阅读说明：本技术 一种从豌豆中提取全蛋白的方法 (Method for extracting whole protein from peas ) 是由 张树成 武世敏 孙钊 于 2020-05-12 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种从豌豆中提取全蛋白的方法,通过将豌豆进行预处理,然后离心分离去除淀粉,得到蛋白浆液；然后对蛋白浆液处理,从中将豌豆蛋白与白蛋白分别提取后混合的方式,得到全蛋白；由于白蛋白中含有较高的含硫氨基酸、苏氨酸、赖氨酸、酪氨酸,将其与豌豆蛋白结合后,填补了豌豆蛋白粉缺乏含硫氨基酸的不足,可以以最佳的配比提供人体所需的氨基酸,能够充分满足人体蛋白质合成时对氨基酸的需求,有效提高了豌豆的利用率,避免资源浪费。(The invention discloses a method for extracting whole protein from peas, which comprises the steps of pretreating peas, and then removing starch through centrifugal separation to obtain protein slurry; then, treating the protein slurry, and respectively extracting pea protein and albumin from the protein slurry and then mixing to obtain total protein; because the albumin contains higher sulfur-containing amino acid, threonine, lysine and tyrosine, after the albumin is combined with the pea protein, the defect that the pea protein powder is lack of sulfur-containing amino acid is overcome, the amino acid required by a human body can be provided according to the optimal proportion, the requirement of the human body on the amino acid during protein synthesis can be fully met, the utilization rate of the pea is effectively improved, and resource waste is avoided.)

一种从豌豆中提取全蛋白的方法

技术领域

本发明属于蛋白质提取技术领域，具体涉及一种从豌豆中提取全蛋白的方法。

背景技术

豌豆是一种优良的植物蛋白资源，豌豆籽粒中营养比较齐全，含量丰富。其基本的组成成分如下：淀粉含量为52％-55％、蛋白质的含量为23％-25％、粗纤维含量为8％-10％，另外还含有丰富的矿物质元素和维生素等。

我国对于豌豆的深加工，主要是利用其中的淀粉制作粉丝，而蛋白一般被用作饲料添加剂，导致产品的附加值低，应用领域较窄，资源浪费严重。豌豆蛋白质占干豌豆的23％-25％，作为一种食用蛋白添加剂，其蛋白质的营养价值主要取决于其中必需氨基酸的含量和比例以及其生物体的生物利用率。

豌豆蛋白在生产过程中，通常使用碱溶酸沉的方法进行提取，但是豌豆中的白蛋白是一种非酸沉蛋白，通常在豌豆豆清水中，在提取过程中不宜提出，随着豌豆豆清水流失。其由于白蛋白的缺失，导致传统的豌豆蛋白粉中蛋白成分不够全面，氨基酸组成失衡。

目前，对于豌豆豆清水处理的方式，即回收分离蛋白，采用等电点酸沉；但是在回收豌豆分离蛋白后，残留的豌豆乳清废水仍含有分子量较小的蛋白质组分存在于其中，不能被有效提取利用，不仅使得豌豆乳清蛋白浪费，造成白蛋白的损失，也会造成环境污染。

国内对于豌豆豆清蛋白的回收处理方法研究较少，现有技术中有采用酶解技术制备提取豌豆蛋白多肽的，首先制备的目标的产物不同，其次如果将酶解技术应用到从豌豆豆清蛋白中提取白蛋白，则会导致蛋白质产生苦味，影响口感，其次，提取出来的蛋白多肽不利于人体吸收利用；而其他的分离纯化乳清蛋白的方法，往往都是从大豆生产废水中提取乳清蛋白，由于初始原料的不同，无法进行技术的直接转用，更无法保证豌豆白蛋白的回收率和纯度。

发明内容

本发明提供一种从豌豆中提取全蛋白的方法，解决背景技术中豌豆蛋白氨基酸组成缺失、白蛋白回收处理利用率低、无法对白蛋白进行目标性提取的问题。

具体技术方案如下：

一种从豌豆中提取全蛋白的方法，包括以下步骤：

将豌豆进行预处理，然后通过离心分离去除淀粉，得到蛋白浆液；

将得到的蛋白浆液经过四级离心分离之后，分别得到豌豆蛋白和豆清水；或将得到的蛋白浆液经过酸沉之后，分别得到豆清水和沉淀物，取沉淀物进行水洗，得到豌豆蛋白；

对豆清水进行处理，得到白蛋白；将得到的豌豆蛋白和白蛋白混合，添加碱性物质调节pH，得到豌豆全蛋白。

优选的，所述预处理包括：将干豌豆进行浸泡后粉碎，然后对粉碎得到的豆汁进行除渣处理；或将豌豆豆皮脱去，并粉碎至200-400目后，将得到的豌豆粉在pH为7-8的条件下进行碱溶，碱溶时间为20min-60min。

优选的，具体步骤为：

浸泡：将干豌豆浸泡；

粉碎：将浸泡后的豌豆进行粉碎；

除渣：将粉碎后的豆汁进行除渣处理；

分离淀粉：将除渣之后的豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆；

四级离心分离：将蛋白原浆，经过四次离心分离，最终得到豌豆蛋白和豌豆豆清水；

控温换热：将豌豆豆清水进行换热处理；

四级膜分离：将换热之后的豌豆豆清水依次经过微滤、纳滤、超滤、二级纳滤步骤，得到白蛋白浆液；

中和：将豌豆蛋白与白蛋白混合，pH调节至6.8-7.2；

杀菌、干燥，即得到豌豆全蛋白。

优选的，具体步骤为：

粉碎：将豌豆豆皮脱去进行粉碎；

碱溶：将豌豆粉浸泡，pH调节至7-8；

分离淀粉：对碱溶之后的豌豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆；

酸沉：蛋白原浆加热，调节pH,离心得到豌豆豆清水和沉淀物；

水洗：取沉淀物加水离心，再取沉淀物，加水稀释，得到豌豆蛋白；

控温换热：将酸沉得到的豌豆豆清水进行换热处理；

四级膜分离：将换热之后的豌豆豆清水依次经过微滤、纳滤、超滤、二级纳滤步骤，得到白蛋白浆液；

中和：将水洗之后得到的豌豆蛋白与四级膜分离得到的白蛋白混合，pH调节至6.8-7.2；

杀菌、干燥，即得到豌豆全蛋白。

优选的，所述浸泡时间为8-10h，温度为24-26℃；所述粉碎过程中，将豌豆粉碎至110-130目。

优选的，所述蛋白浆液经过四级离心分离的具体步骤为：

一级：将蛋白原浆加热到50-60℃，pH4.3--4.8；离心取沉淀物；

二级：沉淀物加热水至干物质6-8％，pH 7.5-8；离心取上清液；

三级：上清液调pH至4.3-4.8，离心取沉淀；

四级：将沉淀物加水稀释后，离心取沉淀，加水稀释至干物质浓度为10-15％，得到豌豆蛋白。

优选的，所述粉碎过程中，将豌豆粉碎至200-400目；所述碱溶过程中，碱溶时间为20min-60min；所述酸沉处理时，蛋白原浆加热到50-60℃，pH调节至4.3-4.8。

优选的，所述控温换热时的温度为40-50℃。

优选的，对豌豆豆清水进行处理得到白蛋白时，包括控温换热和四级膜分离过程，具体参数如下：所述控温换热时的温度为40-50℃；四级膜分离时，微滤膜为10纳米-30微米的碳化硅膜或陶瓷膜；纳滤压力为18-25bar，过滤温度为40-65℃；超滤过程中，采用孔径可隔离分子量为1000-5000道尔顿的超滤膜。

有益效果：

1.本发明得到的全蛋白，通过将豌豆蛋白与白蛋白分别提取后混合的方式，使得全蛋白的氨基酸齐全，可提供人体所需的所有必需氨基酸，能够充分满足人体蛋白质合成时对氨基酸的需求，有效提高了豌豆的利用率，避免资源浪费。

2.对于豌豆蛋白的提取，本发明采用了两种方式，一种是首先将干豌豆浸泡，粉碎后除渣，将除渣之后的豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆，再通过四级离心分离的方式，将蛋白原浆，经过四次离心分离，最终得到豌豆蛋白；四级分离的方式层层递进，能够有效将蛋白原浆中的糖分和盐分以及淀粉分离出去，保证了后续豌豆蛋白的纯度；另一种方式是先将豌豆豆皮脱去，并粉碎，然后将粉碎后的豌豆粉浸泡碱溶，再对碱溶之后的豌豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆，蛋白原浆加热到50-60℃，离心得到豌豆豆清水和沉淀物；然后取沉淀物加水离心，再取沉淀物，加水稀释，得到豌豆蛋白；上述方法将豌豆脱皮干磨成粉后，再浸泡，浸泡和碱溶融为一步，缩短浸泡时间，减少长时间泡豆子形成的发酵味，在保证豌豆蛋白纯度的前提下，使最终得到的豌豆蛋白具有良好的口感。

3.经过本发明得到的白蛋白，含有较高的含硫氨基酸、苏氨酸、赖氨酸、酪氨酸，将其与豌豆蛋白结合后，填补了豌豆蛋白粉缺乏含硫氨基酸的不足，可以以最佳的配比提供人体所需的氨基酸，能够充分满足人体蛋白质合成时对氨基酸的需求；

其中，含硫氨基酸中的胱氨酸可增加机体代谢系统的解毒功能，它辅助胰岛素的供给，也能促进细胞氧化还原，使肝功能旺盛，促进白细胞增生，阻止病原菌发育；苏氨酸是一种重要的营养强化剂，有缓解人体疲劳，促进生长发育的效果；酪氨酸是酪氨酸酶单酚酶的催化底物，是最终形成优黑素和褐黑素的主要原料；赖氨酸含量促进人体生长发育、增强机体免疫力、抗病毒、促进脂肪氧化、缓解焦虑情绪，也能促进某些营养素的吸收，能与一些营养素协同作用，更好的发挥各种营养素的生理功能。

4.在白蛋白提取过程中，微滤之前进行了控温换热，保证豆清水的温度稳定，使其达到进入微滤前的最佳运行温度，为后续有效进行分离奠定基础；微滤步骤对豆清水中离心机未分离干净的大分子蛋白进行进一步的分离，为后续纳滤步骤奠定基础；纳滤时采用纳滤模组，对白蛋白进行进一步分离，同时去除93％-95％的水分，纳滤完之后的白蛋白中仍然含有少量低聚糖；此时再进行超滤步骤将白蛋白和低聚糖分离开，但是此时白蛋白中仍然含有多余的盐分，导致白蛋白纯度较低，再进行二级纳滤，选用卫生级抗污染纳滤膜，加入纳滤时分离出来的清水洗涤，洗脱多余的盐分，洗涤完成后上述清水分离出来，循环使用，经过上述一系列步骤，能够有效回收豌豆豆清水中的小分子量的白蛋白，且纯度较高，避免对豌豆豆清水处理不当造成的环境污染，实现资源再利用。

5.白蛋白提取时通过多种分离和水洗流程，去除豆清水中大分子蛋白，有效的减少了大分子蛋白对后续白蛋白分离工艺的干扰，保证白蛋白的纯度；工艺技术环节采用脱盐工艺，将白蛋白中的盐分通过水洗，纳滤膜分离技术，去除豆清蛋白的酸涩味道；本发明在纳滤时采用纳滤模组，对白蛋白进行进一步分离，同时去除93％-95％的水分，这部分水能够在二次纳滤时再次进行循环利用，减少了污水处理过程，节约能源和水资源。

具体实施方式

以下将结合实施例对本发明进行详细清楚的描述。

本发明公开了一种从豌豆中提取全蛋白的方法，包括以下步骤：以豌豆为原料，进行预处理，然后通过离心分离去除淀粉，得到蛋白浆液；

然后通过两种方式处理，分别得到豌豆蛋白和白蛋白；一种是将得到的蛋白浆液经过四级离心分离之后，分别得到豌豆蛋白和豆清水；另一种是将得到的蛋白浆液经过酸沉之后，分别得到豆清水和沉淀物，取沉淀物进行水洗，得到豌豆蛋白。对豆清水进行处理，得到白蛋白；将得到的豌豆蛋白和白蛋白混合后，添加碱性物质调节pH，得到豌豆全蛋白。

其中，在预处理时，可采用两种方式，对豌豆进行预处理。一种是将干豌豆进行浸泡后粉碎，然后对粉碎得到的豆汁进行除渣处理；另一种是将豌豆豆皮脱去，并粉碎至200-400目后，将得到的豌豆粉在pH为7-8的条件下进行碱溶，碱溶时间为20min-60min。

实施例1：

浸泡：将干豌豆浸泡，浸泡时间为8h，温度为24℃；

粉碎：将浸泡后的豌豆进磋磨机粉碎，粉碎至120目；

离心筛除渣：粉碎后的豆汁用离心筛除渣；将豆皮、纤维组织等分离出去，使得剩下的豆汁中含有较高浓度的淀粉和蛋白；

分离淀粉：将除渣之后的豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆；此时蛋白原浆中干物质的浓度为70％-80％；

四级离心分离：将蛋白原浆经过四次离心分离获得豌豆蛋白和豌豆豆清水；其中，具体步骤如下：

一级：将蛋白原浆加热到55℃，pH4.3；离心取沉淀物；收集上清液，即为豌豆豆清水；

二级：沉淀物加热水至干物质浓度为6-8％，pH7.6；离心取上清液；

三级：上清液调pH至4.5，离心取沉淀；并收集上清液；

四级：将沉淀物加水稀释后，离心取沉淀，加水稀释至干物质浓度为10-15％，得到豌豆蛋白；并收集上清液；

控温换热：将四级分离过程中收集的上清液(即豌豆豆清水)进行换热处理；所述控温换热时的温度为40℃；

四级膜分离：将换热之后的豌豆豆清水依次经过微滤、纳滤、超滤、二级纳滤步骤，得到白蛋白浆液；其中，微滤膜为10纳米的碳化硅膜或陶瓷膜，纳滤压力为25bar，过滤温度为55℃；超滤过程中，采用孔径可隔离分子量为1000-5000道尔顿的超滤膜；

中和：将得到的豌豆蛋白与白蛋白混合，pH调节至7.0，杀菌、干燥后，即得豌豆全蛋白。

实施例2：

浸泡：将干豌豆浸泡，浸泡时间为10h，温度为26℃；

粉碎：将浸泡后的豌豆进磋磨机粉碎，粉碎至125目；

离心筛除渣：粉碎后的豆汁用离心筛除渣；将豆皮、纤维组织等分离出去，使得剩下的豆汁中含有较高浓度的淀粉和蛋白；

分离淀粉：将除渣之后的豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆；此时蛋白原浆中干物质的浓度为70％-80％；

四级离心分离：将蛋白原浆经过四次离心分离获得豌豆蛋白和豌豆豆清水；其中，具体步骤如下：

一级：将蛋白原浆加热到50℃，pH4.8；离心取沉淀物；收集上清液，即为豌豆豆清水；

二级：沉淀物加热水至干物质浓度为6-8％，pH 8；离心取上清液；

三级：上清液调pH至4.6，离心取沉淀；并收集上清液；

四级：将沉淀物加水稀释后，离心取沉淀，加水稀释至干物质浓度为10-15％，得到豌豆蛋白；并收集上清液；

控温换热：将四级分离过程中收集的上清液(即豌豆豆清水)进行换热处理；所述控温换热时的温度为45℃；

四级膜分离：将换热之后的豌豆豆清水依次经过微滤、纳滤、超滤、二级纳滤步骤，得到白蛋白浆液；其中，微滤膜为10纳米-30微米的碳化硅膜或陶瓷膜，纳滤压力为22bar，过滤温度为50℃；超滤过程中，采用孔径可隔离分子量为1000-5000道尔顿的超滤膜；

中和：将得到的豌豆蛋白与白蛋白混合，pH调节至7.2，杀菌、干燥后，即得豌豆全蛋白。

实施例3：

粉碎：将豌豆豆皮脱去，并粉碎至200目；

碱溶：将豌豆粉浸泡，浸泡时间为30min，pH调节至8；

分离淀粉：对碱溶之后的豌豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆；

酸沉：蛋白原浆加热到60℃，离心得到豌豆豆清水和沉淀物；

水洗：取沉淀物加水离心，再取沉淀物，加水稀释至干物质含量为10-15％，得到豌豆蛋白；

控温换热：将酸沉得到的豌豆豆清水进行换热处理；所述控温换热时的温度为45℃；

四级膜分离：将换热之后的豌豆豆清水依次经过微滤、纳滤、超滤、二级纳滤步骤，得到白蛋白浆液；其中，微滤膜为10纳米-30微米的碳化硅膜或陶瓷膜，纳滤压力为21bar，过滤温度为45℃；超滤过程中，采用孔径可隔离分子量为1000-5000道尔顿的超滤膜；

中和：将得到的豌豆蛋白与白蛋白混合，pH调节至6.8，杀菌、干燥后，即得豌豆全蛋白。

实施例4：

粉碎：将豌豆豆皮脱去，并粉碎至300目；

碱溶：将豌豆粉浸泡，浸泡时间为50min，pH调节至7；

分离淀粉：对碱溶之后的豌豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆；

酸沉：蛋白原浆加热到60℃，离心得到豌豆豆清水和沉淀物；

水洗：取沉淀物加水离心，再取沉淀物，加水稀释至干物质含量为10-15％，得到豌豆蛋白；

控温换热：将酸沉得到的豌豆豆清水进行换热处理；所述控温换热时的温度为42℃；

四级膜分离：将换热之后的豌豆豆清水依次经过微滤、纳滤、超滤、二级纳滤步骤，得到白蛋白浆液；其中，微滤膜为10纳米-30微米的碳化硅膜或陶瓷膜，纳滤压力为20bar，过滤温度为53℃；超滤过程中，采用孔径可隔离分子量为1000-5000道尔顿的超滤膜；

中和：将得到的豌豆蛋白与白蛋白混合，pH调节至7.2，杀菌、干燥后，即得豌豆全蛋白。

其中，所述实施例1-4中，白蛋白的具体制备方法如下：

控温换热：豆清水进行换热处理，所述控温换热时的温度为40-50℃；

微滤：将换热处理后的豆清水进行微滤处理，所述微滤过程中采用的膜是孔径为10纳米-30微米的碳化硅膜；隔离豆清水中离心机未分离干净的大分子蛋白，截留液去除，使得白蛋白和低聚糖通过。

纳滤：采用纳滤模组，调节系统压力为18-25bar，过滤温度为60℃，去除95％的水分；

超滤：采用可隔离分子量为1000-5000道尔顿的超滤膜，经过8次洗脱分离，将白蛋白和低聚糖分离开，得到蛋白含量在干基80％-90％的白蛋白和干物7％-30％的低聚糖。

二级纳滤：选用卫生级抗污染纳滤膜，加入纳滤后得到的95％的清水洗涤粗品白蛋白，洗涤完成后去除用于洗涤的清水，留用截留液，得到白蛋白浆液。

实验数据：

一、白蛋白的氨基酸检测结果：

测定本发明实施例1和实施例3中得到的白蛋白氨基酸含量，结果如下表所示。

由以上结果可以看出，实施例1中的白蛋白的氨基酸总和为87.16g/100g，实施例3中白蛋白的氨基酸总和为87.6g/100g，均高于豌豆蛋白的氨基酸含量，这表明经过本发明的提取方法得到的白蛋白氨基酸种类齐全，含有多种氨基酸，营养价值高。

且从对比数据可以看出，实施例1和实施例3中白蛋白的EAA/TAA(必需氨基酸占总氨基酸的比值)为0.41，豌豆蛋白的EAA/TAA为0.44，接近并大于WHO/FAO/NUU推荐的0.4；实施例1和实施例3中白蛋白EAA/NEAA(必需氨基酸和非必需氨基酸的比值)为0.70，豌豆蛋白的EAA/NEAA为0.78，均大于WHO/FAO/NUU推荐的0.6。因此，从EAA/TAA和EAA/NEAA可以看出，白蛋白与豌豆蛋白均属于优质蛋白粉。

在必需氨基酸中，白蛋白的含硫氨基酸含量(4.97g/100g)远高于豌豆蛋白(1.23g/100g)。普通的豌豆蛋白缺乏含硫氨基酸，而白蛋白的胱氨酸含量高，使含硫氨基酸的含量高于WHO/FAO/NUU推荐的人体氨基酸模式，填补了豌豆蛋白粉缺乏含硫氨基酸的不足。胱氨酸可增加机体代谢系统的解毒功能。此外，它辅助胰岛素的供给，也能促进细胞氧化还原，使肝功能旺盛，促进白细胞增生，阻止病原菌发育。

白蛋白的苏氨酸含量(5.23g/100g)大于豌豆蛋白(3.27g/100g)，且高WHO/FAO/NUU推荐的人体氨基酸模式(3.4)，苏氨酸主要用于医药、化学试剂、食品强化剂、饲料添加剂等方面，苏氨酸是一种重要的营养强化剂，有缓解人体疲劳，促进生长发育的效果。

白蛋白的赖氨酸含量(8.85g/100g)大于普通蛋白粉(6.85g/100g)，且高于WHO/FAO/NUU推荐人体氨基酸模式(5.8)，赖氨酸在促进人体生长发育、增强机体免疫力、抗病毒、促进脂肪氧化、缓解焦虑情绪等方面都具有积极的营养学意义，可用于健身增肌；同时也能促进某些营养素的吸收，能与一些营养素协同作用，更好的发挥各种营养素的生理功能。

白蛋白的酪氨酸含量(3.62g/100g)大于普通蛋白粉(3.27g/100g)，酪氨酸是酪氨酸酶单酚酶的催化底物，是最终形成优黑素和褐黑素的主要原料。

二、豌豆全蛋白氨基酸含量测定

分别将实施例1及实施例3得到的白蛋白和豌豆蛋白按照1:3的比例混合后，得到豌豆全蛋白，对豌豆全蛋白进行氨基酸含量检测，并进行氨基酸评分，结果如下表所示。

实施例1全蛋白氨基酸含量及评分结果

实施例3全蛋白氨基酸含量及评分结果

从上表中可以看出，经过本发明制备得到的豌豆全蛋白，其氨基酸含量与人体必需氨基酸模式中的含量相近，可以达到较高的氨基酸评分，以最佳的配比提供人体所需的氨基酸，能够充分满足人体蛋白质合成时对氨基酸的需求。

三、感官测评

随机选取50名感官测评者，分别对实施例1-4中得到的豌豆蛋白进行感官测定，将豌豆蛋白用水冲泡后进行品尝，按照下表的评分标准进行打分，结果取平均值。

分数	项目
		1	发酵味严重，且伴有苦味
2-5	有明显发酵味
		6-9	有轻微发酵味
10	无发酵味

结果如下：

组数	分数
		实施例1	7.4
实施例2	7.8
		实施例3	9.5
实施例4	9.3

从上表可以看出，实施例1和实施例2中得到的豌豆蛋白，具有轻微的发酵味，而实施例3和实施例4得到的豌豆蛋白，基本没有发酵味和其他异味，这表明，通过将将豌豆豆皮脱去，并粉碎至200-400目，然后将豌豆粉浸泡碱溶的方式，缩短了浸泡时间，能够有效减少长时间泡豆子形成的发酵味。

四、白蛋白的回收率、纯度

分别对实施例1-4提取的白蛋白进行回收率、纯度检测，纯度检测采用常规凯氏定氮法进行测定。检测结果如下表所示。

从上表中可以看出，经过本发明的方法提取得到的白蛋白，纯度较高，在89％-93％之间，且本发明对豌豆豆清水中的白蛋白回收率在87％-89％，这表明本发明的提取方法能够有效回收豌豆豆清水中的小分子量的白蛋白。

五、豌豆蛋白回收率、纯度检测

分别对实施例1-4提取的豌豆蛋白进行回收率、纯度检测，纯度检测采用常规凯氏定氮法进行测定。检测结果如下表所示。

从上表中可以看出，经过本发明的方法提取得到的豌豆蛋白，回收率较高，在78％-80％之间，且具有较高的纯度，在82％-88％之间；同时，实施例1和实施例2的豌豆蛋白的纯度略高于实施例3和实施例4，这表明将蛋白原浆经过四次离心分离的方式，能够有效将豌豆蛋白提取出来，将杂质有效分离，提高了豌豆蛋白的纯度。

其中，对于豌豆蛋白的提取，本发明采用了两种方式，一种是首先将干豌豆浸泡，粉碎后除渣，将除渣之后的豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆，再通过四级离心分离的方式，将蛋白原浆，经过四次离心分离，最终得到豌豆蛋白；四级分离的方式层层递进，能够有效将蛋白原浆中的糖分和盐分以及淀粉分离出去，保证了后续豌豆蛋白的纯度；

另一种方式是先将豌豆豆皮脱去，并粉碎，然后将粉碎后的豌豆粉浸泡碱溶，再对碱溶之后的豌豆汁进行离心处理，分离出淀粉，得到蛋白原浆，蛋白原浆加热到50-60℃，离心得到豌豆豆清水和沉淀物；然后取沉淀物加水离心，再取沉淀物，加水稀释，得到豌豆蛋白；上述方法将豌豆脱皮干磨成粉后，再浸泡，浸泡和碱溶融为一步，缩短浸泡时间，减少长时间泡豆子形成的发酵味，在保证豌豆蛋白纯度的前提下，使最终得到的豌豆蛋白具有良好的口感。

其中，对于白蛋白的提取，在微滤之前进行了控温换热，保证豆清水的温度稳定，使其达到进入微滤前的最佳运行温度，为后续有效进行分离奠定基础；微滤步骤对豆清水中离心机未分离干净的大分子蛋白进行进一步的分离，为后续纳滤步骤奠定基础，如果没有微滤步骤，后续的纳滤膜之后很快被堵死，使用寿命降低，通量下降，导致最终得到的白蛋白纯度下降，产出率降低；纳滤时采用纳滤模组，对白蛋白进行进一步分离，同时去除93％-95％的水分，这部分水能够在二次纳滤时再次进行循环利用，不必进行污水处理，节约水资源，纳滤完之后的白蛋白中仍然含有少量低聚糖；此时再进行超滤步骤将白蛋白和低聚糖分离开，但是此时白蛋白中仍然含有多余的盐分，导致白蛋白纯度较低，再进行二级纳滤，选用卫生级抗污染纳滤膜，加入纳滤时分离出来的清水洗涤，洗脱多余的盐分，洗涤完成后上述清水分离出来，循环使用；本方案通过多种分离和水洗流程，去除豆清水中大分子蛋白，有效的减少了大分子蛋白对后续白蛋白分离工艺的干扰，可以保证白蛋白的纯度；工艺技术环节采用脱盐工艺，将白蛋白中的盐分通过水洗，纳滤膜分离技术，去除豆清蛋白的酸涩味道，保证白蛋白的口感；在控制白蛋白分子量的分离技术上，同样采用超滤分离系统，使得白蛋白产品分子量相对平均，均匀可控。

显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种非实质性的改进，或未经改进将本发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本发明保护范围之内。