阅读说明：本技术 一种雷公藤甲素及其组合物用于制备抗食管癌药物的用途 (Application of triptolide and composition thereof in preparing anti-esophageal cancer medicine ) 是由 范智蕊 邓晓明 王辉 卫肖艳 于 2019-11-01 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种雷公藤甲素及其组合物用于制备抗食管癌药物的用途。本发明研究发现,雷公藤甲素对人食管癌细胞的增殖具有显著的抑制作用,且呈现明显的剂量依赖性,具有开发制备成抗食管癌药物的前景；雷公藤甲素与另一种具有抗食管癌作用的天然化合物毛兰素还具有协同抑制人食管癌细胞增殖的作用,因而可以将雷公藤甲素与毛兰素制备成药物组合物用于人食管癌的化学治疗。(The invention discloses an application of triptolide and a composition thereof in preparing anti-esophageal cancer drugs. The research of the invention finds that triptolide has obvious inhibition effect on the proliferation of human esophageal cancer cells, presents obvious dose dependence and has the prospect of developing and preparing anti-esophageal cancer drugs; the triptolide and another natural compound erianin with esophageal cancer resisting effect also have synergistic effect of inhibiting human esophageal cancer cell proliferation, so that the triptolide and erianin can be prepared into pharmaceutical composition for chemotherapy of human esophageal cancer.)

一种雷公藤甲素及其组合物用于制备抗食管癌药物的用途

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种雷公藤甲素及其组合物用于制备抗食管癌药物的用途。

背景技术

食管癌居世界癌症死因顺位的第6位，病死率高达90％。2012年全球约有45.6万食管癌新发病例和40万死亡病例，其中发展中国家的发病和死亡病例均占全球的80％以上。食管癌的发病因素很多，目前公认饮酒、吸烟、对食管造成损伤的各类慢性刺激及环境因素是中国食管鳞癌发病的主要原因。调查发现喜吃烫食、超量饮酒、低收入、低体质指数、既往食管病变、不按时就餐、喜食辣食及肿瘤家族史等均是增加食管癌患病风险的因素。

肿瘤化学预防是指利用天然植物成分或合成小分子化合物预防肿瘤的发生，是目前肿瘤预防领域的研究热点之一。自然界的天然植物成分逐渐成为人们关于研究食管癌预防和治疗研究方面的热点。对于不同的天然植物成分，其预防或治疗食管癌的分子机制亦不同。近些年天然植物成分包括黄酮类、异硫氰酸盐类、鞣花酸类、多酚类等的研究较多(文献：天然植物成分在食管癌预防与治疗方面的分子机制研究进展，肿瘤预防与治疗，2013年05期)。

金宇斌等研究发现，天然化合物姜黄素可以抑制食管癌Eca-109细胞增殖，促进细胞凋亡，作用机制可能是姜黄素可以上调Wnt信号通路中GSK-3β酶的表达、促进β-catenin蛋白降解，从而抑制c-myc基因的转录，抑制癌细胞生长增殖(文献：姜黄素调控食管癌Eca-109细胞分化、增殖、凋亡的机制，中国老年学杂志，2017年04期)。

陈利军等研究发现，天然化合物异甘草素具有很强的抗食管癌活性，其作用机制与其调节细胞周期和促使细胞凋亡有关(文献：异甘草素抗食管癌细胞活性及其机制研究，现代肿瘤医学，2018年07期)。

李赛赛等研究发现，小檗碱可通过对IGF-1R及其介导的下游信号通路的调控来发挥抑制食管癌细胞增殖、阻断细胞周期以及诱导食管癌细胞凋亡的作用(文献：小檗碱通过调控IGF-1R信号通路抑制食管癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的实验，肿瘤防治研究，2018年06期)。

黄伟锋等研究发现，天然化合物汉黄芩素具有抗食管癌KYSE150细胞生长的作用，其机制为抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡(文献：汉黄芩素对食管癌KYSE150细胞周期和凋亡的影响，中医药通报，2018年05期)。

雷公藤甲素是一种二萜内酯类化合物，具有抗炎、抗氧化、抗类风湿、抗老年性痴呆症、抗癌等活性，常被用于自身免疫病和癌症的辅助治疗手段。

毛兰素是从石斛中提取的天然产物，近年来发现毛兰素在体外和体内表现出抗癌活性，诱导多种肿瘤细胞生长抑制。目前报道的毛兰素抗肿瘤效应与多个信号渠道相关。通过激活细胞凋亡的内部线粒体途径和死亡受体介导的外部凋亡途径诱导凋亡；通过ROS/JNK信号渠道诱导细胞周期G2/M期停滞，凋亡和自噬；通过调节促迁移蛋白和迁移抑制蛋白的表达抑制肿瘤细胞的迁移；通过阻断JAK2/STAT3的磷酸化抑制血管生成等。

目前尚无雷公藤甲素及其与毛兰素联合、协同用于治疗食管癌的报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种雷公藤甲素及其组合物用于制备抗食管癌药物的用途。

本发明上述目的通过如下技术方案实现：

雷公藤甲素用于制备抗食管癌药物的医药用途。

一种抗食管癌的药物，以雷公藤甲素为活性成分。

进一步地，还含有药学上可以接受的辅料，制成药学上可以接受的剂型。

更进一步地，所述辅料为液体、固体或半固体辅料。

更进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊、注射剂。

一种抗食管癌的药物组合物，由雷公藤甲素和毛兰素组成。

进一步地，所述雷公藤甲素和毛兰素的物质的量之比为1:1。

上述药物组合物用于制备抗食管癌药物的医药用途。

一种抗食管癌的药物，以上述药物组合物为活性成分。

进一步地，还含有药学上可以接受的辅料，制成药学上可以接受的剂型；所述辅料为液体、固体或半固体辅料，剂型包括片剂、胶囊、注射剂。

毛兰素用于制备抗食管癌药物的医药用途。

有益效果：

本发明研究发现，雷公藤甲素对人食管癌细胞的增殖具有显著的抑制作用，且呈现明显的剂量依赖性，具有开发制备成抗食管癌药物的前景；雷公藤甲素与另一种具有抗食管癌作用的天然化合物毛兰素还具有协同抑制人食管癌细胞增殖的作用，因而可以将雷公藤甲素与毛兰素制备成药物组合物用于人食管癌的化学治疗。

附图说明

图1为各给药组药物对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制率。

具体实施方式

下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。

一、实验材料

人食管癌Eca-109细胞购自于ATCC，液氮中保存，使用前复苏、传代；

胎牛血清为美国GIBCO公司产品；

DMEM培养基为Solarbio公司产品；

雷公藤甲素为上海源叶生物科技有限公司产品，纯度不低于98％；

毛兰素为成都瑞芬思生物科技有限公司，纯度不低于98％；

MTT为美国Sigma公司产品；

DMSO为美国Sigma公司产品。

二、实验方法

1、细胞培养

将人食管癌Eca-109细胞用含有10％胎牛血清的DMEM培养基(完全培养基)于5％CO₂、37℃培养箱中培养，每2～3d传代，取对数期细胞用于后续实验。

2、分组和给药

分为空白对照组，雷公藤甲素低、高剂量组(雷L、雷H)，毛兰素低、高剂量组(毛L、毛H)，联合给药低、高剂量组(雷L+毛L、雷H+毛H)，具体给药方案如下：

空白对照组：不含药的完全培养基培养；

雷L组：给予含有10nM雷公藤甲素的完全培养基培养；

雷H组：给予含有30nM雷公藤甲素的完全培养基培养；

毛L组：给予含有10nM毛兰素的完全培养基培养；

毛H组：给予含有30nM毛兰素的完全培养基培养；

雷L+毛L组：给予含有10nM雷公藤甲素+10nM毛兰素的完全培养基培养；

雷H+毛H组：给予含有30nM雷公藤甲素+30nM毛兰素的完全培养基培养。

每组设5个平行孔。

3、细胞增殖活性测定

取对数生长期的人食管癌Eca-109细胞，消化重悬制成细胞浓度为5×10⁴/mL的细胞悬液，接种于96孔板中，每孔100μL，于5％CO₂、37℃培养箱中培养24h后，按照上述分组分别更换为不同的培养基继续培养，48h后每孔加入5mg/mL的MTT溶液20μL继续培养4h，小心吸弃孔内上清培养液，然后每孔加入150μLDMSO，振荡、混匀，在酶标仪上检测490nm波长处的吸光度值(OD490)，按照如下公式计算抑制率(％)：

抑制率(％)＝(对照组OD490值-给药组OD490值)÷对照组OD490值×100％。

4、数据分析

应用SPSS 17.0进行数据分析，以平均值±标准偏差表示，组间比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异有显著性意义。

三、实验结果

各给药组药物对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制率如表1和图1所示，从各药物对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制率可见雷公藤甲素、毛兰素单独及联合给药时对人食管癌Eca-109细胞均具有显著的增殖抑制作用，且呈现明显的剂量依赖性。

表1各给药组药物对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制率

金正均q值是一种用来评价两种不同药物之间是否存在协同抑制作用的计算值，计算公式为：q＝E_a+b/(E_a+E_b－E_a×E_b)；其中，E_a、E_b为两种抑制剂单独作用的抑制率，E_a+b为两种抑制剂联合作用的抑制率(即合并用药抑制率)，计算公式中的分子即代表“实测合并效应”，分母即代表“期望合并效应”；金正均q值的不同数值范围分别代表3种结果：

q＜0.85：两种药物的抑制作用存在拮抗效应；

0.85≤q＜1.15：两种药物的抑制作用为简单的相加效应；

q≥1.15：两种药物的抑制作用存在协同效应。

经计算，雷L+毛L组、雷H+毛H组的金正均q值分别为1.62、1.36，说明雷公藤甲素和毛兰素在低浓度和高浓度时对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制均呈现明显的协同效应，二者可以制备成具有协同治疗人食管癌作用的药物组合物。

上述实验结果表明，雷公藤甲素对人食管癌细胞的增殖具有显著的抑制作用，且呈现明显的剂量依赖性，具有开发制备成抗食管癌药物的前景；雷公藤甲素与另一种具有抗食管癌作用的天然化合物毛兰素还具有协同抑制人食管癌细胞增殖的作用，因而可以将雷公藤甲素与毛兰素制备成药物组合物用于人食管癌的化学治疗。

上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。