具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一种三种泥鳅的肌肉营养成分与消化酶活力的分析研究，试验前处理包括以下步骤：

a、试验材料的选择

试验材料取自临沂市水产养殖场，随机挑选体质健壮、体表无伤的泥鳅（MA）、大鳞副泥鳅（PD）和台湾大泥鳅（TW）各30尾，三种泥鳅的规格分别为泥鳅体质量为(18.94±0.73)g，体长为(13.57±0.59)cm；大鳞副泥鳅体质量为(17.35±0.39)g，体长为(13.02±0.40)cm；台湾大泥鳅体质量为(20.17±0.89)g，体长为(12.63±0.70)cm；

b、样品的处理

鱼体解剖前采用MS-222将其麻醉，麻醉后取鱼体背部两侧肌肉，用滤纸擦干，捣碎混匀后制成样品，将样品平均分成两份，其中一份用于常规营养成分的测定，另一份置于冰箱-20℃冷冻保存，冷冻干燥后用于氨基酸和脂肪酸的测定；

另外，在样品处理过程中，每种泥鳅鳅各取6尾，采用MS-222麻醉后置于冰盘上，解剖取出肠道与肝胰脏，清除肠道内食物及粪便，剔除肠壁脂肪，去离子水冲洗后保存于-20℃冰箱冷冻备用；采用试剂盒测定肠道与肝胰脏中的蛋白酶、脂肪酶与淀粉酶活力。

本试验中，测定的试验数据用SPSS17.0软件进行生物学统计，描述性统计值使用平均值±标准误( mean±SD)表示。

实施例一常规营养成分的测定

常规营养成分的测定包括水分、灰分、粗蛋白和粗脂肪的测定。

水分测定参照GB5009.3-2010，采用105℃烘干失水法，用BGZ-246电热恒温鼓风干燥箱测定；

灰分测定参照GB/T5009.4-2010，采用550℃干法灰化法，用Thermo BF51794JC-1马弗炉测定；

粗蛋白测定参照GB/T5009.5-2010，采用微量凯氏定氮法，用FOSS 8400全自动定氮仪测定；

粗脂肪测定参照GB/T5009.6-2008，用BUCHI E-812全自动索氏脂肪提取仪测定。

三种泥鳅肌肉中水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分的含量见表1。泥鳅（MA）粗蛋白含量显著高于大鳞副泥鳅（PD）与台湾大泥鳅（TW）(P<0.05)，而粗脂肪含量显著低于其余两种泥鳅(P<0.05)，泥鳅（MA）的水分与粗灰分含量高于大鳞副泥鳅（PD）与台湾大泥鳅（TW），但差异不显著(P>0.05)。

表1 三种泥鳅肌肉成分比较

注：同列肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

脂肪本身不是呈味物质，但脂肪可提升鱼体肉质的柔嫩感及风味的浓郁感，并伴随一些与脂肪酸共存的香味。研究表明鱼体肌肉中粗脂肪含量在3.5～4.5%时，口感较好。本试验测得台湾大泥鳅（TW）(4.21%)与大鳞副泥鳅（PD）(4.03%)粗脂肪含量高于泥鳅（MA）(3.62%)，三种泥鳅粗脂肪含量均高于3.5%，表明三种泥鳅肌肉均具有良好的风味与口感。

蛋白质作为肌肉的重要营养组分，其含量及种类是决定鱼类肌肉品质的重要指标。蛋白质价值的评定由粗蛋白含量、氨基酸种类及比例等因素所决定。由于人体不能合成必需氨基酸或合成速度无法满足机体需要，必须依赖食物蛋白质供给。因此，食品中必需氨基酸种类和比例与人体所需氨基酸组成相符合的蛋白质，才可称之为高营养价值蛋白质。泥鳅（MA）粗蛋白含量为18.15%，高于大鳞副泥鳅（PD）17.45%、台湾大泥鳅（TW）17.10%，三种泥鳅粗蛋白含量均高于草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鳙鱼(Hypophthalmichthys nobilis)、黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco）以及大麻哈鱼(Oncorhynchus keta)，表明三种泥鳅均属于高蛋白优质经济鱼类，推广养殖具有较高的经济效益。

实施例二肌肉蛋白质中氨基酸含量的测定及氨基酸组成评价

测定肌肉中的氨基酸首先采用盐酸水解法对冷冻干燥后的样品进行前处理，之后使用日立L-8900氨基酸分析仪进行测定。

肌肉营养价值的评定根据1973年FAO/WHO建议的氨基酸评分标准模式(%,dry)和全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式(%,dry）分别按以下公式计算氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)和必需氨基酸指数(EAAI)：

式中：aa为试验样品氨基酸含量(%)；AA(FAO/WHO)为FAO/WHO评分标准模式中同种氨基酸含量(%)；AA(Egg)为全鸡蛋蛋白质中同种氨基酸含量(%)；n为比较的必需氨基酸个数；A，B，C，…，H为样品肌肉蛋白质的必需氨基酸含量(%,dry)；AE，BE，CE，…，HE为全鸡蛋蛋白质的必需氨基酸含量(%,dry)；

如表2所示，在三种泥鳅肌肉中共检测出17种氨基酸（色氨酸因酸法水解破坏结构未检测），包括7种必需氨基酸(EAA)、2种半必需氨基酸(HEAA)和8种非必需氨基酸(NEAA)。三种泥鳅氨基酸含量最高的均为谷氨酸(Glu)，其次是天冬氨酸(Asp)。泥鳅（MA）中含量最低的氨基酸为胱氨酸(Cys)，大鳞副泥鳅（PD）与台湾大泥鳅（TW）中蛋氨酸(Met)含量最低。三种泥鳅中有12种氨基酸差异显著(P<0.05)，泥鳅（MA）的必需氨基酸、非必需氨基酸以及鲜味氨基酸总量显著高于另两种泥鳅(P<0.05)，大鳞副泥鳅（PD）的非必需氨基酸与鲜味氨基酸总量显著高于台湾大泥鳅（TW）(P<0.05)。

表2 三种泥鳅肌肉氨基酸含量

注：*为必需氨基酸；#为鲜味氨基酸；同列肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

肌肉蛋白质营养价值主要取决于所含必需氨基酸的种类、数量及组成比例。EAA氨基酸评分（AAS）和化学评分（CS）结果如表3所示，三种泥鳅必需氨基酸中含量最高的均为赖氨酸，除Met+Cys外，AAS均接近或大于1，CS均大于0.5。根据AAS与CS预测，三种泥鳅限制氨基酸均为Met+Cys。泥鳅（MA）必需氨基酸指数EAAI为89.59，高于台湾大泥鳅（TW）(83.97)与大鳞副泥鳅（PD）(80.95)。

表3 三种泥鳅肌肉中必需氨基酸组成评价

对三种泥鳅蛋白营养价值进行比较，其中泥鳅（MA）氨基酸总量、必需氨基酸含量、必需氨基酸与非必需氨基酸比值及EAAI均最高，台湾大泥鳅（TW）次之，大鳞副泥鳅（PD）最低。

三种泥鳅氨基酸种类齐全，必需氨基酸中赖氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸含量丰富，AAS均大于1，CS均大于0.5，可弥补谷类食物中赖氨酸的缺乏，促进机体对蛋白质的利用，提高肌体免疫力，调节人体激素水平。动物蛋白鲜度程度与其肌肉中鲜味氨基酸的含量有关，鲜味氨基酸占比越大，食品味道越鲜美。三种泥鳅中鲜味氨基酸占总氨基酸比例为42.63～42.84%，高于草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco）、红罗非鱼(Red tilapia Oreochromis spp.)。

必需氨基酸指数(EAAI)是一项评价机体蛋白质营养价值的常用指标。三种泥鳅EAAI为80.95～89.59，必需氨基酸指标较高，高于舌虾虎鱼(Glossogobius giuris)、施氏鲟(Acipenser schrencki)、大麻哈鱼(Oncorhynchus keta)、鳜(Siniperca chuatsi)，表明三种泥鳅是一类富含优质蛋白质，可提供丰富必需氨基酸的的淡水优质经济鱼类。

实施例三肌肉中脂肪酸含量的测定

测定脂肪酸含量首先将样品经皂化甲酯化，然后上Agilent 7890A气相色谱仪进行分析。

三种泥鳅肌肉中脂肪酸检测结果如表4所示，在泥鳅肌肉样品中共检测出19种脂肪酸，包含7种饱和脂肪酸（SFA）、4种单不饱和脂肪酸（MUFA）和8种多不饱和脂肪酸（PUFA）。三种泥鳅饱和脂肪酸含量分别为24.56%、22.29%和23.36,大鳞副泥鳅（PD）中饱和脂肪酸低于其他两种泥鳅(P>0.05)。不饱和脂肪酸含量分别为45.17%、48.60%和48.65%，泥鳅（MA）中不饱和脂肪酸显著低于其他两种泥鳅(P<0.05)，其中泥鳅（MA）肌肉中单不饱和脂肪酸含量为15.49%，显著低于其他两种泥鳅(P<0.05)，而泥鳅（MA）肌肉中多不饱和脂肪酸含量为29.68%，显著高于其他两种泥鳅(P<0.05)。泥鳅（MA）肌肉中EPA+DHA含量为9.24%，显著高于台湾大泥鳅（TW）（7.23%）与大鳞副泥鳅（PD）（4.74%）(P<0.05)。三种泥鳅肌肉中的n-3族与n-6族不饱和脂肪酸，均以泥鳅（MA）含量最高(P<0.05)。

表4 三种泥鳅肌肉脂肪酸含量

注：同列肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

三种泥鳅中，泥鳅（MA）的不饱和脂肪酸所占比例最高(29.68%)，显著高于大鳞副泥鳅（PD）（24.32%）及台湾大泥鳅（TW）（16.59%）。本试验中，泥鳅（MA）、大鳞副泥鳅（PD）及台湾大泥鳅（TW）中EPA+DHA含量分别为9.24%、4.74%和7.23%。

脂肪酸是机体生长生存的重要因素，在三种泥鳅肌肉中均检测出19种脂肪酸，包含7种饱和脂肪酸（SFA）、4种单不饱和脂肪酸（MUFA）和8种多不饱和脂肪酸（PUFA）。多不饱和脂肪酸(PUFA)具有降血压、降低胆固醇和甘油三酯、降低血小板凝集作用，此外对预防心血管疾病的发生，抗肿瘤和免疫调节也有一定影响。EPA和DHA是一类主要存在于鱼类脂肪中的多不饱和脂肪酸，是人体生长发育的必需脂肪酸，由此可知，这三种泥鳅可以为人体提供所需的不饱和脂肪酸，经常食用可以提高人体免疫力。

实施例四组织消化酶的测定

在本实施例中，组织消化酶的测定所采用的试剂盒购自南京建成生物工程研究所，蛋白酶使用的试剂盒型号为A080-2-2，脂肪酶使用的试剂盒型号为A054-2-1，淀粉酶使用的试剂盒型号为C016-1-1。

在样品处理过程中，每种泥鳅鳅各取6尾，采用MS-222麻醉后置于冰盘上，解剖取出肠道与肝胰脏，清除肠道内食物及粪便，剔除肠壁脂肪，去离子水冲洗后保存于-20℃冰箱冷冻备用；采用试剂盒测定肠道与肝胰脏中的蛋白酶、脂肪酶与淀粉酶活力。

三种泥鳅肝胰腺与肠道中蛋白酶、脂肪酶与淀粉酶活力如图1至图3所示。三种泥鳅肠道中蛋白酶与脂肪酶活性显著高于肝胰腺，而淀粉酶活性显著低于肝胰腺(P<0.05)。泥鳅（MA）的肝胰脏与肠道中蛋白酶活力显著高于其他两种泥鳅(P<0.05)，大鳞副泥鳅（PD）蛋白酶活力高于台湾大泥鳅（TW）(P>0.05)。大鳞副泥鳅（PD）与台湾大泥鳅（TW）肠道中脂肪酶活力显著高于泥鳅（MA）(P<0.05)，台湾大泥鳅（TW）肝胰脏脂肪酶活力显著高于其他两种泥鳅(P<0.05)。泥鳅（MA）肝胰脏与肠道中淀粉酶活力显著高于大鳞副泥鳅（PD）与台湾大泥鳅（TW）(P<0.05)。

消化酶是由消化腺和消化系统分泌的一种催化机体生化反应的蛋白质，其活性的高低直接影响鱼体对营养物质的吸收利用。测定三种泥鳅消化酶活力可在一定程度上反应出机体的生长速度、消化吸收和饲料利用差异，为生产养殖过程中饲料的选择提供实验依据。

由图1至图3可知，三种泥鳅饲养过程中，肠道对蛋白质和脂肪消化吸收能力高于淀粉的消化吸收能力，因此，在饲料配方中，可用蛋白源原料与脂肪源原料替代15%～50%的淀粉源饲料，增强鱼体对饲料中能量的吸收利用，提高饲料转化率。

综上所述，本发明公开的三种泥鳅营养成分中，台湾大泥鳅（TW）与大鳞副泥鳅（PD）粗脂肪含量分别为4.21%和4.03%，高于泥鳅（MA）的3.62%，三种泥鳅粗脂肪含量均高于3.5%，表明三种泥鳅肌肉均具有良好的风味与口感；粗蛋白含量均高于草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鳙鱼(Hypophthalmichthys nobilis)、黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco）以及大麻哈鱼(Oncorhynchus keta)，其中泥鳅（MA）粗蛋白含量为18.15%，大鳞副泥鳅（PD）17.45%、台湾大泥鳅（TW）17.10%，均属于高蛋白鱼类；三种泥鳅必需氨基酸中含量最高的均为赖氨酸，除Met+Cys外，AAS均接近或大于1，CS均大于0.5，根据AAS与CS预测，三种泥鳅限制氨基酸均为Met+Cys，长期食用可提高机体免疫力；三种泥鳅中鲜味氨基酸占总氨基酸比例为42.63～42.84%，高于草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco）、红罗非鱼(Red tilapia Oreochromis spp.)，口感风味巨佳；三种泥鳅EAAI为80.95～89.59，必需氨基酸指标较高，高于舌虾虎鱼(Glossogobius giuris)、施氏鲟(Acipenser schrencki)、大麻哈鱼(Oncorhynchus keta)、鳜(Siniperca chuatsi)，表明三种泥鳅是一类富含优质蛋白质，可提供丰富必需氨基酸的的淡水优质经济鱼类；在三种泥鳅肌肉中均检测出19种脂肪酸，包含7种饱和脂肪酸（SFA）、4种单不饱和脂肪酸（MUFA）和8种多不饱和脂肪酸（PUFA），由于多不饱和脂肪酸(PUFA)具有降血压、降低胆固醇和甘油三酯、降低血小板凝集作用，此外对预防心血管疾病的发生，抗肿瘤和免疫调节也有一定影响，因此，经常食用泥鳅可以提高身体免疫力，降低疾病的发生几率。

由此可知，泥鳅是一种具有较高营养的鱼类，推广养殖具有较高的经济效益。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。