阅读说明：本技术 紫外线消毒盒杀菌率验证方法 (Method for verifying sterilization rate of ultraviolet disinfection box ) 是由 胡桂云 卢涛 李席如 周德发 王全胜 于 2020-12-05 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种紫外线消毒盒杀菌率验证方法,其先将多种培养基在高温高压蒸汽炉内处理灭菌备用,并制备浓度为0.9％的氯化钠稀释液、洗脱液；再对物体表面进行灭菌为无菌状态；接下来进行菌悬液的制备,然后吸取制备好的菌悬液于已灭菌的物体表面最难杀菌的位置,进行菌片制备；再将染菌物体分别进行紫外线消毒盒试验组和阳性对照组的试验,获取菌数,最后根据杀菌率进行判定是否合格,通过如此杀菌率验证步骤进行,以达到准确高效的验证紫外线消毒盒杀菌率的有益效果。(The invention discloses a sterilization rate verification method of an ultraviolet sterilization box, which comprises the steps of treating and sterilizing various culture mediums in a high-temperature high-pressure steam furnace for later use, and preparing 0.9% sodium chloride diluent and eluent; then sterilizing the surface of the object to be in an aseptic state; preparing bacterial suspension, sucking the prepared bacterial suspension to a position on the surface of a sterilized object which is most difficult to sterilize, and preparing bacterial tablets; and then, respectively testing the infected objects with the ultraviolet disinfection box test group and the positive control group to obtain the number of bacteria, and finally judging whether the infected objects are qualified according to the sterilization rate, wherein the sterilization rate verification step is carried out so as to achieve the beneficial effect of accurately and efficiently verifying the sterilization rate of the ultraviolet disinfection box.)

紫外线消毒盒杀菌率验证方法

技术领域

本发明涉及卫生消毒杀菌技术领域，特别是涉及一种紫外线消毒盒杀菌率验证方法。

背景技术

随着人们对生活健康防范意识的提高，要求生活中的衣、食、住、行所需均达到消毒杀菌后的健康标准，如人们经常对手机、眼镜进行酒精消毒处理、对衣服、食物进行紫外线照射杀菌处理等，以通过消毒杀菌的措施防范身体健康。

目前利用紫外线杀菌灯的照射进行消毒灭菌，是目前国内常用的物理消毒方法之一，它广泛应用于医药，卫生，生物制品等科研生产部门，对空气，水和物体表面进行消毒处理。参考《含碘消毒剂卫生标准》，要求设计紫外线消毒杀菌完成后细菌繁殖体杀菌率大于99.999％，真菌杀菌率大于99.99％，以达到医疗级消毒水平，故对紫外线杀菌的率的验证至关重要，在最难杀灭细菌的地方的杀菌率合格方才认可产品杀菌率合格。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种紫外线消毒盒杀菌率验证方法，准确高效的验证紫外线消毒盒杀菌率。

基于此，本发明提供了一种紫外线消毒盒杀菌率验证方法，包括以下步骤：

S1：制作灭菌培养基与试剂：将胰酪大豆胨液体培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基以及沙氏葡萄糖琼脂培养基在高温高压蒸汽炉内处理灭菌后备用并制备浓度为0.9％的氯化钠稀释液、洗脱液；

S2：物体表面灭菌；对即将消毒杀菌的物体进行清洗、干燥，高温高压灭菌，检测物体表面为无菌状态；

S3：菌悬液制备：通过菌种传代方法制备菌试管斜面，接种环刮取菌的新鲜培养物于装有5ml的上述浓度氯化钠试管中初步制成菌悬液，再与麦氏比浊管粗测其含菌浓度，将菌液进行活菌计数，并用上述浓度的氯化钠稀释液稀释成含菌量为5×105～5×106cfu/mL的菌悬液，确定菌落的数量；

S4：菌片制备：吸取滴注步骤S3中的菌悬液于步骤S2中已灭菌的物体表面最难杀菌的位置并平放于灭菌平皿中，然后置于37℃恒温箱中30min进行烘干处理；

S5：菌数实验：分为紫外线消毒盒试验组和阳性对照组，其中，紫外线消毒盒试验组为：将步骤S4中的染菌物体放入紫外线消毒盒中消毒后用上述浓度的氯化钠试剂洗脱，吸取至培养皿中，作平板倾注，接种两个平板进行培养，平板计数；阳性对照组为：将步骤S4中的染菌物体直接置上述浓度的氯化钠试剂洗脱，吸取至培养皿中，作平板倾注，接种两个平板进行培养，平板计数；

S6：结果判定，根据杀菌率的计算公式：

杀菌率达到目标判定则为合格。

在上述技术方案中，所述步骤S1中高温高压蒸汽炉的温度为121℃，时间为20min。

在上述技术方案中，所述步骤S3中的菌悬液制备方法制备的菌悬液包含金黄色葡萄球菌的菌悬液、大肠杆菌的菌悬液，绿脓假单胞菌的菌悬液以及白色念珠菌的菌悬液。

在上述技术方案中，所述步骤S4中吸取0.1ml含菌量为5×106cfu/mL的菌悬液在已灭菌的物体表面，滴注面积为2×3cm，载体回收菌量为5×105cfu/个。

在上述技术方案中，所述步骤S4中，在已灭菌的物体表面种菌类型分别为金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，绿脓假单胞菌的细菌繁殖体和白色念珠菌的真菌繁殖体。

在上述技术方案中，所述步骤S5中，紫外线消毒盒试验组将染菌物体放入紫外线消毒盒中的消毒时间为60s，用100ml的0.9％的氯化钠试剂洗脱，吸取1ml至培养皿中。

在上述技术方案中，所述步骤S5中，细菌繁殖体：金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，绿脓假单胞菌的培养温度为30℃～37℃，培养时间为3天；真菌：白色念珠菌的培养温度为20℃～25℃，培养时间为5天。

本发明紫外线消毒盒杀菌率验证方法，其先将多种培养基在高温高压蒸汽炉内处理灭菌备用，并制备浓度为0.9％的氯化钠稀释液、洗脱液；再对物体表面进行灭菌为无菌状态；接下来进行菌悬液的制备，然后吸取制备好的菌悬液于已灭菌的物体表面最难杀菌的位置，进行菌片制备；再将染菌物体分别进行紫外线消毒盒试验组和阳性对照组的试验，获取菌数，最后根据杀菌率进行判定是否合格，通过如此杀菌率验证步骤进行，以达到准确高效的验证紫外线消毒盒杀菌率的有益效果。

附图说明

图1是本发明紫外线消毒盒杀菌率验证方法流程图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

请参见图1所示，本发明公开的一种紫外线消毒盒杀菌率验证方法，包括以下步骤：

S1：制作灭菌培养基与试剂：在本实施例中，培养基分别为胰酪大豆胨液体培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。将其在高温高压蒸汽炉内进行处理灭菌后备用，其中，将高温高压蒸汽炉的温度设定为121℃，作用时间为20min；

制备浓度为0.9％的氯化钠稀释液、洗脱液试剂；

S2：物体表面灭菌：对即将消毒杀菌的物体进行清洗、干燥，高温高压灭菌，检测物体表面为无菌状态；

S3：菌悬液制备：以金黄色葡萄球菌为例，菌种传代方法制备金黄色葡萄球菌试管斜面，接种环刮取金黄色葡萄球菌的新鲜培养物于装有5ml0.9％的氯化钠试管中，初步制成菌悬液，再与麦氏比浊管粗测其含菌浓度，将菌液进行活菌计数，并用上述浓度的氯化钠稀释液稀释成含菌量为5×105～5×106cfu/mL的菌悬液，确定菌落的数量。

另外，可以通过上述同种方法制备大肠杆菌，绿脓假单胞菌，白色念珠菌的菌悬液。

S4：菌片制备：将5×106cfu/mL的菌悬液吸取0.1ml滴注2×3cm的放置于已灭菌的物体表面上最难杀菌的位置，并平放于灭菌平皿中，一起放入37℃恒温箱中30min进行烘干，每个载体滴注定量菌液，具体的，载体回收菌量达5×105cfu/个。

其中，种菌类型分别为细菌繁殖体和真菌，细菌繁殖体包括：金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，绿脓假单胞菌；真菌为白色念珠菌。

S5：菌数实验：实验分为紫外线消毒盒试验组和阳性对照组，其中，

紫外线消毒盒试验组为：将上述步骤S4中的染菌物体放入紫外线消毒盒中消毒60s，然后用100ml的0.9％的氯化钠试剂洗脱，吸取1ml至培养皿中，作平板倾注，接种两个平板培养，再平板计数。其中，金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，绿脓假单胞菌培养温度为30℃～37℃培养时间3天；真菌：白色念珠菌培养温度为20℃～25℃培养时间5天。

阳性对照组为：将染菌物体直接置于100ml的0.9％的氯化钠试剂洗脱，吸取1ml至培养皿中，作平板倾注，接种两个平板培养，再平板计数。同样的，金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，绿脓假单胞菌培养温度为30℃～37℃培养时间3天；真菌：白色念珠菌培养温度为20℃～25℃培养时间5天。

同组试验进行三次平行实验，测试三组实验的结果，以三组中杀菌率最低值作为杀菌结果。

S6：结果判定，根据杀菌率的计算公式：

三次平行实验的杀菌率均达到目标判定为合格。

综上，本发明紫外线消毒盒杀菌率验证方法，其先将多种培养基在高温高压蒸汽炉内处理灭菌备用，并制备浓度为0.9％的氯化钠稀释液、洗脱液；再对物体表面进行灭菌为无菌状态；接下来进行菌悬液的制备，然后吸取制备好的菌悬液于已灭菌的物体表面最难杀菌的位置，进行菌片制备；再将染菌物体分别进行紫外线消毒盒试验组和阳性对照组的试验，获取菌数，最后根据杀菌率进行判定是否合格，通过如此杀菌率验证步骤进行，以达到准确高效的验证紫外线消毒盒杀菌率的有益效果。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和替换，这些改进和替换也应视为本发明的保护范围。