阅读说明：本技术 一种超声辅助提取鲍鱼内脏蛋白的方法 (Method for ultrasonic-assisted extraction of abalone visceral protein ) 是由 吴汶飞 汤宇轩 刘祉妤 毛臻彧 刘帅辰 任美霖 林松毅 李冬梅 姜鹏飞 于 2019-12-17 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种超声辅助提取鲍鱼内脏蛋白的方法,包括原料冻干粉碎、脱脂、蛋白提取、蛋白收集干燥步骤。本发明采用超声辅助提取这一食品加工新技术,有效解决了传统碱溶酸沉法提取时间长、提取率低的问题,具有工艺简单、提取率高、操作安全的优点。应用本发明所述方法,超声辅助提取时间为30～60min,鲍鱼内脏蛋白的提取率高于55％,最高可达到65.87％。本发明扩大了水产加工副产物鲍鱼内脏的消耗途径,促进了其高值化应用。(The invention discloses an ultrasonic-assisted method for extracting abalone viscera protein, which comprises the steps of raw material freeze-drying and crushing, degreasing, protein extraction, protein collection and drying. The invention adopts a new food processing technology of ultrasonic-assisted extraction, effectively solves the problems of long extraction time and low extraction rate of the traditional alkali-soluble acid precipitation method, and has the advantages of simple process, high extraction rate and safe operation. By applying the method disclosed by the invention, the ultrasonic-assisted extraction time is 30-60 min, and the extraction rate of the abalone visceral protein is higher than 55% and can reach 65.87% to the maximum extent. The invention expands the consumption way of the abalone viscera as the by-products in the aquatic product processing and promotes the high-valued application of the abalone viscera.)

一种超声辅助提取鲍鱼内脏蛋白的方法

技术领域

本发明属于食品加工领域，具体涉及一种超声辅助提取鲍鱼内脏蛋白的方法。

背景技术

鲍鱼是重要的海洋经济动物，我国的鲍鱼养殖量位居世界首位。近年来，其养殖量增长迅速，平均年增长率达39％。鲍鱼的加工与食用以腹足为主，而占鲍鱼总质量15％～20％的内脏只是被简单加工成低值饲料、鱼粉或直接丢弃，这不仅造成严重的经济损失，而且污染环境。鲍鱼内脏的营养价值较高，含有丰富的蛋白质、氨基酸等营养物质，具有较好的研究价值。因此，有必要加强对水产加工副产物鲍鱼内脏的开发和利用。

碱溶酸沉法是蛋白质提取的常用方法，但在具体应用中，其存在处理时间长、提取率低的问题。本发明针对鲍鱼内脏的营养特点，在传统碱溶酸沉法的基础上，结合超声波这一食品加工新技术，有效改善和克服了传统方法的不足。

发明内容

本发明提供一种从鲍鱼内脏中提取蛋白质的方法，在处理过程中，应用超声波技术辅助提取，本方法具有蛋白提取率高、提取时间短的优点，有利于鲍鱼内脏的高值化利用。

一种超声辅助提取鲍鱼内脏蛋白的方法，包括步骤：

S1、原料冻干粉碎：鲍鱼内脏真空冷冻干燥，粉碎，过50目或60目筛，得鲍鱼内脏粉；

S2、脱脂：取步骤S1所述鲍鱼内脏粉与脱脂溶剂按料液比1:(7～10)g/mL混合，在40～50℃下搅拌浸提3～6h，每1～2h更换1次脱脂溶剂，抽滤收集鲍鱼内脏粉，室温条件下，挥发去除残留的脱脂溶剂，得脱脂鲍鱼内脏粉；其中，所述脱脂溶剂由正己烷和乙醇按体积比3:1混合配制；

S3、蛋白提取：将步骤S2所述脱脂鲍鱼内脏粉与0.01～0.02g/mL的NaOH溶液按料液比1:(15～20)g/mL混合，在提取温度30～50℃、超声功率300～500W、时间30～60min条件下，进行超声、搅拌提取，提取结束后离心收集上清液；在超声过程中进行搅拌的目的是为了使鲍鱼内脏粉在溶液中均匀分散、防止其下沉，以提高提取效果；

S4、蛋白收集干燥：用1mol/L的盐酸溶液调节步骤S3所述上清液的pH至3～4.5，于4～10℃下静置1～2h，离心收集沉淀，将所述沉淀真空冷冻干燥，得鲍鱼内脏蛋白。

优选方式下，步骤S1所述真空冷冻干燥条件具体为：真空度不高于10Pa，冷阱温度不高于-40℃。

优选方式下，步骤S3所述离心条件具体为：4～10℃下，8000～10000g离心30～40min。

优选方式下，步骤S4所述离心条件具体为：4～10℃下，8000～10000g离心10～20min；所述真空冷冻干燥条件具体为：真空度不高于10Pa，冷阱温度不高于-40℃。

优选方式下，所述超声辅助提取鲍鱼内脏蛋白的方法，包括步骤：

S1、原料冻干粉碎：鲍鱼内脏真空冷冻干燥(真空度10Pa，冷阱温度-40℃)，经粉碎机粉碎，过60目筛，得鲍鱼内脏粉；

S2、脱脂：取步骤S1所述鲍鱼内脏粉与脱脂溶剂按料液比1:10g/mL混合，50℃下搅拌脱脂6h，每2h更换1次脱脂溶剂，抽滤收集鲍鱼内脏粉，室温条件下，于通风橱中挥发去除残留的脱脂溶剂，得脱脂鲍鱼内脏粉；其中，所述脱脂溶剂由正己烷和乙醇按体积比3:1混合配制；

S3、蛋白提取：将步骤S2所述脱脂鲍鱼内脏粉与0.015g/mL的NaOH溶液按料液比1:20g/mL混合，于40℃、超声功率400W、超声时间45min条件下，进行超声并搅拌提取，4℃下10000g离心30min，收集上清液；

S4、蛋白收集干燥：进行酸沉处理，使用1mol/L的盐酸溶液调节步骤S3所述上清液的pH至4，于4℃下静置1h，4℃下10000g离心15min，收集沉淀，将所述沉淀真空冷冻干燥(真空度1Pa，冷阱温度-50℃)，得鲍鱼内脏蛋白。

本发明的有益效果是：

(1)本发明采用超声辅助提取这一食品加工新技术，有效解决了传统碱溶酸沉法提取时间长、提取率低的问题。采用本发明所述方法提取鲍鱼内脏蛋白，超声辅助提取时间为30～60min，蛋白提取率最高可达到65.87％。

(2)本发明丰富了水产加工副产物鲍鱼内脏的开发利用方法，有利于其高值化应用。

具体实施方式

通过实施例对本发明进一步说明。

实施例1

一种超声辅助提取鲍鱼内脏蛋白的方法，包括步骤：

S1、原料冻干粉碎：鲍鱼内脏真空冷冻干燥(真空度10Pa，冷阱温度-40℃)，经粉碎机粉碎，过60目筛，得鲍鱼内脏粉；

S2、脱脂：取步骤S1所述鲍鱼内脏粉与脱脂溶剂按料液比1:10g/mL混合，50℃下搅拌脱脂6h，每2h更换1次脱脂溶剂，抽滤收集鲍鱼内脏粉，室温条件下，于通风橱中挥发去除残留的脱脂溶剂，得脱脂鲍鱼内脏粉；其中，所述脱脂溶剂由正己烷和乙醇按体积比3:1混合配制；

S3、蛋白提取：将步骤S2所述脱脂鲍鱼内脏粉与0.015g/mL的NaOH溶液按料液比1:20g/mL混合，于40℃、超声功率400W条件下，进行超声并搅拌提取45min，4℃下10000g离心30min，收集上清液；

S4、蛋白收集干燥：进行酸沉处理，使用1mol/L的盐酸溶液调节步骤S3所述上清液的pH至4，于4℃下静置1h，4℃下10000g离心15min，收集沉淀，将所述沉淀真空冷冻干燥(真空度1Pa，冷阱温度-50℃)，得鲍鱼内脏蛋白。

本实施例蛋白提取率为65.87％。

实施例2

一种超声辅助提取鲍鱼内脏蛋白的方法，包括步骤：

S1、原料冻干粉碎：鲍鱼内脏真空冷冻干燥(真空度10Pa，冷阱温度-40℃)，经粉碎机粉碎，过60目筛，得鲍鱼内脏粉；

S2、脱脂：取步骤S1所述鲍鱼内脏粉与脱脂溶剂按料液比1:10g/mL混合，50℃搅拌脱脂6h，每2h更换1次脱脂溶剂，抽滤收集鲍鱼内脏粉，室温条件下，于通风橱中挥发去除残留的脱脂溶剂，得脱脂鲍鱼内脏粉；其中，所述脱脂溶剂由正己烷和乙醇按体积比3:1混合配制；

S3、蛋白提取：将步骤S2所述脱脂鲍鱼内脏粉与0.014g/mL的NaOH溶液按料液比1:20g/mL混合，于40℃、超声功率428W条件下，进行超声并搅拌提取52min，4℃下10000g离心30min，收集上清液；

S4、蛋白收集干燥：进行酸沉处理，使用1mol/L的盐酸溶液调节步骤S3所述上清液的pH至4，于4℃下静置1h，4℃下10000g离心15min，收集沉淀，将所述沉淀真空冷冻干燥(真空度1Pa，冷阱温度-50℃)，得鲍鱼内脏蛋白。

本实施例蛋白提取率为64.89％。

对比例1

碱溶酸沉法提取鲍鱼内脏蛋白，包括步骤：

S1、原料冻干粉碎：鲍鱼内脏真空冷冻干燥(真空度10Pa，冷阱温度-40℃)，经粉碎机粉碎，过60目筛，得鲍鱼内脏粉；

S2、脱脂：取步骤S1所述鲍鱼内脏粉与脱脂溶剂按料液比1:10g/mL混合，50℃搅拌脱脂6h，每2h更换1次脱脂溶剂，抽滤收集鲍鱼内脏粉，室温条件下，于通风橱中挥发去除残留的脱脂溶剂，得脱脂鲍鱼内脏粉；其中，所述脱脂溶剂由正己烷和乙醇按体积比3:1混合配制；

S3、蛋白提取：将步骤S2所述脱脂鲍鱼内脏粉与0.014g/mL的NaOH溶液按料液比1:20g/mL混合，于40℃下搅拌提取52min，4℃下10000g离心30min，收集上清液；

S4、蛋白收集干燥：进行酸沉处理，使用1mol/L的盐酸溶液调节步骤S3所述上清液的pH至4，于4℃下静置1h，4℃下10000g离心15min，收集沉淀，将所述沉淀真空冷冻干燥(真空度1Pa，冷阱温度-50℃)，得鲍鱼内脏蛋白。

本对比例蛋白提取率为55.67％。

以上实施例和对比例所述的蛋白提取率测定方法为：

式中：提取液，指蛋白提取步骤S3所述上清液，其蛋白含量采用考马斯亮蓝法测定，g；脱脂鲍鱼内脏蛋白含量采用凯氏定氮法测定，g。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。