阅读说明：本技术 含有氮杂双环衍生物的组合物及其用途 (Compositions containing azabicyclo derivatives and uses thereof ) 是由 向飞 赵震震 于 2019-10-21 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种含有互不相同的两种氮杂双环衍生物的混合物的组合物,具体的氮杂双环衍生物的定义如说明书所示。所述混合物能与金花茶、南蛇藤、半夏、白花蛇舌草、柘木、峨参等植物的提取物产生协同的抗肿瘤作用。(The invention provides a composition containing a mixture of two different azabicyclo derivatives, wherein the definition of the specific azabicyclo derivative is shown in the specification. The mixture can produce synergistic antitumor effect with extracts of Camellia Chysantha, Celastrus orbiculatus, rhizoma Pinelliae, herba Hedyotidis Diffusae, lignum Cudraniae Tricuspidatae, and Anthriscus sylvestris.)

含有氮杂双环衍生物的组合物及其用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含有氮杂双环衍生物与多羟基化合物的组合物及其用途。

背景技术

肿瘤(tumour)是对人类健康构成最大威胁的疾病之一。据WHO统计，全球平均每年新增病例约800万人，约有700万人死于恶性肿瘤，且这一数据正在逐年增加。西医临床***的三大方法为手术切除、放疗及化疗。然而传统的化疗药物虽然延长了患者的生存期，但是其较强的不良反应以及耐药性的产生，使得寻求新药物来***的研究成为当前研究领域里的一大热点。

氮杂双环是多种抗肿瘤活性化合物所共有的结构母核，具体实例可见但不限于Rageot D等人(J Med Chem.2018Nov 21；61(22):10084-10105)与Duan Z等人(MolPharmacol.2007Nov；72(5):1137-45)的研究。

多种植物中富含有具有抗肿瘤活性的成分，见诸文献报道的提取物中具有抗肿瘤活性的植物包括但不限于蓝莓、石见穿、灰树花、眼树莲、无梗五加、金花葵、金花茶、南蛇藤、半夏、白花蛇舌草、柘木、峨参、非洲马铃果、玉木耳、对叶大戟、褐藻、三叶青、藏茵陈。

众所周知的是，中药的疗效是通过一系列相似结构的化合物群(有效成分)的协同作用而体现的。因此，寻找能与植物提取物发生协同作用的化合物群，为中西医结合治疗疑难病症提供了新的途径。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含有互不相同的两种氮杂双环衍生物的混合物的组合物，所述混合物能与金花茶、南蛇藤、半夏、白花蛇舌草、柘木、峨参等植物的提取物产生协同的抗肿瘤作用。

为了实现上述目的，本发明一方面提供了一种含有互不相同的选自如下所示化合物1～48的第一氮杂双环衍生物与第二氮杂双环衍生物的混合物的组合物：

一方面优选的，本发明所述混合物中第一氮杂双环衍生物与第二氮杂双环衍生物的质量比0.01:1～100:1之间。

另一方面优选的，本发明所述的组合物中进一步含有植物提取物。

进一步优选的，本发明所述的植物提取物是选自金花茶、南蛇藤、半夏、白花蛇舌草、柘木、峨参中的一种植物的提取物。

另一方面优选的，本发明所述的组合物可制成液体制剂或固体制剂。

更优选的，本发明所述的液体制剂是选自口服液与注射液中的一种，所述的的固体制剂是选自胶囊剂、片剂与颗粒剂中的一种。

本发明另一方面提供了如前所述的组合物在制备用于***的药物中的用途。

更优选的，本发明所述的肿瘤是选自肺癌、结肠癌、白血病、黑色素瘤、鼻咽癌、卵巢癌、乳腺癌、肝癌、胃癌与***癌中的一种。

体外试验结果显示，本发明所述的混合物能能协同地增强所述植物提取物对相关肿瘤细胞增殖的抑制作用。

具体实施方式

以下实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。对所公开的实施例的下述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例中，而是可以应用于符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的更宽的范围。虽然在本发明的实施或测试中可以使用与本发明中所述相似或等价的任何方法和材料，本文在此处列举优选的方法和材料。

制备例1植物提取物的制备

采用超声波提取法，将阴干的植物材料在40℃下烘干，粉碎后过40目筛，放入自封袋中。试验前称取50g的植物干粉，加入10～20倍(v/w)的水进行超声波提取，每次60min，重复提取3次。过滤后浓缩，保存于4℃冰箱内待用。

所述植物材料是选自蓝莓(PE1)、石见穿(PE2)、灰树花(PE3)、眼树莲(PE4)、无梗五加(PE5)、金花葵(PE6)、金花茶(PE7)、南蛇藤(PE8)、半夏(PE9)、白花蛇舌草(PE10)、柘木(PE11)、峨参(PE12)、非洲马铃果(PE13)、玉木耳(PE14)、对叶大戟(PE15)、褐藻(PE16)、三叶青(PE17)与藏茵陈(PE18)中的一种。

试验例1含有氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制肿瘤细胞增殖的作用的影响

本发明采用Deng K等人(Cancer Biol Ther.2019；20(1):52-64)所披露的方法评价了以下受试物对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用：

受试物①：选自如前所述化合物1～48的化合物X与化合物Y以不同的质量比(R₁)构成的混合物，记为混合物X-Y，其中，X、Y选自1～48，而且X≠Y。

受试物②：制备例1制备得到的植物提取物，记为PEZ(Z选自7～12)。

受试物③：受试物①与受试物②以特定的质量比(R₂)形成的混合物，混合物X-Y-PEZ。

根据下式计算各受试物对相关肿瘤细胞增殖的抑制率(IR)。

IR＝(1-RCV)×100％。

上式中的RCV代表根据Deng K等人(Cancer Biol Ther.2019；20(1):52-64)所披露的方法所测得的相对细胞活力。

对于受试物①与受试物②而言，采用IR对混合物的总浓度与植物提取物的浓度(ng/mL)的对数(log(c))作图，根据线性回归方程计算出产生特定fa的抑制率时各受试物的浓度，分别记为IC_fa(A)与IC_faB)。对于受试物③而言，采用IR对其中化合物X与化合物Y的总浓度(ng/mL)的对数作图，根据线性回归方程计算出产生特定fa的抑制率时受试物③中化合物X与化合物Y的总浓度，记为IC_fa(mixA)。

根据下式计算产生特定fa抑制率时的联合用药指数(CI)。

CI<1时，即表示存在协同作用，CI越小，协同作用越强。

表2.1氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制肺癌H1299细胞株增殖作用的影响

表2.2氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制结肠癌HCT-116细胞株增殖作用的影响

表2.3氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制白血病U937细胞株增殖作用的影响

表2.4氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制黑色素瘤OCM-1细胞株增殖作用的影响

表2.5氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制鼻咽癌HNE1细胞株增殖作用的影响

表2.6氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制卵巢癌A2780细胞株增殖作用的影响

表2.7氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制乳腺癌T47D细胞株增殖作用的影响

表2.8氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制肝癌HepG-2细胞株增殖作用的影响

表2.9氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制胃癌7901细胞株增殖作用的影响

表2.10氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制***癌DU145细胞株增殖作用的影响

表2.11氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制肺癌A549细胞株增殖作用的影响

表2.12氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制结肠癌CT26细胞株增殖作用的影响

表2.13氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制白血病K562细胞株增殖作用的影响

表2.14氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制黑色素瘤A375细胞株增殖作用的影响

表2.15氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制鼻咽癌CNE-2细胞株增殖作用的影响

表2.16氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制卵巢癌SK-OV-3细胞株增殖作用的影响

表2.17氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖作用的影响

表2.18氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制肝癌SMMC-7721细胞株增殖作用的影响

表2.19氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制胃癌SGC-7901细胞株增殖作用的影响

表2.20氮杂双环衍生物的混合物对植物提取物抑制***癌PC-3细胞株增殖作用的影响

实施例1含有氮杂双环衍生物与多羟基化合物的液体制剂的制备

处方(10000单位剂量)

注：

^a代表未添加植物提取物

制备工艺

加处方量的柠檬酸、混合物X-Y-PEZ、依地酸二钠、氯化钠、苯扎氯铵、甘露醇，加入处方量的20％的注射用水溶解，经0.22μm微孔滤膜过滤，用氢氧化钠调节pH值至6.3左右,过220目筛网，密闭煮沸60min，冷却至室温，加注射用水至全量。

实施例2含有氮杂双环衍生物的混合物的口服固体制剂的制备

处方(1000单位剂量)

制备方法

取处方量的混合物X-Y-PEZ与辅料，均过100目筛。取混合物X-Y-PEZ、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮与淀粉充分混匀；取处方量的羟丙甲纤维素，配制成依羟丙甲纤维素计浓度为10％的溶液，用乳酸调节pH至3.0～4.0，加入至上述混合物料中制软材，以16目筛制粒，80℃干燥3～4h。用16目筛整粒，加入处方量的微粉硅胶与硬脂酸镁混合混匀，灌装胶囊，即得胶囊；

取处方量的混合物X-Y-PEZ与辅料，均过100目筛。取混合物X-Y-PEZ、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮与淀粉充分混匀；取处方量的羟丙甲纤维素，配制成依羟丙甲纤维素计浓度为10％的溶液，用乳酸调节pH至3.0～4.0，加入至上述混合物料中制软材，以16目筛制粒，80℃干燥3～4h。用16目筛整粒，加入处方量的微粉硅胶与硬脂酸镁混合混匀，分装，即得颗粒剂；

取处方量的混合物X-Y-PEZ与辅料，均过100目筛。取混合物X-Y-PEZ、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮与淀粉充分混匀；取处方量的羟丙甲纤维素，配制成依羟丙甲纤维素计浓度为10％的溶液，用乳酸调节pH至3.0～4.0，加入至上述混合物料中制软材，以16目筛制粒，80℃干燥3～4h。用16目筛整粒，加入处方量的微粉硅胶与硬脂酸镁混合混匀，压片，既得片剂。