一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物及其制备方法和应用
阅读说明：本技术 一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物及其制备方法和应用 (Composition containing pinoresinol diglucoside and preparation method and application thereof ) 是由 肖军平 陈梁 李小锋 刘厚权 张梅红 胡吉忠 夏淑英 毛金娣 林飞英 于 2021-06-30 设计创作，主要内容包括：本发明属于药物制备技术领域,具体涉及一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物及其制备方法和应用。含松脂醇二葡萄糖苷的组合物,包括以下组分：松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素、木耳多糖、γ-氨基丁酸、甘露三糖、佛手苷内酯。该组合物具有较好的治疗治疗骨质疏松症的功效,制备方法简单,毒副作用小、成本低。(The invention belongs to the technical field of medicine preparation, and particularly relates to a composition containing pinoresinol diglucoside, and a preparation method and application thereof. A composition containing pinoresinol diglucoside comprises the following components: pinoresinol diglucoside, syringaresinol, Auricularia polysaccharide, gamma-aminobutyric acid, manninotriose and bergamotol lactone. The composition has good therapeutic effect on osteoporosis, and has the advantages of simple preparation method, low adverse side effect, and low cost.)
技术领域
本发明属于药物制备
技术领域
，具体涉及一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物及其制备方法和应用。背景技术
骨质疏松症(osteoporosis)是由于多种原因导致的骨密度和骨质量下降，骨微结构破坏，造成骨脆性增加，从而容易发生骨折的全身性骨病。骨质疏松症分为原发性和继发性二大类。原发性骨质疏松症又分为绝经后骨质疏松症、老年性骨质疏松症和特发性骨质疏松。
现有技术中治疗骨质疏松的方法有多种。如中国专利申请CN1583069A公开一种治疗骨质疏松症的药物由下述重量份原料组成：骨碎补8-12份、杜仲4-7份、桑寄生4-7份、狗脊2-4份、川芎3-6份、当归3-5份、红花4-6份、白术3-5份、川牛膝6-10份。该药物是根据中医“肾主骨生髓”的理论，以补益肝肾为主，兼顾健脾安胃、活血祛瘀等治法，精选药物配制而成。从临床及动物体内、外两个方面的实验研究表明，治疗骨质疏松症的药物可从根本上调整骨代谢，使之向正态平衡方向转化。
中国专利申请CN1079160A公开一种治疗骨质疏松症断骨十分有效的中草药，它是由沉香、西红花、木香、川芎、桂枝、白芷、三七、川续断、土鳖虫、骨碎补、制马钱子、牛膝、黄瓜子、鸡骨、大黄、自然铜、冰片、血竭18味中草药所组成，口服此药没有副作用，制法简单。
中国专利申请CN111714577A公开了一种预防和治疗骨质疏松症的药物“正元骨泰”及其制作方法。它是以山萸肉、芡实、金樱子、山药、山羊骨、牛骨、牛筋、鹿筋等纯天然药材，用生物技术制成的以复合氨基酸为主的小分子中药；具有滋阴温阳、化瘀通络、补肾壮骨等功效。
现有的治疗骨质疏松的方法中，大多治疗效果有限，同时部分中草药配方组分较多，其中多存在多种杂质一方面会影响药效，药物的利用率大打折扣，另一方面还可能会产生副作用不利于身体健康。
本发明旨在研究一种副作用小、成本低，功效好的治疗骨质疏松症的含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，能有效解决以上问题。
发明内容
为克服以上技术问题，本发明提供了一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物及其制备方法和应用；该组合物具有较好的治疗治疗骨质疏松症的功效，制备方法简单，毒副作用小、成本低。
为实现以上目的，本发明提供的技术方案如下：
一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，包括以下组分：
松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素、木耳多糖、γ-氨基丁酸、甘露三糖、佛手苷内酯。
优选地，按照重量份数计，所述组合物包括以下组分：
松脂醇二葡萄糖苷10-20份、丁香脂素1-5份、木耳多糖5-10份、γ-氨基丁酸1-5份、甘露三糖1-10份、佛手苷内酯5-15份。
优选地，按照重量份数计，所述组合物包括以下组分：
松脂醇二葡萄糖苷12-16份、丁香脂素3-5份、木耳多糖7-9份、γ-氨基丁酸2-4份、甘露三糖4-8份、佛手苷内酯10-12份。
优选地，所述木耳多糖的制备方法为：
(1)取木耳洗净、泡胀、匀浆，于蒸馏水中提取，过滤，制得一次提取液和滤渣；
(2)将滤渣加入蒸馏水超声提取，制得二次提取液；
(3)合并一次提取液和二次提取液，减压浓缩后加乙醇沉淀；制得醇沉物；
(4)将醇沉物溶水后经sephadexG-100凝胶柱处理，先使用乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液后，再使用蒸馏水洗脱，收集蒸馏水洗脱液；向乙酸乙酯洗脱液中加入蒸馏水萃取，将分离出的水相与蒸馏水洗脱液混合后再浓缩，制得木耳多糖。
优选地，步骤(1)中，所述提取在60-80℃下提取30-60min后煮沸提取1-2h。
优选地，步骤(2)中，所述超声的功率为80-100W；所述提取时间为30-60min。
本发明的另一目的在于提供所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物的制备方法，包括以下步骤：
将γ-氨基丁酸溶于蒸馏水中，加入增溶剂，再将松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素、木耳多糖、甘露三糖、佛手苷内酯分散于蒸馏水中，制得组合物的混合液。
优选地，所述增溶剂为丙二醇、聚乙二醇月桂酸酯和聚乙二醇硬脂酸甘油酯中的任一种或多种。
优选地，所述增溶剂为丙二醇和聚乙二醇月桂酸酯的混合物，其中，所述丙二醇和聚乙二醇月桂酸酯的质量比为1-3:1。
优选地，所述聚乙二醇月桂酸酯的相对分子量为600-1000。
优选地，所述增溶剂的质量为在蒸馏水中的质量浓度为1-5％。
本发明的目的还在于提供所述的含松脂醇二葡萄糖苷的组合物在制备防治骨质疏松药物中的应用。
本发明的目的还在于提供一种药物制剂，所述药物制剂包含所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物和药剂学上常用的辅料。
与现有技术比，本发明的技术优势在于：
(1)本发明提供的含松脂醇二葡萄糖苷的组合物能够有效防治骨质疏松。
(2)本发明中木耳多糖能够促进血液循环，具有提高机体免疫的功效，能够有效促进机体钙的吸收，改善骨质疏松；同时，松脂醇二葡萄糖苷和木耳多糖、γ-氨基丁酸具有较好的协同作用，能够有效防治骨质疏松增强骨密度。
(3)丁香脂素和甘露三糖、佛手苷内酯具有较好的协同增效作用，能有效促进松脂醇二葡萄糖苷的在骨强度、免疫力和抗疲劳等功效。
(4)木耳多糖提取过程中使用了sephadexG100，能够有效促进多糖与蛋白质和其它杂质小分子的分离，促进木耳多糖的提纯。
(5)本发明采用水提和超声萃取相结合的方式提取木耳，能够有效提取木耳中的多糖成分，提高木耳的利用率。
(6)本发明在制备混合液时，选用了丙二醇和聚乙二醇月桂酸酯的混合物作为增溶剂，一方面能够有效促进各个组分在水中的溶解性，另一方面当加入辅料制成制剂时可以提高有效成分的利用率，有效发挥作用。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行说明，以使本发明技术方案更易于理解、掌握，但本发明并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1
一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，按照重量份数计，所述组合物包括以下组分：
松脂醇二葡萄糖苷13份、丁香脂素4份、木耳多糖8份、γ-氨基丁酸3份、甘露三糖5份、佛手苷内酯11份。
所述木耳多糖的制备方法为：
(1)取木耳洗净、泡胀、匀浆，于蒸馏水在70℃下提取40min后煮沸提取1.5h，过滤，制得一次提取液和滤渣；
(2)将滤渣加入蒸馏水超声提取50min，超声的功率为80W，制得二次提取液；
(3)合并一次提取液和二次提取液，减压浓缩后加乙醇沉淀；制得醇沉物；
(4)将醇沉物溶水后经sephadexG-100凝胶柱处理，先使用乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液后，再使用蒸馏水洗脱，收集蒸馏水洗脱液；向乙酸乙酯洗脱液中加入蒸馏水萃取，将分离出的水相与蒸馏水洗脱液混合后再浓缩，制得木耳多糖。
所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物的制备方法，包括以下步骤：
将γ-氨基丁酸溶于200份蒸馏水中，加入质量比为2:1丙二醇和聚乙二醇月桂酸酯(M＝800)的混合物作为增溶剂，增溶剂在蒸馏水中的质量浓度为2％，再将松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素、木耳多糖、甘露三糖、佛手苷内酯分散于蒸馏水中，制得组合物的混合液。
实施例2
一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，按照重量份数计，所述组合物包括以下组分：
松脂醇二葡萄糖苷10份、丁香脂素1份、木耳多糖5份、γ-氨基丁酸1份、甘露三糖10份、佛手苷内酯15份。
所述木耳多糖的制备方法为：
(1)取木耳洗净、泡胀、匀浆，于蒸馏水在60℃下提取60min后煮沸提取1h，过滤，制得一次提取液和滤渣；
(2)将滤渣加入蒸馏水超声提取30min，超声的功率为100W，制得二次提取液；
(3)合并一次提取液和二次提取液，减压浓缩后加乙醇沉淀；制得醇沉物；
(4)将醇沉物溶水后经sephadexG-100凝胶柱处理，先使用乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液后，再使用蒸馏水洗脱，收集蒸馏水洗脱液；向乙酸乙酯洗脱液中加入蒸馏水萃取，将分离出的水相与蒸馏水洗脱液混合后再浓缩，制得木耳多糖。
所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物的制备方法，包括以下步骤：
将γ-氨基丁酸溶于200份蒸馏水中，加入质量比为1:1丙二醇和聚乙二醇月桂酸酯(M＝600)的混合物作为增溶剂，增溶剂在蒸馏水中的质量浓度为5％，再将松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素、木耳多糖、甘露三糖、佛手苷内酯分散于蒸馏水中，制得组合物的混合液。
实施例3
一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，按照重量份数计，所述组合物包括以下组分：
松脂醇二葡萄糖苷20份、丁香脂素5份、木耳多糖10份、γ-氨基丁酸5份、甘露三糖1份、佛手苷内酯5份。
所述木耳多糖的制备方法为：
(1)取木耳洗净、泡胀、匀浆，于蒸馏水在80℃下提取30min后煮沸提取2h，过滤，制得一次提取液和滤渣；
(2)将滤渣加入蒸馏水超声提取60min，超声的功率为80W，制得二次提取液；
(3)合并一次提取液和二次提取液，减压浓缩后加乙醇沉淀；制得醇沉物；
(4)将醇沉物溶水后经sephadexG-100凝胶柱处理，先使用乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液后，再使用蒸馏水洗脱，收集蒸馏水洗脱液；向乙酸乙酯洗脱液中加入蒸馏水萃取，将分离出的水相与蒸馏水洗脱液混合后再浓缩，制得木耳多糖。
所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物的制备方法，包括以下步骤：
将γ-氨基丁酸溶于200份蒸馏水中，加入质量比为3:1丙二醇和聚乙二醇月桂酸酯(M＝1000)的混合物作为增溶剂，增溶剂在蒸馏水中的质量浓度为1％，再将松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素、木耳多糖、甘露三糖、佛手苷内酯分散于蒸馏水中，制得组合物的混合液。
对比例1
与实施例1相比，区别仅在于使用等量的γ-氨基丁酸替换木耳多糖。
一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，按照重量份数计，所述组合物包括以下组分：
松脂醇二葡萄糖苷13份、丁香脂素4份、γ-氨基丁酸11份、甘露三糖5份、佛手苷内酯11份。
所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物的制备方法，包括以下步骤：
将γ-氨基丁酸溶于200份蒸馏水中，加入质量比为2:1丙二醇和聚乙二醇月桂酸酯(M＝800)的混合物作为增溶剂，增溶剂在蒸馏水中的质量浓度为2％，再将松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素、甘露三糖、佛手苷内酯分散于蒸馏水中，制得组合物的混合液。
对比例2
与实施例1相比，区别仅在于使用等量的木耳多糖替换γ-氨基丁酸。
一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，按照重量份数计，所述组合物包括以下组分：
松脂醇二葡萄糖苷13份、丁香脂素4份、木耳多糖11份、甘露三糖5份、佛手苷内酯11份。
所述木耳多糖的制备方法同实施例1。
所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物的制备方法，包括以下步骤：
取200份蒸馏水中，加入质量比为2:1丙二醇和聚乙二醇月桂酸酯(M＝800)的混合物作为增溶剂，增溶剂在蒸馏水中的质量浓度为2％，再将松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素、木耳多糖、甘露三糖、佛手苷内酯分散于蒸馏水中，制得组合物的混合液。
对比例3
与实施例1相比，区别仅在于使用等量的淫羊藿苷替换丁香脂素。
一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，按照重量份数计，所述组合物包括以下组分：
松脂醇二葡萄糖苷13份、淫羊藿苷4份、木耳多糖8份、γ-氨基丁酸3份、甘露三糖5份、佛手苷内酯11份。
所述木耳多糖的制备方法同实施例1。
所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物的制备方法，包括以下步骤：
将γ-氨基丁酸溶于200份蒸馏水中，加入质量比为2:1丙二醇和聚乙二醇月桂酸酯(M＝800)的混合物作为增溶剂，增溶剂在蒸馏水中的质量浓度为2％，再将松脂醇二葡萄糖苷、淫羊藿苷、木耳多糖、甘露三糖、佛手苷内酯分散于蒸馏水中，制得组合物的混合液。
对比例4
与实施例1相比，区别仅在于木耳多糖的制备方法不同。
一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，组分同实施例1。
所述木耳多糖的制备方法为：
(1)取木耳洗净、泡胀、匀浆，于蒸馏水在70℃下提取40min后煮沸提取1.5h后不过滤，直接进行超声50min，超声的功率为80W，过滤，制得提取液和滤渣；
(2)将提取液减压浓缩后加乙醇沉淀；制得醇沉物；
(4)将醇沉物溶水后经sephadexG-100凝胶柱处理，先使用乙酸乙酯洗脱，收集乙酸乙酯洗脱液后，再使用蒸馏水洗脱，收集蒸馏水洗脱液；向乙酸乙酯洗脱液中加入蒸馏水萃取，将分离出的水相与蒸馏水洗脱液混合后再浓缩，制得木耳多糖。
所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物的制备方法，步骤同实施例1。
对比例5
与实施例1相比，区别仅在于增溶剂不同。
一种含松脂醇二葡萄糖苷的组合物，组分同实施例1。
所述木耳多糖的制备方法为步骤同实施例1。
所述含松脂醇二葡萄糖苷的组合物的制备方法，包括以下步骤：
将γ-氨基丁酸溶于200份蒸馏水中，加入丙二醇作为增溶剂，增溶剂在蒸馏水中的质量浓度为2％，再将松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素、木耳多糖、甘露三糖、佛手苷内酯分散于蒸馏水中，制得组合物的混合液。
效果评价
大鼠骨质疏松模型：取3.5月龄SPF级雌性大鼠100只，体重为250±20g，室温20-25℃，标准颗粒饲料喂养，含钙1％，磷0.74％，自由摄食、摄水，适应性喂养7d后进行实验。将大鼠随机分为10组，分别为模型组、实施例1-3组、对比例1-5组、空白对照组。
其中，模型组：甲泼尼龙3.5mg/kg/d皮下注射，每日1次。实施例1-3组和对比例1-5组：在皮下注射甲泼尼龙3.5mg/kg/d的同时，灌胃对应组制备的组合物混合液10mg/kg/d(按有效含量计)，每日1次。空白对照组：皮下注射3.5mg/kg/d的生理盐水，每日1次。三组实验同时进行，共8周，每周测1次提供，根据体重调剂给药剂量。
8周后，分别测模型组和对照组大鼠的骨密度，统计学分析P＜0.05说明骨质疏松模型已制备成功。禁食1天后取主动脉血，分离血清，使用放射免疫法测定血清骨钙素(BGP)(试剂盒选自酶联生物)，用双能X线骨密度仪专用小动物软件测定髋关节骨密度(BMD)(美国LUNAR公司生产EXPERT型)，测试结果见表1。
表1测试结果数据
注：同一列表中不同字母间表示具有显著性差异(P＜0.05)。
由实验数据可知，模型组与空白对照组相比具有显著性差异，说明造模成功；实施例1-3组与模型组相比具有显著性差异，说明本发明提供的组合物能够有效预防骨质疏松。其次，实施例1-3组与对比例1-5组相比具有显著性差异，说明本发明中组合物的组成及其制备方法对其治疗骨质疏松的功效具有较大的影响。
上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。
- 上一篇：一种医用注射器针头装配设备
- 下一篇：一种创面修复制剂及其用途和使用方法