼠)

大鼠血清中INS(胰岛素)，T(睾酮)，LH(促黄体激素)的水平在B组(PCOS模型组)的表达明显高于A组(空白对照组)，均具有统计学意义(P<0.05)，C组(固绿组)的表达明显低于B组(P<0.05)。

大鼠血清TNF-α在B组的表达较A组明显增加(P<0.05)，在C组的表达较B组明显降低(P<0.05)。

大鼠血清中IL-6水平在B组的表达高于A组，C组的表达较B组降低，但统计学上均无显著性差别(P>0.05)。结果见表2。数据以均数标准差表示。

表2各组大鼠血清指标结果

*表示与A组比，P<0.05；#表示与B组比，P<0.05。

基于上述实验结果，PCOS模型组大鼠血清TNF-α显著高于正常对照组(P<0.05)，固绿组血清TNF-α较PCOS组显著下降(P<0.05)；血清IL-6水平在三组大鼠间无显著性差异(P>0.05)；PCOS大鼠采用固绿干预后血清INS(胰岛素)，T(睾酮)，LH(促黄体激素)显著下降。在给予固绿的第6天，固绿组大鼠均出现动情周期，恢复***，且成熟卵泡数逐渐恢复；而PCOS组持续处于动情间期，提示无***，直到第10天12只中仅1只恢复动情周期。

上述实验结果提示：固绿具有良好的促***作用，能恢复卵巢正常形态，并且卵巢局部炎症因子的改变可能直接参与发病机制。因此，固绿有望成为一种能够有效治疗***的临床药物。