阅读说明：本技术 一种测定青蒿精油皂抑菌强度的检测方法 (Detection method for determining antibacterial intensity of sweet wormwood essential oil soap ) 是由 孟连枝 郭宇鹏 贾鹏飞 张晶晶 王成龙 连津宣 朱和凤 解克伟 江红格 赵忠亮 于 2019-09-18 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种测定青蒿精油皂抑菌强度的检测方法,它包括以下步骤：步骤1、分别取100μL金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌四种菌液,并将其涂于不同的琼脂平皿板；步骤2、将青蒿精油皂溶解于无菌水制成100μg/μL的母液,然后用无菌水稀释成不同浓度的试剂；步骤3、取直径为6mm的滤纸片,贴于步骤1中的菌液平皿板上,各取100μL步骤2中不同浓度的试剂滴于滤纸片上；步骤4、将步骤3中的滤纸片分别置于37℃的温箱培养,分别在24h、48h、72h时观察是否出现抑菌圈并测量抑菌圈的直径大小,计算绝对抑菌率(%),并根据抑菌率的大小判定青蒿精油皂的抑菌强度；本发明具有操作简单快捷、可行性高、结果可靠的优点。(The invention relates to a detection method for determining the bacteriostatic intensity of sweet wormwood essential oil soap, which comprises the following steps: step 1, respectively taking 100 mu L of four bacterial liquids of staphylococcus aureus, escherichia coli, pseudomonas aeruginosa and candida albicans, and coating the bacterial liquids on different agar plates; step 2, dissolving the sweet wormwood essential oil soap in sterile water to prepare a mother solution with the concentration of 100 mu g/mu L, and then diluting the mother solution with the sterile water to obtain reagents with different concentrations; step 3, taking a filter paper sheet with the diameter of 6mm, pasting the filter paper sheet on the bacterial liquid plate in the step 1, and respectively taking 100 mu L of reagents with different concentrations in the step 2 and dripping the reagents on the filter paper sheet; step 4, respectively placing the filter paper sheets obtained in the step 3 in a 37 ℃ incubator for culture, observing whether an inhibition zone appears or not at 24 hours, 48 hours and 72 hours, respectively, measuring the diameter of the inhibition zone, calculating an absolute inhibition rate (%), and judging the inhibition intensity of the sweet wormwood essential oil soap according to the inhibition rate; the method has the advantages of simple and quick operation, high feasibility and reliable result.)

一种测定青蒿精油皂抑菌强度的检测方法

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种测定青蒿精油皂抑菌强度的检测方法。

背景技术

现有技术公开了用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验称为抑菌试验，通过抑菌实验，可以测定某药物的最低抑菌浓度，用以评价该药物的抑菌性能，这是抗菌药物的最基本的药效学数据，目前，主要的抑菌试验方法有进行定性测定的扩散法和进行定量测定的稀释法；据资料公开，除了抗生素产品，还有大量的抗菌物质具有体外和体内杀菌、抑菌的能力，这类物质多数没有标准品，以及没有国家规定的检测方法，若干企业根据自身情况提出各自适用的方法，用于检测某类物质的活性，迄今为止，尚未见有关对于青蒿精油的抑菌强度的检测方法的报道；因此，提供一种操作简单快捷、可行性高、结果可靠的测定青蒿精油皂抑菌强度的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，而提供一种操作简单快捷、可行性高、结果可靠的测定青蒿精油皂抑菌强度的检测方法。

本发明的目的是这样实现的：一种测定青蒿精油皂抑菌强度的检测方法，它包括以下步骤：

步骤1、分别取100μL金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌四种菌液，并将其涂于不同的琼脂平皿板；

步骤2、将青蒿精油皂溶解于无菌水制成100μg/μL的母液，然后用无菌水按0.5%、1%、2%、3%、5%、10%的梯度稀释成不同浓度的试剂；

步骤3、取直径为6mm的滤纸片，贴于步骤1中的菌液平皿板上，各取100μL步骤2中不同浓度的试剂滴于滤纸片上；

步骤4、将步骤3中的滤纸片分别置于37℃的温箱培养，分别在24h、48h、72h时观察是否出现抑菌圈并测量抑菌圈的直径大小，每组设3个平行，取平均值，计算绝对抑菌率（%），并根据抑菌率的大小判定青蒿精油皂的抑菌强度。

所述的步骤1中的四种菌液浓度均设为定值。

本发明的有益效果：本发明分别将不同浓度的青蒿精油皂溶液滴于四种不同的菌液滤纸片上，分别置于温箱培养一段时间后观察并测量抑菌圈的直径大小，根据测量结果计算抑菌率，并根据抑菌率的大小判定青蒿精油皂的抑菌强度；本发明建立了一种测定青蒿精油皂的抑菌强度方法体系，其具有操作简单快捷、可行性高、结果可靠的优点。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明。本发明的实施方案只能认为是对本发明的说明而不能限制本发明，权利要求书指出了本发明的范围，因此，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在权利要求书的范围内。

实施例1

一种测定青蒿精油皂抑菌强度的检测方法，它包括以下步骤：

步骤1、分别取100μL金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌四种菌液，并将其涂于不同的琼脂平皿板；

步骤2、将青蒿精油皂溶解于无菌水制成100μg/μL的母液，然后用无菌水按0.5%、1%、2%、3%、5%、10%的梯度稀释成不同浓度的试剂；

步骤3、取直径为6mm的滤纸片，贴于步骤1中的菌液平皿板上，各取100μL步骤2中不同浓度的试剂滴于滤纸片上；

步骤4、将步骤3中的滤纸片分别置于37℃的温箱培养，分别在24h、48h、72h时观察是否出现抑菌圈并测量抑菌圈的直径大小，每组设3个平行，取平均值，计算绝对抑菌率（%），并根据抑菌率的大小判定青蒿精油皂的抑菌强度。

本发明分别将不同浓度的青蒿精油皂溶液滴于四种不同的菌液滤纸片上，分别置于温箱培养一段时间后观察并测量抑菌圈的直径大小，根据测量结果计算抑菌率，并根据抑菌率的大小判定青蒿精油皂的抑菌强度；本发明建立了一种测定青蒿精油皂的抑菌强度方法体系，其具有操作简单快捷、可行性高、结果可靠的优点。

实施例2

一种测定青蒿精油皂抑菌强度的检测方法，它包括以下步骤：

步骤1、分别取100μL金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌四种菌液，并将其涂于不同的琼脂平皿板；

步骤2、将青蒿精油皂溶解于无菌水制成100μg/μL的母液，然后用无菌水按0.5%、1%、2%、3%、5%、10%的梯度稀释成不同浓度的试剂；

步骤3、取直径为6mm的滤纸片，贴于步骤1中的菌液平皿板上，各取100μL步骤2中不同浓度的试剂滴于滤纸片上；

步骤4、将步骤3中的滤纸片分别置于37℃的温箱培养，分别在24h、48h、72h时观察是否出现抑菌圈并测量抑菌圈的直径大小，每组设3个平行，取平均值，计算绝对抑菌率（%），并根据抑菌率的大小判定青蒿精油皂的抑菌强度；

所述的步骤1中的四种菌液浓度均设为定值。

本发明分别将不同浓度的青蒿精油皂溶液滴于四种不同的菌液滤纸片上，分别置于温箱培养一段时间后观察并测量抑菌圈的直径大小，根据测量结果计算抑菌率，并根据抑菌率的大小判定青蒿精油皂的抑菌强度；步骤1中的四种菌液浓度均设为定值，保证检测和计算结果的准确性；本发明建立了一种测定青蒿精油皂的抑菌强度方法体系，其具有操作简单快捷、可行性高、结果可靠的优点。