阅读说明：本技术 Arr分层诊断新切点在制备用于原发性醛固酮增多症筛查试剂盒中的应用 (Application of ARR (auto regressive and Redox) hierarchical diagnosis new cut point in preparation of screening kit for primary aldosteronism ) 是由 李晓牧 徐晶 于 2020-05-08 设计创作，主要内容包括：本发明公开了醛固酮/肾素比值分层诊断新切点在制备用于原发性醛固酮增多症筛查试剂盒中的应用,其特征在于,对原醛症高危人群按eGFR进行分层,1)针对eGFR≥90ml/min/1.73m<Sup>2</Sup>部分人群,ARR切点为52ng/dl per ng/ml.h；2))针对eGFR＜90ml/min/1.73m<Sup>2</Sup>部分人群,ARR切点为18ng/dl per ng/ml.h。本发明取肾小球滤过率预估值(eGFR)作为反映肾功能的主要指标,通过研究eGFR与ARR的相关性从而制定适合不同类型高危人群的最适筛查切点,提高原醛症筛查试验的敏感性和特异性,提高对该病的诊治水平。本发明易于标准化并有望进一步推广,对于原醛症的早期筛查诊断具有良好的应用价值。(The invention discloses application of a new cutting point for aldosterone/renin ratio layered diagnosis in preparation of a primary aldosteronism screening kit, which is characterized in that the high risk group of the protoaldosteronism is layered according to eGFR, and 1) aiming at the eGFR of more than or equal to 90ml/min/1.73m 2 The ARR tangent point of part of population is 52ng/dl per ng/ml.h; 2) for eGFR < 90ml/min/1.73m 2 In some groups, the ARR cut point is 18ng/dl per ng/ml. The invention takes an estimated glomerular filtration rate (eGFR) value as a main index for reflecting the renal function, establishes an optimal screening cut point suitable for different types of high risk groups by researching the correlation between eGFR and ARR, improves the sensitivity and specificity of the propaldehyde disease screening test and improves the diagnosis and treatment level of the disease. The invention is easy to standardize and hopeful to be further popularized, and has good application value for early screening and diagnosis of the aldonolemia.)

ARR分层诊断新切点在制备用于原发性醛固酮增多症筛查试 剂盒中的应用

技术领域

本发明属于疾病筛查治疗领域，具体涉及醛固酮/肾素比值分层诊断新切点在原发性醛固酮增多症筛查中的应用。

背景技术

研究报道，原醛症占高血压人群的5％～10％，在顽固性高血压患者中高达20％，是常见的内分泌性高血压。由于原醛症具有较高患病率、低发现率和高心血管风险等特点，新版指南明确提出原醛症的诊治应被视为一项公共健康问题，而不仅仅是某个患者的诊治问题。与国外情况相似，目前国内原醛症的发现率低、误诊率高，原因包括：对原醛症的认识和重视不够；诊断流程较复杂；血浆醛固酮/肾素测定未广泛开展；血浆醛固酮/肾素测定标准不统一等。筛查作为整个诊断流程的起始环节，其重要性显而易见。目前的指南和共识均强调，提高对原醛症高危人群的筛查意识迫在眉睫。

我国原醛症的诊断、研究水平相对滞后。不少尚停留在根据“高血压伴低血钾”的线索来筛查原醛症的“初级水平”。研究报道，仅少部分原醛症患者存在低钾血症，醛固酮腺瘤患者约50％表现有低钾血症，而特发性醛固酮增多症的患者中仅17％表现有低钾血症。因此，低钾血症对于原醛症的诊断价值有限，敏感性非常低。

目前的指南和共识都推荐将ARR作为原醛症首选筛查指标。值得注意的是，年龄、性别、采血时间、饮食情况、体位、采血方法、血钾水平、肌酐水平等都是影响ARR的重要因素。研究表明，长期伴有原醛症相关肾损的病人，其体内血浆肾素活性(PRA)以及血浆醛固酮/肾素活性比值(ARR)水平变化可能是原醛症筛查的一个独立混杂因素。一方面，针对高危人群如采用肾功能正常患者的筛查标准，那么eGFR相关的ARR数值改变可能导致高血压病人误诊风险增高；另一方面，筛查阈值较低将会导致肾功能正常人群的假阳性率增高。

由于ARR受年龄、性别、体位、血钾水平、肌酐水平等诸多因素影响,加之国内外各中心对ARR切点报道不一，目前国内原醛症仍存在发现率低、误诊率高的现状。由此可见,对高血压特别是难治性高血压人群进行原醛症的筛查对临床工作有着现实的指导意义。

值得注意的是，研究表明，长期伴有原醛症相关肾损的病人，其体内血浆肾素活性(PRA)以及血浆醛固酮/肾素活性比值(ARR)水平变化可能是原醛症筛查的一个独立混杂因素，这一研究结果引起了我们的思考。在全自动生化分析日渐成熟，血浆醛固酮/肾素活性比值(ARR)测定逐渐普及，所需医疗成本较低的情况下，是否可以进一步优化原有的筛查模式？根据肾小球滤过率估计值(eGFR)优先对原醛症高危人群分层，相应血浆醛固酮/肾素(ARR)切点作为筛查诊断的思路，采用肾功能检查优先的策略，应用于原醛症的筛查，探索原醛症筛查和诊断的新思路。

发明内容

本发明的目的在于通过对原醛症高危人群按eGFR进行分层，制定适应不同人群的最适筛查切点，提高筛查试验的敏感性和特异性，使患者得到早期诊断和治疗，提高对原醛症的诊治水平。

为了达到上述目的，本发明提供了醛固酮/肾素比值分层诊断新切点在制备用于原发性醛固酮增多症筛查试剂盒中的应用，其特征在于，对原醛症高危人群按eGFR进行分层，

1)针对eGFR≥90ml/min/1.73m²部分人群，ARR切点为52ng/dl per ng/ml.h；

2)针对eGFR＜90ml/min/1.73m²部分人群，ARR切点为18ng/dl per ng/ml.h。

较之传统切点，采用本发明筛查切点所具优点阐释如下：

①能够提高筛查试验的敏感性和特异性。

根据约登指数得到的最适ARR筛查切点为40ng/dl per ng/ml.h。针对eGFR＜90ml/min/1.73m²部分人群，本发明推荐采用18ng/dl per ng/ml.h，若使用40或52ng/dlper ng/ml.h，ROC显示筛选试验的灵敏度将会由100％下降到85.2％；同样，针对eGFR≥90ml/min/1.73m²部分人群，本发明推荐采用52ng/dl per ng/ml.h，若使用18或40ng/dlper ng/ml.h，ROC显示筛选试验的特异性将会由95.4％下降到90.7％。基于上述分析，采用对按eGFR水平进行分层后得出的最适筛查切点，能够显著提高原醛症筛查试验的灵敏性及特异性。

②能够有效提高CKD患者原醛症的早期检出率。

对于eGFR＜90ml/min/1.73m²的肾功能不全高危人群，若选取传统而非本发明推荐的筛查切点，将会导致16.3％的高漏诊率。可见本发明所推荐的筛查切点对于伴有肾功能不全的CKD患者筛查诊断尤为关键，即使应用可有效降低筛查的漏诊率，确保高危患者得到早期诊断与治疗。

③所需医疗成本较低，易于标准化及推广。

本发明筛选标准制定需进行肾小球滤过率估计值(eGFR)及血浆醛固酮/肾素(ARR)测定。本发明肾小球滤过率估计值(eGFR)选取简化的肾脏病饮食改良公式，即MDRD方程[eGFR(ml/min/1.73m²)＝186×Scr(mg/d1)^-1.154×age^-0.203×0.742(if female)×1.210(if black)]进行估算，其中肾功能指标血肌酐(SCr)来自全自动生化分析仪及配套试剂，获得方便容易，医疗成本较低。血浆醛固酮/肾素(ARR)水平采用现阶段大多数中心采用的放射免疫法。其原理为通过测定血管紧张素Ⅰ产生的速率反映血浆醛固酮活性(PRA)。目前，血浆醛固酮/肾素测定技术已在各大中型医院临床广泛开展。随着第三方检验机构的壮大，越来越多的小型或基层医院也有实力常规提供血浆醛固酮/肾素测定服务。因此，本发明所涉及的肾功能相关指标测定方便，可操作性较强；所需医疗成本低，易于标准化和进一步普及推广，对高血压特别是难治性高血压人群进行原醛症筛查的临床工作有良好的应用价值。

综上所述，本发明优先根据肾小球滤过率估计值(eGFR)对原醛症高危人群分层归类，采用相应血浆醛固酮/肾素(ARR)切点作为筛查方法，在门诊高血压患者中筛查原醛症的患病情况。申请人通过回顾性分析评价该方法在高血压人群早期筛查诊断中的临床意义，研究发现，较之未经分层的传统方法，本发明拟推荐筛查方法能够显著提高筛查试验的敏感性和特异性，尤其能够有效提高CKD患者原醛症的早期检出率，鉴于其医疗成本较低、可操作性强等诸多优势，本发明易于标准化并有望进一步推广，对于原醛症的早期筛查诊断具有良好的应用价值。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

申请人通过回顾性分析评价了本发明的ARR分层诊断新切点在伴有醛固酮高危因素的高血压患者早期筛查诊断中的临床意义(Xu J,Yang Y,Ling Y,et al.TheAssociation between eGFR and the Aldosterone-to-Renin Ratio and Its Effect onScreening for Primary Aldosteronism.Int J Endocrinol.2020；2020:2639813.Published 2020Feb 7.doi:10.1155/2020/2639813)。研究发现，较之未经分层的传统方法，本专利拟推荐方法能够显著提高筛查试验的敏感性和特异性，尤其能够有效提高CKD患者原醛症的早期检出率。

原醛症筛查流程简要归纳如下：

①初步收治：依据1999年世界卫生组织/高血压专家委员会(WHO/ISH)制订标准(收缩压达到或超过140mmHg和舒张压达到或超过90mmHg，需3次检查核实)门诊收治伴有原醛症高危因素的高血压患者。进一步利用彩色多普超声等技术排除已知继发性高血压(包括已诊断的内分泌及肾性高血压)和已知内分泌系统疾病(垂体瘤、甲状腺功能亢进症等)。

②分层归类：按肾功能评估指标eGFR≥90或＜90ml/min/1.73m²水平对原醛症高危人群进行分类。具体地：对于eGFR≥90ml/min/1.73m²高血压患者，采用52ng/dl per ng/ml.h的ARR筛查切点；对于eGFR＜90ml/min/1.73m²高血压伴肾功能损害的患者，采用18ng/dl per ng/ml.h的较低筛查阈值。

③最终确诊：利用目前普遍采用的放射免疫法测定血浆醛固酮浓度(PAC)及血浆醛固酮活性(PRA)，间接获得血浆醛固酮/肾素活性比值(ARR)。本发明选取目前国内比较常用的生理盐水输注试验作为原醛症的确诊试验。试验方法：试验前必须卧床休息1h,4h静滴2L 0.9％生理盐水,试验在早上8:00～9:00开始,整个过程需监测血压和心率变化,在输注前及输注后分别采血测血浆肾素活性、血醛固酮、皮质醇及血钾。但由于血容量急剧增加,会诱发高血压危象及心功能衰竭,因而必须排除血压难以控制、心功能不全及低钾血症的患者。生理盐水输注试验后血醛固酮(PAC)大于10ng/dl原醛症诊断明确，<5ng/dl排除原醛症，如介于5～10ng/dl则必须根据患者临床表现、实验室检查及影像学表现综合评价。