具体实施方式

PIKfyve为脂质激酶，其将磷酸酯催化加成到磷脂酰肌醇(PI)的5位置或加成到磷脂酰3-磷酸(PI3P)，以分别产生PI5P和PI(3,5)P2。在通过巨胞饮将营养物和其它分子导入期间，这些次要脂质对于细胞内的囊泡运输是重要的，并且还对于溶酶体和自噬的恰当功能是重要的。先前展示PIKfyve的阻断基因表现或突变引起巨大的胞质液泡化。本申请提供能够抑制PIKfyve和诱导细胞液泡化并且适用于治疗癌症的治疗化合物。还提供药物组合物和制备所述化合物的方法。

治疗化合物

在一个通用方面中，本申请提供式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

表示为的每一键为单键或双键，其限制条件为表示为的两个键不同时为双键；

X¹是选自N和CR^A；

X²是选自N和CR^A；

X³是选自N和CR^A；

每一R^A独立地选自H、卤基、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、C_1-6烷氧基和C_1-6卤烷氧基；

Ar是选自C_6-10芳基和5-10元杂芳基，其中的每一个任选地经1、2、3、4或5个独立地选自R⁷的取代基取代；

每一R⁷独立地选自卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、OR^a1、SR^a1、C(O)R^b1、C(O)NR^c1R^d1、C(O)OR^a1、OC(O)R^b1、OC(O)NR^c1R^d1、NR^c1R^d1、NR^c1C(O)R^b1、NR^c1C(O)OR^a1、NR^c1C(O)NR^c1R^d1、NR^c1S(O)₂R^b1、NR^c1S(O)₂NR^c1R^d1、S(O)₂R^b1和S(O)₂NR^c1R^d1；其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基各自任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、OR^a1、SR^a1、C(O)R^b1、C(O)NR^c1R^d1、C(O)OR^a1、OC(O)R^b1、OC(O)NR^c1R^d1、NR^c1R^d1、NR^c1C(O)R^b1、NR^c1C(O)OR^a1、NR^c1C(O)NR^c1R^d1、NR^c1S(O)₂R^b1、NR^c1S(O)₂NR^c1R^d1、S(O)₂R^b1和S(O)₂NR^c1R^d1；

R¹选自由H和C_1-6烷基组成的群组，其中所述C_1-6烷基任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、OR^a2、C(O)R^b2、C(O)NR^c2R^d2、C(O)OR^a2、NR^c2R^d2、NR^c2C(O)R^b2、NR^c2C(O)OR^a2、NR^c2C(O)NR^c2R^d2、NR^c2S(O)₂R^b2、NR^c2S(O)₂NR^c2R^d2、S(O)₂R^b2和S(O)₂NR^c2R^d2；

R²为任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代的C_1-6烷基：卤基、CN、NO₂、OR^a2、C(O)R^b2、C(O)NR^c2R^d2、C(O)OR^a2、NR^c2R^d2 NR^c2C(O)R^b2、NR^c2C(O)OR^a2、NR^c2C(O)NR^c2R^d2、NR^c2S(O)₂R^b2、NR^c2S(O)₂NR^c2R^d2、S(O)₂R^b2和S(O)₂NR^c2R^d2；或

R¹和R²与其所连接的N一起形成4-7元杂环烷基，其任选地经1、2、3、4或5个独立选择的R⁸取代基取代；

每一R⁸独立地选自卤基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6卤烷基、CN、NO₂、OR^a2、C(O)R^b2、C(O)NR^c2R^d2、C(O)OR^a2、NR^c2R^d2、NR^c2C(O)R^b2、NR^c2C(O)OR^a2、NR^c2C(O)NR^c2R^d2、NR^c2S(O)₂R^b2、NR^c2S(O)₂NR^c2R^d2、S(O)₂R^b2和S(O)₂NR^c2R^d2；

R³是选自H、C_1-6烷基和C_1-6卤烷基；

R⁴是选自H、C_1-6烷基和C_1-6卤烷基；

Y是选自N、C和CR^A；

当R⁵与Y之间的键是单键时，R⁵为5-10元杂芳基，其任选地经1、2、3、4或5个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6卤烷基、OR^a3、SR^a3、C(O)R^b3、C(O)NR^c3R^d3、C(O)OR^a3、OC(O)R^b3、OC(O)NR^c3R^d3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3、NR^c3C(O)OR^a3、NR^c3C(O)NR^c3R^d3、NR^c3S(O)₂R^b3、NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3、S(O)₂R^b3和S(O)₂NR^c3R^d3；其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基各自任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、OR^a3、SR^a3、C(O)R^b3、C(O)NR^c3R^d3、C(O)OR^a3、OC(O)R^b3、OC(O)NR^c3R^d3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3、NR^c3C(O)OR^a3、NR^c3C(O)NR^c3R^d3、NR^c3S(O)₂R^b3、NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3、S(O)₂R^b3和S(O)₂NR^c3R^d3；

当R⁵与Y之间的键是双键时，R⁵为CR^BR^C；

R^B是选自H、C_1-6烷基和C_1-6卤烷基；

R^C是选自C_6-10芳基和5-10元杂芳基，其中的每一个任选地经1、2、3、4或5个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6卤烷基、OR^a3、SR^a3、C(O)R^b3、C(O)NR^c3R^d3、C(O)OR^a3、OC(O)R^b3、OC(O)NR^c3R^d3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3、NR^c3C(O)OR^a3、NR^c3C(O)NR^c3R^d3、NR^c3S(O)₂R^b3、NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3、S(O)₂R^b3和S(O)₂NR^c3R^d3；其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基各自任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、OR^a3、SR^a3、C(O)R^b3、C(O)NR^c3R^d3、C(O)OR^a3、OC(O)R^b3、OC(O)NR^c3R^d3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3、NR^c3C(O)OR^a3、NR^c3C(O)NR^c3R^d3、NR^c3S(O)₂R^b3、NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3、S(O)₂R^b3和S(O)₂NR^c3R^d3；或

R⁴和R⁵与R⁴所连接的Y和N一起形成5-14元杂芳基，其任选地经1、2、3、4或5个独立地选自R⁹的取代基取代；

每一R⁹独立地选自卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6卤烷基、OR^a3、SR^a3、C(O)R^b3、C(O)NR^c3R^d3、C(O)OR^a3、OC(O)R^b3、OC(O)NR^c3R^d3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3、NR^c3C(O)OR^a3、NR^c3C(O)NR^c3R^d3、NR^c3S(O)₂R^b3、NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3、S(O)₂R^b3和S(O)₂NR^c3R^d3；其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基各自任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、OR^a3、SR^a3、C(O)R^b3、C(O)NR^c3R^d3、C(O)OR^a3、OC(O)R^b3、OC(O)NR^c3R^d3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3、NR^c3C(O)OR^a3、NR^c3C(O)NR^c3R^d3、NR^c3S(O)₂R^b3、NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3、S(O)₂R^b3和S(O)₂NR^c3R^d3；

R⁶是选自H、C_1-6烷基和C_1-6卤烷基；或R⁶不存在；

每一R^a1、R^b1、R^a2、R^b2、R^a3和R^b3独立地选自H、C_1-6烷基、C_1-4卤烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自R^g的取代基取代；

每一R^c1、R^d1、R^c2、R^d2、R^c3和R^d3独立地选自H、C_1-6烷基、C_1-4卤烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C(O)R^b7、C(O)NR^c7R^d7、C(O)OR^a7、NR^c7R^d7、S(O)R^b7、S(O)NR^c7R^d7、S(O)₂R^b7和S(O)₂NR^c7R^d7；其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自R^g的取代基取代；

每一R^a7、R^b7、R^c7和R^d7独立地选自H、C_1-6烷基、C_1-4卤烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基和R^g，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自R^g的取代基取代；

或任何R^c1和R^d1与其所连接的N原子一起形成任选地经1、2或3个独立地选自R^g的取代基取代的4元、5元、6元或7元杂环烷基；

或任何R^c2和R^d2与其所连接的N原子一起形成任选地经1、2或3个独立地选自R^g的取代基取代的4元、5元、6元或7元杂环烷基；

或任何R^c3和R^d3与其所连接的N原子一起形成任选地经1、2或3个独立地选自R^g的取代基取代的4元、5元、6元或7元杂环烷基；

每一R^g独立地选自OH、NO₂、CN、卤基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-4卤烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤烷氧基、氰基-C_1-3亚烷基、HO-C_1-3亚烷基、氨基、C_1-6烷氨基、二(C_1-6烷基)氨基、硫基、C_1-6烷硫基、C_1-6烷基亚磺酰基、C_1-6烷基磺酰基、氨甲酰基、C_1-6烷基氨甲酰基、二(C_1-6烷基)氨甲酰基、羧基、C_1-6烷基羰基、C_1-6烷氧羰基、C_1-6烷基羰基氨基、C_1-6烷磺酰基氨基、氨基磺酰基、C_1-6烷基氨基磺酰基、二(C_1-6烷基)氨基磺酰基、氨基磺酰基氨基、C_1-6烷基氨基磺酰基氨基、二(C_1-6烷基)氨基磺酰基氨基、氨基羰基氨基、C_1-6烷基氨基羰基氨基和二(C_1-6烷基)氨基羰基氨基；

在一些实施例中，表示为的两个键都是单键。

在一些实施例中，表示为的一个键是单键，并且表示为的另一个键是双键。

在一些实施例中，X¹为N。在一些实施例中，X¹为CR^A。在一些实施例中，X²为N。在一些实施例中，X²为CR^A。在一些实施例中，X³为N。在一些实施例中，X³为CR^A。

在一些实施例中，R^A独立地选自H、卤基、C_1-6烷基和C_1-6卤烷基。在一些实施例中，R^A独立地选自H、C_1-6烷基和C_1-6卤烷基。在一些实施例中，R^A为H。

在一些实施例中，Ar为任选地经1、2或3个独立地选自R⁷的取代基取代的C_6-10芳基。在一些实施例中，Ar为苯基或萘基。

在一些实施例中，Ar为任选地经1、2或3个独立地选自R⁷的取代基取代的5-10元杂芳基。在一些实施例中，Ar为吡啶基(例如，吡啶-2-基)。

在一些实施例中，R⁷是选自卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a1、C(O)R^b1、C(O)NR^c1R^d1、C(O)OR^a1、NR^c1R^d1、NR^c1C(O)R^b1、NR^c1C(O)OR^a1、NR^c1S(O)₂R^b1、S(O)₂R^b1和S(O)₂NR^c1R^d1。

在一些实施例中，R⁷是选自卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a1、NR^c1R^d1、NR^c1C(O)R^b1和NR^c1S(O)₂R^b1；

在一些实施例中，R⁷是选自甲基、三氟甲基、甲氧基、氟、氯、溴、CN、NO₂、氨基、二甲氨基、NHC(O)CH₃和NHS(O)₂CH₃。在一些实施例中，Y为N。在这些实施例的一些方面中，表示为的键中的一个是双键，并且R⁶不存在。在这些实施例的其它方面中，表示为的两个键都是单键，并且R⁶存在并如本文所描述的。

在一些实施例中，表示为的键中的一个是双键，并且Y为C。在其它实施例中，表示为的两个键都是单键并且Y为CR^A。

在一些实施例中，R¹为H。在一些实施例中，R¹为任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代的C_1-6烷基：卤基、CN、NO₂、OR^a2、C(O)R^b2、C(O)NR^c2R^d2、C(O)OR^a2和NR^c2R^d2。在一些实施例中，R¹为任选地经OR^a2取代的C_1-6烷基。

在一些实施例中，R²为H。在一些实施例中，R²为任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代的C_1-6烷基：卤基、CN、NO₂、OR^a2、C(O)R^b2、C(O)NR^c2R^d2、C(O)OR^a2和NR^c2R^d2。在一些实施例中，R²为任选地经OR^a2取代的C_1-6烷基。

在一些实施例中，R¹为H并且R²为任选地经OR^a2取代的C_1-6烷基。在一些实施例中，R¹和R²各自独立地为任选地经OR^a2取代的C_1-6烷基。

在一些实施例中，R¹和R²一起形成任选地经1、2或3个独立选择的R⁸取代基取代的4-7元杂环烷基。

在一些实施例中，R¹和R²与其所连接的N一起形成选自以下的环：吗啉基、硫代吗啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、氮杂环丁基和3-氧杂-8-氮杂双环[3.2.1]辛基，其中的每一个任选地经1、2或3个独立选择的R⁸取代。

在一些实施例中，R¹和R²与其所连接的N一起形成下式的环：

在一些实施例中，R⁸是选自卤基、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、CN、NO₂、OR^a2、C(O)R^b2、C(O)NR^c2R^d2、C(O)OR^a2、NR^c2R^d2、NR^c2C(O)R^b2、NR^c2S(O)₂R^b2、S(O)₂R^b2和S(O)₂NR^c2R^d2。

在一些实施例中，R⁸是选自C_1-6烷基和OR^a2。在一些实施例中，R⁸是选自C_1-6烷基。在一些实施例中，R⁸为OH。在一些实施例中，R⁸为C_1-6烷氧基。

在一些实施例中，R³是选自H和C_1-6烷基。在一些实施例中，R⁴是选自H和C_1-6烷基。在一些实施例中，R³和R⁴各自为H。在一些实施例中，R³和R⁴中的一个为H且另一个为C_1-6烷基。

在一些实施例中，R⁵与Y之间的键是单键，R⁵为5-10元杂芳基，其任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、C(O)R^b3、C(O)NR^c3R^d3、C(O)OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3、NR^c3C(O)OR^a3、NR^c3S(O)₂R^b3、NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3、S(O)₂R^b3和S(O)₂NR^c3R^d3。

在一些实施例中，R⁵与Y之间的键是单键，R⁵为5-10元杂芳基，其任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3和NR^c3S(O)₂R^b3。

在一些实施例中，R⁵与Y之间的键是双键，R⁵为CR^BR^C。

在一些实施例中，R^B是选自H和C_1-6烷基。

在一些实施例中，R^B为H。

在一些实施例中，R^C为5-10元杂芳基，其任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3和NR^c3S(O)₂R^b3。

在一些实施例中，R^C是选自吲哚基、吡啶基、吡咯基和噻吩基，其中的每一个任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3和NR^c3S(O)₂R^b3。在一些实施例中，R^C是选自吲哚基、吡啶基、吡咯基和噻吩基，其中的每一个任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：甲基、三氟甲基、甲氧基、氟、氯、溴、CN、NO₂、氨基、二甲氨基、NHC(O)CH₃和NHS(O)₂CH₃。

在一些实施例中，R^C为吲哚基，其任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3和NR^c3S(O)₂R^b3。

在一些实施例中，R^C为吲哚基，其任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：甲基、三氟甲基、甲氧基、氟、氯、溴、CN、NO₂、氨基、二甲氨基、NHC(O)CH₃和NHS(O)₂CH₃。

在一些实施例中，R^C为C_6-10芳基，其任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3和NR^c3S(O)₂R^b3。在一些实施例中，R^C为苯基，其任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3和NR^c3S(O)₂R^b3。

在一些实施例中，R^C为苯基，其任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：甲基、三氟甲基、甲氧基、氟、氯、溴、CN、NO₂、氨基、二甲氨基、NHC(O)CH₃和NHS(O)₂CH₃。

在一些实施例中，R⁴和R⁵与R⁴所连接的Y和N一起形成5-14元杂芳基，其任选地经1、2或3个独立地选自R⁹的取代基取代。在一些实施例中，和R⁵与R⁴所连接的Y和N一起形成哒嗪基或吡唑基环，其中的每一个可以任选地与其它环稠合，并且任选地经1、2或3个独立地选自R⁹的取代基取代。

在一些实施例中，R⁹是选自卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-6卤烷基、OR^a3、SR^a3、C(O)R^b3、C(O)NR^c3R^d3、C(O)OR^a3、OC(O)R^b3、OC(O)NR^c3R^d3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3、NR^c3C(O)OR^a3、NR^c3C(O)NR^c3R^d3、NR^c3S(O)₂R^b3、NR^c3S(O)₂NR^c3R^d3、S(O)₂R^b3和S(O)₂NR^c3R^d3。

在一些实施例中，R⁹是选自卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、C(O)R^b3、C(O)NR^c3R^d3、C(O)OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3、NR^c3C(O)OR^a3、NR^c3S(O)₂R^b3、S(O)₂R^b3和S(O)₂NR^c3R^d3。

在一些实施例中，R⁹是选自卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3和NR^c3S(O)₂R^b3。

在一些实施例中，R^a1、R^c1和R^d1各自独立地选自H、C_1-6烷基和C_1-4卤烷基。在一些实施例中，每一R^b1独立地选自C_1-6烷基和C_1-4卤烷基。

在一些实施例中，R^a2、R^c2和R^d2各自独立地选自H、C_1-6烷基和C_1-4卤烷基。在一些实施例中，每一R^b2独立地选自C_1-6烷基和C_1-4卤烷基。在一些实施例中，每一R^a2是选自H和C_1-6烷基。

在一些实施例中，R^a3、R^c3和R^d3各自独立地选自H、C_1-6烷基和C_1-4卤烷基。在一些实施例中，每一R^b3独立地选自C_1-6烷基和C_1-4卤烷基。

在一些实施例中：

R¹、R³和R⁴各自为H；

R²为任选地经OR^a2取代的C_1-6烷基；

R^a2是选自H和C_1-6烷基。

R⁵与Y之间的键是双键；

Y为N；

R⁶不存在；

R⁵为CR^BR^c；

R⁷为C_1-6烷基；

R^B为H；并且

R^C为吲哚基。

在一些实施例中：

R¹和R²各自独立地选自任选地经OR^a2取代的C_1-6烷基；

R³和R⁴各自为H；

R^a2是选自H和C_1-6烷基；

R⁵与Y之间的键是双键；

Y为N；

R⁶不存在；

R⁵为CR^BR^c；

R⁷为C_1-6烷基；

R^B为H；并且

R^C为吲哚基。

在一些实施例中：

R¹和R²一起形成4-7元杂环烷基，其任选地经1、2或3个独立选择的R⁸取代基取代；

每一R⁸是选自C_1-6烷基和OR^a2；

R^a2是选自H和C_1-6烷基；

R³和R⁴各自为H；

R⁵与Y之间的键是双键；

Y为N；

R⁶不存在；

R⁵为CR^BR^C；

每一R⁷是选自卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a1、C(O)R^b1、C(O)NR^c1R^d1、C(O)OR^a1、NR^c1R^d1、NR^c1C(O)R^b1、NR^c1C(O)OR^a1、NR^c1S(O)₂R^b1、S(O)₂R^b1和S(O)₂NR^c1R^d1；

R^a1、R^c1和R^d1各自独立地选自H、C_1-6烷基和C_1-4卤烷基；

每一R^b1独立地选自C_1-6烷基和C_1-4卤烷基；

R^A是选自H、C_1-6烷基和C_1-6卤烷基；

R^B为H。

R^C为5-10元杂芳基，其任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a3、NR^c3R^d3、NR^c3C(O)R^b3和NR^c3S(O)₂R^b3；

R^a3、R^c3和R^d3各自独立地选自H、C_1-6烷基和C_1-4卤烷基；并且

每一R^b3独立地选自C_1-6烷基和C_1-4卤烷基。

在一些实施例中：

R¹和R²与其所连接的N一起形成选自以下的环：吗啉基、硫代吗啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、氮杂环丁基和3-氧杂-8-氮杂双环[3.2.1]辛基，其中的每一个任选地经1、2或3个独立选择的R⁸取代。

R⁸是选自C_1-6烷基和OR^a2；

R^a2是选自H和C_1-6烷基；

R³和R⁴各自为H；

R⁷是选自卤基、CN、NO₂、C_1-6烷基、C_1-6卤烷基、OR^a1、NR^c1R^d1、NR^c1C(O)R^b1和NR^c1S(O)₂R^b1；

R^a1、R^c1和R^d1各自独立地选自H、C_1-6烷基和C_1-4卤烷基；

每一R^b1独立地选自C_1-6烷基和C_1-4卤烷基；

R⁵与Y之间的键是双键；

Y为N；

R⁶不存在；

R⁵为CR^BR^C；

R^A为H；

R^B为H；并且

R^C是选自吲哚基、吡啶基、吡咯基和噻吩基，其中的每一个任选地经1或2个独立地选自以下的取代基取代：甲基、三氟甲基、甲氧基、氟、氯、溴、CN、NO₂、氨基、二甲氨基、NHC(O)CH₃和NHS(O)₂CH₃。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物不为：

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为：

或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式(I)化合物为表8中所提供的化合物中的任一个或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，式I化合物的盐形成于所述化合物的酸基与碱基之间，如氨基官能团，或所述化合物的碱基与酸基之间，如羧基官能团。根据另一个实施例，化合物为药学上可接受的酸加成盐。

在一些实施例中，通常用于形成式I化合物的药学上可接受的盐的酸包括无机酸，如二硫化氢、盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸和磷酸；以及有机酸，如对甲苯磺酸、水杨酸、酒石酸、二酒石酸、抗坏血酸、顺丁烯二酸、苯磺酸(besylic acid)、反丁烯二酸、葡糖酸、葡糖醛酸、甲酸、谷氨酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸(benzenesulfonic acid)、乳酸、草酸、对溴苯磺酸、碳酸、丁二酸、柠檬酸、苯甲酸和乙酸，以及相关的无机酸和有机酸。此类药学上可接受的盐因此包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、单氢磷酸盐、二氢磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、癸酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、反丁烯二酸盐、顺丁烯二酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己炔-1,6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、对苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸酯、β-羟基丁酸盐、羟乙酸盐、顺丁烯二酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸盐和其它盐。在一个实施例中，药学上可接受的酸加成盐包括与矿物酸(如盐酸和氢溴酸)形成的那些酸加成盐，并且尤其是与有机酸(如顺丁烯二酸)形成的那些酸加成盐。

在一些实施例中，通常用于形成式I化合物的药学上可接受的盐的碱包括碱金属氢氧化物，包括钠、钾和锂；碱土金属氢氧化物，如钙和镁；其它金属氢氧化物，如铝和锌；氨，有机胺，如未经取代或经羟基取代的单烷基胺、二烷基胺或三烷基胺、二环己胺；三丁胺；吡啶；N-甲基、N-乙胺；二乙胺；三乙胺；单-(2-OH-(C1-C6)-烷基胺)、双-(2-OH-(C1-C6)-烷基胺)或三-(2-OH-(C1-C6)-烷基胺)，如N,N-二甲基-N-(2-羟乙基)胺或三-(2-羟乙基)胺；N-甲基-D-葡糖胺；吗啉；硫代吗啉；哌啶；吡咯烷；以及氨基酸，如精氨酸、赖氨酸等。

在一些实施例中，基本上分离式I化合物或其药学上可接受的盐。

制备方法

式(I)化合物(包括其盐)可以使用已知的有机合成技术制备并且可以根据许多可能的合成途径中的任一种合成。本领域的技术人员知道如何选择和实施适当的合成方案，并且了解，可在合成本文所提供的化合物中潜在地采用合成有机反应的广泛全套。

起始物质、中间物和产物的适合的合成方法可以参考文献来鉴别，所述文献包括如以下的参考来源：杂环化学物质发展(Advances in Heterocyclic Chemistry),第1-107卷(Elsevier,1963-2012)；杂环化学物质期刊(Journal of Heterocyclic Chemistry)第1-49卷(杂环化学物质期刊,1964-2012)；Carreira等人(编)合成科学(Science ofSynthesis),第1-48卷(2001-2010)和知识更新KU2010/1-4；2011/1-4；2012/1-2(Thieme,2001-2012)；Katritzky等人(编)综合有机官能团转化(Comprehensive OrganicFunctional Group Transformations),(帕加蒙出版社(Pergamon Press,1996)；Katritzky等人(编)；综合有机官能团转化II(Elsevier,第2版,2004)；Katritzky等人(编),综合杂环化学物质(Comprehensive Heterocyclic Chemistry)(帕加蒙出版社,1984)；Katritzky等人,综合杂环化学物质II,(帕加蒙出版社,1996)；Smith等人,马奇高级有机化学:反应、机理和结构(March's Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure),第6版(Wiley,2007)；Trost等人(编),综合有机合成(Comprehensive Organic Synthesis)(帕加蒙出版社,1991)。

用于制备本文所提供的化合物的反应可以在可以由有机合成领域的技术人员容易地选择的适合的溶剂中进行。适合的溶剂可以在反应进行的温度下，例如在从溶剂的冷冻温度到溶剂的沸腾温度范围内的温度下基本上不与起始物质(反应物)、中间物或产物反应。给定反应可以在一种溶剂或超过一种溶剂的混合物中进行。取决于特定反应步骤，用于特定反应步骤的适合的溶剂可以由熟练技术人员选择。

本文所提供的化合物的制备可以涉及各种化学基团的保护和脱保护。对于保护和脱保护的需求，以及适当保护基的选择可以由本领域技术人员容易地确定。可以在例如以下中找到保护基的化学物质：P.G.M.Wuts和T.W.Greene,有机合成中的保护基(ProtectiveGroups in Organic Synthesis),第4版,威利父子公司(Wiley&Sons,Inc.),纽约(NewYork)(2006)。

使用方法

癌症

在一些实施例中，本公开的化合物在活体外、活体内或离体抑制磷脂酰肌醇-3-磷酸5-激酶III型(PIKfyve)。细胞中的PIKfyve的抑制诱导细胞质液泡化和随后细胞死亡。细胞死亡和存活中的细胞质液泡化的作用描述于例如Oncotarget,2016,7(34),55863-55889中。也就是说，化合物可以用于诱导癌细胞死亡。因此，在一些实施例中，本申请提供一种治疗个体的癌症的方法，其包含向个体投与治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，方法包括鉴别需要癌症治疗的个体的步骤。这一步骤可以包括由治疗医师诊断患有癌症的个体。

在一些实施例中，癌症是选自选自以下的群组：肉瘤、血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤、粘液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂肪瘤、畸胎瘤(teratoma)、肺癌、乳腺癌、鳞状细胞支气管癌、未分化的小细胞、未分化的大细胞、腺癌、肺泡细支气管癌、支气管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、软骨瘤性错构瘤(chondromatous hamartoma)、间皮瘤、胃肠癌、食道癌、鳞状细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤、胃癌、癌瘤、淋巴瘤、平滑肌肉瘤、胰腺癌、胰腺导管腺癌(ductal adenocarcinoma)、胰岛素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤(carcinoidtumor)、血管活性肠肽瘤、小肠癌、腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、卡波西肉瘤(Kaposi's sarcoma)、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤、大肠或结肠癌、管状腺瘤、绒毛腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤、泌尿生殖道癌(genitourinary tract cancer)、肾脏癌、腺癌、威尔姆瘤(Wilm's tumor)(肾胚细胞瘤)、淋巴瘤、白血病、膀胱癌、尿道癌、鳞状细胞癌、移行细胞癌(transitional cell carcinoma)、前列腺癌、睾丸癌、精原细胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌瘤、畸胎癌瘤、绒膜癌、肉瘤、间质细胞癌瘤、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤(adenomatoid tumor)、脂肪瘤、肝癌、肝癌肝细胞癌(hepatoma hepatocellular carcinoma)、胆管癌、肝母细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞腺瘤、血管瘤、骨癌、骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、软骨肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)、恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、恶性巨细胞瘤、脊索瘤、骨软骨瘤(osteochrondroma)(骨软骨外生骨疣(osteocartilaginous exostoses))、良性软骨瘤、软骨母细胞瘤、软骨黏液样纤维瘤、骨样骨瘤巨细胞瘤、神经系统癌、颅骨癌、骨瘤、血管瘤、肉芽肿瘤、黄瘤、畸形性骨炎(osteitisdeformans)、脑膜脑膜瘤癌、脑膜肉瘤(meningiosarcoma)、神经胶质瘤病、脑癌、星形细胞瘤、髓母细胞瘤、胶质瘤、室管膜瘤(ependymoma)、胚细胞瘤(松果体瘤(pinealoma))、多形性胶质母细胞瘤、少突神经胶质瘤、神经鞘瘤、视网膜母细胞瘤、先天性肿瘤、脊髓癌、神经纤维瘤、脑膜瘤、胶质瘤、肉瘤、妇科癌症、子宫癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、宫颈癌、肿瘤前宫颈非典型增生(pre tumor cervical dysplasia)、卵巢癌、卵巢癌瘤、浆液性囊腺癌(serous cystadenocarcinoma)、黏液性囊腺癌、未分类的癌瘤、粒层-卵泡膜细胞瘤(granulosa-theca cell tumor)、塞特利氏莱迪希细胞瘤(Sertoli Leydig cell tumor)、无性细胞瘤、恶性畸胎瘤、外阴癌、鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑素瘤、阴道癌、透明细胞癌瘤(clear cell carcinoma)、鳞状细胞癌、葡萄样肉瘤、胚胎横纹肌肉瘤、输卵管癌、血液癌症、血液癌、淋巴母细胞性白血病、急性骨髓性白血病(acute myeloidleukemia；AML)、慢性骨髓性白血病(chronic myeloid leukemia；CML)、急性淋巴母细胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia；ALL)、慢性淋巴母细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、骨髓增生疾病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndrome)、淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、非霍奇金淋巴瘤(恶性淋巴瘤)、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症(Waldenstrom's macroglobulinemia)、皮肤癌、恶性黑素瘤、基底细胞癌、结肠直肠癌、鳞状细胞癌、卡波西肉瘤、痣发育异常痣、脂肪瘤、结肠直肠癌瘤、骨肉瘤、胰腺癌、血管瘤(angioma)皮肤纤维瘤、瘢痕瘤、肾上腺癌症和神经母细胞瘤。在一些实施例中，癌症是淋巴母细胞性白血病、淋巴瘤、结肠直肠癌、多形性胶质母细胞瘤(GBM)、髓母细胞瘤、结肠直肠癌瘤、骨肉瘤或胰腺癌。

发炎

在一些实施例中，本发明的化合物活体外、活体内或离体遏制IL12和/或IL23产生。细胞中的IL12/23的抑制降低发炎疾病或病状的病变。因此，本申请的化合物适用于治疗或预防发炎病症或减轻与这些病症相关的症状。此类病症包括败血症(例如，急性败血症)、秃头症、听力丧失综合征、痛风、关节炎、类风湿性关节炎、硬化症、炎症性肠病、强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis；AS)、抗磷脂抗体综合征(APS)、肌炎、硬皮病、舍格伦综合征(Sjogren's syndrome)、全身性红斑性狼疮症、血管炎、家族性地中海热、新生儿发病的多系统发炎疾病(neonatal onset multisystem inflammatory disease)、贝氏病(Behqet's disease)、皮肤病、1型糖尿病、自身免疫病、牛皮癣、牛皮癣性关节炎、多发性硬化、爱迪生氏病(Addison's disease)、格雷夫斯病(Graves'disease)、桥本甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis)、重症肌无力、恶性贫血、乳糜泻、慢性炎症、风湿、脑脊髓炎、感染后小脑炎(postinfectious cerebellitis)、视神经脊髓炎(例如，德维克病(Devicdisease))、脑炎、代谢脑病、哮喘、牙周炎、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、鼻窦炎和消化性溃疡。与发炎病症相关的症状通常包括慢性疼痛、发红、关节和其它组织的肿胀、僵硬、发热、器官中血液蛋白质的积聚、脱发、疲乏和对正常组织的损伤。本申请的化合物适用于减轻这些症状。

在一个实例中，IL12/23-T辅助子17路径作为牛皮癣性发炎的介体。阿匹莫德为最初在用于IL-12的抑制剂的高通量筛选中发现的脂质激酶PIKfyve的小分子抑制剂：

阿匹莫德遏制由骨髓细胞产生的IL12和IL23，并且经口投与遏制小鼠中的TH1而非TH2响应。向小鼠经口投与显著减少发炎组织病理学皮肤变化并且减小由离体细胞产生的IFN-γ。在患有稳定寻常型牛皮癣皮肤斑的人类中的临床试验(参见Wada,Y.等人,阿匹莫德抑制IL-12和IL-23产生并且减少牛皮癣的树突状细胞浸润(Apilimod inhibits theproduction of IL-12 and IL-23 and reduces dendritic cell infiltration inpsoriasis.)公共科学图书馆·综合(PLoS One),2012.7(4):第e35069页)发现阿匹莫德的经口投与引起疾病活性的组织结构和临床测量结果的相当大的改善。皮肤病变中的IL12和IL23表达显著降低。在最高剂量水平(每日一次70mg)下，47％的患者具有组织学改善，并且PASI(牛皮癣面积和严重度指数)得分有46％的平均改善。然而，移动到新II期试验的截止值不符合，并且作者将不充分响应(其比静脉内药剂优特克单抗(ustekinumab))归因于不能够达到足够药物水平。阿匹莫德具有在每日两次105mg下的剂量限制毒性(归因于头痛、面红、感觉迟钝、头晕、感觉异常)。如本申请中所展示，实例3更确切地说甚至比阿匹莫德更靶向PIKfyve，并且在阻断IL12/23分泌方面比阿匹莫德更有效并且毒性更低。因此，本公开的化合物可以为患有牛皮癣和其它发炎病状(例如，其中涉及IL12/23)的人类的有效经口治疗。

组合治疗

在一些实施例中，治疗个体的癌症或发炎疾病或病状的方法还包含向个体投与额外治疗剂或其药学上可接受的盐。在这个方法中，式(I)化合物和额外治疗剂可以同时(例如以相同剂型或以独立剂型)或连续(例如其它治疗剂可以在式(I)化合物或其药学上可接受的盐之前或之后投与)向个体投与。

额外治疗剂的适合实例包括抗HER2剂(例如曲妥珠单抗(trastuzumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、拉帕替尼(lapatinib))、疼痛缓解剂(例如非类固醇消炎药，如塞内昔布(celecoxib)或罗非昔布(rofecoxib))、止吐剂或额外抗癌剂(例如太平洋紫杉醇、欧洲紫杉醇、道诺霉素(daunorubicin)、表柔比星(epirubicin)、氟尿嘧啶、美法仑(melphalan)、顺铂、卡铂、环磷酰胺、丝裂霉素(mitomycin)、甲氨蝶呤、米托蒽醌、长春碱、长春新碱、异环磷酰胺、替尼泊苷(teniposide)、依托泊苷(etoposide)、博莱霉素(bleomycin)、甲酰四氢叶酸、紫杉醇、赫赛汀(herceptin)、阿瓦斯汀(avastin)、阿糖胞苷(cytarabine)、放线菌素(dactinomycin)、干扰素α、链脲霉素(streptozocin)、泼尼松龙(prednisolone)、伊立替康(irinotecan)、舒林酸(sulindac)、5-氟尿嘧啶、卡培他滨(capecitabine)、奥沙利铂(oxaliplatin)/5FU、阿比特龙(abiraterone)、来曲唑(letrozole)、5-氮杂/罗米地辛(romidepsin)或甲基苄肼)。额外治疗剂的其它实例包括多吉美(nexavar)、舒尼替尼(sutent)、驮瑞塞尔(torisel)、飞尼妥(afinitor)(依维莫司(everolimus))、阿西替尼(axitinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、乐伐替尼(levatinib)、白细胞介素-2和其组合。在一些实施例中，治疗个体的癌症的方法还包含向个体投与蛋白酶体抑制剂。示例性蛋白酶体抑制剂包括乳胞素(lactacystin)、硼替佐米(bortezomib)、双硫仑、盐孢菌酰胺A、卡非佐米(carfilzomib)、ONX0912、CEP-18770、MLN9708、环氧酶素(epoxomicin)和MG132。蛋白酶体抑制剂的非限制性实例包括马瑞佐米(marizomib)(NPI-0052)、硼替佐米和卡非佐米在一些实施例中，额外治疗剂为BRAF-V600E抑制剂(例如，维罗非尼)。

在一些实施例中，额外治疗剂包括消炎剂。适合的实例包括非类固醇消炎药(NSAID)，如塞内昔布、罗非昔布、布洛芬、萘普生、阿司匹林、双氯芬酸、舒林酸、奥沙普嗪、吡罗昔康(piroxicam)、吲哚美辛(indomethacin)、美洛昔康(meloxicam)、非诺洛芬(fenoprofen)、二氟尼柳(diflunisal)、甲氨蝶呤、BAY 11-7082或其药学上可接受的盐。类固醇消炎剂的适合实例包括皮质醇、皮质酮、氢皮质酮、醛固酮、脱氧皮质酮、曲安奈德(triamcinolone)、巴多索隆(bardoxolone)、甲基巴多索隆、曲安奈德、可的松(cortisone)、泼尼松(prednisone)和甲基泼尼松龙，或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，消炎剂是选自：伊珠单抗(ixekizumab)、苏金单抗(secukinumab)(抗IL17A)、古塞库单抗(guselkumab)(抗IL23)、TNF抑制剂(阿达木单抗(adalimumab)、依那西普(etanercypt)、英利昔单抗(infliximab)和优特克单抗(抗IL12/23)。本申请的化合物还可以与非特异性免疫抑制剂组合使用，包括光照疗法、激光暴露、环孢霉素和甲氨蝶呤。

药物组合物

本申请还提供药物组合物，其包含有效量的本文所公开的式(I)化合物或其药学上可接受的盐；以及药学上可接受的载体。药物组合物还可以包含本文所描述的额外治疗剂中的任一种(例如，维罗非尼)。在某些实施例中，本申请还提供包含本文所描述的额外治疗剂中的任一种的药物组合物和剂型。载体在与调配物的其它成分相容的意义上为“可接受的”，并且在药学上可接受的载体的情况下，以药剂中所使用的量对其接受者无害。

可以用于本申请的药物组合物中的药学上可接受的载体、佐剂和媒剂包括(但不限于)：离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白质(如人类血清白蛋白)、缓冲物质(如磷酸酯)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质(如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶态二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素基物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸盐、蜡、聚乙烯-聚氧化丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂)。

组合物或剂型可以含有在0.005％到100％范围内的本文所描述的化合物和治疗剂中的任一种，其中其余部分由适合的药学上可接受的赋形剂制成。考虑组合物可以含有0.001％-100％本文所提供的化合物和治疗剂中的任一种，在一个实施例中，0.1％-95％；在另一实施例中，75％-85％；在另一实施例中，20％-80％，其中其余部分可以由本文所描述的任何药学上可接受的赋形剂或这些赋形剂的任何组合制成。

投与途径和剂型

本申请的药物组合物包括适用于任何可接受的投与途径的那些。可接受的投与途径包括(但不限于)：经颊、皮肤、子宫颈内、鼻窦内、气管内、经肠、硬膜外、间质、腹内、动脉内、支气管内、囊内、脑内、脑池内、冠状动脉内、皮内、管内、十二指肠内、硬膜内、表皮内、食道内、胃内、龈内、回肠内、淋巴管内、髓内、脑膜内、肌肉内、鼻内、卵巢内、腹膜内、前列腺内、肺内、窦内、脊柱内、滑膜内、睾丸内、鞘内、小管内、瘤内、子宫内、血管内、静脉内、经鼻、鼻饲、经口、非经肠、经皮、硬膜外、经直肠、经呼吸道(吸入)、皮下、舌下、粘膜下层、局部、经皮、经粘膜、经气管、经输尿管、经尿道和经阴道。

本文所描述的组合物和调配物可以单位剂型，例如片剂、持续释放胶囊和脂质体呈现，并且可以通过药学领域中熟知的任何方法制备。参见例如雷明顿：药学科学和实践(Remington:The Science and Practice of Pharmacy),利平科特威廉姆斯和维尔金斯出版社(Lippincott Williams&Wilkins),马里兰州巴尔的摩(Baltimore,MD)(第20版2000)。此类制备方法包括使如构成一或多种辅助成分的载体的成分与待投与的分子缔合的步骤。一般来说，通过使活性成分与液体载体、脂质体或细粉状固体载体或两者均匀且紧密缔合并且随后必要时使产物成形来制备组合物。

在一些实施例中，本文所公开的化合物和治疗剂中的任一种是经口投与。适用于经口投与的本申请的组合物可以以离散单元，如各自含有预定量(例如，有效量)的活性成分的胶囊、小药囊(sachet)、颗粒或片剂；粉末或颗粒；水性液体或非水性液体中的溶液或悬浮液；水包油型液体乳剂；油包水型液体乳剂；填充脂质体；或作为大丸剂等存在。软明胶胶囊可以适合于含有此类悬浮液，其可有利地增加化合物吸收的速率。在用于经口使用的片剂的情况下，常用载体包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇，以及硅酸和淀粉。其它可接受的赋形剂可以包括：a)填充剂或增充剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂，如甘油；d)崩解剂，如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂，如石蜡；f)吸收加速剂，如季铵化合物；g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸收剂，如高岭土和膨润土；以及i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和其混合物。对于以胶囊形式经口投与，适用的稀释剂包括乳糖和无水玉米淀粉。当经口投与水性悬浮液时，活性成分与乳化剂和悬浮剂组合。如果需要，可以添加某些甜味剂和/或调味剂和/或着色剂。适用于经口投与的组合物包括口含锭，其包含调味基础上的成分，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍；和片剂，其包含惰性基础上的活性成分，如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶。

适用于非经肠投与的组合物包括：水性和非水性无菌注射溶液或输注溶液，所述溶液可以含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和呈现与预期接受者的血液等张的调配物的溶质；以及水性和非水性无菌悬浮液，所述悬浮液可以包括悬浮剂和增稠剂。调配物可以单位剂量或多剂量容器(例如密封安瓿和小瓶)呈现，并且可以存储在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需要在使用前立即添加无菌液体载体，例如注射用水、生理盐水(例如0.9％生理盐水溶液)或5％右旋糖溶液。可以由无菌粉末、颗粒和片剂制备即用型注射溶液和悬浮液。注射溶液可以呈例如无菌可注射水性或油性悬浮液的形式。这种悬浮液可以根据本领域中已知的技术使用适合的分散剂或润湿剂和悬浮剂来调配。无菌可注射制剂还可以是非毒性的非经肠可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如作为1.3-丁二醇中的溶液。可以采用的可接受的媒剂和溶剂为甘露醇、水、林格氏溶液(Ringer's solution)和等张氯化钠溶液。另外，无菌不挥发性油通常用作溶剂或悬浮介质。出于这个目的，可以采用任何温和的不挥发性油，包括合成单甘油酯或二甘油酯。如油酸的脂肪酸和其甘油酯衍生物如天然的药学上可接受的油(如橄榄油或蓖麻油，尤其呈其聚氧乙基化形式)般适用于制备可注射剂。这些油溶液或悬浮液也可以含有长链醇稀释剂或分散剂。

对于经直肠投与，本申请的药物组合物可以栓剂形式投与。这些组合物可以通过将本申请的化合物与适合的无刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在室温下呈固体但在直肠温度下呈液体，并且因此将在直肠中融化以释放活性组分。此类材料包括(但不限于)：可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。

本申请的药物组合物可以通过鼻用喷雾剂或吸入投与。此类组合物是根据药物调配物领域中所熟知的技术制备，并且可以采用苯甲醇或其它适合的防腐剂、增强生物可用性的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其它本领域中已知的增溶剂或分散剂，制备为于生理盐水中的溶液。参见例如美国专利第6,803,031号。用于鼻内投与的额外调配物和方法发现于Ilium,L.,药学杂志(JPharm Pharmacol),56:3-17,2004和Ilium,L.,欧洲药学杂志(Eur JPharm Sci)11:1-18,2000中。

可以制备本公开的局部组合物并且以局部投与和/或美容和护肤调配物领域中常用的喷雾剂喷雾、乳膏、乳液、固体、液体、分散液、泡沫、油、凝胶、水凝胶、洗剂、摩丝、软膏、粉末、贴片、发蜡、溶液、泵喷雾、棒条、小毛巾、肥皂形式或其它形式使用。局部组合物可以呈乳液形式。当所期望的治疗涉及容易通过局部施用进入的区域或器官时，局部投与本申请的药物组合物是尤其适用的。在一些实施例中，局部组合物包含本文所公开的化合物和治疗剂中的任一种的组合，和一或多种额外成分、载体、赋形剂或稀释剂，包括(但不限于)：吸收剂、抗刺激剂、抗痤疮剂、防腐剂、抗氧化剂、着色剂/颜料、润滑剂(保湿剂)、乳化剂、成膜/保持剂、芳香剂、免洗去角质剂、处方药物、防腐剂、洗涤剂、硅酮、亲肤/修复剂、增滑剂、防晒活性剂、表面活性剂/清洁剂、渗透促进剂和增稠剂。

本申请的化合物和治疗剂可以并入到用于涂布可植入医疗装置的组合物中，所述可植入医疗装置如假体、人造瓣膜、血管移植物、支架或导管。适合的包衣和被涂布的可植入装置的通用制备为本领域中已知的并且在美国专利第6,099,562号；第5,886,026号和第5,304,121号中例示。包衣通常为生物相容性聚合材料，如水凝胶聚合物、聚甲基二硅氧烷、聚己内酯、聚乙二醇、聚乳酸、乙烯乙酸乙烯酯和其混合物。包衣还可以任选地被适合的氟硅酮、多糖、聚乙二醇、磷脂或其组合的最外包衣覆盖，从而在组合物中赋予控制释放特性。用于浸润性装置的包衣将包括在药学上可接受的载体、佐剂或媒剂的定义内，因为本文使用了那些术语。

根据另一实施例，本申请提供一种浸渍有或含有化合物或治疗剂，或包含本申请的化合物或治疗剂的组合物的可植入药物释放装置，使得所述化合物或治疗剂从所述装置释放并且在治疗上具有活性。

剂量和方案

在本申请的药物组合物中，式(I)化合物以有效量(例如治疗有效量)存在。

有效剂量可以不同，取决于所治疗的疾病；疾病的严重程度；投与途径；个体的性别、年龄和一般健康状况；赋形剂使用；与其它治疗性治疗(如使用其它药剂)的共使用的可能性；以及治疗医师的判断。

在一些实施例中，式(I)化合物的有效量可以在例如约0.001mg/kg到约500mg/kg(例如约0.001mg/kg到约200mg/kg；约0.01mg/kg到约200mg/kg；约0.01mg/kg到约150mg/kg；约0.01mg/kg到约100mg/kg；约0.01mg/kg到约50mg/kg；约0.01mg/kg到约10mg/kg；约0.01mg/kg到约5mg/kg；约0.01mg/kg到约1mg/kg；约0.01mg/kg到约0.5mg/kg；约0.01mg/kg到约0.1mg/kg；约0.1mg/kg到约200mg/kg；约0.1mg/kg到约150mg/kg；约0.1mg/kg到约100mg/kg；约0.1mg/kg到约50mg/kg；约0.1mg/kg到约10mg/kg；约0.1mg/kg到约5mg/kg；约0.1mg/kg到约2mg/kg；约0.1mg/kg到约1mg/kg；或约0.1mg/kg到约0.5mg/kg)范围内。

在一些实施例中，式(I)化合物的有效量为约0.1mg/kg、约0.5mg/kg、约1mg/kg、约2mg/kg或约5mg/kg。

前述剂量可以每天投与(例如，以单剂或以两次或更多次分次剂量，例如，每天一次、每天两次、每天三次)或非每天投与(例如，每隔一天、每两天、每三天、每周一次、每周两次、每两周一次、每月一次)。

试剂盒

本发明还包括适用于例如治疗本文所提及的病症、疾病和病状的药物试剂盒，其包括一或多个含有药物组合物的容器，所述药物组合物包含治疗有效量的本公开的化合物。如果需要，此类试剂盒可以进一步包括各种常规药物试剂盒组件中的一或多个，例如具有一或多种药学上可接受的载体的容器、额外容器等。试剂盒中还可以包括作为插入物或标签的说明书，指示待投与的组分的量、投与指南和/或将组分混合的指南。所述试剂盒可以任选地包括本文所描述的量和剂型中的任一种的本文所描述的额外治疗剂(例如维罗非尼)或其药学上可接受的盐中的任一种。

定义

如本文所用，术语“EC₅₀(μM)”是指在液泡化分析中50％活性所需的化合物的μM浓度。

如本文所用，术语“约”意味着“大致”(例如，加上或减去指示值的大致10％)。

在本说明书中的各种地方，本发明化合物的取代基以群组或范围形式公开。特别期望的是，本发明包括此类群组和范围的成员的每一个和每一个别子组合。举例来说，术语“C_1-6烷基”特别希望是个别地公开的甲基、乙基、C₃烷基、C₄烷基、C₅烷基和C₆烷基。

在本说明书中的各种地方，描述各种芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基环。除非另外说明，否则这些环可以如原子价所准许的在任何环成员处连接到分子的其余部分。举例来说，术语“吡啶环”或“吡啶基”可以指吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基环。

另外应了解，为了清楚起见，在单独实施例的上下文中所描述的本发明的某些特征还可以提供于单一实施例中的组合中。相反，为简洁起见，在单一实施例的上下文中所描述的本发明的各种特征也可以单独地或以任何适合的子组合形式提供。

术语“芳香族”是指具有一或多个具有芳香族特征的多元不饱和环(即，具有(4n+2)离域n(π)电子，其中n是整数)的碳环或杂环。

术语“n-元”(其中n是整数)通常描述在环形成原子的数目为n的部分中的环形成原子的数目。举例来说，哌啶基是6元杂环烷基环的实例，吡唑基是5元杂芳基环的实例，吡啶基是6元杂芳基环的实例，并且1,2,3,4-四氢-萘是10元环烷基的实例。

如本文所用，短语“任选地经取代的”意味着未经取代或经取代。独立地选择取代基，并且取代基可处于任何化学上可进入的位置。如本文所用，术语“经取代的”是指氢原子被去除并且被取代基置换。单一二价取代基(例如侧氧基)可以置换两个氢原子。应理解，在给定原子处的取代受原子价限制。

在整个定义中，术语“Cn-m”指示包括端点的范围，其中n和m是整数并且指示碳原子的数目。实例包括C_1-4、C_1-6等。

如本文所用，单独或与其它术语组合使用的术语“Cn-m烷基”是指可以为直链或支链、具有n到m个碳原子的饱和烃基。烷基部分的实例包括(但不限于)：化学基团，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基；高碳数同系物，如2-甲基-1-丁基、正戊基、3-戊基、正己基、1,2,2-三甲基丙基等。在一些实施例中，烷基含有1到6个碳原子、1到4个碳原子、1到3个碳原子或1到2个碳原子。

如本文所用，单独或与其它术语组合使用的术语“C_n-m卤烷基”是指具有一个卤素原子到2s+l个卤素原子的烷基，所述卤素原子可以相同或不同，其中“s”是烷基中的碳原子数，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，卤烷基仅氟化。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，“C_n-m烯基”是指具有一或多个双碳-碳键并且具有n到m个碳原子的烷基。实例烯基包括(但不限于)：乙烯基、正丙烯基、异丙烯基、正丁烯基、仲丁烯基等。在一些实施例中，烯基部分含有2到6个、2到4个或2到3个碳原子。

如本文所用，“C_n-m炔基”是指具有一或多个三碳-碳键并且具有n到m个碳原子的烷基。实例炔基包括(但不限于)：乙炔基、丙炔-1-基、丙炔-2-基等。在一些实施例中，炔基部分含有2到6个、2到4个或2到3个碳原子。

如本文所用，单独或与其它术语组合使用的术语“C_n-m亚烷基”是指具有n到m个碳原子的二价烷基连接基团。亚烷基的实例包括(但不限于)：乙-1,1-二基、乙-1,2-二基、丙-1,1-二基、丙-1,3-二基、丙-1,2-二基、丁-1,4-二基、丁-1,3-二基、丁-1,2-二基、2-甲基-丙-1,3-二基等。在一些实施例中，亚烷基部分含有2到6个、2到4个、2到3个、1到6个、1到4个或1到2个碳原子。

如本文所用，单独或与其它术语组合使用的术语“C_n-m烷氧基”是指式-O-烷基的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。实例烷氧基包括(但不限于)：甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如，正丙氧基和异丙氧基)、丁氧基(例如，正丁氧基和叔丁氧基)等。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，“C_n-m卤烷氧基”是指具有n到m个碳原子的式-O-卤烷基的基团。实例卤烷氧基是OCF₃。在一些实施例中，卤烷氧基仅氟化。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“氨基”是指式-NH₂的基团。

如本文所用，术语“C_n-m烷氨基”是指式-NH(烷基)的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。烷氨基的实例包括(但不限于)：N-甲氨基、N-乙氨基、N-丙氨基(例如，N-(正丙基)氨基和N-异丙基氨基)、N-丁氨基(例如，N-(正丁基)氨基和N-(叔丁基)氨基)等。

如本文所用，术语“二(C_n-m烷基)氨基”是指式-N(烷基)₂的基团，其中两个烷基各自独立地具有n到m个碳原子。在一些实施例中，每一烷基独立地具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“C_n-m烷氧羰基”是指式-C(O)O-烷基的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。烷氧羰基的实例包括(但不限于)：甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基(例如，正丙氧羰基和异丙氧羰基)、丁氧羰基(例如，正丁氧基羰基和叔丁氧羰基)等。

如本文所用，术语“C_n-m烷基羰基”是指式-C(O)-烷基的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。烷基羰基的实例包括(但不限于)：甲基羰基、乙基羰基、丙基羰基(例如，正丙基羰基和异丙基羰基)、丁基羰基(例如，正丁基羰基和叔丁基羰基)等。

如本文所用，术语“C_n-m烷基羰基氨基”是指式-NHC(O)-烷基的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“C_n-m烷磺酰基氨基”是指式-NHS(O)₂-烷基的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“氨基磺酰基”是指式S(O)₂NH₂的基团。

如本文所用，术语“C_n-m烷基氨基磺酰基”是指式-S(O)₂NH(烷基)的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“二(C_n-m烷基)氨基磺酰基”是指式-S(O)₂N(烷基)₂的基团，其中每一烷基独立地具有n到m个碳原子。在一些实施例中，每一烷基独立地具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“氨基磺酰基氨基”是指式-NHS(O)₂NH₂的基团。

如本文所用，术语“C_n-m烷基氨基磺酰基氨基”是指式-NHS(O)₂NH(烷基)的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“二(C_n-m烷基)氨基磺酰基氨基”是指式-NHS(O)₂N(烷基)₂的基团，其中每一烷基独立地具有n到m个碳原子。在一些实施例中，每一烷基独立地具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，单独或与其它术语组合使用的术语“氨基羰基氨基”是指式-NHC(O)NH₂的基团。

如本文所用，术语“C_n-m烷基氨基羰基氨基”是指式-NHC(O)NH(烷基)的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“二(C_n-m烷基)氨基羰基氨基”是指式-NHC(O)N(烷基)₂的基团，其中每一烷基独立地具有n到m个碳原子。在一些实施例中，每一烷基独立地具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“氨甲酰基”是指式C(O)NH₂的基团。

如本文所用，术语“C_n-m烷基氨甲酰基”是指式-C(O)-NH(烷基)的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“二(C_n-m烷基)氨甲酰基”是指式-C(O)N(烷基)₂的基团，其中两个烷基各自独立地具有n到m个碳原子。在一些实施例中，每一烷基独立地具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“硫基”是指式-SH的基团。

如本文所用，术语“C_n-m烷硫基”是指式-S-烷基的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“C_n-m烷基亚磺酰基”是指式-S(O)-烷基的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，术语“C_n-m烷基磺酰基”是指式-S(O)₂-烷基的基团，其中烷基具有n到m个碳原子。在一些实施例中，烷基具有1到6个、1到4个或1到3个碳原子。

如本文所用，单独或与其它术语组合使用的术语“羰基”是指-C(＝O)-基团，其也可以写成C(O)。

如本文所用，术语“羧基”是指-C(O)OH基团。

如本文所用，术语“氰基-C_1-3烷基”是指式-(C_1-3亚烷基)-CN的基团。

如本文所用，术语“HO-C_1-3烷基”是指式-(C_1-3亚烷基)-OH的基团。

如本文所用，“卤基”是指F、Cl、Br或I。在一些实施例中，卤基是F、Cl或Br。

如本文所用，单独或与其它术语组合使用的术语“芳基”是指芳香族烃基，其可以是单环或多环的(例如，具有2、3或4个稠环)。术语“C_n-m芳基”是指具有n到m个环碳原子的芳基。芳基包括例如苯基、萘基、蒽基、菲基、茚满基、茚基等。在一些实施例中，芳基具有6到10个碳原子。在一些实施例中，芳基为苯基或萘基。

如本文所用，“杂芳基”是指具有至少一个选自硫、氧和氮的杂原子环成员的单环或多环芳香族杂环。在一些实施例中，杂芳基环具有1、2、3或4个独立地选自氮、硫和氧的杂原子环成员。在一些实施例中，杂芳基部分中的任何环形成N可为N-氧化物。在一些实施例中，杂芳基为具有1、2、3或4个独立地选自氮、硫和氧的杂原子环成员的5-10元单环或双环杂芳基。在一些实施例中，杂芳基为具有1或2个独立地选自氮、硫和氧的杂原子环成员的5-6元单环杂芳基。在一些实施例中，杂芳基为五元或六元杂芳基环。五元杂芳基环为具有五个环原子的环的杂芳基，其中一或多个(例如1、2或3个)环原子独立地选自N、O和S。示例性五元环杂芳基为噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基、异噻唑基、异噁唑基、1,2,3-三唑基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-三唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,3,4-三唑基、1,3,4-噻二唑基和1,3,4-噁二唑基。六元杂芳基环为具有六个环原子的环的杂芳基，其中一或多个(例如1、2或3个)环原子独立地选自N、O和S。示例性六元环杂芳基为吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基和哒嗪基。

如本文所用，“杂环烷基”是指具有一或多个选自O、N或S的环形成杂原子的非芳香族单环或多环杂环。在杂环烷基中包括单环4元、5元、6元、7元、8元、9元或10元杂环烷基。杂环烷基还可以包括螺环。实例杂环烷基包括吡咯烷-2-酮、1,3-异噁唑烷-2-酮、吡喃基、四氢吡喃基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、吡咯烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、咪唑烷基、氮杂环庚基、苯并氮杂卓等。杂环烷基的环形成碳原子和杂原子可以任选地经1或2个独立选择的侧氧基或硫离子基(例如，C(O)、S(O)、C(S)或S(O)₂等)取代。杂环烷基可以通过环形成碳原子或环形成杂原子连接。在一些实施例中，杂环烷基含有0到3个双键。在一些实施例中，杂环烷基含有0到2个双键。杂环烷基的定义中还包括具有与环烷基环稠合(即，具有共同键)的一或多个芳香族环的部分，例如哌啶、吗啉、氮杂卓等的苯并或噻吩基衍生物。含有稠合芳香族环的杂环烷基可以通过任何环形成原子连接，所述环形成原子包括稠合芳香族环的环形成原子。在一些实施例中，杂环烷基为具有1或2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子并且具有一或多个氧化环成员的单环4-6元杂环烷基。在一些实施例中，杂环烷基为具有1、2、3或4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子并且具有一或多个氧化环成员的单环或双环4-10元杂环烷基。

在某些地方，定义或实施例是指特定环(例如氮杂环丁烷环、吡啶环等)。除非另外指示，否则这些环可以连接到任何环成员，其条件是不超过原子的原子价。举例来说，氮杂环丁烷环可以连接在环的任何位置处，而吡啶-3-基环连接在3-位置处。

如本文所用，术语“侧氧基”是指作为二价取代基的氧原子，当连接到碳(例如，C＝O)或连接到形成亚砜或砜基的杂原子时形成羰基。

如本文所用的术语“化合物”意指包括所描绘的结构的所有立体异构体、几何异构体、互变异构体和同位素。除非另外规定，否则本文中通过名称或结构鉴定为一种特定互变异构形式的化合物希望包括其它互变异构形式。

本文所描述的化合物可为不对称的(例如，具有一或多个立体中心)。除非另外指示，否则所有立体异构体(如对映异构体和非对映异构体)都是期望的。含有不对称经取代的碳原子的本发明化合物可以光学活性或外消旋形式分离。关于如何由光学失活起始物质制备光学活性形式的方法是本领域中已知的，如通过外消旋混合物拆分或通过立体选择性合成。烯烃的许多几何异构体C＝N双键、N＝N双键等也可以存在于本文所描述的化合物中，并且所有此类稳定异构体在本发明中考虑。描述本发明化合物的顺式及反式几何异构体，并且其可以异构体的混合物形式或分开的异构形式来分离。在一些实施例中，化合物具有(R)-构型。在一些实施例中，化合物具有重新构型。

本文所提供的化合物还包括互变异构形式。互变异构形式由单键与相邻双键的交换以及伴随的质子迁移而产生。互变异构形式包括处于具有相同经验式和总电荷的异构质子化状态的质子转移互变异构体。实例质子转移互变异构体包括酮-烯醇对、酰胺-亚胺酸对、内酰胺-内酰亚胺对、烯胺-亚胺对以及其中质子可以占据杂环系统的两个或更多个位置的环形形式，例如1H-咪唑和3H-咪唑、1H-1,2,4-三唑、2H-1,2,4-三唑和4H-1,2,4-三唑、1H-异吲哚和2H-异吲哚以及1H-吡唑和2H-吡唑。互变异构形式可以处于平衡状态或通过适当取代被空间锁定成一个形式。

如本文所用，术语“细胞”意指活体外、离体或活体内细胞。在一些实施例中，离体细胞可以是从生物体(如哺乳动物)切除的组织样品的一部分。在一些实施例中，活体外细胞可以是细胞培养物中的细胞。在一些实施例中，活体内细胞是生物体(如哺乳动物)中的活的细胞。

如本文所用，术语“接触”是指在活体外系统或活体内系统中将指定部分放在一起。举例来说，使PIKfyve与本发明化合物“接触”包括向患有PIKfyve的个体或患者(如人类)投与本发明化合物，以及例如将本发明化合物引入含有细胞或含有PIKfyve的纯化制剂的样品中。

如本文所用，术语“个体(individual/subject)”、“患者”可互换d地使用，是指任何动物，包括哺乳动物，优选地小鼠、大鼠、其它啮齿动物、兔、狗、猫、猪、牛、绵羊、马或灵长类动物，并且最优选地为人类。

如本文所用，短语“有效量”或“治疗有效量”是指引发研究人员、兽医、医生或其他临床医师在组织、系统、动物、个体或人类中所寻求的生物学或药物反应的活性化合物或药剂的量。

如本文所用，术语“治疗(treating/treatment)”是指1)抑制疾病；例如，抑制正在经历或呈现疾病、病状或病症的病变或症状的个体的疾病、病状或病症(即，遏制病变和/或症状的进一步发展)；或2)减轻疾病；例如减轻正在经历或呈现疾病、病状或病症的病变或症状的个体的疾病、病状或病症(即，逆转病变和/或症状)。

实例

实例1-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基-6-吗啉基-N-(对甲苯基)-1,3,5-三嗪-2-胺

物理特性

化合物的分子量为428.5。其可溶于DMSO中。另外，可以使用DMSO(10％)、甲苯(20％)和水(70％)的混合物制备至少10mg/ml的溶液。

化学合成

步骤1

向2,4,6-三氯-[l,3,5]三嗪(1.84g，10mmol)和K₂CO₃(1.38g，10mmol)于THF(30mL)中的冷(0-5℃)搅拌悬浮液中逐滴添加对甲苯胺(1.07g，10mmol)于无水THF(20mL)中的溶液。然后搅拌混合物3小时，同时缓慢升温到环境温度。在环境温度下搅拌14小时之后，通过LCMS监测反应。混合物用EA(200mL)稀释，并且然后用1N盐酸水溶液酸化到pH＝6-7。分离有机相，用水、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水(各自约20mL)依次冲洗并且经无水Mg₂SO₄干燥。将溶液过滤并且在真空中在旋转式蒸发器上浓缩，以得到呈黄色固体状的(4,6-二氯-[l,3,5]三嗪-2-基)-对甲苯基-胺(2.33g，产率：91％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.05(s,1H),7.47(d,J＝8.4Hz,2H),7.20(d,J＝8.0Hz,2H),2.29(s,3H)。

步骤2

向(4,6-二氯-[l,3,5]三嗪-2-基)-对甲苯基-胺(2.33g，9.13mmol)于二噁烷(50mL)中的搅拌溶液中添加DIEA(1.17g，9.13mmol)和吗啉(795mg，9.13mmol)，并且在85℃下加热所得混合物12小时。通过LCMS来监测反应混合物。将反应混合物冷却到环境温度，用水(100mL)稀释并且搅拌1小时。将白色沉淀过滤并在真空中干燥，以得到呈白色固体状的(4-氯-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基)-对甲苯基-胺(1.94g，产率：69％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝10.03(s,1H),7.50(d,J＝6.4Hz,2H),7.12(d,J＝8.0Hz,2H),2.85-3.60(m,8H).2.26(s,3H)。

步骤3

向(4-氯-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基)-对甲苯基-胺(300mg，0.98mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液中添加水合肼(2mL)并且在室温下搅拌混合物30分钟。通过LCMS来监测反应。将混合物在真空中浓缩，以得到呈白色固体状的(4-肼基-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基)-对甲苯基-胺(252mg，产率：85％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝8.97(s,1H),7.96(s,1H),7.59(d,J＝8.4Hz,2H),7.03(d,J＝8.0Hz,2H),4.18(s,2H),3.77-3.58(m,8H),2.22(s,3H)。

步骤4

向(4-肼基-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基)-对甲苯基-胺(100mg，0.33mmol)于EtOH(20mL)中的溶液中添加1H-吲哚-3-甲醛(95.8mg，0.66mmol)，并且在室温下搅拌混合物1小时。将混合物在真空中浓缩，以得到残余物，其通过柱色谱预纯化，接着进行制备型HPLC纯化，以得到呈白色固体状的{4-[N'-(1H-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-6-吗啉-4-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-对甲苯基-胺(40mg，产率：28％)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ＝8.45-8.34(m,1H),8.27(s,1H),7.71-7.52(m,3H),7.40(d,J＝8.0Hz,1H),7.26-7.08(m,4H).3.92-3.70(m,8H),2.32(s,3H).MS:m/z 429.0(M+H⁺)。

生物学活性

50nM的实例1引起大于99％的PIKfyve抑制。在这一程度上，没有其它激酶被50nM的实例1阻断，表明其高度选择性。

胶质母细胞瘤和髓母细胞瘤

将人类多形性胶质母细胞瘤细胞(T98G、G22VF、U251)和人类髓母细胞瘤细胞(p16、p9)与各种浓度的实例1一起培育72小时，并且然后通过cell titer-Glo发光(ATP水平)分析评估细胞活力。取决于细胞系，通过一定浓度将细胞有效地杀死，如图3中所展示。

方法：将实例1以40mM的浓度溶解于DMSO(ATCC)中，将这种储备液进一步稀释到最高最终工作浓度的2×到由DMEM(Life Technologies)、青霉素/链霉素抗生素溶液(LifeTechnologies)和10％FBS(Seradigm)组成的完全培养基中。将这种储备液分配到白壁、平底的96孔盘(Corning)的最终柱中。然后使用完全培养基向下到实例1的最低分析浓度制备连续稀释液(取决于分析为1.5×或2×)。将96孔盘的最终柱保存为仅媒剂对照，并且在完全培养基中包括经1:250稀释的DMSO。

当细胞的汇合度为50％-85％时，使用标准组织培养方法，在5％CO₂，37℃培育箱中生长的细胞在对数生长期收集。为了这样做，其在室温下用1×PBS pH 7.4(LifeTechnologies)洗涤，然后与0.05％胰蛋白酶-EDTA溶液(生命技术)一起培育直到细胞从培养盘明显地分离。然后将细胞悬浮液用移液管来回移取若干次以分散细胞群集，然后立即经1:5稀释到完全培养基中。这种细胞悬浮液的小等分试样用于使用正向和侧向散射在Accuri C6细胞仪(BD Biosciences)上计数以对活细胞群体进行选通。悬浮液的剩余部分在180×g下离心，去除上清液，并且将球粒以100个细胞/μL的最终浓度再悬浮于完全培养基中。然后将50μL这种悬浮液接种到含有实例(如上文所描述制备)的96孔盘的每个孔中，使得每个孔含有100μL完全培养基、5000个细胞、<2μL DMSO和指定浓度的实例1。

将这些培养盘放置于5％CO₂，37℃培育箱中。在培育72小时之后，测量相对ATP含量作为每孔存活细胞的数目的间接指示。将100μL已根据制造商说明书制备的细胞效价Glo试剂(Promega)添加到每个孔中。这个反应是避光的并且在室温下培育10分钟，然后使用Synergy HI微盘读数仪(Biotek)读取总发光。

展示原始发光数或相对ATP浓度(报告为经媒剂处理的对照物的百分比)。所有数据点表示2-3个独立实验复制的平均值，并且误差条表示标准差。

结肠直肠癌瘤

类似地测试人类结肠直肠癌瘤细胞系通过化合物的杀死。(ATP活性是由使用细胞-效价辉光发光分析定义)。如图4中所示，结肠直肠癌细胞中的一些(HCT116、HT29)对化合物诱导的死亡比脑肿瘤细胞系对化合物诱导的死亡更敏感。所有实验都使用RPMI培养基(Life Technologies)作为用于“完整”培养基的基础调配物来进行。HT29细胞需要除胰蛋白酶以外的物理刮擦以从组织培养塑料解离。

骨肉瘤

类似地测试人类骨肉瘤细胞(U20S、143B、MG63和SAOS2)和人类胰腺癌细胞(Panc-1、CFPAC)通过化合物的杀死，如图5中所示。对于具有143B和MG63细胞的实验，使用DMEM:F12培养基(Life Technologies)作为用于“完整”培养基的基础调配物来进行图5中的所有实验。此外，Alamar Blue用于在生长72小时之后分析每一孔的活细胞的相对数目。对于这些分析，从细胞去除生长培养基，并且用含有1:10稀释的Alamar Blue试剂(LifeTechnologies)的新制(“完整”)培养基替换。将培养盘在5％CO₂，37℃下培育40分钟，然后从培育箱移出，并且使用Synergy HI微盘读数仪测量荧光(激发：560nm发射：590nm)。值表示原始光计数减去具有Alamar Blue试剂(在培养基中1:10)但无细胞的孔的值。

淋巴瘤

通过在48小时分析中相对低浓度的化合物杀死鼠类淋巴瘤细胞(E2409、EC+F)，其中存活率通过细胞计数确定，如图6中所示。通过在48小时分析中相对低浓度的实例1杀死鼠类淋巴瘤细胞(E2409、EC+F)。图6中的所有实验使用RPMI培养基(Life Technologies)作为基础调配物进行，并且培养基还含有1mM丙酮酸钠、100mM HEPES、2mM额外L-谷氨酰胺、55μM 2-巯基乙醇和1×MEM NEAA溶液(所有都来自Life Technologies)。对于这些非粘附性细胞来说，胰蛋白酶不是必需的。Presto Blue试剂(Life Technologies)使用与先前针对Alamar Blue描述的相同程序，在30分钟培育时间下用作端点分析。

将人类淋巴瘤细胞系与各种浓度的化合物一起培育72小时，并且通过细胞计数或通过ATP分析确定存活率，如图7中所示。在淋巴瘤实验中，RPMI培养基(LifeTechnologies)用作“完整”培养基的基础调配物。对于这些非粘附性细胞系，不需要胰蛋白酶。对于“细胞计数”数据，将细胞用移液管来回移取以均匀分配，然后使用Accuri C6细胞仪，使用正向和侧向散射将10μL悬浮液计数以选通活的群体。

由于用实例1化合物处理所致的液泡化极快速，在30分钟或更短时间内通过光学显微镜变得可见。仅用媒剂(左)或实例1(右)处理的鼠类淋巴瘤细胞的电子显微照片展示于图2中。

自噬抑制

巨自噬(下文称为“自噬”)为需要内体、自噬小体和溶酶体的精确融合的过程。制备来自用实例1处理的细胞的溶解产物，并且通过蛋白质印迹法探测LC3-I和LC3-II。发现LC3-II的水平增加和p62(螯合体)增加展示在不能完成过程(即，无效自噬)的情况下，进行自噬的驱动增加。溶酶体是意图通过自噬降解的蛋白质的最终目标，并且这个细胞器中的蛋白水解取决于组织蛋白酶以及其它酶。组织蛋白酶水平是通过蛋白质印迹法测量，并且发现在经实例1处理的胶质母细胞瘤细胞中成熟形式变得较不充足，而前驱形式(促组织蛋白酶)累积，表明未能将这些降解的酶传递到适当低pH隔室。

图23含有展示如由LC3随时间的累积所证明的实例1的自噬的诱导的图像。U251胶质母细胞瘤细胞用25、500或20,000nM MC042处理指定时间段，并且然后制备且印迹LC3和微管蛋白的溶解产物(内对照物)。在6小时处开始，并且通过24小时LC3-II(下带标记为LC3)累积变得更明显，指示自噬的活化。然而，p62不降解，因此指示自噬在从细胞去除蛋白质方面无效。

图24展示，以类似方式，U251(胶质母细胞瘤)和RKO(结肠癌)细胞用1μM实例1处理指定时间段，并且然后通过蛋白质印迹法分析LC3累积。RKO细胞具有显著并且快速的LC3诱导，而U251的诱导不太稳固。

图25展示实例1引起未裂解的前驱组织蛋白酶D(“CTSD”)的累积和成熟裂解组织蛋白酶的相对损失。U251或RKO细胞用指定浓度的实例1处理18小时，并且然后通过蛋白质印迹法分析组织蛋白酶D和肌动蛋白(内对照物)。

将U251或RKO细胞接种到10cm组织培养盘上并且在先前所描述的条件下生长。当细胞在对数期中生长并且达到约60％的汇合时，以指定浓度将实例1稀释到生长培养基中。细胞在5％CO₂，37℃下培育18小时，然后如先前所描述来洗涤和收集。通过在180×g下离心将细胞粒化，再悬浮于20mL 1×PBS pH 7.4中，并且再次离心。去除上清液并且将球粒再悬浮于含有IX蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合液(EMD Millipore)的100μL RIPA缓冲液中并在冰上培育1小时。在所述培育之后，通过在17,000×g下离心来将剩余的细胞碎片粒化，并且将溶解产物转移到冰上的干净管中并添加100μL的根据制造商说明书制备的Laemlli缓冲液(BioRad)。在100℃下培育管5分钟，然后涡旋并且转移回到冰上。通过在15％Tris-HCl丙烯酰胺凝胶(Bio Rad)上电泳分离来自50μL每一样品的蛋白质，然后转移到PVDF-FL膜(EMD-Millipore)上。将膜在室温下在SeaBlock试剂(EMD-Millipore)中培育30分钟，然后在4℃下在含有山羊-抗hCathepsinD(1:1000，R&D systems)和小鼠-抗肌动蛋白(1:5000，Chemicon)抗体的溶液中稀释成SeaBlock培育整夜。使用过量1×TBS+1％Tween-20洗涤膜4次。然后在室温下在含有IR-染料-结合二级抗体(Li-Cor)识别山羊和小鼠(1:35,000稀释)的SeaBlock中培育2小时。在用TBS+Tween洗涤4次之后，使用Odyssey扫描仪(Li-Cor)使膜成像。

实例2-(E)-N-(4-((4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-基)氨基)苯基)-5-(2-氧代六氢-lH-噻吩并[3,4-d[咪唑-4-基)戊酰胺

使用与针对实例34所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.44(brs,1H),10.64(brs,1H),9.80(brs,1H),9.19-9.16(m,1H),8.45-8.44(m,1H),8.32(s,1H),8.07-8.00(m,1H),7.70-7.37(m,5H),7.23-7.15(m,1H),6.48(s,1H),6.38(s,1H),4.32-4.29(m,1H),4.15-4.14(m,1H),3.84-3.83(m,8H),3.16-3.10(m,1H),2.85-2.80(m,1H),2.59-2.57(m,2H),2.39-2.32(m,2H),1.64-1.45(m,4H),1.40-1.33(m,2H)。MS:m/z 656.1(M+H⁺)

生物活性

实例2为实例1化合物的生物素标记衍生物。这种化合物证实培养物中的细胞中的液泡化活性，其EC₅₀为0.008μM。参见图9。

实例3-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基N-(对甲苯基)嘧啶-2-胺

化学合成

步骤1

向2,4,6-三氯嘧啶(1.0g，5.5mmol)和吗啉(479mg，5.5mmol)于EtOH(20mL)中的溶液中添加DIPEA(710mg，5.5mmol)并且在室温下搅拌反应16小时。将反应溶液在真空中浓缩到干燥。残余物通过硅胶柱(PE/EA＝50/1)纯化，以得到呈白色固体状的4-(2,6-二氯嘧啶-4-基)吗啉(923mg，产率：72％)。MS:m/z 233.9(M+H⁺)。

步骤2

向4-(2,6-二氯嘧啶-4-基)吗啉(500mg，2.2mmol)和对甲苯胺(275mg，2.6mmol)于1,4-二噁烷(10mL)中的溶液中添加浓HCl(6滴)，且反应在微波中在110℃下加热1小时。将反应混合物用DCM(20mL)稀释，并且混合物用饱和Na₂CO₃(20mL)洗涤。将有机相在真空中浓缩到干燥，以得到呈白色固体状的粗4-氯-6-吗啉基-N-(对甲苯基)嘧啶-2-胺(760mg，粗物质)。MS:m/z 305.0(M+H⁺)。

步骤3

在100℃下搅拌4-氯-6-吗啉基-N-(对甲苯基)嘧啶-2-胺(260mg，0.85mmol)于水合肼(10mL)中的混合溶液16小时。将反应混合物倒入H₂O(10mL)中。混合物通过EA(10mL×2)萃取。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并且浓缩，以得到呈白色固体状的粗4-肼基-6-吗啉基-N-(对甲苯基)嘧啶-2-胺(230mg，粗物质)。

步骤4

向4-肼基-6-吗啉基-N-(对甲苯基)嘧啶-2-胺(230mg，0.85mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中添加lH-吲哚-3-甲醛(123mg，0.85mmol)并且在80℃下搅拌混合物16小时。将混合物在真空中浓缩到干燥，残余物通过制备型HPLC纯化，以得到呈白色固体状的(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-N-(对甲苯基)嘧啶-2-胺(17mg，产率：5％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ＝8.35-8.24(m,3H),7.94(s,1H),7.44(d,J＝8.4Hz,2H),7.39(d,J＝7.1Hz,1H),7.32-7.23(m,3H),7.10(d,J＝8.4Hz,2H),6.82(s,1H),6.05(s,1H),3.81(t,J＝4.4Hz,4H),3.65(t,J＝4.8Hz,4H),2.30(s,3H)。MS:m/z 428.0(M+H⁺)。

生物学活性

参见图10。ECso为0.004μM。

胶质母细胞瘤和结肠直肠癌瘤

胶质母细胞瘤(T98G、U251)或结肠直肠癌细胞系(HT29、RKO、HCT116)也对杀死化合物敏感。参见图11。使用针对胶质母细胞瘤系的DMEM基培养基和针对结肠直肠系的RMPI基培养基来进行实验。

恶性周边神经鞘膜瘤

实例3展示针对称为恶性周边神经鞘膜瘤的肿瘤类型的功效增加。由所述化合物引起的细胞死亡的形式符合被称为“巨泡式死亡”的机制，即已经展示由致癌RAS的高活化引起的非细胞凋亡程序性细胞死亡过程。出于此原因，假设已经活化的RAS的肿瘤细胞将对这种化合物具有增加的灵敏度。恶性周边神经鞘肿瘤(MPNST)在群体中偶发性出现，并且在患有NF1突变的患者中具有极高频率。NF1是RAS抑制因子，并且因此在NF1-突变型背景中产生的肿瘤具有RAS信号传导路径的先前活化。在DMEM基培养基中测试MPNST细胞系(S462、S462TY、26T、T265、SNF96.2)，并且对化合物诱导的死亡高度敏感。参见图26。

PK/PD特征

化合物对PK/PD特征进行进一步表征。在腹膜内注射之后的半衰期为约5.5小时，并且在单次30mg/kg剂量之后的峰值浓度为3268ng/ml。

实例4-对阿匹莫德的比较研究

实例1和实例3对PIKfyve比先前表征的PIKfyve抑制剂阿匹莫德(3-甲基苯甲醛2-[6-(4-吗啉基)-2-[2-(2-吡啶基)乙氧基-4-嘧啶基]肼，CAS注册号541550-19-0)对PIKfyve更具选择性：

在50nM浓度下，实例1仅阻断468种激酶中的1种，到对照物的不到1％。其也不将其它激酶阻断到对照物活性的10％或到35％。相比之下，50nM阿匹莫德将两种激酶抑制到1％或10％，并且将3种激酶抑制到对照物的35％。为了检查在较高浓度下的非特异性结合，在5000nM下测试实例1、实例3和阿匹莫德。在这些条件下，实例1将2、4或11种激酶阻断到1％、10％或35％活性水平，而阿匹莫德再次对将4、9和15种激酶阻断到那些三个水平具有较低特异性。在5000nM下，实例3将仅1、1和4种激酶阻断到1％、10％和35％的截止水平，表明其对于所有三种化合物的PIKfyve具有最高选择性。实例3在5000nM浓度下的高选择性通过Treespot激酶树状图以图形方式证实，其中较大光点指示较高抑制程度。PIKfyve在每一树状图的左下方处表示。参见图12。

实例5-与维罗非尼的协同作用

通用方法

在即将将细胞悬浮液接种到预稀释的实例1或实例3上之前，将DMSO中的25mM维罗非尼储备液(获自Selleckchem)稀释到指定浓度的2倍，以产生两种化合物的最终IX浓度。

B-RAF抑制剂维罗非尼(N-(3-(5-(4-氯苯基)-lH-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)丙烷-l-磺酰胺；CAS注册号918504-65-1)：

反射性活化ras原癌基因。将维罗非尼与实例1或实例3处理组合。由于化合物的组合，观察到细胞死亡显著增加，远远超过任一种。

结果

参见图13，展示在72小时时间过程中由单独实例1或在10μM维罗非尼存在下进行的U251胶质母细胞瘤细胞杀死。应注意，在0μM实例1(最左边点)下，维罗非尼几乎没有影响，但在实例1的低浓度(例如0.5μM)下，维罗非尼的添加显著提高细胞杀死。

对于所指示的细胞类型，在图14和图15中展示了由维罗非尼与各种浓度的实例1的组合协同杀死细胞的更多实例。

如图16中所示，实例3在杀死U251中也与维罗非尼协同作用。

实例6-实例1化合物的药物动力学和药效学研究

物种：禁食的雄性C57BL/6小鼠。

在腹膜内、静脉内或经口投与之后，在小鼠中进行化合物的PK/PD测试。参见图8。腹膜内给药得到以下动力学，其中半衰期为10.1小时，并且在单次30mg/kg剂量之后的最大浓度为534ng/ml。

将1百万个E2409鼠类淋巴瘤细胞注射到裸小鼠的侧腹，并且使其生长4天，此时在每只小鼠上观察到较小的可检测块。小鼠通过腹膜内注射具有或不具有1mg测试化合物的100μl媒剂(10％dmso，20％cremaphor，70％水)来进行每日注射。当肿瘤大小超过1500mm³时，将小鼠安乐死。与仅媒剂处理的小鼠相比，经处理的小鼠具有延长的存活期(p<0.02)。

表l.投与剂量

表2.剂量的组成

图17展示在静脉内、腹膜内和经口给药之后实例1的平均血浆浓度。图18、19和20分别展示在分别以5mg/kg静脉内给药、以30mg/kg腹膜内给药和以30mg/kg经口给药之后实例1的血浆浓度。

表3.实例1在小鼠中的生物可用性，静脉内为5mg/kg，血浆(ng/mL).

表4.实例1在小鼠中的生物可用性，腹膜内为30mg/kg，血浆(ng/mL).

表5.实例1在小鼠中的生物可用性，经口为30mg/kg，血浆(ng/mL).

ND＝未确定的(归因于未充分定义的末端消除期而未确定的参数)。BQL＝低于定量下限(LLOQ)。如果经调整的rsq(末端期上的浓度值的线性回归系数)小于0.9，那么可能无法准确地估算T1/2。如果AUC_Extra％>20％，那么可能无法准确地估算AUC_0-inf、Cl、MRT_0-inf和Vd_ss。如果AUMC_Extra％>20％，那么可能无法准确地估算MRT_0-inf和Vd_ss。末端期中的浓度值的调整后的线性回归系数小于0.9，可能无法准确地估算T1/2，a：使用具有标称剂量的AUC_0-inf(AUC_Extra％<20％)或AUC_0-Iast(AUC_Extra％>20％)计算生物可用性(％)。

实例7-实例3化合物的药物动力学和药效学研究

物种：C57小鼠。给药途径：静脉内和腹膜内。调配媒剂：静脉内和腹膜内：10％DMSO/30％PEG400/60％盐水。剂量水平：静脉内(5mg/kg)和腹膜内(30mg/kg)。剂量容量：静脉内(5mL/kg)和腹膜内(10mL/kg)。调配物浓度：静脉内(1mg/mL)和腹膜内(3mg/mL)。LLOQ：静脉内(2ng/mL)和腹膜内(10ng/mL)。

图21和22分别展示在静脉内给药5mg/kg之后和腹膜内给药30mg/kg IP之后，实例3在雄性C57小鼠中的血浆浓度(ng/mL)。

表6.在静脉内给药5mg/kg之后，雄性C57小鼠中实例3的血浆浓度(ng/mL)和PK参数.

表7.在腹膜内给药30mg/kg之后，雄性C57小鼠中实例3的血浆浓度(ng/mL)和PK参数.

实例8-N-(lH-吲哚-3-基甲基)-6-吗啉-4-基-N'-对甲苯基-[1,3,5[三嗪-2,4-二胺

向(4-氯-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基)-对甲苯基-胺(100mg，0.32mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液中添加(1H-吲哚-3-基)甲胺(187mg，1.28mmol)和DIEA(82.56mg，0.64mmol)，并且在90℃下搅拌混合物12小时。通过LCMS来监测反应。将混合物在真空中浓缩，以得到残余物，将其通过柱色谱纯化，接着进行制备型HPLC纯化，以得到呈白色固体状的N-(lH-吲哚-3-基甲基)-6-吗啉-4-基-N'-对甲苯基-[1,3,5]三嗪-2,4-二胺(37mg，产率：27％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝10.83(s,1H),8.99-8.74(m,1H),7.68-7.55(m,3H),7.33(d,J＝8.0Hz,1H),7.27-7.14(m,2H),7.09-6.93(m,4H),4.62(s,2H),3.81-3.55(m,8H),2.21(s,3H)。MS:m/z 416.0(M+H⁺)。

实例9-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基}-间甲苯基-胺

步骤1

在0℃下，向2,4,6-三氯-[l,3,5]三嗪(700mg，3.8mmol)和K₂CO₃(528mg，3.8mmol)于THF(15mL)中的混合物中缓慢逐滴添加间甲苯胺(407mg，3.8mmol)于THF(5mL)中的溶液。在添加之后，搅拌所得混合物12小时，使温度缓慢升温到室温。去除溶剂并且通过硅胶柱色谱(PE/EA＝20/1到10/1)纯化残余物，以得到呈黄色固体状的(4,6-二氯-[l,3,5]三嗪-2-基)-间甲苯基-胺(200mg，产率：21％)。通过TLC监测反应并且在LCMS光谱上产物的分子的离子强度较弱。注意：如果在-20℃下进行反应可以显著减少二聚体\三聚体副产物增并且增加产率。

步骤2

在0℃下，向(4,6-二氯-[l,3,5]三嗪-2-基)-间甲苯基-胺(200mg，0.787mmol)和DIEA(103mg，0.787mmol)于THF(10mL)中的混合物中添加吗啉(69mg，0.787mmol)。在室温下再搅拌所得混合物2小时。然后将单水合肼(0.5mL，10mmol)添加到上述混合物中。在添加之后，将反应混合物在50℃下加热3小时。在真空中去除挥发物，以得到呈白色固体状的粗(4-肼基-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基)-间甲苯基-胺(250mg，粗物质)。MS:m/z 301.9(M+H⁺)。

步骤3

在70℃下加热(4-肼基-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基)-间甲苯基-胺(95mg，粗物质，0.31mmol))和1H-吲哚-3-甲醛(46mg，0.31mmol)于MeOH(5mL，添加一滴HOAc作为催化剂)中的混合物2小时。过滤反应混合物并且通过制备型HPLC(NH₄CO₃系统)纯化滤液，以得到呈白色固体状的{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-6-吗啉-4-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-间甲苯基-胺(60mg，产率：历经2步骤为45％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.42(brs,1H),10.57(brs,1H),9.08(brs,1H),8.42(d,J＝8.0Hz,1H),8.33(s,1H),7.69(s,1H),7.54-7.39(m,2H),7.25-7.07(m,3H),6.82-6.77(m,1H),3.89-3.59(m,8H),2.27(s,3H)。MS:m/z 429.0(M+H⁺)。

实例10-(4-氟-苯基)-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-吗啉-4-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-胺

步骤1

在N₂气氛下，在-50℃下向2,4,6-三氯-[1,3,5]三嗪(500mg，2.71mmol)和DIEA(350mg，2.71mmol)于THF(25mL)中的溶液中缓慢添加4-氟-苯胺(301mg，2.711mmol)于THF(5mL)中的溶液。在-50℃下搅拌所得混合物2小时。去除THF并且添加H₂O(50mL)。混合物用EA(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL×3)洗涤。然后浓缩分离的有机层，以得到残余物。残余物通过硅胶柱(PE/EA＝50/1)纯化，以得到呈白色固体状的(4,6-二氯-[l,3,5]三嗪-2-基)-(4-氟-苯基)-胺(524mg，产率：75％)。

步骤2

在N₂气氛下，在0℃下向(4,6-二氯-[1,3,5]三嗪-2-基)-(4-氟-苯基)-胺(300mg，1.16mmol)和DIEA(150mg，1.16mmol)于THF(20mL)中的溶液中添加吗啉(101mg，1.16mmol)于THF(5mL)中的溶液。在0℃下搅拌所得混合物1小时。然后添加单水合肼(0.6mL)。在50℃下再继续搅拌反应30分钟。去除THF并且添加H₂O(30mL)。混合物用EA(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(90mL×3)洗涤。然后将分离的有机层浓缩，以得到粗(4-氟-苯基)-(4-肼基-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基)-胺(353mg)，其直接用于下一步骤中。

步骤3

在N₂气氛下，在70℃下搅拌(4-氟-苯基)-(4-肼基-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基)-胺(353mg，1.16mmol)、1H-吲哚-3-甲醛(169mg，1.16mmol)和AcOH(4滴)于MeOH(20mL)中的混合物1小时。去除MeOH并且添加H₂O(10mL)。混合物用EA(10mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL×3)洗涤。将分离的有机层浓缩，以得到残余物。残余物通过制备型HPLC纯化，以得到(4-氟-苯基)-{4-[N'-(1H-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-6-吗啉-4-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-胺(354mg，产率：对于三个步骤为71％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-de):δ＝11.44(brs,1H),10.62(brs,1H),9.29(brs,1H),8.42(d,J＝7.6Hz,1H),8.33(s,1H),8.07(brs,1H),7.87-7.69(m,2H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.26-7.16(m,1H),7.25-7.06(m,3H),3.76-3.67(m,8H)。MS:m/z 433.0(M+H⁺)。

实例11-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-N-(4-氯苯基)-6-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与实例10中所描述的方法和程序类似的方法和程序，使用对氯苯胺作为起始物质来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.45(s,1H),10.70-10.63(m,1H),9.39-9.37(m,1H),8.42(d,J＝7.6Hz,1H),8.33(s,1H),8.15-8.05(m,1H),7.87-7.82(m,1H),7.71(d,J＝2Hz,1H),7.45-7.43(m,1H),7.37-7.26(m,2H),7.23-7.17(m,1H),7.13-7.09(m,1H),3.87-3.61(m,8H)。

MS:m/z 448.9(M+H⁺)

实例12-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基}-(4-甲氧基-苯基)-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):5＝11.42(brs,1H),10.56(brs,1H),9.06(brs,1H),8.44(d,J＝8.4Hz,1H),8.32(s,1H),8.01(s,1H),7.80-7.54(m,2H),7.42(d,J＝8.4Hz,1H),7.26-7.17(m,1H),7.12(t,J＝7.2Hz,1H),6.89(d,J＝8.8Hz,2H),4.07-3.49(m,11H)。MS:m/z 445.0(M+H⁺)

实例13-2-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-对甲苯氨基-[1,3,5]三嗪-2-基氨基}-乙醇

步骤1

在-40℃下，向2,4,6-三氯-[1,3,5]三嗪(3g，16.3mmoL)和K₂CO₃(1.12g，8.15mmoL)于THF(30mL)中的溶液中逐滴添加对甲苯胺(0.87g，8.15mmoL)于THF(20mL)中的溶液。在-40℃下搅拌混合物0.5小时。过滤反应混合物并且浓缩滤液。残余物通过二氧化硅急骤管柱(含10％EA的PE)纯化，以得到呈白色固体状的(4,6-二氯-[l,3,5]三嗪-2-基)-对甲苯基-胺(1.1g，产率：55％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.05(s,1H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),7.20(d,J＝8.8Hz,2H),2.29(s,3H)。

步骤2

在35℃下搅拌(4,6-二氯-[1,3,5]三嗪-2-基)-对甲苯基-胺(800mg,3.1mmoL)、DIEA(0.7mL,3.9mmoL)和2-氨基-乙醇(230mg,3.8mmoL)于二噁烷(7mL)中的溶液1.5小时。将反应混合物用H₂O(10mL)稀释，并且在室温下搅拌混合物1小时。然后过滤悬浮液，并且将收集的滤饼风干，以得到呈白色固体状的2-(4-氯-6-对甲苯氨基-[1,3,5]三嗪-2-基氨基)-乙醇(860mg，产率：98％)。MS:m/z 280.0(M+H⁺)。

步骤3

在室温下搅拌2-(4-氯-6-对甲苯氨基-[1,3,5]三嗪-2-基氨基)-乙醇(400mg，1.43mmoL)和N2H4.H₂O(1mL)于二噁烷(6mL)中的溶液1小时。混合物与MeOH(5mL×4)共蒸发，以得到呈白色固体状的2-(4-肼基-6-对甲苯氨基-[1,3,5]三嗪-2-基氨基)-乙醇(粗物质)。MS:m/z 276.0(M+H⁺)。

步骤4

在75℃下搅拌2-(4-肼基-6-对甲苯氨基-[1,3,5]三嗪-2-基氨基)-乙醇(380mg，1.38mmoL)、1H-吲哚-3-甲醛(391mg，2.69mmoL)和两滴HOAc于MeOH(16mL)中的溶液19小时。浓缩反应混合物并且通过制备型HPLC(NH₃.H₂O)纯化残余物，以得到呈白色固体状的2-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-6-对甲苯氨基-[l,3,5]三嗪-2-基氨基}-乙醇(18mg，产率：7％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.42(brs,1H),10.52-10.37(m,1H),8.97-8.95(m,1H),8.45-8.43(m,1H),8.33(s,1H),8.14-8.68(m,3H),7.42(d,J＝8.0Hz,1H),7.23-7.09(m,4H),6.62-6.60(m,1H),4.69(s,1H),3.55-3.52(m,2H),3.40-3.36(m,2H),2.28(s,3H)。

MS:m/z 403.0(M+H⁺)。

实例14-2-((2-羟基-乙基)-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-对甲苯氨基-[l,3,5]三嗪-2-基}-氨基)-乙醇

使用与实例13中所使用的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.40(brs,1H),10.48(brs,1H),8.98(brs,1H),8.44(d,J＝8.4Hz,1H),8.34(s,1H),7.90-7.68(m,3H),7.41(d,J＝7.2Hz,1H),7.24-6.70(m,4H),5.01-4.74(m,2H),3.69-3.66(m,8H),2.28(s,3H)。

MS:m/z 447.0(M+H⁺)。

实例15-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-哌啶-l-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-对甲苯基-胺

使用与实例13中所使用的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ＝11.42(brs,1H),10.51(brs,1H),9.01(brs,1H),8.48-8.45(m,1H),8.32(s,1H),8.05-7.66(m,3H),7.45-7.39(m,1H),7.26-7.09(m,4H),3.76-3.75(m,4H),2.28(s,3H),1.68-1.52(m,6H)。

MS:m/z 427.0(M+H⁺)。

实例16-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-吡咯烷-l-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-对甲苯基-胺

使用与实例13中所使用的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ＝11.41(brs,1H),10.54(brs,1H),9.02(brs,1H),8.49-8.46(m,1H),8.33(s,1H),7.93-7.66(m,2H),7.43-7.41(m,1H),7.26-7.22(m,1H),7.12-7.09(m,4H),3.56-3.53(m,4H),2.28(s,3H),1.92-1.90(m,4H)。

MS:m/z 413.0(M+H⁺)。

实例17-[4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-[1,3,5]三嗪-2-基]-对甲苯基-胺

使用与实例13中所使用的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d6):5＝11.42(brs,1H),10.55(brs,1H),9.06(brs,1H),8.45(d,J＝7.2Hz,1H),8.31(s,1H),7.97-7.68(m,3H),7.42(d,J＝8.1Hz,1H),7.27-7.09(m,4H),3.77-3.76(m,4H),2.36-2.35(m,4H),2.28(s,3H),2.22(s,3H)。

MS:m/z 442.0(M+H⁺)。

实例18-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-哌嗪-l-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-对甲苯基-胺

使用与实例13中所使用的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d6):5＝11.41(brs,1H),10.51(brs,1H),9.03(brs,1H),8.45(d,J＝7.2Hz,1H),8.31(s,1H),8.0-7.91(m,3H),7.68-7.41(m,1H),7.21-7.8(m,4H),3.73-3.67(m,4H),2.74-2.72(m,4H),2.28(s,3H)。

MS:m/z 428.3(M+H⁺)。

实例19-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-吗啉-4-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-邻甲苯基-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):5＝11.36(brs,1H),10.50(brs,1H),8.57-8.00(m,3H),7.85-7.44(m,2H),7.39(d,J＝8.0Hz,1H),7.29-7.13(m,3H),7.13-6.96(m,2H),4.05-3.50(m,8H),2.27(s,3H)。

MS:m/z 429.2(M+H⁺)。

实例20-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-N-(4-(三氟甲基)苯基)-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.45(brs,1H),10.76(brs,1H),9.67(m,1H),8.45(d,J＝8.0Hz,1H),8.35-8.27(m,3H),7.89(s,1H),7.73-7.60(m,2H),7.45-7.42(m,1H),7.24-7.21(m,1H),7.11-7.07(m,1H),3.85-3.62(m,8H)。

MS:m/z 483.2(M+H⁺)

实例21-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-N-(4-溴苯基)-6-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.45(brs,1H),10.68(brs,1H),9.25(brs,1H),8.42(d,J＝7.6Hz,1H),8.33(s,1H),8.06-8.05(m,1H),7.71-7.63(m,2H),7.46-7.41(m,3H),7.23-7.20(m,1H),7.13-7.09(m,1H),3.80-3.60(m,8H)。

MS:m/z 495.1(M+H⁺)。

实例22-(E)-4-((4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-基)氨基)苯甲腈

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.48(brs,1H),10.75(brs,1H),9.72(brs,1H),8.43(d,J＝7.6Hz,1H),8.39(s,1H),8.35-8.30(m,1H),8.18-7.90(m,1H),7.74-7.63(m,3H),7.73-7.65(m,1H),7.25-7.07(m,2H),4.02-3.83(m,8H)。

MS:m/z 440.2(M+H⁺)

实例23-[4-吗啉-4-基-6-(N'-吡啶-3-基亚甲基-肼基)-[1,3,5]三嗪-2-基]对甲苯基-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.06(s,1H),9.23(s,1H),8.82(s,1H),8.58-8.53(dd,J＝4.8,1.6Hz,1H),8.17(s,1H).8.08-8.03(m,1H),7.68(s,2H),7.50-7.44(m,1H),7.08(d,J＝8.4Hz,2H),3.81-3.62(m,8H),2.25(s,3H)。

MS:m/z 391.0(M+H⁺)。

实例24-{4-吗啉-4-基-6-[N'-(lH-吡咯-3-基亚甲基)-肼基[-[l,3,5]三嗪-2-基}-对甲苯基-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.02(s,1H),10.37(s,1H),9.14(s,1H),8.04(s,1H),7.70-7.66(m,2H),7.07(d,J＝2.0Hz,1H),7.06(d,J＝8.8Hz,2H),6.80(d,J＝2.0Hz,1H),6.36(s,1H),3.78-3.59(m,8H),2.24(s,3H)。

MS:m/z 379.0(M+H⁺)。

实例25-(3-氯-苯基)-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-吗啉-4-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):v＝11.44(brs,1H),10.67(brs,1H),9.60-9.11(m,1H),8.41(s,1H),8.35(s,1H),8.16-7.57(m,3H),7.42(d,J＝8.0Hz,1H),7.37-7.24(m,1H),7.20(t,J＝7.2Hz,1H),7.12(t,J＝7.2Hz,1H),7.07-6.94(m,1H),3.96-3.55(m,8H)。

MS:m/z 448.9(M+H⁺)。

实例26-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-N-(4-硝基苯基)-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.49(brs,1H),10.85(brs,1H),10.04(brs,1H),8.46(d,J＝7.8Hz,1H),8.43(s,2H),8.37-8.16(m,2H),8.08-8.07(m,1H),7.75(s,1H),7.47-7.43(m,1H),7.26-7.20(m,2H),3.91-3.62(m,8H)。

MS:m/z 460.0(M+H⁺)。

实例27-Nl-(4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-基)苯-l,4-二胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(800MHz,DMSO-d₆):δ＝11.38(brs,1H),10.46(brs,1H),8.86-8.75(m,1H),8.43-8.41(m,1H),8.29(s,1H),7.73-7.69(m,1H),7.66-7.64(m,1H),7.43-7.38(m,1H),7.34-7.14(m,3H),6.59-6.48(m,2H),4.84-4.74(m,2H),3.82-3.59(m,8H)。

MS:m/z 430.2(M+H⁺)

实例28-(E)-N-(4-((4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-基)氨基)苯基)乙酰胺

向(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼)-N-(4-氨基苯基)-6-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-胺(100mg，0.2mmol)和AcOH(14mg，0.2mmol)于DMF(15mL)中的溶液中添加DIEA(90.3mg，0.6mmol)和HATU(132.8mg，0.3mmol)。在室温下在N₂气氛下搅拌溶液2小时。浓缩溶液，以得到残余物。通过制备型HPLC(NH₄HCO₃)纯化残余物，以得到(E)-N-(4-((4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-基)氨基)苯基)乙酰胺(15mg，产率：13.6％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.40(brs,1H),10.60(brs,1H),9.85(brs,1H),9.12(brs,1H),8.45-8.32(m,2H),8.05-8.00(m,1H),7.69-7.41(m,5H),7.22-7.19(m,2H),3.81-3.63(m,8H),2.07-2.04(m,3H)。

MS:m/z 472.0(M+H⁺)

实例29-(E)-6-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-N2,N2-双(2-甲氧基乙基)-N4-(对甲苯基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺

使用与针对实例13所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.40(brs,1H),10.49(brs,1H),9.13-8.81(m,1H),8.46(d,J＝4.8Hz,1H),8.30(d,J＝6.4Hz,1H),7.67-7.63(m,3H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.21-7.10(m,4H),3.76-3.72(m,4H),3.61-3.50(m,4H),3.29(s,6H),2.28(s,3H)。

MS:m/z 475.0(M+H⁺)。

实例30-(E)-6-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-N2,N2-二甲基-N4-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2,4-二胺

使用与针对实例13所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.41(brs,1H),10.50(brs,1H),9.01(brs,1H),8.46(d,J＝8.0Hz,1H),8.33(s,1H),8.10-7.65(m,3H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.25-7.03(m,4H),3.13(s,6H),2.28(s,3H)。

MS:m/z 387.0(M+H⁺)。

实例31-[4-(N'-苯并[b]噻吩-3-基亚甲基-肼基)-6-吗啉-4-基-[l,3,5]三嗪-2-基]-对甲苯基-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝10.91(brs,1H),9.29-8.88(m,2H),8.42(s,1H),8.13-7.96(m,2H),7.88-7.55(m,2H),7.52-7.34(m,2H),7.09(d,J＝8.0Hz,2H),4.5-3.47(m,8H),2.28(s,3H)。

MS:m/z 446.0(M+H⁺)。

实例32-[4-吗啉-4-基-6-(N'-吡啶-4-基亚甲基-肼基)-[1,3,5]三嗪-2-基]-对甲苯基-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.19(brs,1H),9.27(brs,1H),8.42(s,1H),8.62(d,J＝6.0Hz 2H),8.10(s,1H),7.79-7.63(m,2H),7.60(d,J＝5.6Hz,2H),7.09(d,J＝8.4Hz,2H),3.84-3.61(m,8H),2.26(s,3H)。

MS:m/z 391.0(M+H⁺)。

实例33-[4-(N'-亚苄基-肼基)-6-吗啉-4-基-[l,3,5]三嗪-2-基]-对甲苯基-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝10.87(s,1H),9.21(s,1H),8.14(s,1H),7.78-7.56(m,4H),7.48-7.32(m,3H),7.08(d,J＝8.4Hz,2H),3.87-3.57(m,8H),2.25(s,3H)。

MS:m/z 390.0(M+H⁺)。

实例34-(E)-Nl-(4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-基)-N4,N4-二甲苯-l,4-二胺

步骤1

在N₂气氛下，在-50℃下向2,4,6-三氯-[l,3,5]三嗪(6.7g，36.2mmol)和K₂CO₃(2.6g，18.8mmol)于THF(160mL)中的溶液中缓慢添加(4-氨基苯基)氨基甲酸叔丁酯(5.2mg，25.0mmol)于THF(40mL)中的溶液。在-50℃下搅拌所得混合物2小时。去除THF并且添加H₂O(150mL)。混合物用EA(150mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤并浓缩，以得到残余物。通过硅胶柱(PE/EA＝10/1)纯化残余物，以得到呈白色固体状的(4-((4,6-二氯-l,3,5-三嗪-2-基)氨基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(4.4g，产率：50％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ＝7.57(s,1H),7.42(d,J＝8.8Hz,2H),7.38(d,J＝8.8Hz,2H),6.54(s,1H),1.53(s,9H)。

步骤2

在N₂气氛下，在0℃下向(4-((4,6-二氯-l,3,5-三嗪-2-基)氨基)苯基)氨基甲酸酯(2g，5.6mmol)和DIEA(726mg，5.6mmol)于THF(50mL)中的溶液中添加吗啉(489mg，5.6mmol)于THF(15mL)中的溶液。在0℃下搅拌所得混合物2小时。然后浓缩溶液并且通过硅胶柱(PE/EA＝8/1)纯化，以得到呈白色固体状的(4-((4-氯-6-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-基)氨基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g，产率：80％)。

步骤3

在室温下搅拌(4-((4-氯-6-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-基)氨基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(1g，2.5mmol)于DCM/TFA(5/1)(20mL)中的溶液整夜。将反应物浓缩并且将残余物分配在NaHCO₃(水溶液)与EA(每种50mL)之间。然后有机相经Na₂SO₄干燥并浓缩，以得到呈灰色固体状的Nl-(4-氯-6-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-基)苯-1,4-二胺(粗物质)。

步骤4

向Nl-(4-氯-6-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-基)苯-1,4-二胺(900mg,2.9mmol)于MeCN(40mL)中的溶液中添加HCHO(37％)(2.38g，29.3mmol)、NaBH₃CN(553.5mg,8.9mmol)和HOAc(616.5mg,10.3mmol)，在室温下搅拌溶液整夜。浓缩反应物并且通过硅胶柱(PE/EA＝5/1)纯化残余物，以得到呈黄色固体状的Nl-(4-氯-6-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-基)-N4,N4-二甲基苯-1,4-二胺(216.7g，产率：31％)。

步骤5

向Nl-(4-氯-6-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-基)-N4,N4-二甲基苯-1,4-二胺(200mg,0.6mmol)和THF(10mL)的溶液中添加N₂H₄.H₂O(0.5mL)。在50℃下再继续搅拌反应4小时。去除THF并且添加H₂O(30mL)。通过过滤收集产物，以得到Nl-(4-肼基-6-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-基)-N4,N4-二甲基苯-1,4-二胺(190mg，产率85％)。

步骤6

步骤6的程序类似于实例10的步骤4中所使用的程序。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.40(brs,1H),10.50(brs,1H),8.90(s,1H),8.45-8.45(m,1H),8.31(s,1H),7.91-7.90(m,1H),7.68(s,1H),7.48-7.41(m,2H),7.22-7.11(m,2H),6.73-6.71(m,2H),3.80-3.62(m,8H),2.86-2.82(m,6H)。

MS:m/z 458.0(M+H⁺)

实例35-(E)-6-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-N2-乙基-N2-甲基-N4-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2,4-二胺

使用与针对实例13所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.40(brs,1H),10.49(brs,1H),8.98(brs,1H),8.48-8.40(m,1H),8.33(s,1H),8.08-7.67(m,3H),7.42(d,J＝8.4Hz,1H),7.26-7.9(m,4H),3.64-3.65(m,2H),3.10(s,3H),2.28(s,3H),1.17-1.14(m,3H)。

MS:m/z 401.0(M+H⁺)。

实例36-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基-6-(氮杂环丁-l-基)-N-(对甲苯基)-1,3,5-三嗪-2-胺

使用与针对实例13所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.43(brs,1H),10.75(brs,1H),9.18(brs,1H),8.46(d,J＝8.0Hz,1H),8.30(d,J＝6.4Hz,1H),7.99-7.96(m,2H),7.68(s,1H),7.43(d,J＝6.4Hz,1H),7.25-7.12(m,4H),4.06-4.00(m,4H),2.30-2.29(m,5H)。

MS:m/z 399.0(M+H⁺)。

实例37-(E)-l-(4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-(对甲苯氨基)-l,3,5-三嗪-2-基)哌啶-4-醇

使用与针对实例13所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.42(brs,1H),10.53(brs,1H),9.05(brs,1H),8.47(d,J＝7.2Hz,1H),8.32(s,1H),8.07-7.68(m,3H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.22-7.10(m,4H),4.73(d,J＝4.4Hz,1H),4.33-4.29(m,2H),3.75(d,J＝3.6Hz,1H),3.28-3.27(m,2H),2.28(s,3H),1.80-1.78(m,2H),1.35-1.33(m,2H)。

MS:m/z 443.0(M+H⁺)。

实例38-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-硫代吗啉基-N-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与针对实例13所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.42(brs,1H),10.60(brs,1H),9.13(brs,1H),8.46(d,J＝6.0Hz,1H),8.32(s,1H),8.08-7.60(m,3H),7.43(d,J＝8.0Hz,1H),7.22-7.12(m,4H),4.12-4.08(m,4H),2.64-2.59(m,4H),2.29(s,3H)。

MS:m/z 445.0(M+H⁺)。

实例39-{3-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基-肼基[-5-吗啉-4-基-苯基}-对甲苯基-胺

步骤1

向2,4,6-三氯-嘧啶(1g，5.5mmol)和对甲苯胺(588.5mg，5.5mmol)于EtOH(15mL)中的溶液中添加TEA(555.5mg，5.5mmol)。在室温下搅拌反应物整夜。将反应溶液分配在EA(60mL)与水(60mL)之间。将有机层用水(60mL)和盐水(60mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩，以得到呈白色固体状的(2,6-二氯-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(1.4g，粗物质)。MS:m/z253.8(M+H)⁺。

步骤2

向(2,6-二氯-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(1.4g，5.5mmol)和吗啉(478.5mg，5.5mmol)于EtOH(15mL)中的溶液中添加TEA(555.5mg，5.5mmol)。在80℃下搅拌反应物4小时。将反应溶液分配在EA(100mL)与水(100mL)之间。将有机层用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩。通过制备型TLC(PE/EA＝15/1)纯化残余物，以得到呈白色固体状的(6-氯-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(900mg，产率：54％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ＝7.17(s,4H),6.50(brs,1H),5.95(s,1H),3.77-3.72(m,8H),2.35(s,3H).MS:m/z 304.8(M+H)⁺。

步骤3

在80℃下搅拌(6-氯-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(250mg，0.82mmol)和单水合肼(82mg，1.64mmol)于二噁烷(8mL)中的溶液4小时。将反应用水(100mL)吸收并过滤。干燥滤饼，以得到呈白色固体状的(6-肼基-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(240mg，产率：97.6％)。MS:m/z 300.9(M+H)⁺。

步骤4

在100℃下搅拌{3-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-5-吗啉-4-基-苯基}-对甲苯基-胺(240mg，0.8mmol)和lH-吲哚-3-甲醛(116mg，0.8mmol)于二噁烷(10mL)中的溶液2小时。将反应用水(100mL)吸收并过滤。干燥滤饼，以得到呈红色固体状的{3-[N'-(1H-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-5-吗啉-4-基-苯基}-对甲苯基-胺(198mg，产率：58％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.40(d,J＝2.0Hz,1H),10.21(s,1H),8.81(s,1H),8.22-8.19(m,2H),7.66(d,J＝1.6Hz,1H),7.47-7.41(m,3H),7.21(t,J＝7.2Hz,1H),7.19-7.10(m,3H),6.01(s,1H),3.65(s,8H),2.28(s,3H)。MS:m/z 428.0(M+H)⁺。

实例40-[2-吗啉-4-基-6-(8H-吡唑并[3,4-b]吲哚-1-基)-嘧啶-4-基]-对甲苯基-胺

步骤1

在100℃下搅拌(6-氯-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(156mg，粗物质)于单水合肼(5mL)中的溶液整夜。将反应溶液分配在EA(60mL)与水(60mL)之间。将有机层用水(60mL)和盐水(60mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩，以得到(6-肼基-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(74mg，粗物质)。MS:m/z 300.9(M+H)⁺。

步骤2

在78℃下搅拌{3-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-5-吗啉-4-基-苯基}-对甲苯基-胺(74mg，0.25mmol)和lH-吲哚-3-甲醛(36mg，0.25mmol)于MeOH(5mL)中的溶液整夜。将反应溶液分配在EA(60mL)与水(60mL)之间。将有机层用水(60mL)和盐水(60mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空中浓缩。通过制备型HPLC(NH₃.H₂O作为添加剂)纯化残余物，以得到呈黄色固体状的[2-吗啉-4-基-6-(8H-吡唑并[3,4-b]吲哚-1-基)-嘧啶-4-基]-对甲苯基-胺(9.6mg，产率：4.3％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝12.86(s,1H),11.54(s,1H),7.77-7.75(m,2H),7.60(s,1H),7.53(d,7＝8.4Hz,1H),7.25-7.21(m,3H),7.13-7.11(m,1H),7.09-7.06(m,2H),3.72-3.67(m,8H),2.33(s,3H)。

MS:m/z 426.0(M+H)⁺。

实例41-{2-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-吗啉-4-基-嘧啶-4-基}-对甲苯基-胺

步骤1

在100℃下搅拌(2,6-二氯-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(200mg，0.79mmol)和水合肼(39mL，0.79mmol)于二噁烷(5mL)中的溶液2小时。将反应物用水(100mL)湿磨并且过滤。干燥滤饼，以得到呈白色固体状的(6-氯-2-肼基-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(140mg，粗物质)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝9.31(s,1H),8.21(s,1H),7.56(d,J＝8.0Hz,2H),7.10(d,J＝8.4Hz,2H),5.98(s,1H),4.22(s,2H),2.25(s,3H)。MS:m/z 249.9(M+H)⁺。

步骤2

在100℃下搅拌(6-氯-2-肼基-嘧啶-4-基)-对甲苯基-胺(140mg，0.56mmol)和lH-吲哚-3-甲醛(81.2mg，0.56mmol)于二噁烷(10mL)中的溶液3小时。将反应物用水(100mL)处理并过滤。干燥滤饼，以得到{6-氯-2-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-嘧啶-4-基}-对甲苯基-胺(164mg，粗物质)。MS:m/z 376.8(M+H)⁺。

步骤3

在100℃下搅拌{6-氯-2-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-嘧啶-4-基}-对甲苯基-胺(164mg，0.436mmol)和吗啉(42mg，0.48mmol)于二噁烷(5mL)中的溶液3小时。将反应物用水(100mL)处理并过滤以获得固体。然后，通过制备型HPLC(NH₃.H₂O作为添加剂)纯化固体，以得到呈白色固体状的{2-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基]-6-吗啉-4-基-嘧啶-4-基}-对甲苯基-胺(8.8mg，产率：4.7％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.34(s,1H),10.15(s,1H),8.82(s,1H),8.49(d,J＝8.0Hz,1H),8.27(s,1H),7.82-7.81(m,2H),7.63(s,1H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.12-7.08(m,3H),5.45(s,1H),3.71-3.69(m,4H),3.47(s,4H),2.29(s,3H)。

MS:m/z 427.8(M+H)⁺。

实例42-(2-氯-苯基)-{4-[N'-(lH吲哚-3-基亚甲基)-肼基[-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基]-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.40(brs,1H),10.68(brs,1H),8.62-8.21(m,3H),8.15(s,1H),7.68(d,J＝2.4Hz,1H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H),7.42-7.32(m,2H),7.18(t,J＝7.2Hz,2H),7.09(t,J＝7.2Hz,1H),4.05-3.56(m,8H)。MS:m/z 448.9(M+H⁺)

实例43-[4-吗啉-4-基-6-(N'-吡啶-2-基亚甲基-肼基)-[1,3,5]三嗪-2-基]-对甲苯基-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.12(brs,1H),9.26(brs,1H),8.56(d,J＝4.4Hz,1H),8.18(s,1H).8.02-7.83(m,2H),7.78-7.54(m,2H),7.36(d,J＝5.4Hz,1H),7.9(d,J＝8.8Hz,2H),3.86-3.58(m,8H),2.25(s,3H)。

MS:m/z 391.0(M+H⁺)。

实例44-{4-[N'-(lH-吲哚-2-基亚甲基)-肼基[-6-吗啉-4-基-[l,3,5]三嗪-2-基}-对甲苯基-胺

使用与针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.22(s,1H),10.85(s,1H),9.12(s,1H),8.21(s,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,2H),7.53(d,J＝7.6Hz,1H),7.43(d,J＝8.0Hz,1H),7.16-7.05(m,3H),6.99(t,J＝6.8Hz,1H),6.71(s,1H),3.86-3.62(m,8H),2.25(s,3H)。

MS:m/z 429.0(M+H⁺)。

实例45-{4-[N'-(lH-吲哚-3-基亚甲基)-肼基-6-吗啉-4-基-[1,3,5]三嗪-2-基}-(5-甲基-吡啶-2-基)-胺

使用与实例10中所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.45(brs,1H),10.73(brs,1H),9.07(s,1H),8.45(d,J＝8.0Hz,1H),8.33(s,1H),8.12(s,1H),7.71(s,1H),7.59(d,J＝9.2Hz,1H),7.43(d,J＝9.2Hz,1H),7.30-7.04(s,2H),3.85-3.61(m,8H),3.29(s,1H),2.28(s,3H)。

MS:m/z 430.0(M+H⁺)。

实例46-(E)-N-(4-((4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-l,3,5-三嗪-2-基)氨基)苯基)甲磺酰胺

使用与实例34中所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝11.43(brs,1H),10.62(brs,1H),9.49-9.47(m,1H),9.23(s,1H),8.45-8.42(m,1H),8.33-8.32(m,1H),8.12-8.10(m,1H),7.72-7.68(m,2H),7.44-7.42(m,1H),7.25-7.14(m,4H),3.84-3.62(m,8H),2.91(s,3H)。

MS:m/z 508.0(M+H⁺)

实例47-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-(3,4-二氢异喹啉-2(lH)-基)-N-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与实例13中所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.44(brs,1H),10.71(brs,1H),9.33-9.16(m,1H),8.57-8.45(m,1H),8.34(s,1H),8.00-7.70(m,3H),7.44(d,J＝8.4Hz,1H),7.23-7.10(m,8H),4.92-4.89(m,2H),4.02(s,2H),2.90(t,J＝1.6Hz,2H),2.30(s,3H)。

MS:m/z 475.0(M+H⁺)。

实例48-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-(2H-苯并[b[[l,4[噁嗪-4(3H)-基)-N-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与实例13中所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.47(d,J＝2.0Hz,1H),10.80-10.71(m,1H),9.33-9.16(m,1H),8.57-8.38(m,2H),8.19-8.02(m,1H),7.72-7.64(m,2H),7.43(d,J＝6.4Hz,1H),7.24-6.90(m,8H),4.31-4.21(m,4H),2.28(s,3H)。

MS:m/z 477.0(M+H⁺)。

实例49-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-(4-甲氧基哌啶-l-基)-N-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与实例13中所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.42(brs,1H),10.47(brs,1H),9.06(brs,1H),8.47(d,J＝7.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.95-7.68(m,3H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.21-7.10(m,4H),4.22-4.19(m,2H),3.45-3.39(m,3H),3.30(s,3H),2.29(s,3H),1.90-1.88(m,2H),1.42-1.40(m,2H)。

MS:m/z 457.3(M+H⁺)。

实例50-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-(3-甲基吗啉基)-N-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与实例13中所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.41(brs,1H),10.56(brs,1H),9.08(m,1H),8.46(d,J＝7.2Hz,1H),8.33(s,1H),8.07-7.68(m,3H),7.42(d,J＝8.0Hz,1H),7.23-7.12(m,4H),4.69(s,1H),4.32(s,1H),3.93-3.91(m,1H),3.73-3.71(m,1H),3.60-3.57(m,1H),3.46-3.40(m,1H),3.18-3.17(m,1H),2.28(s,3H),1.26-1.25(m,3H)。

MS:m/z 443.0(M+H⁺)。

实例51-(E)-6-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-N2-异丙基-N2-(2-甲氧基乙基)-N4-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2,4-二胺

使用与实例13中所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.40(brs,1H),10.47(brs,1H),8.99-8.98(m,1H),8.46(d,J＝4.4Hz,1H),8.33(s,1H),7.97-7.67(m,3H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.21-7.09(m,4H),4.99-4.98(m,1H),3.71-3.48(m,4H),3.31(s,3H),2.28(s,3H),1.23-1.17(m,6H)。

MS:m/z 459.1(M+H⁺)。

实例52-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-(3-氧杂-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-N-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2-胺

使用与实例13中所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝11.43(d,J＝2.0Hz,1H),10.64(brs,1H),9.15(brs,1H),8.45(d,J＝6.4Hz,1H),8.32(s,1H),8.10-7.60(m,3H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.23-7.13(m,4H),4.60-4.59(m,2H),3.67-3.59(m,4H),2.29(s,3H),1.99-1.92(m,4H)。

MS:m/z 455.0(M+H⁺)。

实例53-4-(2-(苯并呋喃-3-基亚甲基)肼基)-6-吗啉基-N-(对甲苯基)-1,3,5-三嗪-2-胺

根据与本文中针对实例10所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-dd):δ＝11.07(s,1H),9.44(m,1H),8.16(s,1H),7.70-7.57(m,4H),7.37(t,J＝8.4Hz,1H),7.28(t,J＝1.6Hz,1H),7.19(s,1H),7.09(d,J＝8.4Hz,2H),3.80-3.60(m,8H),2.25(s,3H)。

MS:m/z 430.2(M+H⁺)。

实例54-N2-(2-(lH-吲哚-3-基)乙基)-6-吗啉基-N4-(对甲苯基)-l,3,5-三嗪-2,4-二胺

根据与本文中针对实例1所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝10.82(d,J＝8.0Hz,1H),8.86(s,1H),7.65-7.57(m,2H),7.54(t,J＝8.0Hz,1H),7.33(d,J＝8.0Hz,1H),7.16(s,1H),7.10-6.91(m,5H),3.75-3.46(m,10H),2.93(t,J＝8.0Hz,2H),2.22(s,3H)。

MS:m/z 430.0(M+H⁺)。

实例55-(E)-4-(2-((lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-6-吗啉基-N-(萘-l-基)-l,3,5-三嗪-2-胺

根据与本文中针对实例1-52所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

实例56-(E)-4-(氮杂环庚-l-基)-6-(2-((2-甲基-lH-吲哚-3-基)亚甲基)肼基)-N-(4-硝基苯基)-l,3,5-三嗪-2-胺

根据与本文中针对实例1-52所描述的方法和程序类似的方法和程序来制备标题化合物。

实例A-针对实例8-56化合物的U251液泡化分析数据(24小时).表8

+EC₅₀<1μM。

++EC₅₀为1<10μM

+++EC₅₀为10<50μM

++++EC₅₀为>50μM

其它实施例

应了解，尽管本申请已经结合其具体实施方式进行描述，但是前述说明旨在说明而非限制本申请的范围，本申请的范围是由所附权利要求书的范围限定。其他方面、优点和修改都在以下权利要求的范围内。