阅读说明：本技术 氨代谢促进剂 (Ammonia metabolism promoter ) 是由 莲村卓广 陈姝 太田宣康 纲川水木 峰岸庆彦 于 2018-05-31 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种促进体内的氨代谢的原料、以及具有优异的氨代谢改善作用、对持久力提高和抗疲劳有效的原料。以儿茶素类为有效成分的氨代谢促进剂。以儿茶素类为有效成分的高氨血症、肝性脑病或慢性疲劳综合征的预防或改善剂。以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分的氨代谢促进剂、持久力提高剂和抗疲劳剂。(The present invention provides a raw material for promoting ammonia metabolism in vivo and a raw material having an excellent ammonia metabolism-improving effect and being effective for improving endurance and resisting fatigue. Ammonia metabolism promoter containing catechin as effective component. A preventive or ameliorating agent for hyperammonemia, hepatic encephalopathy or chronic fatigue syndrome, which contains catechins as the active ingredient. Ammonia metabolism promoter, endurance improver and antifatigue agent containing catechin, citrulline and arginine as effective components are provided.)

氨代谢促进剂

技术领域

本发明涉及一种促进体内的氨代谢的原料。另外，本发明涉及一种促进体内的氨代谢、发挥持久力提高作用和抗疲劳作用的原料。

背景技术

体内的氨主要在蛋白质代谢或运动导致的肌肉的分解等中氨基酸的异化的过程中产生。氨抑制从丙酮酸向乙酰CoA的氧化而引起疲劳(参照非专利文献1)。另外，已知氨造成神经系的功能降低而成为中枢性疲劳的原因，或促进肌肉中的乳酸的蓄积而促进肌肉疲劳(专利文献1)，以及高氨血症引起脑障碍等各种各样的障碍(非专利文献2)。可以认为慢性肝脏病患者中的氨的蓄积在肝性脑病及多脏器衰竭(呼吸衰竭、心血管衰竭、肾衰竭)的发展中发挥重要的作用(专利文献2)。

体内的氨通过肝脏的尿素循环而转变为无毒的尿素，排出至尿中。精氨酸、鸟氨酸和瓜氨酸参与将氨转变为无毒的尿素的肝脏的尿素循环。报道了利用作为参与尿素循环的氨基酸的鸟氨酸、瓜氨酸或精氨酸来抑制血氨的上升(专利文献3、4以及非专利文献1)。在生物体内，从鸟氨酸合成瓜氨酸，瓜氨酸转变为精氨酸。有利用鸟氨酸来抑制血氨的上升或疲劳改善的报道(参照专利文献3)。另外，报道了通过瓜氨酸摄取来使血中精氨酸上升、或改善脑疲劳(专利文献4、5)。

持久力不仅在运动竞技中是必要，而且在我们的日常生活中在走路、跑步等简单动作或重复进行肌肉劳作的劳动中也是必要而不可或缺的。持久力的降低，特别是对于高龄者来说，成为日常动作的困难的原因，对生活的质量(quality of life：QOL)带来很大的不良影响。在持久力的提高方面，广泛认为运动训练是有效的，但由于难以保持时间或维持动机，并且对于高龄者来说担心受伤，因此，通过训练来维持或提高持久力决非是容易的。

儿茶素目前作为具有防止持久力提高或疲劳的作用的成分被报道(专利文献6、7)。但是，对于氨代谢没有关于儿茶素的作用的报道。

作为其它的具有持久力提高或防止疲劳的作用的成分，报道了各种氨基酸，例如鸟氨酸(专利文献3)、瓜氨酸(非专利文献1)、瓜氨酸和精氨酸的并用(专利文献4)、精氨酸、鸟氨酸和瓜氨酸的并用(非专利文献3)等。

专利文献1：日本特开2000-239179号公报

专利文献2：日本特开2012-246294号公报

专利文献3：日本特开2011-132174号公报

专利文献4：国际公开公报第2009/048148号

专利文献5：日本特开2013-060406号公报

专利文献6：日本特开2005-089384号公报

专利文献7：日本特开2008-031148号公报

非专利文献1：Takeda et al,J Nutr Sci Vitaminol,2011,57:246-250

非专利文献2：Walker,Diabetes,Obesity and Metabolism,2009,11:823-835

非专利文献3：Meneguello et al,Cell Biochem Funct,2003,21:85-91

发明内容

本发明提供一种以儿茶素类为有效成分的氨代谢促进剂。

另外，本发明提供一种以儿茶素类为有效成分的高氨血症的预防或改善剂。

另外，本发明提供一种以儿茶素类为有效成分的肝性脑病的预防或改善剂。

另外，本发明提供一种以儿茶素类为有效成分的慢性疲劳综合征的预防或改善剂。

进而，本发明提供一种以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分的氨代谢促进剂，其。

进而，本发明提供一种以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分的持久力提高剂。

进而，本发明提供一种以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分的抗疲劳剂。

附图说明

图1是儿茶素类对肝脏原代培养细胞的尿素产生的影响。数据为AVG±SEM(N＝3-6)。**p＜0.01(student's t-test)，对照：对照组；儿茶素：儿茶素类刺激组。

图2是儿茶素类对肝脏原代培养细胞中氨代谢相关因子的基因表达的影响。数据为AVG±SEM(N＝4)，*p＜0.05(student's t-test)，对照：对照组；儿茶素：儿茶素类刺激组。

图3是儿茶素类摄取小鼠的肝脏中氨代谢相关因子的基因表达。数据为AVG±SEM(N＝8)，**p＜0.01，***p＜0.001(student's t-test)，对照：对照食物摄取组；儿茶素：儿茶素类食摄取组。

图4是儿茶素类对肝脏氨代谢带来的影响。数据为AVG±SEM(N＝8)，**p＜0.01(student's t-test)，对照：对照组；儿茶素：儿茶素类给药组。

图5是儿茶素类对血氨浓度带来的影响。数据为AVG±SEM(N＝6-8)，对照：对照组；儿茶素：儿茶素类给药组。

图6是瓜氨酸和精氨酸对肝细胞的尿素产生带来的影响。Arg+Cit：精氨酸+瓜氨酸；Cit：瓜氨酸单独。数据为AVG±SEM(N＝3)，***p＜0.001(Dunnet test相对于对照)。

图7是儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸对持久力带来的影响。Cat：儿茶素类单独；Cat+Arg/Cit：儿茶素类+精氨酸+瓜氨酸；Cat+Cit：儿茶素类+瓜氨酸。数据为AVG±SEM(N＝9-10)，*p＜0.05(Dunnettest相对于对照)。

图8是儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸对血氨浓度带来的影响。Cat；儿茶素类单独；Cat+Arg/Cit：儿茶素类+精氨酸+瓜氨酸。数据为AVG±SEM(N＝6-8)，*p＜0.05(Fisher's LSD相对于对照)。

具体实施方式

(1.定义)

本说明书中所引用的全部的专利文献、非专利文献、以及其它的刊行物其整体在本说明书中作为参考被引用。

本说明书中，“非治疗性”是不包括医疗行为、即不包括对人体进行手术、治疗或诊断的方法的概念，更具体而言，是不包括医生、医疗从业者或者接受医生的指示的人对人体实施手术、治疗或诊断的方法的概念。

本说明书中，“预防”是指个体的疾病或症状的发病的防止、抑制或延迟、或者使个体的疾病或症状的发病的危险性降低。另外，本说明书中，“改善”是指疾病或症状的好转、疾病或症状的恶化的防止、抑制或延迟、或者疾病或症状的发展的逆转、防止、抑制或延迟。

本说明书中，“运动”是指例如运动、训练、有氧运动等运动比赛(狭义的运动)、以及包括伴有肌肉劳作的劳动、日常的动作等广义的身体运动。本说明书中，“运动”可以指用于运动员或进行狭义的运动的人的情况、优选狭义的运动，另一方面，“运动”也可以指用于中高年、高龄者、病弱者、患病者、处于来自疾病的恢复期的人的情况、优选伴有肌肉劳作的劳动或日常的动作。

本说明书中，“持久力”是指对于上述“运动”的持久力，“持久力提高”是包括增进持久力和抑制持久力的降低的概念。另外，本说明书中，“抗疲劳”是指抑制由于上述“运动”而产生的疲劳或促进其恢复。

本说明书中，“儿茶素类”是指选自儿茶素(C)、没食子儿茶素(GC)、儿茶素没食子酸酯(Cg)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCg)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECg)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCg)中的至少1种。其中，优选选自Cg、EGC和ECg中的至少1种，更优选选自Cg和EGC中的至少1种。因此，本发明中所使用的儿茶素类优选含有选自Cg、EGC和ECg中的至少1种，更优选含有选自Cg和EGC中的至少1种，进一步优选为选自Cg、EGC和ECg中的至少1种，进一步优选为选自Cg和EGC中的至少1种。或者，作为本发明中所使用的儿茶素类的优选例，可以列举含有Cg和EGC的物质、含有Cg、EGC和ECg的物质、Cg和EGC的组合、Cg、EGC和ECg的组合、以及C、GC、Cg、GCg、EC、EGC、ECg和EGCg的组合。

儿茶素类能够从由茶(Camellia)属、例如C.sinensis var.sinensis、C.sinensisvar.assamica、薮北种、或这些杂交种得到的叶子所制造的茶叶用水或热水、根据情况在其中添加提取助剂来提取。该茶叶包括：(1)煎茶、番茶、玉露、碾茶、釜炒茶等绿茶的茶叶；(2)总称为乌龙茶的铁观音、色种、黄金桂、武夷岩茶等半发酵茶的茶叶；(3)被称为红茶的大吉岭、乌巴茶、祁门茶等发酵茶的茶叶。来自该茶叶的儿茶素类的提取能够通过搅拌提取等通常的方法来进行。可以在提取用的水或热水中预先添加抗坏血酸钠等有机酸或有机酸盐类。根据需要，可以在提取中并用一边煮沸脱气或通入氮气等不活泼气体来除去溶存氧、一边在所谓的非氧化的气氛下提取的方法。

或者，也可以不采用从茶叶中直接提取儿茶素类的方法，而将茶提取物(包括其浓缩物或精制物)作为该儿茶素类使用。茶提取物的浓缩物是指例如将从茶叶利用热水或水溶性有机溶剂提取得到的提取物进行浓缩得到的产物，茶提取物的精制物是指例如使用溶剂或柱等对该提取物精制得到的产物。作为该茶提取物的浓缩物或精制物的例子，可以列举通过日本特开昭59-219384号、日本特开平4-20589号、日本特开平5-260907号、日本特开平5-306279号等中详细地例示的方法制得的产物。茶提取物及其浓缩物或精制物可以使用市售品，作为其例子，可以列举三井农林(株)“POLYPHENON”、(株)伊藤园“TEAFLAN”、太阳化学(株)“SUNPHENON”、Suntory(株)“SUNOOLONG”等。作为茶提取物的浓缩物或精制物的形态，可以列举固体、液体、浆状、以及将这些溶解或稀释于水、碳酸水或用通常的步骤提取的茶类提取液等，没有特别限定。

进而，本发明中的儿茶素类可以为茶叶以外的其它原料来源、例如来自葡萄及其加工品(葡萄酒、果汁类等)或者可可豆及其加工品、或者化学合成品。

本发明的儿茶素类优选以茶提取物的浓缩物或精制物的形态使用，更优选以绿茶提取物的浓缩物或精制物的形态使用。

在本发明中，瓜氨酸和精氨酸均能够以游离体或其盐的形态使用。瓜氨酸和精氨酸可以为L-体、D-体、DL-体、及它们的混合物的任一种，优选为L-体。

作为瓜氨酸和精氨酸的盐，可以列举酸加成盐、金属盐、铵盐、有机胺加成盐、氨基酸加成盐等。作为该酸加成盐，可以列举盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等无机酸盐、以及乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、乳酸盐、α-酮戊二酸盐、葡糖酸盐、辛酸盐等有机酸盐。作为该金属盐，可以列举钠盐、钾盐等碱金属盐、镁盐、钙盐等碱土金属盐、铝盐、锌盐等。作为该铵盐，可以列举铵、四甲基铵等盐。作为该有机胺加成盐，可以列举吗啉、哌啶等盐。作为该氨基酸加成盐，可以列举甘氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸等盐。

该瓜氨酸和精氨酸的游离体或这些盐能够通过从含有这些物质的动植物分离精制的方法、化学合成、发酵生产等来得到。或者也可以购入市售品。

(2.由儿茶素类引起的氨代谢促进)

在一个方式中，本发明涉及提供一种具有促进体内的氨代谢的作用的原料。本发明的发明人深入研究的结果发现：儿茶素类具有优异的体内氨代谢促进作用。根据本发明，儿茶素类能够促进促进体内的氨代谢、改善由于高氨血症、肝性脑病、慢性疲劳综合征等氨的过量蓄积而产生的疾病或症状。

如后述的实施例所示，儿茶素类使肝脏细胞中的氨代谢相关因子的基因表达增强，使尿素产生量增加(参照图1～3)。另外，根据儿茶素类的摄取，血中和肝脏内氨浓度降低(参照图4、5)。因此，根据本发明，儿茶素类可以用于体内的氨代谢的促进。

本发明的儿茶素类用于氨代谢促进的用途可以包括治疗性的用途和非治疗性的用途。例如，作为非治疗性的用途，可以列举对于由氨的蓄积导致的伴随神经系的功能降低的中枢性疲劳(专利文献1参照)的抑制、进而由该中枢性疲劳导致的睡意或倦怠感的抑制的应用。另外，例如作为非治疗性的用途，可以列举为了对他人作为非医疗行为投予或摄取儿茶素类，主张上述中枢性疲劳抑制、睡意抑制或倦怠感抑制等效果而提供儿茶素类。

作为治疗性的用途，可以列举慢性疲劳综合征、高氨血症、肝性脑病等对由于氨的过量蓄积而产生的疾病或症状的预防或改善的应用。高氨血症引起呼吸性碱中毒(Respiratory alkalosis)、口齿不清(Slurred speech)、颤抖(Tremors)、衰弱(Weakness)、肌张力的增加或降低(Increased or decreased muscle tone)、运动失调(Ataxia)、低温症(Hypothermia)、痫性发作(Seizure)、脑水肿(Brain oedema)、昏迷(Coma)、脑干受压(Brain stem compression)、伴有头痛的错乱(Confusion withheadache)、恶心(Nausea)、呕吐(Vomiting)、亢奋(Agitation)、妄想和幻觉(Delusionsand delirium)、过敏(irritability)、攻击性(Aggression)、多动、怪异或自残行为(Hyperactive,bizarre orself-injurious behavior)、认知障碍(Cognitive deficits)、蛋白质厌恶(Protein aversion)、厌食(Anorexia)、生长迟缓(Delayed growth)等各种各样的状态。因此，本发明的高氨血症的预防或改善可以包括上述所列举的因高氨血症而引起的状态的预防或改善。

因此，在一个方式中，本发明提供一种以儿茶素类为有效成分的氨代谢促进剂。另外，本发明提供一种以儿茶素类为有效成分的高氨血症的预防或改善剂。另外，本发明提供一种以儿茶素类为有效成分的肝性脑病的预防或改善剂。另外，本发明提供一种以儿茶素类为有效成分的慢性疲劳综合征的预防或改善剂。

在其它方式中，本发明提供一种儿茶素类用于氨代谢促进剂的制造的用途。另外，本发明提供一种儿茶素类用于高氨血症、肝性脑病或慢性疲劳综合征的预防或改善剂的制造的用途。

在一个实施方式中，该本发明的剂可以本质上由儿茶素类构成。在其它一个实施方式中，该本发明的剂可以为至少含有儿茶素类的组合物。

另外，在其它方式中，本发明提供一种儿茶素类用于氨代谢促进的用途。另外，本发明提供一种儿茶素类用于高氨血症、肝性脑病或慢性疲劳综合征的预防或改善的用途。

进而，在其它方式中，本发明提供一种用于在氨代谢促进中使用的儿茶素类。另外，本发明提供一种用于在高氨血症、肝性脑病或慢性疲劳综合征的预防或改善中使用的儿茶素类。

在本发明中，儿茶素类可以对人和非人动物的任一种使用。作为非人动物，可以列举非人哺乳动物、两栖类和鱼类，作为非人哺乳动物，例如可以列举类人猿、其它灵长类、小鼠、大鼠、马、牛、猪、羊、狗、猫、仓鼠和伴生动物等。

此外，在其它方式中，本发明提供一种对象的氨代谢促进方法。另外，本发明提供一种对象的高氨血症的预防或改善方法。另外，本发明提供一种对象的肝性脑病的预防或改善方法。另外，本发明提供一种对象的慢性疲劳综合征的预防或改善方法。该方法包括对对象以有效量投予儿茶素类的步骤。在优选的实施方式中，投予为口服给药。

作为适用该本发明的方法的对象的例子，可以列举需要促进氨代谢、预防或改善高氨血症、肝性脑病或慢性疲劳综合征、抑制因氨蓄积导致的伴随神经系的功能降低的中枢性疲劳、或者抑制由于该中枢性疲劳导致的睡意或倦怠感等的上述人和非人动物。

作为该对象的进一步的例子，可以列举需要预防或改善上述的因高氨血症而引起的症状、例如呼吸性碱中毒(Respiratory alkalosis)、口齿不清(Slurred speech)、颤抖(Tremors)、衰弱(Weakness)、肌张力的增加或降低(Increased or decreased muscletone)、运动失调(Ataxia)、低温症(Hypothermia)、痫性发作(Seizure)、脑水肿(Brainoedema)、昏迷(Coma)、脑干受压(Brain stem compression)、伴有头痛的错乱(Confusionwith headache)、恶心(Nausea)、呕吐(Vomiting)、亢奋(Agitation)、妄想和幻觉(Delusions and delirium)、过敏(irritability)、攻击性(Aggression)、多动、怪异或自残行为(Hyperactive,bizarre or self-injurious behavior)、认知障碍(Cognitivedeficits)、蛋白质厌恶(Protein aversion)、厌食(Anorexia)、生长迟缓(Delayedgrowth)等的上述人和非人动物。

作为该对象的进一步的例子，可以列举需要预防或改善伴有血氨浓度的上升的症状或状态、例如口齿不清、无力、昏迷、意识障碍、视力不清、发育障碍、蛋白质诱导性的呕吐、婴幼儿中的哺乳力降低等的上述人和非人动物。

或者，本发明的氨代谢促进方法可以为体外方法，作为适用该体外方法的对象，可以列举源自上述人或非人动物的肝脏组织和培养肝细胞(例如肝脏原代培养细胞)等。

该本发明的方法中给药的有效量可以为能够实现对象的氨代谢促进的量。氨代谢水平能够通过测定对象的血氨浓度或尿素产生量来进行评价。例如，有效量可以为使投予了儿茶素类的组的氨代谢水平与未给药组相比在统计学上显著地上升的量。另外，例如有效量可以为使投予了儿茶素类的个体组的血氨浓度降低至未给药组的90％以下、优选80％以下的量。另外，例如，有效量可以为在培养肝细胞(例如肝脏原代培养细胞)中使儿茶素类给药组的尿素产生量相对于未给药组在统计学上显著地上升、或上升至未给药组的120％以上、优选130％以上的量。

或者，氨代谢水平能够通过测定肝脏的氨代谢相关因子的表达量来进行评价。作为氨代谢相关因子，可以列举选自NAGS(N-acetylglutamate synthase，N-乙酰谷氨酸合成酶)、CPS1(Carbamoyl phosphate synthase-1，氨基甲酰磷酸合成酶-1)、Otc(Ornithinetranscarbamoylase，鸟氨酸氨基甲酰转移酶)、ASS(Argininosuccinate synthase，精氨基琥珀酸合成酶)、ASL(Argininosuccinate lyase，精氨基琥珀酸裂解酶)和Arg1(Arginase-1，精氨酸酶-1)中的至少1个。上述的因子是与肝脏的氨代谢有关的酶，其表达量的增加促进肝脏的氨代谢。上述的因子的表达量例如能够通过利用实时PCR测定该因子的基因(mRNA)的表达量等公知的方法来进行测定。因此，在一个实施方式中，本发明的方法中的给药的有效量可以为使肝脏组织或培养肝细胞(例如肝脏原代培养细胞)中的氨代谢相关因子的表达量相对于未给药组在统计学上显著地增加的量。

在本发明中，儿茶素类能够作为用于对医药品、准医药品(quasi-drug)或饮食品(包含非人动物用饮食品)等赋予氨代谢促进的功能的有效成分、或作为用于赋予高氨血症、肝性脑病、慢性疲劳综合征等因氨的过量蓄积而产生的疾病或症状的预防或改善功能的有效成分使用。

该医药品(也包括准医药品)是用于氨代谢促进、或用于预防或改善高氨血症、肝性脑病、慢性疲劳综合征等因氨的过量蓄积而产生的疾病或症状的医药品，将儿茶素类作为用于该功能的有效成分含有。进而，该医药品中，可以以不丧失该有效成分的功能的程度根据需要含有药学上能够接受的载体、或其它有效成分、药理成分等。

该医药品(也包括准医药品)的给药方式可以为口服给药和非口服给药的任一种，优选口服给药。该医药品的剂形只要是能够口服或非口服地给药的剂形即可，没有特别限定，例如，可以为注射剂、栓剂、吸入剂、经皮吸收剂、各种外用剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液剂、糖浆剂等任一种，另外，这样的各种剂形的制剂能够通过将儿茶素类与药学上能够接受的载体(例如赋形剂、结合剂、增量剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂、分散剂、缓冲剂、保存剂、矫味剂、香料、被膜剂、稀释剂等)、其它药效成分等适当组合，按照常规方法来制备。

该饮食品是用于提供氨代谢促进、因氨蓄积导致的伴随神经系的功能降低的中枢性疲劳的抑制、或由该中枢性疲劳导致的睡意或倦怠感的抑制等功能的饮食品，将儿茶素类作为用于该功能的有效成分含有。在该饮食品中，包括将氨代谢促进、中枢性疲劳的抑制、睡意抑制、倦怠感抑制等功能作为概念、根据需要表示了该主旨的病人用饮食品、以及营养功能饮食品、特定保健用饮食品、显示功能性的饮食品等保健功能饮食品。

该饮食品的形态可以为固体、半固体或液体状(例如饮料)。作为饮食品的例子，可以列举面包类、面类、饭类、饼干等点心类、果冻类、乳制品、汤类、冷冻食品、即食食品、淀粉加工制品、加工鱼肉制品、其它加工食品、调味料、营养辅助食品、茶或咖啡饮料、果实饮料、碳酸饮料、果冻状饮料等饮料、以及这些的原料。或者，该饮食品可以是具有片剂、胶囊、颗粒、粉末、液剂、糖浆等口服给药制剂的形态的补充剂。

该饮食品能够通过将儿茶素类与任意的饮食品材料或饮食品中能够接受的添加物(例如溶剂、软化剂、油、乳化剂、防腐剂、香科、甜味料、稳定剂、着色剂、紫外线吸收剂、抗氧化剂、保湿剂、增稠剂、固着剂、分散剂、湿润剂等)适当组合、按照常规方法来制备。

该医药品(也包括准医药品)中的儿茶素类的含量没有特别限定，优选为0.01质量％以上，更优选为0.05质量％以上，进一步优选为0.1质量％以上，且优选为10质量％以下，更优选为5质量％以下，进一步优选为2.5质量％以下，更加优选为1质量％以下。进而，作为该含量的例子，可以列举0.01～10质量％、0.01～5质量％、0.01～2.5质量％、0.01～1质量％、0.05～10质量％、0.05～5质量％、0.05～2.5质量％、0.05～1质量％、0.1～10质量％、0.1～5质量％、0.1～2.5质量％、以及0.1～1质量％。

该饮食品中的儿茶素类的含量没有特别限定，优选为0.01质量％以上，更优选为0.05质量％以上，进一步优选为0.1质量％以上，且优选为5质量％以下，更优选为2.5质量％以下，进一步优选为1质量％以下。进而，作为该含量的例子，可以列举0.01～5质量％、0.01～2.5质量％、0.01～1质量％、0.05～5质量％、0.05～2.5质量％、0.05～1质量％、0.1～5质量％、0.1～2.5质量％、以及0.1～1质量％。

在本发明中，儿茶素类的给药量和给药计划按照对象的种类、体重、性别、年龄、状态、或其它的因素由本领域技术人员适当确定即可。口服给药的情况下，本发明的儿茶素类的成人1人每1天的给药量优选为100～3000mg/60kg体重，更优选为250～2000mg/60kg体重，进一步优选为250～1000mg/60kg体重。优选将上述的用量例如分为1天1次、或1天2次或3次以上给药。

(3.由儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的并用得到的氨代谢促进和持久力提高)

在其它一个方式中，本发明涉及提供一种具有优异的氨代谢促进作用、持久力提高和对抗疲劳有效的原料。本发明的发明人发现，通过并用儿茶素类与瓜氨酸和精氨酸，与单独使用儿茶素类或仅并用瓜氨酸和精氨酸的情况相比，可得到显著高的氨代谢促进作用和持久力提高作用。本发明的儿茶素类与瓜氨酸和精氨酸的并用促进体内的氨代谢，从而得到疲劳的减轻或持久力的提高。进而，根据本发明的该并用，能够提高苦恼于持久力的降低或疲劳的病弱者或中高年、高龄者、或需要提高运动功能的人(例如运动员)等的运动的持久力，或使因运动导致的疲劳减轻。

在本发明中，通过并用儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸这三种成分，与各自单独应用、或仅瓜氨酸和精氨酸的并用的情况相比，实现显著高的氨代谢促进作用和持久力提高作用。在本发明中，儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸这三种成分只要能够在生物体内协同作用即可，可以作为含有这三种成分的一个组合物同时给药，或者也可以分别地投予各成分。

因此，在一个方式中，本发明提供一种以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分的氨代谢促进剂。另外，本发明提供一种以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分的持久力提高剂。另外，本发明提供一种以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分的抗疲劳剂。

在其它方式中，本发明提供儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于氨代谢促进剂、持久力提高剂、或抗疲劳剂的制造的用途。

在优选的实施方式中，该本发明的氨代谢促进剂、持久力提高剂和抗疲劳剂为至少含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的3成分的组合物。在一个实施方式中，该本发明的剂可以本质上由儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸构成。

另外，在其它方式中，本发明提供儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于氨代谢促进、持久力提高、或抗疲劳的用途。在优选的实施方式中，该儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸作为含有这些物质的组合物被使用。

在另外的其它方式中，本发明提供一种含有用于在氨代谢促进、持久力提高、或抗疲劳中使用的儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的组合物。

该本发明的儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的3成分的用途可以包括治疗性的用途和非治疗性的用途。作为非治性疗的用途，例如，可以列举出于得到由日常生活中的身体活动导致的疲劳的减轻、伴有肌肉劳作的劳动中的持续性提高或疲劳减轻、狭义的运动时的持久力提高、从狭义的运动中或其后的疲劳的恢复促进等健康增进效果的目的而作为非医疗行为投予或摄取儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸。另外，例如，作为非治疗性的用途，可以列举为了对他人作为非医疗行为投予或使其摄取儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸，主张上述健康增进效果的目的而提供儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸。

作为治疗性的用途，可以列举适用于慢性疲劳综合征、高氨血症、肝性脑病等因氨的过量蓄积而产生的疾病或症状的预防或改善。

在本发明中，儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸能够对人和非人动物的任一种使用。作为非人动物，可以列举非人哺乳动物、两栖类和鱼类，作为非人哺乳动物，例如，可以列举类人猿、其它灵长类、小鼠、大鼠、马、牛、猪、羊、狗、猫、仓鼠和伴生动物等。

此外，在其它方式中，本发明提供一种对象的氨代谢促进方法。另外，本发明提供一种对象的持久力提高方法。另外，本发明提供一种对象的抗疲劳方法。该方法包括对对象以有效量投予儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的步骤。在优选的实施方式中，投予含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的组合物。在其它优选的实施方式中，给药为口服给药。

作为适用该本发明的方法的对象的例子，可以列举需要促进氨代谢、提高持久力、抗疲劳、或者预防或改善慢性疲劳综合征、高氨血症或肝性脑病的等因氨的过量蓄积而产生的疾病或症状的上述人和非人动物。

作为该对象的进一步的例子，可以列举需要减轻因日常生活中的身体活动导致的疲劳、伴有肌肉劳作的劳动中的持续性提高或疲劳减轻、提高狭义的运动时的持久力、促进从狭义的运动中或其后的疲劳的恢复等的上述人和非人动物。

作为该对象的进一步的例子，可以列举需要预防或改善上述的因高氨血症而引起的症状、例如呼吸性碱中毒(Respiratory alkalosis)、口齿不清(Slurred speech)、颤抖(Tremors)、衰弱(Weakness)、肌张力的增加或降低(Increased or decreased muscletone)、运动失调(Ataxia)、低温症(Hypothermia)、痫性发作(Seizure)、脑水肿(Brainoedema)、昏迷(Coma)、脑干受压(Brain stem compression)、伴有头痛的错乱(Confusion with headache)、恶心(Nausea)、呕吐(Vomiting)、亢奋(Agitation)、妄想和幻觉(Delusions and delirium)、过敏(irritability)、攻击性(Aggression)、多动、怪异或自残行为(Hyperactive,bizarre or self-injurious behavior)、认知障碍(Cognitivedeficits)、蛋白质厌恶(Protein aversion)、厌食(Anorexia)、生长迟缓(Delayedgrowth)等的上述人和非人动物。

作为该对象的进一步的例子，可以列举需要抑制因氨的蓄积导致的伴随神经系的功能降低的中枢性疲劳、或抑制该中枢性疲劳导致的睡意或倦怠感等的上述人和非人动物。

作为该对象的进一步的例子，可以列举需要预防或改善伴有血氨浓度的上升的症状或状态、例如口齿不清、无力、昏迷、意识障碍、视力不清、发育障碍、蛋白质诱导性的呕吐、婴幼儿中的哺乳力降低等的上述人和非人动物。

或者，本发明的氨代谢促进方法可以为体外方法，作为适用该体外方法的对象，可以列举源自上述人或非人动物的肝脏组织和培养肝细胞(例如肝脏原代培养细胞)等。

该本发明的方法中给药的有效量可以为能够实现对象的氨代谢促进的量、或能够实现对象的持久力提高或抗疲劳的量。氨代谢水平能够通过测定对象的血氨浓度或尿素产生量来进行评价。持久力或疲劳耐性能够通过踏车(treadmill)试验等来实施。在一个实施方式中，有效量可以为使给药有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的3成分的组的氨代谢水平与未给药组相比在统计学上显著地上升的量。在其它一个实施方式中，有效量可以为使投予了该3成分的个体组的血氨浓度降低至未给药组的90％以下、优选80％以下的量。另外，在其它一个实施方式中，有效量可以为使投予了该3成分的个体组的血氨浓度与未给药组相比在统计学上显著地降低的量。在另外的其它一个实施方式中，有效量可以为在培养肝细胞(例如肝脏原代培养细胞)中使该3成分给药组的尿素产生量上升至未给药组的2倍以上、优选3倍以上的量。此外，在其它一个实施方式中，有效量可以为使投予了该3成分的个体组的踏车行进时间与未给药组相比在统计学上显著地延长的量。

在本发明中，儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸能够作为用于对医药品、准医药品或饮食品(包括非人动物用饮食品)等赋予氨代谢促进、持久力提高、或抗疲劳的功能的有效成分、或作为用于预防或改善慢性疲劳综合征、高氨血症、肝性脑病等因氨的过量蓄积而产生的疾病或症状的有效成分使用。

该医药品(也包括准医药品)是用于氨代谢促进、持久力提高、或抗疲劳、或者用于预防或改善慢性疲劳综合征、高氨血症、肝性脑病等因氨的过量蓄积而产生的疾病或症状的医药品，将儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸作为用于该功能的有效成分含有。进而，该医药品中，可以以不丧失该有效成分的功能的程度根据需要含有药学上能够接受的载体、或其它有效成分、药理成分等。该医药品可以作为含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的1个组合物被提供，或可以作为含有这些物质的1种或2种的多个组合物的组合被提供。

该医药品(也包括准医药品)的给药方式可以为口服给药和非口服给药的任一种，优选口服给药。该医药品的剂形只要是能够口服或非口服地给药的剂形即可，没有特别限定，例如，可以为注射剂、栓剂、吸入剂、经皮吸收剂、各种外用剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液剂、糖浆剂等任一种，另外，这样的各种剂形的制剂能够通过将儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸与药学上能够接受的载体(例如赋形剂、结合剂、增量剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂、分散剂、缓冲剂、保存剂、矫味剂、香料、被膜剂、稀释剂等)、其它药效成分等适当组合，按照常规方法来制备。

该饮食品是用于提供氨代谢促进、持久力提高、或抗疲劳的功能的饮食品，将儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸作为用于该功能的有效成分含有。在该饮食品中，包括将氨代谢促进、持久力提高、或抗疲劳的预防或改善作为概念、根据需要表示了该主旨的病人用饮食品、以及营养功能饮食品、特定保健用饮食品、显示功能性的饮食品等保健功能饮食品。

该饮食品的形态可以为固体、半固体或液体状(例如饮料)。作为饮食品的例子，可以列举面包类、面类、饭类、饼干等点心类、果冻类、乳制品、汤类、冷冻食品、即食食品、淀粉加工制品、加工鱼肉制品、其它加工食品、调味料、营养辅助食品、茶或咖啡饮料、果实饮料、碳酸饮料、果冻状饮料等饮料、以及这些的原料。或者，该饮食品可以是具有片剂、胶囊、颗粒、粉末、液剂、糖浆等口服给药制剂的形态的补充剂。该饮食品可以作为含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的1个组合物被提供，或可以作为含有这些物质的1种或2种的多个组合物的组合被提供。

该饮食品能够通过将儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸与任意的饮食品材料或食品中能够接受的添加物(例如溶剂、软化剂、油、乳化剂、防腐剂、香科、甜味料、稳定剂、着色剂、紫外线吸收剂、抗氧化剂、保湿剂、增稠剂、固着剂、分散剂、湿润剂等)适当组合、按照常规方法来制备。

该医药品(也包括准医药品)中的儿茶素类的含量没有特别限定，优选为0.01质量％以上，更优选为0.05质量％以上，进一步优选为0.1质量％以上，且优选为10质量％以下，更优选为5质量％以下，进一步优选为2.5质量％以下，更加优选为1质量％以下。进而，作为该含量的例子，可以列举0.01～10质量％、0.01～5质量％、0.01～2.5质量％、0.01～1质量％、0.05～10质量％、0.05～5质量％、0.05～2.5质量％、0.05～1质量％、0.1～10质量％、0.1～5质量％、0.1～2.5质量％、以及0.1～1质量％。

该饮食品中的儿茶素类的含量没有特别限定，优选为0.01质量％以上，更优选为0.05质量％以上，进一步优选为0.1质量％以上，且优选为5质量％以下，更优选为2.5质量％以下，进一步优选为1质量％以下。进而，作为该含量的例子，可以列举0.01～5质量％、0.01～2.5质量％、0.01～1质量％、0.05～5质量％、0.05～2.5质量％、0.05～1质量％、0.1～5质量％、0.1～2.5质量％、以及0.1～1质量％。

该医药品(也包括准医药品)中的瓜氨酸的含量没有特别限定，以瓜氨酸游离体换算，优选为0.01质量％以上，更优选为0.05质量％以上，进一步优选为0.1质量％以上，且优选为10质量％以下，更优选为5质量％以下，进一步优选为2.5质量％以下，更加优选为1质量％以下。进而，作为该含量的例子，可以列举0.01～10质量％、0.01～5质量％、0.01～2.5质量％、0.01～1质量％、0.05～10质量％、0.05～5质量％、0.05～2.5质量％、0.05～1质量％、0.1～10质量％、0.1～5质量％、0.1～2.5质量％、以及0.1～1质量％。

该饮食品中的瓜氨酸的含量没有特别限定，以瓜氨酸游离体换算，优选为0.01质量％以上，更优选为0.05质量％以上，进一步优选为0.1质量％以上，且优选为5质量％以下，更优选为2.5质量％以下，进一步优选为1质量％以下。进而，作为该含量的例子，可以列举0.01～5质量％、0.01～2.5质量％、0.01～1质量％、0.05～5质量％、0.05～2.5质量％、0.05～1质量％、0.1～5质量％、0.1～2.5质量％、以及0.1～1质量％。

该医药品(也包括准医药品)中的精氨酸的含量没有特别限定，以精氨酸游离体换算，优选为0.01质量％以上，更优选为0.05质量％以上，进一步优选为0.1质量％以上，且优选为10质量％以下，更优选为5质量％以下，进一步优选为2.5质量％以下，更加优选为1质量％以下。进而，作为该含量的例子，可以列举0.01～10质量％、0.01～5质量％、0.01～2.5质量％、0.01～1质量％、0.05～10质量％、0.05～5质量％、0.05～2.5质量％、0.05～1质量％、0.1～10质量％、0.1～5质量％、0.1～2.5质量％、以及0.1～1质量％。

该饮食品中的精氨酸的含量没有特别限定，以精氨酸游离体换算，优选为0.01质量％以上，更优选为0.05质量％以上，进一步优选为0.1质量％以上，且优选为5质量％以下，更优选为2.5质量％以下，进一步优选为1质量％以下。进而，作为该含量的例子，可以列举0.01～5质量％、0.01～2.5质量％、0.01～1质量％、0.05～5质量％、0.05～2.5质量％、0.05～1质量％、0.1～5质量％、0.1～2.5质量％、以及0.1～1质量％。

在本发明中，儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的给药量和给药计划按照对象的种类、体重、性别、年龄、状态、或其它的因素由本领域技术人员适当确定即可。没有限定，口服给药的情况下，本发明的儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的成人1人每1天的给药量的例子如下所述：

[儿茶素类]优选为100～3000mg/60kg体重、更优选为250～2000mg/60kg体重、进一步优选为250～1000mg/60kg体重；

[瓜氨酸(游离体换算)]优选为100～3000mg/60kg体重、更优选为250～2000mg/60kg体重、进一步优选为250～1000mg/60kg体重；

[精氨酸(游离体换算)]优选为100～3000mg/60kg体重、更优选为250～2000mg/60kg体重、进一步优选为250～1000mg/60kg体重；

优选将上述的用量例如分为1天1次、或1天2次或3次以上给药。

在本发明中，瓜氨酸和精氨酸分别以游离体换算，优选以1︰0.5～2、更优选以1︰0.8～1.2的质量比使用。例如，本发明的氨代谢促进剂、持久力提高剂和抗疲劳剂优选以1︰0.5～2、更优选以1︰0.8～1.2的质量比含有瓜氨酸和精氨酸。另外，例如在本发明的氨代谢促进、持久力提高或抗疲劳方法中，瓜氨酸和精氨酸优选以1︰0.5～2、更优选以1︰0.8～1.2的质量比进行给药。

另外，本发明中所使用的儿茶素类的量与分别以游离体换算的瓜氨酸和精氨酸的合计量之比以质量比计优选为1︰0.1～10、更优选为1︰0.2～8、进一步优选为1︰0.5～2、更加优选为1︰0.8～1.2。例如，本发明的氨代谢促进剂、持久力提高剂和抗疲劳剂中的儿茶素类与瓜氨酸和精氨酸的合计量的含有比以质量比计优选为1︰0.1～10、更优选为1︰0.2～8、进一步优选为1︰0.5～2、更加优选为1︰0.8～1.2。另外，例如，在本发明的氨代谢促进、持久力提高或抗疲劳方法中给药的儿茶素类与瓜氨酸和精氨酸的合计量的用量比以质量比计优选为1︰0.1～10、更优选为1︰0.2～8、进一步优选为1︰0.5～2、更加优选为1︰0.8～1.2。

本发明还作为例示的实施方式包括以下的物质、制造方法、用途、方法等。但是，本发明并不限定于这些实施方式。

[1]一种氨代谢促进剂，其以儿茶素类为有效成分。

[2]一种高氨血症的预防或改善剂，其以儿茶素类为有效成分。

[3]一种肝性脑病的预防或改善剂，其以儿茶素类为有效成分。

[4]一种慢性疲劳综合征的预防或改善剂，其以儿茶素类为有效成分。

[5]儿茶素类用于氨代谢促进剂的制造的用途。

[6]儿茶素类用于高氨血症的预防或改善剂的制造的用途。

[7]儿茶素类用于肝性脑病的预防或改善剂的制造的用途。

[8]儿茶素类用于慢性疲劳综合征的预防或改善剂的制造的用途。

[9]儿茶素类用于氨代谢促进的用途。

[10]儿茶素类用于高氨血症的预防或改善的用途。

[11]儿茶素类用于肝性脑病的预防或改善的用途。

[12]儿茶素类用于慢性疲劳综合征的预防或改善的用途。

[13]用于在氨代谢促进中使用的儿茶素类。

[14]用于在高氨血症的预防或改善中使用的儿茶素类。

[15]用于在肝性脑病的预防或改善中使用的儿茶素类。

[16]用于在慢性疲劳综合征的预防或改善中使用的儿茶素类。

[17]一种对象的氨代谢促进方法，其包括对需要氨代谢促进的对象以有效量投予儿茶素类的步骤。

[18]一种对象的高氨血症的预防或改善方法，其包括对需要高氨血症的预防或改善的对象以有效量投予儿茶素类的步骤。

[19]一种对象的肝性脑病的预防或改善方法，其包括对需要肝性脑病的预防或改善的对象以有效量投予儿茶素类的步骤。

[20]一种对象的慢性疲劳综合征的预防或改善方法，其包括对需要慢性疲劳综合征的预防或改善的对象以有效量投予儿茶素类的步骤。

[21]在上述[1]～[20]中，上述儿茶素类的成人1人每1天的使用量优选为100～3000mg/60kg体重、更优选为250～2000mg/60kg体重、进一步优选为250～1000mg/60kg体重。

[22]优选在上述[21]中，上述的量的儿茶素类1天1次地给药，或分成1天2次或3次以上进行给药。

[23]一种氨代谢促进用饮食品，其以儿茶素类为有效成分。

[24]如[23]所述的氨代谢促进用饮食品，其优选是用于抑制中枢性疲劳、抑制睡意或抑制倦怠感的饮食品。

[25]在上述[1]～[24]中，

上述儿茶素类优选为选自儿茶素、没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素没食子酸酯中的至少1种，

更优选含有选自儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素和表儿茶素没食子酸酯中的至少1种，

进一步优选含有选自儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素中的至少1种，

进一步优选为选自儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素和表儿茶素没食子酸酯中的至少1种，

进一步优选为选自儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素中的至少1种，

且/或作为上述儿茶素类，使用含有该儿茶素类的茶提取物。

[26]一种氨代谢促进剂，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[27]一种持久力提高剂，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[28]一种抗疲劳剂，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[29]一种高氨血症的预防或改善剂，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[30]一种肝性脑病的预防或改善剂，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[31]一种慢性疲劳综合征的预防或改善剂，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[32]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于氨代谢促进剂的制造的用途。

[33]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于持久力提高剂的制造的用途。

[34]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于抗疲劳剂的制造的用途。

[35]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于高氨血症的预防或改善剂的制造的用途。

[36]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于肝性脑病的预防或改善剂的制造的用途。

[37]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于慢性疲劳综合征的预防或改善剂的制造的用途。

[38]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于氨代谢促进的用途。

[39]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于持久力提高的用途。

[40]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于抗疲劳的用途。

[41]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于高氨血症的预防或改善的用途。

[42]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于肝性脑病的预防或改善的用途。

[43]儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸用于慢性疲劳综合征的预防或改善的用途。

[44]一种用于在氨代谢促进中使用的含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的组合物。

[45]一种用于在持久力提高中使用的含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的组合物。

[46]一种用于在抗疲劳中使用的含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的组合物。

[47]一种用于在高氨血症的预防或改善中使用的含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的组合物。

[48]一种用于在肝性脑病的预防或改善中使用的含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的组合物。

[49]一种用于在慢性疲劳综合征的预防或改善中使用的含有儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的组合物。

[50]一种对象的氨代谢促进方法，其包括对需要氨代谢促进的对象以有效量投予儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的步骤。

[51]一种对象的持久力提高方法，其包括对需要持久力提高的对象以有效量投予儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的步骤。

[52]一种对象的抗疲劳方法，其包括对需要抗疲劳的对象以有效量投予儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的步骤。

[53]一种对象的高氨血症的预防或改善方法，其包括对需要高氨血症的预防或改善的对象以有效量投予儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的步骤。

[54]一种对象的肝性脑病的预防或改善方法，其包括对需要肝性脑病的预防或改善的对象以有效量投予儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的步骤。

[55]一种对象的慢性疲劳综合征的预防或改善方法，其包括对需要慢性疲劳综合征的预防或改善的对象以有效量投予儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的步骤。

[56]一种氨代谢促进用饮食品，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[57]一种持久力提高用饮食品，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[58]一种抗疲劳用饮食品，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[59]一种高氨血症的预防或改善用饮食品，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[60]一种肝性脑病的预防或改善用饮食品，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[61]一种慢性疲劳综合征的预防或改善用饮食品，其以儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸为有效成分。

[62]在上述[26]～[61]中，

上述儿茶素类优选为选自儿茶素、没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素没食子酸酯中的至少1种，

更优选含有选自儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素和表儿茶素没食子酸酯中的至少1种，

进一步优选含有选自儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素中的至少1种，

进一步优选为选自儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素和表儿茶素没食子酸酯中的至少1种，

进一步优选为选自儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素中的至少1种，

且/或作为上述儿茶素类，使用含有该儿茶素类的茶提取物。

[63]在上述[26]～[62]中，上述儿茶素类与上述瓜氨酸和上述精氨酸的合计量的质量比优选为1︰0.1～10、更优选为1︰0.2～8、进一步优选为1︰0.5～2、更加优选为1︰0.8～1.2。

[64]在上述[26]～[63]中，上述瓜氨酸与上述精氨酸和的质量比优选为1︰0.5～2、更优选为1︰0.8～1.2。

[65]在上述[26]～[64]中，上述儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸的成人1人每1天的使用量如下所述：

[儿茶素类]优选为100～3000mg/60kg体重、更优选为250～2000mg/60kg体重、进一步优选为250～1000mg/60kg体重；

[瓜氨酸(游离体换算)]优选为100～3000mg/60kg体重、更优选为250～2000mg/60kg体重、进一步优选为250～1000mg/60kg体重；

[精氨酸(游离体换算)]优选为100～3000mg/60kg体重、更优选为250～2000mg/60kg体重、进一步优选为250～1000mg/60kg体重。

[66]在上述[65]中，上述的量的儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸1天1次地给药，或分成1天2次或3次以上进行给药。

实施例

以下，使用实施例更具体地说明本发明。但是，本发明的技术范围不限定于这些实施例。

实施例1儿茶素类对肝脏原代培养细胞的氨代谢带来的影响

(肝脏原代培养细胞的制备)

将小鼠(雄性Balb/c、18周龄；Orientalbio)在全身麻醉下开腹，使用蠕动泵从门静脉使加热至37℃的肝灌流基质(Liver perfusion medium，Invitrogen)以2mL/min的速度流动，全身灌流15分钟。接着，用肝消化培养基(Liver Digest Medium)同样地灌流15分钟。其后，取出肝脏，用剪刀细切之后，利用过滤器(BD falcon)使细胞解离。在50mL管中回收细胞，用完全DMEM培养基(Complete DMEM，D6046，Sigma)10mL移液清洗之后，在400rpm、4℃下离心3分钟。重复3次同样的操作，除去死细胞。其后，将细胞悬浮于无FBS培养基，以10⁵个细胞/孔接种于24孔板。在37℃、5体积％CO₂条件下培养24小时后，进行培养基更换，供于下述实验。

(儿茶素刺激和尿素定量)

将接种24小时后的细胞用PBS清洗2次后，更换为不含精氨酸、亮氨酸(Arginine、Leucine free)的DMEM培养基(D9443，Sigma)，添加茶儿茶素类(POLYPHENON 70S、三井农林(株))10μM或作为对照的水，在37℃、5体积％CO₂条件下培养24小时后，回收培养上清液。使用QuantiChrom尿素检测试剂盒(QuantiChrom Urea Assay Kit，Bio Assay Systems)对培养上清液中所含的尿素进行定量。茶儿茶素组成：GC 6.1质量％、EGC 20.0质量％、C 1.8质量％、EC 7.9质量％、EGCg 32.3质量％、GCg 3.2质量％、ECg 8.8质量％、Cg 0.8质量％。

(基因表达分析)

从培养基回收细胞，使用RNeasy Mini Kit(QIAGEN)提取RNA，使用High-CapacityRNA-to-cDNAKit(Applied Biosystems)进行了cDNA合成之后，通过实时PCR(RealtimePCR)(Taqman gene expression，Applied Bio systems)进行了下述氨代谢相关因子的基因表达的定量。

CPS1：氨基甲酰磷酸合成酶-1(Carbamoyl phosphate synthase-1)(Mm01256489_m1)

Otc：鸟氨酸氨基甲酰转移酶，(Ornithine transcarbamoylase)(Mm00493267_m1)

Arg1：精氨酸酶-1(Arginase-1)(Mm00475988_m1)

将尿素定量的结果示于图1，将基因表达分析的结果示于图2。与对照组相比，在儿茶素刺激组中，尿素产生量在统计学上显著地增加，且CPS1、Otc和Arg1的表达在统计学上显著地增强。

实施例2儿茶素种对小鼠的原代肝细胞氨代谢带来的影响

在细胞中使用肝细胞培养试剂盒(源自10周龄雄性Balb/c小鼠、24孔、1×10⁵个细胞/孔、Cosmo Bio公司)。在高葡萄糖DMEM(31053028、Gibco)中含有Gluta max(35050-061、Gibco)、青霉素/链霉素(168-23191、Wako)、抗坏血酸(014-04801、Wako)的培养基中添加终浓度5mM的氯化铵(015-02991、Wako)和儿茶素类(EGC、Cg或ECg)1.4μM或4.2μM并培养细胞：EGC(NH020203、长良科学)、Cg(NH021302、长良科学)、ECg(NH020302、长良科学)。将用未添加儿茶素类的培养基进行了培养的细胞作为对照。24小时后，回收培养上清液，使用氨检测试剂盒(Ammonia Assay Kit，Abcam)对培养上清液中所含的氨进行定量。将氯化铵和儿茶素类添加24小时后的培养基中氨量相对于添加时的减少量作为培养基中氨变化量。

将培养基中氨变化量示于表1。表1的值表示氨变化量相对于对照的增加率。统计处理中，在各组n＝4中利用Dunnett检验进行了多组比较(**：p＜0.001、*：p＜0.05)。在EGC4.2μM添加组和Cg4.2μM添加组中，培养基中氨变化量相对于对照显著地增加，显示这些儿茶素种具有更高的氨代谢增强作用。

[表1]

实施例3儿茶素类摄取对肝脏的氨代谢关联酶基因表达带来的影响

(动物和组织采集)

将小鼠(雄性Balb/c、6周龄；Orientalbio)分成2组，分别给予表2记载的对照食物和试验食物(含有0.5％儿茶素)。试验期间中，小鼠设为自由摄食、自由饮水。对各组的小鼠实施1天30分钟的轻度运动行进(踏车、倾斜8度、15m/分钟10分钟→20m/分钟30分钟),1周4次。8周后，进行安静时解剖，从各小鼠的腹部大静脉采血后，摘除肝脏，用液氮迅速地冻结，在-80℃保存。

[表2]

※茶儿茶素类：POLYPHENON 70S(三井农林(株))

组成：GC 6.1质量％，EGC 20.0质量％，C 1.8质量％，EC 7.9质量％，EGCg 32.3质量％，GCg 3.2质量％，ECg 8.8质量％，Cg 0.8质量％

(基因表达分析)

在来自肝脏的总RNA提取中使用RNeasy Mini Kit(QIAGEN)。在cDNA合成中使用High-Capacity RNA-to-cDNAKit(Applied Biosystems)，通过实时PCR(Taqman geneexpression，Applied Bio systems)进行了下述氨代谢相关因子的基因表达的定量。

NAGS：N-乙酰谷氨酸合成酶(N-acetylglutamate synthase)(Mm00467530_m1)

CPS1：氨基甲酰磷酸合成酶-1(Carbamoyl phosphate synthase-1)(Mm01256489_m1)

Otc：鸟氨酸氨基甲酰转移酶(Ornithine transcarbamoylase)(Mm00493267_m1)

ASS：精氨基琥珀酸合成酶(Argininosuccinate synthase)(Mm00711256_m1)

ASL：精氨基琥珀酸裂解酶(Argininosuccinate lyase)(Mm01197741_m1)

Arg1：精氨酸酶(Arginase-1)(Mm00475988_m1)

将结果示于图3。在所研究的全部6种基因中，儿茶素食摄取组与对照组相比，表达增加。

实施例4儿茶素类摄取对肝脏的氨代谢带来的影响

(动物和组织采集)

小鼠(雄性Balb/c、8周龄；Orientalbio)预饲养1周后，以初期持久力平均值成为同等的方式分成2组。持久力通过踏车(倾斜8度、28m/分钟)行进进行测定。对各组的小鼠实施1周5次轻度运动行进(踏车、倾斜6度、20m/分钟、30分钟)，总计4周。在各行进运动的1小时前，对各组使用经口喂食针胃内投予以下的试验物质的任一种。4周后，对各组的小鼠使用经口喂食针胃内投予试验物质，1小时后进行踏车行进(倾斜8度、25m/分钟)1小时。运动之后，立即进行解剖，从各小鼠的腹部大静脉采血后，摘除肝脏，用液氮迅速地冻结，在-80℃保存。

试验物质

对照组：水

儿茶素给药组：茶儿茶素类^※(0.2g/kg体重)

※茶儿茶素类：POLYPHENON 70S(三井农林(株)；组成：GC 6.1质量％、EGC 2质量0％、C 1.8质量％、EC 7.9质量％、EGCg 32.3质量％、GCg 3.2质量％、ECg 8.8质量％、Cg0.8质量％)

(肝脏内氨定量)

使用氨检测试剂盒(abcam 83360)，进行肝脏内氨的提取和定量，算出每肝脏重量的氨量。

将结果示于图4。与对照组相比，在儿茶素给药组中，肝脏内氨量在统计学上显著地降低。

实施例5儿茶素类摄取对血氨浓度带来的影响

以与实施例4同样的条件将小鼠分成2组，分别进行试验物质的给药和运动之后采血。对采集的血液样品测定血氨浓度。在血氨浓度的测定中使用氨浓度检测试剂盒(Ammonia/Ammonium Assay Kit，Abcam)。

将结果示于图5。与对照组相比，在儿茶素给药组中，血氨浓度降低。

参考例瓜氨酸和精氨酸对肝细胞的尿素产生带来的影响

(肝脏原代培养细胞的采集)

通过与实施例1同样的步骤从小鼠的肝脏回收细胞，除去死细胞。其后，将细胞悬浮于DMEM培养基，以10⁵个细胞/孔接种于24孔板并进行培养。

(尿素的定量)

将接种24小时后的细胞用PBS清洗2次后，更换为不含精氨酸、亮氨酸(Arginine、Leucine free)的DMEM培养基(D9443，Sigma)，在其中添加氯化铵5mM(对照)、氯化铵+L-精氨酸0.5mM+L-瓜氨酸0.5mM(Arg+Cit)、或氯化铵+L-瓜氨酸1mM(Cit)。24小时后，回收培养上清液，使用QuantiChrom尿素检测试剂盒(Bio AssaySystems)对所含的尿素进行定量。

将尿素定量结果示于图6。显示在精氨酸+瓜氨酸添加组(Arg+Cit)、和瓜氨酸单独添加组(Cit)的任一个中，肝细胞的尿素产生量均显著地增加，氨代谢增强。

实施例6儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸对持久力带来的影响

小鼠(雄性Balb/c、8周龄；Orientalbio)预饲养1周之后，以初期持久力平均值成为同等的方式分成4组。试验期间中，使小鼠自由摄取试验食物AIN76粉末食物(10％脂质)并自由饮水。持久力通过踏车(倾斜8度、28m/分钟)行进来进行测定。对各组的小鼠实施1周5次轻度运动行进(踏车、倾斜6度、20m/分钟、30分钟)，总计4周。在各行进运动的1小时前，对各组使用经口喂食针胃内投予以下的试验物质的任一种。4周后，再利用踏车(倾斜8度、28m/分钟)测定各个体的持久力。

试验物质

第1组(对照)：水

第2组(Cat)：茶儿茶素类^※(0.1g/kg体重)

第3组(Cat+Arg/Cit)：茶儿茶素类^※(0.1g/kg体重)

+L-精氨酸(0.1g/kg体重)

+L-瓜氨酸(0.1g/kg体重)

第4组(Cat+Cit)：茶儿茶素类^※(0.1g/kg体重)

+L-瓜氨酸(0.2g/kg体重)

※茶儿茶素类：POLYPHENON 70S(三井农林(株)；组成：GC 6.1质量％、EGC 20质量％、C 1.8质量％、EC 7.9质量％、EGCg 32.3质量％、GCg 3.2质量％、ECg 8.8质量％、Cg0.8质量％)

将各组的小鼠的踏车行进时间示于图7。显示与儿茶素单独添加组(Cat)或儿茶素+瓜氨酸添加组(Cat+Cit)相比，在添加有儿茶素、精氨酸和瓜氨酸这三种成分的组(Cat+Arg/Cit)中，行进时间显著地延长，持久力提高。

实施例7儿茶素类、瓜氨酸和精氨酸对血氨浓度带来的影响

小鼠(雄性Balb/c、8周龄；Orientalbio)预饲养1周之后，以初期持久力平均值成为同等的方式分成3组。试验期间中，使小鼠自由摄取试验食物AIN76粉末食物(10％脂质)并自由饮水。持久力通过踏车(倾斜8度、28m/分钟)行进来进行测定。对各组的小鼠实施1周5次轻度运动行进(踏车、倾斜6度、20m/分钟)，总计4周。在各行进运动的1小时前，对各组使用经口喂食针胃内投予以下的试验物质的任一种。4周后，对各组的小鼠使用经口喂食针胃内投予试验物质，1小时后，进行踏车行进(倾斜8度、25m/分钟)1小时，之后立即从腹部大静脉采血，测定血氨浓度。在血氨浓度的测定中使用氨浓度检测试剂盒(Abcam)。

试验物质

第1组(对照)：水

第2组(Cat)：茶儿茶素类^※(0.2g/kg体重)

第3组(Cat+Arg/Cit)：茶儿茶素类^※(0.2g/kg体重)

+精氨酸(0.2g/kg体重)

+瓜氨酸(0.2g/kg体重)

※茶儿茶素类：POLYPHENON 70S(三井农林(株)；组成：GC 6.1质量％、EGC 20质量％、C 1.8质量％、EC 7.9质量％、EGCg 32.3质量％、GCg 3.2质量％、ECg 8.8质量％、Cg0.8质量％)

将各组的小鼠的血氨浓度示于图8。与儿茶素单独添加组(Cat)相比，在添加了儿茶素、精氨酸和瓜氨酸这三种成分的组(Cat+Arg/Cit)中，血氨浓度显著地降低。